Uso da termografia e ultrassonografia power dopplerpara avaliação da resposta tecidual em falhas ósseas preenchidas com biomaterial em ovinos / Termography and power doppler sonography assessment for tissue response evaluation in sheep bone defects filled with biomaterial

Biomateriaistem diversas indicações como auxiliares no processo de reparação óssea, além de terem função de substituto ósseo em perdas extensas. Diversas são as vantagens de sua utilização, como por exemplo, auxílio na osteocondutividade, estímulo de neovascularização, potencial antimicrobiano, entre outros. Falhas ósseas foram realizadas nas tíbias de seis ovinos da raça Santa Inês e preenchidas com biomaterial à base de quitosana, colágeno e hidroxiapatita. Um membro foi considerado controle e outro membro tratado segundo estudo randomizado. Foram realizadas avaliações termográficas e por ultrassonografia Power Dopplerem todos os animais do estudo, semanalmente, nos dias D0, D7, D14, D21, D28, D35, D42 e D56. Não houve diferenças significativas com relação à temperatura mínima, máxima e média entre os grupos com biomaterial e controle nas imagens termográficas. Houveram variações com relação ao tempo dentro de ambos os grupos. Com relação à presença de vasos na ultrassonografia Power Dopplernão houve diferenças estatísticas entre os grupos, exceto no dia 21 (P=0,031). Dentro das possibilidades de avaliação que os exames de imagem fornecem, a termografia e a ultrassonografia Power Dopplermostraram-se ferramentas não invasivas de avaliação pós-operatória de processo inflamatório e neovascularização, sendo realizadas semanalmente, permitindo acompanhamento fidedigno e detalhado ao longo do experimento, sem gerar desconforto ou estresse aos animais. Não houve indícios de complicações relacionadas ao biomaterial.(AU)

Biomaterials have several indications supporting the bone repair process, besides having bone substitute function in extensive losses. There are several advantages of its use, such as contribution in osteoconductivity, stimulation of neovascularization, antimicrobial potential, among others.Tibial bone defects was performed in six Santa Inês breed ewes and implanted with chitosan, collagen and hydroxyapatite biomaterial. One limb was considered the control limb and the other one the biomateriallimb, chosenrandomly. Thermographic and Power Dopplersonography was performed in all animals, weekly for 56 days. The thermography showed no significant differences related to low, high and mean temperature between the control and the biomaterial groups. Statisticalvariations were found between time in both groups. The visualization of neovascularization with the Power Dopplersonography did not present statistical differences, except for day 21 (P=0,031). Within the possibilities provided by imaging exams, thermography and Power Doppler sonography demonstrate to be non-invasive methods for post-operative evaluation of inflammatory process and neovascularization. The weekly management allowed reliable and detailed monitoring throughout the experiment, without causingdiscomfort or stress to the animals. There was no evidence of biomaterial complications.(AU)

Valuation of angiogenesis in bovine xenografts implanted in intracorporal sites of rabbits as models of in-vivo bioreactors / Avaliação da angiogênese em xenoenxertos bovinos implantados em sítios intracorpóreos de coelhos como modelos de biorreatores in vivo

The aim of this study was to evaluate neovascularization of bovine xenografts implanted in intracorporeal sites of rabbits (bioreactors). 30 rabbits were used, divided into 6 groups, according to the evaluation time (7, 15, 30, 45, and 60 days); each animal received xenogenic implants in 3 different intracorporeal sites (A1 - omentum bag; A2 - intermuscular space of quadriceps femoris; A3 - subperiosteal of ilium bone). Histological assessments graded the presence of angiogenesis, the number of inflammatory cells, newly formed bone tissue, and the presence of giant cells. Histological analyses showed intense angiogenesis in all implanted xenografts. Presence of inflammatory infiltrate and giant cells at the A1 implant site and presence of bone neoformation at the A3 implant site were noted. Degeneration of implants and formation of a fibrous capsule were noted. When comparing the interaction of the site with the days of evaluation, statistical analysis showed a significant difference (p≤0.05) in any time of neovascularization analysis. The vascular endothelial growth factor (VEGF) and inflammatory cells of the omentum in its structure, may have contributed to the greater presence of neovessels and inflammatory cells, a fact that may indicate functionality as a possible bone substitute.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a neovascularização de xenoenxertos bovinos implantados em sítios intracorpóreos de coelhos (biorreatores). Foram utilizados 30 coelhos, os quais foram divididos em seis grupos, de acordo com o tempo de avaliação (sete, 15, 30, 45 e 60 dias); cada animal recebeu implantes xenogênicos em três diferentes sítios intracorpóreos (A1 - bolsa de omento; A2 - espaço intermuscular do quadríceps femoral; A3 - subperiosteal do osso ílio). Avaliações histológicas classificaram a presença de angiogênese, o número de células inflamatórias, de tecido ósseo neoformado e a presença de células gigantes. As análises histológicas mostraram intensa angiogênese em todos os xenoenxertos implantados. Observou-se presença de infiltrado inflamatório e células gigantes no local do implante A1 e presença de neoformação óssea no local do implante A3. Ao mesmo tempo, a degeneração dos implantes e a formação de uma cápsula fibrosa foram observadas. Ao comparar a interação do local com os dias de avaliação, a análise estatística mostrou diferença significativa (P≤0,05) em qualquer momento da análise de neovascularização. O fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e as células inflamatórias do omento em sua estrutura podem ter contribuído para a maior presença de neovasos e células inflamatórias, fato que pode indicar funcionalidade como possível substituto ósseo.(AU)

Região metafisária da tíbia de coelhos: uma opção para estudos dos substitutos ósseos / Metaphyseal region of the tibia of rabbits: an option for bone substitutes studies

Apresenta-se um modelo experimental de ostectomia de tíbia em coelhos para estudo de biomateriais em processos de reparação óssea. Foi realizada falha segmentar de 6mm de diâmetro na região metafisária medial proximal de tíbia de 72 coelhos as quais foram preenchidas com substituto ósseo e avaliadas clinicamente, por exame radiográfico e por meio de tomografia computadorizada feixe cônico, em diferentes tempos. Conclui-se que a metáfise medial proximal de tíbia de coelhos é adequada como modelo para estudos que avaliem o comportamento de enxertos e/ou biomateriais em falhas ósseas.

Is presented an experimental model of tibial ostectomy in rabbits to study biomaterials during bone repair process. Segmental failure of 6 mm diameter was performed in the medial proximal tibial metaphyseal region of 72 rabbits, which were filled with bone substitute and evaluated by clinical exam, X-ray, and cone beam computed tomography at different times. It is concluded that the medial proximal tibial metaphysis region of rabbits is suitable as a model for studies that evaluate the behavior of grafts and/or biomaterials on bone defects.

Região metafisária da tíbia de coelhos: uma opção para estudos dos substitutos ósseos / Metaphyseal region of the tibia of rabbits: an option for bone substitutes studies

Apresenta-se um modelo experimental de ostectomia de tíbia em coelhos para estudo de biomateriais em processos de reparação óssea. Foi realizada falha segmentar de 6mm de diâmetro na região metafisária medial proximal de tíbia de 72 coelhos as quais foram preenchidas com substituto ósseo e avaliadas clinicamente, por exame radiográfico e por meio de tomografia computadorizada feixe cônico, em diferentes tempos. Conclui-se que a metáfise medial proximal de tíbia de coelhos é adequada como modelo para estudos que avaliem o comportamento de enxertos e/ou biomateriais em falhas ósseas.(AU)

Is presented an experimental model of tibial ostectomy in rabbits to study biomaterials during bone repair process. Segmental failure of 6 mm diameter was performed in the medial proximal tibial metaphyseal region of 72 rabbits, which were filled with bone substitute and evaluated by clinical exam, X-ray, and cone beam computed tomography at different times. It is concluded that the medial proximal tibial metaphysis region of rabbits is suitable as a model for studies that evaluate the behavior of grafts and/or biomaterials on bone defects.(AU)

Região metafisária da tíbia de coelhos: uma opção para estudos dos substitutos ósseos / Metaphyseal region of the tibia of rabbits: an option for bone substitutes studies

Apresenta-se um modelo experimental de ostectomia de tíbia em coelhos para estudo de biomateriais em processos de reparação óssea. Foi realizada falha segmentar de 6mm de diâmetro na região metafisária medial proximal de tíbia de 72 coelhos as quais foram preenchidas com substituto ósseo e avaliadas clinicamente, por exame radiográfico e por meio de tomografia computadorizada feixe cônico, em diferentes tempos. Conclui-se que a metáfise medial proximal de tíbia de coelhos é adequada como modelo para estudos que avaliem o comportamento de enxertos e/ou biomateriais em falhas ósseas.

Is presented an experimental model of tibial ostectomy in rabbits to study biomaterials during bone repair process. Segmental failure of 6 mm diameter was performed in the medial proximal tibial metaphyseal region of 72 rabbits, which were filled with bone substitute and evaluated by clinical exam, X-ray, and cone beam computed tomography at different times. It is concluded that the medial proximal tibial metaphysis region of rabbits is suitable as a model for studies that evaluate the behavior of grafts and/or biomaterials on bone defects.

Substitution of soybean meal with dried distillery grains on performance and carcass quality of feedlot lambs / Influência da substituição do farelo de soja por grão seco de destilaria no desempenho e características de carcaça de ovinos confinados

The objective of this work was to evaluate the effect of inclusion of dried distillery grains (DDGS) as a replacement for soybean meal in the diet of lambs in feedlot and to evaluate the performance, yield characteristics, and meat quality. Three diets with different DDGS levels were provided: diet with soybean meal (control); diet with 50% replacement of soybean meal by DDGS; diet with 100% replacement of soybean meal with DDGS. The average feed intake of the animals and the difference between the leftovers showed no difference among the treatments. No differences of average daily weight gain, body score and feed conversion index were observed among treatments. The same was observed for biometric measurements. However, warm carcass weight and chest perimeter were higher without the use of DDGS. The final weight, muscle, bone, intermuscular, subcutaneous and total fat weight did not differ among treatments. No difference was also found for tissues color. The kilogram of the concentrate mixture that uses soybean meal as the main source of protein (control) was approximately 12% more expensive than the mixture using DDGS (100%). The use of DDGS as an alternative source in confined lamb feeding may be recommended in up to 24% replacement in dietary dry matter.

O Objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da inclusão de grão seco de destilaria com solúveis (DDGS) como substituto a farelo de soja na dieta de cordeiros em confinamento. E avaliar a influência dessa inclusão sobre as características de desempenho, rendimento e qualidade de carne. Foram usados 30 animais, sendo 15 machos e 15 fêmeas, distribuídos em três tratamentos. Foram elaboradas dietas com três níveis de inclusão de DDGS, sendo: Tratamento 1 - dieta com farelo de soja (controle, 0%de inclusão de DDGS); Tratamento 2 - dieta com 50% de substituição do farelo de soja por DDGS; e Tratamento 3 - dieta com 100% de substituição do farelo de soja por DDGS. Foi avaliado o consumo médio dos animais, suas medidas biométricas, além de parâmetros de qualidade de carne e custo das dietas. A avaliação do consumo e a diferença entre as sobras não mostraram diferença entre os tratamentos. Também não foram observadas diferenças entre os ganhos de peso médio diário, ganho de peso total, escore corporal, índice de conversão alimentar e eficiência alimentar entre os tratamentos. O mesmo foi observado para as medidas biométricas. Não houve diferenças para a circunferência externa e interna, conformação, musculatura e largura da garupa e do tórax. No entanto, o peso da carcaça quente e o perímetro torácico foram maiores no tratamento sem o uso de DDGS. O peso final, peso dos músculos, peso ósseo, peso de gordura intermuscular, peso de gordura subcutânea, peso total de gordura também não diferiram entre os tratamentos. Nenhuma diferença foi encontrada para cor do músculo ou da gordura intermuscular e subcutânea. O valor gasto no custo do quilograma da mistura de concentrado que utilizava farelo de soja como principal fonte de proteína (controle) foi aproximadamente 12% mais caro que a mistura usando DDGS (100%), o que permitiu concluir [...].

Substitution of soybean meal with dried distillery grains on performance and carcass quality of feedlot lambs / Influência da substituição do farelo de soja por grão seco de destilaria no desempenho e características de carcaça de ovinos confinados

The objective of this work was to evaluate the effect of inclusion of dried distillery grains (DDGS) as a replacement for soybean meal in the diet of lambs in feedlot and to evaluate the performance, yield characteristics, and meat quality. Three diets with different DDGS levels were provided: diet with soybean meal (control); diet with 50% replacement of soybean meal by DDGS; diet with 100% replacement of soybean meal with DDGS. The average feed intake of the animals and the difference between the leftovers showed no difference among the treatments. No differences of average daily weight gain, body score and feed conversion index were observed among treatments. The same was observed for biometric measurements. However, warm carcass weight and chest perimeter were higher without the use of DDGS. The final weight, muscle, bone, intermuscular, subcutaneous and total fat weight did not differ among treatments. No difference was also found for tissues color. The kilogram of the concentrate mixture that uses soybean meal as the main source of protein (control) was approximately 12% more expensive than the mixture using DDGS (100%). The use of DDGS as an alternative source in confined lamb feeding may be recommended in up to 24% replacement in dietary dry matter.(AU)

O Objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da inclusão de grão seco de destilaria com solúveis (DDGS) como substituto a farelo de soja na dieta de cordeiros em confinamento. E avaliar a influência dessa inclusão sobre as características de desempenho, rendimento e qualidade de carne. Foram usados 30 animais, sendo 15 machos e 15 fêmeas, distribuídos em três tratamentos. Foram elaboradas dietas com três níveis de inclusão de DDGS, sendo: Tratamento 1 - dieta com farelo de soja (controle, 0%de inclusão de DDGS); Tratamento 2 - dieta com 50% de substituição do farelo de soja por DDGS; e Tratamento 3 - dieta com 100% de substituição do farelo de soja por DDGS. Foi avaliado o consumo médio dos animais, suas medidas biométricas, além de parâmetros de qualidade de carne e custo das dietas. A avaliação do consumo e a diferença entre as sobras não mostraram diferença entre os tratamentos. Também não foram observadas diferenças entre os ganhos de peso médio diário, ganho de peso total, escore corporal, índice de conversão alimentar e eficiência alimentar entre os tratamentos. O mesmo foi observado para as medidas biométricas. Não houve diferenças para a circunferência externa e interna, conformação, musculatura e largura da garupa e do tórax. No entanto, o peso da carcaça quente e o perímetro torácico foram maiores no tratamento sem o uso de DDGS. O peso final, peso dos músculos, peso ósseo, peso de gordura intermuscular, peso de gordura subcutânea, peso total de gordura também não diferiram entre os tratamentos. Nenhuma diferença foi encontrada para cor do músculo ou da gordura intermuscular e subcutânea. O valor gasto no custo do quilograma da mistura de concentrado que utilizava farelo de soja como principal fonte de proteína (controle) foi aproximadamente 12% mais caro que a mistura usando DDGS (100%), o que permitiu concluir [...].(AU)

Avaliação histológica e por microscopia eletrônica de varredura da biocerâmica de fosfato de cálcio nano-estruturada micromacro porosa em grânulos em defeito crítico de rádio de coelhos

ABSTRACT The objective was to evaluate, through histologic exam and by scanning electron microscopy (SEM), the evolution of experimental critical defects in radio or not filled with nano-structured calcium phosphate micro-macro porous bioceramic granules rabbits. We used 70 rabbits, New Zealand, young adults, males, there was a critical defect in radio. The members were the groups: GI, slow bioceramic, GII, GIII and bioceramic moderate, negative control. After each experimental period, the animals were sacrificed and the radios harvested. Histological evaluations were performed at eight, 15, 30, 45, 60, 90 and 120 days and SEM analyzes at 60, 90 and 120 days. Histologically there was bone healing process earlier in GI and GII compared to GIII. In SEM we observed a higher proportion of mature bone and presence of secondary osteons in GI and GII, being more evident in the GII, confirming the histological findings. Ceramic promoted complete filling of the defect, while the control group was filling in the center of the defect, with empty spaces remaining on the sides. In conclusion, the use of bioceramics, slow and moderate absorption favor complete bone regeneration in critical defects being indicated as a bone substitute. The maturation occurs earlier when employing the ceramic moderate absorption.

RESUMO Objetivou-se avaliar, histologicamente e por microscopia eletrônica de varredura (MEV), a evolução de defeitos críticos experimentais em rádio de coelhos preenchidos ou não com biocerâmica fosfocálcica nanoestruturada micromacro porosa em grânulos. Utilizaram-se 70 coelhos, Nova Zelândia, adultos jovens, machos, e realizou-se um defeito crítico nos rádios. Os membros constituíram os grupos: GI, biocerâmica lenta, GII, biocerâmica moderada e GIII, controle negativo. Após cada período experimental, os animais foram sacrificados, e os rádios coletados. As avaliações histológicas foram realizadas aos oito, 15, 30, 45, 60, 90 e 120 dias, e as análises de MEV aos 60, 90 e 120 dias. Histologicamente, observou-se processo de reparação óssea mais adiantado nos grupos GI e GII comparando-se ao GIII. Na MEV, constatou-se maior proporção de osso maduro e presença de ósteons secundários nos GI e GII, sendo mais evidente no GII, confirmando os achados histológicos. As cerâmicas promoveram preenchimento completo do defeito, enquanto no grupo controle houve preenchimento no centro do defeito, permanecendo espaços vazios nas laterais. Conclui-se que o emprego das biocerâmicas de absorção lenta e moderada favorece a regeneração óssea completa em defeitos críticos sendo indicadas como substituto ósseo. A maturação óssea ocorre mais precocemente quando se emprega a cerâmica de absorção moderada.

Aspecto morfológico da interface entre o compósito, constituído de quitosana e polimetilmetacrilato, e a falha óssea de tíbia de coelhos / Morphological aspect of the interface between the composite, made of chitosan and polymethylmethacrylate, and bone failure of the rabbit tibia

As afecções ortopédicas com perda de tecido ósseo são um desafio não só na medicina veterinária mas também na medicina humana. Analisou a interface entre compósito, constituído de esferas de quitosana e polimetilmetacrilato em falha óssea (leito receptor) de tíbia de coelhos, por meio de técnica radiológica, avaliação macroscópica e pela microscopia eletrônica de varredura, em diferentes tempos. Foram utilizados 12 coelhos adultos da raça Nova Zelândia, divididos em quatro Grupos Experimentais (E1, n=3; E2, n=3; E3, n=3 e E4, n=3), que tiveram as falhas ósseas das tibiais direitas preenchidas com compósito, e avaliadas no pós-operatório imediato, aos 30, 60 e 90 e 120 dias. Dos compósitos implantados nas tíbias de coelhos, apenas dois permaneceram em seus leitos receptores, enquanto que os demais se encontravam encapsulados no tecido subcutâneo. As esferas de quitosana, presentes nas superfícies dos biomateriais implantados, que mantiveram contato direto com o leito receptor de tíbias de coelhos apresentavam-se preservadas e não integraram ao tecido ósseo. Diante disso, para melhor compreensão do comportamento da quitosana como substituto ósseo, novas pesquisas serão necessárias.(AU)

Orthopedic diseases with bone loss are challenging in both veterinary and human medicine. The aim of this investigation was to analyze and compare the reactions at the interface between the composite, made of chitosan and polymethylmethacrylate, and the bone defect (receptor site) of the rabbits tibia through radiological and microscopic techniques and by scanning electron microscopy, in different periods. Twelve adult New Zealand rabbits were divided into four experimental groups (E1, n=3; E2, n=3; E3, n=3 and E4, n=3), which had the right tibial bone defects filled with the composite, and evaluated in the immediate postoperative, 30, 60, 90 and 120 days. Composite implanted in the tibia of rabbits, only two remained in their beds receivers, while the remaining were encapsulated in the subcutaneous tissue. Spheres of chitosan present in the biomaterial that has been deployed and were in direct contact with the bone defect, were preserved, however, were not integrated into the bone tissue. Therefore, to understand the behavior of chitosan as a bone substitute, further research is needed.(AU)

Aspecto morfológico da interface entre o compósito, constituído de quitosana e polimetilmetacrilato, e a falha óssea de tíbia de coelhos / Morphological aspect of the interface between the composite, made of chitosan and polymethylmethacrylate, and bone failure of the rabbit tibia

As afecções ortopédicas com perda de tecido ósseo são um desafio não só na medicina veterinária mas também na medicina humana. Analisou a interface entre compósito, constituído de esferas de quitosana e polimetilmetacrilato em falha óssea (leito receptor) de tíbia de coelhos, por meio de técnica radiológica, avaliação macroscópica e pela microscopia eletrônica de varredura, em diferentes tempos. Foram utilizados 12 coelhos adultos da raça Nova Zelândia, divididos em quatro Grupos Experimentais (E1, n=3; E2, n=3; E3, n=3 e E4, n=3), que tiveram as falhas ósseas das tibiais direitas preenchidas com compósito, e avaliadas no pós-operatório imediato, aos 30, 60 e 90 e 120 dias. Dos compósitos implantados nas tíbias de coelhos, apenas dois permaneceram em seus leitos receptores, enquanto que os demais se encontravam encapsulados no tecido subcutâneo. As esferas de quitosana, presentes nas superfícies dos biomateriais implantados, que mantiveram contato direto com o leito receptor de tíbias de coelhos apresentavam-se preservadas e não integraram ao tecido ósseo. Diante disso, para melhor compreensão do comportamento da quitosana como substituto ósseo, novas pesquisas serão necessárias.(AU)

Orthopedic diseases with bone loss are challenging in both veterinary and human medicine. The aim of this investigation was to analyze and compare the reactions at the interface between the composite, made of chitosan and polymethylmethacrylate, and the bone defect (receptor site) of the rabbits tibia through radiological and microscopic techniques and by scanning electron microscopy, in different periods. Twelve adult New Zealand rabbits were divided into four experimental groups (E1, n=3; E2, n=3; E3, n=3 and E4, n=3), which had the right tibial bone defects filled with the composite, and evaluated in the immediate postoperative, 30, 60, 90 and 120 days. Composite implanted in the tibia of rabbits, only two remained in their beds receivers, while the remaining were encapsulated in the subcutaneous tissue. Spheres of chitosan present in the biomaterial that has been deployed and were in direct contact with the bone defect, were preserved, however, were not integrated into the bone tissue. Therefore, to understand the behavior of chitosan as a bone substitute, further research is needed.(AU)

Avaliação histológica e por microscopia eletrônica de varredura da biocerâmica de fosfato de cálcio nano-estruturada micromacro porosa em grânulos em defeito crítico de rádio de coelhos / Histological and nano-structured calcium phosphate bioceramic micro-macro porous granules in critical defect rabbits radius scanning electron microscopy evaluation

Objetivou-se avaliar, histologicamente e por microscopia eletrônica de varredura (MEV), a evolução de defeitos críticos experimentais em rádio de coelhos preenchidos ou não com biocerâmica fosfocálcica nanoestruturada micromacro porosa em grânulos. Utilizaram-se 70 coelhos, Nova Zelândia, adultos jovens, machos, e realizou-se um defeito crítico nos rádios. Os membros constituíram os grupos: GI, biocerâmica lenta, GII, biocerâmica moderada e GIII, controle negativo. Após cada período experimental, os animais foram sacrificados, e os rádios coletados. As avaliações histológicas foram realizadas aos oito, 15, 30, 45, 60, 90 e 120 dias, e as análises de MEV aos 60, 90 e 120 dias. Histologicamente, observou-se processo de reparação óssea mais adiantado nos grupos GI e GII comparando-se ao GIII. Na MEV, constatou-se maior proporção de osso maduro e presença de ósteons secundários nos GI e GII, sendo mais evidente no GII, confirmando os achados histológicos. As cerâmicas promoveram preenchimento completo do defeito, enquanto no grupo controle houve preenchimento no centro do defeito, permanecendo espaços vazios nas laterais. Conclui-se que o emprego das biocerâmicas de absorção lenta e moderada favorece a regeneração óssea completa em defeitos críticos sendo indicadas como substituto ósseo. A maturação óssea ocorre mais precocemente quando se emprega a cerâmica de absorção moderada.(AU)

The objective was to evaluate, through histologic exam and by scanning electron microscopy (SEM), the evolution of experimental critical defects in radio or not filled with nano-structured calcium phosphate micro-macro porous bioceramic granules rabbits. We used 70 rabbits, New Zealand, young adults, males, there was a critical defect in radio. The members were the groups: GI, slow bioceramic, GII, GIII and bioceramic moderate, negative control. After each experimental period, the animals were sacrificed and the radios harvested. Histological evaluations were performed at eight, 15, 30, 45, 60, 90 and 120 days and SEM analyzes at 60, 90 and 120 days. Histologically there was bone healing process earlier in GI and GII compared to GIII. In SEM we observed a higher proportion of mature bone and presence of secondary osteons in GI and GII, being more evident in the GII, confirming the histological findings. Ceramic promoted complete filling of the defect, while the control group was filling in the center of the defect, with empty spaces remaining on the sides. In conclusion, the use of bioceramics, slow and moderate absorption favor complete bone regeneration in critical defects being indicated as a bone substitute. The maturation occurs earlier when employing the ceramic moderate absorption.(AU)

Avaliação histológica e por microscopia eletrônica de varredura da biocerâmica de fosfato de cálcio nano-estruturada micromacro porosa em grânulos em defeito crítico de rádio de coelhos / Histological and nano-structured calcium phosphate bioceramic micro-macro porous granules in critical defect rabbits radius scanning electron microscopy evaluation

Objetivou-se avaliar, histologicamente e por microscopia eletrônica de varredura (MEV), a evolução de defeitos críticos experimentais em rádio de coelhos preenchidos ou não com biocerâmica fosfocálcica nanoestruturada micromacro porosa em grânulos. Utilizaram-se 70 coelhos, Nova Zelândia, adultos jovens, machos, e realizou-se um defeito crítico nos rádios. Os membros constituíram os grupos: GI, biocerâmica lenta, GII, biocerâmica moderada e GIII, controle negativo. Após cada período experimental, os animais foram sacrificados, e os rádios coletados. As avaliações histológicas foram realizadas aos oito, 15, 30, 45, 60, 90 e 120 dias, e as análises de MEV aos 60, 90 e 120 dias. Histologicamente, observou-se processo de reparação óssea mais adiantado nos grupos GI e GII comparando-se ao GIII. Na MEV, constatou-se maior proporção de osso maduro e presença de ósteons secundários nos GI e GII, sendo mais evidente no GII, confirmando os achados histológicos. As cerâmicas promoveram preenchimento completo do defeito, enquanto no grupo controle houve preenchimento no centro do defeito, permanecendo espaços vazios nas laterais. Conclui-se que o emprego das biocerâmicas de absorção lenta e moderada favorece a regeneração óssea completa em defeitos críticos sendo indicadas como substituto ósseo. A maturação óssea ocorre mais precocemente quando se emprega a cerâmica de absorção moderada.(AU)

The objective was to evaluate, through histologic exam and by scanning electron microscopy (SEM), the evolution of experimental critical defects in radio or not filled with nano-structured calcium phosphate micro-macro porous bioceramic granules rabbits. We used 70 rabbits, New Zealand, young adults, males, there was a critical defect in radio. The members were the groups: GI, slow bioceramic, GII, GIII and bioceramic moderate, negative control. After each experimental period, the animals were sacrificed and the radios harvested. Histological evaluations were performed at eight, 15, 30, 45, 60, 90 and 120 days and SEM analyzes at 60, 90 and 120 days. Histologically there was bone healing process earlier in GI and GII compared to GIII. In SEM we observed a higher proportion of mature bone and presence of secondary osteons in GI and GII, being more evident in the GII, confirming the histological findings. Ceramic promoted complete filling of the defect, while the control group was filling in the center of the defect, with empty spaces remaining on the sides. In conclusion, the use of bioceramics, slow and moderate absorption favor complete bone regeneration in critical defects being indicated as a bone substitute. The maturation occurs earlier when employing the ceramic moderate absorption.(AU)

Análise das interfaces entre os compósitos constituídos de matrizes ósseas mineralizadas heterólogas trabeculares canina (MOMHTc) e de bovina (MOMHTb) associadas ao polimetilmetacrilato (PMMA) e as falhas ósseas de tíbias de coelhos

As afecções ortopédicas que necessitam de procedimentos cirúrgicos especializados para reposição de tecido ósseo são frequentes tanto na medicina veterinária quanto na humana. Por isso, não é raro ortopedistas se depararem com fraturas de ossos longos, neoplasias ósseas ou não-uniões de fraturas, que necessitam de tratamento cirúrgico reparador com o uso de enxerto ósseo ou implante natural e/ou sintético. Pretendeu-se com está pesquisa analisar as interfaces entre compósitos constituídos de matriz óssea mineralizada heteróloga trabecular canina (MOMHTc) e bovina (MOMHTb) associadas ao PMMA e as falhas ósseas de tíbias de coelhos, por meio de estudo radiográfico e pela microscopia eletrônica de varredura em diferentes tempos. Foram utilizados 12 coelhos adultos da raça Nova Zelândia para avaliar os comportamentos dos compósitos à base de MOMHTc e/ou MOMHTb associada ao PMMA. Os grupos foram dividido em quatro subgrupos (E1, n-3; E2, n-3; E3, n-3 e E4, n-3), que tiveram as falhas ósseas de tibiais direitas e esquerdas preenchidas com compósitos e avaliadas no pós-operatório imediato, aos 30, 60, 90 e 120 dias. Observou-se que os compósitos de MOMHT(c/b) e PMMA apresentaram potencial citotóxico, sendo este maior no de bovino. Morfologicamente, também foi observado que os compósitos se mantiveram preservados após autoclavagem, demonstrando que o processo de esterilização não alterou as estruturas dos constituintes dos compósitos. Houve incorporação, em relação ao tempo, dos compósitos de MOMHT(c/b) e PMMA aos leitos receptores em 100% dos casos, demostrando ser biologicamente biocompatível, pois promoveram a reparação de falhas ósseas, sem sinais de infecção, migração e/ou rejeição, podendo, dessa forma, ser mais uma opção como substitutos para preencher grandes defeitos ósseos.

Orthopedic conditions that require specialized surgical procedures for replacement of bone tissue are frequent in both veterinary and human medicine. Therefore, it is not uncommon for orthopedists to encounter long-bone fractures, bone neoplasms, or non-fracture joint, that need surgical repair treatment using bone graft or natural and / or synthetic implant. The aim of this study is to analyze the interfaces between composites composed of canine (MOMHTc) and bovine heterologous trabecular mineralized bone matrix (MOMHTb) associated with PMMA and the bone defects of rabbits, by radiographic study and scanning electron microscopy at different times. Twelve adult New Zealand rabbits were used to evaluate the behavior of composites based on MOMHTc and MOMHTb associated with PMMA, they were divided into four subgroups (E1, n=3; E2, n=3; E3, n=3 e E4, n=3), which had filled the right and left tibial bone failures with composites and evaluated at the immediate postoperative period at 30, 90, and 120 days. It was observed that MOMHT(c/b) and PMMA composites showed cytotoxic potential, which was higher in the bovine composite. Morphologically, it was also observed that the composites were preserved after autoclaving, this demonstrated that the sterilization process did not change the structures of the constituents of the composites. process did not change the structures of the constituents of the composites. There was incorporation, in relation to time, of the MOMHT(c/b) and PMMA composites to the receiving beds in 100% of the cases, this demonstrated to be biologically biocompatible, as they promoted the repair of bone defects, with no signs of infection, migration or rejection, and may therefore be another option as a substitute to fill large bone defects.

Efeitos de um enxerto biofuncional e da terapia laser de baixa intensidade em defeitos ósseos induzidos em tíbias de ratos.

O objetivo do estudo foi avaliar os efeitos de um enxerto biofuncional isolado, ou combinado com a terapia laser de baixa intensidade no reparo de defeitos ósseos induzidos em tíbias de ratos. A hipótese foi que a qualidade do reparo ósseo pode ser incrementada a partir da associação destas terapias. Foram utilizados 40 ratos da linhagem Wistar, machos, três meses de idade, com massa corpórea variando entre 250 e 300 g, nos quais foi induzido defeito ósseo circular de 3 mm de diâmetro, nas tíbias direita e esquerda. Os ratos foram divididos, aleatoriamente, em quatro grupos experimentais equitativos: Grupo 1 controle, Grupo 2 - enxerto biofuncional composto de beta fosfato tricálcico e poli(ácido lático-co-ácido glicólico) (-TCP/PLGA), Grupo 3 terapia laser de baixa intensidade, Grupo 4 enxerto biofuncional composto de -TCP/PLGA, e terapia laser de baixa intensidade. Os ratos foram submetidos à eutanásia aos 15 dias após a cirurgia. A irradiação laser (Ga-Al-As) foi iniciada no pós-operatório imediato e repetida três vezes por semana, sendo empreagado 6 J de energia em um único ponto sobre a região do defeito. Após a eutanásia, as tíbias direita e esquerda foram removidas, sendo que as tíbias direitas foram designadas para as análises histológicas e as tíbias esquerdas para as análises biomecânicas com ensaio de flexão em três pontos. Estatisticamente o Grupo 4 apresentou o menor escore de infiltrado inflamatório e o maior de tecido ósseo neoformado, sendo o maior escore de tecido de granulação do Grupo 3. A força máxima de ruptura e a força descolamento no momento da ruptura máxima foram maiores no Grupo 4. Foi possível concluir que a terapia laser de baixa intensidade em combinação com enxerto biofuncional composto de -TCP e PLGA permitiu, tanto no aspecto histológico como biomecânico, uma melhor qualidade no reparo de defeitos ósseos induzidos em tíbias de ratos, quando comparado as terapêuticas isoladas.

This study aimed to assess the effects of a biofunctional graft alone, or in combination with low-level laser therapy (LLLT) on the repair of tibial bone defect in rats. The hypothesis was that the combination of therapy modalities could increase the quality of bone healing. Forty male Wistar rats, 3 months of age, weighing from 250 g to 300 g were used. A circular bone defect (3 mm diameter) was created in the right and left tibias. The rats were randomly distributed into four equal groups: G1 - control, G2 - biofunctional graft composed of -tricalcium phosphate and poly(lactic-co-glycolic acid) (-TCP/PLGA), G3 - LLLT, G4 - biofunctional graft composed of -TCP/PLGA and LLLT. The rats were euthanized on day 15 day after surgery. The LLLT (Ga-Al-As) was performed in the immediate postoperative period and three times per week. The application was at one point with energy 6J. After euthanasia, the right and left tibiae were removed. The right tibias were used for the histological analysis, and the left tibias were used for three-point bending tests. The statistical analysis showed lower inflammatory infiltrate score and higher newly-formed bone tissue in G4, and the higher granulation tissue score in G3. Highest values for maximum rupture force and maximum displacement occurred in G4. In conclusion, biofunctional graft composed of -TCP/PLGA and LLLT was better in promoting the repair of bone defects induced in rat tibiae compared with each treatment alone, based on the histopathological and biomechanical findings.

Avaliação da interação biológica de substituto ósseo á base de fosfato de cálcio em falhas ósseas induzidas em tíbias de coelhos

O objetivo do presente estudo foi comparar o processo de regeneração óssea em coelhos através da utilização do cimento ósseo á base de fosfato de cálcio isolado e associado à membrana de colágeno. Essa dissertação foi dividida em dois capítulos: o primeiro, uma avaliação clínica e termográfica do processo inflamatório nos membros onde se realizou a ostectomia, e o segundo, uma comparação da regeneração óssea através da análise radiográfica, por microscopia de luz (ML) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Foram utilizados 12 coelhos adultos, de ambos os sexos e pesando em média 2,49± 0,29 kg (média ± desvio padrão). Os animais foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos experimentais, grupo cimento ósseo (GCO) e grupo cimento ósseo acrescido da membrana de colágeno (GCOM). Os biomateriais foram introduzidos em defeitos criados cirurgicamente na diáfise proximal e distal de cada tíbia, de modo que o cimento ósseo foi introduzido no membro direito e no membro esquerdo, além do cimento ósseo foi adicionada a membrana de colágeno. Logo após o procedimento cirúrgico e aos e 30 e 60 dias de pós- operatório foram realizadas radiografias nas projeções crânio-caudal e médio-lateral. No capítulo I, foram avaliadas a temperatura retal (TR) e temperatura superficial (TS) da região das ostectomias nos momentos D0(antes do procedimento cirúrgico) e do D1 ao D7 e D14 de pós-operatório. A TR se manteve dentro dos valores de referência para a espécie. Com relação a TS não se observou diferença estatística entre os grupos.Essa diferença foi constatada em ambos os grupos com relação à localização dos implantes e em relação ao momento D14. Observou-se em ambos os grupos reação inflamatória na maioria dos animais a partir do D8 e que no GCOM essa inflamação foi mais acentuada. Conclui-se que avaliação clínica e termográfica foram ferramentas auxiliares para análise do processo inflamatório nos membros onde se realizou a ostectomia. No capítulo II esses animais foram subdivididos ao acaso em dois momentos experimentais, sendo 06 animais eutanasiados aos 30 dias após a cirurgia, e 06 aos 60 dias. Tanto na radiografia e ML quanto na MEV na avaliação descritiva e comparativa, não se observou diferença com relação à regeneração óssea entre os grupos, o que se verificou foi que aos 60 dias de pós-operatório a reparação óssea foi mais acentuada e intensificou a neoformação óssea se comparada aos 30 dias. Segundo os resultados obtidos, todas as amostras foram gradativamente absorvidas durante os períodos avaliados, sendo substituídas por tecido ósseo neoformado, no entanto a atividade osteopromotora da membrana de colágeno não foi evidenciada.

The objective of the present study was to compare the bone regeneration process in rabbits through the use of calcium phosphate based bone cement isolated and associated with the collagen membrane. This dissertation was divided into two chapters: the first, a clinical and thermographic evaluation of the inflammatory process in the limbs where the ostectomy was performed, and the second, a comparison of the bone regeneration through the radiographic analysis, by light microscopy (LM) and Microscopy Scanning Electronics (SEM). Twelve adult rabbits of both sexes and weighing on average 2.49 ± 0.29 kg (mean ± standard deviation) were used. The animals were randomly assigned to two experimental groups, bone cement group (GCO) and bone cement group plus collagen membrane (GCOM). The biomaterials were introduced into surgically created defects in the proximal and distal diaphysis of each tibia, so that the bone cement was introduced into the right limb and left limb, in addition to the bone cement was added to the collagen membrane. Shortly after the surgical procedure and at the 30 and 60 postoperative days, radiographs were performed in the cranio-caudal and mid-lateral projections. In section I, the rectal temperature (TR) and superficial temperature (TS) of the ostectomy region at the D0 moments (before the surgical procedure) and from the D1 to the D7 and postoperative D14 were evaluated. The TR remained within the reference values for the species. Regarding TS, no statistical difference was observed between the groups. This difference was observed in both groups in relation to the location of the implants and in relation to the D14 moment. It was observed in both groups inflammatory reaction in the majority of the animals from the D8 and that in the GCOM this inflammation was more accentuated. It was concluded that clinical and thermographic evaluation were auxiliary tools to analyze the inflammatory process in the limbs where the ostectomy was performed. In Chapter II, these animals were randomly subdivided into two experimental moments, with six animals euthanized at 30 days after surgery, and 06 at 60 days. In both radiography and ML and in the SEM in the descriptive and comparative evaluation, no difference was observed in relation to the bone regeneration between the groups, which was verified that at 60 postoperative days the bone repair was more accentuated and intensified the neoformation compared to 30 days. According to the results obtained, all the samples were gradually absorbed during the evaluated periods, being replaced by neoformed bone tissue, however the osteopromotor activity of the collagen membrane was not evidenced.

BIOCERÂMICA DE HIDROXIAPATITA E TRIFOSFATOS DE CÁLCIO DE ABSORÇÕES RÁPIDA E LENTA NO REPARO DE DEFEITOS OSSEOS EM RATAS WISTAR COM OU SEM OSTEOPENIA INDUZIDA

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do substituto ósseo HA/TCP de absorções rápida e lenta na reparação óssea de ratas com ou sem osteopenia induzida. O projeto foi desenvolvido em duas etapas: indução da osteopenia (Capítulo I) e implantação do biomaterial (Capítulo II). Na fase de indução da osteopenia foram utilizadas 18 ratas albinas da linhagem Wistar (Rattus norvegicus) com massa corporal média de 300 gramas e seis meses de idade. A osteopenia foi induzida por ovariosalpingohisterectomia associada a dieta hipocalcêmica e foi avaliada por densidade radiográfica óssea e mensuração de marcadores bioquímicos fosfatase alcalina e osteocalcina. Em todas as ratas verificou-se aumento dos níveis séricos de FA e OC e redução da densidade radiográfica óssea, caracterizando a condição osteopênica. Na segunda fase do projeto foram utilizadas 36 ratas albinas da linhagem Wistar (Rattus norvegicus) com massa corporal média de 300 gramas e seis meses de idade. As ratas foram divididas em dois grupos: animais submetidos a ovariohisterectomia e dieta hipocalcêmica (Grupo OSH) e animais não castrados com dieta comercial (Grupo Controle). Após a confirmação da indução osteopênica por meio de densidade radiográfica óssea no grupo OSH, foi criado um defeito ósseo no terço proximal das tíbias direita e esquerda em todos os animais. Estes foram subdivididos em dois grupos: tratados com preenchimento do defeito com HA/TCP de absorções rápida e lenta e grupo controle negativo no qual o defeito permaneceu vazio. Foram feitas avaliações radiográficas nos dias 0, 15 e 30 após implante e avaliações histológicas aos 15 e 30 dias. Foram observadas formação de redes vasculares, tecido osteóide e matriz óssea em todos os grupos tratados com HA/TCP rápida e lenta, favorecendo o processo de reparação; nos grupos controle negativos foi observada a formação de cortical fina e descontinua a partir do osso preexistente. A HA/TCP de absorções rápida e lenta é um biomaterial ideal no tratamento de falhas ósseas promovendo a regeneração. A HA/TCP de absorção rápida mostrou-se um material promissor no reparo de falhas ósseas com uma neoformação mais organizada.s em condições de ostepenica.

The aim of this study was to evaluate the effect of the fast and slow absorptions of / HA bone substitute on bone repair of rats with or without induced osteopenia. The project was developed in two stages: induction of osteopenia (Chapter I) and implantation of the biomaterial (Chapter II). In the osteopenia induction phase, 18 Wistar (Rattus norvegicus) albino rats with a mean body mass of 300 grams and 6 months of age were used. Osteopenia was induced by ovariosalpingohisterectomy associated with a hypocalcemic diet and was evaluated by radiographic bone density and measurement of biochemical markers alkaline phosphatase and osteocalcin. In all rats there was an increase in serum levels of FA and OC and reduction of bone radiographic density, characterizing the osteopenic condition. In the second phase of the project, 36 Wistar rats (Rattus norvegicus) with average body mass of 300 grams and six months of age were used. The rats were divided into two groups: animals submitted to ovariohysterectomy and hypocalcemic diet (OSH Group) and uncastrated animals with commercial diet (Control Group). After confirming the osteopenic induction by means of bone radiographic density in the OSH group, a bone defect was created in the proximal third of the right and left tibias in all the animals. These were subdivided into two groups: treated with defect filling with fast and slow absorption / HA / TCP and negative control group in which the defect remained empty. Radiographic evaluations were performed on days 0, 15 and 30 after implantation and histological evaluations at 15 and 30 days. Formation of vascular networks, osteoid tissue and bone matrix were observed in all groups treated with fast and slow HA / TCP, favoring the repair process; in the negative control groups, fine and discontinuous cortical formation was observed from the preexisting bone. The rapid and slow absorption of / HA is an ideal biomaterial in the treatment of bone failure promoting regeneration. Fast-absorbing -HA / TCP proved to be a promising material for repairing bone defects with a more organized neoformation.

Castor oil polyurethane containing silica nanoparticles as filling material of bone defect in rats / Poliuretana de mamona contendo nanopartículas de sílica como material de preenchimento de defeito ósseo em ratos

PURPOSE: To evaluate the biologic behavior of the castor polymer containing silica nanoparticles as a bone substitute in diafisary defect. METHODS: Twenty seven male rattus norvegicus albinus wistar lineage were submitted to bone defect filled with castor oil polymer. Three experimental groups had been formed with nine animals each: (1) castor oil polymer containing only calcium carbonate; (2) castor oil polymer with calcium carbonate and doped with 5 percent of silica nanoparticles; (3) castor polymer with calcium carbonate doped with 10 percent of silica nanoparticles; 3 animals of each group were submitted to euthanasia 15, 30 and 60 days after experimental procedure, and their femurs were removed to histological evaluation. RESULTS: there was bone growth in all the studied groups, with a greater tendency of growth in the group 1. After 30 days all the groups presented similar results. After 60 days a greater amount of fibroblasts, osteoblasts, osteocytes and osteoclasts in group 3 was observed, with integrated activity of 3 kinds of cells involved in the bone activation-reabsorption-formation. CONCLUSIONS: The castor polymer associated to the silica nanoparticles is biocompatible and allows osteoconduction. The presence of osteoprogenitors cells suggests silica osteoinduction capacity.(AU)

OBJETIVO: Avaliar o comportamento biológico do polímero de mamona contendo nanopartículas de sílica como substituto ósseo. MÉTODOS: Vinte e sete rattus norvergicus albinus, Wistar foram submetidos a defeito ósseo preenchido com polímero de mamona. Foram formados três grupos experimentais, com nove ratos cada: (1) Polímero com carbonato de cálcio; (2) Polímero com carbonato de cálcio dopado com 5 por cento de nanopartículas de sílica; (3) Polímero com carbonato de cálcio dopado com 10 por cento de nanopartículas de sílica; três animais de cada grupo foram submetidos à eutanásia 15, 30 e 60 dias após o procedimento experimental e os fêmures removidos e submetidos à avaliação histológica. RESULTADOS: Houve crescimento ósseo em todos os grupos estudados, com maior tendência de crescimento no grupo contendo polímero de mamona acrescido apenas por carbonato de cálcio. Aos 30 dias, todos os grupos apresentaram resultados semelhantes. Aos 60 dias, notou-se maior presença de fibroblastos, osteoblastos, osteócitos e osteoclastos no grupo 3, com persistência da atividade integrada dos três tipos de células envolvidas no processo de ativação-reabsorção-formação óssea. CONCLUSÕES: O polímero de mamona associado com nanopartículas de sílica é biocompatível e permite a osteocondução. A presença de células osteoprogenitoras nos implantes contendo 10 por cento de sílica indica sua capacidade osteoindutora.(AU)

Tomografia computadorizada da matriz óssea mineralizada heteróloga fragmentada e metilmetacrilato na reparação de falhas ósseas segmentares produzidas em tíbia de coelhos / Computed tomography to evaluate the association of fragmented heterolog cortical bone and methylmethacrylate to repare segmental bone defect produced in tibia of rabbits

Foi realizada falha segmentar de 6mm na região metafisária medial da tíbia de 12 coelhos, seguida de preenchimento desta por matriz óssea mineralizada heteróloga fragmentada conservada em glicerina (98%) e metilmetacrilato autoclavado, bem como avaliação por meio da tomografia computadorizada de feixe cônico (cone beam) aos 30, 60 e 90 dias. Houve incorporação gradativa do implante no leito receptor em relação ao tempo em 100% dos casos, o que mostra ser este biologicamente compatível, ao promover reparação da falha óssea, sem sinais de infecção, migração e/ou rejeição, caracterizando-se, assim, como nova opção de substituto ósseo para preenchimento de falhas ósseas.(AU)

A 6mm segmental defect was performed on the metaphyseal region of the tibia of 12 rabbits and the autoclaved fragmented heterolog cortical bone conserved in glycerin (98%) and methylmethacrylate was used as a bone graft for the reconstruction. The graft was placed in the receptor bed and its integration was evaluated by computed tomography after 30, 60 and 90 days. There was gradual bone graft incorporation in the receptor bed during the time in 100% of the cases. Fragmented cortical bone heterograft and methylmethacrylate was biologically compatible and promotes bone defect reparation without signs of infection, migration and or rejection, featuring a new option of osseous substitute to fill in bone defects.(AU)

Avaliação histológica e histomorfométrica da regeneração óssea a partir da utilização de mantas ósseas à base quitosana, hidroxiapatita e colágeno como substituto ósseo em falhas ósseas induzidas em tíbias de ovinos

Falhas ósseas são comumente encontradas na medicina veterinária em diferentes enfermidades, principalmente por traumas em grandes animais. Frequentemente fazse necessário auxiliar este reparo tecidual para melhor correção desta falha. Os biomateriais foram desenvolvidos para cumprir esta função. A fim de avaliar o comportamento celular perante estes substitutos ósseos, a realização de testes in vivo é fundamental. A partir da observação da unidade morfofuncional do tecido é possível avaliar a quantidade e a qualidade do tecido neoformado. Atualmente, em estudos ortopédicos, os ovinos são considerados animais de escolha como modelo experimental. Falhas ósseas foram realizadas experimentalmente em ovinos, onde foram implantados biomateriais à base de quitosana, hidroxiapatita e colágeno. Após 60 dias foi realizada biopsia no local do reparo tecidual e por meio da histomorfometria, da análise descritiva da microscopia de luz e da microscopia eletrônica de transmissão, o tecido neoformado foi avaliado e comparado. Na histomorfometria, não houve diferença significativa quanto à quantidade de tecido neorformado do grupo controle e do grupo com biomaterial, porém quando comparado ao osso pré-existente, retirado no momento da confecção da falha, a área de matriz óssea foi menor. Na descrição da microscopia de luz e em maiores detalhes na análise ultra estrutural, observou-se o biomaterial em contato íntimo com o tecido neoformado, sugerindo boa biocompatibilidade. Foi possível observar o padrão da reparação tecidual, onde o membro controle e o membro com biomaterial não diferiram quanto à arquitetura tecidual, porém nas amostras com o implante do biomaterial foi identificada a presença do mesmo. Todas estas informações sugerem que o biomaterial de estudo apresenta potencial para auxiliar na rotina ortopédica de grandes animais.

Bone defects are commonly found in veterinary medicine through different disease such as trauma, especially in large animals. Frequently it is necessary to assist this tissue repair for better regeneration. Biomaterials in general are designed to this function. In order to understand the bone cells in the presence of bone substitutes, tests in vivo are essential for these studies. The quantity and quality of new tissue formation can be assessed by observation of tissue morphofunctional unit. Currently, in orthopedic studies sheep are considerated animals of choice for experimental development. Bone defects were performed experimentally in sheep and were implanted chitosan, hydroxyapatite and collagen biomaterials. After 60 days, biopsy was performed at the site of tissue repair and the new tissue formation was described, evaluated and compared by histomorphometry and electronic transmission microscopy. After hystomorfometry analysis there was no difference between control group and biomaterial group, but when compare with pre-existent tissue, the values are smaller. In descriptive analysis was observed intimate contact with biomaterial and new tissue formation suggesting biocompatibility. It observed the pattern of tissue repair in control group and biomaterial group did not differ in the architecture tissue. However, in the biomaterial group was identified presence of the biomaterial in the specimen. All these data suggest that the biomaterial study has the potential to assistant in orthopedic routine of large animals.

Células-tronco mononucleares autólogas e proteína óssea morfogenética na cicatrização de defeitos tibiais experimentalmente induzidos em cães / Autologue mononuclear stem cells and morphogenetic bone protein in experimentally induced tibial defect healing in dogs

Avaliou-se a utilização de células-tronco mononucleares (CTM) na cicatrização de defeito ósseo experimental como alternativa aos métodos convencionais, analisando-se o tempo de evolução cicatricial e a presença dessas células no tecido neoformado. Foram utilizados 18 cães, separados em três grupos (G) de seis, e de cada animal foram colhidas células da medula óssea (MO), contadas e analisadas para morfometria, por meio da contagem manual e mielograma. Um defeito ósseo tibial foi então criado cirurgicamente, e a lesão tratada com esponja de gelatina embebida em solução fisiológica (G1), esponja de gelatina embebida com aspirado de MO processado (G2) e esponja de gelatina embebida com aspirado de MO processado e proteína óssea morfogenética (rhBMP-2) (G3). A cicatrização foi então avaliada por estudos radiográficos, e a presença de CTM foi identificada por meio de marcadores nanocristais Qtracker, em microscopia com luz fluorescente, uma semana após a intervenção cirúrgica. Entre as células identificadas pelo marcador, foram encontradas células da linhagem óssea. As avaliações radiográficas demonstram crescimento ósseo acelerado nos animais de G2 e G3. Houve diferenças significativas entre o G1 e G3 em todos os tempos estudados, e entre G1 e G2 nos tempos de 30 e 45 dias. A utilização de CTM adultas suplementadas ou não com rhBMP-2 é alternativa favorável ao crescimento ósseo em defeitos experimentais agudos de tíbia de cães.(AU)

Mononuclear stem cells (MSC) were experimentally implanted in bone defect, as an alternative to the conventional methods, in order to evaluate the healing speed, and the presence of these cells in the new-born tissue. Bone marrow (BM) was collected from 18 dogs, and then counted and morphometrically analyzed by manual count and myelogram. The dogs were separated in three groups (G) of six animals each. A tibial bone defect was surgically made in each dog and the wound was treated with gelatin sponge and physiologic solution (G1), gelatin sponge and processed BM (G2), and gelatin sponge, processed BM, and rhBMP-2 (G3). The healing was evaluated by radiographic study and the presence of MSC was microscopically identified by Qtracker nanocrystal labeler with a fluorescent light one week after the surgery. Cells from the bone lineage were found among the labeled cells. The radiographic evaluations demonstrated a speed up in bone growth in dogs from G2 and G3, and significant differences were found between G1 and G3 dogs, in all studied periods; and between G1 and G2 animals at 30 and 45 days. The rhBMP-2 supplemented or not-supplemented adult MSC are favorable alternatives to the bone growth in the healing process of acute experimental-induced tibial defects in dogs.(AU)