Evaluation of psychological symptoms in patients before and after simultaneous pancreas-kidney transplantation: a single-center cross-sectional study

Purpose: Simultaneous pancreas-kidney transplantation (SPKT) brings several benefits for insulin-dependent type-1 diabetic patients associated with end-stage renal disease (ESRD). However, data on psychological outcomes for the waiting list and the transplanted patients are still lacking. Methods: Using the psychological Beck inventories of anxiety (BAI) and depression (BDI), 39 patients on the waiting list were compared to 88 post-transplanted patients who had undergone SPKT. Results: Significant differences were found regarding depression (p = 0.003) but not anxiety (p = 0.161), being the pretransplant patients more vulnerable to psychological disorders. Remarkable differences were observed relative to the feeling of punishment (p < 0.001) and suicidal thoughts (p = 0.008) between the groups. It was observed that patients who waited a longer period for the transplant showed more post-transplant anxiety symptoms due to the long treatment burden (p = 0.002). Conclusions: These results demonstrated the positive impact of SPKT on psychological aspects related to depression when comparing the groups. The high number of stressors in the pretransplant stage impacts more severely the psychosocial condition of the patient.

Financial cost of the admissions for simultaneous pancreas-kidney transplant in a Brazilian Hospital

PURPOSE:To perform a cost analysis of simultaneous pancreas-kidney transplantation (SPKT) in a Brazilian hospital.METHODS:Between January 2008 and December 2011, 105 consecutive SPKTs at the Hospital of Kidney and Hypertension in Sao Paulo were evaluated. We evaluated the patient demographics, payment source (public health system or supplementary system), and the impact of each hospital cost component. The evaluated costs were corrected to December 2011 values and converted to US dollars.RESULTS:Of the 105 SPKT patients, 61.9% were men, and 38.1% were women. Eight patients died, and 97 were discharged (92.4%). Eighty-nine procedures were funded by the public health system. The cost for the patients who were discharged was $18.352.27; the cost for the deceased patients was $18.449.96 (p = 0.79). The FOR for SPKT during this period was positive at $5,620.65. The costs were distributed as follows: supplies, 36%; administrative costs, 20%; physician fees, 15%; intensive care unit, 10%; surgical center, 10%; ward, 9%.CONCLUSION:Mortality did not affect costs, and supplies were the largest cost component.(AU)

O IMPACTO DAS VIAS INTRAPANCREÁTICA, INTRAVENOSAE E INTRACAPSULAR RENAL NO TRANSPLANTE DE CÉLULAS-TRONCO MESENQUIMAIS - REGENERAÇÃO MORFOFUNCIONAL DO DIABETES TIPO 1 EXPERIMENTAL

O diabetes mellitus (DM) é uma das doenças que mais tem aumentado sua incidência na última década. As células-tronco mesenquimais derivadas de tecido adiposo (CTMs-TA) possuem características imunomoduladoras e reparadoras, sendo capazes de reverter efeitos sistêmicos da doença. Sendo assim, nosso trabalho teve como objetivo avaliar o impacto do transplante de CTMs-TA pelas vias intravenosa, intrapancreática e intra-capsular renal em ratos diabéticos e comparar a que melhor exerce efeito regenerador. Para o estudo, utilizamos 45 ratos, wistar, fêmeas, divididos em 5 grupos: GCS controle sadio; GCD controle diabético; GIV diabético, via intravenosa; GIP diabético, via intrapancreática; GIR diabético, via cápsula renal. Para a indução, utilizamos uma única aplicação intraperitoneal (i.p) de Aloxana (120mg/kg), e após 3 dias, os animais foram submetidos ao transplante com as CTMs-TA (2x106cel/animal). Após 15 dias do transplante, os animais foram eutanasiados. O transplante de CTMs-TA pela cápsula renal foi capaz de reverter a hiperglicemia, além de restaurar o diâmetro das ilhotas e restabelecer a função das massa -pancreática. Concluímos que a cápsula renal foi a que apresentou melhores resultados na regeneração morfofuncional do pâncreas diabético. As CTMs-TA utilizadas neste estudo foram capazes de exercer um importante efeito parácrino, podendo ser utilizadas como alternativa para a melhoria da qualidade de vida de indivíduos diabéticos.

Diabetes mellitus is one of the diseases that has increased your incidence in the last decade. Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells (ATMSCs) have immunomodulatory and regenerate characteristics, thus are capable of reverse the damages of the disease. Therefore, our study aimed to evaluate the impact of ATMSCs transplantation by the intravenous, intrapancreatic and intra-capsular renal routes in diabetic rats and detect the best route to promote regenerative effects. We used 45 female wistar rats, divided into 5 groups: GCS healthy control; GCD - diabetic control; GIV - diabetic, intravenous; GIP - diabetic, intrapancreatic route; GIR - diabetic, via renal capsule. For induction, we used a single intraperitoneal application (i.p) of Alloxan (120mg / kg) and after 3 days, the animals were transplanted with the ATMSCs (2x106/ animal). After 15 days of transplantation, the animals were euthanized. The transplantation of ATMSCs by the renal capsule were able to reverse hyperglycemia, besides restoring the islet diameter and restoring the function of -pancreatic mass. We conclude that the renal capsule presented the best results in the morphofunctional regeneration of the diabetic pancreas. The stem cells used in this study were able to exert an

Alotransplante de ilhotas pancreáticas no baço com imunossupressão com ciclosporina. Modelo experimental em cães / Pancreatic islet allograft in spleen with immunossuppression with cyclosporine. Experimental model in dogs

PURPOSE: To study the functional behavior of the allograft with immunosuppression of pancreatic islets in the spleen. METHODS: Five groups of 10 Mongrel dogs were used: Group A (control) underwent biochemical tests; Group B underwent total pancreatectomy; Group C underwent total pancreatectomy and pancreatic islet autotransplant in the spleen; Group D underwent pancreatic islet allograft in the spleen without immunosuppressive therapy; Group E underwent pancreatic islet allograft in the spleen and immunosuppression with cyclosporine. All of the animals with grafts received pancreatic islets prepared by the mechanical-enzymatic method - stationary collagenase digestion and purification with dextran discontinuous density gradient, implanted in the spleen. RESULTS: The animals with autotransplant and those with allografts with immunosuppression that became normoglycemic showed altered results of intravenous tolerance glucose (p < 0.001) and peripheral and splenic vein plasmatic insulin levels were significantly lower (p < 0.001) in animals that had allografts with immunosuppression than in those with just autotransplants. CONCLUSIONS: In the animals with immunosupression with cyclosporine subjected to allograft of pancreatic islets prepared with the mechanical-enzymatic preparation method (stationary collagenase digestion and purification with dextran discontinuous density gradient), the production of insulin is decreased and the response to intravenous glucose is altered.(AU)

OBJETIVO: Avaliar o comportamento funcional do alotransplante com imunossupressão de ilhotas pancreáticas no baço. MÉTODOS: Foram utilizados cinco grupos de 10 cães mestiços: grupo A (controle) submetido aos exames bioquímicos; grupo B, submetido à pancreatectomia total; grupo C (autotransplante) submetido à pancreatectomia total e autotransplantação de ilhotas pancreáticas no baço; grupo D, submetido à alotransplantação de ilhotas pancreáticas no baço sem terapia imunossupressiva; grupo E, submetido à alotransplantação de ilhotas no baço e imunossupressão com ciclosporina. Todos os animais transplantados receberam ilhotas pancreáticas isoladas pelo método mecânico-enzimático, digestão estacionária com colagenase e purificação com gradiente de densidade descontínua de dextran e foram implantadas no baço. RESULTADOS: Animais autotransplantados e alotransplantados com imunossupressão que se tornaram normoglicêmicos apresentaram testes de tolerância à glicose intravenosa alterados (p<0,001) e o nível de insulina plasmática periférica e na veia esplênica foram significantemente menores (p<0,001) nos animais alotransplantados com imunossupressão em relação aos autotransplantados. CONCLUSÃO: Nos animais submetidos ao alotransplante de ilhotas pancreáticas com imunossupressão com ciclosporina e preparadas pelo método mecânico-enzimático, digestão estacionária com colagenase e purificação com gradiente de densidade descontínua de dextran, a produção de insulina está diminuída e a resposta à sobrecarga de glicose intravenosa alterada.(AU)

Early hemodynamics and metabolic changes after total abdominal evisceration for experimental multivisceral transplantation / Efeitos hemodinâmicos e metabólicos iniciais da evisceração abdominal total para transplante multivisceral experimental

PURPOSE: Multivisceral transplantation (MVTx) has been accepted as standard therapeutic modality for patients with short-bowel syndrome associated with irreversible liver failure. Even nowadays, experimental models of MVTx grounds high incidence of intraoperative or early recipient mortality. Despite the known deleterious effects of hepatosplanchnic exenteration the impact of this procedure on systemic hemodynamics and metabolism remains to be determined. METHODS: Nine dogs (20.1±0.5 kg) were subjected to an en bloc resection of all abdominal organs including, stomach, duodenum, pancreas, liver, spleen, small bowel, and colon. A woven double velour vascular graft was interposed between the suprahepatic and infrahepatic vena cava. Systemic hemodynamic were evaluated through a Swan-Ganz catheter, ultrasonic flowprobes, and arterial lines. Systemic O2-derived variables, glucose, and lactate metabolism were analyzed throughout the experiment. RESULTS: Complete abdominal exenteration was associated with significant reduction in cardiac output, and mean arterial pressure (57% and 14%, respectively). Two hours after reperfusion a significant reduction in arterial pH and glucose were also observed. Oxygen consumption remained unaltered during the first two hours of the experiment, with a significant increase of lactate levels (1.4±0.3 vs. 7.6±0.4, p<0.05). Three animals died before the 3 hours of reperfusion were completed. Total abdominal exenteration for MVTx in dogs is associated with early major hemodynamics, and metabolic changes. CONCLUSION: The deleterious hemodynamic alterations observed are probably related with the association of severe acidosis, hyperlactemia, hypoglycemia, and reduction of total circulating blood volume. Close hemodynamic and metabolic monitoring should be provided during experimental MVTx in order to promote an increase in successful rates of this complex and challenging procedure.(AU)

OBJETIVO: O transplante multivisceral (MVTx) é preconizado como tratamento de escolha em pacientes com síndrome do intestine curto associado com falência hepática irreverssível. Modelos experimentais de MVTx apresentam altas taxas de mortalidade intra-operatória e nas primeiras horas apos a reperfusão. Apesar dos deletérios efeitos hemodinâmicos da exenteração abdominal, o impacto deste procedimento na perfusão e no metabolismo sistêmico ainda esta por ser determinado. MÉTODOS: Nove cães (20.1±0.5 kg) foram submetidos a ressecção em bloco de todos os orgãos abdominais incluindo, estômago, duodeno, pancreas, fígado, baço, intestino delgado, e colon. Uma prótese vascular foi interposta entre a veia cava infra e supra-hepática. Efeitos hemodinâmicos foram avaliados por meio de um cateter de Swan-Ganz catheter e Doppler ultrassônico. As variáveis dependentes de oxigênio, e o metabolismo da glicose e lactato foram avaliados durante todo o experimento. RESULTADOS: A evisceração abdominal esteve associada a uma redução significativa do débito cardiaco e da pressão arterial média (57% and 14%, respectivamente). Duas horas após a reconstrução vascular da veia cava inferior observou-se uma redução significativa do pH e da glicose arterial. O consumo de oxigênio se manteve inalterado nas primeiras duas horas do experimento, com um significativo aumento dos níveis séricos de lactato (1.4±0.3 vs. 7.6±0.4, p<0.05). Três animais morreram antes de 180 minutos após a reperfusão. CONCLUSÃO: A evisceração abdominal total esteve associada com graves repercussões hemodinâmicas e metabólicas sistêmicas. Estas graves alterações hemodinâmicas estam associadas, provavelmente, a combinação de vários fatores incluindo: acidose metabólica, hiperlactemia, hipoglicemia e redução do volume de sangue circulante. A cuidadosa monitorização hemodinâmica e metabólica deve ser realizada durante o MVTx experimental com a finalidade de promover um aumento...(AU)

Estudo comparativo entre cinco diferentes tratamentos sobre as alterações clínicas e laboratoriais do rato diabético induzido pela aloxana / Comparative study among five different treatments on the clinical and laboratory changes of the alloxan-induced diabetic rats

OBJETIVOS: Este estudo visa a analisar os efeitos, a longo prazo, de cinco diferentes tratamentos sobre o controle metabólico de ratos diabéticos aloxânicos. MÉTODOS: Foram analisados 7 grupos experimentais, com 50 ratos cada um, sendo: GN o grupo controle normal; GD o grupo controle diabético, sem tratamento; GI, GA e GIA os grupos tratados, respectivamente, com insulina, acarbose e associação insulina + acarbose; GTIL o grupo tratado com transplante de ilhotas de Langerhans; e o GTPD o grupo tratado com transplante pancreatoduodenal heterotópico. Parâmetros clínicos (peso, ingestão hídrica, ingestão alimentar e diurese) e laboratoriais (glicemia, glicose urinária e insulina plasmática) foram avaliados em todos os animais, no início do experimento, e após 1, 3, 6, 9 e 12 meses de seguimento. RESULTADOS: A exceção do GN, mortalidade foi observada em todos os grupos experimentais no seguimento de 12 meses (GD= 50 por cento; GI= 20 por cento; GA= 26 por cento; GIA= 18 por cento; GTIL= 4 por cento; GTPD= 20 por cento). Em GD, GI, GA e GIA os óbitos ocorreram por distúrbios metabólicos ou hidroeletrolíticos e/ou pneumonia, diarréia e caquexia; em GTIL e GTPD todos os óbitos ocorreram por falhas técnicas no pós-operatório até 72h. Animais dos grupos GI, GA e GIA tiveram melhora significativa (p < 0,05) de todos os parâmetros clínicos e laboratoriais observados em ratos diabéticos, sem diferença de efetividade entre os tratamentos. Porém, os resultados observados nestes grupos, biologicamente não foram comparáveis aos observados em GTIL e GTPD, onde observou-se correção completa, aos níveis normais, de todas as variáveis analisadas (p<0,01). CONCLUSÕES: Os tratamentos convencionais com insulina, acarbose e insulina + acarbose melhoraram o estado diabético grave dos ratos tratados, contudo, a eficácia dos tratamentos foi significativamente inferior à oferecida pelo GTIL e GTPD. (AU)

Função do fator de crescimento progranulina na diferenciação e proliferação de células de linhagem hepática, durante o desenvolvimento embrionário de ratos Fischer 344 / Function of the progranuline growth factor in the hepatic lineage cell differentiation and proliferation during the embryo development of fisher 344 rats

Doenças envolvendo órgãos endodermicamente derivados afetam milhares de pessoas no mundo. O sucesso da terapia celular para o tratamento de doenças de órgãos oriundos da mesoderme e ectoderme gera ótimas perspectivas para o uso do mesmo em tratamento de doenças de órgãos de origem endodérmica (tireóide, pulmões, fígado, vesícula biliar e pâncreas). Particularmente, no fígado, ainda que sejam atribuídas propriedades regenerativas em muitas lesões o mecanismo de reparação é insuficiente, tornando o transplante hepático à única opção definitiva. Dentre as células-tronco embrionárias, as células de linhagens hepáticas fetais podem estabelecer-se como fonte importante para a terapia celular em indivíduos com doenças hepáticas, pois possuem um alto índice de diferenciação de hepatócitos e células do ducto biliar in vitro. Evidências apontam a progranulina como um fator de crescimento de grande habilidade para a indução de proliferação celular, uma vez que está envolvida no desenvolvimento embrionário e neonatal. Sendo assim, neste trabalho foram utilizados embriões de ratos Fischer 344 com idades gestacionais 12,5; 13,5; 14,5; 15,5; 16;5 para caracterizar o papel do novo fator de crescimento progranulina na hepatogênese. Foram realizadas análises histológicas, de microscopia eletrônica de transmissão e imuno-histoquímicas nos embriões. Houve expressão de progranulina e Oct-4 (marcador de célula tronco indiferenciada) principalmente nas idades gestacionais de 13,5 a 16,6 dias e 12,5 a 16,5 dias para PCNA (marcador de proliferação celular). Dessa forma acredita-se que, a progranulina atua nos processos de proliferação celular e diferenciação das células-tronco do broto hepático, podendo ser usada como um fator de diferenciação em culturas in vitro visando à diferenciação de células-tronco do broto hepático em hepatócitos funcionais para a terapia celular

Diseases involving endodermal-derivated organs affect thousands of people all over the world. The cell therapy success for treating diseases of organs originated from mesoderm and ectoderm generates excellent perspectives for its use in treating diseases of organs of endodermal origin (thyroid, lungs, liver, gallbladder and pancreas). Particularly in the liver, although regenerative proprieties are attributed in many lesions, the repairing mechanism is insufficient, making the hepatic transplant the only definitive option. Among the embryo stem cells, the fetal hepatic lineage cells may establish themselves as important sources for cell therapy in individuals with hepatic diseases, since they have high ability in hepatocytes and billiar duct cells differentiation in vitro. However, for the use of hepatic lineage embryo stem cells as a bi-potential source of differentiation, it is necessary the establishment of efficient proliferation methods in this type of cells. Evidences point to progranuline as a growth factor with high capability for the induction of cell proliferation, since it is involved in the embryo and neo-natal development. Thus, this study used embryos of Fischer 344 rats with gestational ages 12.5, 13.5, 14.5, 15.5 and 16.5 to characterize the role of the new growth factor progranuline in hepatogenesis. We conducted histological, transmission electron microscopy and immunohistochemical in embryos. There was expression of progranuline and Oct-4 (undifferentiated stem cell marker), especially at gestational ages 13.5 to 16.5 days and 12.5 to 16.5 days for PCNA (proliferation marker). So it is believed that progranuline acts on cell proliferation and differentiation of stem cells from the liver bud, which can be used as a differentiating factor in order to cultures in vitro differentiation of stem cells from the liver bud into functional hepatocytes for cell therapy

Experimental pancreas transplantation: the consequences of the portocaval shunt on the blood glucose, plasma insulin, and glucagon

The consequences of the bypass of the portal venous effluent into the systemic circulation on the blood glucose, plasma insulin, and glucagon in immediate postoperative period of rats submitted to pancreas transplantation were studied. Forty outbred male Wistar rats were randomly assigned to two experimental groups: group NC included 20 non-diabetic control rats, submitted to simulated operating (sham-operated), and group PT included 20 diabetic rats that received heterotopic pancreas transplantation from normal donor Wistar rats. For 7 days prior and 1, 3, 6, 12, 24, 48, 72 and 96 hours after transplantation blood glucose, plasma insulin, and glucagon were recorded. These parameters were also concurrently recorded for NC rats. Diabetes was induced by i.v. alloxan administration; PT rats were immunosuppressed with cyclosporin A. NC rats presented normal values of blood glucose, plasma insulin, and glucagon over the course of experiment. A marked hyperinsulinemia was found in peripheral venous blood of PT rats, being plasma insulin significantly higher than that for NC rats (P 0.01) beginning 72- h after transplant. The plasma glucagon, elevated in pre-transplant period, did not change after transplant. Despite hyperinsulinemia and hyperglucagonemia, the blood glucose levels were elevated up to 6- h after transplant, but were within normal levels following this period. Beginning at 12- h after transplant the blood glucose levels observed in PT rats did not differ significantly to NC rats until the sacrifice.

A proposição foi realizada, no período pós-operatório imediato, em 40 ratos Wistar, distribuídos por sorteio em doi grupos: grupo NC, vinte ratos correspondentes ao grupo controle, não diabético, submetidos a operação simulada e o grupo PT, 20 ratos correspondentes ao grupo diabético que recebeu transplante de pâncreas heterotópico de ratos Wistar normais. Durante sete dias, antes do transplante, e 1, 3, 6, 12, 24, 48, 72, 96 horas após, determinava-se a glicose sanguínea, a insulina plasnática e o glucagon. Estes parâmetros eram obtidos também do grupo NC. Diabetes mellitus experimental era induzida pela administração intravenosa de aloxana. O grupo PT era imunosuprimido com ciclosporina A. O grupo NC apresentou níveis normais de glicose sanguínea, de insulina plásmica e de glucagon, durante todo o experimento. Foi encontrada nítida hiperinsulinemia no sangue venoso periférico do grupo PT. A insulina plasmática era significantemente maior no grupo PT comparada ao grupo NC começando 72 horas após o transplante. O glucagon plasmático, elevado no período pré-transplante, não se alterou após o transplante. Apesar de hiperinsulinemia e hiperglucagonemia, os níveis de glicose sanguínea eram elevados 6 horas após o transplante e mantiveram-se normais após este período. Considerando-se os níveis de glicose sanguínea 12 horas pós-transplante, não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos PT e NC, até o sacrifício.

Transplante de ilhotas pancreáticas em dispositivos de imunoisolamento celular: resultados iniciais

There have been great developments in pancreas and pancreatic islet cell transplantion in the last few years. The isolation of the islet cells in capsules with semi-permeable membranes may become ideal means of treating diabetes, and the use of immunossuppression could be avoided. The ideal material for the confection of the capsules has remained a dream. A new material derived from natural latex was implanted in the subcutaneous tissue of normal and diabetic rats to study the biocompatibility and the vascular neoformation. After 21 days, an analysis of the implant showed intense vascular neoformation on the membrane-tissue interface and little fibrotic tissue. The inicial results show great promise for utilization of this material in capsules for the isolation of cells.

O transplante de pâncreas e de ilhotas pancreáticas vem apresentando grande desenvolvimento nos últimos anos. O isolamento das ilhotas em cápsulas com membrana semi-permeáveis pode ser tratamento de escolha para o diabetes, pois dispensa o uso de imunossupressores. O material ideal para a confecção de uma cápsula para o isolamento celular ainda permanece um sonho. Um novo material a base de látex natural foi implantado no subcutâneo de ratos normais e diabéticos para estudar a biocompatibilidade e a neoformação vascular. A análise após 21 dias de implante mostrou intensa formação capilar na interface membrana-tecido e pouco tecido fibrótico. Estes achados iniciais mostram que o material pode ter algum potencial para a confecção de dispositivos de isolamento celular.

TRANSPLANTE DE ILHOTAS PANCREÁTICAS EM DISPOSITIVOS DE IMUNOISOLAMENTO CELULAR: RESULTADOS INICIAIS

There have been great developments in pancreas and pancreatic islet cell transplantion in the last few years. The isolation of the islet cells in capsules with semi-permeable membranes may become ideal means of treating diabetes, and the use of immunossuppression could be avoided. The ideal material for the confection of the capsules has remained a dream. A new material derived from natural latex was implanted in the subcutaneous tissue of normal and diabetic rats to study the biocompatibility and the vascular neoformation. After 21 days, an analysis of the implant showed intense vascular neoformation on the membrane-tissue interface and little fibrotic tissue. The inicial results show great promise for utilization of this material in capsules for the isolation of cells.

O transplante de pâncreas e de ilhotas pancreáticas vem apresentando grande desenvolvimento nos últimos anos. O isolamento das ilhotas em cápsulas com membrana semi-permeáveis pode ser tratamento de escolha para o diabetes, pois dispensa o uso de imunossupressores. O material ideal para a confecção de uma cápsula para o isolamento celular ainda permanece um sonho. Um novo material a base de látex natural foi implantado no subcutâneo de ratos normais e diabéticos para estudar a biocompatibilidade e a neoformação vascular. A análise após 21 dias de implante mostrou intensa formação capilar na interface membrana-tecido e pouco tecido fibrótico. Estes achados iniciais mostram que o material pode ter algum potencial para a confecção de dispositivos de isolamento celular.

Pancreatic islet isolation by mechanical-enzymatic separation, stationary collagenase digestion and dextran discontinuous density gradient purification: experimental study in dogs

The prospects for allotransplantation of pancreatic islets in man depend on the development of methods that provide sufficient quantities of pancreatic islets from a single donor, which are capable, when transplanted, of achieve the normalization of carbohydrate metabolism. Objective: Evaluate the efficacy of the isolation of Langerhans islets from dogs, by means of mechanical-enzymatic separation technique with stationary digestion using collagenase, and purification with a discontinuous dextran density gradient. Methods: The counting of islet numbers and evaluation of their sizes was accomplished by staining with diphenylthiocarbazone and using stereoscopic microscopes equipped with eyepiece reticule for the measurement of average diameters of stained islets. Results: The results disclosed that the average number of islets isolated was 81032.20 ± 24736.79 and the average number of islets isolated per kg of body weight was 6938.70 ± 1392.43. The average number of islets isolated per kg of body weight showed significant correlation with body weight and weight of the pancreas resected. Conclusion: The number of islets isolated, of a single donor, by mechanical-enzymatic separation, stationary collagenase digestion and discontinuous dextran density gradient purification can be sufficient to success of pancreatic islets transplant in dogs.

A perspectiva do alotransplante de ilhotas pancreáticas no homem está na dependência do desenvolvimento de métodos que propiciem quantidades suficientes de ilhotas pancreáticas, originadas de doador único, capazes de, quando transplantadas, levarem à normalização do metabolismo dos hidratos de carbono. Objetivo: Avaliar, em cães, a eficácia do isolamento das ilhotas de Langerhans por meio da técnica de separação mecânica-enzimática, digestão estacionária com colagenase e purificação pelo gradiente de densidade descontínua de dextran. Métodos: A contagem do número e avaliação do tamanho das ilhotas foi realizada pela coloração com difeniltiocarbazona e exame em microscópio estereoscópico munido de retícula ocular para medição do diâmetro médio das ilhotas coradas. Resultados: O número médio de ilhotas isoladas foi de 81032,20 ± 24736.79 e o número médio de ilhotas/kg de peso corpóreo foi de 6938,70± 1392,43. O número médio de ilhotas/kg de peso corpóreo obtido mostrou correlação significativa com peso corpóreo e peso do pâncreas extirpado. Conclusão: Estes resultados sugerem que o número de ilhotas isoladas, de um único doador, por meio da separação mecânica-enzimática, digestão estacionária com colagenase e purificação pelo gradiente de densidade descontínua de dextran pode ser suficiente para o sucesso do transplante de ilhotas pancreáticas em cães.

Distribuição anatômica da árvore ductal pancreática do cão: implicações para o isolamento das ilhotas de Langerhans

The knowledge of normal pancreatic ductal tree anatomy in dogs is important for the preparation and isolation of islets of Langerhans. The aim of this study is to demonstrate the anatomical configuration of the pancreatic ductal tree, especially concerning its implications in the preparation of pancreatic tissue for Langerhans islets transplantation techniques. The main pancreatic duct ( Santorini ) was dissected, and the upper and the lower branches were catheterized. Total pancreatectomy was performed without duodenectomy. Through the catheters an acetone solution was administered to the ducts, a blue ink solution was administered to the upper branch, and a red ink solution was administered to the lower branch. The ductal tree was then carefully dissected. A global distension of the pancreatric parenquima was observed due to the complete envelopment of the gland by the tributary branches of the main pancreatic duct. The lower branch only distended the uncinated process region, and the upper branch only distended the body and tail regions of the pancreatic tissue. This study suggests that the use of these sites of infusion are adequate in the procedures for isolating islets of Langerhans in dogs.

O conhecimento da anatomia normal da árvore ductal pancreática no cão e de sua variações reveste-se de importância para a execução dos protocolos de preparação e isolamento das ilhotas de Langerhans. A proposta deste estudo é demonstrar a configuração anatômica da dutal pancreática com especial atenção para as implicações sobre as técnicas de preparação do tecido pancreático para o transplante de ilhotas de Langerhans no cão. Os autores realizaram a dissecção do duto pancreático principal (Santorini) e a cateterização dos seus ramos ascendente e descendente. Em seguida procederam à pancreatectomia total sem duodenectomia. Através destes cateteres, infundiu-se solução de acetona no interior dos ductos e solução de tinta nanquim de cor azul no ramo ascendente e de cor vermelha no ramo descendente. Posteriormente, os autores dissecaram a árvore ductal pancreática com pinças delicadas e digitoclasia. Através desta técnica, os autores verificaram a distensão universal do parênquima pancreático devido ao envolvimento de toda a glândula pelos ramos tributários do ducto pancreático principal. O ramos descendente distendeu exclusivamente a região do processo uncinado, ao passo que o ramo ascendente distendeu exclusivamente as regiões do corpo e cauda do pâncreas canino. Esta constatação enfatiza a utilização destas vias para a infusão das soluções apropriadas nos procedimentos de isolamento das ilhotas de Langerhans no modelo canino.