Correlation and contrasts between agronomic and physical traits of grain in transgenic and conventional corn hybrids for the food industry / Correlação e contrastes entre características agronômicas e físicas dos grãos em híbridos de milho transgênicos e convencionais para a indústria alimentícia

The food industry is very interested in high-yield ingredients to enrich and develop new products that have an affordable value for the population. This work aimed to determine the correlations and contrasts between grain physical and agronomic traits of conventional and transgenic corn hybrids cultivated in the first crop season. The experiments were installed in the 2017/18, 2018/19, and 2019/20 crop seasons in Guarapuava - PR. The experimental design was a randomized block design with eight hybrids (SUPREMO VIP, SUPREMO, P30F53VYH, P30F53, P3456H, P3456, DKB290PRO3, and DKB290) and three replications. The agronomic traits, such as the percentage of rot grains, 1000-grain mass, and grain yield, also the physical traits of grains for industrial purposes, such as grits, germ, vitreousness, flotation, and hectoliter weight, were evaluated. There is a positive correlation between grits and flotation. The choice of hybrids for the food industry based on vitreousness positively favors flotation. The grits showed a positive correlation with hectoliter weight and a negative correlation with the incidence of rot grains. Vitreousness was influenced by the choice of conventional or transgenic hybrid and crop season. The environments of the crop seasons influence the grain yield, 1000-grain mass, and rot grain incidence of conventional and transgenic corn hybrids.(AU)

A indústria de alimentos tem grande interesse por ingredientes de elevado rendimento industrial para enriquecer e desenvolver novos produtos, e que tenha um valor acessível para a população. Os objetivos desse trabalho foram determinar as correlações e contrastes entre caracteres físicos de grãos e agronômicos de híbridos de milho convencionais e transgênicos cultivados na primeira safra. Os experimentos foram instalados nas safras agrícolas (2017/18, 2018/19 e 2019/20), no município de Guarapuava ­ PR. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados com 8 híbridos: (SUPREMO VIP, SUPREMO, P30F53VYH, P30F53, P3456H, P3456, DKB290PRO3, DKB290) e três repetições. Foram avaliadas as características agronômicas como a porcentagem de grãos ardidos, peso de mil grãos e produtividade de grãos e também as características físicas dos grãos para fins industriais, como a canjica, gérmen, vitreosidade, flutuação e peso hectolítrico. Há correlação positiva entre a canjica e a flutuação. A escolha de híbridos para a indústria alimentícia com base na vitreosidade favorece positivamente a característica de flutuação. A canjica apresentou correlação positiva com peso hectolitro e negativa com incidência de grãos ardidos. A vitreosidade foi influenciada pela escolha do híbrido convencional ou transgênico e pela safra agrícola. Os ambientes das safras agrícolas influenciam as características produtividade de grãos, peso de mil grãos e incidência de grãos ardidos dos híbridos de milho convencional e transgênico.(AU)

Agronomic characteristics of maize hybrids (Zea mays, L. ) at different maturity stages / Características agronômicas de híbridos de milho (Zea mays, L. ) silageiros em diferentes estádios de maturação

The objective of this study was to evaluate the production and physical composition of three maize hybrids (Zea mays, L.) for silage production at six maturity stages. The hybrids evaluated were Maximus VIP3, Defender VIP and Feroz VIP. The experiment was conducted in a completely randomized block design with four replicates. The mean plant heights observed at harvest time (2.33 m, 2.45 m and 2.40m) demonstrated that all materials were medium-sized hybrids. A positive correlation was observed between plant height and height of the ear insertion, varying from 0.86 for the Feroz VIP hybrid to 0.88 for the Maximus VIP3 hybrid, but these two variants had no correlation with the productivity data. There was a significant difference for the production of fresh biomass at the R1, R2 and R5 stages, with Maximus VIP3 obtaining the highest yields. The proportion of grains in the physical composition of plant varied between hybrids, where Maximus VIP3 and Defender VIP (482.2 and 461.7 g kg-¹, respectively) were superior to Feroz VIP (429.7 g kg-¹). With the advancement of maturity, there was a decreasing linear behavior for stem and leaf participation, with reductions of 3.8 g kg-¹ and 4.5 gkg-¹, respectively, per day (R2 = 0.79 and 0.80, respectively), quadratic behavior for bracts and corncob and a linear increase in grain participation in the plant structure, with an increase of 7.7 g kg-¹ per day (R2 = 0.88). In general, the three hybrids present good characteristics for silage production and permit harvesting in the hard grain stage, allowing the addition of starch in relation to the farinaceous grain stage.

O objetivo do trabalho foi avaliar a produção e a composição física de três híbridos de milho (Zea mays, L.) para produção de silagem, em seis estádios de maturidade. Os híbridos avaliados foram o MaximusVIP3, Defender VIP e Feroz VIP. O experimento foi conduzido em delineamento de blocos inteiramente casualizados com quatro repetições e três tratamentos. A média de altura de planta observada no momento da colheita (2,33m, 2,45m e 2,40m, respectivamente) classifica todos os materiais como híbridos de porte médio. Foi observado correlação positiva, variando de 0,86 para o híbrido Feroz VIP a0,88 para o híbrido Maximus VIP3, entre a altura de planta e altura de inserção da espiga, porém, essas duas varáveis não tiveram correlação com os dados de produtividade. Houve diferença significativa para produção de biomassa fresca nos estádio R1, R2 e R5, tendo o Maximus VIP3 obtido as maiores produtividades. A proporção de grãos na composição física da planta variou entre os híbridos, onde o Maximus VIP3 e o Defender VIP (482,2 e 461,7 g kg-¹) foram superiores ao Feroz VIP (429,7 g kg-¹).Com o avanço da maturidade notou-se comportamento linear decrescente para participação de colmo e folha, com redução de 03,8 g kg-¹ e 04,5 g kg-¹ (R2=0,79 e 0,8; respectivamente) ao dia, quadrático para brácteas e sabugo, e linear crescente para participação de grãos na estrutura da planta, com aumento de 7,7 g kg-¹ ao dia (R2=0,88). De forma geral, os três híbridos apresentam boas características para produção de silagem e permitem a colheita em estádio de grão duro, possibilitando acréscimo de grãos em relação ao estádio de grão farináceo.

Agronomic characteristics of maize hybrids (Zea mays, L. ) at different maturity stages / Características agronômicas de híbridos de milho (Zea mays, L. ) silageiros em diferentes estádios de maturação

The objective of this study was to evaluate the production and physical composition of three maize hybrids (Zea mays, L.) for silage production at six maturity stages. The hybrids evaluated were Maximus VIP3, Defender VIP and Feroz VIP. The experiment was conducted in a completely randomized block design with four replicates. The mean plant heights observed at harvest time (2.33 m, 2.45 m and 2.40m) demonstrated that all materials were medium-sized hybrids. A positive correlation was observed between plant height and height of the ear insertion, varying from 0.86 for the Feroz VIP hybrid to 0.88 for the Maximus VIP3 hybrid, but these two variants had no correlation with the productivity data. There was a significant difference for the production of fresh biomass at the R1, R2 and R5 stages, with Maximus VIP3 obtaining the highest yields. The proportion of grains in the physical composition of plant varied between hybrids, where Maximus VIP3 and Defender VIP (482.2 and 461.7 g kg-¹, respectively) were superior to Feroz VIP (429.7 g kg-¹). With the advancement of maturity, there was a decreasing linear behavior for stem and leaf participation, with reductions of 3.8 g kg-¹ and 4.5 gkg-¹, respectively, per day (R2 = 0.79 and 0.80, respectively), quadratic behavior for bracts and corncob and a linear increase in grain participation in the plant structure, with an increase of 7.7 g kg-¹ per day (R2 = 0.88). In general, the three hybrids present good characteristics for silage production and permit harvesting in the hard grain stage, allowing the addition of starch in relation to the farinaceous grain stage.(AU)

O objetivo do trabalho foi avaliar a produção e a composição física de três híbridos de milho (Zea mays, L.) para produção de silagem, em seis estádios de maturidade. Os híbridos avaliados foram o MaximusVIP3, Defender VIP e Feroz VIP. O experimento foi conduzido em delineamento de blocos inteiramente casualizados com quatro repetições e três tratamentos. A média de altura de planta observada no momento da colheita (2,33m, 2,45m e 2,40m, respectivamente) classifica todos os materiais como híbridos de porte médio. Foi observado correlação positiva, variando de 0,86 para o híbrido Feroz VIP a0,88 para o híbrido Maximus VIP3, entre a altura de planta e altura de inserção da espiga, porém, essas duas varáveis não tiveram correlação com os dados de produtividade. Houve diferença significativa para produção de biomassa fresca nos estádio R1, R2 e R5, tendo o Maximus VIP3 obtido as maiores produtividades. A proporção de grãos na composição física da planta variou entre os híbridos, onde o Maximus VIP3 e o Defender VIP (482,2 e 461,7 g kg-¹) foram superiores ao Feroz VIP (429,7 g kg-¹).Com o avanço da maturidade notou-se comportamento linear decrescente para participação de colmo e folha, com redução de 03,8 g kg-¹ e 04,5 g kg-¹ (R2=0,79 e 0,8; respectivamente) ao dia, quadrático para brácteas e sabugo, e linear crescente para participação de grãos na estrutura da planta, com aumento de 7,7 g kg-¹ ao dia (R2=0,88). De forma geral, os três híbridos apresentam boas características para produção de silagem e permitem a colheita em estádio de grão duro, possibilitando acréscimo de grãos em relação ao estádio de grão farináceo.(AU)

Differences in lipidomics may be potential biomarkers for early diagnosis of pancreatic cancer

Purpose To analyze the plasma lipid spectrum between healthy control and patients with pancreatic cancer and to select differentially expressed tumor markers for early diagnosis. Methods In total, 20 patents were divided into case group and healthy control group according to surgical pathology. Of almost 1206 plasma lipid molecules harvested from 20 patients were measured by HILIC using the normal phase LC/MS. Heat map presented the relative levels of metabolites and lipids in the healthy control group and patients with pancreatic cancer. The PCA model was constructed to find out the difference in lipid metabolites. The principal components were drawn in a score plot and any clustering tendency could be observed. PLS-DA were performed to distinguish the healthy control group and pancreatic cancer according to the identified lipid profiling datasets. The volcano plot was used to visualize all variables with VIP>1 and presented the important variables with P 0.01 and ,FC,>2. Results The upregulated lipid metabolites in patients with pancreatic cancer contained 9 lipids; however, the downregulated lipid metabolites contained 79 lipids. Conclusion There were lipid metabolomic differences in patients with pancreatic cancer, which could serve as potential tumor markers for pancreatic cancer.(AU)

Performance, carcass characteristics and ingestive behavior of steers fed with silages of different maize hybrids / Desempenho, características da carcaça e comportamento ingestivo de novilhos alimentados com silagens de diferentes híbridos de milho

The objective of this study was to evaluate the performance, carcass characteristics and ingestive behavior of feedlot steers fed with three maize hybrids: Maximus VIP3, Defender VIP and Feroz VIP. The experiment lasted 112 days, weighing animals four times, every 28 days. The experimental diets were formulated and constituted by maize silage and pelletized ration in a 50:50 ratio (dry basis). Regardless of the hybrid used, there was an increase in the intake of dry matter with the advance in feedlot evaluation period (9.15, 9.14, 9.35 and 9.59kg day-1, in the first, second, third and fourth weighing, respectively). The type of maize hybrid silage influenced weight gain of animals differently, with a final mean of 1.413kg for animals fed with Maximus VIP3, 1,375kg for those fed with Defender VIP and 1,184kg for those fed with Feroz VIP. The animals fed with Feroz VIP hybrid silage showed higher carcass gain efficiency and were more active in the number of times they went to the feeder. Although the three evaluated hybrids resulted in good animal performance, the carcass characteristics did not change; nevertheless, the hybrid Maximus VIP3 is recommended for its superior bromatological composition.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar desempenho, características da carcaça e comportamento ingestivo de novilhos terminados em confinamento alimentados com silagens dos híbridos de milho: Maximus VIP3, Defender VIP e Feroz VIP. O experimento teve duração de 112 dias, sendo quatro pesagens a cada 28 dias. As dietas experimentais foram formuladas e constituídas por silagem de milho e ração peletizada em proporção de 50:50, na base seca. Independentemente do híbrido utilizado, houve aumento conforme avanço na fase de terminação (9,15; 9,14; 9,35 e 9,59kg dia-1, na primeira, segunda, terceira e quarta pesagens, respectivamente). A distinção da silagem de milho determinou diferença no ganho de peso dos animais, com média final de 1,413kg para os animais tratados com Maximus VIP3, 1,375kg para os tratados com Defender VIP e 1,184 para aqueles alimentados com Feroz VIP. Os animais alimentados com silagem do híbrido Feroz VIP apresentaram maior eficiência de ganho de carcaça e foram mais ativos ao número de vezes em ir ao comedouro. Apesar dos três híbridos avaliados proporcionarem bons resultados relacionados ao desempenho animal, as características da carcaça não sofreram alterações; mesmo assim, recomenda-se o híbrido Maximus VIP3 por sua superioridade bromatológica.(AU)

Performance, carcass characteristics and ingestive behavior of steers fed with silages of different maize hybrids / Desempenho, características da carcaça e comportamento ingestivo de novilhos alimentados com silagens de diferentes híbridos de milho

The objective of this study was to evaluate the performance, carcass characteristics and ingestive behavior of feedlot steers fed with three maize hybrids: Maximus VIP3, Defender VIP and Feroz VIP. The experiment lasted 112 days, weighing animals four times, every 28 days. The experimental diets were formulated and constituted by maize silage and pelletized ration in a 50:50 ratio (dry basis). Regardless of the hybrid used, there was an increase in the intake of dry matter with the advance in feedlot evaluation period (9.15, 9.14, 9.35 and 9.59kg day-1, in the first, second, third and fourth weighing, respectively). The type of maize hybrid silage influenced weight gain of animals differently, with a final mean of 1.413kg for animals fed with Maximus VIP3, 1,375kg for those fed with Defender VIP and 1,184kg for those fed with Feroz VIP. The animals fed with Feroz VIP hybrid silage showed higher carcass gain efficiency and were more active in the number of times they went to the feeder. Although the three evaluated hybrids resulted in good animal performance, the carcass characteristics did not change; nevertheless, the hybrid Maximus VIP3 is recommended for its superior bromatological composition.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar desempenho, características da carcaça e comportamento ingestivo de novilhos terminados em confinamento alimentados com silagens dos híbridos de milho: Maximus VIP3, Defender VIP e Feroz VIP. O experimento teve duração de 112 dias, sendo quatro pesagens a cada 28 dias. As dietas experimentais foram formuladas e constituídas por silagem de milho e ração peletizada em proporção de 50:50, na base seca. Independentemente do híbrido utilizado, houve aumento conforme avanço na fase de terminação (9,15; 9,14; 9,35 e 9,59kg dia-1, na primeira, segunda, terceira e quarta pesagens, respectivamente). A distinção da silagem de milho determinou diferença no ganho de peso dos animais, com média final de 1,413kg para os animais tratados com Maximus VIP3, 1,375kg para os tratados com Defender VIP e 1,184 para aqueles alimentados com Feroz VIP. Os animais alimentados com silagem do híbrido Feroz VIP apresentaram maior eficiência de ganho de carcaça e foram mais ativos ao número de vezes em ir ao comedouro. Apesar dos três híbridos avaliados proporcionarem bons resultados relacionados ao desempenho animal, as características da carcaça não sofreram alterações; mesmo assim, recomenda-se o híbrido Maximus VIP3 por sua superioridade bromatológica.(AU)

Transgenic traits in the cotton crop in Brazil: a review / Tecnologias transgênicas na cultura do algodoeiro no Brasil: revisão

Over the last years, the cotton (Gossypium hirsutum L.) crop in Brazil has been substantially modified by a large-scale introduction of biotechnologically-based resources. In this work, a general review on the technical principles and the current status regarding transgenic traits developed for cotton is presented. The use of transgenic cotton, which contains genes isolated from other species, has been increasingly frequent, occupying more than 80% of the crop production area in Brazil in 2017. The development of transgenic cotton is costly and time-consuming, and is concentrated in a few owner groups. Current generations of Bt protoxins isolated from Bacillus thuringiensis (“Cry” and “Vip” proteins) for control of lepidopteran insects and genes conferring tolerance to glyphosate (cp4epsps and 2mepsps) and ammonium glufosinate (pat and bar) are included as products commercially available for growers. Events for tolerance to the herbicides 2,4-D and dicamba, although already developed, require regulatory authorizations in Brazil, and, probably, will be available for commercialization in the coming years. The combination of several transgenic traits (stacked-traits)within an individual genotype is an increasing tendency for new transgenic cultivars to be launched. More recently, promising studies involving transgenic plants have been conducted to obtain resistance to diseases, tolerance to abiotic stresses, and improvements in fiber and seed properties, which may result in release of new traits in the future.

A cultura do algodoeiro (Gossypium hirsutum L.) tem sofrido importantes modificações nos últimos anos no Brasil devido à introdução em larga de escala de recursos provenientes de biotecnologia. Neste trabalho é apresentada uma revisão geral sobre os princípios técnicos e o status atual relacionados a eventos transgênicos desenvolvidos para o algodoeiro. A utilização de algodoeiro transgênico, que contém genes isolados de outras espécies, tem sido cada vez mais frequente, ocupando mais de 80% das áreas destinadas à cultura no Brasil no ano de 2017. O desenvolvimento de variedades transgênicas é um processo demorado e de custo elevado, e está concentrado em poucos grupos detentores. Entre produtos comercialmente disponíveis aos produtores incluem-se gerações atuais de protoxinas Bt isoladas de Bacillus thuringiensis (proteínas “Cry” e “Vip”) para controle de insetos lepidópteros e genes que conferem tolerância aos herbicidas glifosato (cp4epsps e 2mepsps) e glufosinato de amônio (pat e bar). Eventos de tolerância aos herbicidas 2,4-D e dicamba, embora já tenham sido desenvolvidos, necessitam de autorizações regulatórias no Brasil e devem estar disponíveis para comercialização nos próximos anos. A combinação de diversos produtos transgênicos em um mesmo genótipo (produtos piramidados) é uma tendência crescente para os próximos cultivares a serem lançados. Mais recentemente, foram realizados estudos promissores envolvendo transgenia para obtenção de resistência a doenças, tolerância a estresses abióticos e melhorias em propriedades da fibra e da semente, os quais podem resultar no fornecimento de novos eventos futuramente.

Competitive interaction and economic injury level of Urochloa plantaginea in corn hybrids / Interação competitiva e nível de dano econômico de papuã em híbridos de milho

Identifying the competitive ability of corn hybrids and the economic injury level (EIL) caused by Urochloa plantaginea is important for the adoption of integrated management of this weed. This work aims to evaluate the interference and EIL of U. plantaginea infesting corn hybrids. Treatments included the corn hybrids Syngenta Status VIP3, Syngenta SX8394 VIP3, Pioneer P1630H, Pioneer 30F53 YH, and Dow 135021, as well as 12 densities of U. plantaginea for each hybrid. We used a rectangular hyperbolic model to describe the relationship between corn grain productivity loss and the explanatory variables ­ plant density (PD), dry mass (DM) of the aerial parts, ground cover (GC), and leaf area (LA). EIL was determined using grain productivity, control cost, corn price, and herbicide efficacy. The rectangular hyperbolic model provides a satisfactory estimate of grain productivity loss regarding the interference of U. plantaginea in corn culture. The hybrids Pioneer 30F53 YH and Pioneer P1630H presented better competitiveness and higher EIL. Sowing the hybrids Pioneer P1630H, Pioneer 30F53 YH, and Dow 135021 increased EIL, justifying the adoption of control measures for U. plantaginea at higher densities.(AU)

A identificação da habilidade competitiva de híbridos de milho e do nível de dano econômico (NDE) ocasionado pelo papuã (Urochloa plantaginea) torna-se importante para a adoção do manejo integrado dessa planta daninha. Diante disso, objetivou-se com este trabalho avaliar a interferência e o NDE de papuã infestante de híbridos de milho. Os tratamentos foram compostos pelos híbridos de milho Syngenta Status VIP 3, Syngenta SX8394 VIP 3, Pioneer P1630H, Pioneer 30F53 YH e Dow 135021 e 12 densidades de plantas de papuã para cada híbrido. Para descrever a relação entre a perda de produtividade de grãos do milho e as variáveis explicativas densidade de plantas (DP), massa seca da parte aérea (MS), cobertura do solo (CS) e área foliar (AF), usou-se o modelo da hipérbole retangular. A determinação do NDE foi efetuada usando-se a produtividade de grãos, custo de controle, preço do milho e eficiência do herbicida. O modelo da hipérbole retangular estima de modo satisfatório as perdas de produtividade de grãos em função da interferência do papuã na cultura do milho. Os híbridos Pionner 30F53 YH e Pionner P1630H apresentaram melhor competitividade e os maiores NDEs. A semeadura dos híbridos Pioneer P1630H, Pioneer 30F53 YH e Dow 135021 aumenta o NDE, justificando a adoção de medidas de controle em densidades mais elevadas.(AU)

Transgenic traits in the cotton crop in Brazil: a review / Tecnologias transgênicas na cultura do algodoeiro no Brasil: revisão

Over the last years, the cotton (Gossypium hirsutum L.) crop in Brazil has been substantially modified by a large-scale introduction of biotechnologically-based resources. In this work, a general review on the technical principles and the current status regarding transgenic traits developed for cotton is presented. The use of transgenic cotton, which contains genes isolated from other species, has been increasingly frequent, occupying more than 80% of the crop production area in Brazil in 2017. The development of transgenic cotton is costly and time-consuming, and is concentrated in a few owner groups. Current generations of Bt protoxins isolated from Bacillus thuringiensis (“Cry” and “Vip” proteins) for control of lepidopteran insects and genes conferring tolerance to glyphosate (cp4epsps and 2mepsps) and ammonium glufosinate (pat and bar) are included as products commercially available for growers. Events for tolerance to the herbicides 2,4-D and dicamba, although already developed, require regulatory authorizations in Brazil, and, probably, will be available for commercialization in the coming years. The combination of several transgenic traits (stacked-traits)within an individual genotype is an increasing tendency for new transgenic cultivars to be launched. More recently, promising studies involving transgenic plants have been conducted to obtain resistance to diseases, tolerance to abiotic stresses, and improvements in fiber and seed properties, which may result in release of new traits in the future.(AU)

A cultura do algodoeiro (Gossypium hirsutum L.) tem sofrido importantes modificações nos últimos anos no Brasil devido à introdução em larga de escala de recursos provenientes de biotecnologia. Neste trabalho é apresentada uma revisão geral sobre os princípios técnicos e o status atual relacionados a eventos transgênicos desenvolvidos para o algodoeiro. A utilização de algodoeiro transgênico, que contém genes isolados de outras espécies, tem sido cada vez mais frequente, ocupando mais de 80% das áreas destinadas à cultura no Brasil no ano de 2017. O desenvolvimento de variedades transgênicas é um processo demorado e de custo elevado, e está concentrado em poucos grupos detentores. Entre produtos comercialmente disponíveis aos produtores incluem-se gerações atuais de protoxinas Bt isoladas de Bacillus thuringiensis (proteínas “Cry” e “Vip”) para controle de insetos lepidópteros e genes que conferem tolerância aos herbicidas glifosato (cp4epsps e 2mepsps) e glufosinato de amônio (pat e bar). Eventos de tolerância aos herbicidas 2,4-D e dicamba, embora já tenham sido desenvolvidos, necessitam de autorizações regulatórias no Brasil e devem estar disponíveis para comercialização nos próximos anos. A combinação de diversos produtos transgênicos em um mesmo genótipo (produtos piramidados) é uma tendência crescente para os próximos cultivares a serem lançados. Mais recentemente, foram realizados estudos promissores envolvendo transgenia para obtenção de resistência a doenças, tolerância a estresses abióticos e melhorias em propriedades da fibra e da semente, os quais podem resultar no fornecimento de novos eventos futuramente.(AU)

Competitive interaction and economic injury level of Urochloa plantaginea in corn hybrids / Interação competitiva e nível de dano econômico de papuã em híbridos de milho

Identifying the competitive ability of corn hybrids and the economic injury level (EIL) caused by Urochloa plantaginea is important for the adoption of integrated management of this weed. This work aims to evaluate the interference and EIL of U. plantaginea infesting corn hybrids. Treatments included the corn hybrids Syngenta Status VIP3, Syngenta SX8394 VIP3, Pioneer P1630H, Pioneer 30F53 YH, and Dow 135021, as well as 12 densities of U. plantaginea for each hybrid. We used a rectangular hyperbolic model to describe the relationship between corn grain productivity loss and the explanatory variables ­ plant density (PD), dry mass (DM) of the aerial parts, ground cover (GC), and leaf area (LA). EIL was determined using grain productivity, control cost, corn price, and herbicide efficacy. The rectangular hyperbolic model provides a satisfactory estimate of grain productivity loss regarding the interference of U. plantaginea in corn culture. The hybrids Pioneer 30F53 YH and Pioneer P1630H presented better competitiveness and higher EIL. Sowing the hybrids Pioneer P1630H, Pioneer 30F53 YH, and Dow 135021 increased EIL, justifying the adoption of control measures for U. plantaginea at higher densities.(AU)

A identificação da habilidade competitiva de híbridos de milho e do nível de dano econômico (NDE) ocasionado pelo papuã (Urochloa plantaginea) torna-se importante para a adoção do manejo integrado dessa planta daninha. Diante disso, objetivou-se com este trabalho avaliar a interferência e o NDE de papuã infestante de híbridos de milho. Os tratamentos foram compostos pelos híbridos de milho Syngenta Status VIP 3, Syngenta SX8394 VIP 3, Pioneer P1630H, Pioneer 30F53 YH e Dow 135021 e 12 densidades de plantas de papuã para cada híbrido. Para descrever a relação entre a perda de produtividade de grãos do milho e as variáveis explicativas densidade de plantas (DP), massa seca da parte aérea (MS), cobertura do solo (CS) e área foliar (AF), usou-se o modelo da hipérbole retangular. A determinação do NDE foi efetuada usando-se a produtividade de grãos, custo de controle, preço do milho e eficiência do herbicida. O modelo da hipérbole retangular estima de modo satisfatório as perdas de produtividade de grãos em função da interferência do papuã na cultura do milho. Os híbridos Pionner 30F53 YH e Pionner P1630H apresentaram melhor competitividade e os maiores NDEs. A semeadura dos híbridos Pioneer P1630H, Pioneer 30F53 YH e Dow 135021 aumenta o NDE, justificando a adoção de medidas de controle em densidades mais elevadas.(AU)

Evaluation of sample extracting methods of FCSM by Lactobacillus acidophilus based on a UPLC-Q-TOF-MS global metabolomics analysis

Abstract The study of metabolomics requires extracting as many metabolites as possible from a biological sample. This study aimed to determine the optimal method for the extraction of metabolites from solid-state fermented cottonseed meal (FCSM). The UPLC-Q-TOF-MS global metabolomics technology was used to detect the metabolites in FCSM, and the extraction quantity and extraction efficiency of seven different extraction methods, specifically the WA, 50MeOH, 50MeOHB, 50MeCNB, 80MeOHB, 80MeOH and AMF methods were evaluated. The results showed that the number of VIP metabolites extracted by AMF method are 196 and 184 in ESI+ and ESI- mode respectively, it is the largest number of all exacted methods; and the AMF methods also provided a higher extraction efficiency compared with the other methods, especially in indoleacrylic acid, dl-tryptophan and epicatechin (p 0.01). As a result, AMF/-4 °C method was identified as the best method for the extraction of metabolites from FCSM by Lactobacillus acidophilus. Our study establishes a technical basis for future metabolomics research of fermented feed.

Evaluation of sample extracting methods of FCSM by Lactobacillus acidophilus based on a UPLC-Q-TOF-MS global metabolomics analysis

The study of metabolomics requires extracting as many metabolites as possible from a biological sample. This study aimed to determine the optimal method for the extraction of metabolites from solid-state fermented cottonseed meal (FCSM). The UPLC-Q-TOF-MS global metabolomics technology was used to detect the metabolites in FCSM, and the extraction quantity and extraction efficiency of seven different extraction methods, specifically the WA, 50MeOH, 50MeOHB, 50MeCNB, 80MeOHB, 80MeOH and AMF methods were evaluated. The results showed that the number of VIP metabolites extracted by AMF method are 196 and 184 in ESI+ and ESI- mode respectively, it is the largest number of all exacted methods; and the AMF methods also provided a higher extraction efficiency compared with the other methods, especially in indoleacrylic acid, dl-tryptophan and epicatechin (p < 0.01). As a result, AMF/-4 °C method was identified as the best method for the extraction of metabolites from FCSM by Lactobacillus acidophilus. Our study establishes a technical basis for future metabolomics research of fermented feed.(AU)

PERFIL METABOLÔMICO DO PLASMA SEMINAL DE TOUROS GUZERÁ (Bos taurus indicus) COM DIFERENTES PARÂMETROS DE CONGELABILIDADE DO SÊMEN

O plasma seminal, além de ser um importante meio carreador dos espermatozoides ejaculados, relaciona-se com diversos metabólitos que exercem significativo papel em vários eventos biológicos e têm sido vinculados a possíveis biomarcadores, auxiliando a predizer o potencial reprodutivo de animais selecionados. Dessa forma, o presente estudo objetivou avaliar os metabólitos do plasma seminal de touros Bos taurus indicus da raça Guzerá e suas associações com a congelabilidade do sêmen. O sêmen de nove touros adultos foi colhido por eletroejaculação e, em seguida, foi realizado o exame andrológico e a criopreservação. Posteriormente, o sêmen foi descongelado e os parâmetros seminais foram avaliados pelo CASA. As amostras do plasma seminal dos touros foram preparadas e, porteriormente, analisadas com a utilização de cromatografia gasosa aliada à espectrometria de massas (CG-EM) e análises multivariadas e univariadas dos dados obtidos. Os metabólitos do plasma seminal e as suas respectivas vias foram identificados por bioinformática a partir dos programas Xcalibur e Cytoscape com o plug-in Metscape e da plataforma MetaboAnalyst. Sessenta e dois metabólitos foram identificados no plasma seminal dos touros. O 1,3-Dioxan-5-ol, ácido esteárico, miristato de colesterila, ácido 2-etilheptanoico e isobutilamina foram os metabólitos mais abundantes enquanto que o ácido heptadecanoico, pirrolidina, ácido não-adecanoico, 1-etil-1-nitrosoureia e o lactato de etila foram os metabólitos menos abundantes no plasma seminal. A análise estatística multivariada indicou uma separação distinta entre os touros de alta e baixa congelabilidade. Os metabólitos com maior pontuação de importância variável na projeção (VIP > 1,0) incluíram o ácido propanoico, ribose, glicina, ácido heptadecanoico e ácido undecanoico. Entre os compostos, o ácido propanoico (VIP = 3,5) e a ribose (VIP = 2,3) foram mais abundantes no grupo de alta congelabilidade (AC) do que no grupo de baixa congelabilidade (BC). A análise do teste t sugeriu que a concentração de ribose foi a única significativa (P = 0,014). Este metabólito pode influenciar na redução do estresse oxidativo, na reparação de danos ao DNA e na prevenção da apoptose celular, além de servir como possível fonte de energia para o organismo. Desse modo, a ribose pode ser considerada um potencial biomarcador de congelabilidade seminal em touros. Até onde sabemos, nosso estudo é o primeiro a conduzir uma avaliação dos metabólitos no plasma seminal de touros da raça Guzerá relacionados com diferentes fenótipos de congelabilidade. As descobertas deste estudo servirão de auxílio para o desenvolvimento de novas pesquisas e de uma melhor compreensão sobre os mecanismos de criopreservação espermática.

Seminal plasma, in addition to being an important carrier medium for ejaculated sperm, is connected to several metabolites that play a significant role in many biological events and have been linked to possible biomarkers, helping to predict the reproductive potential of selected animals. The present study aimed to evaluate the seminal plasma metabolites of Bos taurus indicus bulls of the Guzerá breed and their associations with semen freezability. Semen from nine adult bulls was collected by electroejaculation, followed by andrological examination and cryopreservation. Afterwards, the semen was thawed and the seminal parameters were evaluated by CASA. Seminal plasma samples from bulls were prepared and then analyzed using gas chromatography combined with mass spectrometry (GC-MS) and multivariate and univariate analyzes. The seminal plasma metabolites and their respective pathways were identified by bioinformatics from Xcalibur and Cytoscape programs and the MetaboAnalyst platform. Sixty-two metabolites were identified in the seminal plasma of the bulls. 1,3-Dioxan-5-ol, stearic acid, cholesteryl myristate, 2-ethylheptanoic acid and isobutylamine were the most abundant metabolites, while heptadecanoic acid, pyrrolidine, nonadecanoic acid, 1-ethyl-1-nitrosourea and ethyl lactate were the least abundant metabolites in the seminal plasma. The multivariate statistical analysis indicated a distinct separation between high and low freezability bulls. The metabolites with the highest score of variable importance in the projection (VIP> 1.0) included propanoic acid, ribose, glycine, heptadecanoic acid and undecanoic acid. Among the compounds, propanoic acid (VIP = 3.5) and ribose (VIP = 2.3) were more abundant in the high freezability group (HF) than in the low freezability group (LF). The t-test analysis suggested that only the concentration of ribose was significant (P = 0.014). This metabolite can influence the reduction of oxidative stress, the repair of DNA damage and the prevention of cellular apoptosis, in addition to serving as a possible source of energy for the body. Thus, ribose can be considered a biomarker of seminal freezability in bulls. As far as it is known, this is the first study to conduct an evaluation of the metabolites in the seminal plasma of Guzerá bulls related to different freezability phenotypes. The findings of this study will serve to assist the development of new research and a better understanding of the mechanisms of sperm cryopreservation.

AVALIAÇÃO DE NOVOS HÍBRIDOS DE MILHO PARA A PRODUÇÃO DE SILAGEM

Objetivou-se avaliar a composição bromatológica, digestibilidade e produção de metano in vitro, os parâmetros fermentativos, o tamanho de partícula e processamento de grãos de silagens de oito híbridos de milho: RK3115, K9105 VIP3, K9960 VIP3, K9822 VIP3, R9080 CONV, R9080 PRO2, RB9789 VIP3 e RB9060 CONV. O híbrido R9080 CONV foi superior à RB9789 VIP 3 para teor de matéria seca (407,7 e 322,7 g kg-1). O teor de carboidratos totais e carboidratos não fibrosos variou entre 84,03-87,16 e 37,43- 48,79 g kg-1 MS, respectivamente. Dentre os parâmetros fermentativos, apenas o nitrogênio amoniacal em proporção do nitrogênio total variou (5,95 a 10,32). Houve variabilidade na distribuição de partículas entre os híbridos. Maior variação foi observada na peneira de 4 a 8 mm (42,2 a 61,9%). Os grãos foram processados eficientemente para todos os híbridos (superiores a 90%). Na avaliação de produção de gases, houve diferença entre os híbridos para volume total de gás produzido, com menores valores observados para R9080 CONV, K9105 VIP3 e K9960 VIP3 (39,0, 40,7 e 42,3 mL g-1 MS, respectivamente). O híbrido R9080 CONV apresentou menores valores de produção de metano por grama de matéria seca incubada e produção de metano por grama de matéria seca degradada (2,8 e 4,8 mL, respectivamente) quando comparado com K9822 VIP3, R9080 PRO2 e RB9060 CONV; com médias para produção de metano por grama de matéria seca incubada de 4,8, 4,7 e 4,6 mL, e para produção de metano por grama de matéria seca degradada, as médias foram 8,4, 8,0 e 8,1, respectivamente. Os híbridos apresentam semelhanças em termos de composição química, digestibilidade in vitro da matéria seca e parâmetros fermentativos. Maiores diferenças foram observadas para o tamanho de partícula, com destaque para os híbridos K9960 VIP3 e RB9789 VIP3, que apresentaram melhor distribuição entre as peneiras.

The objective of this research was to evaluate chemical composition, digestibility and in vitro methane production, fermentation parameters, size of particle and processing of silage grains of eight maize hibrids: RK3115, K9105 VIP3, K9960 VIP3, K9822 VIP3, R9080 CONV, R9080 PRO2, RB9789 VIP3 and RB9060 CONV. The hibrid R9080 CONV was higher than RB9789 VIP 3 for dry matter content (407,7 and 322,7 g kg-1). The content of total carbohydrates and non-fiber carbohydrates varied between 84,03- 87,16 and 37,43-48,79 g kg-1 MS, respectively. Among the fermentation parameters, only ammonia nitrogen in proportion to total nitrogen varied (5.95 to 10.32). There was variability in the distribution of particles among the hybrids. Greater variation was observed in the sieve 4 to 8 mm (42.2 to 61.9%). Grains were processed efficiently for all hybrids (higher than 90%). In the evaluation of gas production, there was a difference between the hybrids for the total volume of gas produced, with lower values observed for R9080 CONV, K9105 VIP3 and K9960 VIP3 (39.0, 40.7 and 42.3 mL g-1 MS, respectively). The hybrid R9080 CONV had lower values of methane production per gram of incubated dry matter and methane production per gram of degraded dry matter (2.8 and 4.8 mL, respectively), when compared to K9822 VIP3, R9080 PRO2 and RB9060 CONV; for methane production per gram of incubated dry matter with the averages 4,8, 4,7 and 4,6 mL, and for methane production per gram of degraded dry matter, the averages were 8,4, 8,0 and 8,1, respectively. The hybrids show similarities in terms of chemical composition, in vitro digestibility of dry matter and fermentation parameters. Greater differences were observed for the particle size, with emphasis on the hybrids K9960 VIP3 and RB9789 VIP3, which had better distribution between the sieves.

PROTEÔMICA DO FLUIDO FOLICULAR OVARIANO DE OVELHAS

A interação que existe do líquido folicular com oócito serve para manter o mesmo e contribuir com o desenvolvimento oocitário. O objetivo deste estudo foi descrever o perfil de proteínas do líquido folicular ovariano de ovelhas em duas categorias de desenvolvimento dos folículos. Os ovários foram colhidos de um abatedouro e transportados até o laboratório. No laboratório, os ovários foram lavados com solução 0,9% NaCl, os folículos foram mensurados e classificados em duas categorias, folículos pequenos com diâmetro de < 4 mm e médios de 4 a 6 mm. O líquido folicular foi colhido por aspiração centrifugados a 800g por 10 minutos para retirada dos debris celulares e recentrifugados a 10.000g, durante 30 minutos a 4º C. A depleção de albumina foi conduzida e a concentração de proteínas totais foi mensurada pelo método de Bradford. Uma alíquota contendo 50 µg de proteína foi preparada para eletroforese unidimensional SDS-PAGE. A corrida foi interrompida quando as amostras atingiram o gel de separação e a digestão tríptica in gel foi realizada. Então, as amostras foram submetidas a espectrometria de massa com abordagem shotgun ESI-Q-TOF MS/MS. Os resultados foram submetidos à análise multivariada, por análise de componente principal (PCA), análise discriminante por mínimos quadrados parciais (PLS-DA) indicada pela pontuação VIP (projeção de importância variável VIP score), dendrograma e ontologia gênica (função molecular, processo biológico e componente celular). Foi encontrado um total de 55 proteínas nos dois grupos, sendo 02 apenas no grupo < 4 mm e 13 no grupo 4 a 6 mm. A PCA identificou 2 grupos distintos, sendo a somatória de PC1 e PC2 > 50%. No VIP score foram encontradas 12 proteínas com 1,5, sendo 2 mais abundantes no folículos com diâmetro < 4 mm e 10 nos folículos entre 4 a 6 mm. Concluindo-se que as proteínas descritas estão ligadas diretamente com o funcionamento do metabolismo folicular e desenvolvimento dos oócitos, participando do processo de ovulação e qualidade dos oócitos.

The interaction that exists between the follicular fluid and the oocyte serves to maintain it and contribute to oocyte development. The objective of this study was to describe the protein profile of the ovarian follicular fluid of sheep in two categories of follicle development. The ovaries were harvested from a slaughterhouse and transported to the laboratory. In the laboratory, the ovaries were washed with 0.9% NaCl solution, the follicles were measured and classified into two categories, small follicles with a diameter of < 4 mm and medium from 4 to -6 mm. The follicular fluid was collected by centrifuged aspiration at 800g for 10 minutes to remove the cellular debris and refocused at 10,000g for 30 minutes at 4ºC. Albumin depletion was conducted and the total protein concentration was measured by the Bradford method. An aliquot containing 50 µg of protein was prepared for SDS-PAGE unidimensional electrophoresis. The run was stopped when the samples reached the separation gel and tryptic digestion in gel was performed. Then, the samples were submitted to mass spectrometry with shotgun approach ESI-Q-TOF MS/MS. The results were submitted to multivariate analysis, by principal component analysis (PCA), discriminant analysis by partial least squares (PLS-DA) indicated by VIP score (projection of variable importance - VIP score), dendrogram and gene ontology (molecular function, biological process and cellular component). A total of 55 proteins were found in both groups, 02 only in the group < 4 mm and 13 in the group 4 to 6 mm. The PCA identified 2 distinct groups, being the sum of PC1 and PC2 > 50%. In the VIP score were found 12 proteins with 1.5, being 2 more abundant in follicles with diameter < 4 mm and 10 in follicles between 4 and 6 mm. It was concluded that the proteins are directly linked to the functioning of the follicular metabolism and development of the oocytes, participating in the ovulation process and oocyte quality.

Características agronômicas e nutricionais de híbridos de milho (Zea mays L.) colhidos em seis estágios de maturidade: Produção e qualidade da silagem e desempenho animal

O objetivo desse trabalho foi avaliar a produção e a composição morfológica de três híbridos de milho (Zea mays, L.) para produção de silagem, em seis estágios de maturidade. Foram avaliados a produção de biomassa fresca, seca e de grãos, os teores de matéria seca da planta e dos componentes estruturais dos híbridos de milho Maximus VIP3, Defender VIP e Feroz VIP. As plantas de milho foram avaliadas sucessivamente nas fases reprodutivas de formação do grão, R1; grão leitoso, R2; grão pastoso, R3; grão farináceo, R4; grão duro, R5; e grão maduro, R6. O experimento foi conduzido segundo delineamento de blocos inteiramente casualizados com quatro repetições e três tratamentos. A média de altura de planta observado no momento da colheita (2,33; 2,45 e 2,40 m; respectivamente) classifica todos os materiais como híbridos de porte médio. Foi observado correlação positiva, variando de 0,86 para o híbrido Feroz VIP a 0,88 para o híbrido Maximus VIP3, entre a altura de planta e altura de inserção da espiga, porém, essas duas varáveis não tiveram correlação com os dados de produtividade. Houve diferença significativa para produção de biomassa fresca nos estágios R1, R2 e R5, tendo o Maximus VIP3 obtido as maiores produtividades. A proporção de grãos na composição morfológica da planta variou entre os híbridos, sendo que o Maximus VIP3 e o Defender VIP (48,22% e 46,17%) foram superiores ao Feroz VIP (42,97%). Com o avanço da maturidade notou-se comportamento linear decrescente para participação de colmo e folha, com redução de 0,38% e 0,45% (R2 = 0,79 e 0,81; respectivamente) ao dia, quadrático para brácteas e sabugo, e linear crescente para participação de grãos na estrutura da planta, com aumento de 0,77% ao dia (R2= 0,88). De forma geral, os três híbridos apresentam boas características para produção de silagem e permitem a colheita em estágio de grão duro, possibilitando acréscimo de grãos em relação ao estágio de grão farináceo. Palavras-chave: composição morfológica de planta, estágio fenológico, produção de matéria verde, silagem de milho.

Studying maize hybrids available for tillage and silage production is essential to understand how we should act to be more assertive in recommendations. This also leads to reflect on where new researches must anchor in order to develop new cultivars that fill our real needs. It is assumed that the greater the grain production of a given hybrid, the better the nutritional value of the resulting silage, ignoring the importance of the other fractions. So, there are those who believe that if we postpone the harvesting time, soon we will have more grains in the plant and the food will be better again. Like others, this study shows us that each hybrid behaves differently according to the maturation progress, and therefore, to make decisions about harvest time based only on maturation stage, dry matter content of the plant, or even worse, based on the deposition of the starch on the grain, without knowing the peculiarities of each hybrid, can cause several mistakes. The overall results show that the agronomic characteristics and the nutritional value of the plant suffer greater interference from the harvest stage than hybrid, but at specific points the latter can present such significant differences between them that justify the need to know each detail of all those existing on the market. As an example, when we opted for a common moment to harvest the studied hybrids and make whole-plant silage for supply to feedlot steers, we observed that the performance of these animals was affected by the hybrid used, and even their ingestive behavior suffered interference as a result of the chemical peculiarities of each silage. We note that these small differences between each hybrid have the potential to affect from the post-opening of the silo to the resulting products from rumen fermentation.

IMUNOLOCALIZAÇÃO DA OSTEOPONTINA E ASSINATURAS PROTEÔMICAS DO TRATO REPRODUTOR DE CÃES

Os estudos com a tecnologia ômica auxiliam a investigar o papel da sinalização proteica na maturação espermática, capacitação e fertilização. Apesar da importância de estudos sobre moléculas envolvidas na fertilidade, até o momento, na espécie canina, a proteômica do tecido reprodutor não foi descrita. Dessa forma, o objetivo desse estudo e a imunolocalização da osteopontina em testículo, cabeça, corpo e cauda do epidídimo (Artigo I) e descrever o proteoma destes tecidos (Artigo II). A escolha desta proteína foi devida a importância relacionada a fertilidade já demonstrada em outras espécies. Para realização do artigo I, foram colhidos de 3 cães adultos jovens entre 2 a 5 anos, testículos e epidídimos (cabeça, corpo e cauda), sem raça definida, após a orquiectomia eletiva, totalizando 24 amostras. Para realização do artigo II, testículos e epidídimos (cabeça, corpo e cauda) foram colhidos de 3 cães, adultos jovens entre 2 a 5 anos, amostras armazenadas em formalina tamponada durante 48 horas e transferidas para álcool 70%, as amostras passaram por desidratação e reidratação. Foi utilizado anticorpo anti-OPN, as amostras foram coradas com DAB. Todos os tecidos foram marcados com anticorpo, em células próximas a parte luminal do epidídimo e citoplasma, sem diferença significativa (P>0,05). As amostras foram marcadas em célula próximas a parte luminal do epidídimo e citoplasma. Apesar da imunomarcação da OPN no citoplasma das células, em todos os tecidos, esta proteína não foi identificada na abordagem shotgun. Também não houve diferença na imunomarcação da OPN entre os tecidos. No artigo II, foram encontradas 1.918 proteínas, sendo 132 utilizadas na análise multivariada, a qual incluiu a principal component analysis (PCA), variable importance in projection (VIP score) determinada pela partial least squares-discriminant analysis (PLS-DA), ANOVA, dendrograma e diagrama de Venn. Na PCA foram formados 4 clusters distintos, com proximidade dos clusters das amostras da cabeça e corpo do epidídimo. O VIP score indicou 20 proteínas ( > 1,5) e 18 foram confirmadas pelo ANOVA como mais relevantes nos clusters. Seis proteínas foram mais abundantes no corpo, 4 na cabeça do epidídimo e 10 no testículo. As proteínas inositol-3-phosphate synthase 1, equilibrative nucleoside transporter 1, tubulin alpha chain, heat shock protein 90 alpha family class A member 1, heat shock protein family A member 8, heat shock protein family A (HSP70) member 2 e cytochrome P450 family 17 subfamily A member 1, tyrosine 3-monooxygenase/tryptophan 5-monooxygenase activation protein zeta foram mais abundantes no testículo e reduziram gradativamente em direção a cauda do epidídimo. Concluímos que a abundância das proteínas nos tecidos do trato reprodutor está relacionada com a função dos compartimentos de cada compartimento, como o testículo, cabeça, corpo e cauda do epidídimo de cão pode possuir alguma proteína similiar a OPN que se ligue ao anticorpo, porém é necessários maiores investigações.

Studies with omic technology help to investigate the role of protein signaling in sperm maturation, capacitation and fertilization. Thus, the objective of this study is the immunolocation of osteopontin in the testis, head, body and cauda of the epididymis (Article I) and to describe the proteome of these tissues (Article II). The choice of this protein was due to the importance related to fertility already demonstrated in other species. Article I, 3 young adult dogs aged 2 to 5 years, testicles and epididymis (caput, corpus and cauda), of mixed breed, were collected after elective orchiectomy, totaling 24 samples. For the realization of article II, testicles and epididymis (caput, corpus and tail) were collected from 3 dogs, young adults aged 2 to 5 years, samples stored in buffered formalin for 48 hours and transferred to 70% alcohol, the samples were dehydrated and rehydration. Anti-OPN antibody was used, the samples were stained with DAB. All tissues were labeled with antibody in cells close to the luminal part of the epididymis and cytoplasm, with no significant difference (P> 0.05). Despite the immunostaining of OPN in the cytoplasm of cells, in all tissues, this protein was not identified in the shotgun approach. There was also no difference in the immunostaining of OPN between tissues. In article II, 1,918 proteins were found, 132 of which were used in multivariate analysis, which included the main component analysis (PCA), variable importance in projection (VIP score) determined by the partial least squares-discriminant analysis (PLS-DA), ANOVA , dendrogram and Venn diagram. In the PCA, 4 distinct clusters were formed, with proximity to the clusters of the head and body samples of the epididymis. The VIP score indicated 20 proteins (> 1.5) and 18 were confirmed by ANOVA as the most relevant in the clusters. Six proteins were more abundant in the body, 4 in the epididymis head and 10 in the testis. Inositol-3-phosphate synthase 1, equilibrative nucleoside transporter 1, tubulin alpha chain, heat shock protein 90 alpha family class A member 1, heat shock protein family A member 8, heat shock protein family A (HSP70) member 2 and cytochrome P450 family 17 subfamily A member 1, tyrosine 3-monooxygenase / tryptophan 5-monooxygenase activation protein zeta were more abundant in the testis and gradually reduced towards the tail of the epididymis. We conclude that the abundance of proteins in the tissues of the reproductive tract is related to the function of the compartments of each compartment, as the testis, caput, corpus and cauda of the dog epididymis may have some protein similar to OPN that binds to the antibody, however it is urther investigation is needed.

PROTEÔMICA DO FLUÍDO FOLICULAR DE BÚFALAS

O objetivo do presente estudo foi identificar, quantificar e descrever o perfil proteico do liquido folicular e morfometria dos foliculos, de ovários de búfalas mestiças das raças Mediterrânea e Murrah.O fluido folicular (FF) é um meio essencial para o crescimento e a maturação das células ovarianas. A análise dos seus componentes é fundamental para o entendimento da dinâmica folicular da espécie bubalina. O objetivo deste estudo foi traçar o perfil proteico do FF. Foram utilizados 112 ovários provenientes de um abatedouro, a extração do FF foi realizada manualmente com o uso de seringas e agulhas por meio de punção aspirativa nos folículos visíveis macroscopicamente, os folículos aspirados foram separados em seis grupos, < 5 mm com corpo lúteo (CL); < 5 sem CL; 5 8 com CL; 5 8 sem CL; > 8 com CL; > 8 sem CL. A concentração de proteína total foi determinada pelo método de Bradford. Baseado na concentração de proteina total uma alíquota contendo 50 µg foi aplicada em gel de poliacrilamida 12%, a corrida foi interrompida quando as amostras atingiram o gel de separação, a seguir foi realizada a disgestão em gel para a análise da espectrometria de massa em Nano-LC-ESI-Q-TOF mass spectrometry. A analise estatística foi realizada utilizando o programa MetaboAnalyst 4.0 e de acordo com os dados obtidos podemos observar no dendrograma e na analise de componente principal (PCA), no Vip Scores e no Heat Map que a concetração de proteínas foi constante em todos os grupos independente do tamanho dos folículos. As proteínas mais relevantes foram, Mucin-19, Haptoglobin, Histone H2A type 1, Histone H2B, Lysosomal alpha-glucosidase, Glutathione S-transferase A1, e a Serine protease inhibitor clade E member 2. Podemos relacionar estas proteínas que estão em abundancia no liquido folicular como sendo promotoras do desenvolvimento folicular, e do processo de maturação oocitária.

The objective of the present study was to identify, quantify and describe the protein profile of the follicular fluid and morphometry of the follicles, of mixed-race buffalo ovaries of the Mediterranean and Murrah breeds. The follicular fluid (FF) is an essential medium for the growth and maturation of the ovarian cells. The analysis of its components is fundamental for understanding the follicular dynamics of the buffalo species. The aim of this study was to trace the protein profile of FF. 112 ovaries from a slaughterhouse were used, FF extraction was performed manually using syringes and needles through aspiration puncture in the macroscopically visible follicles, the aspirated follicles were separated into six groups, <5 mm with corpus luteum (CL ); <5 without CL; 5 - 8 with CL; 5 - 8 without CL; > 8 with CL; > 8 without CL. The total protein concentration was determined by the Bradford method. Based on the total protein concentration, an aliquot containing 50 µg was applied on 12% polyacrylamide gel, the run was interrupted when the samples reached the separation gel, then the gel was analyzed for analysis of the Nano mass spectrometry. -LC-ESI-Q-TOF mass spectrometry. The statistical analysis was performed using the MetaboAnalyst 4.0 program and according to the data obtained, we can see in the dendrogram and in the main component analysis (PCA), in the Vip Scores and in the Heat Map that the concentration of proteins was constant in all groups regardless the size of the follicles. The most relevant proteins were, Mucin-19, Haptoglobin, Histone H2A type 1, Histone H2B, Lysosomal alpha-glucosidase, Glutathione S-transferase A1, e a Serine protease inhibitor clade E member 2. We can relate these proteins that are in abundance in the follicular fluid as being promoters of follicular development, and the oocyte maturation process.

Steady-state levels of vasoactive intestinal peptide (VIP) mRNA in goat ovaries and the effect of VIP on the in vitro development of isolated preantral follicles

The aims of this study were to verify the steady-state level of vasoactive intestinal peptide (VIP) mRNA in goat follicles at various developmental stages and to investigate the influence of VIP on the survival, antrum formation and growth of secondary follicles cultured for 6 days. Primordial, primary and secondary goat follicles and small and large antral follicles were obtained to quantify VIP mRNA by real-time reverse transcription with the polymerase chain reaction. The influence of VIP and the presence or absence of follicle-stimulating hormone (FSH) on the development of secondary follicles and on mRNA expression for VIP and FSH receptor (FSHR) were determined after 6 days of culture. Survival, antrum formation and follicular diameter were evaluated every other day of culture. The levels of VIP mRNA in primary and secondary follicles were significantly higher than in primordial follicles. Cumulus–oocyte complexes (COCs) from both small and large antral follicles had significantly higher levels ofVIP mRNA than their respective granulosa/theca cells. During culture, the addition of VIP and/or FSH had o effect on follicular development. However, the presence of FSH and/or VIP in the culture medium significantly reduced VIP mRNA levels, but did not alter FSHR mRNA levels. In conclusion, VIP mRNA was detected in all goat follicular categories and cellular types, VIP and/or FSH did not affect the development of secondary follicles and reduce the expression of VIP mRNA levels.(AU)

Steady-state levels of vasoactive intestinal peptide (VIP) mRNA in goat ovaries and the effect of VIP on the in vitro development of isolated preantral follicles

The aims of this study were to verify the steady-state level of vasoactive intestinal peptide (VIP) mRNA in goat follicles at various developmental stages and to investigate the influence of VIP on the survival, antrum formation and growth of secondary follicles cultured for 6 days. Primordial, primary and secondary goat follicles and small and large antral follicles were obtained to quantify VIP mRNA by real-time reverse transcription with the polymerase chain reaction. The influence of VIP and the presence or absence of follicle-stimulating hormone (FSH) on the development of secondary follicles and on mRNA expression for VIP and FSH receptor (FSHR) were determined after 6 days of culture. Survival, antrum formation and follicular diameter were evaluated every other day of culture. The levels of VIP mRNA in primary and secondary follicles were significantly higher than in primordial follicles. Cumulus–oocyte complexes (COCs) from both small and large antral follicles had significantly higher levels ofVIP mRNA than their respective granulosa/theca cells. During culture, the addition of VIP and/or FSH had o effect on follicular development. However, the presence of FSH and/or VIP in the culture medium significantly reduced VIP mRNA levels, but did not alter FSHR mRNA levels. In conclusion, VIP mRNA was detected in all goat follicular categories and cellular types, VIP and/or FSH did not affect the development of secondary follicles and reduce the expression of VIP mRNA levels.