Optimized biotransformation of acid-treated water melon peel hydrolyzate into ethanol / Biotransformação otimizada de hidrolisado de casca de melancia tratada com ácido em etanol

Abstract Today, global focus of research is to explore the solution of energy crisis and environmental pollution. Like other agricultural countries, bulk quantities of watermelon peels (WMP) are disposed-off in environment as waste in Pakistan and appropriate management of this waste is the need of hour to save environment from pollution. The work emphasizes the role of ethanologenic yeasts to utilize significant sugars present in WMP for low-cost bioethanol fermentation. Dilute hydrochloric acid hydrolysis of WMP was carried out on optimized conditions employing RSM (response surface methodology) following central composite design (CCD). This experimental design is based on optimization of ethanologenesis involving some key independent parameters such as WMP hydrolysate and synthetic media ratio (X1), incubation temperature (X2) and incubation temperature (X3) for maximal ethanol yield exploiting standard (Saccharomyces cerevisiae K7) as well as experimental (Metchnikowia cibodasensisY34) yeasts. The results revealed that maximal ethanol yields obtained from S. cerevisiae K7 was 0.36±0.02 g/g of reducing sugars whereas M. cibodasensisY34, yielded 0.40±0.01 g ethanol/g of reducing sugars. The yeast isolate M. cibodasensisY34 appeared as promising ethanologen and embodies prospective potential for fermentative valorization of WMP-to-bioethanol.

Resumo Hoje, o foco global da pesquisa é explorar a solução da crise energética e da poluição ambiental. Como em outros países agrícolas, grandes quantidades de cascas de melancia (WMP) são descartadas como resíduos no meio ambiente no Paquistão, mas a gestão adequada desses resíduos é a mais recente solução para salvar o meio ambiente da poluição. O trabalho enfatiza o papel das leveduras etanologênicas para utilizar açúcares significativos presentes no WMP para fermentação de bioetanol de baixo custo. A hidrólise de ácido clorídrico diluído de WMP foi realizada em condições otimizadas empregando RSM (metodologia de superfície de resposta) e seguindo o projeto de composto central (CCD). Este projeto experimental é baseado na otimização da etanologenesis envolvendo alguns parâmetros independentes importantes, como hidrolisado de WMP e razão de meio sintético (X1), temperatura de incubação (X2) e temperatura de incubação (X3) para rendimento máximo de etanol explorando o padrão (Saccharomyces cerevisiae K7) também como leveduras experimentais (Metchnikowia cibodasensis Y34). Os resultados revelaram que os rendimentos máximos de etanol obtidos a partir de S. cerevisiae K7 foi de 0,36 ± 0,02 g / g de açúcares redutores, enquanto M. cibodasensis Y34 rendeu 0,40 ± 0,01 g de etanol / g de açúcares redutores. O isolado de levedura M. cibodasensis Y34 apareceu como um etanologeno promissor e incorpora um potencial prospectivo para a valorização fermentativa de WMP em bioetanol.

Impact of yeast on the characteristics of Sauvignon Blanc wines from the Campanha Gaúcha Region / Impacto de leveduras nas características de vinhos Sauvignon Blanc da Região da Campanha Gaúcha

The objective of this work was to evaluate the effect of different commercial strains of Saccharomyces cerevisiae on the characteristics of Sauvignon Blanc wines produced in the Campanha Gaúcha region. The must obtained by mechanical destemming and crushing was treated with 150 mg L of potassium metabisulfite and pectolitic enzymes and subject to enzymatic hidrolisis and débourbage for 24h00 at 4°C. The must was divided into glass fermenters of 4,6 L, in triplicate for each of the four treatments, which were defined by the inoculation of 25g hL-1 of dry yeast: T1 - Zymaflore X5® (Laffort, Bordeaux, France); T2 - AWRI 796 (AB Biotek, Sydney, Australia); T3 - Maurivim PDM (AB Biotek, Sydney, Australia); T4 - 50% Zymaflore X5® + 50% AWRI 796. The wines were analyzed, regarding: ethanol; reducing sugars; total acidity; volatile acidity; pH; dry matter; and ash. The most significant differences were observed in: ethanol; reducing sugars; pH; dry matter. Among the treatments inoculated with single strains, T1 showed higher ethanol and lower reducing sugars content. T3 presented results similar to T1. T2 resulted in higher content of reducing sugars and consequently lower ethanol levels. The mixed fermentation (T4) achieved the lowest levels of reducing sugars among the treatments. It suggests that mixed fermentations could be an alternative to produce drier wines.(AU)

O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito de leveduras Saccharomyces cerevisiae comerciais nas características de vinhos Sauvignon Blanc, da região da Campanha Gaúcha, Brasil. Após desengace e esmagamento das uvas, o mosto foi sulfitado (150 mg L de metabissulfito de potássio), submetido a 24h00 de débourbage. Após, o mosto foi dividido em garrafões de vidro de 4,6 L, para realização da fermentação alcoólica, em triplicata. Os tratamentos constituíram-se pela inoculação de 25 g hL-1leveduras desidratadas: T1 - Zymaflore X5® (Laffort, Bordeaux, França); T2 - AWRI 796® (AB Biotek, Sydney, Austrália); T3 - Maurivin PDM® (AB Biotek, Sydney, Austrália), T4 - 50% Zymaflore X5® + 50% de AWRI 796®. As variáveis analisadas nos vinhos foram: etanol; açúcares redutores; acidez total; acidez volátil; pH; extrato seco; cinzas. As diferenças mais significativas foram observadas para: etanol; açúcares redutores; pH; extrato seco. Dentre os tratamentos com inoculação de cepas únicas, T1 apresentou maior graduação alcoólica e baixo teor de açúcares redutores. T3 apresentou resultados semelhantes a T1. T2 apresentou menor graduação alcoólica e maior teor de açúcares redutores. T4 apresentou os níveis mais baixos de açúcares redutores dentre os tratamentos. Isso sugere que a inoculação de mais de uma cepa pode ser uma alternativa para produzir vinhos mais secos.(AU)

Comparison of the alcohol content obtained in the fermentation of dwarf cavendish bananaand its peel for the purposes of brandy production / Comparação do teor alcóolico obtido na fermentação de banana nanica e de sua casca para fins de produção de aguardente

Brandy is one of the most consumed alcoholic beverages in Brazil, being produced with sweet vegetables, cereals, sugar cane and fruits that have fermentable sugars. This drink is confused with cachaça, from which it is distinguished by the alcoholic degree and typically Brazilian productivity. Banana stands out in Brazil and in the world as the second fruit in productivity, behind only orange, being an accessible raw material for the production of brandy. This processing is advantageous due to the rapid ripening of this fruit, which can often make it impossible to fresh to the consumer. This study aimed to carry out the fermentation through the inoculation of the yeast Saccharomyces cerevisiaeseparately for pulp and skins of Dwarf Cavendish bananas to verify the alcohol content produced. The banana pulp brandy reached an alcohol content of 39,5° GL, within the stipulated by the current legislation, the peel, however, did not allow adequate alcohol levels (7,5° GL). It is concluded that the pulp of Dwarf Cavendish banana is viable for the production of brandy.(AU)

A aguardente é uma das bebidasalcoólicasmais consumidasno Brasil, sendo produzida comvegetais doces, cereais, cana-de-açúcar e frutas que possuemaçúcares fermentescíveis. Esta bebida é confundida com a cachaça, da qual é diferenciadapelo grau alcoólicoe produtividade tipicamente brasileira. Abanana possui destaque no Brasil e no mundo como a segunda fruta em produtividade,atrás apenas da laranja, sendo uma matéria-prima acessível para a produção de aguardenteem razão do processo de amadurecimento rápido,o que acaba muitas vezes por inviabilizar a venda in naturapara o consumidor. Este estudo objetivou realizar a fermentação através da inoculação da levedura Saccharomyces cerevisiaeseparadamente para mostosdapolpa e cascas de bananas nanicapara verificar o teor alcóolico produzido. A aguardente de polpa de bananaatingiu teor alcoólicode 39,5° GL, dentro do estipulado pela legislação vigente, a casca, contudo, não permitiuníveis alcóolicos adequados(7,5°GL). Conclui-se que a polpa da banana nanica é viável para a produção de aguardente.(AU)

Autolyzed Saccharomyces cerevisae reduce microbiological carcass contamination in feedlot steers / Suplementação com Saccharomyces cerevisaeautolisada reduz contaminação microbiológica da carcaça de novilhos terminados em confinamento

The present work aims to verify whether the autolyzed Saccharomyces cerevisiae reduces total coliforms, Escherichia coli and Salmonella spp. from the hide, feces and carcass of feedlot-finished steers. Eighteen half-Angus steers were subjected to three treatments daily for 105 days: control (n=6), Lev 4 g (diet with 4 g yeast animal day-1, n=6) or Lev 7 g (diet with 7 g yeast animal day-1, n=6). On Days 29 and 90 after entrance into the feedlot, fecal samples, skin swabs, water and food were collected to identify and count E. coli and total coliforms and identify Salmonella spp. On the day of slaughter, carcasses were collected to identify and quantify E. coli, total coliforms, and mesophiles. There were reductions in E. coli and total coliforms in fecal samples (P=0.0001 and 0.001, respectively) and mesophilic aerobics in carcasses (P= 0.05) in the treated groups, and no Salmonella spp. was observed in any of the samples collected. It was concluded that supplementation reduced fecal excretion of and, consequently, carcass contamination by E. coli, mesophiles and total coliforms in confined animals and that this technique is a beneficial and residue-free sanitary measure to improve the microbiological quality of meat.

Este trabalho objetivou verificar se o prebiótico a base de parede celular de Saccharomyces cerevisiae reduz coliformes totais, Escherichia coli e Salmonella spp da pele, fezes e da carcaça de bovinos terminados em confinamento. Para tanto, 18 novilhos, ½ sangue Angus foram submetidos a três tratamentos diários durante 105 dias: controle (n=6), Lev 4g (dieta com 4 g de levedura por animal dia-1, n=6) ou Lev 7g ( dieta com 7 g de levedura por animal dia-1, n=6). Nos dias 29 e 90 após a entrada no confinamento, coletou-se amostras de fezes, swab de pele, água e alimento para contagem de Escherichia coli e coliformes totais e isolamento de Salmonella spp. No dia do abate, realizou-se coleta nas carcaças para identificação de Salmonella spp e quantificação de Escherichia coli, coliformes totais, mesófilos. Notou-se redução de Escherichia coli e coliformes totais nas amostras de fezes (P=0,0001 e 0,001 respectivamente) e de Escherichia coli, coliformes totais e aeróbios mesófilos na carcaça (P=0,06; 0,10 e 0,05 respectivamente) nos grupos tratados. Houve ausência de Salmonella spp. em todas as coletas realizadas. Concluiu-se que a suplementação reduziu a excreção fecal e consequentemente, a contaminação da carcaça pela Escherichia coli, mesófilos e coliformes totais dos animais confinados, sendo uma medida sanitária benéfica e livre de resíduos para melhorar a qualidade microbiológica da carne.

Effects of Saccharomyces Cerevisiae Supplemented Diet on Production Performance, Egg Quality and Humoral Immunity in Black Australorp and Fayoumi Layers

The present study intended to identify the effects of the Saccharomyces cerevisiae yeast on production performance and parameters related to the quality of layers' eggs. Effects of yeast on immune titers after routine vaccinations against Newcastle disease and infectious bronchitis were also studied. Fayoumi chicken (n=288) were divided in four groups (72 in each), and Black Australorp (n=288) in four groups (72 in each). Both had 12 weeks of age and were kept in 08 groups (3 replicates per treatment). Hens were fed a controlled diet along with the addition of 0.5g, 1.0 g, and 1.5 g of S. cerevisiae per kg of feed, till 25 weeks of age. Feed intake and egg production were measured on a daily basis, while body weight gain and egg weight were measured weekly. Egg quality parameters were evaluated by picking 5 eggs from every group weekly. Birds were vaccinated for Newcastle disease (ND) and infectious bronchitis (IB) at the 18th week. Subsequently, 10 days after vaccination, antibody titers were determined by Hemagglutination Inhibition and Enzyme Linked Immunosorbent Assay for both diseases. Results showed no significant effect of S. cerevisiae on layers' weight gain and feed intake. However, egg production was increased in the experimental group. Moreover, yeast supplementation impacted positively on birds' immune system. In conclusion, probiotic supplementation improved birds' egg production and immunity.(AU)

Testes bioquímicos para identificação de leveduras na medicina veterinária - revisão de literatura / Biochemical tests to yeast identification in veterinary medicine - literature review / Pruebas bioquímicas para identificación de levaduras en la medicina veterinaria - revisión de literatura

As leveduras são fungos de importância à medicina veterinária por causarem doenças infecciosas em diferentes hospedeiros animais. A presente revisão de literatura teve como objetivo relatar os principais testes bioquímicos capazes de auxiliar na identificação de fungos leveduriformes de interesse veterinário e zoonótico. Para o levantamento bibliográfico, foram consideradas 48 publicações científicas selecionadas na área e indexadas nas principais bases de dados, entre os anos de 1988 e 2020. Como resultados, observou-se que oito provas são as mais empregadas na rotina micológica. Devido à baixa variabilidade morfológica das espécies leveduriformes, testes bioquímicos complementares são fundamentais na rotina laboratorial. A análise do perfil bioquímico de leveduras contribui na determinação taxonômica dos fungos a partir de reações químicas, visto que o metabolismo varia de acordo com a espécie, resultando em metabólitos distintos, os quais podem ser avaliados por diferentes provas. Conclui-se que a identificação fenotípica das leveduras é imprescindível no diagnóstico, prognóstico, tratamento e controle de doenças fúngicas e contribui para a manutenção da saúde animal.(AU)

Yeasts are fungi of importance to veterinary medicine because they cause infectious diseases in different animal hosts. This literature review aimed to report the main biochemical tests capable of assisting in the identification of yeast-like fungi of veterinary and zoonotic interest. For the bibliographical survey, 48 selected scientific publications in the area and indexed in the main databases, between the years 1988 and 2020, were considered. As a result, it was observed that eight tests are the most used in the mycological routine. Due to the low morphological variability of yeast species, complementary biochemical tests are fundamental in the laboratory routine. The analysis of the biochemical profile of yeast contributes to the taxonomic determination of fungi based on chemical reactions, since the metabolism varies according to the species, resulting in different metabolites, which can be evaluated by different tests. It is concluded that the phenotypic identification of yeasts is essential in the diagnosis, prognosis, treatment and control of fungal diseases and contributes to the maintenance of animal health.(AU)

Las levaduras son hongos de importancia para la medicina veterinaria porque causan enfermedades infecciosas en diferentes animales huéspedes. Esta revisión de la literatura tuvo como objetivo informar las principales pruebas bioquímicas capaces de ayudar en la identificación de hongos tipo levadura de interés veterinario y zoonótico. Para el levantamiento bibliográfico se consideraron 48 publicaciones científicas seleccionadas en el área e indexadas en las principales bases de datos, entre los años 1988 y 2020. Como resultado se observó que ocho pruebas son las más utilizadas en la rutina micológica. Debido a la baja variabilidad morfológica de las especies de levaduras, las pruebas bioquímicas complementarias son fundamentales en la rutina del laboratorio. El análisis del perfil bioquímico de la levadura contribuye a la determinación taxonómica de los hongos en base a reacciones químicas, ya que el metabolismo varía según la especie, dando como resultado diferentes metabolitos, los cuales pueden ser evaluados mediante diferentes pruebas. Se concluye que la identificación fenotípica de levaduras es fundamental en el diagnóstico, pronóstico, tratamiento y control de enfermedades fúngicas y contribuye al mantenimiento de la salud animal.(AU)

Effects of autolyzed yeast on leukocyte oxidative metabolism and pneumonia occurrence in feedlot steers / Efeito da levedura autolisada no metabolismo oxidativo leucocitário e na ocorrência de pneumonia em novilhos terminados em confinamento

Although yeast supplementation has shown an immunostimulant effect in feedlot cattle, the question remains whether it influences the occurrence of the bovine respiratory disease complex (BRD) in feedlot cattle. Therefore, our objective was to evaluate whether dietary supplementation with autolyzed yeast affects the efficiency of blood phagocytes, reducing inflammation and the occurrence of BRD in feedlot cattle. A randomized experimental trial was conducted with whole steers with half Angus blood for 106 days: control (n=10): diet without yeast; Y4 (n=12): yeast diet (4g per animal per day); and Y7 (n=7): yeast diet (7g per animal per day). On Days 0, 14, 42, 70, and 105, blood count, leukocyte oxidative metabolism, serum haptoglobin, frequency of nasal secretion and orbital temperature were evaluated. On slaughter day, a lung evaluation was performed. On Days 42 and 70 of feedlot finishing, the treated animals showed increased leukocyte oxidative metabolism (D42 P=0.04; D70 P=0.02) compared to the control group. These animals had a lower frequency of mucopurulent nasal secretion, lower orbital temperature and reduced pneumonia occurrence than the treated groups (P=0.05) with less lung lesion severity (P=0.01), allowing us to infer that the autolyzed yeast improves blood phagocytic function and decreases the inflammation and BRD of feedlot steers, especially at a dose of 4g.

Embora a suplementação com leveduras tenha demonstrado efeito imunoestimulante em bovinos, permanece-se a dúvida se ela influencia na ocorrência do complexo doença respiratória bovina (CDRB) em bovinos confinados. Portanto, objetivou-se avaliar se a suplementação dietética com levedura autolisada influencia a eficiência de fagócitos sanguíneos, reduzindo inflamações e a ocorrência de CDRB em bovinos confinados. Realizou-se um ensaio experimental randomizado com 36 novilhos inteiros 1/2 sangue Angus por 106 dias: controle (n=10): dieta sem levedura; Y4 (n=12): dieta com levedura (4g por animal por dia); e Y7 (n=7): dieta com levedura (7g por animal por dia). Nos dias 0, 14, 42, 70 e 105, hemograma, metabolismo oxidativo de leucócitos, haptoglobina sérica, frequência de secreção nasal e temperatura orbital foram avaliados. No dia do abate, foi realizada avaliação pulmonar. Nos dias 42, e 70 de terminação em confinamento, os animais tratados apresentaram aumento do metabolismo oxidativo dos leucócitos (D42 P=0,04; D70 P=0,02) em relação ao grupo controle. Esses animais apresentaram menor frequência de secreção nasal mucopurulenta, menor temperatura orbital, menor ocorrência de pneumonias (P=0,05) com menor gravidade das lesões pulmonares (P=0,01), permitindo inferir que a levedura autolisada na dieta melhorou a eficiência dos fagócitos sanguíneos, reduzindo inflamações e a ocorrência de CDRB, especialmente na dosagem de 4g.

Optimized biotransformation of acid-treated water melon peel hydrolyzate into ethanol

Abstract Today, global focus of research is to explore the solution of energy crisis and environmental pollution. Like other agricultural countries, bulk quantities of watermelon peels (WMP) are disposed-off in environment as waste in Pakistan and appropriate management of this waste is the need of hour to save environment from pollution. The work emphasizes the role of ethanologenic yeasts to utilize significant sugars present in WMP for low-cost bioethanol fermentation. Dilute hydrochloric acid hydrolysis of WMP was carried out on optimized conditions employing RSM (response surface methodology) following central composite design (CCD). This experimental design is based on optimization of ethanologenesis involving some key independent parameters such as WMP hydrolysate and synthetic media ratio (X1), incubation temperature (X2) and incubation temperature (X3) for maximal ethanol yield exploiting standard (Saccharomyces cerevisiae K7) as well as experimental (Metchnikowia cibodasensisY34) yeasts. The results revealed that maximal ethanol yields obtained from S. cerevisiae K7 was 0.36±0.02 g/g of reducing sugars whereas M. cibodasensisY34, yielded 0.40±0.01 g ethanol/g of reducing sugars. The yeast isolate M. cibodasensisY34 appeared as promising ethanologen and embodies prospective potential for fermentative valorization of WMP-to-bioethanol.

Resumo Hoje, o foco global da pesquisa é explorar a solução da crise energética e da poluição ambiental. Como em outros países agrícolas, grandes quantidades de cascas de melancia (WMP) são descartadas como resíduos no meio ambiente no Paquistão, mas a gestão adequada desses resíduos é a mais recente solução para salvar o meio ambiente da poluição. O trabalho enfatiza o papel das leveduras etanologênicas para utilizar açúcares significativos presentes no WMP para fermentação de bioetanol de baixo custo. A hidrólise de ácido clorídrico diluído de WMP foi realizada em condições otimizadas empregando RSM (metodologia de superfície de resposta) e seguindo o projeto de composto central (CCD). Este projeto experimental é baseado na otimização da etanologenesis envolvendo alguns parâmetros independentes importantes, como hidrolisado de WMP e razão de meio sintético (X1), temperatura de incubação (X2) e temperatura de incubação (X3) para rendimento máximo de etanol explorando o padrão (Saccharomyces cerevisiae K7) também como leveduras experimentais (Metchnikowia cibodasensis Y34). Os resultados revelaram que os rendimentos máximos de etanol obtidos a partir de S. cerevisiae K7 foi de 0,36 ± 0,02 g / g de açúcares redutores, enquanto M. cibodasensis Y34 rendeu 0,40 ± 0,01 g de etanol / g de açúcares redutores. O isolado de levedura M. cibodasensis Y34 apareceu como um etanologeno promissor e incorpora um potencial prospectivo para a valorização fermentativa de WMP em bioetanol.

Probiotic yeast Saccharomyces cerevisiae Az-12 isolated from pomegranate juice presented inhibitory effects against pathogenic bacteria / Levedura probiótica Saccharomyces cerevisiae Az-12 isolada de suco de romã apresentando efeitos inibitórios contra bactérias patogênicas

The potential probiotic yeast was isolated from the Kyzyl Anor pomegranate variety growing in the Turkestan region (Kazakhstan). The yeast strain was identified as Saccharomyces cerevisiae Az-12. Molecular genetic identification was carried out using the Sanger sequencing method. The degree of homology of the S. cerevisiae Az-12 strain with the strain MH608341.1 Saccharomyces cerevisiae isolate extr03 was 99.65%. Antagonistic effect of the yeast against pathogenic bacteria was confirmed according inhibition zones for Staphylococcus aureus 13.5 ± 0.05 mm; the inhibition zones for Escherichia coli 12.8 ± 0.05 mm; and 10.7 ± 0.05 mm for Pseudomonas aeruginosa. Scanning microscopy of S. cerevisiae Az-12 and S. aureus confirmed the adhesive ability of the yeast cell surface to S. aureus. S. cerevisiae Az-12 were chosen as the most promising, as they are able to quickly ferment juices. Functional drinks containing pomegranate juice and yeast with a probiotic effect can be considered as a useful synbiotic product formulation.

A levedura probiótica potencial foi compreendida da variedade de romã Kyzyl Anor que cresce na região do Turquestão (Cazaquistão). A cepa de levedura foi identificada como Saccharomyces cerevisiae Az-12. A identificação genética molecular foi realizada pelo método de sequenciamento de Sanger. O grau de homologia da cepa S. cerevisiae Az-12 com a cepa MH608341.1 Saccharomyces cerevisiae isolado extr-03 foi de 99,65%. O efeito antagônico da levedura contra bactérias patogênicas foi confirmado de acordo com as zonas de inibição para Staphylococcus aureus 13,5 ± 0,05 mm; as zonas de inibição para Escherichia coli 12,8 ± 0,05 mm; e 10,7 ± 0,05 mm para Pseudomonas aeruginosa. A microscopia de varredura de S. cerevisiae Az-12 e S. aureus confirmou a capacidade de adesão da superfície celular de levedura a S. aureus. S. cerevisiae Az-12 foram escolhidas como as mais promissoras, pois são capazes de fermentar sucos rapidamente. Bebidas funcionais contendo suco de romã e fermento com efeito probiótico podem ser consideradas como uma formulação de produto simbiótico útil.

Supplementation of yeast culture combined with an enzyme complex in the diet for confined steers / Suplementação de cultura de leveduras em associação com complexo enzimático na dieta de novilhos confinados

The objective was to evaluate the productive performance, apparent digestibility of the diet and ingestive behavior of beef cattle finished in feedlot under the effect of the inclusion of yeast culture or enzyme complex. The treatments were: diet without additives (control); diet with enzyme complex (7 g animal day-1); diet with yeast culture (7g animal day-1) and diet with the association of enzymatic complex (7 g animal day-1) and yeast culture (7g animal day-1). The experimental design was completely randomized, with five replications. Forty ½ Angus ½ Nellore steers, with an average initial body weight of 362 kg ± 6 kg, were used. Regardless of the evaluation period, non-supplementation caused the animals to gain less weight (0 to 21 days: 1.267 kg day-1; 0 to 42 days: 1.377 kg day-1; 0 to 63 days: 1.368 kg day-1) compared to supplemented animals, feed conversion for non-supplemented animals was also worse. Starch apparent digestibility showed higher averages when steers were supplemented with yeast culture alone and yeast culture combined with enzyme complex (97.30% and 97.07%, respectively). Supplementation using a combination of yeast culture with enzyme complex did not cause additional effects on weight gain, but resulted in the lowest averages for feed conversion.(AU)

Objetivou-se avaliar o desempenho produtivo, digestibilidade aparente da dieta e comportamento ingestivo de bovinos de corte terminados em confinamento sob efeito da inclusão de cultura de leveduras ou de complexo enzimático. Os tratamentos foram assim constituídos: dieta sem aditivos (controle); dieta com complexo enzimático (7 g animal dia-1); dieta com cultura de levedura (7g animal dia-1) e dieta com a associação de complexo enzimático (7 g animal dia-1) e cultura de levedura (7g animal dia-1). O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado, com cinco repetições. Utilizou-se 40 novilhos inteiros, ½ sangue Angus ½ sangue Nelore, com peso vivo médio inicial de 362 kg ± 6kg. Independente do período de avaliação, a não suplementação fez com que os animais ganhassem menos peso (0 a 21 dias: 1,267 kg dia-1; 0 a 42 dias: 1,377 kg dia-1; 0 a 63 dias: 1,368 kg dia-1) em relação aos animais suplementados, a conversão alimentar para os animais não suplementados também foi pior. A digestibilidade aparente do amido apresentou maiores médias quando os novilhos foram suplementados com cultura de levedura isolada e com cultura de levedura associada com complexo enzimático (97,30% e 97,07% respectivamente). A suplementação na forma de associação da cultura de leveduras ao complexo enzimático não apresentou efeitos adicionais sobre o ganho de peso, mas possui as menores médias para conversão alimentar.(AU)

Optimized biotransformation of acid-treated water melon peel hydrolyzate into ethanol / Biotransformação otimizada de hidrolisado de casca de melancia tratada com ácido em etanol

Today, global focus of research is to explore the solution of energy crisis and environmental pollution. Like other agricultural countries, bulk quantities of watermelon peels (WMP) are disposed-off in environment as waste in Pakistan and appropriate management of this waste is the need of hour to save environment from pollution. The work emphasizes the role of ethanologenic yeasts to utilize significant sugars present in WMP for low-cost bioethanol fermentation. Dilute hydrochloric acid hydrolysis of WMP was carried out on optimized conditions employing RSM (response surface methodology) following central composite design (CCD). This experimental design is based on optimization of ethanologenesis involving some key independent parameters such as WMP hydrolysate and synthetic media ratio (X1), incubation temperature (X2) and incubation temperature (X3) for maximal ethanol yield exploiting standard (Saccharomyces cerevisiae K7) as well as experimental (Metchnikowia cibodasensisY34) yeasts. The results revealed that maximal ethanol yields obtained from S. cerevisiae K7 was 0.36±0.02 g/g of reducing sugars whereas M. cibodasensisY34, yielded 0.40±0.01 g ethanol/g of reducing sugars. The yeast isolate M. cibodasensisY34 appeared as promising ethanologen and embodies prospective potential for fermentative valorization of WMP-to-bioethanol.

Hoje, o foco global da pesquisa é explorar a solução da crise energética e da poluição ambiental. Como em outros países agrícolas, grandes quantidades de cascas de melancia (WMP) são descartadas como resíduos no meio ambiente no Paquistão, mas a gestão adequada desses resíduos é a mais recente solução para salvar o meio ambiente da poluição. O trabalho enfatiza o papel das leveduras etanologênicas para utilizar açúcares significativos presentes no WMP para fermentação de bioetanol de baixo custo. A hidrólise de ácido clorídrico diluído de WMP foi realizada em condições otimizadas empregando RSM (metodologia de superfície de resposta) e seguindo o projeto de composto central (CCD). Este projeto experimental é baseado na otimização da etanologenesis envolvendo alguns parâmetros independentes importantes, como hidrolisado de WMP e razão de meio sintético (X1), temperatura de incubação (X2) e temperatura de incubação (X3) para rendimento máximo de etanol explorando o padrão (Saccharomyces cerevisiae K7) também como leveduras experimentais (Metchnikowia cibodasensis Y34). Os resultados revelaram que os rendimentos máximos de etanol obtidos a partir de S. cerevisiae K7 foi de 0,36 ± 0,02 g / g de açúcares redutores, enquanto M. cibodasensis Y34 rendeu 0,40 ± 0,01 g de etanol / g de açúcares redutores. O isolado de levedura M. cibodasensis Y34 apareceu como um etanologeno promissor e incorpora um potencial prospectivo para a valorização fermentativa de WMP em bioetanol.

Optimized biotransformation of acid-treated water melon peel hydrolyzate into ethanol / Biotransformação otimizada de hidrolisado de casca de melancia tratada com ácido em etanol

Today, global focus of research is to explore the solution of energy crisis and environmental pollution. Like other agricultural countries, bulk quantities of watermelon peels (WMP) are disposed-off in environment as waste in Pakistan and appropriate management of this waste is the need of hour to save environment from pollution. The work emphasizes the role of ethanologenic yeasts to utilize significant sugars present in WMP for low-cost bioethanol fermentation. Dilute hydrochloric acid hydrolysis of WMP was carried out on optimized conditions employing RSM (response surface methodology) following central composite design (CCD). This experimental design is based on optimization of ethanologenesis involving some key independent parameters such as WMP hydrolysate and synthetic media ratio (X1), incubation temperature (X2) and incubation temperature (X3) for maximal ethanol yield exploiting standard (Saccharomyces cerevisiae K7) as well as experimental (Metchnikowia cibodasensisY34) yeasts. The results revealed that maximal ethanol yields obtained from S. cerevisiae K7 was 0.36±0.02 g/g of reducing sugars whereas M. cibodasensisY34, yielded 0.40±0.01 g ethanol/g of reducing sugars. The yeast isolate M. cibodasensisY34 appeared as promising ethanologen and embodies prospective potential for fermentative valorization of WMP-to-bioethanol.(AU)

Hoje, o foco global da pesquisa é explorar a solução da crise energética e da poluição ambiental. Como em outros países agrícolas, grandes quantidades de cascas de melancia (WMP) são descartadas como resíduos no meio ambiente no Paquistão, mas a gestão adequada desses resíduos é a mais recente solução para salvar o meio ambiente da poluição. O trabalho enfatiza o papel das leveduras etanologênicas para utilizar açúcares significativos presentes no WMP para fermentação de bioetanol de baixo custo. A hidrólise de ácido clorídrico diluído de WMP foi realizada em condições otimizadas empregando RSM (metodologia de superfície de resposta) e seguindo o projeto de composto central (CCD). Este projeto experimental é baseado na otimização da etanologenesis envolvendo alguns parâmetros independentes importantes, como hidrolisado de WMP e razão de meio sintético (X1), temperatura de incubação (X2) e temperatura de incubação (X3) para rendimento máximo de etanol explorando o padrão (Saccharomyces cerevisiae K7) também como leveduras experimentais (Metchnikowia cibodasensis Y34). Os resultados revelaram que os rendimentos máximos de etanol obtidos a partir de S. cerevisiae K7 foi de 0,36 ± 0,02 g / g de açúcares redutores, enquanto M. cibodasensis Y34 rendeu 0,40 ± 0,01 g de etanol / g de açúcares redutores. O isolado de levedura M. cibodasensis Y34 apareceu como um etanologeno promissor e incorpora um potencial prospectivo para a valorização fermentativa de WMP em bioetanol.(AU)

Effect of amla and ginger powders on quality criteria of African catfish (Clarias gariepinus) fingers / Efeito da amla e do gengibre em pó nos critérios de qualidade dos palitos de bagre-africano (Clarias gariepinus)

Catfish (Clarias gariepinus) meat isn't preferred by consumers in compared to other fish species meat, thus to enhance the use of catfish meat, ready to eat catfish fingers were prepared with some plants additives (amla and ginger powder). The mean objective of this study was to assess the impact of amla and ginger powder on catfish finger qualities in terms of physical, chemical, microbiological, and sensorial parameters under stored at a low temperature (5 ± 1 °C). The obtained results were compared with those of a control sample (basic formula) and a sample containing the synthetic antioxidant. During the storage period, the levels of pH, thiobarbituric acid, total volatile basic nitrogen, trimethylamine, total bacteria count, psychrophilic bacteria, molds and yeasts counts increased dramatically, although the values remained within acceptable ranges. The findings also revealed, that amla and ginger powder considerably (p < 0.05) reduced the changes in quality parameters, as well as there was a considerable increase in the quality parameter in all treated samples than in the control. Finally, amla and ginger powder can be a substitute for synthetic antioxidants and antimicrobials. These findings suggest that the powder of amla and ginger are suitable for use as a natural antioxidants and antimicrobials to extend the shelf-life of animal products.

Catfish (Clarias gariepinus) meat isn't preferred by consumers in compared to other fish species meat, thus to enhance the use of catfish meat, ready to eat catfish fingers were prepared with some plants additives (amla and ginger powder). The mean objective of this study was to assess the impact of amla and ginger powder on catfish finger qualities in terms of physical, chemical, microbiological, and sensorial parameters under stored at a low temperature (5 ± 1 °C). The obtained results were compared with those of a control sample (basic formula) and a sample containing the synthetic antioxidant. During the storage period, the levels of pH, thiobarbituric acid, total volatile basic nitrogen, trimethylamine, total bacteria count, psychrophilic bacteria, molds and yeasts counts increased dramatically, although the values remained within acceptable ranges. The findings also revealed, that amla and ginger powder considerably (p < 0.05) reduced the changes in quality parameters, as well as there was a considerable increase in the quality parameter in all treated samples than in the control. Finally, amla and ginger powder can be a substitute for synthetic antioxidants and antimicrobials. These findings suggest that the powder of amla and ginger are suitable for use as a natural antioxidants and antimicrobials to extend the shelf-life of animal products.

Microbiological featuring of two neotropical fish species from the quilombola area of maranhão state, Brazil / Caracterização microbiológica de duas espécies de peixes neotropicais oriundas de área quilombola maranhense, Brasil

The aim of study is to feature the microbiological quality of two neotropical fish species from the quilombola area of Maranhão State, Brazil. In order to do so, 21 samples of Hoplerythrinus unitaeniatus and 21 samples of Cichlasoma bimaculatum were captured in flooded environment. Collected fish were euthanized in laboratory environment; muscle fragments were removed for microbiological analyses focused on enumerating molds and yeasts, viable strict and facultative mesophilic microorganisms and coagulase-positive staphylococci; on counting total and thermotolerant coliforms; and on investigating Escherichia coli and Salmonella sp. Microbiological results were compared to the Brazilian legislation, which establishes the list of microbiological standards for food products. Among the assessed fish, 9.52% were classified as non-acceptable for human consumption, based on the Salmonella parameter. Enumerated coagulase-positive staphylococci ranged from < 10 to 3.9 x 104 CFU/g; 9.52% of assessed fish were classified as having intermediate standard for human consumption, whereas 4.76% were classified as non-acceptable for such a purpose. E. coli counting ranged from 3.6 to > 1,100MPN/g; 4.76% of assessed fish were classified as having intermediate standard for human consumption, whereas 4.76% were classified as non-acceptable for such a purpose. Total and thermotolerant coliforms' counting and the enumeration of viable strict and facultative aerobic microorganisms, as well as of molds and yeasts, have evidenced high microbial population rates; this finding suggests poor hygienic conditions at capture site, contaminated raw material and risk of incidence of enteropathogens. This finding has evidenced imbalance in the investigated environment, as well as compromised aquatic biodiversity.(AU)

Objetivou-se caracterizar a qualidade microbiológica de duas espécies de peixes neotropicais oriundas de área qui-lombola maranhense, Brasil. Para isso, foram capturadas 21 amostras de Hoplerythrinus unitaeniatus e 21 amostras de Cichlasoma bimaculatum de ambiente alagável. No laboratório, os peixes foram eutanasiados, procedida a retirada dos fragmentos mus-culares e realizada as análises microbiológicas: enumeração de bolores e leveduras, micro-organismos mesófilos aeróbios estri-tos e facultativos viáveis e de estafilococos coagulase positiva, quantificação de coliformes totais e termotolerantes, pesquisa de Escherichia coli e Salmonella sp. Os resultados microbiológicos obtidos foram comparados com a legislação brasileira que estabelece a lista de padrões microbiológicos para alimentos. Dos peixes avaliados, 9,52% foram considerados inaceitáveis para consumo humano para o parâmetro Salmonella. A enumeração de estafilococos coagulase positivavariou de <10 a 3,9 x 104 UFC/g, sendo 9,52% dos peixes considerados com padrão intermediário e 4,76% inaceitáveis para consumo. A quanti-ficação de E. coli variou de 3,6 a >1.100 NMP/g, sendo 4,76% considerados com padrão intermediário e 4,76% inaceitáveis para consumo. A quantificação de coliformes totais e termotolerantes e a enumeração de micro-organismos aeróbios estritos e facultativos viáveis e bolores e leveduras revelou elevadas populações microbianas o que sugere más condições higiênicas do local de captura, matéria-prima contaminada e risco da presença de enteropatógenos, demonstrando desequilíbrio no ambiente estudado com comprometimento da biodiversidade aquática.(AU)

Phagocytotic activity and gene expression of leukocytes isolated from Astyanax lacustris / Atividade fagocítica e expressão gênica de leucócitos isolados de Astyanax lacustris

The constant intensification of aquaculture has considerable increased the stress levels of farmed fish and, consequently, the number and intensity of diseases outbreaks. Thus, studies on fish immune response, especially regarding the interaction of fish leukocytes with potential pathogens and xenobiotics are of great importance in order to develop new prophylactic and curative strategies. We isolated leukocytes from the head kidney of Astyanax lacustris­an important Neotropical fish species for aquaculture and a potential model for Neotropical aquaculture research­using a Percoll centrifugation protocol. The isolated leukocytes were incubated with lipopolysaccharide (LPS), and the expression of genes IL-1ß, IL-8, LysC, and LysG were measured. We assessed the phagocytotic activity of leukocytes using Congo red-dyed yeast, a novel and cost-effective protocol that has been developed in this study. The isolated leukocytes responded to LPS induction, exhibiting strong IL-1ß and IL-8 upregulation, two of the most important pro-inflammatory interleukins for vertebrates immune reponse. The optimal concentration of yeast for the phagocytic assay was 106 cells mL-1, resulting in acceptable phagocytic capacity (PC) but without excess of yeasts during the counting process, ensuring a high precision and accuracy of the method. To the best of our knowledge, the present study is the first to investigate the in vitro gene expression and phagocytic activity of leukocytes isolated from A. lacustris. Our findings will serve as a reference for future studies on the immunology and toxicology of Neotropical fish.

A constante intensificação da aquicultura tem aumentado consideravelmente os níveis de estresse dos animais cultivados e, consequentemente, o número e a intensidade dos surtos de doenças. Logo, estudos sobre a resposta imune dos peixes, especialmente relacionados com a interação dos leucócitos de peixes com potenciais patógenos e xenobióticos, são de grande importância para o desenvolvimento de novas estratégias profiláticas e curativas. No presente trabalho, nós obtivemos sucesso ao isolar leucócitos oriundos do rim cranial de Astyanax lacustris ­ uma importante espécie de peixe Neotropical para a aquicultura e um modelo em potencial para pesquisas em aquicultura Neotropical ­ usando um protocolo de centrifugação com Percoll. Os leucócitos isolados foram incubados com lipossacarídeo (LPS) e, a expressão dos genes IL-1ß, IL-8, LysC, e LysG foi avaliada. Ainda, um novo protocolo para avaliação da atividade fagocítica dos leucócitos utilizando leveduras coradas com Vermelho Congo foi estabelecido. Os leucócitos isolados responderam à indução com LPS, exibindo up regulation dos genes IL-1ß e IL-8, duas das interleucinas pró-inflamatórias mais importantes para a resposta imune de vertebrados. Além do mais, a concentração ótima de leveduras para a avaliação da fagocitose foi de 106 células mL-1, resultando em uma capacidade fagocítica (PC) aceitável, mas sem excesso de leveduras durante o processo de contagem, garantindo maior precisão e eficácia do método. Até o presente momento, o presente estudo é o primeiro a investigar a expressão gênica e atividade fagocítica de leucócitos isolados de A. lacustris através da abordagem in vitro. Ainda, nossos resultados servirão de referência para futuros estudos em imunologia e toxicologia de peixes Neotropicais.

Antifungal effect of (R) and (S)-citronellal enantiomers and their predictive mechanism of action on Candida albicans from voriconazole-resistant onychomycoses / Efeito antifúngico dos enantiômeros (R) e (S)-citronelal e seu mecanismo de ação preditivo sobre Candida albicans de onicomicoses resistentes ao voriconazol

Onychomycosis is the most common disease affecting the nail unit and accounts for at least 50% of all nail diseases. In addition, Candida albicans is responsible for approximately 70% of onychomycoses caused by yeasts. This study investigated the antifungal effect of (R) and (S)-citronellal enantiomers, as well as its predictive mechanism of action on C. albicans from voriconazole-resistant onychomycoses. For this purpose, in vitro broth microdilution and molecular docking techniques were applied in a predictive and complementary manner to the mechanisms of action. The main results of this study indicate that C. albicans was resistant to voriconazole and sensitive to the enantiomers (R) and (S)-citronellal at a dose of 256 and 32 µg/mL respectively. In addition, there was an increase in the minimum inhibitory concentration (MIC) of the enantiomers in the presence of sorbitol and ergosterol, indicating that these molecules possibly affect the integrity of the cell wall and cell membrane of C. albicans. Molecular docking with key biosynthesis proteins and maintenance of the fungal cell wall and plasma membrane demonstrated the possibility of (R) and (S)-citronellal interacting with two important enzymes: 1,3-ß-glucan synthase and lanosterol 14α-demethylase. Therefore, the findings of this study indicate that the (R) and (S)-citronellal enantiomers are fungicidal on C. albicans from onychomycoses and probably these substances cause damage to the cell wall and cell membrane of these micro-organisms possibly by interacting with enzymes in the biosynthesis of these fungal structures.

A onicomicose é a doença mais comum que afeta a unidade ungueal e representa pelo menos 50% de todas as doenças ungueais. Além disso, a Candida albicans é responsável por aproximadamente 70% das onicomicoses causadas por leveduras. Nesse estudo, foi investigado o efeito antifúngico dos enantiômeros (R) e (S)-citronelal, bem como seu mecanismo de ação preditivo sobre C. albicans de onicomicoses resistentes ao voriconazol. Para este propósito, foram aplicadas técnicas in vitro de microdiluição em caldo e docking molecular de forma preditiva e complementar para os mecanismos de ação. Os principais resultados deste estudo indicam que C. albicans foi resistente ao voriconazol e sensível aos enantiômeros (R) e (S)-citronelal na dose de 256 e 32 µg/mL respectivamente. Além disso, houve aumento da concentração inibitória mínima (CIM) dos enantiômeros na presença do sorbitol e do ergosterol, indicando que estas moléculas possivelmente afetem a integridade da parede e da membrana celular de C. albicans. O docking molecular com proteínas chave da biossíntese e manutenção da parede celular e da membrana plasmática fúngica, demonstraram a possibilidade do (R) e (S)-citronelal interagir com duas importantes enzimas: 1,3-ß-glucan sintase e lanosterol 14α-demetilase. Portanto, os achados desse estudo indicam que os enantiômeros (R) e (S)-citronelal são fungicidas sobre C. albicans de onicomicoses e provavelmente essas substâncias causem danos a parede e a membrana celular desses microrganismos possivelmente por interagir com as enzimas da biossíntese destas estruturas fúngicas.

Nutritional and metabolic parameters of ewe lambs fed yeast in the diet containing fibrolytic enzyme / Parâmetros nutricionais e metabólicos de borregas alimentadas com leveduras na ração contendo enzima fibrolítica

This study aimed to evaluate the dry matter digestibility, intake and metabolic profile of ewe lambs fed active or inactive yeasts in the diet containing fibrolytic enzyme. Twenty crossbred animals with an average weight of 33.4kg and an average age of six months were distributed in a completely randomized design. The treatments consisted of yeasts: Control (no yeast), Milk Sacc X® (active yeast), Active Flora®(active yeast + inactive yeast) and Rumen Yeast®(inactive yeast). Analysis of variance and SNK test were applied with a significance level of 5% for type I error. There was no difference for dry matter intake between treatments (P>0.05). There was a significant trend (P=0.0596) for dry matter digestibility, with higher values for the control treatment. There was a significant trend for blood metabolites (P=0.0705), in which the diet containing Milk Sacc® was superior to the other treatments for total protein concentration. In addition, there was a statistical difference (P<0.05) for urea concentration, in which control and Active Flora® treatments were superior to the others. The inclusion of active or inactive yeasts in the diet for ewe lambs containing fibrolytic enzyme reduces dietary digestibility, without affecting the dry matter intake, in addition, it increases urea and total protein levels without causing liver or kidney damage in ewe lambs.

Objetivou-se avaliar a digestibilidade da matéria seca, consumo e perfil metabólico de borregas alimentadas com leveduras vivas e inativadas na ração contendo enzima fibrolítica. Foram utilizados vinte animais mestiços com peso médio de 33,4kg e idade média de seis meses, distribuídas em delineamento inteiramente casualizado. Os tratamentos consistiram nas leveduras: Controle (sem levedura), Milk Sacc X® (levedura ativa), Active Flora®(levedura viva mais levedura inativada) e Rúmen Yeast® (levedura inativa). Foi realizada à análise variância e teste SNK com nível de significância de 5% para o erro tipo I. Não houve diferença entre tratamentos para consumo de matéria seca com uso ou não de levedura na dieta (P>0,05). Houve tendência significativa (P=0,0596) para a digestibilidade da matéria seca sendo superior para com o tratamento sem inclusão de leveduras. Para os metabólitos sanguíneos houve tendência significativa (P=0,0705) sendo o Milk Sacc® superior aos demais tratamentos para concentração de proteínas totais. Além disso, houve diferença estatística (P<0,05) para concentração de ureia cujos tratamentos controle e Active Flora® foram superiores aos demais. A inclusão de leveduras vivas ou inativadas na dieta para borregas contendo enzima fibrolítica diminui a digestibilidade da dieta, sem afetar o consumo de matéria seca, além disso, aumenta teores de ureia e proteínas totais sem causar prejuízos hepáticos ou renais as borregas.

Performance and carcass characteristics of lambs fed diets supplemented with different levels of Saccharomyces cerevisiae

The objective of this study was to evaluate the productive performance, apparent digestibility, and carcass and longissimus dorsi muscle characteristics of lambs fed diets supplemented with four levels of Saccharomyces cerevisiae. Thirty-two male Hampshire lambs (25.82±1.95 kg body weight) were distributed in four treatments: basal diet (20:80, forage:concentrate), and the inclusion of 0, 3, 5, and 10 g animal−1 d−1 Saccharomyces cerevisiae. The variables evaluated were dry matter intake, daily weight gain, feed conversion, apparent digestibility, dorsal fat thickness, longissimus dorsi muscle area, and physicochemical characteristics of carcass and muscle. We used a completely randomized design and orthogonal polynomials to test the linear and quadratic effects of the inclusion levels of the yeast. Saccharomyces cerevisiae showed a quadratic effect on lamb performance. Dry matter intake decreased with yeast in response to a better feed conversion and body weight gain; however, at the highest Saccharomyces cerevisiae dose, daily weight gain and final weight were lower than with the basal diet treatment. Saccharomyces cerevisiae did not affect apparent digestibility or carcass and muscle physicochemical characteristics. Supplementation with 3 and 5 g d−1 Saccharomyces cerevisiae improves productive performance of lambs fed high concentrate diets without affecting the physicochemical characteristics of the carcass or muscle.(AU)

Saccharomyces cerevisiae OS303 expression of an alkaline protease from a newly isolated Bacillus subtilis D9 / Expressão de Saccharomyces cerevisiae OS303 de uma protease alcalina de um Bacillus subtilis D9 recém-isolado

The aim of this study was to produce high yield of a local bacterial alkaline protease in the yeast system because the scientific involvement of microorganisms in enzyme production is still not given enough attention in Saudi Arabia. Soil samples were collected from the rhizosphere of some desert plants in Saudi Arabia. Ninety-three alkaline protease producing bacterial isolates were recovered on skimmed-milk agar at pH 9.4 and 45°C for 48 hr. Isolate D9 obtained from the rhizosphere of Heliotropium digynum at Dhahran City was the most potent isolate in respect to enzyme productivity (184.6 U/ml). The full gene of alkaline protease was amplified and showed the expected size (1300 bp). Restriction enzymes analysis also verified the integrity of the PCR product. The sequence of the protease gene revealed an open reading frame of 1329 nt correspond to the full length of the protease gene of isolate D9 encoding a 443 aa protein. After ligation of the amplified gene by the TA cloning method, digestion with appropriate restriction enzymes confirmed the integrity of the cloned gene. The insert was prepared by two PCRs that were conducted with a pair of primers specifically designed for this purpose. The digested and purified cloning vector pRS426/GAL1p-207-Glu-MS was ligated with the insert then transformed into various strains of Saccharomyces cerevisiae via the electroporation method. Maximum protease expression was done by recombinant OS303 in galactose containing media (145.5 U/ml) with an approximately 2-fold increase when compared with the wild OS303 strain., this may be due to ability to activate gal operon.

O objetivo deste estudo foi produzir alto rendimento de uma protease alcalina bacteriana local no sistema de leveduras, já que o envolvimento científico de microrganismos na produção de enzimas ainda não recebe atenção suficiente na Arábia Saudita. Amostras de solo foram coletadas da rizosfera de algumas plantas do deserto na Arábia Saudita. Noventa e três isolados bacterianos produtores de protease alcalina foram recuperados em ágar de leite desnatado a pH 9,4 e 45°C por 48 horas. O isolado D9 obtido da rizosfera de Heliotropium digynum na cidade de Dhahran foi o mais potente em relação à produtividade da enzima (184,6 U/ml). O gene completo da protease alcalina foi amplificado e apresentou o tamanho esperado (1300 pb). A análise de enzimas de restrição também verificou a integridade do produto de PCR. A sequência do gene da protease revelou uma fase de leitura aberta de 1329 nt, correspondendo ao comprimento total do gene da protease do isolado D9 que codifica uma proteína 443 aa. Após a ligação do gene amplificado pelo método de clonagem TA, a digestão com enzimas de restrição apropriadas confirmou a integridade do gene clonado. A inserção foi preparada por dois PCRs que foram conduzidos com um par de primers projetados especificamente para esta finalidade. O vetor de clonagem digerido e purificado pRS426/GAL1p-207-Glu-MS foi ligado com a inserção e então transformado em várias cepas de Saccharomyces cerevisiae por meio do método de eletroporação. A expressão máxima da protease foi feita por OS303 recombinante em meio contendo galactose (145,5 U/ml) com um aumento de aproximadamente duas vezes quando comparado com a cepa OS303 selvagem, e isso pode ser por causa da capacidade de ativar o operon gal.

Effect of enzyme and probiotic supplementation on growth performance, nutrient digestibility, carcass traits, and meat quality of Simmental steers

The objective of this trial was to investigate the potential benefits of enzyme and probiotic supplementation on the growth performance, nutrient digestibility, carcass traits, and meat quality of Simmental cattle. Sixty Simmental steers (367.75±4.69 kg) were randomly divided into three groups: control (fed basal diet), BC1 group (fed basal diet and 10 g/d brewer's yeast and cellulase supplementation per cattle), and BC2 group (fed basal diet and 20 g/d brewer's yeast and cellulase supplementation per cattle). A 10-d preparation period was followed by a 120-d experimental period. The results showed that the final weight of the BC2 group was greater than that of the control group. Also, feed conversion ratio of the BC2 group was better than that of the control group. Net meat weight increased by 3.86% in the BC2 group compared with the control group. The apparent digestibility of neutral detergent fiber, acid detergent fiber, and crude protein of the BC2 group was greater than that of the control group. Dietary supplementation with brewer's yeast and cellulase supplementation could improve the growth performance and nutrient digestibility of Simmental cattle.(AU)