Toxoplasma gondii in cetaceans of Brazil: a histopathological and immunohistochemical survey / Toxoplasma gondii em cetáceos do Brasil: estudo histopatológico e imuno-histoquímico

Toxoplasmosis is a parasitic disease caused by the protozoan Toxoplasma gondii. In cetaceans, T. gondii infection is a significant cause of morbidity and mortality. Despite the worldwide range and broad cetacean host record of T. gondii infection, there is limited information on toxoplasmosis in cetaceans from the Southern hemisphere. We investigated the occurrence of T. gondii by histopathology and immunohistochemistry in tissue samples of 185 animals comprising 20 different cetacean species from Brazil. Three out of 185 (1.6%) animals presented T. gondii-associated lesions: a captive killer whale Orcinus orca, a free-ranging common bottlenose dolphin Tursiops truncatus and a free-ranging Guiana dolphin Sotalia guianensis. The main lesions observed in these animals were necrotizing hepatitis, adrenalitis and lymphadenitis associated with protozoal cysts or extracellular tachyzoites presenting immunolabeling with anti-T. gondii antibodies. This study widens the spectrum of species and the geographic range of this agent in Brazil, and provides the first reports of T. gondii infection in a captive killer whale and in a free-ranging common bottlenose dolphin in South America.(AU)

Toxoplasmose é uma doença parasitária causada pelo protozoário Toxoplasma gondii. A infecção por T. gondii é uma causa significativa de morbidade e mortalidade, nos cetáceos. Apesar da abrangência mundial e amplo registro de espécies de cetáceos infectadas por T. gondii, informações sobre toxoplasmose em cetáceos do hemisfério sul são limitadas. Neste estudo pesquisou-se por meio de histopatologia e imuno-histoquímica a ocorrência de T. gondii em amostras de tecido de 185 animais, compreendendo 20 diferentes espécies de cetáceos que ocorrem no Brasil. Três dos 185 (1,6%) animais apresentaram lesões associadas a T. gondii: uma orca Orcinus orca mantida em cativeiro, um golfinho-nariz-de-garrafa Tursiops truncatus e um boto-cinza Sotalia guianensis de vida livre. As principais lesões observadas nesses animais foram hepatite, adrenalite e linfadenite necrotizantes associadas a cistos protozoários ou taquizoítos extracelulares, marcados com anticorpos anti-T. gondii. O presente estudo amplia o espectro de espécies susceptíveis a esse agente e o seu alcance geográfico no Brasil, fornecendo o primeiro relato da infecção por T. gondii em uma orca mantida em cativeiro e em um golfinho-nariz-de-garrafa de vida livre na América do Sul.(AU)

Adrenalitis associated with Leishmania infantum infection in a maned wolf (Chrysocyon brachyurus)

This report describes a case of visceral leishmaniasis characterized by adrenalitis with intralesional Leishmania sp. amastigotes in a 16 year-old maned wolf (Chrysocyon brachyurus). The animal had been previously diagnosed as infected with Leishmania infantum by serology and xenodiagnosis. The only organ in which amastigotes were detected by histopathology and immunohistochemistry was the adrenal gland, which presented multifocal infiltration of lymphocytes, plasma cells and macrophages containing intracytoplasmic amastigotes. The animal had no other lesions of visceral leishmaniasis, except for renal and splenic amyloidosis and pancreatitis that may be associated with the disease. Importantly, the maned wolf had an intratubular seminoma in the testis, which to the best of our knowledge is the first reported case of testicular tumor in this species.(AU)

Adrenalitis associated with Leishmania infantum infection in a maned wolf (Chrysocyon brachyurus)

This report describes a case of visceral leishmaniasis characterized by adrenalitis with intralesional Leishmania sp. amastigotes in a 16 year-old maned wolf (Chrysocyon brachyurus). The animal had been previously diagnosed as infected with Leishmania infantum by serology and xenodiagnosis. The only organ in which amastigotes were detected by histopathology and immunohistochemistry was the adrenal gland, which presented multifocal infiltration of lymphocytes, plasma cells and macrophages containing intracytoplasmic amastigotes. The animal had no other lesions of visceral leishmaniasis, except for renal and splenic amyloidosis and pancreatitis that may be associated with the disease. Importantly, the maned wolf had an intratubular seminoma in the testis, which to the best of our knowledge is the first reported case of testicular tumor in this species.

DETERMINAÇÃO DA CAUSA DE MORTE E PRINCIPAIS ACHADOS PATOLÓGICOS EM TARTARUGAS VERDES (CHELONIA MYDAS) NO LITORAL NORTE DA BAHIA

SILVA, D. N. Determinação da causa de morte e principais achados patológicos em tartarugas-verdes, Chelonia mydas no litoral norte da Bahia. Salvador, 2020. 268p. (Defesa de doutorado - Ciência Animal nos Trópicos) Escola de Medicina Veterinária Universidade Federal da Bahia. Objetivou-se a partir deste estudo, avaliar os achados anatomopatológicos em tartarugas- verdes (Chelonia mydas) e o seu impacto na conservação, correlacionando-os com a pesca, infecções parasitárias pelos espirorquídeos, bem como a identificação das patologias oculares. Foram necropsiados 61 animais (46 fêmeas e 15 machos) e, amostras de órgãos com lesão identificada na macroscopia, foram colhidos para avaliação histopatológica. Os dados de animais confirmados ou sugestivos de interação com a pesca foram registrados. Do total de tartarugas avaliadas, foi possível determinar a causa mortis em 90,2% das tartarugas, sendo 77% de ameaças naturais, 16,7% dos casos estavam associadas a interação antrópica e 3,3% foram inconclusivos. Com relação a causa mortis, 44,3% morreram de insuficiência respiratória aguda; 26,2% de sepse, 16,4% por caquexia/desnutrição, 4,9% tiveram colapso circulatório por tromboembolismo e 1,6% compactação gástrica. Nos casos inconclusivos, 3,3% não foram observadas alterações na macroscopia determinantes à morte. 3,3% das tartarugas foram submetidas à eutanásia. Para identificar a ocorrência de trematódeos da Família Spirorchiidae e as lesões causadas por estes parasitos, foram coletadas amostras fecais de 41/61 (68,3%) animais necropsiados, e destas, 6,5% apresentavam parasitos adultos, queestavam localizados na luz de grandes vasos. A avaliação coproparasitológica, possibilitou a identificação de três tipos de ovos de espirorquídeos, pela técnica de sedimentação. As lesões provocadas por estes parasitos foram granulomas na serosa do TGI (24,6%), esplenite parasitária (19,4%) e formação de trombos nas artérias, com consequente obstrução parcial ou total (14,7%) de sua luz. As artérias acometidas foram aortas esquerda e direita, tronco braquiocefálico, aorta dorsal e as artérias celíaca e mesentérica cranial. Os granulomas parasitários nas paredes dos vasos também foram observados; em 8,2% dos vasos havia trombos e formação granulomatosa na parede. Outra alteração observada nos vasos foi a proliferação de tecido fibroso ou endarterite (9,3%). Os achados microscópicos mais frequentes foram pneumonia com vasculite granulomatosa parasitária (54,1%), esplenite e vasculite granulomatosa parasitária (37,7%), nefrite e vasculite granulomatosa (34,4%), hepatite granulomatosa heterofílica (26,2%), coroidite com vasculite granulomatosa parasitaria (26,2%), miocardite parasitária (21,3%), gastrite com vasculite granulomatosa (19,8%) e adrenalite com vasculite granulomatosa (4,9%). A avaliação anátomo-histopatológica do aparelho visual dos espécimes revelou, predominantemente, lesões de caráter neoplásico e inflamatório, sendo a fibropapilomatose (FP) a lesão mais frequente (58,9%), seguido da espirorquidíase (46,8%). Outras lesões oftálmicas incluíram a conjuntivite mucopurulenta, ceratite ulcerativa, perfuração de córneas, panoftalmites, phthisis bulbi, tecido cicatrical bilateral nas pálpebras e litíases nas glândulas de sal. Este estudo ratifica a importância do conhecimento dos processos patológicos que acometem as tartarugas marinhas, como os causados por ação antropogênica, infecções parasitárias ou doenças oculares, pois são alterações que podem impactar diretamente o manejo e conservação destas espécies.

SILVA, D. N. Determination of the cause of death and main pathological findings in green turtles (Chelonia mydas) in the north coast of Bahia. Salvador, 2020. 268p. Thesis (Doctor in Animal Science on Tropics) School of Veterinary Medicine and Zootechny Federal University of Bahia. The objective of this study was to evaluate the pathological findings in green turtles (Chelonia mydas) and their impact on conservation, correlating them with fishing, parasitic infections by spirorchids, as well as the identification of ocular pathologies. Sixty-one animals (46 females and 15 males) were necropsied and samples of organs with lesions identified by macroscopy were collected for histopathological evaluation. Data from animals confirmed or suggestive of interaction with fishing were recorded. Of the total number of turtles evaluated, it was possible to determine the cause of death in 90,2% of the turtles, 77% of which were natural threats, 16.7% of the cases were associated with human interaction and 6.6% were inconclusive. Regarding cause of death, 44.3% died of acute respiratory failure; 26.2% of sepsis, 16.4% due to cachexia/malnutrition, 4.9% had circulatory collapse due to thromboembolism and 1.6% had gastric compaction. In inconclusive cases, 3.3% were not observed macroscopic changes determining death. 3.3% of the animals were found to be euthanized. To identify the occurrence of trematodes of the family Spirorchiidae and the lesions caused by these parasites, fecal samples were collected from 41/61 (68.3%) necropsied animals, and of these, 6.5% had adult parasites, which were located in the light of large vases. The coproparasitological evaluation allowed the identification of three types of spirorchid eggs, using the sedimentation technique. The lesions caused by these parasites were granulomas in the TGI serosa (24.6%), parasitic splenitis (19.4%) and thrombus formation in the arteries, with consequent partial or total obstruction (14.7%) of its lumen. The affected arteries were left and right aortas, brachiocephalic trunk, dorsal aorta and celiac and cranial mesenteric arteries. Parasitic granulomas in vessel walls were also observed; in 8.2% of the vessels there were thrombi and granulomatous formation in the wall. Another change observed in the vessels was the proliferation of fibrous tissue or endarteritis (9.3%). The most common microscopic findings were pneumonia with parasitic granulomatous vasculitis (54.1%), splenitis and parasitic granulomatous vasculitis (37.7%), nephritis and granulomatous vasculitis (34.4%), heterophilic granulomatous hepatitis (26.2%), choroiditis with parasitic granulomatous vasculitis (26.2%), parasitic myocarditis (21.3%), gastritis with granulomatous vasculitis (19.8%) and adrenalitis with granulomatous vasculitis (4.9%). The anatomo-histopathological evaluation of the specimens' visual apparatus revealed predominantly neoplastic and inflammatory lesions, with fibropapillomatosis (FP) being the most frequent lesion (58.9%), followed by spirorchidiasis (46.8%). Other ophthalmic lesions included mucopurulent conjunctivitis, ulcerative keratitis, corneal perforation, panophthalmitis, phthisis bulbi, bilateral scar tissue in the eyelids and lithiasis in the salt glands. This study confirms the importance of knowing the pathological processes that affect sea turtles, such as those caused by anthropogenic action, parasitic infections or eye diseases, as these are changes that can directly impact the management and conservation of these species.

Morphological changes and parasite load of the adrenal from dogs with visceral leishmaniasis / Alterações morfológicas e carga parasitária da adrenal de cães com leishmaniose visceral

The objective of this study was to analyze morphological changes and parasite loads in the adrenal gland from 45 dogs with visceral leishmaniasis (VL). The animals were from the Zoonosis Control Center of Araçatuba, state of São Paulo, which is an endemic region for the disease. These animals were euthanized due to positive diagnoses of VL. The dogs were classified into asymptomatic, oligosymptomatic and symptomatic groups. The parasite load was determined by immunohistochemistry, using VL-positive dog hyperimmune serum. Nine dogs showed an inflammatory infiltrate composed, predominantly, of plasma cells and macrophages. However, only eight dogs showed macrophages with amastigote forms of the parasite, immunolabeled in the cytoplasm. The medullary and reticular layers were the most affected areas, possibly due to a favorable microenvironment created by hormones in these regions. The density of parasites in the glandular tissue was not associated with clinical signs of VL (P > 0.05). However, the presence of the parasite was always associated with the presence of a granulomatous inflammatory infiltrate. This gland may not be an ideal place for the parasite's multiplication, but the presence of injuries to the glandular tissue could influence the dog's immune system, thus favoring the parasite's survival in the host's different organs.

O objetivo deste estudo foi analisar as alterações morfológicas e a carga parasitária da glândula adrenal de 45 cães com leishmaniose visceral (LV). Os animais eram provenientes do Centro de Controle de Zoonoses (CCZ) de Araçatuba (SP), região endêmica para a doença. Esses animais são submetidos à eutanásia, devido ao diagnóstico positivo para LV. Os cães foram classificados nos grupos assintomático, oligossintomático e sintomático. A determinação da carga parasitária foi feita por imuno-histoquímica, com utilização de soro hiperimune de cão positivo para LV. Em nove cães, verificou-se um infiltrado inflamatório, composto predominantemente por plasmócitos e macrófagos. Entretanto, apenas oito cães apresentaram macrófagos com formas amastigotas do parasito imunomarcadas em seu citoplasma. As camadas medular e reticulada foram as mais afetadas, possivelmente por um microambiente favorável criado pelos hormônios nestas regiões. A densidade de parasitos no tecido glandular não foi relacionada com os sinais clínicos de LV (P > 0,05). No entanto, a presença do parasito sempre esteve associada à presença de infiltrado inflamatório granulomatoso. Possivelmente, essa glândula não é um sítio ideal para a multiplicação do protozoário, mas a presença de injúrias no tecido glandular poderia influenciar o sistema imune do cão, favorecendo a sobrevivência do parasito nos diferentes órgãos do hospedeiro.

Caracterização anatomo-histoquímica das alterações viscerais de tartaruga de pente (Eretmochelys imbricata, Linnaeus 1766) encalhadas nos litorais dos estados do Espírito Santo e do rio de janeiro - Brasil, entre 2010 e2014

Eretmochelys imbricata (tartaruga de pente) é uma das cinco espécies de tartarugas marinhas encontradas no Brasil, está na lista de espécies ameaçadas de extinção e são protegidas por leis federais. Contudo, as descrições histopatológicas nesta espécie são escassas. Objetivou-se caracterizar pela anatomo-histoquímica os achados viscerais em E. imbricata do Espírito Santo e do Rio de Janeiro, Brasil. Para isto, foram avaliadas 29 E. imbricata que encalharam mortas ou que vieram a óbito durante tratamento. Amostras de cada animal foram fixadas em formol a 10% submetidas ao processamento histológico de rotina e classificadas histomorfologicamente. As colorações de Grocott e Ziehl Neelsen, feitas nas suspeitas de infecções, e o PAS nas de ruptura de membrana basal. Os ovos de parasitos foram classificados e mensurados. Dos animais, 100% eram juvenis, 75,86% encalharam vivas e 24,14% mortas, 79,31% fêmeas, 17,24% machos e em 3,45% não foi possível determinar o sexo. A necropsia revelou: condição corporal ruim; ascite; traqueia com espuma; pulmões com espuma, hiperemia, nódulos, cisto e cáseo; intestino delgado com nódulos na serosa e mucosa hiperêmica; intestino grosso com úlceras, corpo estranho, fecaloma e mucosa hiperêmica; fígado com padrão lobular evidente, hiperêmico e com nódulos; hiperemia em coração, estômago, pâncreas, rim, baço, adrenal, tireoide e cérebro. A histopatologia mostrou: pulmões com broncopneumonia heterofílica, pneumonia granulomatosa por ovos de parasito, bactérias e fungos, e congestão; nos intestinos, enterite granulomatosa por larvas e ovos de parasito, enterite ulcerativa e fibroangiomatosa; no fígado, esteatose, congestão, degeneração hidrópica e hepatite granulomatosa por ovos de parasito; pâncreas, pancreatite granulomatosa por ovos de parasito; rins com processo necrótico-degenerativo, membrana basal íntegra, e congestão; baço, esplenite granulomatosa por ovos de parasitos e congestão; e adrenal, adrenalite granulomatosa por ovos de parasito. Observaram-se correlações positivas e negativas entre as lesões nos diversos órgãos. Ovos de parasitos são do tipo 1. Conclui-se que a maioria das E. imbricata encalham vivas, são fêmeas, juvenis, com condição corporal ruim, apresenta inflamação granulomatosa, em especial, enterite por passagem de larva e os ovos pertencem aos gêneros Learedius, Monticellius e Hapalotrema. Lesões macro e microscópicas apresentam correlação positiva.

Eretmochelys imbricata (hawksbill turtle) is one of the five species of sea turtles found in Brazil. It is on the endangered species list and it is protected by federal laws even so, histopathological descriptions of it are scarce. Therefore, this work aimed to characterize through anatomy-histochemical technique the visceral findings of the E. imbricata from Espírito Santo and Rio de Janeiro states, Brazil. For this, it was evaluate 29 E. imbricata that stranded, dead or that died during the treatment. Samples of each animal were fixed at formaldehyde 10%, submitted to routine histological processing and classified histomorphologically. Colorations of Grocott and Ziehl Neelsen tests were made in case of suspected infections, PAS test in the basement membrane rupture and the eggs of parasites found in the turtles were classified and measured. Among the studied animals, 100% were juveniles, 75.86% stranded alive and 24.14% stranded dead, being them, 79.31% females, 17.24% males and 3.45% of the cases it was not possible to define the sex. The necropsy revealed: body condition bad; ascites; trachea with foam; lungs: with foam; hyperemia, nodules, cysts and caseous; small intestine: nodules in serous and hyperemic mucosa; large intestine: ulcers, foreign body, faecaloma and hyperemic mucosa; liver: clear lobular pattern, hyperemic and with nodules; hyperemia at heart, stomach, pancreas, kidney, spleen, adrenal, thyroid and brain. Histopathology showed: lungs, heterophilic bronchopneumonia, granulomatous pneumonia by parasite eggs, bacteria and fungi, and congestion; in the intestines, granulomatous enteritis by larvae and eggs of parasites, ulcerative enteritis and fibroangiomatosa; in the liver, steatosis, congestion, hydropic degeneration and granulomatous hepatitis by parasite eggs; pancreas, pancreatitis granulomatous by parasite eggs; kidney, necrotic-degenerative process, with full basement membrane, and congestion; spleen, granulomatous splenitis by eggs of parasites and congestion and adrenal, granulomatous adrenalitis by parasite eggs. It was observed positive and negative correlations between the lesions in various organs. Parasite eggs are of type 1. It is concluded that most of E. imbricata stranded live, were female, juveniles, with poor body condition, they presented granulomatous inflammation, in particular, enteritis by passage of larvae and the eggs belong to the genera Learedius, Monticellius and Hapalotrema. Macro and microscopic lesions are positively correlated.