Estudos para o incremento da produção de embriões in vivo e in vitro em vacas de corte taurinas e sintéticas / Studies to improve in vivo and in vitro embryo production in beef cows from taurine and synthetic breeds

O Brasil destaca-se por ser um dos líderes mundiais na produção in vitro de embriões, o que é decorrente do rebanho nacional ser predominantemente composto por raças zebuínas, que possuem maior número de folículos antrais aspiráveis. Por outro lado, vacas taurinas apresentam menor população folicular antral, o que limita o número de ovócitos obtidos por seção de aspiração folicular (ovum pick-up; OPU). Portanto, na região Sul do Brasil há demanda para produção tanto in vivo como in vitro de embriões de doadoras de raças taurinas e sintéticas. Este texto discute estudos recentes que buscam estratégias para aperfeiçoar as etapas envolvidas na produção de embriões bovinos, bem como para aumentar o aproveitamento de receptoras utilizadas nos programas de transferência de embriões (TE), com foco em vacas taurinas e sintéticas.(AU)

Brazil stands among the leaders on in vitro embryo production, as the Brazilian herd is predominantly composed by Zebu breeds, which have a greater number of antral follicles available to ovum pick-up (OPU). On the other hand, taurine cows have a lower antral follicle population, which limits the number of oocytes obtained by each OPU section. Therefore, in the Brazilian Southern region there is a demand for both in vivo and in vitro production of embryos from donors of taurine and synthetic breeds. This text discusses recent studies that seek strategies to improve the steps involved in the production of bovine embryos, as well as to increase the use of recipients in embryo transfer (ET) programs, focusing on taurine and synthetic cows.(AU)

Desafios e perspectivas na produção comercial de embriões in vivo e in vitro de raças taurinas e sintéticas / Current challenges and perspectives of in vivo and in vitro commercial embryo production of taurine and synthetic breeds

As biotécnicas de produção in vivo e in vitro de embriões bovinos permitem aumentar significativamente o número de descendentes de fêmeas genética e/ou zootecnicamente importantes. Porém, antes de se optar por um dos métodos, deve-se avaliar suas peculiaridades. A produção in vivo pode ser empregada de forma satisfatória tanto em zebuínos quanto em raças sintéticas e taurinas, permitindo a obtenção de, em média, seis a sete embriões viáveis por coleta, com boa tolerância à criopreservação. Já a produção in vitro é mais eficiente em raças zebuínas e sintéticas, visto que possuem maior número de folículos antrais aspiráveis. Além disso, esta técnica permite a produção de embriões sem estímulos hormonais exógenos, porém com menor criotolerância. Desse modo, a presente revisão discute os desafios atuais e perspectivas futuras na produção de embriões in vivo e in vitro com base nos dados da rotina de uma central de doadoras e laboratório de produção de embriões que desenvolve simultaneamente ambas as técnicas de produção de embriões na região Sul do Brasil.(AU)

Biotechniques for in vivo and in vitro production of bovine embryos allow to significantly increase the number of descendants from cows genetically and/or zootechnically superior. However, before opting for one of the methods, one should evaluate its peculiarities. In vivo production can be used satisfactorily both in zebu cattle and in synthetic and taurine breeds, allowing to obtain, on average, six to seven viable embryos per procedure, with good tolerance to cryopreservation. In vitro production is more efficient in Zebu and synthetic breeds, since they have a greater number of aspirable antral follicles. In addition, this technique allows the production of embryos without exogenous hormonal stimuli, but with lower cryotolerance. This review discusses current challenges and future perspectives in in vivo and in vitro embryo production based on routine data from an embryo production center and a laboratory that develop, simultaneously, the two embryo production techniques in southern Brazil.(AU)

Effects of oxygen supplementation in ewes subjected to laparoscopic ovum pick-up under total intravenous anesthesia / Efeitos da suplementação de oxigênio em ovelhas submetidas à aspiração de folículos por laparoscopia sob anestesia intravenosa total

Laparoscopy procedures are useful tools to perform some assisted reproductive biotechnologies in ewes, it requi-res general anesthesia and manoeuvres that might result in alteration of the cardiopulmonary function. For this reason, this study aimed to investigate the effects of oxygen supplementation as a therapeutic measure to mitigate these alterations in ewes submitted to laparoscopic ovum pick-up (LOPU) under total intravenous anesthesia (TIVA). Twenty-four healthy adult ewes were submitted to two LOPUs with a 21 days interval, under ketamine-midazolam anesthesia, and receiving each of the two experimental in random order, oxygen treatment (OT) 50 mL/kg/min of oxygen via endotracheal tube and control treatment (CT) not receive any inhalation treatment. Heart rate (HR), respiratory rate (fR), peripheral oxygen saturation (SpO2), mean arterial pressure (MAP), rectal temperature (RT), end-tidal CO2 concentration (EtCO2) and recovery anesthesia time were evaluated during LOPU, arterial blood gases and electrolytes were evaluated after induction of anesthesia and at the end of the LOPU. Variables were compared between groups and moments using ANOVA. MAP, SpO2, PaO2, SaO2 and pH were higher in OT, while EtCO2, PaCO2, temperature loss and recovery time were lower. These results allow to conclude that oxy-gen supplementation in ewes submitted to LOPU under TIVA provides benefits in order to mitigate physiological alterations.(AU)

Os procedimentos de laparoscopia são ferramentas úteis para realizar algumas biotecnologias de reprodução assistida em ovelhas, requer anestesia geral e manobras que podem resultar em alteração da função cardiopulmonar. Por esse motivo, este estudo teve como objetivo investigar os efeitos da suplementação de oxigênio como medida terapêutica para atenuar as alterações em ovelhas submetidas à Aspiração Folicular guiada por Laparoscopia (LOPU) sob anestesia venosa total (TIVA). Vinte e quatro ovelhas adultas saudáveis foram submetidas a duas LOPUs com intervalo de 21 dias, sob anestesia com cetamina-midazolam, recebendo cada um dos dois experimentos em ordem aleatória, tratamento com oxigênio (OT) 50 mL/kg/min de oxigênio via tubo endotraqueal e tratamento de controle (CT) não recebem nenhum tratamento por inalação. Frequência cardíaca (FC), frequência respiratória (FR), saturação periférica de oxigênio (SpO2), pressão arterial média (PAM), temperatura retal (TR), concentração expirada de CO2 (EtCO2) e tempo de recuperação da anestesia foram avaliados durante LOPU, arterial gasometria e eletrólitos foram avaliados após a indução da anestesia e ao final da COL. As variáveis foram comparadas entre grupos e momentos por meio de ANOVA. PAM, SpO2, PaO2, SaO2 e pH foram maiores no TO, enquanto EtCO2, PaCO2, perda de temperatura e tempo de recuperação foram menores. Estes resultados permitem concluir que a suplementação de oxigênio em ovelhas submetidas a LOPU sob TIVA proporciona benefícios no sentido de atenuar as alterações fisiológicas.(AU)

Infuence of heat stress on in vitro oocyte and embryo production in high-yielding Holstein cows / Influência do estresse calórico na produção in vitro de oócitos e embriões de vacas Holandesas de alta produtividade

The objective of this study was to evaluate the influence of thermal shock on oocytes used in the production of in vitro embryos (IVP) of high productivity Holstein cows on the day of follicular aspiration (OPU; 0), 30, 60 and 90 days before the OPU. From the mean temperature on day 0 and on the previous 30, 60 and 90 days, they were classifed into comfort group (TC; up to 15°C) and heat stress (HS; above 15°C) groups.Anegative influence was observed on oocytes and viable embryos (total and grade I). The heat stress in the periods of 30 and 60 days prior to OPU resulted in lower production of viable oocytes (P=0.0028; P=0.0092, respectively). Under stress, on the day of OPU (HS-OPU), cows showed no reduction in the amount of viable oocytes (P=0.5497) and there was no influence of temperature for the group stressed 90 days before OPU (P=0.8287). For total embryos, the difference occurred only in the HS-30 group (P=0.0317), where the groups HS-OPU, HS-60, HS-90 presented, respectively, P=0. 1987, P=0.0596 and P=0.4580. Regarding the production of embryos of grade 1, there was no difference for the groups HS-OPU (P=0.2291) and HS-90 (P=0.2868), but there was a reduction for HS-30 (P=0.0143) and HS-60 (P=0.0253). In summary, heat stress had a negative impact when it occurred 30 or 60 days before follicular aspiration. In addition, 30 days seems to be the period of more susceptibility and that causes the greatest deleterious effects on oocyte viability and IVP.(AU)

Objetivou-se avaliar a infuência do estresse térmico em oócitos utilizados na produção in vitro de embriões (PIV) bovinos da raça Holandesa de alta produtividade no dia da aspiração folicular (OPU; 0), 30, 60 e 90 dias antes da OPU. A partir da temperatura média no dia 0 e aos 30, 60 e 90 dias anteriores, foram classificados nos grupos conforto (CT; até 15°C) e estresse por calor (ET -acima de 15°C). Observou-se infuência negativa em oócitos e embriões viáveis (total e grau I). A submissão ao estresse térmico nos períodos de 30 e 60 dias anteriores à OPU resultou em menor produção de oócitos viáveis (P=0,0028; P=0,0092, respectivamente). Sob estresse, no dia da OPU (ET-OPU), as vacas não apresentaram redução na quantidade de oócitos viáveis (P=0,5497) e não houve infuência da temperatura para o grupo estressado 90 dias antes da OPU (P=0,8287). Para embriões totais, a diferença ocorreu apenas no grupo ET-30 (P=0,0317), onde os grupos ET-OPU, ET-60, ET-90 apresentaram, respectivamente, P=0,1987, P=0,0596 e P=0,4580. Em relação à produção de embriões grau 1, não houve diferença para os grupos ET-OPU (P=0,2291) e ET-90 (P=0,2868), porém houve redução para ET-30 (P=0,0143) e ET- 60 (P=0,0253). Em resumo, o estresse por calor teve impacto negativo quando ocorreu 30 ou 60 dias antes da aspiração folicular. Além disso, 30 dias parece ser o período de maior suscetibilidade e que causa os maiores efeitos deletérios na viabilidade oocitária e na PIV.(AU)

Relationships between antral follicle counts and ovarian morphology of Bos indicus of different ages / Relações entre a contagem de folículos antrais e a morfologia ovariana de Bos indicus de diferentes idades

This study aimed to evaluate the relationship between the antral follicle count (AFC) and the ovarian morphology of Bos indicus in different age groups: 12-23 months (G1), 24-35 months (G2), 36-47 months (G3), 48-59 months (G4), and >60 months (G5). Ovaries were collected individually and sent to the laboratory, where we measured AFC, the diameter and weight of the ovaries, dominant follicle (DF, >8mm), corpus luteum (CL), and small follicles (SF, <8mm). AFC were classified as high, intermediate-high, intermediate-low, and low. A group of ovaries was subjected to follicular aspiration to evaluate the morphological quality of the recovered cumulus oocyte complexes (COCs). Mean AFC did not vary between ages. The morphological characteristic that was most closely correlated with AFC was the weight of the small follicles. There was no relationship between AFC and the weight and diameter of the DF and CL. Quality of the COCs was superior in ovaries in which the CL was present, but it did not vary between the AFC classes. We conclude that AFC can be performed on a single ovary, regardless of the presence, diameter, and weight of the CL and DF in zebu between 12 and 60 months old.

O presente estudo teve como objetivo avaliar a relação entre a contagem de folículos antrais (CFA) e a morfologia ovariana de Bos indicus em diferentes faixas etárias: 12-23 meses (G1), 24-35 meses (G2), 36-47 meses (G3), 48-59 meses (G4) e >60 meses (G5). Os ovários foram coletados individualmente e enviados ao laboratório, onde suas características morfológicas foram medidas: CFA, diâmetro e peso dos ovários, do folículo dominante (FD, ≥8 mm), do corpo lúteo (CL) e dos folículos pequenos (SF, <8 mm). A CFA foi classificada como alta, intermediária-alta, intermediária-baixa e baixa. Um grupo de ovários foi submetido à aspiração folicular para avaliar a qualidade morfológica dos complexos cumulus oócitos (COCs) recuperados. A CFA média não variou entre as idades. A característica morfológica que se correlacionou mais intimamente com a CFA foi o peso dos folículos pequenos. Não houve relação entre a CFA e o peso e o diâmetro do FD e do CL. A qualidade dos COCs foi superior em ovários em que o CL estava presente, mas não variou entre as classes de CFA. Concluiu-se que a CFA pode ser realizada em um único ovário, independentemente da presença, do diâmetro e do peso do CL e do FD em zebuínos entre 12 e 60 meses de vida.

Synchronization with estradiol benzoate in the presence of the corpus luteum in Wagyu cows increases the number of medium follicles but does not interfere with in vitro production of embryos / Sincronização com benzoato de estradiol na presença do corpo lúteo em vacas de Wagyu aumenta o número de folículos médios, mas não interfere com a produção in vitro de embriões

Reproductive biotechnologies are emerging as an important element for livestock; however, some strategies must be modified to adapt to different breeding systems, such as the use of follicular synchronization protocols. This study aimed to evaluate follicular synchronization using estradiol benzoate (EB), in the presence of the corpus luteum (CL) from Wagyu oocyte donors in in vitro embryo production (IVEP). Rounds of IVEP were performed in heifers and cows (n=19) that were classified into three groups: G1/CL - animals with CL, G2/WCL - animals without CL, and G3/CL + EB - animals with CL that were subjected to follicular synchronization with EB at D0. The groups G1/CL and G2/WCL were considered the control and undertook the natural process of follicular dynamics. The results showed that the synchronization of the follicular wave with the application of EB in the presence of CL, presented a smaller number of small (6.05 ± 0.55) and large follicles (0.45 ± 0.15), but increased (P < 0.05) the number of medium-sized follicles (16.20 ± 0.90). However, the results of ovum pick up showed that regardless of whether or not EB was applied, and regardless of the presence or absence of CL in the Wagyu donor, there was no difference among the groups (P > 0.05) concerning the number of viable oocytes and the viability rate. It was concluded that follicular synchronization using EB in Wagyu oocyte donors that presented a CL, increased the number of medium-sized follicles. However, there was no improvement in the efficiency of ovum pick up, in vitro embryo production, and pregnancy rate.(AU)

As biotecnologias reprodutivas estão emergindo como um elemento importante para a pecuária, entretanto, algumas estratégias devem ser modificadas para se adaptar a diferentes sistemas de criação, como o uso de protocolos de sincronização folicular. Este estudo teve como objetivo avaliar a sincronização folicular utilizando benzoato de estradiol (BE), na presença do corpo lúteo (CL) de doadoras de oócitos Wagyu na produção in vitro de embriões (PIVE). Sessões de PIVE foram realizadas em novilhas e vacas (n=19) que foram classificadas em três grupos: G1/CL - animais com CL, G2/SCL - animais sem CL e G3/CL+BE - animais com CL que foram submetidos para sincronização folicular com BE em D0. Os grupos G1/CL e G2/ SCL foram considerados o controle e realizaram o processo natural da dinâmica folicular. Os resultados mostraram que a sincronização da onda folicular com a aplicação de BE na presença de CL, apresentou um menor número de folículos pequenos (6,05 ± 0,55) e grandes (0,45 ± 0,15), mas aumentou (P < 0,05) o número de folículos de tamanho médio (16,20 ± 0,90). No entanto, os resultados da ovum pick up mostraram que independente da aplicação ou não de BE, e independente da presença ou ausência de CL na doadora Wagyu, não houve diferença entre os grupos (P > 0,05) quanto ao número de oócitos viáveis e a taxa de viabilidade. Concluiu-se que a sincronização folicular por meio de BE em doadoras de oócitos Wagyu que apresentaram CL, aumentou o número de folículos de tamanho médio. No entanto, não houve melhora na eficiência da ovum pick up, na produção in vitro de embriões e na taxa de prenhez.(AU)

Flushing folicular: uma nova alternativa para melhorar a obtenção de oócitos por aspiração ovariana em bovinos / Follicular flushing: a new alternative to improve oocyte recovery by ovarian aspiration in cattle

A lavagem folicular (flushing) associado à aspiração folicular, ou também chamado deflushing folicular (FF) é uma técnica bastante utilizada para a recuperação de oócitos em mulheres. Em animais, já foi empregado para a aspiração folicular transvaginal em equinose na aspiração de ovários bovinos de abatedouros. A recuperação do maior número possível de oócitos é o propósito desse método, pois corresponde a uma ou mais lavagens do folículo puncionado imediatamente após a aspiração folicular. Este trabalho objetivou comparar ouso do FF associado à aspiração folicular (AF) em ovários bovinos de frigoríficos, quanto às taxas de recuperação de oócitos (TRO) e a morfologia dos oócitos. Na AF utilizou-se agulha 18G acoplada a seringa. No FF foi elaborado um sistema manual no laboratório INVITRO/CEBRAN, utilizando equipo, torneira de 3 vias, agulha, seringa, tubo e bomba de vácuo. Neste trabalho, ocorreu apenas uma lavagem intrafolicular. Os oócitos foram classificados de A (COC) a F (Desnudos), conforme o número de camada de células do cumulus, grau de compactação, coloração e uniformidade do citoplasma. Na taxa de obtenção de oócitos por ovário não houve diferença estatística (FF 11±3,12 vs. AF11,63±3,74; p>0,05); porém existiu diferenças na TRO por folículo aspirado (FF88,13%±16,44 vs. AF 71,50%±14,47; p<0,05) e na taxa de recuperação de oócitos grau A(FF 27%±10,98 vs. AF 12,75%±8,56; p<0,05). Além disso, o FF aumentou o tempo de colheita dos oócitos devido a lavagem extra (p<0,01). Com os dados obtidos pode-se observar que o flushing folicular melhorou a TRO em ovários bovinos, favorecendo maior recuperação de COCs.

Follicular lavage (flushing) associated with follicular aspiration, or also called follicular flushing (FF) is a technique widely used for the oocyte recovery in women. In animals, it has already been used by transvaginal follicular aspiration in horses and aspiration of bovine ovaries from slaughterhouses. The recovery of the largest possible number of oocytes is the purpose of this method, as it corresponds to one or more washes of the punctured follicle immediately after follicular aspiration. This study aimed to compare the use of FF associated with follicular aspiration (FA) in bovine ovaries from slaughterhouses, in terms of oocyte recovery rates (ORT) and oocyte morphology. In FA, an 18G needle attached to a syringe was used. In the FF a manual system was elaborated in the INVITRO / CEBRAN laboratory, using parenteral infusion equipment, 3-way stopcock, needle, syringe, tube and vacuum pump. In this study, there was only an intra-follicular lavage. Oocytes were classified from A (COC) to F (Denudes), according to the number of cumulus cell layers, degree of compaction, staining and uniformity of the cytoplasm. There was no statistical difference in the oocytes rate obtained by ovary (FF 11±3.12 vs. FA 11.63±3.74; p> 0.05); however, there were differences in ORT per aspirated follicle (FF 88.13%±16.44 vs. FA 71.50%±14.47;p<0.05) and in the recovery rate of grade A oocytes (FF 27%±10.98 vs. AF 12.75%±8.56;p<0.05). In addition, the FF increased the time to harvest the oocytes due to extra washing(p<0.01). With the data obtained, it can be seen that follicular flushing improved ORT in bovine ovaries, favoring greater recovery of COCs.

Flushing folicular: uma nova alternativa para melhorar a obtenção de oócitos por aspiração ovariana em bovinos / Follicular flushing: a new alternative to improve oocyte recovery by ovarian aspiration in cattle

A lavagem folicular (flushing) associado à aspiração folicular, ou também chamado deflushing folicular (FF) é uma técnica bastante utilizada para a recuperação de oócitos em mulheres. Em animais, já foi empregado para a aspiração folicular transvaginal em equinose na aspiração de ovários bovinos de abatedouros. A recuperação do maior número possível de oócitos é o propósito desse método, pois corresponde a uma ou mais lavagens do folículo puncionado imediatamente após a aspiração folicular. Este trabalho objetivou comparar ouso do FF associado à aspiração folicular (AF) em ovários bovinos de frigoríficos, quanto às taxas de recuperação de oócitos (TRO) e a morfologia dos oócitos. Na AF utilizou-se agulha 18G acoplada a seringa. No FF foi elaborado um sistema manual no laboratório INVITRO/CEBRAN, utilizando equipo, torneira de 3 vias, agulha, seringa, tubo e bomba de vácuo. Neste trabalho, ocorreu apenas uma lavagem intrafolicular. Os oócitos foram classificados de A (COC) a F (Desnudos), conforme o número de camada de células do cumulus, grau de compactação, coloração e uniformidade do citoplasma. Na taxa de obtenção de oócitos por ovário não houve diferença estatística (FF 11±3,12 vs. AF11,63±3,74; p>0,05); porém existiu diferenças na TRO por folículo aspirado (FF88,13%±16,44 vs. AF 71,50%±14,47; p<0,05) e na taxa de recuperação de oócitos grau A(FF 27%±10,98 vs. AF 12,75%±8,56; p<0,05). Além disso, o FF aumentou o tempo de colheita dos oócitos devido a lavagem extra (p<0,01). Com os dados obtidos pode-se observar que o flushing folicular melhorou a TRO em ovários bovinos, favorecendo maior recuperação de COCs.(AU)

Follicular lavage (flushing) associated with follicular aspiration, or also called follicular flushing (FF) is a technique widely used for the oocyte recovery in women. In animals, it has already been used by transvaginal follicular aspiration in horses and aspiration of bovine ovaries from slaughterhouses. The recovery of the largest possible number of oocytes is the purpose of this method, as it corresponds to one or more washes of the punctured follicle immediately after follicular aspiration. This study aimed to compare the use of FF associated with follicular aspiration (FA) in bovine ovaries from slaughterhouses, in terms of oocyte recovery rates (ORT) and oocyte morphology. In FA, an 18G needle attached to a syringe was used. In the FF a manual system was elaborated in the INVITRO / CEBRAN laboratory, using parenteral infusion equipment, 3-way stopcock, needle, syringe, tube and vacuum pump. In this study, there was only an intra-follicular lavage. Oocytes were classified from A (COC) to F (Denudes), according to the number of cumulus cell layers, degree of compaction, staining and uniformity of the cytoplasm. There was no statistical difference in the oocytes rate obtained by ovary (FF 11±3.12 vs. FA 11.63±3.74; p> 0.05); however, there were differences in ORT per aspirated follicle (FF 88.13%±16.44 vs. FA 71.50%±14.47;p<0.05) and in the recovery rate of grade A oocytes (FF 27%±10.98 vs. AF 12.75%±8.56;p<0.05). In addition, the FF increased the time to harvest the oocytes due to extra washing(p<0.01). With the data obtained, it can be seen that follicular flushing improved ORT in bovine ovaries, favoring greater recovery of COCs.(AU)

Estacionalidade e a produção de oócitos e embriões in vitro em vacas Gir leiteiro na região sudeste do Brasil / Seasonality and the production of oocytes and in vitro embryos in Gir dairy cows in the southeast region of Brazil

A eficiência reprodutiva de doadoras de embriões Bos taurus é afetada pelas estações devido ao estresse calórico em países de clima tropical e temperado. O objetivo do estudo foi avaliar o efeito das condições climáticas de verão e inverno na produção de oócitos e embriões in vitro na raça Gir Leiteiro (Bos indicus) em fazendas da região Sudeste do Brasil. Os parâmetros avaliados foram: total de oócitos recuperados (OT), oócitos viáveis (OV) e percentual de oócitos viáveis sobre o total (POV); embriões produzidos (EP) e percentual de embriões produzidos (PEP) sobre o total de estruturas recuperadas pela aspiração folicular guiada por ultrassonografia (OPU). Os oócitos foram obtidos de 153 doadoras pluríparas de diferentes idades e ordens de parição de 10 rebanhos. As médias obtidas em 380 aspirações foliculares (OPU) nos meses de verão foram: OT=14,8; OV=12,6; EP= 3,4; PEP=22,3%, e no inverno de OT=13,4; OV=10,8; EP=3,5; PEP=26,1%, apresentando coeficiente de variação de até 84%, porém sem diferença estatísticas (p<0,05) entre estes períodos, utilizando-se o teste de Kruscal Wallis s (p<0,05). Apenas a percentagem de oócitos viáveis foi maior (p<0,05) no período de verão (POV=84,4 vs. 80,0%), contudo, o total de embriões PIVE foi semelhante nos dois períodos. Conclui-se que a produção de embriões da raça Gir Leiteiro, criadas na região Sudeste do Brasil, não foi afetada pela sazonalidade climática.

The reproductive performance of B.taurus embryo donors is affected in many tropical and temperate countries. The objective of this study was to evaluate the effects of the climatic conditions of summer and winter climatic conditions on the production of oocytes and in vitro embryos in dairy cows of the breed Gir Leiteiro (Bos indicus) at farms in Southeast of the Brazil. The variable answers evaluated were the total oocytes recovered (TO) and percentage of viable oocytes over the total (PVO); embryo production (EP) and percentage of embryos in viable oocytes (PE) over the total of structures recovered by follicular aspiration guided by ultrasonography (OPU). The oocytes analyzed were obtained from 10 herds and 153 pubertal donors of different ages and orders of parturition. The average from 380 ovum pick up (OPU) during summer were: TO=14.8; PVO=12.6; EP=3.4; PE=22.3%, and TO=13.4; PVO=10.8; EP=3.5; PE=26.1%, with variation coefficient of up to 84%, and no differences evaluated through the Kruscal Wallis (p<0.05). Only the percentage of viable oocytes was higher (p<0.05) in the summer period (PVO=84.4 vs. 80.0%). However, the embryo production (IVEP) was similar in both seasons (summer and winter). Therefore, we could conclude that the embryo production of Dairy Gir cows in Southeast of the Brazil was not affected by weather seasonality.

Estacionalidade e a produção de oócitos e embriões in vitro em vacas Gir leiteiro na região sudeste do Brasil / Seasonality and the production of oocytes and in vitro embryos in Gir dairy cows in the southeast region of Brazil

A eficiência reprodutiva de doadoras de embriões Bos taurus é afetada pelas estações devido ao estresse calórico em países de clima tropical e temperado. O objetivo do estudo foi avaliar o efeito das condições climáticas de verão e inverno na produção de oócitos e embriões in vitro na raça Gir Leiteiro (Bos indicus) em fazendas da região Sudeste do Brasil. Os parâmetros avaliados foram: total de oócitos recuperados (OT), oócitos viáveis (OV) e percentual de oócitos viáveis sobre o total (POV); embriões produzidos (EP) e percentual de embriões produzidos (PEP) sobre o total de estruturas recuperadas pela aspiração folicular guiada por ultrassonografia (OPU). Os oócitos foram obtidos de 153 doadoras pluríparas de diferentes idades e ordens de parição de 10 rebanhos. As médias obtidas em 380 aspirações foliculares (OPU) nos meses de verão foram: OT=14,8; OV=12,6; EP= 3,4; PEP=22,3%, e no inverno de OT=13,4; OV=10,8; EP=3,5; PEP=26,1%, apresentando coeficiente de variação de até 84%, porém sem diferença estatísticas (p<0,05) entre estes períodos, utilizando-se o teste de Kruscal Wallis s (p<0,05). Apenas a percentagem de oócitos viáveis foi maior (p<0,05) no período de verão (POV=84,4 vs. 80,0%), contudo, o total de embriões PIVE foi semelhante nos dois períodos. Conclui-se que a produção de embriões da raça Gir Leiteiro, criadas na região Sudeste do Brasil, não foi afetada pela sazonalidade climática.(AU)

The reproductive performance of B.taurus embryo donors is affected in many tropical and temperate countries. The objective of this study was to evaluate the effects of the climatic conditions of summer and winter climatic conditions on the production of oocytes and in vitro embryos in dairy cows of the breed Gir Leiteiro (Bos indicus) at farms in Southeast of the Brazil. The variable answers evaluated were the total oocytes recovered (TO) and percentage of viable oocytes over the total (PVO); embryo production (EP) and percentage of embryos in viable oocytes (PE) over the total of structures recovered by follicular aspiration guided by ultrasonography (OPU). The oocytes analyzed were obtained from 10 herds and 153 pubertal donors of different ages and orders of parturition. The average from 380 ovum pick up (OPU) during summer were: TO=14.8; PVO=12.6; EP=3.4; PE=22.3%, and TO=13.4; PVO=10.8; EP=3.5; PE=26.1%, with variation coefficient of up to 84%, and no differences evaluated through the Kruscal Wallis (p<0.05). Only the percentage of viable oocytes was higher (p<0.05) in the summer period (PVO=84.4 vs. 80.0%). However, the embryo production (IVEP) was similar in both seasons (summer and winter). Therefore, we could conclude that the embryo production of Dairy Gir cows in Southeast of the Brazil was not affected by weather seasonality.(AU)

Effect of the antral follicle count of Bos taurus × Bos indicus dairy cows on in vitro embryo production / Efeito da contagem de folículos antrais de vacas Bos taurus x Bos indicus com aptidão leiteira na produção in vitro de embriões

This study aimed to evaluate the potential of Girolando (Bos taurus × Bos indicus) cows with high and low antral follicle counts (AFC) for the in vitro production of bovine embryos (IVEP), as well as the pregnancy rates of the recipients of these embryos. Girolando cows (Bos taurus × Bos indicus) were classified as high and low AFC when they had 35-52 (n = 13) and 11-17 follicles (n = 15), respectively. All animals were subjected to repeated follicular aspiration [Ovum pick-up (OPU)] and subsequent IVEP sessions. The synchronization protocol of the recipients was performed on a random day of the estrous cycle (Day 0) with the implantation of progesterone, estradiol benzoate, and prostaglandin. The high AFC group had higher aspirated oocyte/OPU (42.6 ± 5.2 vs. 14.6 ± 1.9; p < 0.01) and cultured oocyte/OPU (38.1 ± 6.6 vs. 12.3 ± 2.8; p < 0.01) averages as well as a higher blastocyst percentage on D7 (23.0 ± 1.0% vs. 18.4 ± 1.5%; p < 0.05) and higher pregnancy rate (42.7 ± 2.7% vs. 39.7 ± 4.6%; p< 0.05) than the low AFC group. Thus, we can conclude that animals with high AFC had better IVEP success rates than animals with low AFC.

Este estudo teve como objetivo avaliar o potencial de produção in vitro de embriões (PIVE) bovinos de vacas da raça Girolando (Bos taurus x Bos indicus) com alta e baixa contagem de folículos antrais (CFA), bem como a taxa de prenhez nas receptoras destes embriões. As vacas da raça Girolando (Bos taurus x Bos indicus) foram classificadas como de alta CFA quando apresentavam de 35 a 52 folículos(n = 13) e baixa CFA, quando apresentavam de 11 a 17 folículos (n = 15). Todos os animais foram submetidos a repetidas sessões de aspiração folicular (OPU) e subsequente PIVE. O protocolo de sincronização das receptoras foi realizado em um dia aleatório do ciclo estral (Dia 0) com implante de progesterona, benzoato de estradiol e prostaglandina. O grupo de alta CFA obteve uma maior média de oócitos aspirados / OPU (42,6 ± 5,2 vs. 14,6 ± 1,9; p < 0,01); oócitos cultivados / OPU (38,1 ± 6,6 vs.12,3 ± 2,8; p < 0,01); porcentagem de blastocistos em D7 (23,0 ± 1,0% vs. 18,4 ± 1,5%; p < 0,05) e taxa de prenhez (42,7 ± 2,7% vs. 39,7 ± 4,6%; p < 0,05) maiores quando comparado ao grupo de baixa CFA. Desta maneira, podemos concluir que os animais de alta CFA apresentaram melhores taxas de PIVE que os animais de baixa CFA.

In vitro embryo production in Nelore cows supplemented with calcium salts of long-chain fatty acid / Produção de embriões in vitro em vacas Nelore suplementadas com sais de cálcio e ácidos graxos de cadeia longa

This study was performed to evaluate the effects of supplementation of lactating Nelore cows with calcium salts of long-chain fatty acids (Ca-LCFA) of soybean oil on in vitro oocytes competency, cleavage rate, embryo production rate, pregnancy rate, and sex ratio of transferred embryos. Fifteen multiparous Nelore cows grazed on a Tifton 85 pasture were allotted to two treatments: (1) supplement without fat inclusion (CONT, n = 6) and (2) supplement containing 47.2 g Ca-LCFA /kg (to provide an intake of 0.2 kg Ca-LCFA/day) based on dry matter (n = 9). Animals were subjected to 2.53 ± 1.35 rounds of consecutive ovum pick up at intervals of 27.65 ± 21.72 days. Oocytes were morphologically evaluated, selected, maturated, fertilized, and cultivated for embryo production in vitro and then transferred into recipients who had previously undergone an embryo transfer protocol at a fixed time. The number of aspirated oocytes, the proportion of viable oocytes, cleavage rate, embryo percentage, pregnancy rate, and sex ratio were not affected when Nelore cows were supplemented with Ca-LCFA of soybean oil compared with non-supplemented Nelore cows. In conclusion, our results suggest that feeding a supplement containing 47.2 g Ca-LCFA/kg (to provide an intake of 0.2 kg Ca-LCFA/day) to Nelore cows does not affect in vitro embryo production in lactating Nelore cows. However, further studies...

Este estudo foi realizado para avaliar os efeitos da suplementação de vacas Nelores em lactação com sais de cálcio de ácidos graxos de cadeia longa (Ca-SCACL) feitos com óleo de soja sobre a competência in vitro de oócitos, taxa de clivagem, taxa de produção de embriões, taxa de prenhez e proporção de sexo de embriões transferidos. Foram utilizadas 15 vacas Nelore (lactantes, multíparas e mantidas em pastagem de Tifton 85) distribuídas em dois tratamentos: (1) suplemento sem inclusão de lipídios (CONT, n = 6) e (2) suplemento contendo 47,2 g Ca-SCACL/kg (para proporcionar uma ingestão de 0,2 kg Ca-SCACL/ dia) com base na matéria seca (n = 9). Os animais foram submetidos a 2,53 ± 1,35 rodadas consecutivas de aspiração folicular a intervalos de 27,65 ± 21,72 dias. Os oócitos foram avaliados morfologicamente, selecionados, maturados, fertilizados e cultivados para produção de embriões in vitro. Em seguida, os embriões foram transferidos para receptoras previamente submetidas a um protocolo de transferência de embriões em tempo fixo. O número de oócitos aspirados, a proporção de oócitos viáveis, a taxa de clivagem, a porcentagem de embriões, a taxa de prenhez e a proporção de sexo de embriões não foram afetados quando as vacas Nelore foram suplementadas com Ca-SCACL de óleo de soja em comparação com as vacas Nelore não suplementadas. Em conclusão, nossos resultados sugerem que suplemento contendo 47,2 g de Ca-SCACL/kg (para fornecer uma ingestão de 0,2 kg de Ca-SCACL) não afeta a produção in vitro de embriões de vacas Nelore em lactação. No entanto, novos estudos utilizando doses mais altas de gordura na dieta poderiam ser úteis para determinar o seu potencial sobre produção embrionária in vitro.

Use of melatonin in the in vitro production of bovine embryos / Uso da melatonina na produção in vitro de embriões bovinos

We aimed to assess the effects of melatonin in the in vitro production of bovine embryos. Our experiment was conducted at the Laboratório de Reprodução Animal of the Universidade Estadual do Maranhão. The cumulus-oocyte complexes (COCs) were distributed among treatments at concentrations of 0, 10-1, 10-3 and 10-5 µMol/L melatonin. Our experiment was further divided into two: the first was to assess the effect of different concentrations of melatonin (treatments) on the maturation rate of COCs, and the second was to assess the effects of melatonin treatments on the in vitro production of bovine embryos. The results from the first experiment demonstrated no significant difference between the in vitro maturation rate of the cultivated COCs in treatments with melatonin. In the second experiment, however, melatonin treatments yielded statistically higher cleavage, morula and blastocyst rates in the 10-5 µM group (52.9%, 52.9%, and 35.3%, respectively), and lower rates in the 10-1 µM group (19.5%, 19.5% and 7.8%, respectively), compared to the others. The control group (no melatonin) and the 10-3 µM group showed similar results. We concluded that supplementation of melatonin in the in vitro maturation medium resulted in no improvement in the oocyte maturation rate, but in the in vitro production of embryos at different concentrations, the 10-5 µM group displayed better results, but with no improvement in the variables (P < 0.05).(AU)

Objetivou-se avaliar os efeitos da melatonina na produção in vitro de embriões bovinos. O experimento foi conduzido no Laboratório de Reprodução Animal da Universidade Estadual do Maranhão. Os complexos cumulus-oócitos (CCOs) foram distribuídos entre os tratamentos 0, 10-1, 10-3 e 10-5 µmol/L de melatonina. A avaliação foi dividida em dois experimentos, onde o primeiro avaliou o efeito dessas diferentes concentrações de melatonina (tratamentos) sobre a taxa de maturação dos CCOs e o segundo, o efeito desses tratamentos com melatonina sobre a produção in vitro de embriões bovinos. Os resultados no primeiro experimento demonstraram não haver diferença significativa na taxa de maturação in vitro dos CCOs cultivados no tratamento com melatonina. No entanto, o tratamento com melatonina no segundo experimento, as taxas de clivagens, mórulas e blastocistos, o grupo 10-5 µM foi estatisticamente superior (52,9%, 52,9% e 35,3%, respectivamente) e o grupo 10-1 µM inferior (19,5%, 19,5% e 7,8%, respectivamente) aos outros grupos. O grupo controle (sem melatonina) e o grupo 10-3 µM obtiveram resultados semelhantes. Concluiu-se que a suplementação da melatonina no meio de maturação in vitro não evidenciou melhoras na taxa de maturação dos oócitos, porém na produção in vitro de embriões em diferentes concentrações, o grupo 10-5 µM apresentou melhores resultados mesmo não havendo melhorias nas variáveis (P<0,05).(AU)

Effect of the antral follicle count of Bos taurus × Bos indicus dairy cows on in vitro embryo production / Efeito da contagem de folículos antrais de vacas Bos taurus x Bos indicus com aptidão leiteira na produção in vitro de embriões

This study aimed to evaluate the potential of Girolando (Bos taurus × Bos indicus) cows with high and low antral follicle counts (AFC) for the in vitro production of bovine embryos (IVEP), as well as the pregnancy rates of the recipients of these embryos. Girolando cows (Bos taurus × Bos indicus) were classified as high and low AFC when they had 35-52 (n = 13) and 11-17 follicles (n = 15), respectively. All animals were subjected to repeated follicular aspiration [Ovum pick-up (OPU)] and subsequent IVEP sessions. The synchronization protocol of the recipients was performed on a random day of the estrous cycle (Day 0) with the implantation of progesterone, estradiol benzoate, and prostaglandin. The high AFC group had higher aspirated oocyte/OPU (42.6 ± 5.2 vs. 14.6 ± 1.9; p < 0.01) and cultured oocyte/OPU (38.1 ± 6.6 vs. 12.3 ± 2.8; p < 0.01) averages as well as a higher blastocyst percentage on D7 (23.0 ± 1.0% vs. 18.4 ± 1.5%; p < 0.05) and higher pregnancy rate (42.7 ± 2.7% vs. 39.7 ± 4.6%; p< 0.05) than the low AFC group. Thus, we can conclude that animals with high AFC had better IVEP success rates than animals with low AFC.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar o potencial de produção in vitro de embriões (PIVE) bovinos de vacas da raça Girolando (Bos taurus x Bos indicus) com alta e baixa contagem de folículos antrais (CFA), bem como a taxa de prenhez nas receptoras destes embriões. As vacas da raça Girolando (Bos taurus x Bos indicus) foram classificadas como de alta CFA quando apresentavam de 35 a 52 folículos(n = 13) e baixa CFA, quando apresentavam de 11 a 17 folículos (n = 15). Todos os animais foram submetidos a repetidas sessões de aspiração folicular (OPU) e subsequente PIVE. O protocolo de sincronização das receptoras foi realizado em um dia aleatório do ciclo estral (Dia 0) com implante de progesterona, benzoato de estradiol e prostaglandina. O grupo de alta CFA obteve uma maior média de oócitos aspirados / OPU (42,6 ± 5,2 vs. 14,6 ± 1,9; p < 0,01); oócitos cultivados / OPU (38,1 ± 6,6 vs.12,3 ± 2,8; p < 0,01); porcentagem de blastocistos em D7 (23,0 ± 1,0% vs. 18,4 ± 1,5%; p < 0,05) e taxa de prenhez (42,7 ± 2,7% vs. 39,7 ± 4,6%; p < 0,05) maiores quando comparado ao grupo de baixa CFA. Desta maneira, podemos concluir que os animais de alta CFA apresentaram melhores taxas de PIVE que os animais de baixa CFA.

In vitro embryo production in Nelore cows supplemented with calcium salts of long-chain fatty acid / Produção de embriões in vitro em vacas Nelore suplementadas com sais de cálcio e ácidos graxos de cadeia longa

This study was performed to evaluate the effects of supplementation of lactating Nelore cows with calcium salts of long-chain fatty acids (Ca-LCFA) of soybean oil on in vitro oocytes competency, cleavage rate, embryo production rate, pregnancy rate, and sex ratio of transferred embryos. Fifteen multiparous Nelore cows grazed on a Tifton 85 pasture were allotted to two treatments: (1) supplement without fat inclusion (CONT, n = 6) and (2) supplement containing 47.2 g Ca-LCFA /kg (to provide an intake of 0.2 kg Ca-LCFA/day) based on dry matter (n = 9). Animals were subjected to 2.53 ± 1.35 rounds of consecutive ovum pick up at intervals of 27.65 ± 21.72 days. Oocytes were morphologically evaluated, selected, maturated, fertilized, and cultivated for embryo production in vitro and then transferred into recipients who had previously undergone an embryo transfer protocol at a fixed time. The number of aspirated oocytes, the proportion of viable oocytes, cleavage rate, embryo percentage, pregnancy rate, and sex ratio were not affected when Nelore cows were supplemented with Ca-LCFA of soybean oil compared with non-supplemented Nelore cows. In conclusion, our results suggest that feeding a supplement containing 47.2 g Ca-LCFA/kg (to provide an intake of 0.2 kg Ca-LCFA/day) to Nelore cows does not affect in vitro embryo production in lactating Nelore cows. However, further studies...(AU)

Este estudo foi realizado para avaliar os efeitos da suplementação de vacas Nelores em lactação com sais de cálcio de ácidos graxos de cadeia longa (Ca-SCACL) feitos com óleo de soja sobre a competência in vitro de oócitos, taxa de clivagem, taxa de produção de embriões, taxa de prenhez e proporção de sexo de embriões transferidos. Foram utilizadas 15 vacas Nelore (lactantes, multíparas e mantidas em pastagem de Tifton 85) distribuídas em dois tratamentos: (1) suplemento sem inclusão de lipídios (CONT, n = 6) e (2) suplemento contendo 47,2 g Ca-SCACL/kg (para proporcionar uma ingestão de 0,2 kg Ca-SCACL/ dia) com base na matéria seca (n = 9). Os animais foram submetidos a 2,53 ± 1,35 rodadas consecutivas de aspiração folicular a intervalos de 27,65 ± 21,72 dias. Os oócitos foram avaliados morfologicamente, selecionados, maturados, fertilizados e cultivados para produção de embriões in vitro. Em seguida, os embriões foram transferidos para receptoras previamente submetidas a um protocolo de transferência de embriões em tempo fixo. O número de oócitos aspirados, a proporção de oócitos viáveis, a taxa de clivagem, a porcentagem de embriões, a taxa de prenhez e a proporção de sexo de embriões não foram afetados quando as vacas Nelore foram suplementadas com Ca-SCACL de óleo de soja em comparação com as vacas Nelore não suplementadas. Em conclusão, nossos resultados sugerem que suplemento contendo 47,2 g de Ca-SCACL/kg (para fornecer uma ingestão de 0,2 kg de Ca-SCACL) não afeta a produção in vitro de embriões de vacas Nelore em lactação. No entanto, novos estudos utilizando doses mais altas de gordura na dieta poderiam ser úteis para determinar o seu potencial sobre produção embrionária in vitro.(AU)

Use of melatonin in the in vitro production of bovine embryos / Uso da melatonina na produção in vitro de embriões bovinos

We aimed to assess the effects of melatonin in the in vitro production of bovine embryos. Our experiment was conducted at the Laboratório de Reprodução Animal of the Universidade Estadual do Maranhão. The cumulus-oocyte complexes (COCs) were distributed among treatments at concentrations of 0, 10-1, 10-3 and 10-5 µMol/L melatonin. Our experiment was further divided into two: the first was to assess the effect of different concentrations of melatonin (treatments) on the maturation rate of COCs, and the second was to assess the effects of melatonin treatments on the in vitro production of bovine embryos. The results from the first experiment demonstrated no significant difference between the in vitro maturation rate of the cultivated COCs in treatments with melatonin. In the second experiment, however, melatonin treatments yielded statistically higher cleavage, morula and blastocyst rates in the 10-5 µM group (52.9%, 52.9%, and 35.3%, respectively), and lower rates in the 10-1 µM group (19.5%, 19.5% and 7.8%, respectively), compared to the others. The control group (no melatonin) and the 10-3 µM group showed similar results. We concluded that supplementation of melatonin in the in vitro maturation medium resulted in no improvement in the oocyte maturation rate, but in the in vitro production of embryos at different concentrations, the 10-5 µM group displayed better results, but with no improvement in the variables (P < 0.05).

Objetivou-se avaliar os efeitos da melatonina na produção in vitro de embriões bovinos. O experimento foi conduzido no Laboratório de Reprodução Animal da Universidade Estadual do Maranhão. Os complexos cumulus-oócitos (CCOs) foram distribuídos entre os tratamentos 0, 10-1, 10-3 e 10-5 µmol/L de melatonina. A avaliação foi dividida em dois experimentos, onde o primeiro avaliou o efeito dessas diferentes concentrações de melatonina (tratamentos) sobre a taxa de maturação dos CCOs e o segundo, o efeito desses tratamentos com melatonina sobre a produção in vitro de embriões bovinos. Os resultados no primeiro experimento demonstraram não haver diferença significativa na taxa de maturação in vitro dos CCOs cultivados no tratamento com melatonina. No entanto, o tratamento com melatonina no segundo experimento, as taxas de clivagens, mórulas e blastocistos, o grupo 10-5 µM foi estatisticamente superior (52,9%, 52,9% e 35,3%, respectivamente) e o grupo 10-1 µM inferior (19,5%, 19,5% e 7,8%, respectivamente) aos outros grupos. O grupo controle (sem melatonina) e o grupo 10-3 µM obtiveram resultados semelhantes. Concluiu-se que a suplementação da melatonina no meio de maturação in vitro não evidenciou melhoras na taxa de maturação dos oócitos, porém na produção in vitro de embriões em diferentes concentrações, o grupo 10-5 µM apresentou melhores resultados mesmo não havendo melhorias nas variáveis (P<0,05).

Effect of single dose follicle stimulating hormone on follicular aspiration, in vitro fertilization and pregnancy rate / Efeito do hormônio folículo estimulante em dose única na aspiração folicular, fertilização in vitro e taxa de prenhez

The present study evaluated Brangus cows treated with single doses of follicle stimulating hormone (FSH) subjected to follicular aspiration after 24 h to assess oocyte recovery, in vitro fertilization and pregnancy rate. Follicles exceeding 3 millimeters in diameter were aspirated, 200 mg of FSH was administered 2 days later, and a new ovum pickup was performed 24 h afterward. These methods were performed 3 times every 3 days. In control, follicular aspirations occurred at intervals of 1-week without FSH administration o. The aspirated oocytes were evaluated, submitted to in vitro fertilization and the embryos were transferred to the recipients. The average recovery of oocytes was higher (p<0.05) in control cows (12.4±1.8) than in treated cows (9.4±1.3). There was no difference (p>0.05) in the mean percentage of viable oocytes (52.0±3.9 and 62.7±4.7%) or the mean percentage of embryos (41.4±4.8 and 41.5±4.2%) among control and treated cows, respectively. The mean percentage of pregnancy did not differ (p>0.05) for control cows (43.8±2.7%), and treated cows (40.9±6.8%). In conclusion, FSH treatment did not improve oocyte recovery, in vitro fertilization, and pregnancy percentage. However, there is possibility of several consecutive ovum pickup every t3 days, concentrating the in vitro fertilization and the pregnancy percentage.

O presente estudo avaliou vacas Brangus tratadas com doses únicas de hormônio folículo estimulante (FSH) submetidas a aspiração folicular após vinte e quatro horas, para avaliação da recuperação oocitária, fertilização in vitro e taxa de prenhez. Folículos superiores a três milímetros de diâmetro foram aspirados, 200 mg de FSH foram administrados dois dias depois e uma nova aspiração folicular foi realizada 24 horas após. Esses métodos foram efetivados três vezes a cada três dias. No controle, as aspirações foliculares ocorreram em intervalos de uma semana sem administração de FSH. Os oócitos aspirados foram avaliados, submetidos à fertilização in vitro e os embriões foram transferidos em receptoras. A recuperação média dos oócitos foi superior (p<0,05) nas vacas controle (12,4±1,8) do que nas vacas tratadas (9,4±1,3). Não houve diferença (p>0,05) na porcentagem média de oócitos viáveis (52,0±3,9 e 62,7±4,7%) ou na porcentagem média de embriões (41,4±4,8 e 41,5±4,2%) entre vacas controle e vacas tratadas, respectivamente. A porcentagem média de prenhez não diferiu (p>0,05) para as vacas controle (43,8±2,7%) e as tratadas (40,9±6,8%). Em conclusão, o tratamento com FSH não melhorou a recuperação de oócitos, a fertilização in vitro e o percentual de prenhez. No entanto, existe a possibilidade de várias aspirações foliculares consecutivas a cada três

Effect of single dose follicle stimulating hormone on follicular aspiration, in vitro fertilization and pregnancy rate / Efeito do hormônio folículo estimulante em dose única na aspiração folicular, fertilização in vitro e taxa de prenhez

The present study evaluated Brangus cows treated with single doses of follicle stimulating hormone (FSH) subjected to follicular aspiration after 24 h to assess oocyte recovery, in vitro fertilization and pregnancy rate. Follicles exceeding 3 millimeters in diameter were aspirated, 200 mg of FSH was administered 2 days later, and a new ovum pickup was performed 24 h afterward. These methods were performed 3 times every 3 days. In control, follicular aspirations occurred at intervals of 1-week without FSH administration o. The aspirated oocytes were evaluated, submitted to in v itrofertilization and the embryos were transferred to the recipients. The average recovery of oocytes was higher (p<0.05) in control cows (12.4±1.8) than in treated cows (9.4±1.3). There was no difference (p>0.05) in the mean percentage of viable oocytes (52.0±3.9 and 62.7±4.7%) or the mean percentage of embryos (41.4±4.8 and 41.5±4.2%) among control and treated cows, respectively. The mean percentage of pregnancy did not differ (p>0.05) for control cows (43.8±2.7%), and treated cows (40.9±6.8%). In conclusion, FSH treatment did not improve oocyte recovery, in vitro fertilization, and pregnancy percentage. However, there is possibility of several consecutive ovum pickup every t3 days, concentrating the in vitro fertilization and the pregnancy percentage.

O presente estudo avaliou vacas Brangus tratadas com doses únicas de hormônio folículo estimulante (FSH) submetidas a aspiração folicular após vinte e quatro horas, para avaliação da recuperação oocitária, fertilização in vitro e taxa de prenhez. Folículos superiores a três milímetros de diâmetro foram aspirados, 200 mg de FSH foram administrados dois dias depois e uma nova aspiração folicular foi realizada 24 horas após. Esses métodos foram efetivados três vezes a cada três dias. No controle, as aspirações foliculares ocorreram em intervalos de uma semana sem administração de FSH. Os oócitos aspirados foram avaliados, submetidos à fertilização in vitro e os embriões foram transferidos em receptoras. A recuperação média dos oócitos foi superior (p<0,05) nas vacas controle (12,4±1,8) do que nas vacas tratadas (9,4±1,3). Não houve diferença (p>0,05) na porcentagem média de oócitos viáveis (52,0±3,9 e 62,7±4,7%) ou na porcentagem média de embriões (41,4±4,8 e 41,5±4,2%) entre vacas controle e vacas tratadas, respectivamente. A porcentagem média de prenhez não diferiu (p>0,05) para as vacas controle (43,8±2,7%) e as tratadas (40,9±6,8%). Em conclusão, o tratamento com FSH não melhorou a recuperação de oócitos, a fertilização in vitro e o percentual de prenhez. No entanto, existe a possibilidade de várias aspirações foliculares consecutivas a cada três dias, concentrando a fertilização in vitro e o percentual de prenhez.

Supplementation of cows with linseed: effects on antral follicle count, oocyte quality, and nutritional and plasma metabolite parameters / Suplementação de fêmeas girolando com linhaça: efeitos sobre contagem de folículos antrais, qualidade oocitária, parâmetros nutricionais e metabólitos plasmáticos

Linseed is distinguished by its composition of fatty acids, which are rich in unsaturated acids, and by the slow release of oil in the rumen, consequently providing a greater amount of lipids of interest for intestinal absorption. The aim of this study was to evaluate the effect of linseed supplementation on the antral follicle count (AFC) and oocyte quality of Girolando cows, as well as their digestive parameters and plasma metabolite. Twelve Girolando cows were used in the study and were randomly distributed in two experimental groups: control (CTL, n = 6) and linseed (LINS, n = 6). During the 126 days of supplementation, seven transvaginal ultrasound-guided ovum pick-up (OPU) sessions were performed at intervals of 21 days. AFC was performed in each OPU session. The cows fed with linseed showed no significant difference in the dry matter coefficient of digestibility (63.11 and 62.88), crude protein (62.7 and 55.26), neutral detergent fiber (NDF; 75.36 and 77.15), or acid detergent fiber (ADF; 72.45 and 74.77) for LINS and CTL, respectively. On the contrary, a higher level of ethereal extract was observed for LINS (69.31 vs. 40.7). There was no effect (p > 0.05) of lipid supplementation on plasma metabolite between groups and OPU sessions. There was no difference (p > 0.05) in the mean number of antral follicles (CTL: 31.14 ± 1.97; LINS: 25.52 ± 2.68), cumulus oocyte complexes recovered (CTL: 6.45 ± 1.66; LINS: 5.28 ± 1.18), or oocyte quality (CTL: 60.48% ± 8.46; LINS: 64.54% ± 7.77). The supplementation of 800g of linseed in the diet of Girolando cows did not alter the apparent digestibility of nutrients, AFC, or quality of oocytes obtained by OPU.

A linhaça destaca-se pela composição de ácidos graxos insaturados e por apresentar lenta liberação do óleo no rúmen e consequentemente fornecendo maior quantidade de lipídios de interesse para absorção intestinal. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da suplementação com linhaça sobre a contagem de folículos antrais e a qualidade oocitária de vacas Girolando, bem como parâmetros digestivos e metabólitos plasmáticos. Foram utilizadas doze fêmeas bovinas da raça Girolando distribuídas aleatoriamente em 2 grupos experimentais: controle (CTL n = 6) e linhaça (LINS, n = 6). Durante os 126 dias de suplementação foram realizadas 7 sessões de aspiração folicular guiada por ultrassonografia (OPU) com intervalo de 21 dias entre si. A cada sessão de OPU a CFA era realizada. Os animais alimentados com linhaça não apresentaram diferença no coeficiente de digestibilidade de matéria seca (63,11 vs. 62,88), proteína bruta (62,7 vs. 55,26), fibra em detergente neutro (75,36 vs. 77,15), fibra em detergente ácido (72,45 vs. 74,77) para LINS e CTL respectivamente. Por outro lado, os níveis de extrato etéreo foram superiores para LINS (69,31 vs. 40,7). Não houve efeito (P > 0,05) da suplementação lipídica sobre os metabólitos plasmáticos entre os grupos e as sessões de OPU. Não houve diferença (P > 0,05) no número médio de folículos antrais (31,14±1,97 vs. 25,52±2,68), COCs recuperados (6,45±1,66 vs. 5,28±1,18) e na qualidade dos oócitos (60,48%±8,46 vs. 64,54%±7,77) para LINS e CTL respectivamente. A suplementação de 800 g de linhaça na dieta de vacas Girolando não alterou a digestibilidade aparente dos nutrientes, bem como o número e a qualidade dos oócitos obtidos por OPU.

Comparison of two surgical approaches for Laparoscopic Ovum Pick Up in Ewes / Comparação de duas abordagens cirúrgicas para aspiração folicular laparoscópica em ovelhas

The present study had as an aim to evaluate a right lateral access as an alternative method to laparoscopic ovum pick-up (LOPU) in sheep. Twenty-four Santa Ines ewes were randomly assigned in two groups with twelve animals each: RLD - positioned in right lateral decubitus, with 10º head-down tilt; and DD - positioned in dorsal decubitus with 35º head-down tilt. The following parameters were evaluated every 10 minutes during the procedure: total surgical time (ST), visualized follicles (VF), aspirated follicles (AF), recovered oocytes (RO), mean arterial pressure (MAP), heart rate (HR), respiratory rate (fR) and end tidal CO2 pressure (EtCO2). Pre and postoperative arterial hemogasometry parameters (PaO2, PaCO2, pH, CHCO3 and BE) were also evaluated; and serum fibrinogen levels (SFL) on postoperative period. The values of VF, AF, RO, fR, PaO2, pH, CHCO3, BE and SFL were similar between groups, although ST, HR, MAP, EtCO2 and PaCO2 were higher in LG. Regarding operative periods, PaO2 and pH were lower after surgery (PaO2: 79.1±16.4; 79.2±11.7mmHg; pH: 7.30±0.09; 7.32±0.08) in both groups when compared to preoperative (PaO2: 80.1±14.3; 83.4±10.5 mmHg; pH: 7.38±0.05; 7.39±0.05) while PaCO2 (43.6±4.6; 41.9±5.4mmHg) and CHCO3 (22.8±1.5; 22.7±3.0mmol/L) increased (PaCO2: 54.3±10.9; 46.9±6.3mmHg; CHCO3: 24.8±3.4; 24.4±2.7mmol/L) postoperative. This alternative decubitus presented is a viable procedure and did not differ in oocyte recovery rates in ewes. However, entails cardiorespiratory major alterations compared to conventional procedure, making its practical applicability limited.(AU)

O presente estudo teve como objetivo avaliar o acesso lateral direito como um método alternativo para a recuperação de oócitos por laparoscopia (LOPU) em ovelha. Vinte e quatro ovelhas Santa Inês foram distribuídas aleatoriamente em dois grupos com 12 animais: grupo RLD - posicionado em decúbito lateral direito, cefalodeclive com 10º de inclinação; grupo DD - posicionado em decúbito dorsal em cefalodeclive, inclinação de 35º. Foram avaliados, a cada 10 minutos, durante o procedimento cirúrgico: tempo total da cirurgia (ST), folículos visualizados (VF), folículos aspirados (AF), oócitos recuperados (RO), pressão arterial média (MAP), frequência cardíaca (FC), frequência respiratória (fR) e pressão final de CO2 (EtCO2). Também foram avaliados os parâmetros de hemogasometria arterial pré-operatória e pós-operatória (PaO2, PaCO2, pH, CHCO3 e BE), bem como os níveis séricos de fibrinogênio (SFL) no período pós-operatório. Os valores de VF, AF, RO, fR, PaO2, pH, CHCO3, BE e SFL foram semelhantes entre os grupos, embora ST, FC, MAP, EtCO2 e PaCO2 tenham sido maiores em RLD. Os parâmetros PaO2 e pH foram menores após a cirurgia (PaO2: 79,1±16,4; 79,2±11,7mmHg; pH: 7,30±0,09; 7,32±0,08) em ambos os grupos em relação ao momento pré-cirúrgico (PaO2: 80,1±14,3; 83,4±10,5mmHg; pH: 7,38±0,05; 7,39±0,05), enquanto PaCO2 (43,6±4.6; 41,9±5,4mmHg) e CHCO3 (22,8±1,5; 22,7±3.0mmol/L) aumentaram (PaCO2: 54,3±10,9; 46,9±6,3mmHg; CHCO3: 24,8±3,4; 24,4±2,7mmol/L) após a cirurgia. O decúbito lateral é uma alternativa viável para LOPU e não apresenta diferença para a taxa de recuperação oocitária em ovelhas. No entanto, promove alterações cardiorrespiratórias em comparação com o decúbito dorsal, tornando a sua aplicabilidade prática limitada.(AU)