Avaliação da broncopneumonia de bezerros criados nos assentamentos de Presidente Venceslau e Presidente Epitácio

O complexo respiratório bovino é um dos principais problemas encontrados em bovinos tanto confinados quanto àqueles criados a pasto, levando a importantes perdas econômicas devido aos altos índices de morbidade e mortalidade. O objetivo geral deste trabalho foi determinar a prevalência de M. bovis, M. díspar, M. mycoides subsp. mycoides SC, P. multocida, M. haemolytica, Parainfluenza Bovino tipo-3 (PIb-3) e Influenza vírus D e a prevalência de anticorpos contra Vírus da Diarreia Viral Bovina (VDVB), Herpesvírus tipo -1 (BoHV1) e o Vírus Respiratório Sincicial Bovino (VRSB) em bezerros sadios e com broncopneumonia criados nos assentamentos de Caiuá, Presidente Epitácio e Mirante de Paranapanema - SP. Além disso, objetiva-se avaliar a associação destes micro-organismos com a presença da broncopneumonia e dos sinais e sintomas apresentados pelos animais durante a avaliação física. Estudou-se 141 bezerros, machos e fêmeas de até um ano de idade, os quais, após exame físico, foram classificados em sadios e com pneumonia. Foram coletadas amostras de lavado traqueobrônquico e sangue total para obtenção do soro. As amostras foram utilizadas para isolamento e identificação de M. bovis, M. díspar, M. mycoides subsp. mycoides SC, P. multocida e M. haemolytica, detecção molecular de Parainfluenza Bovino tipo-3 (PIb-3) e Influenza vírus D (IVD) e detecção de anticorpos contra Vírus da Diarreia Viral Bovina (VDVB), Herpesvírus tipo -1 (HVBo-1) e o Vírus Respiratório Sincicial Bovino (VRSB). Não houve isolamento de P. multocida e M. haemolytica. Dentre as bactérias aeróbias isoladas, observou-se maior frequência de isolamento de Bacillus sp., Staphylococcus intermedius e bactérias Gram-negativas não fermentadoras. M. díspar foi a única espécie de micoplasma identificada com os oligonucleotídeos iniciadores utilizados. Faz-se necessário a busca por outras espécies de micoplasmas que podem estar relacionadas aos casos de broncopneumonia em bovinos. Não houve detecção de Parainfluenza Bovino tipo 3 e Influenza vírus D nas amostras de lavado traqueobrônquico. Os três municípios estudados apresentaram anticorpos para os vírus estudados. Observou-se prevalência de BoHV, VDVB e VRSB de 31,7%, 24,6 e 38,8%, respectivamente. Não houve associação entre o status de saúde dos bezerros e os achados microbiológicos e sorológicos. Foi observada associação entre M. díspar e a variável alerta (p<0,001). Associação entre enterobactérias e a variável desidratação leve (p=0,033/ OR= 11,25, IC: 1,809-41,834) foi observada. Foi observada associação entre a presença de anticorpos contra VDVB e a variável mucosa rósea (p=0,069/ OR=2,037; IC: 1,059-8,709). Observou-se associações entre Mollicutes e as variáveis secreção nasal serosa (p=0,03) e fluxo de ar nasal (p=0,055). Para concluir, foi observada associação entre S. intermedius e a variável fluxo de ar nasal (p=0,097).

Bovine respiratory disease complex is one of the major problems observed in feedlot and grazing cattle, causing economic losses due to high morbidity and mortality rates. The aim of this study was to determine the prevalence of M. bovis, M. díspar, M. mycoides subsp. mycoides SC, P. multocida, M. haemolytica, Bovine Parainfluenza type-3 (bPI-3) and Influenza vírus D (IVD) and the prevalence of antibodies against Bovine Viral Diarrhea Vírus (BVDV), Bovine Herpesvírus type -1 (BoHV1) and Bovine Respiratory Syncytial Vírus (VRSB) in healthy and pneumonic calves raised in settlements located in Caiuá, Presidente Epitácio e Mirante de Paranapanema São Paulo State. Moreover, we aimed to evaluate the association between those microorganisms and antibodies and the presence of bronchopneumonia and the symptoms observed during the physical examination. We studied 141 males and females calves that were classified as healthy and pneumonic calves. We collected tracheobronchial lavage samples and total blood to obtain serum samples. Isolation and biochemical/ molecular identification were performed in order to detect M. bovis, M. díspar, M. mycoides subsp. mycoides SC, P. multocida, M. haemolytica, Bovine Parainfluenza type-3 and Influenzavírus D. Serological survey was performed to detect antibodies aginst Bovine Viral Diarrhea Vírus (BVDV), Bovine Herpesvírus type -1 (BoHV1) and Bovine Respiratory Syncytial Vírus (VRSB). There was not any isolation of P. multocida and M. haemolytica. Bacillus sp., Staphylococcus intermedius and Non-fermenter Gram-negative bacteria were higher prevalent compared to the other aerobic bacteria isolated. M. díspar was the only mycoplasma species identified by the primers used. It is necessary the identification of other mycoplasma species that could be related to the cases of bronchopneumonia in cattle. Bovine Parainfluenza type-3 and Influenza vírus D were not identified. Antibodies were detected in all municipalities. The prevalence of BoHV, BVDV e VRSB was 31.7%, 24.6 and 38.8%, respectively. The association between health status and microbial/ serological findings was not observed. Association between M. díspar and the variable alert (p<0.001) was detected. Enterobacterias were associated to mild dehydration (p=0.033/OR=11.25; IC: 1.809-41.834). The association between the presence of antibodies against BVDV and mucosa rosea (p=0.069/ OR=2.037; IC: 1.059-8.709). Associations between Mollicutes and serous nasal discharge (p=0.03) and nasal air flow (p=0.055) were also detected. In conclusion, S. intermedius was associated to nasal air flow (p=0.097).

AVALIAÇÃO DA EXPRESSÃO DE PROTEÍNAS NO PLASMA SEMINAL DA PUBERDADE À MATURIDADE SEXUAL DE TOUROS GUZERÁ CRIADOS NO NORDESTE DO BRASIL

O objetivo do presente estudo foi avaliar a evolução dos parâmetros seminais com a expressão de proteínas no plasma seminal da puberdade até a maturidade sexual de touros da raça Guzerá criados no Nordeste do Brasil.Cinco touros Guzerás sadios, com idade inicial de 24 meses e criados extensivamente no município de Quixeramobim, Ceará, com suplementação mineral proteinada, foram avaliados mensalmente quanto a medidas de peso vivo (PV) e circunferência escrotal (CE) com ajuda de balança e fita métrica,respectivamente. Os animais foram submetidos a exames andrológicos mensais com avaliação da qualidade do sêmen, obtido por meio de eletroejaculação.Amostras de sêmen foram obtidas por eletroejaculação para . A puberdade foi definida como a idade em que os animais apresentaram, nos seus ejaculados,50 milhões de espermatozoides totais com, no mínimo de 10 % motilidade total.A idade à maturidade sexual foi definida como o momento em que os animais apresentaram no mínimo 70 % de espermatozoides morfologicamente normais,com menos de 15% de defeitos espermáticos maiores nos ejaculados. Amostras de plasma seminal foram obtidos por centrifugação dos ejaculados e as proteínas daquele fluido foram submetidas a um tratamento de precipitação usando o 2-D Clean-Up Kit para a eliminação de contaminantes. A separação das proteínas foi feita por meio de eletroforese bidimensional e os géis foram analisados com o aplicativo PDQuest. As intensidades dos spots detectados nos géis foram comparadas entre as diversas idades avaliadas e os spots diferencialmente expressos foram identificados por meio de espectrometria de massa. Os animais apresentaram como desenvolvimento reprodutivo e parâmetros espermáticos médios, peso corporal de 268,2 ± 12,1, 288 ± 13,2, 305,75 ± 10,8, 315,5 ± 14,1, 310,25 ± 11,9, 328,25 ± 15,1 kg, circunferência escrotal de 27,5 ± 0,8, 28 ± 0,7, 29,1 ± 0,7, 29,4 ± 0,6, 30,3 ± 0,5, 30,8 ± 0,3 cm, motilidade de 29 ± 14,7, 25 ± 8,9, 45 ± 16,2, 57,5 ± 4,8, 57,5 ± 3,2, 61,25 ± 10,3, espermatozóides normais de 67,9 ± 9, 68,75 ± 10,1, 77,4 ± 7,4, 89,75 ± 1,8, 88,75 ± 2,2, 86,63 ± 4,1, concentração espermática de 224,5 ± 93, 293,13 ± 101,9, 485 ± 184,7, 641,25 ± 169,2, 781,25 ± 159,1, e 857,5 ± 181,3 e vigor espermático de 1,8 ± 0,5, 1,8 ± 0,5, 2,5 ± 0,6, 3,25 ± 0,3, 3 ± 0,4, 3,13 ± 0,3 aos 24, 25, 26, 27, 28 e 29 meses de idade, respectivamente. Foram identificadas 23 proteínas a partir de 22 spots por espectrometria de massa. As proteínas seminal plasma protein PDC-109, spermadhesin Z13, Glucose-6-phosphate isomerase, Inhibitor of carbonic anhydrase, serotransferrin-like, seminal palsma protein A3, epididimal-specific lipocalina-5, epididymal secretory glutathione peroxidades, ephrin-A1, metalloproteinase inhbitor 2, plasma serine protease inhibitor e carbohydrate-binding protein AQN-1, foram identificadas a partir de sete spots e apresentaram-se diferentes significativamente (p < 0,05), entre as idades (24 a 29 meses). As proteínas seminal plasma protein BSP-30 kDa, spermadhesin-1, epididymal sperm-binding protein 1 e junction plakoglobin, foram identificadas a partir de dois spots e foram expressas a partir dos 25 meses de idade. A seminal plasma protein BSP-30 kDa, spermadhesin-1, seminal plasma protein PDC-109, seminal plasma protein A3, double-headed protease inhibitor e submandibular gland, foram expressas a partir dos 28 meses. As proteínas BPI fold-containing Family A member 1, von ebner minor salivar gland protein, BPI fold-containing Family B member 1, sex hormonebinding globulin, apolipoprotein A-I, mitochondrial malate dehydrogenase 2, NAD e epididymal sperm-binding protein 1, só foram expressas aos 29 meses de idade. Os touros atingiram a maturidade sexual com idade média de 25,2 meses de idade. A diferença na expressão dessas proteínas ao longo das idades podem caracterizar possíveis marcadores moleculares da maturidade sexual dos touros da raça Guzerá criados no semiárido brasileiro.

The aim of this study was to evaluate the evolution of semen parameters with the expression of proteins in seminal plasma of puberty to sexual maturity Guzerá bulls raised in northeastern Brazil. Five healthy Guzerás bulls, with initial age of 24 months and raised extensively in the village of Quixeramobim, Ceará, with proteinada mineral supplements were evaluated monthly for the body weight measures (PV) and scrotal circumference (SC) with balance of help and tape metric, respectively. The animals were subjected to monthly andrological tests with evaluation of the quality of semen obtained through electroejaculation. Semen samples were obtained by electroejaculation for. Puberty was defined as the age at which the animals presented in their ejaculates, 50 million total sperm with at least 10% total motility. The age of sexual maturity was defined as the time when the animals showed at least 70% of morphologically normal sperm with less than 15% major defects in ejaculated sperm. Seminal plasma samples were obtained by centrifugation of ejaculated fluid and proteins that were subjected to a precipitation treatment using the 2-D Clean-Up Kit for the removal of contaminants. Separation of proteins was done using two-dimensional electrophoresis and gels were analyzed using PDQuest application. The intensities of the detected spots in gels were compared among the different ages and evaluated differentially expressed spots were identified by mass spectrometry. The animals showed as reproductive development and average sperm parameters, body weight 268.2 ± 12.1, 288 ± 13.2, 305.75 ± 10.8, 315.5 ± 14.1, 310.25 ± 11.9, 328.25 ± 15.1 kg, scrotal circumference 27.5 ± 0.8, 28 ± 0.7, 29.1 ± 0.7, 29.4 ± 0.6, 30.3 ± 0.5, 30.8 ± 0.3 cm, motility 29 ± 14.7, 25 ± 8.9, 45 ± 16.2, 57.5 ± 4.8, 57.5 ± 3.2, 61.25 ± 10.3, normal sperm 67.9 ± 9, 68.75 ± 10.1, 77.4 ± 7.4, 89.75 ± 1.8, 88.75 ± 2.2, 86.63 ± 4.1, sperm concentration of 224.5 ± 93, 293.13 ± 101.9, 485 ± 184.7, 641.25 ± 169.2, 781.25 ± 159.1 and 857.5 ± 181.3 and spermatic force of 1.8 ± 0.5, 1.8 ± 0.5, 2.5 ± 0.6, 3.25 ± 0.3, 3 ± 0.4, 3.13 ± 0.3 at 24, 25, 26, 27, 28 and 29 months of age, respectively. 23 proteins were identified from the spots 22 by mass spectrometry. The seminal plasma proteins protein PDC-109, spermadhesin Z13, Glucose-6-phosphate isomerase, Inhibitor of carbonic anhydrase, serotransferrin-like seminal palsma protein A3, lipocalin-5 epididymal-specific, epididymal secretory glutathione peroxidases, ephrin-A1, metalloproteinase inhbitor 2, plasma serine protease inhibitor and carbohydrate-binding protein AQN-1 were identified from seven spots and stood significantly different (p <0.05) between the ages (24 to 29 months). The seminal plasma proteins protein BSP-30 kDa, spermadhesin-1, epididymal sperm-binding protein 1 and junction plakoglobin were identified from two spots and were expressed from 25 months old. The seminal plasma protein BSP 30-kDa spermadhesin-1, seminal plasma protein PDC-109, seminal plasma protein A3, double-headed protease inhibitor and submandibular gland were expressed after 28 months. The foldcontaining Family BPI protein A member 1, von ebner salivary gland protein minor, BPI fold-containing Family B member 1, fri hormone-binding globulin, apolipoprotein AI, mitochondrial malate dehydrogenase 2, NAD and epididymal sperm-binding protein 1, They were only expressed at 29 months of age. The Bulls reached sexual maturity with an average age of 25.2 months. The difference in expression of these proteins throughout the ages can identify possible molecular marker of sexual maturity of Guzerá bulls bred in the Brazilian semiarid region.

O polietilenoglicol aumenta a penetração do vírus da diarréia viral bovina, do vírus da estomatite vesicular e do vírus sincicial respiratório bovino em células de cultivo

The low efficiency of penetration of some viruses in cultured cells may represent an obstacle for viral isolation and/or viral multiplication in tissue culture. This study investigated the effect of polyethylene glycol (PEG) on the penetration and replication of seven bovine enveloped viruses in culture cells. Penetration efficiency was measured by counting the number of viral plaques produced in bovine kidney cells (MDBK). The addition of 5% PEG (molecular weight 6.000) to the viral inoculum containing 100 TCID50 mL-1 (tissue culture median infectious dosis) of each virus, during adsorption for 2h at 37°C, resulted in a significant increase in the number of plaques for bovine viral diarrhea virus (BVDV) (increase of 3.4-fold), vesicular stomatitis virus (VSV) (2.2-fold) and bovine respiratory syncytial virus (BRSV) (1.5-fold). The addition of 5% PEG to the inoculum of bovine herpesviruses 1, 2 and 5 (BoHV-1, BoHV-2 and BoHV-5) did not increase the number of viral plaques. On the other hand, PEG produced a reduction in the number of plaques by bovine parainfluenza virus (bPI-3V) (1.4-fold). Furthermore, the addition of 5% PEG produced a 10- to 1000-fold increase in the sensitivity of BVDV detection in the serum of three persistently infected calves; and doubled the sensitivity of detection of BRSV in nasal secretions of two experimentally infected sheep. These results demonstrate that PEG enhances the efficiency of infection by BVDV, VSV and BRSV in cultured bovine cells and therefore may be used to increase the sensitivity of virus detection in clinical samples (viral isolation), and/or to increase virus titers in cell cultures.

A baixa eficiência de penetração de alguns vírus em células de cultivo pode representar uma dificuldade para o isolamento e a multiplicação viral in vitro. No presente estudo investigou-se o efeito do polietilenoglicol (PEG) na replicação de sete vírus bovinos em células de linhagem de rim bovino (MDBK). A eficiência de penetração e replicação foi mensurada pela contagem do número de placas virais produzidas em tapetes celulares, após adsorção do inóculo viral (100 DICC50 mL-1) com ou sem a adição de PEG a 5% (peso molecular 6.000). A adição de PEG ao inóculo resultou em aumentos significativos do número de placas para o vírus da diarréia viral bovina (BVDV) (aumento de 3,4 vezes), vírus da estomatite vesicular (VSV) (2,2 vezes) e vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) (1,5 vezes). A adição de PEG não produziu aumento significativo no número de placas dos herpesvírus bovinos 1, 2 e 5 (BoHV-1, BoHV-2 e BoHV-5). Por outro lado, o PEG produziu uma redução do número de placas (1,4 vezes) produzidas pelo vírus da parainfluenza bovina (bPI-3V). A adição de PEG a 5% também aumentou a sensibilidade de detecção (entre 10 e 100 vezes) do BVDV no soro de três bezerros persistentemente infectados. Para o BRSV, a adição de PEG aumentou em duas vezes a sensibilidade do isolamento viral de secreções nasais de duas ovelhas infectadas experimentalmente. Esses resultados demonstram que o PEG aumenta a eficiência de infecção do BVDV, VSV e BRSV em células de cultivo, podendo ser utilizado para aumentar a sensibilidade de detecção desses vírus em amostras clínicas (isolamento viral) e/ou, para aumentar os títulos de vírus produzidos em cultivo celular.

O polietilenoglicol aumenta a penetração do vírus da diarréia viral bovina, do vírus da estomatite vesicular e do vírus sincicial respiratório bovino em células de cultivo

The low efficiency of penetration of some viruses in cultured cells may represent an obstacle for viral isolation and/or viral multiplication in tissue culture. This study investigated the effect of polyethylene glycol (PEG) on the penetration and replication of seven bovine enveloped viruses in culture cells. Penetration efficiency was measured by counting the number of viral plaques produced in bovine kidney cells (MDBK). The addition of 5% PEG (molecular weight 6.000) to the viral inoculum containing 100 TCID50 mL-1 (tissue culture median infectious dosis) of each virus, during adsorption for 2h at 37°C, resulted in a significant increase in the number of plaques for bovine viral diarrhea virus (BVDV) (increase of 3.4-fold), vesicular stomatitis virus (VSV) (2.2-fold) and bovine respiratory syncytial virus (BRSV) (1.5-fold). The addition of 5% PEG to the inoculum of bovine herpesviruses 1, 2 and 5 (BoHV-1, BoHV-2 and BoHV-5) did not increase the number of viral plaques. On the other hand, PEG produced a reduction in the number of plaques by bovine parainfluenza virus (bPI-3V) (1.4-fold). Furthermore, the addition of 5% PEG produced a 10- to 1000-fold increase in the sensitivity of BVDV detection in the serum of three persistently infected calves; and doubled the sensitivity of detection of BRSV in nasal secretions of two experimentally infected sheep. These results demonstrate that PEG enhances the efficiency of infection by BVDV, VSV and BRSV in cultured bovine cells and therefore may be used to increase the sensitivity of virus detection in clinical samples (viral isolation), and/or to increase virus titers in cell cultures.

A baixa eficiência de penetração de alguns vírus em células de cultivo pode representar uma dificuldade para o isolamento e a multiplicação viral in vitro. No presente estudo investigou-se o efeito do polietilenoglicol (PEG) na replicação de sete vírus bovinos em células de linhagem de rim bovino (MDBK). A eficiência de penetração e replicação foi mensurada pela contagem do número de placas virais produzidas em tapetes celulares, após adsorção do inóculo viral (100 DICC50 mL-1) com ou sem a adição de PEG a 5% (peso molecular 6.000). A adição de PEG ao inóculo resultou em aumentos significativos do número de placas para o vírus da diarréia viral bovina (BVDV) (aumento de 3,4 vezes), vírus da estomatite vesicular (VSV) (2,2 vezes) e vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) (1,5 vezes). A adição de PEG não produziu aumento significativo no número de placas dos herpesvírus bovinos 1, 2 e 5 (BoHV-1, BoHV-2 e BoHV-5). Por outro lado, o PEG produziu uma redução do número de placas (1,4 vezes) produzidas pelo vírus da parainfluenza bovina (bPI-3V). A adição de PEG a 5% também aumentou a sensibilidade de detecção (entre 10 e 100 vezes) do BVDV no soro de três bezerros persistentemente infectados. Para o BRSV, a adição de PEG aumentou em duas vezes a sensibilidade do isolamento viral de secreções nasais de duas ovelhas infectadas experimentalmente. Esses resultados demonstram que o PEG aumenta a eficiência de infecção do BVDV, VSV e BRSV em células de cultivo, podendo ser utilizado para aumentar a sensibilidade de detecção desses vírus em amostras clínicas (isolamento viral) e/ou, para aumentar os títulos de vírus produzidos em cultivo celular.

O polietilenoglicol aumenta a penetração do vírus da diarréia viral bovina, do vírus da estomatite vesicular e do vírus sincicial respiratório bovino em células de cultivo

The low efficiency of penetration of some viruses in cultured cells may represent an obstacle for viral isolation and/or viral multiplication in tissue culture. This study investigated the effect of polyethylene glycol (PEG) on the penetration and replication of seven bovine enveloped viruses in culture cells. Penetration efficiency was measured by counting the number of viral plaques produced in bovine kidney cells (MDBK). The addition of 5% PEG (molecular weight 6.000) to the viral inoculum containing 100 TCID50 mL-1 (tissue culture median infectious dosis) of each virus, during adsorption for 2h at 37°C, resulted in a significant increase in the number of plaques for bovine viral diarrhea virus (BVDV) (increase of 3.4-fold), vesicular stomatitis virus (VSV) (2.2-fold) and bovine respiratory syncytial virus (BRSV) (1.5-fold). The addition of 5% PEG to the inoculum of bovine herpesviruses 1, 2 and 5 (BoHV-1, BoHV-2 and BoHV-5) did not increase the number of viral plaques. On the other hand, PEG produced a reduction in the number of plaques by bovine parainfluenza virus (bPI-3V) (1.4-fold). Furthermore, the addition of 5% PEG produced a 10- to 1000-fold increase in the sensitivity of BVDV detection in the serum of three persistently infected calves; and doubled the sensitivity of detection of BRSV in nasal secretions of two experimentally infected sheep. These results demonstrate that PEG enhances the efficiency of infection by BVDV, VSV and BRSV in cultured bovine cells and therefore may be used to increase the sensitivity of virus detection in clinical samples (viral isolation), and/or to increase virus titers in cell cultures.

A baixa eficiência de penetração de alguns vírus em células de cultivo pode representar uma dificuldade para o isolamento e a multiplicação viral in vitro. No presente estudo investigou-se o efeito do polietilenoglicol (PEG) na replicação de sete vírus bovinos em células de linhagem de rim bovino (MDBK). A eficiência de penetração e replicação foi mensurada pela contagem do número de placas virais produzidas em tapetes celulares, após adsorção do inóculo viral (100 DICC50 mL-1) com ou sem a adição de PEG a 5% (peso molecular 6.000). A adição de PEG ao inóculo resultou em aumentos significativos do número de placas para o vírus da diarréia viral bovina (BVDV) (aumento de 3,4 vezes), vírus da estomatite vesicular (VSV) (2,2 vezes) e vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) (1,5 vezes). A adição de PEG não produziu aumento significativo no número de placas dos herpesvírus bovinos 1, 2 e 5 (BoHV-1, BoHV-2 e BoHV-5). Por outro lado, o PEG produziu uma redução do número de placas (1,4 vezes) produzidas pelo vírus da parainfluenza bovina (bPI-3V). A adição de PEG a 5% também aumentou a sensibilidade de detecção (entre 10 e 100 vezes) do BVDV no soro de três bezerros persistentemente infectados. Para o BRSV, a adição de PEG aumentou em duas vezes a sensibilidade do isolamento viral de secreções nasais de duas ovelhas infectadas experimentalmente. Esses resultados demonstram que o PEG aumenta a eficiência de infecção do BVDV, VSV e BRSV em células de cultivo, podendo ser utilizado para aumentar a sensibilidade de detecção desses vírus em amostras clínicas (isolamento viral) e/ou, para aumentar os títulos de vírus produzidos em cultivo celular.

Pesquisa de vírus relacionados com doenças respiratórias em ovinos sadios e naturalmente acometidos

A expansão econômica da ovinocultura acarreta no aumento do número de animais mantidos em confinamento e seu maior trânsito entre as propriedades. Com isso há aumento dos índices de doenças respiratórias nessa espécie, que estão entre as enfermidades que ocasionam maiores perdas econômicas em rebanhos de vários países. Grande parte das doenças respiratórias de mortalidade elevada e sintomatologia clínica evidente está associada a infecções por Mannheimia (Pasteurella) haemolytica. Entretanto, outras enfermidades também acometem os ovinos e são pouco definidas etiológica e morfologicamente, especialmente as de etiologia viral. Os vírus têm sido incriminados como agentes precursores e agravantes quando em associação com infecção bacteriana secundária. Os métodos mais utilizados para identificação viral são a sorologia, isolamento viral, teste de vírus neutralização e reação em cadeia pela polimerase. Contudo, essas técnicas apresentam limitações quanto ao tempo de execução e a necessidade de equipamentos dispendiosos. Com a necessidade da detecção rápida de antígenos virais, métodos como imunofluorescência e ensaios imunoenzimáticos vem sendo mais estudados no diagnóstico de agentes etiológicos. A imunoistoquímica é uma opção para a identificação de diversos agentes etiológicos e vem sendo amplamente estudada nos casos de enfermidades respiratórias, devido a facilidade na execução e não necessitar equipamentos dispendiosos nem técnicas trabalhosas para armazenamento de amostras. Neste contexto, o propósito deste estudo foi avaliar ovinos com comprometimento de vias aéreas anteriores e processos broncopulmonares, detectados no exame clínico e exame histopatológico, e correlacionar os achados com a sorologia, citologia de vias aéreas anteriores e posteriores, com a imunoistoquímica para os Vírus sincicial respiratório...

The economic expansion of sheep breeding cause an increase in the number of animals kept in confinement and increased traffic between these properties, increasing the rates of respiratory diseases in this species, which are among the diseases that cause major economic losses in herds in several countries. Much of respiratory diseases and high mortality evident clinical symptoms are associated with infections by Mannheimia (Pasteurella) haemolytica, however, other diseases also affect sheep and are poorly defined etiology and morphology, especially viral diseases. Viruses have long been incriminated as agents precursors and aggravating when combined with secondary bacterial infection. The methods used for viral identification are serology, virus isolation, virus neutralization test, polymerase chain reaction. However, these techniques have limitations as to time of execution and the need for expensive equipment. With the need for rapid detection of viral antigens, methods such as immunofluorescence and enzyme immunoassays has been most studied in the search for etiologic agents. Immunohistochemistry is an option for the identification of other agents and has been widely studied in cases of respiratory illnesses due to ease of execution and does not require expensive equipment or laborious techniques for sample storage. In this context, the purposes of this research was to evaluate sheep with involvement of upper airways and bronchopulmonary cases, detected on clinical examination and histopathology, and correlate the findings with serology, cytology airways before and after, and immunohistochemistry for Virus Respiratory Syncytial and Parainfluenza virus. Was detected by serology 27.5% for the BIS-3 and 40% for BRSV positive samples. There was a predominance of interstitial pneumonia type (56.7%) and immunohistochemistry detected the presence of BPI-3 antigens in 13.3% and 20.0%

Isolamento do vírus Parainfluenza bovino tipo 3 no Rio Grande do Sul, Brasil

The isolation of bovine parainfluenza virus type 3 (bPI-3) from a case of mild respiratory disease in a calf is described. Identification was carried out by virus isolation in cell cultures and confirmed by hemagglutination, hemagglutination inhibition, hemadsorbtion and direct imunofluorescence. This is the first report on the isolation of bPI-3 in Rio Grande do Sul, Brazil.

É descrito o isolamento do vírus Parainfluenza bovino tipo 3 (bPI-3) a partir de secreções nasais coletadas de um bovino com infecção respiratória. A identificação do agente foi realizada através de isolamento em cultivo celular e confirmada por testes de hemaglutinação, inibição da hemaglutinação, hemadsorção e imunofluorescência direta. Este é o primeiro registro do isolamento do vírus no Rio Grande do Sul.

Isolamento do vírus Parainfluenza bovino tipo 3 no Rio Grande do Sul, Brasil

The isolation of bovine parainfluenza virus type 3 (bPI-3) from a case of mild respiratory disease in a calf is described. Identification was carried out by virus isolation in cell cultures and confirmed by hemagglutination, hemagglutination inhibition, hemadsorbtion and direct imunofluorescence. This is the first report on the isolation of bPI-3 in Rio Grande do Sul, Brazil.

É descrito o isolamento do vírus Parainfluenza bovino tipo 3 (bPI-3) a partir de secreções nasais coletadas de um bovino com infecção respiratória. A identificação do agente foi realizada através de isolamento em cultivo celular e confirmada por testes de hemaglutinação, inibição da hemaglutinação, hemadsorção e imunofluorescência direta. Este é o primeiro registro do isolamento do vírus no Rio Grande do Sul.

Caracterização preliminar de um paramixovírus contaminante de cultivos celulares

Este artigo relata a caracterização preliminar de um vírus detectado como contaminante de cultivos celulares no Setor de Virologia da UFSM. O agente foi inicialmente detectado em células de linhagem de rim fetal bovino (MDBK) e posteriormente disseminou-se para cultivos celulares de outras espécies. A citopatologia, caracterizada por arredondamento celular, citomegalia, desprendimento e formação de sincícios era progressiva e resultava em morte celular e destruição do tapete em poucos dias. Exames iniciais de microscopia eletrônica (ME) de células afetadas revelaram a presença de partículas víricas semelhantes a herpesvírus. No entanto, testes de imunofluorescência e soro-neutralização não revelaram relação antigênica entre o agente e três herpesvírus humanos e dez de animais. Testes subseqüentes demonstraram que o agente possui um ciclo replicativo curto; atividade hemaglutinante com eritrócitos de ovinos e camundongos; e é capaz de replicar e produzir citopatologia em cultivos celulares de humanos e de várias espécies animais. Testes de imunofluorescência revelaram que o agente é relacionado antigenicamente com o vírus da parainfluenza tipo-3 humana (hPI-3) e bovina (bPI-3). Posteriormente, anticorpos com atividade neutralizante contra o agente foram detectados no soro de bovinos (715/847), ovinos (41/59) e humanos (27/95). Uma análise posterior das fotos de ME revelou a pres

Caracterização preliminar de um paramixovírus contaminante de cultivos celulares

Este artigo relata a caracterização preliminar de um vírus detectado como contaminante de cultivos celulares no Setor de Virologia da UFSM. O agente foi inicialmente detectado em células de linhagem de rim fetal bovino (MDBK) e posteriormente disseminou-se para cultivos celulares de outras espécies. A citopatologia, caracterizada por arredondamento celular, citomegalia, desprendimento e formação de sincícios era progressiva e resultava em morte celular e destruição do tapete em poucos dias. Exames iniciais de microscopia eletrônica (ME) de células afetadas revelaram a presença de partículas víricas semelhantes a herpesvírus. No entanto, testes de imunofluorescência e soro-neutralização não revelaram relação antigênica entre o agente e três herpesvírus humanos e dez de animais. Testes subseqüentes demonstraram que o agente possui um ciclo replicativo curto; atividade hemaglutinante com eritrócitos de ovinos e camundongos; e é capaz de replicar e produzir citopatologia em cultivos celulares de humanos e de várias espécies animais. Testes de imunofluorescência revelaram que o agente é relacionado antigenicamente com o vírus da parainfluenza tipo-3 humana (hPI-3) e bovina (bPI-3). Posteriormente, anticorpos com atividade neutralizante contra o agente foram detectados no soro de bovinos (715/847), ovinos (41/59) e humanos (27/95). Uma análise posterior das fotos de ME revelou a pres

Caracterização preliminar de um paramixovírus contaminante de cultivos celulares

Este artigo relata a caracterização preliminar de um vírus detectado como contaminante de cultivos celulares no Setor de Virologia da UFSM. O agente foi inicialmente detectado em células de linhagem de rim fetal bovino (MDBK) e posteriormente disseminou-se para cultivos celulares de outras espécies. A citopatologia, caracterizada por arredondamento celular, citomegalia, desprendimento e formação de sincícios era progressiva e resultava em morte celular e destruição do tapete em poucos dias. Exames iniciais de microscopia eletrônica (ME) de células afetadas revelaram a presença de partículas víricas semelhantes a herpesvírus. No entanto, testes de imunofluorescência e soro-neutralização não revelaram relação antigênica entre o agente e três herpesvírus humanos e dez de animais. Testes subseqüentes demonstraram que o agente possui um ciclo replicativo curto; atividade hemaglutinante com eritrócitos de ovinos e camundongos; e é capaz de replicar e produzir citopatologia em cultivos celulares de humanos e de várias espécies animais. Testes de imunofluorescência revelaram que o agente é relacionado antigenicamente com o vírus da parainfluenza tipo-3 humana (hPI-3) e bovina (bPI-3). Posteriormente, anticorpos com atividade neutralizante contra o agente foram detectados no soro de bovinos (715/847), ovinos (41/59) e humanos (27/95). Uma análise posterior das fotos de ME revelou a pres