Decontamination of genetically modified mice strains by embryo transfer for obtaining SPF colonies in a Brazilian animal facility / Descontaminação de linhagens de camundongos geneticamente modificadas por transferência embrionária para obtenção de colônias SPF em um biotério brasileiro (São Paulo, SP)

The introduction of new strains of mice in specific pathogen-free (SPF) animal facilities should be performed carefully to avoid breaking sanitary barriers. To meet this need, animals should be rederived to reduce infection risk and thus avoid research interference caused by loss of animal health status and welfare. The objective of this study was to implement mice embryo transfer in the laboratory mouse facility of the Department of Immunology at the Institute of Biomedical Sciences/University of São Paulo, Brazil. Embryo transfers were performed to rederive genetically modified mouse strains with undefined sanitary status, received from different research and educational institutions. Fertilized eggs at two-cell stage were obtained by natural means and transferred into the oviducts of SPF pseudo-pregnant female mice. All surgical procedures were performed under aseptic conditions. A total of 625 embryos were transferred into the recipients. 148 pups were born, of which 140 were reared. Viruses, bacteria and intestinal protozoa were eliminated using this technique. The improvement in the microbiological status of mice allowed their expansion in our SPF facility. With these results, we can stimulate the use of embryo transfer technique between rodent facilities in Brazil and thus encourage the distribution of better models to our scientific community.(AU)

A introdução de novas linhagens de camundongos em biotérios livres de patógenos específicos (SPF) deve ser realizada com critérios para evitar a quebra das barreiras sanitárias. Dessa forma, os animais devem ser rederivados para reduzir os riscos de infecção e evitar as interferências provocadas pela perda do status sanitário e do bem-estar dos animais. O objetivo deste estudo foi implementar a transferência de embriões murinos no Biotério do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo, Brasil. As transferências embrionárias foram realizadas para rederivar linhagens de camundongos geneticamente modificadas com status sanitário não conhecido, recebidas de diferentes instituições de pesquisa e de ensino. Os embriões em duas células foram obtidos pelos métodos naturais e transferidos para os ovidutos de fêmeas de camundongos SPF pseudoprenhas. Todos os procedimentos cirúrgicos foram realizados sob condições assépticas. Um total de 625 embriões foram transferidos para as receptoras. Foram obtidos 148 filhotes nascidos vivos, destes 140 foram desmamados. Por meio desta técnica, foram eliminados vírus, bactérias e protozoários intestinais. A melhora no status microbiológico dos camundongos permitiu a expansão destes em nossa colônia SPF. Com esses resultados, podemos promover o uso da técnica de transferência de embriões entre os biotérios brasileiros e assim incentivar a distribuição de modelos mais adequados para a nossa comunidade científica.(AU)

Decontamination of genetically modified mice strains by embryo transfer for obtaining SPF colonies in a Brazilian animal facility / Descontaminação de linhagens de camundongos geneticamente modificadas por transferência embrionária para obtenção de colônias SPF em um biotério brasileiro (São Paulo, SP)

The introduction of new strains of mice in specific pathogen-free (SPF) animal facilities should be performed carefully to avoid breaking sanitary barriers. To meet this need, animals should be rederived to reduce infection risk and thus avoid research interference caused by loss of animal health status and welfare. The objective of this study was to implement mice embryo transfer in the laboratory mouse facility of the Department of Immunology at the Institute of Biomedical Sciences/University of São Paulo, Brazil. Embryo transfers were performed to rederive genetically modified mouse strains with undefined sanitary status, received from different research and educational institutions. Fertilized eggs at two-cell stage were obtained by natural means and transferred into the oviducts of SPF pseudo-pregnant female mice. All surgical procedures were performed under aseptic conditions. A total of 625 embryos were transferred into the recipients. 148 pups were born, of which 140 were reared. Viruses, bacteria and intestinal protozoa were eliminated using this technique. The improvement in the microbiological status of mice allowed their expansion in our SPF facility. With these results, we can stimulate the use of embryo transfer technique between rodent facilities in Brazil and thus encourage the distribution of better models to our scientific community.(AU)

A introdução de novas linhagens de camundongos em biotérios livres de patógenos específicos (SPF) deve ser realizada com critérios para evitar a quebra das barreiras sanitárias. Dessa forma, os animais devem ser rederivados para reduzir os riscos de infecção e evitar as interferências provocadas pela perda do status sanitário e do bem-estar dos animais. O objetivo deste estudo foi implementar a transferência de embriões murinos no Biotério do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo, Brasil. As transferências embrionárias foram realizadas para rederivar linhagens de camundongos geneticamente modificadas com status sanitário não conhecido, recebidas de diferentes instituições de pesquisa e de ensino. Os embriões em duas células foram obtidos pelos métodos naturais e transferidos para os ovidutos de fêmeas de camundongos SPF pseudoprenhas. Todos os procedimentos cirúrgicos foram realizados sob condições assépticas. Um total de 625 embriões foram transferidos para as receptoras. Foram obtidos 148 filhotes nascidos vivos, destes 140 foram desmamados. Por meio desta técnica, foram eliminados vírus, bactérias e protozoários intestinais. A melhora no status microbiológico dos camundongos permitiu a expansão destes em nossa colônia SPF. Com esses resultados, podemos promover o uso da técnica de transferência de embriões entre os biotérios brasileiros e assim incentivar a distribuição de modelos mais adequados para a nossa comunidade científica.(AU)

Desenvolvimento e implementação de um software livre para o gerenciamento de um biotério brasileiro / Development and employment of free language-based software for the managment of a brazilian lab animal facility

Com o advento da promulgação da Lei 11794/2008 (Lei Arouca), posteriormente regu- lamentada pelo Decreto 6899/2009, iniciou-se uma corrida para a implementação de mudanças no cenário da experimentação animal no Brasil, com ênfase para a neces- sidade de melhorias no gerenciamento dos biotérios. Com o intuito de facilitar essas melhorias, o uso de softwares específicos para o gerenciamento de biotérios tornou-se uma opção atrativa para a manutenção e recuperação dos dados das diferentes rotinas do criatório animal. Estes programas proporcionam melhor visualização da alocação dos recursos financeiros e facilitam tomadas de decisões gerenciais mais rápidas e seguras. Com o objetivo de melhorar a capacidade do processo gerencial do nosso biotério, desenvolvemos e implementamos um software baseado em linguagens de acesso livre, denominado BioterC. As etapas de desenvolvimento e implementação do software foram fundamentadas na interação direta entre o desenvolvedor e os bioteristas, propiciando a construção de uma ferramenta robusta, versátil, de uso intuitivo, em um conceito de elevada adaptabilidade e flexibilidade, sem qualquer investimento adicional com hardware por parte do biotério. Uma vez colocado em uso, o programa pôde ser posteriormente adaptado, visando à adequação do software com a realidade apresentada na rotina de cada ambiente do biotério. No presente relatório técnico descrevemos o desenvolvimento e a implementação de um software baseado em linguagens de programação de acesso livre, utilizado como uma ferramenta gerencial aplicada a biotérios.

The publication of Federal Brazilian Law 11.794/2008 (also named Law Arouca), regulated by Decree 6899/2009, was the major circumstance that supported changes in laboratory animal science in Brazil, in special those related to management control. The lack of management into lab animal facilities is related main to a limited capacity of both data recording and data recovery. Thus, softwares specifically developed to Furthermore, it allows a better overview of financial resources allocation and can maintain and analyze lab animal facilities data helping the overall data management. be used to take fast management decisions by lab animal staff. In order to improve the management in our lab animal facility was developed and implemented a free language-based software, termed BioterC. The whole software programming was based on close interaction between programmer developer and lab animal staff. This methodology allowed the construction of a robust, versatile, use intuitive, on a concept of high adaptability and flexibility software, without any additional investment in hardware by the lab animal facility. When software began to be used it could be constantly adapted to reality found into each routine from the lab animal facility. In this technical report we describe the developing and implementing of a free language software-based used as management tool applied in lab animal facilities.

Desenvolvimento e implementação de um software livre para o gerenciamento de um biotério brasileiro / Development and employment of free language-based software for the managment of a brazilian lab animal facility

Com o advento da promulgação da Lei 11794/2008 (Lei Arouca), posteriormente regu- lamentada pelo Decreto 6899/2009, iniciou-se uma corrida para a implementação de mudanças no cenário da experimentação animal no Brasil, com ênfase para a neces- sidade de melhorias no gerenciamento dos biotérios. Com o intuito de facilitar essas melhorias, o uso de softwares específicos para o gerenciamento de biotérios tornou-se uma opção atrativa para a manutenção e recuperação dos dados das diferentes rotinas do criatório animal. Estes programas proporcionam melhor visualização da alocação dos recursos financeiros e facilitam tomadas de decisões gerenciais mais rápidas e seguras. Com o objetivo de melhorar a capacidade do processo gerencial do nosso biotério, desenvolvemos e implementamos um software baseado em linguagens de acesso livre, denominado BioterC. As etapas de desenvolvimento e implementação do software foram fundamentadas na interação direta entre o desenvolvedor e os bioteristas, propiciando a construção de uma ferramenta robusta, versátil, de uso intuitivo, em um conceito de elevada adaptabilidade e flexibilidade, sem qualquer investimento adicional com hardware por parte do biotério. Uma vez colocado em uso, o programa pôde ser posteriormente adaptado, visando à adequação do software com a realidade apresentada na rotina de cada ambiente do biotério. No presente relatório técnico descrevemos o desenvolvimento e a implementação de um software baseado em linguagens de programação de acesso livre, utilizado como uma ferramenta gerencial aplicada a biotérios.(AU)

The publication of Federal Brazilian Law 11.794/2008 (also named Law Arouca), regulated by Decree 6899/2009, was the major circumstance that supported changes in laboratory animal science in Brazil, in special those related to management control. The lack of management into lab animal facilities is related main to a limited capacity of both data recording and data recovery. Thus, softwares specifically developed to Furthermore, it allows a better overview of financial resources allocation and can maintain and analyze lab animal facilities data helping the overall data management. be used to take fast management decisions by lab animal staff. In order to improve the management in our lab animal facility was developed and implemented a free language-based software, termed BioterC. The whole software programming was based on close interaction between programmer developer and lab animal staff. This methodology allowed the construction of a robust, versatile, use intuitive, on a concept of high adaptability and flexibility software, without any additional investment in hardware by the lab animal facility. When software began to be used it could be constantly adapted to reality found into each routine from the lab animal facility. In this technical report we describe the developing and implementing of a free language software-based used as management tool applied in lab animal facilities.(AU)

Decontamination of genetically modified mice strains by embryo transfer for obtaining SPF colonies in a Brazilian animal facility / Descontaminação de linhagens de camundongos geneticamente modificadas por transferência embrionária para obtenção de colônias SPF em um biotério brasileiro (São Paulo, SP)

The introduction of new strains of mice in specific pathogen-free (SPF) animal facilities should be performed carefully to avoid breaking sanitary barriers. To meet this need, animals should be rederived to reduce infection risk and thus avoid research interference caused by loss of animal health status and welfare. The objective of this study was to implement mice embryo transfer in the laboratory mouse facility of the Department of Immunology at the Institute of Biomedical Sciences/University of São Paulo, Brazil. Embryo transfers were performed to rederive genetically modified mouse strains with undefined sanitary status, received from different research and educational institutions. Fertilized eggs at two-cell stage were obtained by natural means and transferred into the oviducts of SPF pseudo-pregnant female mice. All surgical procedures were performed under aseptic conditions. A total of 625 embryos were transferred into therecipients. 148 pups were born, of which 140 were reared. Viruses, bacteria and intestinal protozoa were eliminated using this technique. The improvement in the microbiological status of mice allowed their expansion in our SPF facility. With these results, we can stimulate the use of embryo transfer technique between rodent facilities in Brazil and thus encourage the distribution of better models to our scientific community.

A introdução de novas linhagens de camundongos em biotérios livres de patógenos específicos (SPF) deve ser realizada com critérios para evitar a quebra das barreiras sanitárias. Dessa forma, os animais devem ser rederivados para reduzir os riscos de infecção e evitar as interferências provocadas pela perda do status sanitário e do bem-estar dos animais. O objetivo deste estudo foi implementar a transferência de embriões murinos no Biotério do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo, Brasil. As transferências embrionárias foram realizadas para rederivar linhagens de camundongos geneticamente modificadas com status sanitário não conhecido, recebidas de diferentes instituições de pesquisa e de ensino. Os embriões em duas células foram obtidos pelos métodos naturais e transferidos para os ovidutos de fêmeas de camundongos SPF pseudoprenhas. Todos os procedimentos cirúrgicos foramrealizados sob condições assépticas. Um total de 625 embriões foram transferidos para as receptoras. Foram obtidos 148 filhotes nascidos vivos, destes 140 foram desmamados. Por meio desta técnica, foram eliminados vírus, bactérias e protozoários intestinais. A melhora no status microbiológico dos camundongos permitiu a expansão destes em nossa colônia SPF. Com esses resultados, podemos promover o uso da técnica de transferência de embriões entre os biotéri

Parasite survey in mouse and rat colonies of Brazilian laboratory animal houses kept under differents sanitary barrier conditions

A parasitological study was undertaken to determine the health status of 15 mouse and 10 rat colonies bred in 18 Brazilian laboratory animal houses maintained under different sanitary barrier conditions which supply animals for teaching, research purposes and manufacture of biological products for medical or veterinary use. Parasitological methods were used for diagnosis of mites, lices, helminthes and protozoan parasites. A questionnaire was answered by institutions with the intention to obtain information about the existence of barriers against infections and of regular sanitary monitoring program of their colonies. The questionnaire data show that the majority of the animal houses investigated do not possess an efficient sanitary barrier system able to keep animals under controlled health sanitary conditions. Ecto and endoparasite infections are widespread in the colonies and multiple infections were common in animals from most facilities investigated. The prevalences of parasites detected among the mouse and rat colonies of the laboratory animal houses investigated were: Myocoptes musculinus (46.6%), Myobia musculi (26.6%), Radfordia ensifera (13.3%), Syphacia obvelata (86.6%), Aspiculuris tetraptera (60.0%), Hymenolepis nana (53.3%), Spironucleus muris (80.0%), Tritrichomonas muris (80.0%), Giardia muris (66.0%), Entamoeba muris (20.0%), Eimeria sp. (13.3%), Hexamastix muris (26.6%), Poliplax spinulosa (30.0%), Poliplax serrata (10.0%), Radfordia ensifera (30.0%), Syphacia muris (80.0%), Hymenolepis nana (40.0%), Trichosomoides crassicauda (55.5%), Spironucleus muris (90.0%), Tritrichomonas muris (80.0%), Giardia muris (60.0%), Entamoeba muris (80.0%), Eimeria sp. (60.0%) and Hexamastix muris (60.0%).

Um estudo parasitológico foi realizado para verificar as condições de saúde de 15 colônias de camundongos e 10 colônias de ratos produzidos em 18 biotérios de instituições brasileiras que fornecem animais para ensino, pesquisa e produção de imunobiológicos de uso médico ou veterinário. Métodos parasitológicos foram utilizados para diagnóstico de ácaros, piolhos, helmintos e protozoários parasitos. Um questionário foi respondido pelas instituições com o intuito de obter informações sobre a existência de barreiras contra infecções e programa de fiscalização sanitária de suas colônias. Os dados do questionário mostram que a maioria dos biotérios analisados não possui um sistema de barreiras sanitárias eficiente capaz de manter animais sob condições sanitárias controladas. Infecções por ecto e endoparasitos são generalizadas nas colônias e a associação de infecções múltiplas foi comum na maioria dos animais dos biotérios analisados. A prevalência dos parasitos detectados entre as colônias de camundongos e de ratos investigadas foi: Myocoptes musculinus (46,6%), Myobia musculi (26,6%), Radfordia ensifera (13,3%), Syphacia obvelata (86,6%), Aspiculuris tetraptera (60,0%), Hymenolepis nana (53,3%), Spironucleus muris (80,0%), Tritrichomonas muris (80,0%), Giardia muris (66,0%), Entamoeba muris (20,0%), Eimeria sp. (13,3%), Hexamastix muris (26,6%), Poliplax spinulosa (30,0%), Poliplax serrata (10,0%), Radfordia ensifera (30,0%), Syphacia muris (80,0%), Hymenolepis nana (40,0%), Trichosomoides crassicauda (55,5%), Spironucleus muris (90,0%), Tritrichomonas muris (80,0%), Giardia muris (60,0%), Entamoeba muris (80,0%), Eimeria sp. (60,0%) e Hexamastix muris (60,0%).

ANÁLISE HEMATOLÓGICA E BIOQUÍMICA EM CÁGADOS PESCOÇO-DE-COBRA (Hydromedusa tectifera) MANTIDOS EM CATIVEIRO

Hydromedusa tecnifera (cágado pescoço-de-cobra) pertence a Família Chelidae. Ordem Testudines e Classe Reptilia. No Estado do Paraná, essa espécie é encontrada na bacia do Rio Iguaçu; são animais pouco estudadas mas sabe-se que sofrem perturbações decorrentes da acentuada poluição, extração intensiva de areia e invasão urbana de várzeas. O cágado tornou-se alvo de estudos após ter sido encontrado no Rio Iguaçu devido ao segundo maior acidente ambiental brasileiro, ocorrido em julho de 2000, decorrente do derramamento de quatro milhões de litros de óleo da refinaria PETROBRÁS, no município de Araucária-PR. Denre os 56 cágados resgatados no local do acidente ambiental, dez animais (grupo acidente) foram mantidos em um biotério instalado no Hospital Veterinario da UFPR, juntamente com 12 cágados capturados a montante do local do acidente (grupo montante) e 15 cágados capturados no Zoológico de Curitiba (grupo referência). O objetivo desse trabalho foi analisar parâmetros hematológicos e bioquímicos e o nível de metais pesados e arsênico no sangue e músculo dos três grupos de cágados. No período compreendido entre os anos de 2000 e 2002, foram realizadas 16 colheitas de sangue de todos os cágados para avaliações hematológicas (eritrograma e leucograma) e bioquímicas (fosfatase alcalina, uréia, creatinina, ácido úrico e colinesterase). Três análises (sangue e músculo) foram realizadas em nove cágados para a dosagem de metais pesados e arsênico. Dentre os parâmetros hematológicos avaliados, houve diferença significativa na contagem total de eritrócitos para o grupo montante, na contagem total de leucócitos para o grupo acidente e na contagem diferencial de heterófilos e basófilos para o grupo acidente. Para as variáveis bioquímicas não houve diferença significativa entre os grupos. Na análise de metais pesados e arsênico observaram-se altos índices de alguns compostos no grupo acidente. Os resultados obtidos nesse estudo mostraram que poucos parâmetros sanguineos foram alterados no grupo acidente, mas essas alterações correlacionam-se com o acidente ambiental. Por meio desta pesquisa foi possível estabelecer valores basais, hematológicos e bioquímicos para H. tectifera já que a literatura corrente não apresenta valores normais para essa espécie