Andrologia e geriatria: o que temos de novo na espécie canina? / Andrology and geriatrics: what is new in the canine specie?

Os cães, assim como os homens, passam por fases na vida chegando a idades avançadas. A senilidade é observada em diferentes processos dos sistemas do organismo incluindo o sistema reprodutivo. Fazem parte das alterações do sistema reprodutor masculino de cães senis a perda da função dos órgãos sexuais, perda de libido, alterações do sistema endócrino reprodutivo e alterações no sêmen, nos espermatozoides e resultando em infertilidade. A longevidade reprodutiva dos cães reprodutores depende de vários fatores internos e externos e sua manutenção pode ser feita com a utilização de manejo nutricional, sanitário e reprodutivo corretos, aplicação de biotecnologias aplicadas a reprodução.(AU)

Dogs, like men, go through stages in life, reaching advanced ages. Senility is observed in different processes of the body systems including the reproductive system. The changes in the male reproductive system of senile dogs include loss of function of the sexual organs, loss of libido, changes in the reproductive endocrine system and changes in semen and sperm, resulting in infertility. The reproductive longevity of the stud dogs depends on several internal and external factors and its maintenance can be done with the use of correct nutritional, sanitary, reproductive management and application of biotechnologies applied to reproduction.(AU)

Biologia reprodutiva das abelhas africanizadas (Apis melífera) e biotecnologias aplicadas à sua conservação / Reproductive biology of Africanized bees (Apis mellifera) and biotechnologies applied to their conservation

A biodiversidade das abelhas africanizadas (Apis melífera) encontra-se sob grande ameaça e, neste cenário as investigações acerca da biologia reprodutiva, alguns aspectos ainda incipientes, bem como métodos aprimorados para a inseminação instrumental e criopreservação de gametas podem ser ferramentas preciosas para a conservação in situ e ex situ de subespécies e ecótipos. O entendimento e adoção de ferramentas como estas mencionadas, podem auxiliar na seleção de características de interesse para os criadores, assim como, nos esforços para a conservação de populações de abelhas ameaçadas.(AU)

The biodiversity of Africanized bees (Apis mellifera) is under great threat and, in this scenario, investigations about reproductive biology, some aspects are still incipient, as well as improved methods for instrumental insemination and cryopreservation of gametes can be precious tools for ex situ and in conservation. situ of subspecies and ecotypes can be contemplated. The understanding and adoption of tools such as those mentioned can help in the selection of characteristics of interest to breeders, as well as those committed to the conservation of endangered bee populations.(AU)

Seleção de reprodutores caprinos e ovinos para produção de sêmen / Selection of caprine and ovine sires for semen production

A presente revisão propôs analisar quais características são desejáveis para seleção de reprodutores caprinos e ovinos, visando à produção de sêmen. A escolha dos reprodutores deve ser feita de acordo com os padrões exigidos da raça, além da higidez reprodutiva dos animais. Biotecnologias reprodutivas oferecem oportunidades consideráveis para a produção animal, como a inseminação artificial, transferência de embriões e congelamento de sêmen. Análises da produção de espermatozoides são de grande importância, pois está diretamente relacionada com a atividade sexual. A genética do criatório é um fator crítico que influencia o resultado final e a saúde animal. A utilização de marcadores moleculares é uma ferramenta que temos para selecionar características desejáveis em uma prole, através da identificação de biomarcadores. Técnicas de genética molecular potencializam o efeito de biotécnicas reprodutivas e consequentemente a lucratividade da pecuária intensiva.(AU)

The present review proposed to analyze which characteristics are desirable for the selection of goat and sheep breeders, aiming at the production of semen. The choice of breeders must be made in accordance with the standards required for the breed, in addition to the reproductive health of the animals. Reproductive biotechnologies offer considerable opportunities for animal production, such as artificial insemination, embryo transfer and semen freezing. Analyzes of sperm production are of great importance, as it is directly related to sexual activity. Farm genetics is a critical factor that influences the end result and animal health. The use of molecular markers is a tool that we have to select desirable characteristics in an offspring, through the identification of biomarkers. Molecular genetic techniques enhance the effect of reproductive biotechniques and consequently the profitability of intensive livestock farming.(AU)

Recuperação, caracterização e criopreservação de espermatozoides epididimários de animais silvestres do bioma Caatinga / Recovery, characterization and cryopreservation of epididymal sperm from wild animals of the Caatinga biome

A Caatinga, bioma exclusivamente brasileiro, abriga grande diversidade biológica, porém sofre com graves ameaças ambientais. Por isso, é iminente a necessidade de desenvolvimento de técnicas voltadas para a conservação dos animais que nela habitam, bem como se seu germoplasma. Quando do súbito óbito de um animal biologicamente valioso, a recuperação de espermatozoides epididimários pode se apresentar como a única possibilidade para salvaguardar gametas. Ainda, esta biotécnicas configura-se em uma ferramenta possível de ser utilizada quando não há outra forma de se coletar o sêmen em determinada espécie. Os espermatozoides coletados podem ser armazenados por meio da criopreservação, e posteriormente utilizados em outras biotecnologias. Neste sentido, esta revisão tem como objetivo apresentar os aspectos da recuperação, caracterização e criopreservação de espermatozoides epididimários em animais silvestres com principal foco em espécies do bioma Caatinga, como os preás, cutias, catetos e emas.(AU)

The Caatinga, an exclusively Brazilian biome, is home to great biological diversity, but suffers from serious environmental threats. Therefore, there is an imminent need to develop techniques aimed at the conservation of the animals that inhabit it, as well as their germplasm. When the sudden death of a biologically valuable animal, the recovery of epididymal spermatozoa may present itself as the only possibility to safeguard gametes. Still, this biotechnique is a tool that can be used when there is no other way to collect semen in each species. Collected spermatozoa can be stored through cryopreservation, and later used in other biotechnologies. In this sense, this review aims to present aspects of recovery, characterization, and cryopreservation of epididymal spermatozoa in wild animals with a focus on species from the Caatinga biome, such as cavies, agoutis, collared peccary, and rheas.(AU)

Ética e condicionamento de animais selvagens para a aplicação de técnicas de reprodução assistida / Ethics and conditioning of wild animals for the application of assisted reproduction techniques

A relação humano-animal é conhecida desde o período Mesolítico e vem evoluindo ao longo dos anos pela busca de interações cada vez mais positivas. A forma como os animais e os ambientes são tratados abre muitas discussões éticas e morais em várias correntes filosóficas. O fato é que a biodiversidade vem apresentando uma redução expressiva dentro de um contexto de sexta extinção em massa do planeta e, para muitas espécies, trabalhar manejo populacional envolvendo coleções ex situ, seria a única alternativa de sobrevivência. As informações sobre a biologia das espécies selvagens ainda são muito insipientes e, portanto, faz-se necessário desenvolver pesquisas básicas que colaborem com as Técnicas de Reprodução Assistida (ARTs). A possibilidade de se trabalhar dentro do conceito de Conservação Única possibilita uma interconexão entre os planos de ação in situ e ex situ, as ações antrópicas no meio ambiente (sustentabilidade) e as pesquisas que englobam a conservação. Para tanto, utilizar as técnicas de condicionamento, que são prática voltada ao manejo de bem-estar, associadas às biotecnologias reprodutivas tem sido um manejo cada vez mais utilizado, com sucesso para muitas espécies ameaçadas. Animais manejados dentro dos protocolos de boas práticas são grandes candidatos a fazer parte dos programas de conservação integrada.(AU)

The human-animal relationship has been known since the Mesolithic period and has evolved over the years in search of increasingly positive interactions. How animals and environments are treated opens up many ethical and moral discussions in various philosophical currents. The fact is that biodiversity has been showing a significant reduction within the context of the sixth mass extinction on the planet, and, for many species, working on population management involving ex situ collections would be the only alternative for survival. Information on the biology of wild species is still very incipient; therefore, it is necessary to develop basic research that collaborates with Assisted Reproduction Techniques (ARTs). Working within the One Conservation concept enables an interconnection between in situ and ex situ action plans, anthropic environmental actions (sustainability), and research that encompasses conservation. Therefore, using conditioning techniques­a practice aimed at welfare management­associated with reproductive biotechnologies has been increasingly used, with success for many endangered species. Animals handled within suitable practice protocols are great candidates to be part of integrated conservation programs.(AU)

Effects of oxygen supplementation in ewes subjected to laparoscopic ovum pick-up under total intravenous anesthesia / Efeitos da suplementação de oxigênio em ovelhas submetidas à aspiração de folículos por laparoscopia sob anestesia intravenosa total

Laparoscopy procedures are useful tools to perform some assisted reproductive biotechnologies in ewes, it requi-res general anesthesia and manoeuvres that might result in alteration of the cardiopulmonary function. For this reason, this study aimed to investigate the effects of oxygen supplementation as a therapeutic measure to mitigate these alterations in ewes submitted to laparoscopic ovum pick-up (LOPU) under total intravenous anesthesia (TIVA). Twenty-four healthy adult ewes were submitted to two LOPUs with a 21 days interval, under ketamine-midazolam anesthesia, and receiving each of the two experimental in random order, oxygen treatment (OT) 50 mL/kg/min of oxygen via endotracheal tube and control treatment (CT) not receive any inhalation treatment. Heart rate (HR), respiratory rate (fR), peripheral oxygen saturation (SpO2), mean arterial pressure (MAP), rectal temperature (RT), end-tidal CO2 concentration (EtCO2) and recovery anesthesia time were evaluated during LOPU, arterial blood gases and electrolytes were evaluated after induction of anesthesia and at the end of the LOPU. Variables were compared between groups and moments using ANOVA. MAP, SpO2, PaO2, SaO2 and pH were higher in OT, while EtCO2, PaCO2, temperature loss and recovery time were lower. These results allow to conclude that oxy-gen supplementation in ewes submitted to LOPU under TIVA provides benefits in order to mitigate physiological alterations.(AU)

Os procedimentos de laparoscopia são ferramentas úteis para realizar algumas biotecnologias de reprodução assistida em ovelhas, requer anestesia geral e manobras que podem resultar em alteração da função cardiopulmonar. Por esse motivo, este estudo teve como objetivo investigar os efeitos da suplementação de oxigênio como medida terapêutica para atenuar as alterações em ovelhas submetidas à Aspiração Folicular guiada por Laparoscopia (LOPU) sob anestesia venosa total (TIVA). Vinte e quatro ovelhas adultas saudáveis foram submetidas a duas LOPUs com intervalo de 21 dias, sob anestesia com cetamina-midazolam, recebendo cada um dos dois experimentos em ordem aleatória, tratamento com oxigênio (OT) 50 mL/kg/min de oxigênio via tubo endotraqueal e tratamento de controle (CT) não recebem nenhum tratamento por inalação. Frequência cardíaca (FC), frequência respiratória (FR), saturação periférica de oxigênio (SpO2), pressão arterial média (PAM), temperatura retal (TR), concentração expirada de CO2 (EtCO2) e tempo de recuperação da anestesia foram avaliados durante LOPU, arterial gasometria e eletrólitos foram avaliados após a indução da anestesia e ao final da COL. As variáveis foram comparadas entre grupos e momentos por meio de ANOVA. PAM, SpO2, PaO2, SaO2 e pH foram maiores no TO, enquanto EtCO2, PaCO2, perda de temperatura e tempo de recuperação foram menores. Estes resultados permitem concluir que a suplementação de oxigênio em ovelhas submetidas a LOPU sob TIVA proporciona benefícios no sentido de atenuar as alterações fisiológicas.(AU)

Avances en el manejo de gametos caninos in vitro / Advance in handling canine gametes in vitro

Las características fisiológicas de los gametos caninos que los hace especiales respecto a los de otras especies han dificultado los estudios tendientes a incrementar los porcentajes de éxito en diversas biotecnologías reproductivas. Entre estas características está el inicio de la meiosis de los ovocitos posterior al nacimiento y la ovulación de un gameto inmaduro como ovocito primario, lo que ha complejizado la maduración in vitro de estos ovocitos y, por parte de los espermatozoides, una gran diferencia en la sobrevivencia de los espermatozoides eyaculados versus los congelados-descongelados, que hace imprescindible evaluar la biología reproductiva de estos gametos tendiente a optimizar nuevos protocolos haciendo énfasis previamente en una adecuada evaluación del crecimiento del ovocito in vivo y de la viabilidad espermática en aquellos sometidos a criopreservación(AU)

The physiological characteristics of canine gametes that make them unique compared to those of other species have hindered studies aimed at increasing the success rates in various reproductive biotechnologies. Among these characteristics is the meiosis of the oocytes after birth and the ovulation of an immature gamete as a primary oocyte, which has made the in vitro maturation of these oocytes more complex and, on the part of the spermatozoa, a significant difference in the viability of ejaculated versus frozen-thawed spermatozoa, which makes it essential to evaluate the reproductive biology of these gametes in order to optimize new protocols, previously emphasizing an adequate evaluation of in vivo oocyte growth and sperm viability in those subjected to cryopreservation.(AU)

Vaginal cytology in mares in the different stages of the estral cycle associated with the seasons of the year / Citologia vaginal em éguas nas diferentes fases do ciclo estral associadas as estações do ano

The reproductive biotechnologies directly assist in the development of different methods of reproductive evaluation. The objective of this study was to develop a new method to determine the estrous cycle phase in equine females through vaginal cytology throughout the seasons, as well as to establish an estimate of inflammatory cells present in the vagina. Six mares were evaluated at different ages without a defined breed and reproductive activity and were subjected to ultrasound evaluation of the reproductive system and cytological analysis of the vaginal region. In the summer, there was a predominance of keratinized epithelial cells in the estrus and intermediate in the diestrus. In the autumn, there was a predominance of keratinized cells in estrus and parabasal cells in estrus and diestrus. In anestrus (winter), a greater number of parabasal cells was identified in relation to the other cell types. In estrus (spring), there was a predominance of parabasal and intermediate cells. Conversely, in diestrus, parabasals were found in greater numbers. The evaluation of inflammatory cells of the vaginal epithelium of mares showed greater activity in the summer; however, there are no reference values for healthy animals in the literature, and it is necessary to conduct studies on the subject. It is concluded that there is an influence of cyclicity on the vaginal epithelium of the equine species, varying according to the season. Additionally, vaginal cytological evaluation is an important complementary tool in the diagnosis of vaginitis in mares, requiring further research on the subject.(AU)

As biotecnologias reprodutivas auxiliam diretamente no desenvolvimento de diferentes métodos de avaliação repro-dutiva. O objetivo deste estudo foi desenvolver um novo método para determinar a fase do ciclo estral em fêmeas equinas através da citologia vaginal ao longo das estações, bem como estabelecer uma estimativa das células inflamatórias presentes na vagina. Seis éguas foram avaliadas em diferentes idades, sem raça definida e em atividade reprodutiva, e foram submetidas à avaliação ultrassonográfica do aparelho reprodutor e análise citológica da região vaginal. No verão, houve predomínio de células epiteliais queratinizadas no estro e intermediárias no diestro. No outono, houve predomínio de células queratinizadas no estro e células parabasais no estro e diestro. No anestro (inverno), foi identificado maior número de células parabasais em relação aos demais tipos celulares. No estro (primavera), houve predomínio de células parabasais e intermediárias. Por outro lado, no diestro, os parabasais foram encontrados em maior número. A avaliação das células inflamatórias do epitélio vaginal de éguas mostrou maior atividade no verão; entretanto, não há valores de referência para animais saudáveis na literatura, sendo necessário a rea-lização de estudos sobre o assunto. Conclui-se que há influência da ciclicidade no epitélio vaginal da espécie equina, variando de acordo com a estação do ano. Além disso, a avaliação citológica vaginal é uma importante ferramenta complementar no diagnóstico da vaginite em éguas, necessitando de mais pesquisas sobre o assunto.(AU)

Biotecnologias na preservação de espermatozoides felinos / Biotechnologies in the preservation of feline sperm

O gato doméstico é a única espécie da família Felídea sem risco ou iminência de extinção, diferente da maior parte dos felinos selvagens. Desta forma, o desenvolvimento e aprimoramento de diferentes biotécnicas reprodutivas, são essenciais para a manutenção da qualidade reprodutiva, tendo em vista a preservação de espécies mais vulneráveis. Além disso, as biotécnicas do sêmen são para as tecnologias reprodutivas, como a inseminação artificial (IA) e a fertilização in vitro (FIV). Sendo assim, o objetivo deste compilado bibliográfico foi abordar as principais técnicas de colheita, análise e preservação de sêmen/espermatozoides felino, assim como o uso dessas células em IA e FIV. Para a colheita do sêmen felino, diferentes métodos têm sido aplicados: ejaculação farmacológica, eletroejaculação e vagina artificial. Em caso de óbito do reprodutor, os espermatozoides recuperados do epidídimo também apresentam viabilidade reprodutiva. Ademais, a cinética espermática avaliada pelo sistema CASA, a morfologia e a morfometria são as principais análises que demonstram a qualidade espermática e refletem na fertilidade do ejaculado. O sistema CASA também avalia a trajetória individual de cada espermatozoide, que ao se agrupar em clusters, demonstra a heterogeneidade do ejaculado nas subpopulações. Contudo, os diluentes para a conservação e refrigeração dos espermatozoides felinos e as curvas de congelação ainda não estão totalmente estabelecidos e influenciam diretamente a viabilidade dos espermatozoides criopreservados. Diante disso, os resultados da utilização do sêmen felino após criopreservação são inconsistentes, sendo necessários mais estudos para elucidar melhores curvas de congelação e meios de diluentes para viabilizar a preservação do material genético dos gatos.

The domestic cat is the only species of the Felidea family without risk or imminence of extinction, unlike most wild cats. Therefore, the development and improvement of different reproductive biotechnologies are essential for the maintenance of reproductive quality for the preservation of the most vulnerable species. Furthermore, semen biotechnologies are the basis for reproductive technologies such as artificial insemination (AI) and in vitro fertilization (IVF). Thus, the objective of this bibliographic compilation was to approach the main techniques of collection, analysis, and preservation of feline semen/sperm, as well as the use of these cells in AI and IVF. For feline semen collection, different methods have been applied: pharmacological ejaculation, electroejaculation, and artificial vagina. In case of death of the sire, sperm recovered from the epididymis also show reproductive viability. Moreover, the sperm kinetics evaluated by the CASA system, the morphology, and the morphometry are the main analyzes that demonstrate sperm quality and reflect on ejaculate fertility. The CASA system also evaluates the individual path of each sperm, which, when grouped into clusters, demonstrates the heterogeneity of the ejaculate in the subpopulations. However, diluents for the conservation and refrigeration of feline sperm and freezing curves are not yet fully established and directly influence the viability of cryopreserved sperm. Therefore, the results of using feline semen after cryopreservation are inconsistent, and further studies are needed to elucidate better freezing curves and diluents to enable the preservation of the genetic material of cats.

Relative transcript level of BMP15, BAX and CASP3 with qRT-PCR in vitrified equine immature cumulus-oocytes complexes / Relative transcript level of BMP15, BAX and CASP3 with qRT-PCR in vitrified equine immature cumulus-oocytes complexes

Research focused on female gamete vitrification has increased attention to develop a reliable cryopreservation method to preserve immature equine oocytes. Despite the intensive implementation of biotechnological procedures for horse breeding, vitrification of immature equine cumulus-oocyte complexes (COCs) remain to be clearly elucidated. We aimed to determine the relative transcript level of target genes Bone morphogenetic protein 15 (BMP15); Bcl-2-associated X protein (BAX); and Caspase 3 (CASP3) in equine COCs prior to and after vitrification. Ovarian follicles were aspirated from ovaries collected from an abattoir. A total of 240 COCs were collected and distributed into vitrified COCs (VIT, n=120) and nonvitrified (Non-VIT, n=120) groups. Then, COCs were preserved and relative transcript expressions of BMP15, BAX, CASP3 were measured and normalized against GAPDH performed by qRT-PCR. In addition, 38 COCs were evaluated to assess chromatin configuration of germinal vesicl e stage prior and after vitrification by exposure to 10 µg/ml of bisbenzimide. A difference was observed in the COCs' mRNA level of abundance for the BAX gene between the VIT (2.05 ± 0.47) and (0.85 ± 0.08) Non-VIT groups. There was no difference in mRNA relative transcript level of CASP3 and BMP15 in Non-VIT (0.63 ± 0.20 and 1.55 ± 0.73, respectively) compared to VIT (0.64 ± 0.01 and 2.84 ± 2.20, respectively) equine COCs. All COCs where considered at immature stage of development even though COCs in Non-VIT group showed higher condensed chromatin configuration compared to VIT (100% vs 60.7%, respectively). We demonstrate that BMP15 and CASP3 are detected in VIT and Non-VIT immature COCs. In conclusion, BAX is expressed highly in vitrified immature equine COCs and indicates that activation of apoptosis signaling cascades in cells exposed to vitrification.(AU)

Pesquisas sobre a vitrificação de gametas femininos estão sendo realizadas para o desenvolvimento de um método confiável de criopreservação dos complexos cumulus-oócitos (CCOs) na espécie equina. Apesar da implementação intensiva de biotecnologias reprodutivas em equinos, a vitrificação dos CCOs imaturos permanece em estágio experimental em relação à competência celular. O objetivo do estudo foi determinar o nível de transcrição relativo dos genes Proteína morfogenética óssea 15 (BMP15); Proteína X associada a Bcl-2 (BAX); e Caspase 3 (CASP3) em CCOs equinos antes e após a vitrificação. Folículos ovarianos foram aspirados de ovários coletados em matadouro. O total de 240 CCOs foi coletado e distribuído em grupos vitrificados (VIT, n=120) e não vitrificados (N-VIT, n=120). Os CCOs foram preservados e as expressões transcritas relativas de BMP15, BAX, CASP3 foram determinadas pela técnica de qRT-PCR sendo normalizadas em relação ao GAPDH. Além disso, 38 CCOs foram avaliados para determinar a configuração da cromatina no estágio de vesícula germinativa antes e após a vitrificação pela exposição a 10 µg/ml de bisbenzimida. Os resultados mostraram uma diferença no nível de abundância de mRNA dos CCOs para o gene BAX entre os grupos VIT (2,05 ± 0,47) e N-VIT (0,85 ± 0,08). Não houve diferença no nível de transcrição relativa do mRNA de CASP3 e BMP15 nos CCOs do grupo N-VIT (0,63 ± 0,20 e 1,55 ± 0,73, respectivamente) em comparação com VIT (0,64 ± 0,01 e 2,84 ± 2,20, respectivamente). Todos os CCOs foram considerados em estágio imaturo de desenvolvimento, embora os CCOs no grupo N-VIT apresentaram a configuração de cromatina condensada em maior número de células avaliadas em comparação com VIT (100% vs 60,7%, respectivamente). Demonstramos que BMP15 e CASP3 são detectados em CCOs imaturos em VIT e N-VIT. Conclui-se que o BAX é altamente expresso em CCOs equinos imaturos vitrificados sendo relacionado à sinalização de apoptose em células expostas ao processo de vitrificação.(AU)

Uma visão integrada das biotecnologias reprodutivas com o conceito de One Conservation / An integrated view of reproductive biotechnologies with the One Conservation's concept

O preocupante status de conservação de milhares de espécies desencadeia uma força tarefa de conservação integrada para evitar o colapso da biodiversidade em muitos nichos ecológicos. A possibilidade de se trabalhar dentro do conceito de one conservation possibilita uma interconexão entre os planos de ação in situ e ex situ, as ações antrópicas no meio ambiente (sustentabilidade) e as pesquisas que englobam a conservação. Associar agricultura e a pecuária às formas sustentáveis de produção é uma maneira efetiva de contribuir com conservação da biodiversidade e dos recursos naturais, além de ofertar melhores meios de vida e bem-estar humano. As populações de fauna mantidas ex situ também são alvo dos programas de conservação integrada. É preciso trabalhar protocolos de manejo de bem-estar para que estes animais sejam viáveis dentro dos programas de reprodução que visam aumento da variabilidade genética para a espécie. Além disto, desafios constantes permeiam a reprodução destes animais, como o desconhecimento de informações comportamentais, fisiológicos, bem como seus mecanismos adaptativos frente a situações de mudanças. A possibilidade de armazenar informações genéticas de espécies silvestres, através dos bancos de germoplasma é uma forma de salvaguardar espécies até que as biotécnicas reprodutivas estejam com delineamentos bem eficazes para serem aplicadas.

The worrying conservation status of thousands of species triggers an integrated conservation task force to prevent biodiversity from collapsing in many ecological niches. The possibility of working within the One Conservation concept enables interconnection between in situ and ex situ action plans, anthropogenic actions in the environment (sustainability), and research that encompasses conservation. Associating agriculture and livestock with sustainable forms of production is an effective way to contribute to the conservation of biodiversity and natural resources and offer better livelihoods and human well-being. Integrated conservation programs also target ex situ fauna populations. It is necessary to work on welfare management protocols to make these animals viable within breeding programs to increase genetic variability for the species. In addition, constant challenges permeate the reproduction of these animals, such as the lack of behavioral and physiological information and their adaptive mechanisms in changing situations. The possibility of storing genetic information of wild species through germplasm banks is a way of safeguarding species until reproductive biotechniques have very effective designs to be applied.

Desafios técnicos e biológicos na produção in vitro de embriões de búfalo / Desafíos técnicos y biológicos en la producción in vitro de embriones de búfalo

O elevado número de búfalos, junto com seus atributos produtivos, tem convertido a Amazônia brasileira em uma das regiões mais importantes na produção de animais desta espécie fora da Ásia. O uso de biotecnologias reprodutivas tem permitido importantes avanços no melhoramento genético, no entanto, a resposta dos búfalos às diferentes técnicas de reprodução assistida é variável. Atualmente, a produção in vitro de embriões nesta espécie, embora represente uma técnica com resultados promissores, ainda se depara com desafios relacionados com as particularidades estruturais e metabólicas dos gametas e embriões, assim como com as características morfofisiológicas próprias da reprodução dos búfalos. Conjuntamente, essas características compõem os fatores biológicos e técnicos que majoritariamente reduzem a eficiência dos resultados e que obrigam a adaptação dos sistemas e das metodologias utilizadas ao longo do processo de produção de embriões no laboratório. Nesse sentido, representam os pontos chaves que merecem ser analisados em profundidade na procura de melhorar os resultados e alcançar a maior eficiência da técnica quando aplicada à espécie bubalina.

El elevado número de búfalos, junto con sus atributos productivos, han convertido a la Amazonia brasilera en una de las regiones más importantes para la producción de animales de esta especie fuera del continente asiático. La implementación de biotecnologías reproductivas ha permitido importantes avances en el mejoramiento genético, sin embargo, la respuesta de los búfalos a las diferentes técnicas de reproducción asistida es variable. En la actualidad, la producción in vitro de embriones en esta especie, aun cuando representa una técnica con resultados promisorios, enfrenta desafíos relacionados con las particularidades estructurales y metabólicas de los gametos y embriones, así como, con las características morfofisiológicas propias de la reproducción de los búfalos. Conjuntamente, esas características componen los factores de orden técnico y biológico que en mayor medida reducen la eficiencia de los resultados, y que obligan a la adaptación de los sistemas y las metodologías utilizadas a lo largo de la producción de embriones en el laboratorio, por lo tanto, representan los puntos clave que merecen ser analizados a profundidad, en la búsqueda de mejorar los resultados, y de alcanzar la plena eficiencia de la técnica, cuando se implementa en la especie bufalina.

Synchronization with estradiol benzoate in the presence of the corpus luteum in Wagyu cows increases the number of medium follicles but does not interfere with in vitro production of embryos / Sincronização com benzoato de estradiol na presença do corpo lúteo em vacas de Wagyu aumenta o número de folículos médios, mas não interfere com a produção in vitro de embriões

Reproductive biotechnologies are emerging as an important element for livestock; however, some strategies must be modified to adapt to different breeding systems, such as the use of follicular synchronization protocols. This study aimed to evaluate follicular synchronization using estradiol benzoate (EB), in the presence of the corpus luteum (CL) from Wagyu oocyte donors in in vitro embryo production (IVEP). Rounds of IVEP were performed in heifers and cows (n=19) that were classified into three groups: G1/CL - animals with CL, G2/WCL - animals without CL, and G3/CL + EB - animals with CL that were subjected to follicular synchronization with EB at D0. The groups G1/CL and G2/WCL were considered the control and undertook the natural process of follicular dynamics. The results showed that the synchronization of the follicular wave with the application of EB in the presence of CL, presented a smaller number of small (6.05 ± 0.55) and large follicles (0.45 ± 0.15), but increased (P < 0.05) the number of medium-sized follicles (16.20 ± 0.90). However, the results of ovum pick up showed that regardless of whether or not EB was applied, and regardless of the presence or absence of CL in the Wagyu donor, there was no difference among the groups (P > 0.05) concerning the number of viable oocytes and the viability rate. It was concluded that follicular synchronization using EB in Wagyu oocyte donors that presented a CL, increased the number of medium-sized follicles. However, there was no improvement in the efficiency of ovum pick up, in vitro embryo production, and pregnancy rate.(AU)

As biotecnologias reprodutivas estão emergindo como um elemento importante para a pecuária, entretanto, algumas estratégias devem ser modificadas para se adaptar a diferentes sistemas de criação, como o uso de protocolos de sincronização folicular. Este estudo teve como objetivo avaliar a sincronização folicular utilizando benzoato de estradiol (BE), na presença do corpo lúteo (CL) de doadoras de oócitos Wagyu na produção in vitro de embriões (PIVE). Sessões de PIVE foram realizadas em novilhas e vacas (n=19) que foram classificadas em três grupos: G1/CL - animais com CL, G2/SCL - animais sem CL e G3/CL+BE - animais com CL que foram submetidos para sincronização folicular com BE em D0. Os grupos G1/CL e G2/ SCL foram considerados o controle e realizaram o processo natural da dinâmica folicular. Os resultados mostraram que a sincronização da onda folicular com a aplicação de BE na presença de CL, apresentou um menor número de folículos pequenos (6,05 ± 0,55) e grandes (0,45 ± 0,15), mas aumentou (P < 0,05) o número de folículos de tamanho médio (16,20 ± 0,90). No entanto, os resultados da ovum pick up mostraram que independente da aplicação ou não de BE, e independente da presença ou ausência de CL na doadora Wagyu, não houve diferença entre os grupos (P > 0,05) quanto ao número de oócitos viáveis e a taxa de viabilidade. Concluiu-se que a sincronização folicular por meio de BE em doadoras de oócitos Wagyu que apresentaram CL, aumentou o número de folículos de tamanho médio. No entanto, não houve melhora na eficiência da ovum pick up, na produção in vitro de embriões e na taxa de prenhez.(AU)

Evolução e premissas dos protocolos hormonais de inseminação artificial em tempo fixo na pecuária / Evolution and premises of hormonal protocols of fixed time artificial insemination in livestock

O Brasil historicamente tornou-se um dos principais produtores na pecuária de leite e corte. No entanto, para que o país continue com alta eficácia na produção, deve-se realizar a reposição de animais produtivos. Tal fator é proporcionado pela reprodução animal, através de novas biotecnologias criadas, sendo uma delas a Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF), a qual atribui um determinado protocolo hormonal e permite saber o dia específico para a inseminação da fêmea, sem a necessidade da observação do estro. O objetivo da atual revisão é sintetizar a evolução dos protocolos hormonais de IATF e apresentar as estratégias atuais para o aumento da fertilidade do rebanho.

Brazil has historically become one of the main producers of dairy and beef cattle. However, for the country to continue with high efficiency in production, it is necessary to perform the replacement productive animals. Such factor is provided by animal reproduction, through new biotechnologies created, one of which is Artificial Insemination in Fixed Time (IATF), which assigns a certain hormonal protocol and it is possible to know the specific day for the insemination of the female without the need of oestrus observation. The objective of the current review is to synthesize the evolution of hormonal protocols of IATF and present the current strategies for increasing herd fertility.

Caracterização fúngica e formação de biofilme em éguas com endometrite / Fungal characterization and biofilm formation in mares with endometritis

A endometrite é a principal causa de infertilidade em éguas, além de gerar grandes transtornos econômicos e produtivos. Objetivou-se caracterizar a citologia, cultura bacteriana e fúngica, além da identificação da formação de biofilme em éguas com endometrite. Amostras de 70 éguas foram coletadas para citologia uterina e exame microbiológico. A determinação da formação de biofilme foi realizada através da técnica de cristal violeta. Das 70 éguas diagnosticadas com endometrite 43 (61,4%) apresentaram infecção bacteriana e/ou fúngica. Das 43 éguas, 30,2% (13/43) apresentaram infecção fúngica, os mais evidenciados foram Aspergillus spp. e Candida albicans, Curvalaria spp., Cladosporium spp. e Zygomices spp. Dos fungos identificados, 9/13 (69,2%) formaram biofilme. Esses resultados revelam números de infecção fúngica acima da média em comparação com a literatura. Várias causas são reportadas ao aumento dos casos de endometrite fúngica, dentre elas o aumento no uso das biotecnologias reprodutivas provocando um excesso de manipulação uterina. É de suma importância a identificação do agente, o conhecimento da suscetibilidade farmacológica e a comprovação da produção de biofilme em casos de endometrite. Estas ferramentas podem fornecer subsídios ainda mais importantes para melhorar a eficiência reprodutiva e sanitária dos rebanhos equinos.(AU)

Endometritis is the main cause of infertility in mares, besides generating major economic and productive disorders. The objective was to characterize the cytology, microbiological and fungal culture, as well as the identification of biofilm formation in mares with endometritis. Samples of seventy mares were collected for uterine cytology and microbiological examination. The determination of biofilm formation was performed using violet crystal technique. Of the seventy mares diagnosed with endometritis 43 (61.4%) presented bacterial and/or fungal infection. From the 43 mares, 30.2% (13/43) presented fungal infection, the most evidenced were Aspergillus spp. and Candida albicans, Curvalaria spp., Cladosporium spp. and Zygomices spp. Of the identified fungi, 9/13 (69.2%) formed biofilm. These results reveal above average numbers of fungal infection compared to the literature. Several causes are related to the increase in cases of fungal endometritis, among them the increase in the use of reproductive biotechnologies, causing an excessive uterine manipulation. Identification of the agent, knowledge of pharmacological susceptibility and evidence of biofilm production in endometritis cases are extremely important. These tools can provide even more important subsidies to improve the reproductive and sanitary efficiency of equine herds.(AU)

Cultivo in vitro de folículos pré-antrais bovinos: revisão, desafios, conquistas e perspectivas futuras / In vitro culture of bovine preantral follicles: review, challenges, achievements and future perspectives

A reprodução animal incide diretamente na eficiência e rentabilidade econômica de um rebanho, sendo considerada um dos fatores de maior importância para os sistemas de produção. Consequentemente, o desenvolvimento e a utilização de biotecnologia são indispensáveis para o aumento da eficiência reprodutiva, do melhoramento genético, da produção de alimentos e geração de riquezas. Nas últimas décadas várias foram as biotécnicas associadas à reprodução animal que apresentaram um grande potencial para a geração de genética, especialmente, ao que se referem aos avanços da reprodução assistida. Estes progressos possibilitaram a utilização de folículos pré-antrais como fonte de oócitos para biotecnologias reprodutivas. Deste modo, a técnica de cultivo in vitro proporciona a retomada do desenvolvimento dos folículos presente na reserva ovariana pela ativação in vitro forçada simulando a ocorrência de distúrbios na foliculogênesse. Até então, apenas a especie murina obteve descendentes vivos através dos folículos primordiais cultivados in vitro. Infelizmente, não há relatos de sucesso em outras espécies, tornando o desenvolvimento de sistemas ideias de cultivo in vitro um desafio. Portanto, o objetivo desta revisão é descrever e discutir os principais avanços da situação atual da pesquisa com folículos pré-antrais inclusos em folículos ovarianos.(AU)

Animal reproduction directly affects the efficiency and economic profitability of a herd, being considered one of the most important factors for production systems. Consequently, the development and use of biotechnology are indispensable for increasing reproductive efficiency, genetic improvement, food production and wealth generation. In the last few decades, biotechnologies associated with animal reproduction have shown great potential for the generation of genetics, especially with regard to advances in assisted reproduction. These advances have enabled the use of pre-antral follicles as a source of oocytes for reproductive biotechnologies. Thus, the in vitro culture technique provides the resumption of the development of follicles present in the ovarian reserve by forced in vitro activation, simulating the occurrence of disturbances in folliculogenesis. Until then, only the murine species obtained living descendants through primordial follicles cultivated in vitro. Unfortunately, there are no reports of success in other species, making the development of ideal in vitro culture systems a challenge.Therefore, the purpose of this review is to describe and discuss the main advances in the current research situation with preantral follicles included in ovarian follicles.(AU)

Evolução e premissas dos protocolos hormonais de inseminação artificial em tempo fixo na pecuária / Evolution and premises of hormonal protocols of fixed time artificial insemination in livestock

O Brasil historicamente tornou-se um dos principais produtores na pecuária de leite e corte. No entanto, para que o país continue com alta eficácia na produção, deve-se realizar a reposição de animais produtivos. Tal fator é proporcionado pela reprodução animal, através de novas biotecnologias criadas, sendo uma delas a Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF), a qual atribui um determinado protocolo hormonal e permite saber o dia específico para a inseminação da fêmea, sem a necessidade da observação do estro. O objetivo da atual revisão é sintetizar a evolução dos protocolos hormonais de IATF e apresentar as estratégias atuais para o aumento da fertilidade do rebanho.(AU)

Brazil has historically become one of the main producers of dairy and beef cattle. However, for the country to continue with high efficiency in production, it is necessary to perform the replacement productive animals. Such factor is provided by animal reproduction, through new biotechnologies created, one of which is Artificial Insemination in Fixed Time (IATF), which assigns a certain hormonal protocol and it is possible to know the specific day for the insemination of the female without the need of oestrus observation. The objective of the current review is to synthesize the evolution of hormonal protocols of IATF and present the current strategies for increasing herd fertility.(AU)

Caracterização fúngica e formação de biofilme em éguas com endometrite / Fungal characterization and biofilm formation in mares with endometritis

A endometrite é a principal causa de infertilidade em éguas, além de gerar grandes transtornos econômicos e produtivos. Objetivou-se caracterizar a citologia, cultura bacteriana e fúngica, além da identificação da formação de biofilme em éguas com endometrite. Amostras de 70 éguas foram coletadas para citologia uterina e exame microbiológico. A determinação da formação de biofilme foi realizada através da técnica de cristal violeta. Das 70 éguas diagnosticadas com endometrite 43 (61,4%) apresentaram infecção bacteriana e/ou fúngica. Das 43 éguas, 30,2% (13/43) apresentaram infecção fúngica, os mais evidenciados foram Aspergillus spp. e Candida albicans, Curvalaria spp., Cladosporium spp. e Zygomices spp. Dos fungos identificados, 9/13 (69,2%) formaram biofilme. Esses resultados revelam números de infecção fúngica acima da média em comparação com a literatura. Várias causas são reportadas ao aumento dos casos de endometrite fúngica, dentre elas o aumento no uso das biotecnologias reprodutivas provocando um excesso de manipulação uterina. É de suma importância a identificação do agente, o conhecimento da suscetibilidade farmacológica e a comprovação da produção de biofilme em casos de endometrite. Estas ferramentas podem fornecer subsídios ainda mais importantes para melhorar a eficiência reprodutiva e sanitária dos rebanhos equinos.

Endometritis is the main cause of infertility in mares, besides generating major economic and productive disorders. The objective was to characterize the cytology, microbiological and fungal culture, as well as the identification of biofilm formation in mares with endometritis. Samples of seventy mares were collected for uterine cytology and microbiological examination. The determination of biofilm formation was performed using violet crystal technique. Of the seventy mares diagnosed with endometritis 43 (61.4%) presented bacterial and/or fungal infection. From the 43 mares, 30.2% (13/43) presented fungal infection, the most evidenced were Aspergillus spp. and Candida albicans, Curvalaria spp., Cladosporium spp. and Zygomices spp. Of the identified fungi, 9/13 (69.2%) formed biofilm. These results reveal above average numbers of fungal infection compared to the literature. Several causes are related to the increase in cases of fungal endometritis, among them the increase in the use of reproductive biotechnologies, causing an excessive uterine manipulation. Identification of the agent, knowledge of pharmacological susceptibility and evidence of biofilm production in endometritis cases are extremely important. These tools can provide even more important subsidies to improve the reproductive and sanitary efficiency of equine herds.

Cultivo in vitro de folículos pré-antrais bovinos: revisão, desafios, conquistas e perspectivas futuras / In vitro culture of bovine preantral follicles: review, challenges, achievements and future perspectives

A reprodução animal incide diretamente na eficiência e rentabilidade econômica de um rebanho, sendo considerada um dos fatores de maior importância para os sistemas de produção. Consequentemente, o desenvolvimento e a utilização de biotecnologia são indispensáveis para o aumento da eficiência reprodutiva, do melhoramento genético, da produção de alimentos e geração de riquezas. Nas últimas décadas várias foram as biotécnicas associadas à reprodução animal que apresentaram um grande potencial para a geração de genética, especialmente, ao que se referem aos avanços da reprodução assistida. Estes progressos possibilitaram a utilização de folículos pré-antrais como fonte de oócitos para biotecnologias reprodutivas. Deste modo, a técnica de cultivo in vitro proporciona a retomada do desenvolvimento dos folículos presente na reserva ovariana pela ativação in vitro forçada simulando a ocorrência de distúrbios na foliculogênesse. Até então, apenas a especie murina obteve descendentes vivos através dos folículos primordiais cultivados in vitro. Infelizmente, não há relatos de sucesso em outras espécies, tornando o desenvolvimento de sistemas ideias de cultivo in vitro um desafio. Portanto, o objetivo desta revisão é descrever e discutir os principais avanços da situação atual da pesquisa com folículos pré-antrais inclusos em folículos ovarianos.

Animal reproduction directly affects the efficiency and economic profitability of a herd, being considered one of the most important factors for production systems. Consequently, the development and use of biotechnology are indispensable for increasing reproductive efficiency, genetic improvement, food production and wealth generation. In the last few decades, biotechnologies associated with animal reproduction have shown great potential for the generation of genetics, especially with regard to advances in assisted reproduction. These advances have enabled the use of pre-antral follicles as a source of oocytes for reproductive biotechnologies. Thus, the in vitro culture technique provides the resumption of the development of follicles present in the ovarian reserve by forced in vitro activation, simulating the occurrence of disturbances in folliculogenesis. Until then, only the murine species obtained living descendants through primordial follicles cultivated in vitro. Unfortunately, there are no reports of success in other species, making the development of ideal in vitro culture systems a challenge.Therefore, the purpose of this review is to describe and discuss the main advances in the current research situation with preantral follicles included in ovarian follicles.

Biotécnicas reprodutivas: captura, exame andrológico, conservação do ejaculado e inseminação artificial em canídeos e felídeos selvagens em risco de extinção / Reproductive biotechniques: capture, andrological examination, ejaculate conservation and artificial insemination in wild dogs or felids in extinction risk / Biotecnicas reproductivas: captura, examen andrológico, conservación eyaculada e inseminación artificial en cánidos e felinos silvestres en riesgo de extinción

Debido a la reducción acelerada del número de animales y la consecuente disminución de la variabilidad genética, fue necesario estudiar y aplicar biotecnologías de cría en animales silvestres y salvajes, con el fin de reducir el impacto sobre ellos y disminuir el riesgo de extinción de diferentes especies de cánidos y felinos salvajes y salvajes. El presente estudio, mediante metodología cualitativa, mediante revisión bibliográfica, realizó análisis de estudios y datos existentes, con el objetivo de dilucidar y describir los métodos de captura de los animales, el examen andrológico, los medios de preservación del eyaculado y la inseminación artificial en cánidos y felinos silvestres con el fin de preservar especies en peligro de extinción.

Due to the accelerated reduction in the number of animals and the consequent decline in genetic variability, it was necessary to study and apply breeding biotechniques in wild and wild animals, in order to reduce the impact on them and decrease the risk of extinction of different species of canids and wild and wild felids. The present study, through qualitative methodology, through bibliographic review, carried out analysis of existing studies and data, with the objective of elucidating and describing the methods of capturing the animals, the andrological examination, means of preserving the ejaculate and artificial insemination canids and wild felids for the purpose of preserving endangered species.

Devido a acelerada redução no número de animais e consequente declínio na variabilidade genética, foi necessário estudar e aplicar biotécnicas de reprodução em animais silvestres e selvagens, com a finalidade de reduzir o impacto sobre estas e diminuir o risco de extinção de diferentes espécies de canídeos e felídeos selvagens e silvestres. O presente estudo, através de metodologia qualitativa, por meio de revisão bibliográfica, realizou análise de estudos e dados existentes, com objetivo de elucidar e descrever os métodos de captura dos animais, o exame andrológico, meios de conservação do ejaculado e a inseminação artificial em canídeos e felídeos selvagens com fim de preservação das espécies ameaçadas de extinção.