In vitro cytotoxicity of curcuminoids against head and neck cancer HNO97 cell line

Abstract Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is a malignant tumour of Head and Neck Cancer (HNC). The recent therapeutic approaches used to treat cancer have adverse side effects. The natural agents exhibiting anticancer activities are generally considered to have a robust therapeutic potential. Curcuminoids, one of the major active compounds of the turmeric herb, are used as a therapeutic agent for several diseases including cancer. In this study, the cytotoxicity of curcuminoids was investigated against OSCC cell line HNO97. Our data showed that curcuminoids significantly inhibits the proliferation of HNO97 in a time and dose-dependent manner (IC50=35 M). Cell cycle analysis demonstrated that curcuminoids increased the percentage of G2/M phase cell populations in the treated groups. Treating HNO97 cells with curcuminoids led to cell shrinking and increased detached cells, which are the typical appearance of apoptotic cells. Moreover, flow cytometry analysis revealed that curcuminoids significantly induced apoptosis in a time-dependent manner. Furthermore, as a response to curcuminoids treatment, comet tails were formed in cell nuclei due to the induction of DNA damage. Curcuminoids treatment reduced the colony formation capacity of HNO97 cells and induced morphological changes. Overall, these findings demonstrate that curcuminoids can in vitro inhibit HNC proliferation and metastasis and induce apoptosis.

Resumo O carcinoma de células escamosas oral (OSCC) é um tumor maligno do câncer de cabeça e pescoço (HNC). As recentes abordagens terapêuticas usadas para tratar o câncer têm efeitos colaterais adversos. Os agentes naturais que exibem atividades anticâncer são geralmente considerados como tendo um potencial terapêutico robusto. Curcuminoides, um dos principais compostos ativos da erva cúrcuma, são usados como agente terapêutico para várias doenças, incluindo câncer. Neste estudo, a citotoxicidade dos curcuminoides foi investigada contra a linha de células OSCC HNO97. Nossos dados mostraram que os curcuminoides inibem significativamente a proliferação de HNO97 de forma dependente do tempo e da dose (IC50 = 35 M). A análise do ciclo celular demonstrou que os curcuminoides aumentaram a porcentagem de populações de células da fase G2 / M nos grupos tratados. O tratamento das células HNO97 com curcuminoides levou ao encolhimento celular e ao aumento das células destacadas, que são a aparência típica das células apoptóticas. Além disso, a análise de citometria de fluxo revelou que os curcuminoides induziram significativamente a apoptose de uma maneira dependente do tempo. Além disso, em resposta ao tratamento com curcuminoides, caudas de cometa foram formadas nos núcleos das células devido à indução de danos ao DNA. O tratamento com curcuminoides reduziu a capacidade de formação de colônias das células HNO97 e induziu alterações morfológicas. No geral, esses achados demonstram que os curcuminoides podem inibir in vitro a proliferação e metástase de HNC e induzir apoptose.

Enhancement of Annexin V in response to combination of epigallocatechin gallate and quercetin as a potent arrest the cell cycle of colorectal cancer

Abstract Colorectal cancer (CRC) is one of the most common cancers leading to comorbidities and mortalities globally. The rational of current study was to evaluate the combined epigallocatechin gallate and quercetin as a potent antitumor agent as commentary agent for therapeutic protocol. The present study investigated the effect of epigallocatechin Gallate (EGCG) (150mg) and quercetin (200mg) at different proportions on proliferation and induction of apoptosis in human colon cancer cells (HCT-116). Cell growth, colonogenic, Annexin V in addition cell cycle were detected in response to phytomolecules. Data obtained showed that, the colony formation was inhibited significantly in CRC starting from the lowest concentration tested of 10 µg/mL resulting in no colonies as visualized by a phase-contrast microscope. Data showed a significant elevation in the annexin V at 100 µg/mL EGCG(25.85%) and 150 µg/mL quercetin (48.35%). Moreover, cell cycle analysis showed that this combination caused cell cycle arrest at the G1 phase at concentration of 100 µg/mL (72.7%) and 150 µg/mL (75.25%). The combined effect of epigallocatechin Gallate and quercetin exert antiproliferative activity against CRC, it is promising in alternative conventional chemotherapeutic agent.

Resumo O câncer colorretal (CCR) é um dos cânceres mais comuns, levando a comorbidades e mortalidade em todo o mundo. O racional do presente estudo foi avaliar a combinação de galato de epigalocatequina e quercetina como um agente antitumoral potente como agente de comentário para protocolo terapêutico. O presente estudo investigou o efeito de galato de epigalocatequina (EGCG) (150 mg) e quercetina (200 mg) em diferentes proporções na proliferação e indução de apoptose em células de câncer de cólon humano (HCT-116). O crescimento celular, colonogênico, anexina V, além do ciclo celular foram detectados em resposta a fitomoléculas. Os dados obtidos mostraram que a formação de colônias foi inibida significativamente no CRC a partir da concentração mais baixa testada de 10 µg/mL, resultando em nenhuma colônia conforme visualizado por um microscópio de contraste de fase. Os dados mostraram uma elevação significativa na anexina V a 100 µg/mL de EGCG (25,85%) e 150 µg/mL de quercetina (48,35%). Além disso, a análise do ciclo celular mostrou que essa combinação causou parada do ciclo celular na fase G1 na concentração de 100 µg/mL (72,7%) e 150 µg/mL (75,25%). O efeito combinado da epigalocatequina galato e quercetina exerce atividade antiproliferativa contra o CCR, é promissor como agente quimioterápico alternativo convencional.

Isolation and characterization of bacteria residing in the oral, gut, and fecal samples of different pheasant species

Abstract There is a paucity of research conducted on microbial prevalence in pheasants. The microbiota of captive birds has zoonotic significance and must be characterize. Present study is therefore planned to assess the microbiota from oral, fecal and gut content of captive avian species. It will be helpful in characterization of harmful microbes. Different samples taken from oral, gut and feces of ring-necked pheasants (Phasianus colchicus), green pheasants (Phasianus versicolor), golden pheasant (Chrysolophus pictus) and silver pheasant (Lophura nycthemera). Samples were collected, diluted, and inoculated onto different agar plates (MacConkey, SS agar, MSA and nutrient agar) for cultivation of bacterial species. Colonies of E.coli, Staphylococcus spp. Brachyspira spp. and Campylobacter spp were observed based on colony morphology. Colony forming unit showed E. coli as frequently found bacteria in fecal, oral and gut contents of all the above pheasants. The overall significance difference was found among bacterial species of golden pheasants, green pheasant, ring-necked pheasant, and silver pheasants. It was concluded that E.coli is predominant isolated from heathy pheasants followed by Campylobacter, Staphylococcus and Brachyspira.

Resumo Há uma escassez de pesquisas realizadas sobre a prevalência microbiana em faisões. A microbiota de aves em cativeiro tem significado zoonótico e deve ser caracterizada. O presente estudo está, portanto, planejado para avaliar a microbiota do conteúdo oral, fecal e intestinal de espécies aviárias em cativeiro. Será útil na caracterização de micróbios nocivos. Diferentes amostras retiradas da boca, intestino e fezes de faisões de pescoço redondo (Phasianus colchicus), faisões verdes (Phasianus versicolor), faisões dourados (Chrysolophus pictus) e faisão prateado (Lophura nycthemera). As amostras foram coletadas, diluídas e inoculadas em diferentes placas de ágar (MacConkey, ágar SS, MSA e ágar nutriente) para o cultivo de espécies bacterianas. Colônias de E. coli, Staphylococcus spp., Brachyspira spp. e Campylobacter spp foram observados com base na morfologia da colônia. A unidade formadora de colônia mostrou E. coli como bactéria frequentemente encontrada no conteúdo fecal, oral e intestinal de todos os faisões acima. A diferença de significância geral foi encontrada entre as espécies bacterianas de faisões dourados, faisões verdes, faisões de pescoço anelado e faisões prateados. Verificou-se que a E.coli é predominantemente isolada de faisões saudáveis, seguida por Campylobacter, Staphylococcus e Brachyspira.

Cell therapy with adipose tissue-derived human stem cells in the urinary bladder improves detrusor contractility and reduces voiding residue / A terapia celular com células-tronco humanas derivadas do tecido adiposo na bexiga urinária melhora a contratilidade do detrusor e reduz o resíduo miccional

Detrusor hypocontractility (DH) is a disease without a gold standard treatment in traditional medicine. Therefore, there is a need to develop innovative therapies. The present report presents the case of a patient with DH who was transplanted with 2 x 106 adipose tissue-derived mesenchymal stem cells twice and achieved significant improvements in their quality of life. The results showed that cell therapy reduced the voiding residue from 1,800 mL to 800 mL, the maximum cystometric capacity from 800 to 550 mL, and bladder compliance from 77 to 36.6 mL/cmH2O. Cell therapy also increased the maximum flow from 3 to 11 mL/s, the detrusor pressure from 08 to 35 cmH2O, the urine volume from 267 to 524 mL and the bladder contractility index (BCI) value from 23 to 90. The International Continence on Incontinence Questionnaire - Short Form score decreased from 17 to 8. Given the above, it is inferred that the transplantation of adipose tissue-derived mesenchymal stem cells is an innovative and efficient therapeutic strategy for DH treatment and improves the quality of life of patients affected by this disease.

A Hipocontratilidade Detrusora (HD) é uma doença sem um tratamento padrão-ouro na medicina tradicional. Logo, há a necessidade de desenvolvimento de terapias inovadoras. O presente relato apresenta um caso de paciente com HD transplantado duas vezes com 2 x 106 células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo que obteve melhoras significativas em sua qualidade de vida. Os resultados demonstraram que a terapia celular reduziu o resíduo miccional de 1.800mL para 800mL; a Capacidade Cistométrica Máxima de 800 para 550mL; a complacência de 77 para 36,6mL/cmH2O. A terapia celular também aumentou o fluxo máximo de 3 para 11mL/s; a pressão detrusora de 08 para 35cmH2O; o volume urinado de 267 para 524mL e o índice de contratilidade vesical (BCI) de 23 para 90. O score do International Continence on Incontinence Questionare - Short Form passou de 17 para 8. Diante do exposto, infere-se que o transplante de células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo é uma estratégia terapêutica inovadora e eficiente para o tratamento da HD e para melhoria da qualidade de vida de pacientes acometidos por essa doença.

Molecular detection of Mycoplasma gallisepticum in different poultry breeds of Abbottabad and Rawalpindi, Pakistan

Abstract The poultry sector in Pakistan is contributing mainly in bridging gap between demand and supply for protein. Mycoplasma gallisepticum is an emerging bacterium causing serious problems in poultry industry of Pakistan. A cross-sectional study was conducted to evaluate the M. gallisepticum load in poultry populated regions of Pakistan. Total 600 serum and 600 swab samples were collected, 200 from each broiler, layers and breeders poultry in Rawalpindi and Abbottabad districts. Serum samples were analyzed through ELISA for seroprevalence. Swabs were cultured on Freys medium followed by PCR and partial mgc2 gene sequencing. Results of seroprevalence of M. gallisepticum showed that layers (75%, n=150) are more positive as compared to breeders (70%, n=140) and broilers (50%, n=100). Typical colonies of the M. gallisepticum were observed in breeder (26.5%), followed by layer (21%) and broilers (9%). A total of 37.1% (n=42) samples were identified positive through PCR out of total 113 cultured based positive samples. A total of six M. gallisepticum isolates of current study showed 98-99 percent similarity with previously reported isolates on the basis of mgc2 gene partial sequencing. The M. gallisepticum was found highly prevalent in different poultry breads. Results of this study would add into basic data and provide a direction for livestock sector to strengthen a control strategy for mycoplasmosis in poultry farms.

Resumo O setor avícola do Paquistão está contribuindo principalmente para preencher a lacuna entre a demanda e a oferta de proteína. Mycoplasma gallisepticum é uma bactéria emergente que causa sérios problemas na indústria avícola do Paquistão. Um estudo transversal foi conduzido para avaliar a carga de M. gallisepticum em regiões de avicultura do Paquistão. Um total de 600 amostras de soro e 600 amostras de esfregaço foi coletado, 200 de cada frango de corte, poedeiras e aves reprodutoras nos distritos de Rawalpindi e Abbottabad. Amostras de soro foram analisadas por ELISA para soroprevalência. As zaragatoas foram cultivadas em meio Frey, seguido de PCR e sequenciação parcial do gene mgc2. Os resultados da soroprevalência de M. gallisepticum mostraram que as poedeiras (75%, n = 150) são mais positivas em comparação com matrizes (70%, n = 140) e frangos de corte (50%, n = 100). Colônias típicas de M. gallisepticum foram observadas em reprodutoras (26,5%), seguidas de poedeiras (21%) e frangos de corte (9%). Um total de 37,1% (n = 42) das amostras foi identificado como positivas por PCR de um total de 113 amostras positivas baseadas em cultura. Um total de seis isolados de M. gallisepticum do estudo atual mostrou 98-99% de similaridade com isolados relatados anteriormente com base no sequenciamento parcial do gene mgc2. O M. gallisepticum foi encontrado com alta prevalência em diferentes pães de aves. Os resultados deste estudo acrescentariam dados básicos e forneceriam orientação para o setor pecuário fortalecer uma estratégia de controle da micoplasmose em granjas avícolas.

Recruitment of crustose coralline algae on tiles material for monitoring coral larvae settlements consolidators at Nature Reserve Pulau Sempu, East Java, Indonesia

Abstract Crustose coralline algae (Corallinophycideae) are red algae that produced calcium carbonate and are well recognized as foundation species in the epipelagic zone of the marine ecosystem. These algae induced settlement juvenile of coral by released chemical cues from bacterial communities on the surface of their colonies. Their extracellular calcium carbonate also can stabilize reef structure that influencing many invertebrate attaches and growth in the seabed. Crustose coralline algae (CCA) have obtained attention because of their distribution and health compromise to increasing seawater temperature, ocean acidification, and pollutant. As a cryptic species in the ecosystem, the presence of CCA recruit sometimes doesnt have attention, especially on their capability to occupy the empty space. This study aimed to document coverage and number of CCA recruit in two different recruitment tiles material. The highest CCA percentage of the cover was showed inside surface than others surface in all stations. Light intensity and low sedimentation were suggested as a key factor of success of high coverage. Overall, station higher CCA recruits have shown from Tiga Warna. Low sedimentation and protection from aerial exposure became the main reason for it. No significant difference number of CCA recruits between marble and sandstone in this study. Successful CCA recruitment in this study can give a wide picture that natural recruitment of coral and other reef biodiversity in Southern Malang might be will succeed because of the abundance of coralline algae that support their life history stage.

Resumo As algas coralinas crustosas (Corallinophycideae) são algas vermelhas que produzem carbonato de cálcio e são bem reconhecidas como espécies de base na zona epipelágica do ecossistema marinho. Essas algas induziram o assentamento juvenil de coral por meio de estímulos químicos liberados por comunidades bacterianas na superfície de suas colônias. Seu carbonato de cálcio extracelular também pode estabilizar a estrutura do recife que influencia muitos invertebrados anexados e crescimento no fundo do mar. As algas coralinas crustosas (CCA) têm obtido atenção devido à sua distribuição e comprometimento da saúde com o aumento da temperatura da água do mar, acidificação dos oceanos e poluentes. Como uma espécie enigmática no ecossistema, a presença de recrutamento CCA às vezes não recebe atenção, especialmente em sua capacidade de ocupar o espaço vazio. Este estudo teve como objetivo documentar a cobertura e o número de recrutamento de CCA em dois materiais de recrutamento diferentes. A maior porcentagem de CCA da cobertura foi mostrada na superfície interna do que nas outras superfícies em todas as estações. A intensidade da luz e a baixa sedimentação foram sugeridas como um fator-chave para o sucesso da alta cobertura. De modo geral, recrutas de CCA mais graduados mostraram-se em Tiga Warna. A baixa sedimentação e a proteção contra a exposição aérea se tornaram a principal razão para isso. Não houve diferença significativa no número de recrutas CCA entre mármore e arenito neste estudo. O recrutamento bem-sucedido de CCA neste estudo pode dar uma imagem ampla de que o recrutamento natural de corais e outros recifes da biodiversidade no sul de Malang será bem-sucedido por causa da abundância de algas coralinas que sustentam seu estágio de história de vida.

Study of resveratrol against bone loss by using in-silico and in-vitro methods

Abstract By applying the in-silico method, resveratrol was docked on those proteins which are responsible for bone loss. The Molecular docking data between the resveratrol and Receptor activator of nuclear factor-kappa- ligand [RANKL] receptors proved that resveratrol binds tightly to the receptors, showed the highest binding affinities of 6.9, 7.6, 7.1, 6.9, 6.7, and 7.1 kcal/mol. According to in-vitro data, Resveratrol reduced the osteoclasts after treating Marrow-Derived Macrophages [BMM] with Macrophage colony-stimulating factor [MCSF] 20ng / ml and RANKL 50ng / ml, with different concentrations of resveratrol (2.5, 10 g / ml) For 7 days, the cells were treated with MCSF (20 ng / ml) and RANKL (40 ng / ml) together with concentrated trimethyl ether and resveratrol (2.5, 10 g / ml) within 12 hours. Which, not affect cell survival. After fixing osteoclast cells with formaldehyde fixative on glass coverslip followed by incubation with 0.1% Triton X-100 in PBS for 5 min and after that stain with rhodamine phalloidin staining for actin and Hoechst for nuclei. Fluorescence microscopy was performed to see the distribution of filaments actin [F.actin]. Finally, resveratrol reduced the actin ring formation. Resveratrol is the best bioactive compound for drug preparation against bone loss.

Resumo Com a aplicação do método in-silico, o resveratrol foi ancorado nas proteínas responsáveis pela perda óssea. Os dados de docking molecular entre o resveratrol e o ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa- [Receptor Activator of Nuclear Factor kappa-B Ligant (RANKL)] provaram que o resveratrol se liga fortemente aos receptores, mostraram as afinidades de ligação mais altas de 6,9, 7,6, 7,1, 6,9, - 6,7 e -7,1 kcal / mol. De acordo com dados in-vitro, o resveratrol reduziu os osteoclastos após o tratamento de macrófagos derivados da medula óssea [Bone Marrow-derived Macrophage (BMM)] com fator estimulador de colônias de macrófagos [Macrophage Colony-Stimulating Factor (MCSF)] 20ng / ml e RANKL 50ng / ml, com diferentes concentrações de resveratrol (2,5, 10 g / ml). Durante sete dias, as células foram tratadas com MCSF (20 ng / ml) e RANKL (40 ng / ml) juntamente com éter trimetílico concentrado e resveratrol (2,5, 10 g / ml) em 12 horas, processo que não afeta a sobrevivência celular. Após a fixação de células de osteoclastos com fixador de formaldeído em lamela de vidro seguido de incubação com 0,1% Triton X-100 em PBS por 5 min, foi realizado posteriormente o procedimento para corar com rodamina faloidina a actina e Hoechst os núcleos. A microscopia de fluorescência foi realizada para ver a distribuição dos filamentos de actina [F.actina]. Finalmente, o resveratrol reduziu a formação do anel de actina. O resveratrol é o melhor composto bioativo para o preparo de medicamentos contra a perda óssea.

Vitality of mycobionts and photobionts after passing through the digestive tract of Constrictotermes cyphergaster (Isoptera) workers / Vitalidade de micobiontes e fotobiontes após passagem pelo trato digestivo de operários de Constrictotermes cyphergaster (Isoptera)

Termites are among the insects that consume lichens and may be potential dispersers of these symbionts. This study evaluated the vitality of photobionts and mycobionts after passing through the digestive tract of Constrictotermes cyphergaster. The percentage of live and dead algae was verified throughout the alimentary canal of 450 workers, originating from five sampled colonies in the Caatinga Dry Forest, NE, Brazil. A progressive growth in algae mortality was observed in the crop, paunch and rectum, however more than 40% of the algae found in faeces presented signs of vitality. Photobiont morphology was different between cells extracted from thallus in natura and algae present in termite faeces. The photobiont cells presented more shrunken cytoplasms after passing through the alimentary canal of C. cyphergaster. There was also an increase between the cell wall space and the cytoplasm membrane of algae found in the termite faecal pellets. Only four broken spores were found in the intestine, which made the vitality analysis unfeasible for these cells. The record of photobiont vitality in termite faecal pellets is indicative of endozoochoric dispersal, suggesting that this relationship between insects and lichens extends beyond a trophic interaction.

Os térmitas estão entre os insetos consumidores de liquens e representam um potencial dispersor desses simbiontes. Este estudo avaliou a vitalidade de fotobiontes e micobiontes depois de terem passado pelo trato digestivo de Constrictotermes cyphergaster. O percentual de algas vivas e mortas foi verificado ao longo do canal alimentar de 450 operários, oriundos de cinco colônias amostradas em Caatinga Dry Forest, NE, Brazil. Um crescimento progressivo na mortalidade das algas foi observado no sentido papo, pança e reto, porém mais de 40% das algas presentes nas fezes apresentaram sinais de vitalidade. A morfologia dos fotobiontes foi diferente entre células extraídas de talos in natura e algas presentes nas fezes dos térmitas. As células do fotobionte apresentaram seu citoplasma mais encolhido, após a passagem pelo canal alimentar de C. cyphergaster. Também houve um aumento entre o espaço da parede celular e a membrana do citoplasma das algas encontradas nas pelotas fecais dos térmitas. Apenas quatro esporos quebrados foram encontrados no intestino dos cupins, o que inviabilizou a análise de vitalidade dessas células. O registro da vitalidade de fotobiontes nas pelotas fecais dos térmitas é um indicativo de dispersão endozoocórica, remetendo que a relação entre esses insetos e os liquens pode ir além de uma interação trófica.

Pantoea ananatis in Oryza sativa in Brazil / Pantoea ananatis em Oryza sativa no Brasil

ABSTRACT: The state of Santa Catarina is the second-largest producer of rice seeds in Brazil. Research on phytopathogenicbacterias in this crop is scarce and the high frequency of panicle diseases leads to the hypothesis that seeds may be infected by bacteria. This research quantified the incidence of bacteria in the seeds, verified the bacteria viability during the storage period and characterized the associated bacteria. Seeds from the 2018/19 and 2019/20 seasons were analyzed. To check the incidence, the seeds were disinfected, plated on a nutrient agar + fungicide culture medium, and incubated for seven days at 27 °C. To assess viability, every 45 days, three cultivars stored in a processing unit were subjected to the same detection methodology. To characterize, prevalent colonies were isolated on semi-selective culture medium Pantoea genus-specific agar (PGSA), where the ones that showed growth were subjected to deoxyribonucleic acid (DNA) extraction and Polymerase Chain Reaction (PCR), DNA sequencing, and sequence comparison on GenBank. The hypersensitivity reaction (HR) in tobacco was performed using a bacterial suspension of each isolate. All seed samples had an average incidence of 83%. During storage, the seeds maintained stable bacterial viability, with an average incidence of 95% at the beginning of storage and 99% at the end of it. All isolates that grew in PGSA culture medium were identified by molecular characterization with 100% identity with two specimens of Pantoeaananatis and one of them induced RH in tobacco.

RESUMO: O estado de Santa Catarina é o segundo maior produtor de sementes de arroz do Brasil. As pesquisas com bactérias fitopatogênicas nesta cultura são escassas e a alta frequência de doenças da panícula leva à hipótese de que sementes podem estar infectadas por bactérias. O objetivo desta pesquisa foi quantificar a incidência de bactérias nas sementes, verificar a viabilidade das bactérias durante o período de armazenamento e caracterizar as bactérias associadas. Foram analisadas sementes das safras 2018/19 e 2019/20. Para verificar a incidência, as sementes foram desinfestadas, plaqueadas em meio de cultura ágar nutriente + fungicida e incubadas por sete dias a 27 °C. Para avaliar a viabilidade, a cada 45 dias, três cultivares armazenadas em uma unidade de beneficiamento foram submetidas à mesma metodologia de detecção. Para caracterizar, colônias prevalentes foram isoladas em meio de cultura semisseletivo Pantoea genus-specific ágar (PGSA), onde as que apresentaram crescimento foram submetidas à extração do ácido desoxirribonucléico (DNA) e Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), sequenciamento do DNA e comparação de sequências no GenBank. A reação de hipersensibilidade (HR) em tabaco foi realizada utilizando uma suspensão bacteriana de cada isolado. Todas as amostras de sementes apresentaram incidência média de 83%. Durante o armazenamento, as sementes mantiveram viabilidade bacteriana estável, com incidência média de 95% no início do armazenamento e 99% ao fim. Todos os isolados que cresceram no meio de cultura PGSA, foram identificados por caracterização molecular com 100% de identidade com dois espécimes de Pantoea ananatis e um deles induziu HR em tabaco.

Evaluation of three alum-precipitated Aeromonas hydrophila vaccines administered to Labeo rohita, Cirrhinus mrigala and Ctenopharyngodon idella: immunokinetics, immersion challenge and histopathology

Abstract Aeromonas hydrophila is a cause of infectious disease outbreaks in carp species cultured in South Asian countries including Pakistan. This bacterium has gained resistance to a wide range of antibiotics and robust preventive measures are necessary to control its spread. No prior use of fish vaccines has been reported in Pakistan. The present study aims to develop and evaluate inactivated vaccines against local strain of A. hydrophila in Pakistan with alum-precipitate as adjuvant. The immunogenic potential of vaccine was evaluated in two Indian major carps (Rohu: Labeo rohita, Mori: Cirrhinus mrigala) and a Chinese carp (Grass carp: Ctenopharyngodon idella). Fish were vaccinated intraperitoneally followed by a challenge through immersion. Fish with an average age of 4-5 months were randomly distributed in three vaccinated groups with three vaccine concentrations of 108, 109 and 1010 colony forming unit (CFU)/ml and a control group. Fixed dose of 0.1ml was applied to each fish on 1st day and a booster dose at 15 days post-vaccination (DPV). Blood samples were collected on 14, 28, 35, 48 and 60 DPV to determine antibody titers in blood serum using compliment fixation test (CFT). Fish were challenged at 60 DPV with infectious A. hydrophila with 108 CFU/ml through immersion. Significantly higher levels of antibody titers were observed from 28 DPV in all vaccinated groups as compared to those in the control group. In challenge experiment the average RPS (relative percent survivability) was 71% for groups vaccinated with 109 and 1010 CFU/ml and 86% for 108 CFU/ml. Vaccine with 108 CFU/ml induced highest immune response followed by 109 and 1010 CFU/ml. The immune response of L. rohita and C. idella was better than that of C. mrigala. In general, normal histopathology was observed in different organs of vaccinated fish whereas minor deteriorative changes were found in fish vaccinated with higher concentrations of the vaccine.

Resumo Aeromonas hydrophila é uma causa de surtos de doenças infecciosas em espécies de carpas cultivadas em países do sul da Ásia, incluindo o Paquistão. Essa bactéria ganhou resistência a uma ampla gama de antibióticos, e medidas preventivas robustas são necessárias para controlar sua disseminação. Nenhum uso anterior de vacinas para peixes foi relatado no Paquistão. O presente estudo tem como objetivo desenvolver e avaliar vacinas inativadas contra cepa local de A. hydrophila no Paquistão com precipitado de alúmen como adjuvante. O potencial imunogênico da vacina foi avaliado em duas carpas principais indianas (Rohu: Labeo rohita, Mori: Cirrhinus mrigala) e uma carpa chinesa (Grass Carp: Ctenopharyngodon idella). Os peixes foram vacinados por via intraperitoneal, seguido de um desafio por imersão. Peixes com idade média de 4-5 meses foram distribuídos aleatoriamente em três grupos vacinados com três concentrações de vacina de 108, 109 e 1010 unidades formadoras de colônias (UFC) / ml e um grupo de controle. Foi aplicada dose fixa de 0,1ml em cada peixe no 1º dia e dose de reforço 15 dias pós-vacinação (DPV). Amostras de sangue foram coletadas em 14, 28, 35, 48 e 60 DPV para determinar os títulos de anticorpos no soro sanguíneo usando o teste de fixação de elogio (CFT). Os peixes foram desafiados a 60 DPV com infecciosa A. hydrophila com 108 CFU / ml por imersão. Níveis significativamente mais elevados de títulos de anticorpos foram observados em 28 DPV em todos os grupos vacinados, em comparação com aqueles no grupo de controle. Na experiência de desafio, o RPS médio (sobrevivência percentual relativa) foi de 71% para os grupos vacinados com 109 e 1010 CFU / ml e 86% para 108 CFU / ml. A vacina com 108 UFC / ml induziu a maior resposta imune seguida por 109 e 1010 UFC / ml. A resposta imune de L. rohita e C. idella foi melhor do que a de C. mrigala. Em geral, histopatologia normal foi observada em diferentes órgãos de peixes vacinados, enquanto pequenas alterações deteriorantes foram encontradas no grupo de controle e nos peixes vacinados com concentrações mais altas da vacina.

Qualidade microbiológica de hambúrgueres comercializados no município do Rio de Janeiro / Microbiological quality of hamburgers commercialized in the municipality of Rio de Janeiro

O hambúrguer é um produto cárneo moldado, com maior risco de contaminação microbiana pelo fato de ser preparado com carne moída que apresenta maior superfície de exposição, além de ser muito manipulado e consumido, muitas vezes, mal-passado. O objetivo do presente estudo foi avaliar a qualidade microbiológica de hambúrgueres industriais comercializados no município do Rio de Janeiro/RJ, bem como, verificar as condições higiênicosanitárias dos locais de comercialização. Foram coletadas 12 amostras de hambúrguer, de oito marcas comerciais, comercializados em três diferentes supermercados. Durante a coleta das amostras foi realizada uma avaliação visual das condições higiênicas da comercialização. Após obtenção, as amostras foram encaminhadas para o Laboratório de Controle Microbiológico de Alimentos da Universidade Castelo Branco (UCB), para realização das análises microbiológicas. De acordo com os resultados das avaliações higiênicosanitárias dos locais onde as amostras de hambúrguer foram obtidas, observou-se 20%, 60% e 20% de não conformidades nos supermercados I, II e III, respectivamente, devido falhas na organização da gôndola, no acondicionamento do produto e/ou no controle da temperatura de comercialização. Resultados em não conformidade com o padrão microbiológico vigente foram observados em 16,67%, 66,67% e 8,33% das amostras para a contagem de Bactérias Heterotróficas Aeróbias Mesófilas, Estafilococos coagulase positiva e E. coli, respectivamente. A presença de Unidades Formadoras de Colônias típicas de Salmonella spp foi verificada em 41,67% das amostras. Os resultados demonstraram que os hambúrgueres comercializados em três supermercados do município do Rio de Janeiro/RJ estavam impróprios para o consumo podendo representar risco à saúde dos consumidores.(AU)

The hamburger is a molded meat product with a greater risk of microbial contamination because it is prepared with ground meat, which has a greater contact surface. In addition, it is very manipulated and often consumed medium rare. The objective of the present study was to evaluate the microbiological quality of industrial hamburgers sold in Rio de Janeiro/RJ and verify the hygienic-sanitary conditions of the commercialization places. Twelve hamburger samples were collected, from eight commercial brands, and sold in three different supermarkets. During the collection of the samples, a visual evaluation of the hygienic conditions of the commercialization was carried out. After obtaining, the samples were sent to the Laboratory of Microbiological Control of Food at Universidade Castelo Branco (UCB), for microbiological analysis. According to the results of the hygienicsanitary evaluations of the places where the hamburger samples were obtained, 20%, 60%, and 20% of non-conformities were observed in supermarkets I, II, and III, respectively. The non-conformities were due to failures in the organization of the shelf, in the packaging of the product, and/or in the control of the commercialization temperature. Results that did not comply with the current microbiological standard were observed in 16.67%, 66.67%, and 8.33% of the samples for the counting of Mesophilic Aerobic Heterotrophic Bacteria, Coagulase Positive Staphylococci, and E. coli, respectively. The presence of typical Colony Forming Units of Salmonella spp was verified in 41.67% of the samples. The results showed that the hamburgers sold in three supermarkets in Rio de Janeiro/RJ were unfit for consumption and could pose a risk to consumers' health.(AU)

Molecular detection of Mycoplasma gallisepticum in different poultry breeds of Abbottabad and Rawalpindi, Pakistan / Detecção molecular de Mycoplasma gallisepticum em diferentes raças de aves de Abbottabad e Rawalpindi, Paquistão

The poultry sector in Pakistan is contributing mainly in bridging gap between demand and supply for protein. Mycoplasma gallisepticum is an emerging bacterium causing serious problems in poultry industry of Pakistan. A cross-sectional study was conducted to evaluate the M. gallisepticum load in poultry populated regions of Pakistan. Total 600 serum and 600 swab samples were collected, 200 from each broiler, layers and breeders poultry in Rawalpindi and Abbottabad districts. Serum samples were analyzed through ELISA for seroprevalence. Swabs were cultured on Frey’s medium followed by PCR and partial mgc2 gene sequencing. Results of seroprevalence of M. gallisepticum showed that layers (75%, n=150) are more positive as compared to breeders (70%, n=140) and broilers (50%, n=100). Typical colonies of the M. gallisepticum were observed in breeder (26.5%), followed by layer (21%) and broilers (9%). A total of 37.1% (n=42) samples were identified positive through PCR out of total 113 cultured based positive samples. A total of six M. gallisepticum isolates of current study showed 98-99 percent similarity with previously reported isolates on the basis of mgc2 gene partial sequencing. The M. gallisepticum was found highly prevalent in different poultry breads. Results of this study would add into basic data and provide a direction for livestock sector to strengthen a control strategy for mycoplasmosis in poultry farms.

O setor avícola do Paquistão está contribuindo principalmente para preencher a lacuna entre a demanda e a oferta de proteína. Mycoplasma gallisepticum é uma bactéria emergente que causa sérios problemas na indústria avícola do Paquistão. Um estudo transversal foi conduzido para avaliar a carga de M. gallisepticum em regiões de avicultura do Paquistão. Um total de 600 amostras de soro e 600 amostras de esfregaço foi coletado, 200 de cada frango de corte, poedeiras e aves reprodutoras nos distritos de Rawalpindi e Abbottabad. Amostras de soro foram analisadas por ELISA para soroprevalência. As zaragatoas foram cultivadas em meio Frey, seguido de PCR e sequenciação parcial do gene mgc2. Os resultados da soroprevalência de M. gallisepticum mostraram que as poedeiras (75%, n = 150) são mais positivas em comparação com matrizes (70%, n = 140) e frangos de corte (50%, n = 100). Colônias típicas de M. gallisepticum foram observadas em reprodutoras (26,5%), seguidas de poedeiras (21%) e frangos de corte (9%). Um total de 37,1% (n = 42) das amostras foi identificado como positivas por PCR de um total de 113 amostras positivas baseadas em cultura. Um total de seis isolados de M. gallisepticum do estudo atual mostrou 98-99% de similaridade com isolados relatados anteriormente com base no sequenciamento parcial do gene mgc2. O M. gallisepticum foi encontrado com alta prevalência em diferentes pães de aves. Os resultados deste estudo acrescentariam dados básicos e forneceriam orientação para o setor pecuário fortalecer uma estratégia de controle da micoplasmose em granjas avícolas.

Recruitment of crustose coralline algae on tiles material for monitoring coral larvae settlement's consolidators at Nature Reserve Pulau Sempu, East Java, Indonesia / Recrutamento de algas coralinas crustosas em azulejos para monitorar consolidadores de assentamentos de larvas de coral na Reserva Natural Pulau Sempu, Java Oriental, Indonésia

Crustose coralline algae (Corallinophycideae) are red algae that produced calcium carbonate and are well recognized as foundation species in the epipelagic zone of the marine ecosystem. These algae induced settlement juvenile of coral by released chemical cues from bacterial communities on the surface of their colonies. Their extracellular calcium carbonate also can stabilize reef structure that influencing many invertebrate attaches and growth in the seabed. Crustose coralline algae (CCA) have obtained attention because of their distribution and health compromise to increasing seawater temperature, ocean acidification, and pollutant. As a cryptic species in the ecosystem, the presence of CCA recruit sometimes doesn’t have attention, especially on their capability to occupy the empty space. This study aimed to document coverage and number of CCA recruit in two different recruitment tile’s material. The highest CCA percentage of the cover was showed inside surface than others surface in all stations. Light intensity and low sedimentation were suggested as a key factor of success of high coverage. Overall, station higher CCA recruits have shown from Tiga Warna. Low sedimentation and protection from aerial exposure became the main reason for it. No significant difference number of CCA recruits between marble and sandstone in this study. Successful CCA recruitment in this study can give a wide picture that natural recruitment of coral and other reef biodiversity in Southern Malang might be will succeed because of the abundance of coralline algae that support their life history stage.

As algas coralinas crustosas (Corallinophycideae) são algas vermelhas que produzem carbonato de cálcio e são bem reconhecidas como espécies de base na zona epipelágica do ecossistema marinho. Essas algas induziram o assentamento juvenil de coral por meio de estímulos químicos liberados por comunidades bacterianas na superfície de suas colônias. Seu carbonato de cálcio extracelular também pode estabilizar a estrutura do recife que influencia muitos invertebrados anexados e crescimento no fundo do mar. As algas coralinas crustosas (CCA) têm obtido atenção devido à sua distribuição e comprometimento da saúde com o aumento da temperatura da água do mar, acidificação dos oceanos e poluentes. Como uma espécie enigmática no ecossistema, a presença de recrutamento CCA às vezes não recebe atenção, especialmente em sua capacidade de ocupar o espaço vazio. Este estudo teve como objetivo documentar a cobertura e o número de recrutamento de CCA em dois materiais de recrutamento diferentes. A maior porcentagem de CCA da cobertura foi mostrada na superfície interna do que nas outras superfícies em todas as estações. A intensidade da luz e a baixa sedimentação foram sugeridas como um fator-chave para o sucesso da alta cobertura. De modo geral, recrutas de CCA mais graduados mostraram-se em Tiga Warna. A baixa sedimentação e a proteção contra a exposição aérea se tornaram a principal razão para isso. Não houve diferença significativa no número de recrutas CCA entre mármore e arenito neste estudo. O recrutamento bem-sucedido de CCA neste estudo pode dar uma imagem ampla de que o recrutamento natural de corais e outros recifes da biodiversidade no sul de Malang será bem-sucedido por causa da abundância de algas coralinas que sustentam seu estágio de história de vida.

Determination of the viability of Azospirillum syrups, multiplied in different culture media / Determinação da viabilidade de caldas de Azospirillum, multiplicadas em diferentes meios de cultura

The use of products of microbial origin, bacteria, for agriculture has grown exponentially in the world, and in Brazil this growth is significant. In recent years,several companies have settled in the country and started to develop different products in this segment. The producer has the possibility of multiplying bacteria on the farms themselves in a process called on farm, a homemade way of multiplying bacteria. The objective of this studywas to evaluate the efficiency of the mixtures produced through the on farmmethod of multiplication of microorganisms from inoculants based on Azospirillumwith different culture media. For this, three culture media were used: commercial product Multibacter®, yeast syrup plus sugar and yeast syrup, which were subsequently quantified. The syrups were produced in the onfarmsystem, the sterilization of the place of packaging and allocation of the bioreactors was carried out, the samples of the syrups were diluted for incubation and the preparation of the TSA(Trypticasein Soy Agar)also took place. It was possible to conclude that the non-sterile culture media do not present satisfactory results for the multiplication of on farmmicroorganisms with Azospirillumsyrups. Colony forming units are not parameters to indicate viability for non-sterile culture media.(AU)

O uso de produtos de origem microbiana, bactérias, para a agricultura tem crescido exponencialmente no mundo, e no Brasil este crescimento é significativo. Nos últimos anos várias empresas se instalaram no país e passaram a desenvolver diversos produtos neste segmento. O produtor, tem a possibilidade de multiplicar bactérias nas próprias fazendas em um processo chamado on farm,uma forma caseira de multiplicar bactérias. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficiência das caldas produzidas através do método on farmde multiplicação de microrganismos de inoculantes a base de Azospirillumcom diferentes meios de culturas. Para isto foram utilizados três meios de cultura: produto comercial Multibacter®, calda de levedura mais açúcar e calda de levedura, os quais posteriormente foram quantificados. As caldas foram produzidas no sistema on farm, foi realizada a esterilização do local acondicionamento e alocação dos biorreatores, as amostras das caldas foram diluídas para incubação e também ocorreu o preparo do TSA (Trypticasein Soy Agar). Foi possível concluir que os meios de cultura não estéreis não apresentam resultados satisfatórios para a multiplicação de microrganismos on farmcom caldas de Azospirillum. Unidades formadoras de colônias não são parâmetros para indicar a viabilidade para meios de cultura não estéreis.(AU)

Isolation and characterization of bacteria residing in the oral, gut, and fecal samples of different pheasant species / Isolamento e caracterização de bactérias residentes nas amostras orais, intestinais e fecais de diferentes espécies de faisão

Abstract There is a paucity of research conducted on microbial prevalence in pheasants. The microbiota of captive birds has zoonotic significance and must be characterize. Present study is therefore planned to assess the microbiota from oral, fecal and gut content of captive avian species. It will be helpful in characterization of harmful microbes. Different samples taken from oral, gut and feces of ring-necked pheasants (Phasianus colchicus), green pheasants (Phasianus versicolor), golden pheasant (Chrysolophus pictus) and silver pheasant (Lophura nycthemera). Samples were collected, diluted, and inoculated onto different agar plates (MacConkey, SS agar, MSA and nutrient agar) for cultivation of bacterial species. Colonies of E.coli, Staphylococcus spp. Brachyspira spp. and Campylobacter spp were observed based on colony morphology. Colony forming unit showed E. coli as frequently found bacteria in fecal, oral and gut contents of all the above pheasants. The overall significance difference was found among bacterial species of golden pheasants, green pheasant, ring-necked pheasant, and silver pheasants. It was concluded that E.coli is predominant isolated from heathy pheasants followed by Campylobacter, Staphylococcus and Brachyspira.

Resumo Há uma escassez de pesquisas realizadas sobre a prevalência microbiana em faisões. A microbiota de aves em cativeiro tem significado zoonótico e deve ser caracterizada. O presente estudo está, portanto, planejado para avaliar a microbiota do conteúdo oral, fecal e intestinal de espécies aviárias em cativeiro. Será útil na caracterização de micróbios nocivos. Diferentes amostras retiradas da boca, intestino e fezes de faisões de pescoço redondo (Phasianus colchicus), faisões verdes (Phasianus versicolor), faisões dourados (Chrysolophus pictus) e faisão prateado (Lophura nycthemera). As amostras foram coletadas, diluídas e inoculadas em diferentes placas de ágar (MacConkey, ágar SS, MSA e ágar nutriente) para o cultivo de espécies bacterianas. Colônias de E. coli, Staphylococcus spp., Brachyspira spp. e Campylobacter spp foram observados com base na morfologia da colônia. A unidade formadora de colônia mostrou E. coli como bactéria frequentemente encontrada no conteúdo fecal, oral e intestinal de todos os faisões acima. A diferença de significância geral foi encontrada entre as espécies bacterianas de faisões dourados, faisões verdes, faisões de pescoço anelado e faisões prateados. Verificou-se que a E.coli é predominantemente isolada de faisões saudáveis, seguida por Campylobacter, Staphylococcus e Brachyspira.

Streblid flies parasitizing cave bats in Carajás, Amazonia, with a new record for Brazil / Moscas estréblidas parasitando morcegos cavernícolas em Carajás, Amazônia, com um novo registro para o Brasil

Streblid flies (Diptera: Streblidae) are hematophagous and highly specialized parasitic insects, found only on bats (Chiroptera). Caves are important roosts for bats but, despite harboring high bat richness, relatively few studies exist on the ecology and biology of streblid flies in cave environments, especially in Amazonia, the largest domain in northern Brazil, with >140 bat species and thousands of caves. To fill some of the gaps in the geographical distribution and interspecific relationships for streblid flies in the region, we sampled bats in six caves in Carajás National Forest, a protected area in Pará state (Brazil). Thirteen of the 14 streblid species found are new records for Carajás, with three new records for Pará state and two for the northern region of Brazil. Nycterophilia fairchildi was recorded for the first time in Brazil. Most streblids had host-specific behavior, however, N. fairchildi, Trichobius caecus, and T. johnsonae were less host-specific, parasitizing different Pteronotus bat species. The gregarious behavior of Pteronotus species and the spatial distribution of their colonies within the caves may be important factors in the flies' exchange among congener hosts and deserve special attention in future studies. Furthermore, studies on ecological interaction networks between bats and their ectoparasitic flies in caves will be useful for a broader understanding of how this relationship is structured over time and space, as well as its impact on both bats and flies.(AU)

Moscas estréblidas (Diptera: Streblidae) são insetos hematófagos e parasitas encontrados apenas sobre morcegos (Chiroptera). As cavernas são abrigos importantes para morcegos, mas, apesar de abrigarem alta riqueza desses mamíferos, são relativamente poucos os estudos focados na ecologia e biologia de moscas estréblidas em ambientes cavernícolas, especialmente na Amazônia, o maior domínio no norte do Brasil, com >140 espécies de morcegos e milhares de cavernas. Para preencher algumas das lacunas na distribuição geográfica e nas relações interespecíficas de moscas estréblidas na região, amostramos morcegos cavernícolas em seis cavernas na Floresta Nacional de Carajás, uma área protegida no estado do Pará. Treze das 14 espécies de moscas estréblidas encontradas são novos registros para Carajás, com três novos registros para o Pará e dois para a região norte do Brasil. Nycterophilia fairchildi foi registrada pela primeira vez no Brasil. A maioria das espécies de moscas foi hospedeiro-específica; entretanto, N. fairchildi, Trichobius caecus e T. johnsonae foram menos específicas, parasitando diferentes espécies de morcegos do gênero Pteronotus. O comportamento gregário das espécies de Pteronotus e a distribuição espacial de suas colônias dentro das cavernas podem ser fatores importantes na troca de moscas entre hospedeiros congêneres e merecem atenção especial em estudos futuros. Adicionalmente, estudos sobre redes de interação ecológica entre morcegos e suas moscas ectoparasitas em cavernas serão úteis para uma compreensão mais ampla de como essa relação se estrutura no tempo e no espaço, bem como sobre o seu impacto, tanto sobre os morcegos como sobre as moscas.(AU)

An outbreak of fatal Pullorum disease (Salmonella Pullorum) in Guinea fowl keets (Numida meleagris) / Surto fatal de pulorose (Salmonella Pullorum) em pintinhos de galinhas-d'Angola (Numida meleagris)

Pullorum disease is described worldwide and is caused by Salmonella enterica subspecies enterica serovar Gallinarum biovar Pullorum (S. Pullorum). S. Pullorum infection is important in commercial poultry, provoking a systemic disease with high mortality rates. Its occurrence requires notification, and when it is diagnosed in commercial breeding flocks, its eradication is demanded. The aim of this study was to report a severe outbreak of Pullorum disease in young Guinea fowl (Numida meleagris), resulting in 100% mortality of keets (n=290) within the first two weeks of age. All examined keets had enlarged liver, kidneys and spleen (5/5), and the affected tissues were submitted to histological and bacteriological examination. On histopathology, random paratyphoid nodules characterized by areas of necrosis with fibrin and a moderate infiltrate of macrophages and heterophils were observed in the liver. In kidneys, discrete areas of necrosis associated with moderate multifocal infiltrates of lymphocytes, and plasma cells were observed. In the spleen, a moderate infiltrate of macrophages was noticed. Isolation of colonies suggestive of S. Pullorum from liver and spleen was performed in selective agars and, after biochemical tests, confirmed by specific duplex-PCR. The antimicrobial susceptibility test of the isolated strain revealed resistance to only sulfamethoxazole + trimethoprim among the tested antimicrobials. The S. Pullorum isolate recovered in the present study was highly pathogenic to N. meleagris and may represent a risk to other avian species, including industrial poultry.

A pulorose é descrita mundialmente e é causada por Salmonella enterica subespécie enterica sorovar Gallinarum biovar Pullorum (S. Pullorum). A infecção por S. Pullorum é importante em aves comerciais, provocando doença sistêmica com altas taxas de mortalidade. Sua ocorrência requer notificação e quando diagnosticada em aves de criação comercial resulta na erradicação do plantel. O objetivo deste estudo foi relatar um surto grave de pulorose em filhotes de galinhas-d'Angola (Numida meleagris), resultando em 100% de mortalidade das aves (n=290) nas primeiras duas semanas de idade. Os pintinhos recebidos tinham hepato, espleno e nefromegalia (5/5). Os tecidos dos cinco indivíduos recebidos foram submetidos a exame histológico e bacteriológico. Na histopatologia, foram observados nódulos paratifoides aleatórios caracterizados por áreas de necrose com fibrina e infiltrado moderado de macrófagos e heterófilos no fígado. Nos rins, foram observadas áreas discretas de necrose associadas a infiltrados multifocais moderados de linfócitos e plasmócitos. No baço, foi observado infiltrado moderado de macrófagos. O isolamento de colônias sugestivas de S. Pullorum de fígados e baços foi realizado em ágares seletivos e, após testes bioquímicos, confirmado por duplex-PCR específico. A susceptibilidade antimicrobiana da cepa isolada revelou resistência apenas ao sulfametoxazol + trimetoprim entre os antimicrobianos testados. O isolado de S. Pullorum recuperado no presente estudo foi altamente patogênico para N. meleagris e pode representar um risco para outras espécies de aves, incluindo aves industriais.

Crescimentos de fungos produtores de micotoxinas em grãos de amendoim / Growths of mycotoxin-producing fungi on peanut grains

O amendoim (Arachis hypogaea L.) é uma oleaginosa com alto valor energético e nutricional, servindo de substrato ideal para o crescimento de fungos durante o processo de colheita, estocagem e processamento dos grãos. As micotoxinas são originadas a partir do metabolismo secundário de fungos toxigênicos; quando essas toxinas são ingeridas, podem causar efeitos tóxicos em humanos e animais. O objetivo deste trabalho foi avaliar a contaminação fúngica em amostras de grãos de amendoim disponíveis para o consumo humano. Foram analisadas amostras de amendoim torrado na vagem, amendoim cru (in natura) e amendoim torrado sem a vagem. A metodologia utilizada foi o método de plaqueamento direto em placas de Petri, contendo o meio cultura Sabouraud Dextrose Ágar (SDA). Porções de 40 grãos de amendoim de cada amostra foram utilizadas para o teste. Os resultados obtidos foram expressos em quantidade de grãos que apresentaram crescimento fúngico em porcentagem. Para identificação ao nível do género das colônias fúngicas isoladas, foi efetuada uma observação microscópica das suas estruturas morfológicas. Em todas as amostras estudadas ocorreram o crescimento de fungos potencialmente micotoxigênicos. Os grãos de amendoim cru (in natura) sem a vagem foram os mais contaminados por fungos como Aspergillus sp. (20%), Alternaria sp. (13,1%), Penicillium sp. (13,3%) e Fusarium sp. (23,3%) quando comparados com os grãos torrados. A presença desses fungos nas amostras de amendoim indica a possibilidade de desenvolvimento de micotoxinas potencialmente tóxicas para o humano. O processo de torrefação inibe o crescimento de determinadas espécies de fungos micotoxigênicos.(AU)

Peanut is an oilseed with high energy and nutritional value, serving as an ideal substrate for the growth of fungi during the process of harvesting, storing and processing the grains. Mycotoxins originate from the secondary metabolism of toxigenic fungi; when ingested, they can cause toxic effects in humans and animals. The objective of this work was to evaluate the fungal contamination in samples of peanut grains available for human consumption. The methodology used was the direct plating method in Petri dishes containing Sabouraud Dextrose Agar (SDA) culture. Portions of 40 peanut kernels from the samples were immersed in a 0.4% sodium hypochlorite solution for two minutes for surface disinfection, then rinsed once in distilled water. Incubation was carried out at room temperature for 7 days and the results were expressed as the amount of grains that showed fungal growth in percentage. To identify the colonies of isolated filamentous fungi at the genus level, a microscopic observation of their morphological structures was carried out, which consists of removing a sample from the edge of the colony and placing it in a drop of cotton blue (1g/L in lactic acid 88%), between slide and coverslip. Potentially toxigenic fungi were identified: Aspergillus sp., Rhizopus sp., Alternaria sp., Penicillium sp. and Fusarium sp. The presence of these fungi in peanut samples indicates the possibility of development of mycotoxins potentially toxic to humans. The roasting process may not be sufficient to destroy some mycotoxins.(AU)

Pantoea ananatis in Oryza sativa in Brazil / Pantoea ananatis em Oryza sativa no Brasil

The state of Santa Catarina is the second-largest producer of rice seeds in Brazil. Research on phytopathogenicbacterias in this crop is scarce and the high frequency of panicle diseases leads to the hypothesis that seeds may be infected by bacteria. This research quantified the incidence of bacteria in the seeds, verified the bacteria viability during the storage period and characterized the associated bacteria. Seeds from the 2018/19 and 2019/20 seasons were analyzed. To check the incidence, the seeds were disinfected, plated on a nutrient agar + fungicide culture medium, and incubated for seven days at 27 °C. To assess viability, every 45 days, three cultivars stored in a processing unit were subjected to the same detection methodology. To characterize, prevalent colonies were isolated on semi-selective culture medium Pantoea genus-specific agar (PGSA), where the ones that showed growth were subjected to deoxyribonucleic acid (DNA) extraction and Polymerase Chain Reaction (PCR), DNA sequencing, and sequence comparison on GenBank. The hypersensitivity reaction (HR) in tobacco was performed using a bacterial suspension of each isolate. All seed samples had an average incidence of 83%. During storage, the seeds maintained stable bacterial viability, with an average incidence of 95% at the beginning of storage and 99% at the end of it. All isolates that grew in PGSA culture medium were identified by molecular characterization with 100% identity with two specimens of Pantoeaananatis and one of them induced RH in tobacco.

O estado de Santa Catarina é o segundo maior produtor de sementes de arroz do Brasil. As pesquisas com bactérias fitopatogênicas nesta cultura são escassas e a alta frequência de doenças da panícula leva à hipótese de que sementes podem estar infectadas por bactérias. O objetivo desta pesquisa foi quantificar a incidência de bactérias nas sementes, verificar a viabilidade das bactérias durante o período de armazenamento e caracterizar as bactérias associadas. Foram analisadas sementes das safras 2018/19 e 2019/20. Para verificar a incidência, as sementes foram desinfestadas, plaqueadas em meio de cultura ágar nutriente + fungicida e incubadas por sete dias a 27 °C. Para avaliar a viabilidade, a cada 45 dias, três cultivares armazenadas em uma unidade de beneficiamento foram submetidas à mesma metodologia de detecção. Para caracterizar, colônias prevalentes foram isoladas em meio de cultura semisseletivo Pantoea genus-specific ágar (PGSA), onde as que apresentaram crescimento foram submetidas à extração do ácido desoxirribonucléico (DNA) e Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), sequenciamento do DNA e comparação de sequências no GenBank. A reação de hipersensibilidade (HR) em tabaco foi realizada utilizando uma suspensão bacteriana de cada isolado. Todas as amostras de sementes apresentaram incidência média de 83%. Durante o armazenamento, as sementes mantiveram viabilidade bacteriana estável, com incidência média de 95% no início do armazenamento e 99% ao fim. Todos os isolados que cresceram no meio de cultura PGSA, foram identificados por caracterização molecular com 100% de identidade com dois espécimes de Pantoea ananatis e um deles induziu HR em tabaco.

Recruitment of crustose coralline algae on tiles material for monitoring coral larvae settlement's consolidators at Nature Reserve Pulau Sempu, East Java, Indonesia / Recrutamento de algas coralinas crustosas em azulejos para monitorar consolidadores de assentamentos de larvas de coral na Reserva Natural Pulau Sempu, Java Oriental, Indonésia

Crustose coralline algae (Corallinophycideae) are red algae that produced calcium carbonate and are well recognized as foundation species in the epipelagic zone of the marine ecosystem. These algae induced settlement juvenile of coral by released chemical cues from bacterial communities on the surface of their colonies. Their extracellular calcium carbonate also can stabilize reef structure that influencing many invertebrate attaches and growth in the seabed. Crustose coralline algae (CCA) have obtained attention because of their distribution and health compromise to increasing seawater temperature, ocean acidification, and pollutant. As a cryptic species in the ecosystem, the presence of CCA recruit sometimes doesnt have attention, especially on their capability to occupy the empty space. This study aimed to document coverage and number of CCA recruit in two different recruitment tiles material. The highest CCA percentage of the cover was showed inside surface than others surface in all stations. Light intensity and low sedimentation were suggested as a key factor of success of high coverage. Overall, station higher CCA recruits have shown from Tiga Warna. Low sedimentation and protection from aerial exposure became the main reason for it. No significant difference number of CCA recruits between marble and sandstone in this study. Successful CCA recruitment in this study can give a wide picture that natural recruitment of coral and other reef biodiversity in Southern Malang might be will succeed because of the abundance of coralline algae that support their life history stage.(AU)

As algas coralinas crustosas (Corallinophycideae) são algas vermelhas que produzem carbonato de cálcio e são bem reconhecidas como espécies de base na zona epipelágica do ecossistema marinho. Essas algas induziram o assentamento juvenil de coral por meio de estímulos químicos liberados por comunidades bacterianas na superfície de suas colônias. Seu carbonato de cálcio extracelular também pode estabilizar a estrutura do recife que influencia muitos invertebrados anexados e crescimento no fundo do mar. As algas coralinas crustosas (CCA) têm obtido atenção devido à sua distribuição e comprometimento da saúde com o aumento da temperatura da água do mar, acidificação dos oceanos e poluentes. Como uma espécie enigmática no ecossistema, a presença de recrutamento CCA às vezes não recebe atenção, especialmente em sua capacidade de ocupar o espaço vazio. Este estudo teve como objetivo documentar a cobertura e o número de recrutamento de CCA em dois materiais de recrutamento diferentes. A maior porcentagem de CCA da cobertura foi mostrada na superfície interna do que nas outras superfícies em todas as estações. A intensidade da luz e a baixa sedimentação foram sugeridas como um fator-chave para o sucesso da alta cobertura. De modo geral, recrutas de CCA mais graduados mostraram-se em Tiga Warna. A baixa sedimentação e a proteção contra a exposição aérea se tornaram a principal razão para isso. Não houve diferença significativa no número de recrutas CCA entre mármore e arenito neste estudo. O recrutamento bem-sucedido de CCA neste estudo pode dar uma imagem ampla de que o recrutamento natural de corais e outros recifes da biodiversidade no sul de Malang será bem-sucedido por causa da abundância de algas coralinas que sustentam seu estágio de história de vida.(AU)