The first study of molecular prevalence and species characterization of Cryptosporidium in free-range chicken (Gallus gallus domesticus) from Brazil / Primeiro estudo de prevalência molecular e caracterização de espécies de Cryptosporidium em galinhas (Gallus gallus domesticus) colonial/caipiras do Brasil

Rearing free-range chicken is based on grazing feeding patterns, and these animals could be potential environmental contaminants of Cryptosporidium oocysts for humans and other animals. Therefore, the present study aimed to evaluate the molecular prevalence of Cryptosporidium spp. in free-range chickens from Brazil. A total of 351 fecal samples from chickens were examined from 20 farms. For detection of Cryptosporidium spp., 18S rRNA gene fragments were amplified using a nested PCR reaction. Positive samples were sent for sequencing. The overall prevalence of Cryptosporidium was 25.6% (95% CI = 21.2% - 30.6%). Sequencing of the amplified fragments allowed for the identification of three species: C. meleagridis in 57 (62.6%), C. baileyi in 15 (16.4%), C. parvum in 3 (3.2%) samples, and a new Cryptosporidium genotype (C. genotype BrPR1) in 3 (3.2%) samples. Cryptosporidium genotype BrPR1 has not yet been classified as a species, and its host spectrum is not known. Cryptosporidium, including zoonotic species, exists at a high prevalence in free-range chickens within the region studied.(AU)

A criação de galinhas no estilo colonial/caipira é baseada em padrões de alimentação de pastagem, o que as torna potenciais contaminantes ambientais de oocistos de Cryptosporidium para humanos e outros animais. Portanto, o presente estudo teve como objetivo avaliar a prevalência molecular de Cryptosporidium spp. em galinhas criadas em sistema colonial/caipira. Um total de 351 amostras de fezes de frangos foram examinadas em 20 fazendas. Para a detecção de Cryptosporidium spp., os fragmentos do gene rRNA 18S foram amplificados utilizando-se a reação de nested-PCR. A prevalência global de Cryposporidium foi de 25,6% (IC 95% = 21,2% - 30,6%). O sequenciamento dos fragmentos amplificados permitiu a identificação de três espécies que infectam aves: C. meleagridis em 57 (62,6%), C. baileyi em 15 (16,4%), C. parvum em 3 (3,2%) amostras, bem como, um novo genótipo de Cryptosporidium (C. genótipo BrPR1) foi identificado em 3 (3,2%) amostras. Cryptosporidium genotipo BrPR1 não foi ainda classificado como uma espécie, e seu espectro de hospedeiros é desconhecido. O presente trabalho permitiu concluir que Cryptosporidium, incluindo espécies zoonóticas, existe com alta prevalência em galinhas criadas em sistema colonial/caipira na região estudada.(AU)

INFECÇÃO POR Cryptosporidium spp. EM BEZERROS NO ESTADO DE PERNAMBUCO, BRASIL

A bovinocultura representa um dos grandes esteios econômicos do estado do Pernambuco. Entretanto, protozooses intestinais constituem um grande entrave para o desenvolvimento do segmento. A infecção por protozoários do gênero Cryptosporidium provoca sérios danos no epitélio intestinal durante seu desenvolvimento no hospedeiro. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi estudar o parasitismo por Cryptosporidium spp. em bezerros provenientes de municípios da Microrregião do Agreste Meridional do estado de Pernambuco, Brasil. Para tal, realizou-se um estudo transversal onde amostras fecais de bezerros (n=385) foram coletadas e posteriormente processadas por meio da técnica de centrífugo-sedimentação fecal em formol-éter com posterior coloração pela técnica Ziehl-Neelsen modificada. O estudo dos fatores de risco foi realizado empregando análise univariada. Além disto, descreve-se aqui um surto isolado de criptosporidose em uma fazenda de gado da raça Nelore, município de São Benedito do Sul (08º48'30" S e 35º57'06"W), Mata Meridional pernambucana, no qual utilizou-se a técnica supracitada em associação ao imunoensaio com o kit comercial MERIFLUOR® para o processamento das amostras fecais de bezerros (n=40). A prevalência para infecção por Cryptosporidium spp. no Agreste Meridional foi de 25,71% (99/385). A criação concomitante de espécies diferentes no mesmo ambiente (OR = 3,33; p = 0,0000), o sistema de criação semi-intensivo (OR = 1,70; p = 0,024) e a ausência de limpeza nas instalações (OR = 1,64; p = 0,029), mostraram-se estatisticamente associadas a presença da infecção. Na região do surto, o teste MERIFLUOR® detectou 45% (18/40) de amostras positivas para Cryptosporidium spp., e 15% (6/40) para Cryptosporidium spp. e Giardia spp. concomitantemente. Os resultados desta pesquisa, inédita nas áreas de estudo, comprovam a presença do protozoário nas criações de bovinos, e, portanto, deve-se ressaltar a importância da implementação de medidas que reduzam perdas econômicas do setor produtivo e o impacto negativo na saúde pública, por se tratar de um agente zoonótico responsável por grandes transtornos em todo o mundo.

Cattle breeding represents one of the great economic supports of the state of Pernambuco. However, intestinal protozooses constitute a major barrier to segment development. Infection with protozoa of the genus Cryptosporidium causes serious damage to the intestinal epithelium during its development in the host. Thus, the objective of this work was to study the parasitism by Cryptosporidium spp. in calves from municipalities of the Southern Agreste Microregion of the state of Pernambuco, Brazil. For this purpose, a cross-sectional study was performed in which fecal samples of calves (385) were collected and further processed by the technique of fecal centrifugal sedimentation in formaldehyde with subsequent staining by the modified Ziehl-Neelsen technique. The study of risk factors was performed through univariate analysis. In addition, an isolated outbreak of cryptosporidosis is described in a Nelore cattle farm, municipality of São Benedito do Sul (08º48'30 "S and 35º57'06" W), Pernambuco Southern Mata, in which the aforementioned technique in association with immunoassay with the commercial MERIFLUOR® kit for the processing of calf fecal samples (40). The prevalence for Cryptosporidium spp. in the Southeast was 25.71% (99/385). Concomitant rearing of different species in the same environment (OR = 3.33; p = 0.0000), semi-intensive rearing system (OR = 1.70; p = 0.024) and lack of on-site cleaning (OR = 1.64; p = 0.029) were statistically associated with the presence of infection. In the outbreak region, the MERIFLUOR® test detected 45% (18/40) of Cryptosporidium spp., and 15% (6/40) positive samples for Cryptosporidium spp. and Giardia spp. concomitantly. The results of this research, unprecedented in the study areas, prove the presence of protozoan in cattle breeding, and, therefore, the importance of implementing measures that reduce economic losses of the productive sector and the negative impact on public health should be emphasized, because it is a zoonotic agent responsible for major disorders worldwide.