Resumo
Fatty acids are considered metabolic intermediaries, although new facts indicate they also work as signaling molecules with different roles in the immune response. Based on that, in this study, we investigated the anti-inflammatory effects of n-3 polyunsaturated fatty acids (PUFAs) as eicosapentaenoic acid (EPA), docosahexaenoic acid (DHA), and α-linolenic acid (LNA) in ex vivo bovine endometrial explants. For this, two groups were formed: (1) LPS-challenged and (2) control, both to evaluate the accumulation of proinflammatory cytokines as interleukin 1ß (IL1B) and interleukin 6 (IL6). To develop the study, bovine female reproductive tracts from non-pregnant Angus heifers without evidence of reproductive diseases were selected. Endometrial explants were processed and treated for 24 h with EPA, DHA, and LNA in five different concentrations (0µM, 50µM, 100 µM, 200µM and 400 µM) and then, challenged with LPS for 24 h. Supernatants were collected to evaluate the concentration of IL1B and IL6 by ELISA. Explants treated with EPA from control groups reduced the concentrations of ILB (200µM) and IL6 (400 µM), and IL6 (50 µM; 100 µM) from the LPS-challenged group. DHA decreased the accumulation of IL1B and IL6 at 200 µM on explants from the LPS-challenged group, and 200 µM reduced IL6 from the control group. In contrast, explants treated with LNA only reduced the accumulation of IL1B to 400µM (from both groups). In conclusion, the EPA acid is the best anti-inflammatory option to decrease the concentration of both pro-inflammatory cytokines (IL1B and IL6) from LPS-challenged and control groups in bovine endometrial explants; while LNA evidence to be the last option to promote an anti-inflammatory response.(AU)
Os ácidos graxos são considerados intermediários metabólicos, embora novos fatos indiquem que eles também atuem como moléculas sinalizadoras com diferentes papéis na resposta imune. Dessa forma, este estudo investigou os efeitos anti-inflamatórios de ácidos graxos poliinsaturados n-3 (PUFAs) como ácido eicosapentaenóico (EPA), ácido docosahexaenóico (DHA) e ácido α-linolênico (LNA) em explantes endometriais ex vivo de bovinos. Para tal, o experimento foi divido em dois grupos: (1) Desafiado-LPS e (2) Controle, para que então pudesse avaliar o acúmulo de citocinas pró-inflamatórias como interleucina 1ß (IL1B) e interleucina 6 (IL6). Foram selecionados tratos reprodutivos de fêmeas bovinas de novilhas Angus não prenhes sem evidência de doenças reprodutivas. Explantes endometriais foram processados e tratados por 24h com EPA, DHA e LNA em cinco concentrações diferentes (0µM, 50µM, 100 µM, 200µM e 400 µM) e, em seguida, desafiados com LPS por mais 24h. Os sobrenadantes foram colhidos para avaliar a concentração de IL1B e IL6 pelo teste de ELISA. Os explantes tratados com EPA dos grupos de controle reduziram as concentrações de ILB (200 µM) e IL6 (400 µM) e no grupo desafiado com LPS houve redução das concentrações de IL6 (50 µM; 100 µM). Nos explantes do grupo desafiado com LPS, o DHA diminuiu o acúmulo de IL1B e IL6 nas concentrações de 200 µM, e no grupo controle reduziu IL6 nas concentrações de 200 µM, enquanto os explantes tratados com LNA reduziram apenas o acúmulo de IL1B a 400 µM (de ambos os grupos). Em conclusão, o ácido EPA provou ser a melhor opção anti-inflamatória para diminuir a concentração de ambas as citocinas pró-inflamatórias (IL1B e IL6) de grupos desafiados com LPS e controle em explantes endometriais bovinos; enquanto o LNA evidencia ser a opção menos viável para promover uma resposta anti-inflamatória.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos/imunologia , Ácidos Graxos Ômega-3/efeitos adversos , Endométrio/fisiologia , Técnicas In Vitro/veterinária , Citocinas/efeitos adversosResumo
Effective protocols for in vitro rooting for woody fruit trees are still a challenge for in vitro seedling production, especially when there is a need to insert new cultivars or rootstocks. These protocols are essential to accelerate studies in plant breeding programs and for seedling distribution. This study evaluated the use of 6-Benzylaminopurine (IBA) in in vitro rooting of Pyruscomunnis rootstocks, clones 'OHxF87' and Pyrodwarf. Explant exposure times (0, 24, 48, 72, and 96 hours) to 20 mg L-1 IBA were tested for in vitro rooting. The exposure to IBA resulted in rooting rates above 80%, surpassing some results reported in the literature. The 24-hour treatment provided 81,81% survival, leading to an average growth of five roots with 19 mm length, for 'OHxF87' rootstock. The same exposure time resulted in the highest survival rate (75%) and the highest mean root number, seven roots per plant with 10 mm length, for 'PDW' rootstock. Root formation did not occur in the absence of synthetic auxin. Therefore, it can be concluded that a 24-hour exposure at 20 mg L-1 IBA was sufficient to promote in vitro rooting in 'OHxF87' and Pyrodwarf rootstocks'.
Protocolos eficazes de enraizamento in vitro de frutíferas lenhosas ainda são um desafio para produção de mudas in vitro, especialmente quando há necessidade de inserção de novas cultivares ou porta-enxerto. Esses protocolos são essenciais para acelerar estudos nos programas de melhoramento genético e também para distribuição posterior das mudas. Nesse sentido, o objetivo deste estudo foi avaliar a utilização da 6-Benzilaminopurina no enraizamento in vitro de porta-enxerto Pirus comunnis, clones 'OHxF87' e Pyrodwarf. Para o enraizamento, foi testado o tempo de exposição dos explantes ao AIB. Para tanto, foram utilizados 20 mg L-1 do fitohormônio nas horas 0, 24, 48, 72 e 96 horas. A exposição ao AIB resultou em taxas de enraizamento acima de 80%, superando alguns resultados encontrados na literatura. Para o porta-enxerto 'OHxF87', o tratamento de 24 horas proporcionou 81,81% de sobrevivência, promovendo em média cinco raízes com comprimento de 19 mm. O mesmo tratamento para o porta-enxerto 'PDW' resultou na maior taxa de sobrevivência (75%), bem como no maior número médio de raízes, sete raízes por planta, com comprimento de 10 mm. Na ausência de auxina sintética, a formação de raízes não ocorreu. Assim sendo, podemos concluir que o tempo de exposição de 24 horas a 20 mg L-1 de IBA foi suficiente para promover o enraizamento de porta-enxertos Pyrus communis de 'OHxF87' e 'PDW'.
Assuntos
Técnicas In Vitro , Pyrus/crescimento & desenvolvimento , Desenvolvimento VegetalResumo
ABSTRACT: In micropropagation, potassium nitrate (KNO3), an ACS reagent grade chemical, used in the preparation of growing mediums is expensive and its procurement depends on bureaucratic procedures, as it is controlled by the Brazilian Army. This research to assessed the effect of replacing the ACS KNO3 for a commercially available fertilizer (KNO3- based) on the micropropagation of the prickly pear cactus (Opuntia stricta (Haw.) Haw. cv. Elephant Ear. Treatments used six different fertilizer concentrations (0, 0.5, 1, 1.5, 2 and 2.5 g L-1) and a control consisting of 1.9 g L-1 KNO3, as shown in the MS salts. The survival, size and number of sprouts and the value of fresh biomass were evaluated. After seedling acclimation, we assessed the survival, number of sprouts, length, and number of roots, racket formation, average fresh biomass mass, macronutrient absorption and morphological changes of the seedlings. Explants inoculated with fertilizers at concentrations of 0.0; 2.0 and 2.5 g L-¹ did not grow. The response of explants at concentrations of 0.5 and 1.5 g L-1 of the fertilizer were the same as those developed in a KNO3 medium, and at a concentration of 1.0 g L-1, in all variables, the means were higher than those of the control medium. Therefore, it showed the feasibility of using fertilizers in the in vitro cultivation of the prickly pear cactus, which may remove bureaucratic barriers and reduce product costs by 99.12%.
RESUMO: Na micropropagação, o nitrato de potássio (KNO3), reagente puro para análise (P.A.), utilizado no preparo dos meios de cultura, possui custo elevado e a sua aquisição depende de trâmites burocráticos, por se tratar de substância controlada pelo Exército Brasileiro. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da substituição do KNO3 P.A. por fertilizante comercial (com fonte de KNO3), encontrado livremente no comércio, na micropropagação de palma (Opuntia stricta (Haw.) Haw. cv Orelha de Elefante. Os tratamentos foram de seis concentrações do fertilizante (0; 0,5; 1; 1,5; 2 e 2,5 g L-1) e um controle constituído de 1,9 g L-1 de reagente KNO3, conforme mostrado nos sais MS. Avaliou-se a sobrevivência, tamanho e número de brotações do explante, e o valor da biomassa fresca. Após a aclimatização das mudas avaliou-se a sobrevivência, número de brotações, comprimento da parte aérea, número de raízes, formação da raquete, massa média da biomassa fresca, absorção de macronutrientes e alterações morfológicas das mudas. Os explantes inoculados em meio com fertilizantes nas concentrações de 0,0; 2,0 e 2,5 g L-¹ não se desenvolveram. A resposta dos explantes nas concentrações de 0,5 e 1,5 g L-1 do fertilizante foram iguais aos desenvolvidos em meio contendo KNO3, e na concentração de 1,0 g L-1, em todas as variáveis, as médias foram superiores em relação as do controle. Dessa forma, constatou-se a viabilidade do uso do fertilizante no cultivo in vitro da palma, o que propiciou a eliminação dos entraves burocráticos e redução no custo de 99,12% na compra do produto.
Resumo
In vitro tests are performed to evaluate the efficacy of antimycotoxins additives (AMAs); nevertheless, such assays show a low correlation with in vivo trials, which are also required to determine AMAs' efficacy. In search of an alternative method, the current study investigated the use of an ex vivo technique. Six AMAs (AMA1 to AMA6) had their ability to reduce intestinal absorption of aflatoxin B1 (AFB1) evaluated. Jejunal explants were obtained from broilers and subjected to two treatments per AMA in Ussing chambers: T1 (control) - 2.8 mg/L AFB1, and T2 - 2.8 mg/L AFB1 + 0.5% AMA. AMAs were also tested in vitro to assess adsorption of AFB1 in artificial intestinal fluid. In the ex vivo studies, AMA1 to AMA6 decreased intestinal absorption of AFB1 by 67.11%, 73.82%, 80.70%, 85.86%, 86.28% and 82.32%, respectively. As for the in vitro results, AMA1 to AMA6 presented an adsorption of 99.72%, 99.37%, 99.67%, 99.53%, 99.04% and 99.15%, respectively. The evaluated ex vivo model proved useful in the assessment of AMAs. No correlation was reported between ex vivo and in vitro findings. Further studies are needed to elucidate the correlation between ex vivo and in vivo results seeking to reduce animal testing.
Testes in vitro são realizados para avaliar a eficácia de aditivos antimicotoxinas (AAMs); entretanto, tais experimentos apresentam uma baixa correlação com ensaios in vivo, que também são exigidos para determinar a eficácia de AAMs. Em busca de um método alternativo, o presente estudo investigou o uso de uma técnica ex vivo. A capacidade de seis AAMs (AAM1 a AAM6) de reduzir a absorção intestinal de aflatoxina B1 (AFB1) foi avaliada. Explantes jejunais foram coletados de frangos de corte e submetidos a dois tratamentos por AAM em câmaras de Ussing: T1 (controle) - 2,8 mg/L AFB1, e T2 - 2.8 mg/L AFB1 + 0,5% AAM. Os AAMs também foram testados in vitro para verificar a adsorção de AFB1 em fluido intestinal artificial. Nos ensaios ex vivo, AAM1 ao AAM6 diminuíram a absorção intestinal de AFB1 em 67,11%, 73,82%, 80,70%, 85,86%, 86,28% e 82,32%, respectivamente. Quanto aos achados in vitro, AAM1 ao AAM6 apresentaram adsorção de 99,72%, 99,37%, 99,67%, 99,53%, 99,04% e 99,15%, respectivamente. O modelo ex vivo avaliado mostrou-se eficiente na avaliação de AAMs. Não houve correlação entre os resultados ex vivo e in vitro. Estudos adicionais são necessários para definir a correlação entre achados ex vivo e in vivo na tentativa de reduzir os testes em animais.
Assuntos
Animais , Antitoxinas/análise , Galinhas , Aflatoxina B1/toxicidade , Jejuno , Técnicas In VitroResumo
Hop (Humulus lupulus L.) female inflorescences are important raw materials used to produce beers, cosmetics, and medicines. Vegetative propagation is the preferred way of obtaining seedlings for commercial cultivations as female plants produce more lupulin than male plants, a component of commercial interest. It can be carried out by macropropagation (stem cuttings or rhizomes) or micropropagation. This review aimed to systematize different techniques of hop vegetative propagation, with no time frame, from searches in the main academic research bases: Capes Journal Portal, Scielo, Scopus, Web of Science, Science Direct, Google Scholar, and ResearchGate. Most studies are related to micropropagation, mainly addressing different plant regulators and concentrations, as well as types of explants and culture media, strategies to produce virus-free plants, artificial lighting, and cryopreservation. Experiments with stem cuttings are more common regarding macropropagation, but factors such as size and origin of cuttings, rooting period, and the response of different cultivars need to be better evaluated. Cultivation by cuttings allows the production of clones of female plants and micropropagation the production of virus-free clones in a short time and less physical space. Currently, micropropagation has been widely applied to cryopreservation.(AU)
As inflorescências femininas do lúpulo (Humulus lupulus L.) são matérias-primas importantes utilizadas na produção de cervejas, cosméticos e medicamentos. Como as plantas femininas produzem mais lupulina que as masculinas, componente de interesse comercial, a propagação vegetativa é a forma preferencial de obtenção de mudas para os cultivos comerciais. Esta pode ser realizada por macropropagação (estaquia caulinar ou rizomas) ou micropropagação. O objetivo desta revisão foi sistematizar as diferentes técnicas de propagação vegetativa do lúpulo, sem recorte temporal, a partir de buscas nas principais bases de pesquisa acadêmica: Portal de Periódicos Capes, Scielo, Scopus, Web of Science, Science Direct, Google Acadêmico e Research Gate. A maioria dos trabalhos são relacionados à micropropagação, abordando principalmente diferentes reguladores vegetais e concentrações, além de tipos de explantes e meios de cultura, estratégias para produzir plantas livres de vírus, iluminação artificial e criopreservação. Quanto à macropropagação, experimentos com estaquia caulinar são mais comuns, porém fatores precisam ser melhor avaliados tais como tamanho e origem das estacas, período de enraizamento e resposta de diferentes cultivares. O cultivo por estacas permite a produção de clones de plantas femininas e a micropropagação a produção de clones isentos de vírus, em pouco tempo e em menor espaço físico. Atualmente, a micropropagação tem sido muito aplicada à criopreservação.(AU)
Assuntos
Humulus/crescimento & desenvolvimento , Rizoma , Inflorescência , Cannabaceae/crescimento & desenvolvimento , HistóriaResumo
In micropropagation, potassium nitrate (KNO3), an ACS reagent grade chemical, used in the preparation of growing mediums is expensive and its procurement depends on bureaucratic procedures, as it is controlled by the Brazilian Army. This research to assessed the effect of replacing the ACS KNO3 for a commercially available fertilizer (KNO3- based) on the micropropagation of the prickly pear cactus (Opuntia stricta (Haw.) Haw. cv. Elephant Ear. Treatments used six different fertilizer concentrations (0, 0.5, 1, 1.5, 2 and 2.5 g L-¹) and a control consisting of 1.9 g L-¹ KNO3, as shown in the MS salts. The survival, size and number of sprouts and the value of fresh biomass were evaluated. After seedling acclimation, we assessed the survival, number of sprouts, length, and number of roots, racket formation, average fresh biomass mass, macronutrient absorption and morphological changes of the seedlings. Explants inoculated with fertilizers at concentrations of 0.0; 2.0 and 2.5 g L-¹ did not grow. The response of explants at concentrations of 0.5 and 1.5 g L-¹ of the fertilizer were the same as those developed in a KNO3 medium, and at a concentration of 1.0 g L-¹, in all variables, the means were higher than those of the control medium. Therefore, it showed the feasibility of using fertilizers in the in vitro cultivation of the prickly pear cactus, which may remove bureaucratic barriers and reduce product costs by 99.12%.
Na micropropagação, o nitrato de potássio (KNO3), reagente puro para análise (P.A.), utilizado no preparo dos meios de cultura, possui custo elevado e a sua aquisição depende de trâmites burocráticos, por se tratar de substância controlada pelo Exército Brasileiro. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da substituição do KNO3 P.A. por fertilizante comercial (com fonte de KNO3), encontrado livremente no comércio, na micropropagação de palma (Opuntia stricta (Haw.) Haw. cv Orelha de Elefante. Os tratamentos foram de seis concentrações do fertilizante (0; 0,5; 1; 1,5; 2 e 2,5 g L-¹) e um controle constituído de 1,9 g L-¹ de reagente KNO3, conforme mostrado nos sais MS. Avaliou-se a sobrevivência, tamanho e número de brotações do explante, e o valor da biomassa fresca. Após a aclimatização das mudas avaliou-se a sobrevivência, número de brotações, comprimento da parte aérea, número de raízes, formação da raquete, massa média da biomassa fresca, absorção de macronutrientes e alterações morfológicas das mudas. Os explantes inoculados em meio com fertilizantes nas concentrações de 0,0; 2,0 e 2,5 g L-¹ não se desenvolveram. A resposta dos explantes nas concentrações de 0,5 e 1,5 g L-¹ do fertilizante foram iguais aos desenvolvidos em meio contendo KNO3, e na concentração de 1,0 g L-¹, em todas as variáveis, as médias foram superiores em relação as do controle. Dessa forma, constatou-se a viabilidade do uso do fertilizante no cultivo in vitro da palma, o que propiciou a eliminação dos entraves burocráticos e redução no custo de 99,12% na compra do produto.
Assuntos
Fertilizantes/análise , Micronutrientes/administração & dosagem , Micronutrientes/efeitos adversos , Opuntia/crescimento & desenvolvimento , Opuntia/efeitos dos fármacos , Potássio/administração & dosagemResumo
In micropropagation, potassium nitrate (KNO3), an ACS reagent grade chemical, used in the preparation of growing mediums is expensive and its procurement depends on bureaucratic procedures, as it is controlled by the Brazilian Army. This research to assessed the effect of replacing the ACS KNO3 for a commercially available fertilizer (KNO3- based) on the micropropagation of the prickly pear cactus (Opuntia stricta (Haw.) Haw. cv. Elephant Ear. Treatments used six different fertilizer concentrations (0, 0.5, 1, 1.5, 2 and 2.5 g L-¹) and a control consisting of 1.9 g L-¹ KNO3, as shown in the MS salts. The survival, size and number of sprouts and the value of fresh biomass were evaluated. After seedling acclimation, we assessed the survival, number of sprouts, length, and number of roots, racket formation, average fresh biomass mass, macronutrient absorption and morphological changes of the seedlings. Explants inoculated with fertilizers at concentrations of 0.0; 2.0 and 2.5 g L-¹ did not grow. The response of explants at concentrations of 0.5 and 1.5 g L-¹ of the fertilizer were the same as those developed in a KNO3 medium, and at a concentration of 1.0 g L-¹, in all variables, the means were higher than those of the control medium. Therefore, it showed the feasibility of using fertilizers in the in vitro cultivation of the prickly pear cactus, which may remove bureaucratic barriers and reduce product costs by 99.12%.(AU)
Na micropropagação, o nitrato de potássio (KNO3), reagente puro para análise (P.A.), utilizado no preparo dos meios de cultura, possui custo elevado e a sua aquisição depende de trâmites burocráticos, por se tratar de substância controlada pelo Exército Brasileiro. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da substituição do KNO3 P.A. por fertilizante comercial (com fonte de KNO3), encontrado livremente no comércio, na micropropagação de palma (Opuntia stricta (Haw.) Haw. cv Orelha de Elefante. Os tratamentos foram de seis concentrações do fertilizante (0; 0,5; 1; 1,5; 2 e 2,5 g L-¹) e um controle constituído de 1,9 g L-¹ de reagente KNO3, conforme mostrado nos sais MS. Avaliou-se a sobrevivência, tamanho e número de brotações do explante, e o valor da biomassa fresca. Após a aclimatização das mudas avaliou-se a sobrevivência, número de brotações, comprimento da parte aérea, número de raízes, formação da raquete, massa média da biomassa fresca, absorção de macronutrientes e alterações morfológicas das mudas. Os explantes inoculados em meio com fertilizantes nas concentrações de 0,0; 2,0 e 2,5 g L-¹ não se desenvolveram. A resposta dos explantes nas concentrações de 0,5 e 1,5 g L-¹ do fertilizante foram iguais aos desenvolvidos em meio contendo KNO3, e na concentração de 1,0 g L-¹, em todas as variáveis, as médias foram superiores em relação as do controle. Dessa forma, constatou-se a viabilidade do uso do fertilizante no cultivo in vitro da palma, o que propiciou a eliminação dos entraves burocráticos e redução no custo de 99,12% na compra do produto.(AU)
Assuntos
Opuntia/efeitos dos fármacos , Opuntia/crescimento & desenvolvimento , Potássio/administração & dosagem , Fertilizantes/análise , Micronutrientes/administração & dosagem , Micronutrientes/efeitos adversosResumo
A biotecnologia vegetal é uma área de elevada importância, uma vez que tem a função de obter organismos vegetais com características superiores aos já existentes no mercado. A clonagem é uma das ferramentas que podem ser utilizadas para essa função, através dela, seleciona-se organismos com características de interesse e realiza-se a multiplicação deste individuo, garantindo que as plantas regeneradas sejam geneticamente idênticas a matriz desejada, estabelecendo uma padronização. Sabendo que o setor de plantas ornamentais contribui de maneira expressiva com a economia e dentre as plantas ornamentais de mais estima entre os brasileiros, encontram-se as orquídeas, que vem adquirindo visibilidade cultural e um grande número de colecionadores nos últimos anos. O objetivo, do presente trabalho, foi estabelecer um protocolo de assepsia eficiente para meristemas laterais e obtenção de clones da orquídea do gênero Phalaenopsis. Para metodologia, visando a padronização de um protocolo de assepsia, foram elaborados e testados 4 tratamentos que possuíam diferentes combinações (concentração x tempo) de agentes como o hipoclorito de sódio, álcool, cobre, tween e lavagem dos explantes com água destilada estéril para meristemas laterais da orquídea de gênero Phalaenopsis. Os meristemas, também conhecidos como gemas laterais, foram retirados do caule das plântulas, de suas hastes florais...
Plant biotechnology is an área of high importance since it has the function of obtaining plant organisms with characteristics superior to those already on the market. Cloning is one of the tools that can be used for this function, through it, organisms with characteristics of interest are selected and this individual is multiplied, ensuring that the regenerated plants are genetically identical to the desired matrix, establishing a standardization. Knowing that the ornamental plants sector contributes significantly to the economy and among the most esteemed ornamental plants among Brazilians, there are orchids which have acquired cultural visibility and a large number of collectors in recent years. The objective of the present work was to establish an efficient assepsis protocol for lateral meristems and to obtain clones of the orchid of the genus Phalaenopsis. For methodology, aiming at the standardization o fan asepsis protocol, 4 treatments were developed and tested with different combinations (concentration x time) of agents such as sodium hypochlorite, alcohol, copper, tween and washing the explants with sterile distilled wáter for meristems of the orchid of the genus Phalaenopsis. The meristems, also known as lateral buds, were removed from the stem of the seedlings, from their floral stems. As for obtained clones, the experiment carried out consisted of...
Assuntos
Biotecnologia , Clonagem de Organismos , Orchidaceae , Técnicas In VitroResumo
A biotecnologia vegetal é uma área de elevada importância, uma vez que tem a função de obter organismos vegetais com características superiores aos já existentes no mercado. A clonagem é uma das ferramentas que podem ser utilizadas para essa função, através dela, seleciona-se organismos com características de interesse e realiza-se a multiplicação deste individuo, garantindo que as plantas regeneradas sejam geneticamente idênticas a matriz desejada, estabelecendo uma padronização. Sabendo que o setor de plantas ornamentais contribui de maneira expressiva com a economia e dentre as plantas ornamentais de mais estima entre os brasileiros, encontram-se as orquídeas, que vem adquirindo visibilidade cultural e um grande número de colecionadores nos últimos anos. O objetivo, do presente trabalho, foi estabelecer um protocolo de assepsia eficiente para meristemas laterais e obtenção de clones da orquídea do gênero Phalaenopsis. Para metodologia, visando a padronização de um protocolo de assepsia, foram elaborados e testados 4 tratamentos que possuíam diferentes combinações (concentração x tempo) de agentes como o hipoclorito de sódio, álcool, cobre, tween e lavagem dos explantes com água destilada estéril para meristemas laterais da orquídea de gênero Phalaenopsis. Os meristemas, também conhecidos como gemas laterais, foram retirados do caule das plântulas, de suas hastes florais...(AU)
Plant biotechnology is an área of high importance since it has the function of obtaining plant organisms with characteristics superior to those already on the market. Cloning is one of the tools that can be used for this function, through it, organisms with characteristics of interest are selected and this individual is multiplied, ensuring that the regenerated plants are genetically identical to the desired matrix, establishing a standardization. Knowing that the ornamental plants sector contributes significantly to the economy and among the most esteemed ornamental plants among Brazilians, there are orchids which have acquired cultural visibility and a large number of collectors in recent years. The objective of the present work was to establish an efficient assepsis protocol for lateral meristems and to obtain clones of the orchid of the genus Phalaenopsis. For methodology, aiming at the standardization o fan asepsis protocol, 4 treatments were developed and tested with different combinations (concentration x time) of agents such as sodium hypochlorite, alcohol, copper, tween and washing the explants with sterile distilled wáter for meristems of the orchid of the genus Phalaenopsis. The meristems, also known as lateral buds, were removed from the stem of the seedlings, from their floral stems. As for obtained clones, the experiment carried out consisted of...(AU)
Assuntos
Orchidaceae , Técnicas In Vitro , Biotecnologia , Clonagem de OrganismosResumo
The release of endometrial prostaglandin-F2α (PGF2α) in bovine females can be induced in vivo by estradiol (E2). However, its role in this mechanism has not been clarified. We hypothesized that E2 stimulates the activity and abundance of protein kinase C (PKC) and phospholipase A2 (PLA2). Our objective in this study was to analyze the effects of PKC and PLA2 inhibitors on PGF2α synthesis induced by E2 and calcium ionophore (CI) in bovine endometrial cells (BEND cells; Experiment 1). Additionally, we evaluated the abundance of PKC and PLA2 in endometrial explants of cows treated or not with E2 17 days after estrus (D17, D0 = estrus; Experiment 2). In Experiment 1, BEND cells were submitted to a PKC inhibitor (10 µM of C25H24N4O2; bisindolylmaleimide I, or BIS I), a PLA2 inhibitor (20 µM of arachydoniltrifluoromethane or AACOCF3), or none. The BEND cells were subsequently treated with E2 and CI, and PGF2α concentrations were measured in the culture medium through radioimmunoassay. For DIF-12 (PGF2α concentration 12 h after treatment subtracted from PGF2α concentration at hour 0), no PKC inhibitor effect was observed (P= 0.2709). However, DIF-12 was lower (P < 0.05) for groups treated with the PLA2 inhibitor and PLA2 inhibitor + CI + E2 groups than the control and CI + E2 groups. Thus, AACOCF3 was an efficient PLA2 inhibitor in the BEND cells culture system, and E2 did not stimulate the synthesis of PKC and PLA2. In Experiment 2, cyclic Nellore heifers received none (n = 5) or 3 mg (n = 6) of 17ß-E2 on D17 and were slaughtered 2 h after administration. The abundance of PKC and PLA2 in the endometrial tissue was evaluated using Western blotting analysis. No E2 effect was observed on PKC (P = 0.08) and PLA2 (P = 0.56). We concluded that E2 did not stimulate the activity and abundance of PKC and PLA2.(AU)
A liberação endometrial de prostaglandina-F2α (PGF2α) em fêmeas bovinas pode ser induzida in vivo pelo estradiol (E2). Entretanto o seu mecanismo de ação ainda não foi bem esclarecido. Nossa hipótese é que o E2 estimula a atividade e a abundância da proteína quinase C (PKC) e da fosfolipase A2 (PLA2). Nosso objetivo com este estudo foi analizar os efeitos de inibidores de PKC e PLA2 na síntese de PGF2α induzida por E2 e ionóforo de cálcio (CI) em células endometriais bovinas (células BEND; Experimento 1). Adicionalmente, nós avaliamos a abundância de PKC e PLA2 em explantes endometriais de vacas tratadas com ou sem E2 17 dias após o estro (D17, D0 = estro; Experimento 2). No Experimento 1, células BEND foram submetidas ao inibidor de PKC (10 µM de C25H24N4O2; bisindolylmaleimide I, ou BIS I), e ao inibidor de PLA2 (20 µM de arachydoniltrifluoromethane ou AACOCF3) ou a nenhum inibidor. As células BEND foram subsequentemente tratadas com E2 e CI e concentrações de PGF2α foram mensuradas no meio de cultura por radioimunoenssaio. Para DIF-12 (concentração de PGF2α 12 horas depois do tratamento, subtraída da concentração de PGF2α na hora 0), não foi observado efeito do inibidor de PKC (P = 0.2709). Entretanto DIF-12 foi menor (P < 0.05) nos grupos tratados com inibidor de PLA2 e inibidor de PLA2 + CI + E2 quando comparados com o grupo controle e o grupo CI + E2. O AACOCF3 foi um eficiente inibidor de PLA2 em sistema de cultura de células BEND e o E2 não estimulou a síntese de PKC e PLA2. No Experimento 2, novilhas Nelore cíclicas receberam 3 mg de 17ß-E2 (n = 6) ou nenhum tratamento (n = 5) no D17 e foram abatidas duas horas depois da administração dos tratamentos. A quantidade de PKC and PLA2 no tecido endometrial foi avaliada pela técnica de Western Blotting. Não foi observado efeito do E2 sobre a PKC (P= 0.08) e nem sobre a PLA2 (P= 0.56). Conclui-se que o E2 não estimulou a atividade e abundância de PKC e PLA2.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Proteína Quinase C , Bovinos/fisiologia , Inibidores de Fosfolipase A2 , Doenças Uterinas , Estradiol , Ionóforos de CálcioResumo
The release of endometrial prostaglandin-F2α (PGF2α) in bovine females can be induced in vivo by estradiol (E2). However, its role in this mechanism has not been clarified. We hypothesized that E2 stimulates the activity and abundance of protein kinase C (PKC) and phospholipase A2 (PLA2). Our objective in this study was to analyze the effects of PKC and PLA2 inhibitors on PGF2α synthesis induced by E2 and calcium ionophore (CI) in bovine endometrial cells (BEND cells; Experiment 1). Additionally, we evaluated the abundance of PKC and PLA2 in endometrial explants of cows treated or not with E2 17 days after estrus (D17, D0 = estrus; Experiment 2). In Experiment 1, BEND cells were submitted to a PKC inhibitor (10 µM of C25H24N4O2; bisindolylmaleimide I, or BIS I), a PLA2 inhibitor (20 µM of arachydoniltrifluoromethane or AACOCF3), or none. The BEND cells were subsequently treated with E2 and CI, and PGF2α concentrations were measured in the culture medium through radioimmunoassay. For DIF-12 (PGF2α concentration 12 h after treatment subtracted from PGF2α concentration at hour 0), no PKC inhibitor effect was observed (P= 0.2709). However, DIF-12 was lower (P < 0.05) for groups treated with the PLA2 inhibitor and PLA2 inhibitor + CI + E2 groups than the control and CI + E2 groups. Thus, AACOCF3 was an efficient PLA2 inhibitor in the BEND cells culture system, and E2 did not stimulate the synthesis of PKC and PLA2. In Experiment 2, cyclic Nellore heifers received none (n = 5) or 3 mg (n = 6) of 17ß-E2 on D17 and were slaughtered 2 h after administration. The abundance of PKC and PLA2 in the endometrial tissue was evaluated using Western blotting analysis. No E2 effect was observed on PKC (P = 0.08) and PLA2 (P = 0.56). We concluded that E2 did not stimulate the activity and abundance of PKC and PLA2.(AU)
A liberação endometrial de prostaglandina-F2α (PGF2α) em fêmeas bovinas pode ser induzida in vivo pelo estradiol (E2). Entretanto o seu mecanismo de ação ainda não foi bem esclarecido. Nossa hipótese é que o E2 estimula a atividade e a abundância da proteína quinase C (PKC) e da fosfolipase A2 (PLA2). Nosso objetivo com este estudo foi analizar os efeitos de inibidores de PKC e PLA2 na síntese de PGF2α induzida por E2 e ionóforo de cálcio (CI) em células endometriais bovinas (células BEND; Experimento 1). Adicionalmente, nós avaliamos a abundância de PKC e PLA2 em explantes endometriais de vacas tratadas com ou sem E2 17 dias após o estro (D17, D0 = estro; Experimento 2). No Experimento 1, células BEND foram submetidas ao inibidor de PKC (10 µM de C25H24N4O2; bisindolylmaleimide I, ou BIS I), e ao inibidor de PLA2 (20 µM de arachydoniltrifluoromethane ou AACOCF3) ou a nenhum inibidor. As células BEND foram subsequentemente tratadas com E2 e CI e concentrações de PGF2α foram mensuradas no meio de cultura por radioimunoenssaio. Para DIF-12 (concentração de PGF2α 12 horas depois do tratamento, subtraída da concentração de PGF2α na hora 0), não foi observado efeito do inibidor de PKC (P = 0.2709). Entretanto DIF-12 foi menor (P < 0.05) nos grupos tratados com inibidor de PLA2 e inibidor de PLA2 + CI + E2 quando comparados com o grupo controle e o grupo CI + E2. O AACOCF3 foi um eficiente inibidor de PLA2 em sistema de cultura de células BEND e o E2 não estimulou a síntese de PKC e PLA2. No Experimento 2, novilhas Nelore cíclicas receberam 3 mg de 17ß-E2 (n = 6) ou nenhum tratamento (n = 5) no D17 e foram abatidas duas horas depois da administração dos tratamentos. A quantidade de PKC and PLA2 no tecido endometrial foi avaliada pela técnica de Western Blotting. Não foi observado efeito do E2 sobre a PKC (P= 0.08) e nem sobre a PLA2 (P= 0.56). Conclui-se que o E2 não estimulou a atividade e abundância de PKC e PLA2.(AU)
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Animais , Bovinos , Proteína Quinase C , Bovinos/fisiologia , Inibidores de Fosfolipase A2 , Doenças Uterinas , Estradiol , Ionóforos de CálcioResumo
Sincoraea mucugensis (Wand. & A.A. Conc.) LOUZADA & WAND, an endangered bromeliad, is confined to the central region of the Chapada Diamantina, in the municipality of Mucugê, Brazil. From various researches, it is evident that for the propagation of this species, the in vitro technique is a feasible option. However, due to the low multiplication rates reported in various papers, this study aimed to establish a micropropagation protocol of direct organogenesis for S. mucugensis. First, the inoculation of the stem explants was done in MS ½ culture medium which contained different levels of BAP (0.00; 6.66; 8.88; 11.10; 13.20 µM) and NAA (0.00; 2.60; 5.20 µM). These shoots were then subjected to a couple of distinct rooting periods (of 30- and 60-day duration) using activated charcoal; finally, these microplants were transferred to a greenhouse for acclimatization, and covered with transparent plastic cups, as a water loss prevention test method. All the data were submitted to the analysis of variance (ANOVA), and the means were subjected to regression analysis or compared using the Tukey test. The findings revealed that the S. mucugensis stem explants raised in the NAA-rich medium (6.42 to 7.43 shoots/explants) showed high multiplication rates; the shoot rooting was done for 30 days using activated charcoal with the medium. Acclimatization, which was performed by directly exposing the microplants to the ex vitro environment, showed 95% survival rate.(AU)
Sincoraea mucugensis (Wand. & A.A. Conc.) LOUZADA & WAND é uma bromélia vulnerável de ocorrência restrita ao município de Mucugê, Chapada Diamantina. Estudos indicam que a cultura de tecidos é uma alternativa viável para a propagação in vitro desta espécie. Contudo, em função das baixas taxas de multiplicação obtidas em estudos anteriores, objetivou-se estabelecer um protocolo de micropropagação via organogênese direta para S. mucugensis. Explantes caulinares foram inoculados em meio de cultura MS ½ contendo diferentes concentrações de BAP (0,00; 6,66; 8,88; 11,10; 13,20 µM) e ANA (0,00; 2,60; 5,20 µM). Os brotos obtidos foram submetidos a diferentes períodos de enraizamento (30 e 60 dias) com carvão ativado; posteriormente as microplantas foram aclimatizadas em casa de vegetação, testando-se o efeito da cobertura com copos plásticos transparentes como estratégias contra perda de água. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e as médias analisadas por regressão ou comparadas pelo Teste de Tukey. Os resultados demonstram que altas taxas de multiplicação de S. mucugensis são geradas a partir de explantes caulinares cultivados em meio contendo ANA (6,42 a 7,43 brotos/explantes); o enraizamento dos brotos é realizado por 30 dias em meio com carvão ativado e a aclimatização é feita com exposição direta das microplantas ao ambiente ex vitro com 95% de sobrevivência.(AU)
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Bromelia/embriologia , Bromelia/crescimento & desenvolvimento , Brotos de Planta/crescimento & desenvolvimento , Técnicas In Vitro , Análise de VariânciaResumo
This study evaluated the effect of vitrification solutions and exposure time on the cryopreservation of Brazilian green dwarf coconut plumules (BGD) using the droplet vitrification technique. Explants were excised from BGD mature fruits from the Active Germplasm Bank of Embrapa Tabuleiros Costeiros, Sergipe, Brazil. Firstly, embryos were disinfected, and after excision, plumules were pre-cultivated for 72 hours in Y3 + 0.6 M sucrose + 2.2 g L-1 Gelrite® culture medium. Plumules were exposed to PVS2 and PVS3 solutions for 15 and 30 minutes and rapidly immersed in liquid nitrogen (-196 ºC). After cryopreservation, they were thawed in culture medium solution (Y3 + 1.2 M sucrose) and cultured in regeneration medium. The experimental design was completely randomized in a 2x2 factorial scheme (vitrification solutions per exposure times), with five replicates per treatment. Data were compared by the Tukeys test at 5% probability. Significant differences were observed in the callogenesis percentage for the solutions x exposure time interaction for non-cryopreserved cultures (-NL) and for exposure time after cryopreservation (+NL). PVS2 and PVS3 combined with 15 minutes of exposure promoted the highest callus formation (70 and 100%, respectively) in control cultures. The exposure time of 30 min, regardless of vitrification solution, resulted in 30% embryogenic callus formation after cryopreservation. These results contributed to the long-term conservation of coconut palm.(AU)
O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito das soluções de vitrificação e do tempo de exposição na criopreservação de plúmulas de coqueiro anão verde do Brasil de Jiqui (BGD), pela técnica de vitrificação em gotas. Os explantes foram excisados de frutos maduros oriundos do Banco de Germoplasma Ativo de Embrapa Tabuleiros Costeiros, Sergipe, Brasil. Os embriões foram desinfestados e as plúmulas, após a excisão, pré-cultivadas durante 72 horas em meio de cultura Y3 suplementado com sacarose 0,6 e 2,2 g L-1 Gelrite®. As plúmulas foram expostas em soluções de PVS2 e PVS3 durante 15 e 30 minutos, e rapidamente imersas em nitrogênio líquido (-196 ºC). Após a criopreservação, foram descongeladas na solução de meio de cultura Y3 com 1,2 M de sacarose, e cultivadas em meio de regeneração. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 2x2 (soluções de vitrificação x tempos de exposição), com cinco repetições por tratamento. Os dados foram comparados pelo teste de Tukey à probabilidade de 5%. Observaram-se diferenças significativas na porcentagem de calogênese para a interação entre soluções e tempo de exposição para as culturas não criopreservadas (-NL), e para o tempo de exposição após a criopreservação (+NL). O PVS2 e o PVS3 combinados com 15 minutos promoveram a maior formação de calo (70 e 100%, respectivamente) nas culturas de controle. O tempo de exposição de 30 min, independente da solução de vitrificação, promoveu 30% da formação de calos embriogênicos após a criopreservação. Estes resultados contribuem para a conservação em longo prazo do coqueiro.(AU)
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Criopreservação/métodos , Arecaceae , VitrificaçãoResumo
In the present study, histological, morphometrical and ultrastructural analysis were performed to investigate intestinal mucosa changes in piglets jejunal explants exposed to two concentration of heat-inactivated Lactobacillus plantarum and their respective culture supernatants. Jejunal explants were incubated for 4 hours in DMEM culture medium with a) only culture medium (control group), b) heat-inactivated Lactobacillus plantarum strain1 - LP1 (1.1 x 108CFU/ml), c) heat-inactivated Lactobacillus plantarum strain2 - LP2 (2.0 x 109CFU/ml), d) heat-inactivated Lactobacillus plantarum strain1 culture supernatant (CS1), and e) heat-inactivated Lactobacillus plantarum strain2 culture supernatant (CS2). Explants exposed to heat-inactivated L. plantarum strain 1 and 2 showed multifocal to difuse villi atrophy, villi apical necrosis and enterocyte flattening. Morphological assessment revealed similar results with bacterial adhesion to mucus and intestinal epithelial cells and, morphometric analysis showed a decreased villi height compared to the control group. Alterations in explants treated with the culture supernatant of both strains include mild villi atrophy and mild enterocyte apical necrosis. Morphological assesment reveled numerous well delineated villi and, morphometric analysis showed a significant increase in villi height compared to the control group. In general, exposure to the culture supernatants improved the intestinal morphology.(AU)
No presente estudo, foram realizadas análises histológica, morfométrica e ultraestrutural para investigar as alterações da mucosa intestinal em explantes jejunais de leitões expostos a duas cepas e concentrações de Lactobacillus plantarum inativado pelo calor e seus sobrenadantes de cultura. Os explantes jejunais foram incubados durante quatro horas, em meio de cultura DMEM com: a) meio de cultura (grupo controle); b) Lactobacillus plantarum, cepa 1 - LP1 (1,1 x 108CFU/mL); c) Lactobacillus plantarum, LP2 (2,0 x 109CFU/mL); d) sobrenadante da cultura do Lactobacillus plantarum, cepa 1 (SC1); e e) sobrenadante da cultura do Lactobacillus plantarum, cepa 2 (SC2). Os explantes expostos às cepas 1 e 2 do L. plantarum inativado pelo calor mostraram atrofia difusa de vilosidades, necrose apical das vilosidades e achatamento de enterócitos. A avaliação morfológica revelou resultados semelhantes, com adesão bacteriana ao muco e às células epiteliais intestinais, e a análise morfométrica mostrou uma diminuição da altura das vilosidades em relação ao grupo controle. Alterações nos explantes tratados com o sobrenadante da cultura de ambas as cepas caracterizaram-se por atrofia leve das vilosidades e necrose apical leve dos enterócitos. A avaliação morfológica revelou vilosidades bem delineadas, e a análise morfométrica mostrou um aumento significativo na altura das vilosidades em comparação ao grupo controle. Em geral, a exposição aos sobrenadantes da cultura melhora a morfologia intestinal.(AU)
Assuntos
Animais , Suínos/anatomia & histologia , Lactobacillus plantarum , Mucosa Intestinal/patologiaResumo
In the present study, histological, morphometrical and ultrastructural analysis were performed to investigate intestinal mucosa changes in piglets jejunal explants exposed to two concentration of heat-inactivated Lactobacillus plantarum and their respective culture supernatants. Jejunal explants were incubated for 4 hours in DMEM culture medium with a) only culture medium (control group), b) heat-inactivated Lactobacillus plantarum strain1 - LP1 (1.1 x 108CFU/ml), c) heat-inactivated Lactobacillus plantarum strain2 - LP2 (2.0 x 109CFU/ml), d) heat-inactivated Lactobacillus plantarum strain1 culture supernatant (CS1), and e) heat-inactivated Lactobacillus plantarum strain2 culture supernatant (CS2). Explants exposed to heat-inactivated L. plantarum strain 1 and 2 showed multifocal to difuse villi atrophy, villi apical necrosis and enterocyte flattening. Morphological assessment revealed similar results with bacterial adhesion to mucus and intestinal epithelial cells and, morphometric analysis showed a decreased villi height compared to the control group. Alterations in explants treated with the culture supernatant of both strains include mild villi atrophy and mild enterocyte apical necrosis. Morphological assesment reveled numerous well delineated villi and, morphometric analysis showed a significant increase in villi height compared to the control group. In general, exposure to the culture supernatants improved the intestinal morphology.(AU)
No presente estudo, foram realizadas análises histológica, morfométrica e ultraestrutural para investigar as alterações da mucosa intestinal em explantes jejunais de leitões expostos a duas cepas e concentrações de Lactobacillus plantarum inativado pelo calor e seus sobrenadantes de cultura. Os explantes jejunais foram incubados durante quatro horas, em meio de cultura DMEM com: a) meio de cultura (grupo controle); b) Lactobacillus plantarum, cepa 1 - LP1 (1,1 x 108CFU/mL); c) Lactobacillus plantarum, LP2 (2,0 x 109CFU/mL); d) sobrenadante da cultura do Lactobacillus plantarum, cepa 1 (SC1); e e) sobrenadante da cultura do Lactobacillus plantarum, cepa 2 (SC2). Os explantes expostos às cepas 1 e 2 do L. plantarum inativado pelo calor mostraram atrofia difusa de vilosidades, necrose apical das vilosidades e achatamento de enterócitos. A avaliação morfológica revelou resultados semelhantes, com adesão bacteriana ao muco e às células epiteliais intestinais, e a análise morfométrica mostrou uma diminuição da altura das vilosidades em relação ao grupo controle. Alterações nos explantes tratados com o sobrenadante da cultura de ambas as cepas caracterizaram-se por atrofia leve das vilosidades e necrose apical leve dos enterócitos. A avaliação morfológica revelou vilosidades bem delineadas, e a análise morfométrica mostrou um aumento significativo na altura das vilosidades em comparação ao grupo controle. Em geral, a exposição aos sobrenadantes da cultura melhora a morfologia intestinal.(AU)
Assuntos
Animais , Suínos/anatomia & histologia , Lactobacillus plantarum , Mucosa Intestinal/patologiaResumo
Among the native fruit trees of the South of Brazil, the red strawberry guava (Psidium cattleyanum Sabine) of the Myrtaceae family and it is considered a native forest species of great importance in this region. The strawberry guava is usually propagated through sexual reproduction, however, few studies have been done to optimize the propagation of this native species. In addition to this problem, many studies with woody plants have shown positive results with propagation through tissue culture techniques. In this way, the objective was to verify the in vitro germination of red strawberry guava and the initial development of the explants with the use of the micropropagation technique. A completely randomized design with 3 x 2 factorial arrangement was used, with three forms of seed fractionation (without cutting, longitudinal and transverse cutting) and two conditions of light intensities (presence and absence of light), totaling six treatments with 10 replications of four seeds each. After 14 days of the experiment were evaluated oxidation (%) and sowing (cm). The seeds germination rate (%), mean root length (cm), length of the largest root (cm), length of explant and number of roots and leaves were analyzed with 240 days. It was concluded that just a single seed of Psidium cattleyanum, when being fractionated, maintains the germinative capacity and can produce more than one n
Entre as fruteiras nativas do Sul do Brasil, destaca-se o araçazeiro vermelho (Psidium cattleyanum Sabine) da família Myrtaceae e por isso, é considerado uma espécie florestal nativa de grande importância nessa região. O araçazeiro é propagado normalmente por via sexuada, entretanto são poucos os estudos que otimizem a propagação desta espécie nativa. Aliado a isso, para contornar esta problemática, muitos estudos com espécies florestais lenhosas demonstram resultados positivos com a propagação por meio de técnicas de cultura de tecidos. Dessa forma, o objetivo foi verificar a germinação in vitro de araçazeiro vermelho, assim como, o desenvolvimento inicial dos explantes com o uso da técnica de micropropagação. Utilizou-se um delineamento inteiramente casualizado, com arranjo fatorial 3 x 2, sendo três formas de fracionamento de sementes (sem corte, longitudinal e transversal) e duas condições de intensidades luminosas (presença de luz e obscuridade), totalizando seis tratamentos com 10 repetições de quatro sementes cada. Após 14 dias da instalação do experimento, as variáveis analisadas foram: oxidação (%) e estiolamento (%) e transcorridos 240 dias, avaliou-se a taxa germinativa das sementes (%), comprimento médio de raízes (cm), da maior raiz (cm) e do explante (cm) e número de raízes e de folhas. Concluiu-se com esse estudo, que uma única semente de Psidium cattleyanum Sabi
Resumo
The implantation of a model of sustainable development for agriculture can happen with the contribution of the mandiocultura. But for this, culture needs to be strengthened. In vitro propagation is an instrument for this purpose. Micropropagation can provide growers with large quantities of vigorous and healthy cassava seedlings in a short time. The objective of this study was to evaluate the in vitro establishment of four varieties of cassava cultivated in the municipality of Colorado do Oeste, State of Rondônia, popularly known as Arara, Caturra, Cacau Vermelha and Roxinha. For that, an experiment was carried out in the Laboratory of In Vitro Cultivation at the Pole of Technological Innovation of the University of Cruz Alta (UNICRUZ), with a completely randomized design in a 4 x 2 factorial scheme, with 6 replications. The treatments consisted of explants grown in Murashige and Skoog (MS) medium without the presence of growth regulator and MS medium supplemented with of 6-benzylaminopurine (BAP). The results indicate that the mean contamination percentage of the explants was 47.19%, differing among the varieties. The best growth response in culture media, in the multiple comparison of means (Scott-Knott's test, 5%), was obtained with MS medium without BAP addition, with significant difference between varieties. Under the conditions of this experiment, it was evidenced that micropropagation is a viable tool for obtaining varieties of interest, with desired phytosanitary qualities, with varietal and large-scale authenticity.(AU)
A implantação de um modelo de desenvolvimento sustentável para a agricultura pode acontecer com a contribuição da mandiocultura. Mas para isso, a cultura precisa ser fortalecida. A propagação in vitro é um instrumento para este fim. A micropropagação pode proporcionar aos produtores grande quantidade de mudas de mandioca vigorosas e sadias em um curto espaço de tempo. O objetivo deste trabalho foi avaliar o estabelecimento in vitro de quatro variedades de mandioca cultivadas no município de Colorado do Oeste, Rondônia, popularmente conhecidas como Arara, Caturra, Cacau Vermelha e Roxinha. Para isso, foi realizado um experimento no Laboratório de Cultivo In Vitro no Polo de Inovação Tecnológica da Universidade de Cruz Alta (UNICRUZ), com delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 4 x 2, com 6 repetições. Os tratamentos consistiram em explantes cultivados em meio Murashige e Skoog (MS) sem a presença de regulador de crescimento e meio MS suplementado com 6-benzilaminopurina (BAP). Os resultados indicam que a porcentagem média de contaminação dos explantes foi de 47,19%, diferindo entre as variedades. A melhor resposta de crescimento em meios de cultura, na comparação múltipla de médias (teste de Scott-Knott, 5%), foi obtida com meio MS sem adição de BAP, com diferença significativa entre as variedades. Nas condições deste experimento, ficou evidenciado que a micropropagação é uma ferramenta viável para obtenção de variedades de interesse, com qualidades fitossanitárias desejadas, com autenticidade varietal e em larga escala.(AU)
La implantación de un modelo de desarrollo sostenible para la agricultura puede suceder con el aporte de la mandiocultura. Pero, para eso, la cultura necesita ser fortalecida. La propagación in vitro es un instrumento para ese fin. La micropropagación puede proporcionar a los cultivadores grandes cantidades de plántulas de mandioca vigorosas y saludables en poco tiempo. El objetivo de esta investigación ha sido evaluar el establecimiento in vitro de cuatro variedades de mandiocas cultivadas en el municipio de Colorado del Oeste, Rondônia, popularmente conocidas como Arara, Caturra, Cacau Vermelha y Roxinha. Para eso, se realizó un experimento en el Laboratorio de cultivo in vitro en el Polo de Innovación Tecnológica de la Universidad de Cruz Alta (UNICRUZ), con delineamiento completamente casualizado en esquema factorial 4 x 2, con 6 repeticiones. Los tratamientos consistieron en explantes cultivados en medio Murashige y Skoog (MS) sin la presencia de regulador de crecimiento y medio MS suplementado con 6-bencilaminopurina (BAP). Los resultados indican que el porcentaje de contaminación promedio de los explantes fue de 47.19%, diferenciándose entre las variedades. La mejor respuesta de crecimiento en medios de cultivo, en la comparación múltiple de medias (prueba de Scott-Knott, 5%), se obtuvo con medio MS sin adición de BAP, con una diferencia significativa entre las variedades. Bajo las condiciones de este experimento, se evidenció que la micropropagación es una herramienta viable para obtener variedades de interés, con cualidades fitosanitarias deseadas, con autenticidad varietal y de gran escala.(AU)
Assuntos
Manihot/crescimento & desenvolvimento , Manihot/embriologia , Técnicas In Vitro/classificaçãoResumo
The implantation of a model of sustainable development for agriculture can happen with the contribution of the mandiocultura. But for this, culture needs to be strengthened. In vitro propagation is an instrument for this purpose. Micropropagation can provide growers with large quantities of vigorous and healthy cassava seedlings in a short time. The objective of this study was to evaluate the in vitro establishment of four varieties of cassava cultivated in the municipality of Colorado do Oeste, State of Rondônia, popularly known as Arara, Caturra, Cacau Vermelha and Roxinha. For that, an experiment was carried out in the Laboratory of In Vitro Cultivation at the Pole of Technological Innovation of the University of Cruz Alta (UNICRUZ), with a completely randomized design in a 4 x 2 factorial scheme, with 6 replications. The treatments consisted of explants grown in Murashige and Skoog (MS) medium without the presence of growth regulator and MS medium supplemented with of 6-benzylaminopurine (BAP). The results indicate that the mean contamination percentage of the explants was 47.19%, differing among the varieties. The best growth response in culture media, in the multiple comparison of means (Scott-Knott's test, 5%), was obtained with MS medium without BAP addition, with significant difference between varieties. Under the conditions of this experiment, it was evidenced that micropropagation is a viable tool for obtaining varieties of interest, with desired phytosanitary qualities, with varietal and large-scale authenticity.(AU)
A implantação de um modelo de desenvolvimento sustentável para a agricultura pode acontecer com a contribuição da mandiocultura. Mas para isso, a cultura precisa ser fortalecida. A propagação in vitro é um instrumento para este fim. A micropropagação pode proporcionar aos produtores grande quantidade de mudas de mandioca vigorosas e sadias em um curto espaço de tempo. O objetivo deste trabalho foi avaliar o estabelecimento in vitro de quatro variedades de mandioca cultivadas no município de Colorado do Oeste, Rondônia, popularmente conhecidas como Arara, Caturra, Cacau Vermelha e Roxinha. Para isso, foi realizado um experimento no Laboratório de Cultivo In Vitro no Polo de Inovação Tecnológica da Universidade de Cruz Alta (UNICRUZ), com delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 4 x 2, com 6 repetições. Os tratamentos consistiram em explantes cultivados em meio Murashige e Skoog (MS) sem a presença de regulador de crescimento e meio MS suplementado com 6-benzilaminopurina (BAP). Os resultados indicam que a porcentagem média de contaminação dos explantes foi de 47,19%, diferindo entre as variedades. A melhor resposta de crescimento em meios de cultura, na comparação múltipla de médias (teste de Scott-Knott, 5%), foi obtida com meio MS sem adição de BAP, com diferença significativa entre as variedades. Nas condições deste experimento, ficou evidenciado que a micropropagação é uma ferramenta viável para obtenção de variedades de interesse, com qualidades fitossanitárias desejadas, com autenticidade varietal e em larga escala.(AU)
La implantación de un modelo de desarrollo sostenible para la agricultura puede suceder con el aporte de la mandiocultura. Pero, para eso, la cultura necesita ser fortalecida. La propagación in vitro es un instrumento para ese fin. La micropropagación puede proporcionar a los cultivadores grandes cantidades de plántulas de mandioca vigorosas y saludables en poco tiempo. El objetivo de esta investigación ha sido evaluar el establecimiento in vitro de cuatro variedades de mandiocas cultivadas en el municipio de Colorado del Oeste, Rondônia, popularmente conocidas como Arara, Caturra, Cacau Vermelha y Roxinha. Para eso, se realizó un experimento en el Laboratorio de cultivo in vitro en el Polo de Innovación Tecnológica de la Universidad de Cruz Alta (UNICRUZ), con delineamiento completamente casualizado en esquema factorial 4 x 2, con 6 repeticiones. Los tratamientos consistieron en explantes cultivados en medio Murashige y Skoog (MS) sin la presencia de regulador de crecimiento y medio MS suplementado con 6-bencilaminopurina (BAP). Los resultados indican que el porcentaje de contaminación promedio de los explantes fue de 47.19%, diferenciándose entre las variedades. La mejor respuesta de crecimiento en medios de cultivo, en la comparación múltiple de medias (prueba de Scott-Knott, 5%), se obtuvo con medio MS sin adición de BAP, con una diferencia significativa entre las variedades. Bajo las condiciones de este experimento, se evidenció que la micropropagación es una herramienta viable para obtener variedades de interés, con cualidades fitosanitarias deseadas, con autenticidad varietal y de gran escala.(AU)
Assuntos
Manihot/crescimento & desenvolvimento , Manihot/embriologia , Técnicas In Vitro/classificaçãoResumo
The importance of the hoof to the horse health is clear, and the current knowledge regarding the cellular aspects of hoof keratinocytes is poor. Studies on equine keratinocyte culture are scarce. Developing keratinocyte cultures in vitro is a condition for studies on molecular biology, cell growth and differentiation. Some methods have already been established, such as those for skin keratinocyte culture. However, few methodologies are found for lamellar keratinocytes. The objective of this study was to standardize the equine hoof keratinocyte isolation and cultivation, and then characterize the cell immunophenotype. For this, the primary culture method used was through explants obtained from three regions of the equine hoof (medial dorsal, dorsal, and lateral dorsal). After the cell isolation and cultivation, the cell culture and its explants were stained with anti-pan cytokeratin (pan-CK) (AE1/AE3), vimentin (V9), p63 (4A4), and Ki-67 (MIB-1) antibodies. Cells were grown to third passage, were positive for pan-CK, p63 and Ki-67, and few cells had vimentin positive expression. As for the explants, the epidermal laminae were not stained for vimentin or Ki-67. However, some cells presented positive pan-CK and p63 expression. This study demonstrated the viability of lamellar explants of equine hooves as a form of isolating keratinocytes in primary cultures, as well as characterized the proliferation ability of such keratinocytes in monolayers.(AU)
É notória a importância do casco na saúde dos equinos, mas o conhecimento em nível celular é pouco entendido. Estudos envolvendo o cultivo de queratinócitos equinos são escassos. Sabe-se que o desenvolvimento de cultivos de queratinócitos in vitro é uma condição para estudos sobre a biologia molecular, crescimento e diferenciação celular. Alguns métodos já estão estabelecidos, como para cultivo de queratinócitos de pele, mas poucas metodologias são encontradas para queratinócitos lamelares. O objetivo desse estudo foi padronizar o cultivo de queratinócitos provenientes de casco equino visando futuramente associar ao estudo da medicina regenerativa para assim estabelecer um modelo experimental in vitro e indicar o uso criterioso de terapias regenerativas para a laminite equina. Desta forma, o cultivo em monocamada e a caracterização de queratinócitos lamelares foram realizados. Para isso, o método de cultura primária utilizado foi através de explantes obtidos de três regiões do casco (dorso-medial, dorsal e dorso-lateral). As células foram caracterizadas para os marcadores anti pan-cytokeratin (AE1/AE3), vimentin (V9), p63 (4A4) e Ki-67 (MIB-1) nos cultivos e nos explantes. As células foram cultivadas até terceira passagem, tendo marcação positiva para pan-CK, p63 e Ki-67 e fraca marcação para vimentina. Já as lâminas epidermais não tiveram marcação de vimentin e Ki-67, porém marcaram acentuadamente para pan-CK e p63. Este estudo demonstrou a exiquibilidade do uso de explantes lamelares do casco de equinos, como forma de isolamento de queratinócitos em cultivos primários, bem como caracterizou a habilidade de proliferação desses queratinócitos em monocamada.(AU)
Assuntos
Animais , Cultura Primária de Células/veterinária , Doenças do Pé/veterinária , Casco e Garras/patologia , Doenças dos Cavalos/patologia , Doenças dos Cavalos/terapia , Queratinócitos/citologiaResumo
The importance of the hoof to the horse health is clear, and the current knowledge regarding the cellular aspects of hoof keratinocytes is poor. Studies on equine keratinocyte culture are scarce. Developing keratinocyte cultures in vitro is a condition for studies on molecular biology, cell growth and differentiation. Some methods have already been established, such as those for skin keratinocyte culture. However, few methodologies are found for lamellar keratinocytes. The objective of this study was to standardize the equine hoof keratinocyte isolation and cultivation, and then characterize the cell immunophenotype. For this, the primary culture method used was through explants obtained from three regions of the equine hoof (medial dorsal, dorsal, and lateral dorsal). After the cell isolation and cultivation, the cell culture and its explants were stained with anti-pan cytokeratin (pan-CK) (AE1/AE3), vimentin (V9), p63 (4A4), and Ki-67 (MIB-1) antibodies. Cells were grown to third passage, were positive for pan-CK, p63 and Ki-67, and few cells had vimentin positive expression. As for the explants, the epidermal laminae were not stained for vimentin or Ki-67. However, some cells presented positive pan-CK and p63 expression. This study demonstrated the viability of lamellar explants of equine hooves as a form of isolating keratinocytes in primary cultures, as well as characterized the proliferation ability of such keratinocytes in monolayers.(AU)
É notória a importância do casco na saúde dos equinos, mas o conhecimento em nível celular é pouco entendido. Estudos envolvendo o cultivo de queratinócitos equinos são escassos. Sabe-se que o desenvolvimento de cultivos de queratinócitos in vitro é uma condição para estudos sobre a biologia molecular, crescimento e diferenciação celular. Alguns métodos já estão estabelecidos, como para cultivo de queratinócitos de pele, mas poucas metodologias são encontradas para queratinócitos lamelares. O objetivo desse estudo foi padronizar o cultivo de queratinócitos provenientes de casco equino visando futuramente associar ao estudo da medicina regenerativa para assim estabelecer um modelo experimental in vitro e indicar o uso criterioso de terapias regenerativas para a laminite equina. Desta forma, o cultivo em monocamada e a caracterização de queratinócitos lamelares foram realizados. Para isso, o método de cultura primária utilizado foi através de explantes obtidos de três regiões do casco (dorso-medial, dorsal e dorso-lateral). As células foram caracterizadas para os marcadores anti pan-cytokeratin (AE1/AE3), vimentin (V9), p63 (4A4) e Ki-67 (MIB-1) nos cultivos e nos explantes. As células foram cultivadas até terceira passagem, tendo marcação positiva para pan-CK, p63 e Ki-67 e fraca marcação para vimentina. Já as lâminas epidermais não tiveram marcação de vimentin e Ki-67, porém marcaram acentuadamente para pan-CK e p63. Este estudo demonstrou a exiquibilidade do uso de explantes lamelares do casco de equinos, como forma de isolamento de queratinócitos em cultivos primários, bem como caracterizou a habilidade de proliferação desses queratinócitos em monocamada.(AU)