Natural association between bovine leukemia virus and reproductive infectious diseases

Background: Enzootic bovine leukosis (EBL) is a widespread infectious disease caused by the bovine leukemia virus (BLV), which results in immune system dysfunction. The resulting immunosuppression may lead to an increased prevalence of other diseases. Dairy cows infected have altered immune function associated with decreased milk production and shortened lifespan and decreased immune response to immunization. BLV infection, however, is often asymptomatic, so any connection between subclinical infection and common reproductive diseases remains unknown. This study aimed to describe the relationship between naturally occurring subclinical BLV and infectious reproductive diseases seroconversion in the field. Materials, Methods & Results: The diseases investigated included Bovine viral diarrhoea (BVD), Bovine alfaherpesvirus 1 (BoHV-1), Bovine gammaherpesvirus 4 (BoHV-4), Chlamydiosis, Leptospirosis, Brucellosis and Neosporosis in dairy cattle. Six hundred fifty-five sera samples from the northern and south-central regions of Uruguay, from asymptomatic female Holstein and Holstein crosses without a history of vaccination against reproductive diseases were processed using reference diagnostic methods (Seronautalization, ELISA, MAT, Rose Bengal Plate test). The seroprevalence of BLV was 20.0%. Seroprevalence of reproductive diseases BVD, BoHV-1 and BoHV-4 were 99.3%, 41.2% and 27.3% of the populations, respectively, and the total seroprevalence of Leptospirosis, bovine Neospora caninum and Chlamydiosis were 19.8%, 29.8% and 33.0% respectively. The results revealed positive associations between naturally contracted BLV and the presence of antibodies against BoHV-1 (P = 0.002), as well as between naturally contracted BLV and presence of antibodies against Leptospira spp. (P = 0.028). Discussion: BLV infection can impact innate and adaptive immune system cells and alter the proper functioning of uninfected cells. BLV infection may also induce changes in the complex balance of cytokine expression, cell proliferation, and programmed cell death in T- and B-lymphocytes, which is critical for immune competence and effective response to infectious challenges. The progression of BLV infection has a substantial effect on host defense mechanisms. Indeed, lowmagnitude serologic responses to a commercial foot-and-mouth disease vaccine and a J5 Escherichia coli vaccine have been observed. These results are supported by recent trial studies showing a reduced immune response to vaccination against BoHV-1 and Leptospira spp. in asymptomatic animals infected with BLV. These are 2 of the most prevalent infectious reproductive diseases in cattle worldwide, and our results provide evidence that a link between BLV and susceptibility to these diseases may exist. Although there is evidence of the co-occurrence of these diseases, it remains unknown whether there is a direct or indirect effect of BLV on infertility, embryonic loss, or abortion. Another possibility is that natural infection with these reproductive pathogens (BoHV-1, Leptospira, or others) promotes BLV expression, negatively affecting the farms where these pathogens are endemic. Considering the high seroprevalence of BLV in dairy herds in North and South America where the infection is endemic, it was explored BLV's role as an immunosuppressant by quantifying its co-occurrence with diseases that affect reproductive performance in breeding herds. Future work should clarify the role of BLV and the co-occurring pathogens in causing infertility or abortions.

Leptospirosis, bovine viral diarrhea and infectious bovine rhinotracheitis: prevalence in Colombian cattle and buffaloes

One of the limiting factors of productive efficiency in cattle and buffalo herds is related to the high prevalence of infectious diseases which affect reproduction. The aim of this study was to determine the prevalence of anti-Leptospiraantibodies for bovine viral diarrhea virus (BVDV) and bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) in bovine and buffalo herds in Colombia. Blood serum samples were collected from 1100 buffaloes and 1000 cattle. The ELISA technique was used to detect antibodies against BVDV and BoHV-1, and the microscopic agglutination technique to detect anti-Leptospiraantibodies. The prevalence of anti-Leptospiraantibodies and of BVDV and BoHV-1 in bovine samples was observed in 16, 39.7, and 65% of animals, respectively, while the positivity in samples for the same antibodies in buffalos was detected in 18.7, 27.5 and 51.5%, respectively. Exposure of cattle and buffaloes to BoHV-1 was positively associated with age, higher prevalence rates were observed in older ages. Seropositivity of cattle for BVDV and BoHV-1 was higher in male animals. Activities such as embryo transfer, milking, and needle reuses, as well as the presence of cats and rodents are factors which favor positivity of the herd for BVDV and BoHV-1.(AU)

Estudo soroepidemiológico de alphaherpesvírus bovino 1 (BoHV-1) em bubalinos (Bubalus bubalis) de corte da Região Sul do Brasil / Seroepidemiology survey of bovine alphaherpesvirus 1 (BoHV-1) in unvaccinated beef bubalines (Bubalus bubalis) from Southern Brazil

Background: The bovine alphaherpesvirus type 1 (BoHV-1) belonging to the order Herpesvirales, family Herpesviridae,subfamily Alphaherpesvirinae and genus Varicellovirus. Bovine alphaherpesvirus 1 (BoHV-1) infections have a great importance due to the high rates of dissemination in cattles worldwide. Although, the BoHV-1 was largely related in cattle,buffaloes were also classified as host for the virus. However, studies that determine seroepidemiological data in this species are scarce and necessary. The aim of the present study was to determine the presence of antibodies against BoHV-1in healthy beef buffaloes using the virus neutralization (VN) technique.Cases: This work portrays an epidemiological survey, based on a sectional study characterized by blood samples collectedfrom 54 Murrah buffalo, aged 6 to 24 months, from the municipalities of Guaraqueçaba, Ponta Grossa, Antonina andDoutor Ulysses, located in Paraná state, being 20, 14, 10 and 10 samples from each location, respectively. Thirty-sevenpercent (20/54) of the samples were collected at slaughterhouse with registration at the Federal Inspection Service (SIF)of the Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply (MAPA), and 63% (34/54) at the buffalo’s farms. The serumsamples were collected in sterile tubes without anticoagulant in stored isothermal boxes, with serum separation and storedat -20ºC. The samples were sent to the Animal Virology Laboratory of Universidade Estadual de Londrina, UEL for serological analysis. Serological diagnosis using the virus neutralization (VN) technique was performed according the OIEmanual of diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals, using the BoHV-1 Los Angeles strain. Forth-five of the 54samples (83.3%) evaluated generated titers of antibodies against BoHV-1 present in all evaluated herds, and the samplescollected in herd from Antonina city were 100% positive, following by 80% in Guaraqueçaba...

Estudo soroepidemiológico de alphaherpesvírus bovino 1 (BoHV-1) em bubalinos (Bubalus bubalis) de corte da Região Sul do Brasil / Seroepidemiology survey of bovine alphaherpesvirus 1 (BoHV-1) in unvaccinated beef bubalines (Bubalus bubalis) from Southern Brazil

Background: The bovine alphaherpesvirus type 1 (BoHV-1) belonging to the order Herpesvirales, family Herpesviridae,subfamily Alphaherpesvirinae and genus Varicellovirus. Bovine alphaherpesvirus 1 (BoHV-1) infections have a great importance due to the high rates of dissemination in cattles worldwide. Although, the BoHV-1 was largely related in cattle,buffaloes were also classified as host for the virus. However, studies that determine seroepidemiological data in this species are scarce and necessary. The aim of the present study was to determine the presence of antibodies against BoHV-1in healthy beef buffaloes using the virus neutralization (VN) technique.Cases: This work portrays an epidemiological survey, based on a sectional study characterized by blood samples collectedfrom 54 Murrah buffalo, aged 6 to 24 months, from the municipalities of Guaraqueçaba, Ponta Grossa, Antonina andDoutor Ulysses, located in Paraná state, being 20, 14, 10 and 10 samples from each location, respectively. Thirty-sevenpercent (20/54) of the samples were collected at slaughterhouse with registration at the Federal Inspection Service (SIF)of the Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply (MAPA), and 63% (34/54) at the buffalos farms. The serumsamples were collected in sterile tubes without anticoagulant in stored isothermal boxes, with serum separation and storedat -20ºC. The samples were sent to the Animal Virology Laboratory of Universidade Estadual de Londrina, UEL for serological analysis. Serological diagnosis using the virus neutralization (VN) technique was performed according the OIEmanual of diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals, using the BoHV-1 Los Angeles strain. Forth-five of the 54samples (83.3%) evaluated generated titers of antibodies against BoHV-1 present in all evaluated herds, and the samplescollected in herd from Antonina city were 100% positive, following by 80% in Guaraqueçaba...(AU)

Serologic profile of bovine Alfaherpesvirus type1 (BoHV-1) and Pestivírus A (BVDV-1) in herds of a family farming of the Sao Paulo state / Perfil sorológico do Alfaherpesvirus bovino tipo 1 (BoHV-1) e Pestivírus A (BVDV-1) em rebanhos da agricultura familiar no estado de São Paulo

Serum samples from 719 dairy cattle of reproductive age, from 47 farms in a settlement in the municipality of Andradina, São Paulo, were analyzed for the presence of antibodies against the Nebraska strain of BoHV-1 and Singer type 1 of BVDV-1, using the virus neutralization technique (VN). Regarding BoHV-1, 72.0% of the samples analyzed (518/719) were positive, with a geometric mean of antibody titers of 318. For BVDV-1, 44.8% of the samples were reactive, only one farm had no reactive animals, and the majority of antibody titers found in the animals' sera were low. The results of this study revealed that BoHV-1 was present in all of the studied herds, with moderate titration in the majority of cases, with the presence of some high individual titers among the tested animals. Also, even with the reactivation or circulation of BoHV-1 in herds, the clinical disease was not observed, an epidemiological finding that also applied to BVDV-1. In view of the results obtained, the circulation of diseases in family farm herds in the studied region was evident, suggesting the need to study local risk factors and improve health education policies as a way to prevent or reduce the prevalence of these diseases.

Coletou-se 719 amostras de soro sanguíneo de bovinos em idade reprodutiva, de 47 propriedades de um assentamento no município de Andradina-SP. As amostras foram analisadas para presença de anticorpos contra ambos os vírus estudados, pela técnica de virusneutralização, utilizando-se a estirpe Nebraska para o BoHV-1 e Singer tipo 1 para o BVDV-1. Em relação ao BoHV-1, 72,0% (518/719) das amostras foram positivas, sendo 318 a média geométrica dos títulos de anticorpos (GMT).Para o BVDV-1, 44,8% das amostras foram reagentes; apenas uma propriedade não teve animais reagentes, sendo a maioria dos títulos de anticorpos encontrados nos soros baixa. Observou-se que o BoHV-1 está presente em todos os rebanhos estudados com titulação moderada, com presença de alguns títulos individuais altos entre animais e com GMT alta em um dos rebanhos. Mesmo havendo a reativação ou mesmo a circulação do BoHV-1 nos rebanhos, não foi observado a doença clínica, fato epidemiológico que também ocorreu com o BVDV-1. Diante dos resultados obtidos, ficou evidente a circulação das doenças nos rebanhos da agricultura familiar na região estudada, sugerindo o estudo de fatores de risco local e melhorias de políticas de educação em saúde como forma de prevenir e ou reduzir a prevalência das enfermidades.

Serologic profile of bovine Alfaherpesvirus type1 (BoHV-1) and Pestivírus A (BVDV-1) in herds of a family farming of the Sao Paulo state / Perfil sorológico do Alfaherpesvirus bovino tipo 1 (BoHV-1) e Pestivírus A (BVDV-1) em rebanhos da agricultura familiar no estado de São Paulo

Serum samples from 719 dairy cattle of reproductive age, from 47 farms in a settlement in the municipality of Andradina, São Paulo, were analyzed for the presence of antibodies against the Nebraska strain of BoHV-1 and Singer type 1 of BVDV-1, using the virus neutralization technique (VN). Regarding BoHV-1, 72.0% of the samples analyzed (518/719) were positive, with a geometric mean of antibody titers of 318. For BVDV-1, 44.8% of the samples were reactive, only one farm had no reactive animals, and the majority of antibody titers found in the animals' sera were low. The results of this study revealed that BoHV-1 was present in all of the studied herds, with moderate titration in the majority of cases, with the presence of some high individual titers among the tested animals. Also, even with the reactivation or circulation of BoHV-1 in herds, the clinical disease was not observed, an epidemiological finding that also applied to BVDV-1. In view of the results obtained, the circulation of diseases in family farm herds in the studied region was evident, suggesting the need to study local risk factors and improve health education policies as a way to prevent or reduce the prevalence of these diseases.(AU)

Coletou-se 719 amostras de soro sanguíneo de bovinos em idade reprodutiva, de 47 propriedades de um assentamento no município de Andradina-SP. As amostras foram analisadas para presença de anticorpos contra ambos os vírus estudados, pela técnica de virusneutralização, utilizando-se a estirpe Nebraska para o BoHV-1 e Singer tipo 1 para o BVDV-1. Em relação ao BoHV-1, 72,0% (518/719) das amostras foram positivas, sendo 318 a média geométrica dos títulos de anticorpos (GMT).Para o BVDV-1, 44,8% das amostras foram reagentes; apenas uma propriedade não teve animais reagentes, sendo a maioria dos títulos de anticorpos encontrados nos soros baixa. Observou-se que o BoHV-1 está presente em todos os rebanhos estudados com titulação moderada, com presença de alguns títulos individuais altos entre animais e com GMT alta em um dos rebanhos. Mesmo havendo a reativação ou mesmo a circulação do BoHV-1 nos rebanhos, não foi observado a doença clínica, fato epidemiológico que também ocorreu com o BVDV-1. Diante dos resultados obtidos, ficou evidente a circulação das doenças nos rebanhos da agricultura familiar na região estudada, sugerindo o estudo de fatores de risco local e melhorias de políticas de educação em saúde como forma de prevenir e ou reduzir a prevalência das enfermidades.(AU)

Economic impacts of Bovine alphaherpesvirus 1 infection in Brazil: Meta-analysis based on epidemiological indicators / Impactos econômicos da infecção por Bovine alphaherpesvirus 1 no Brasil: Metanálise a partir de indicadores epidemiológicos

This study aimed to conduct a systematic review to estimate the economic impact of Bovine alphaherpesvirus 1 (BoAHV1) infection in Brazil using epidemiological indicators through a meta-analysis. Specific descriptors were used to retrieve studies from the Scopus, PubMed, Biblioteca Digital Brasileira de Teses e Dissertações, and Catálogo de Teses e Dissertações da Capes databases, selecting those that met the inclusion criteria established between the years 2000 and 2020. The selected studies were subjected to descriptive statistical analysis using prevalence data as the primary outcome with a 95% confidence interval (CI) with a meta-analysis of random effects and measures of heterogeneity, significance, magnitude of the effect, and measurement of publication bias. Abortion costs and estimates were calculated based on the prevalence of BoAHV1 infection in Brazil and the characteristics of the agent as viral subtypes that cause abortion, period of occurrence, average pregnancy rate, and morbidity applied to susceptible animals and animal replacement values. The results were obtained from 49 studies included for meta-analysis where a prevalence of BoAHV1 infection of 54.12% (95% CI: 49.07% - 59.26%) in the bovine population and 88.53% (95% CI: 82.97%­92.43%) was present. From the structured formula, it is estimated that 258,779 bovine abortions occur, which causes a total loss, based only on the occurrence of abortion, of US $ 48,402,244.00 to the country. It is noteworthy that because of the losses caused, strict control and eradication measures need to be implemented based on the elaboration of normative instruction that includes health education measures, vaccination, tests for traffic, and animal trade so that BoAHV1 infections do not continue to negatively impact national producers economically, productively, and socially.(AU)

Objetivou-se com o presente estudo realizar uma revisão sistemática para estimar os impactos econômicos da infecção por Alfaherpesvirus Bovino 1 no Brasil a partir dos indicadores epidemiológicos por meio de uma metanálise. Foram usados descritores específicos para a recuperação de estudos a partir das bases Scopus, Pubmed, Biblioteca Digital Brasileira de Teses e Dissertações e do Catálogo de Teses e Dissertações da Capes, selecionando-se aqueles que se enquadraram nos critérios de inclusão estabelecidos entre os anos 2000 e 2020. Os estudos selecionados foram submetidos à análise estatística descritiva utilizando-se os dados de prevalência como desfecho primário com intervalo de confiança de 95%, sendo realizado metanálise de efeito randômico e avaliadas as medidas de heterogeneidade, significância, magnitude do efeito e aferição do viés de publicação. Os custos e estimativas de aborto foram calculados com base na prevalência encontrada para BoAHV1 no Brasil e as características do agente como subtipos virais que provocam o aborto, período de ocorrência, taxa média de prenhez e morbidade aplicados aos animais suscetíveis e aos valores de reposição animal. Os resultados foram obtidos a partir de 49 estudos incluídos para metanálise, onde se verificou uma prevalência de BoAHV1 de 54,12% (IC95%: 49,07% ­ 59,26%) na população bovina e 88,53% (IC95%: 82,97% ­ 92,43%) para os rebanhos. A partir da fórmula estruturada, se estima que ocorram 258.779 abortos bovinos, que totalizam um prejuízo, apenas baseado na ocorrência do aborto, de US$ 48.402.244,00 ao país. Destaca-se que em virtude dos prejuízos ocasionados, medidas de controle e erradicação mais rigorosas precisam ser implementadas a partir da elaboração de uma instrução normativa que contemple medidas de educação sanitária, vacinação, realização de exames para o trânsito e comércio de animais para que as infecções pelo BoAHV1 não continuem a impactar negativamente os produtores nacionais de forma econômica, produtiva e socialmente.(AU)

Meningoencephalitis caused by Bovine alphaherpesvirus 5 in Pernambuco, Brazil / [Meningoencefalite causada pelo Bovine alphaherpesvirus 5 em Pernambuco, Brasil]

Objetivou-se descrever a ocorrência do Bovine alphaherpesvirus 5 (BoHV5) como causa de meningoencefalite não supurativa em bovinos do estado de Pernambuco, Brasil. Para tanto, 32 amostras de sistema nervoso embebidas em parafina foram obtidas de animais acometidos por doenças neurológicas atendidos na Clínica de Bovinos de Garanhuns da Universidade Federal Rural de Pernambuco (CBG-UFRPE), entre 2012 e 2016. As amostras foram analisadas quanto à presença do gene da glicoproteína C do BoHV5 por reação em cadeia da polimerase (PCR). Dois animais (6,25%) tiveram resultado positivo à PCR, e sua análise de sequenciamento indicou 100% de similaridade para o BoHV5. Os resultados histopatológicos desses dois animais revelaram lesões multifocais de meningoencefalite não supurativa associada à polioencefalomalácia, presença de corpúsculos de inclusão basofílicos, infiltração de células de Gitter e presença de manguitos perivasculares. A PCR se mostra uma importante ferramenta para diferenciação das infecções por BoHV5 de outras enfermidades neurológicas de bovinos, especialmente a raiva.(AU)

Pathogenesis of Bovine alphaherpesvirus 2 in calves following different routes of inoculation / Patogênese do alfaherpesvírus bovino 2 em bezerros inoculados por diferentes vias

Bovine alphaherpesvirus 2 (BoHV-2) is the agent of herpetic mammilitis (BHM), a cutaneous and self-limiting disease affecting the udder and teats of cows. The pathogenesis of BoHV-2 is pourly understood, hampering the development of therapeutic drugs, vaccines and other control measures. This study investigated the pathogenesis of BoHV-2 in calves after inoculation through different routes. Three- to four-months seronegative calves were inoculated with BoHV-2 (107TCID50.mL-1) intramuscular (IM, n=4), intravenous (IV, n=4) or transdermal (TD) after mild scarification (n=4) and submitted to virological, clinical and serological monitoring. Calves inoculated by the IV route presented as light increase in body temperature between days 6 to 9 post-inoculation (pi). Virus inoculation by the TD route resulted in mild inflammatory lesions at the sites of inoculation, characterized by hyperemia, small vesicles, mild exudation and scab formation, between days 2 and 8pi. Virus or viral DNA was detected by PCR in the crusts/swabs collected from lesions of 3 out of 4 animals inoculated TD from day 2 to 8pi. Viremia was detected in 3/4 animals of the IM group (from day 4 to 8pi); in 2/4 animals of the IV group (days 6 and 8pi) but not in the TD group. Calves from all inoculated groups seroconverted to BoHV-2 in titers from 4 to 64, as indicated by virus-neutralizing (VN) assays performed in sera collected at day 15pi. Administration of dexamethasone (Dex) to the inoculated calves at day 48pi, did not result in virus reactivation as indicated by lack of virus detection in the blood and/or in inoculation sites and no increase in VN antibody titers. These results demonstrated that BoHV-2 was able to replicate efficiently in calves following different routes of exposure, produced viremia after IM and IV inoculation and was not reactivated by Dex treatment.(AU)

O alfaherpesvírus bovino 2 (BoHV-2) é um agente etiológico da mamilite herpética (BHM), uma doença cutânea e autolimitante do úbere e tetos de vacas. Pouco se sabe sobre a patogênese do BoHV-2, dificultando o desenvolvimento de medicamentos terapêuticos e vacinas. Este estudo investigou a patogênese do BoHV-2 em bezerros após a inoculação por diferentes vias. Bezerros soronegativos de três a quatro meses foram inoculados com BoHV-2 (107TCID50.mL-1) por via intramuscular (IM, n=4), por via intravenosa (IV, n=4) ou transdérmica (TD, n=4) após escarificação leve e submetidos a monitoramento virológico, clínico e sorológico. Os bezerros inoculados pela via IV apresentaram aumento leve da temperatura corporal entre os dias 6 a 9 pós-inoculação (pi). A inoculação do vírus pela via TD resultou em lesões inflamatórias leves nos locais de inoculação, caracterizadas por hiperemia, pequenas vesículas, exsudação leve e formação de crostas, entre os dias 2 e 8pi. O vírus ou DNA viral foi detectado por PCR nas crostas/swabs coletados de lesões de 3 de 4 animais inoculados TD do dia 2 ao 8pi. Viremia foi detectada em 3/4 dos animais do grupo IM (do dia 4 ao 8pi); em 2/4 animais do grupo IV (dias 6 e 8pi), mas não no grupo TD. Bezerros de todos os grupos inoculados soroconverteram o BoHV-2 em títulos de 4 a 64, conforme indicado por ensaios de vírus-neutralização (VN) realizados em soro coletado no dia 15pi. Administração de dexametasona (Dex) nos bezerros inoculados no dia 48pi, não resultou em reativação do vírus, como indicado pela falta de detecção de vírus no sangue e/ou nos locais de inoculação e pela ausência de aumento nos títulos de anticorpos. Estes resultados demonstraram que o BoHV-2 foi capaz de replicar eficientemente em bezerros seguindo diferentes vias de inoculação, produziu viremia após a inoculação IM e IV e não foi reativado pelo tratamento com Dex.(AU)

Pathogenesis of Bovine alphaherpesvirus 2 in calves following different routes of inoculation / Patogênese do alfaherpesvírus bovino 2 em bezerros inoculados por diferentes vias

Bovine alphaherpesvirus 2 (BoHV-2) is the agent of herpetic mammilitis (BHM), a cutaneous and self-limiting disease affecting the udder and teats of cows. The pathogenesis of BoHV-2 is pourly understood, hampering the development of therapeutic drugs, vaccines and other control measures. This study investigated the pathogenesis of BoHV-2 in calves after inoculation through different routes. Three- to four-months seronegative calves were inoculated with BoHV-2 (107TCID50.mL-1) intramuscular (IM, n=4), intravenous (IV, n=4) or transdermal (TD) after mild scarification (n=4) and submitted to virological, clinical and serological monitoring. Calves inoculated by the IV route presented as light increase in body temperature between days 6 to 9 post-inoculation (pi). Virus inoculation by the TD route resulted in mild inflammatory lesions at the sites of inoculation, characterized by hyperemia, small vesicles, mild exudation and scab formation, between days 2 and 8pi. Virus or viral DNA was detected by PCR in the crusts/swabs collected from lesions of 3 out of 4 animals inoculated TD from day 2 to 8pi. Viremia was detected in 3/4 animals of the IM group (from day 4 to 8pi); in 2/4 animals of the IV group (days 6 and 8pi) but not in the TD group. Calves from all inoculated groups seroconverted to BoHV-2 in titers from 4 to 64, as indicated by virus-neutralizing (VN) assays performed in sera collected at day 15pi. Administration of dexamethasone (Dex) to the inoculated calves at day 48pi, did not result in virus reactivation as indicated by lack of virus detection in the blood and/or in inoculation sites and no increase in VN antibody titers. These results demonstrated that BoHV-2 was able to replicate efficiently in calves following different routes of exposure, produced viremia after IM and IV inoculation and was not reactivated by Dex treatment.(AU)

O alfaherpesvírus bovino 2 (BoHV-2) é um agente etiológico da mamilite herpética (BHM), uma doença cutânea e autolimitante do úbere e tetos de vacas. Pouco se sabe sobre a patogênese do BoHV-2, dificultando o desenvolvimento de medicamentos terapêuticos e vacinas. Este estudo investigou a patogênese do BoHV-2 em bezerros após a inoculação por diferentes vias. Bezerros soronegativos de três a quatro meses foram inoculados com BoHV-2 (107TCID50.mL-1) por via intramuscular (IM, n=4), por via intravenosa (IV, n=4) ou transdérmica (TD, n=4) após escarificação leve e submetidos a monitoramento virológico, clínico e sorológico. Os bezerros inoculados pela via IV apresentaram aumento leve da temperatura corporal entre os dias 6 a 9 pós-inoculação (pi). A inoculação do vírus pela via TD resultou em lesões inflamatórias leves nos locais de inoculação, caracterizadas por hiperemia, pequenas vesículas, exsudação leve e formação de crostas, entre os dias 2 e 8pi. O vírus ou DNA viral foi detectado por PCR nas crostas/swabs coletados de lesões de 3 de 4 animais inoculados TD do dia 2 ao 8pi. Viremia foi detectada em 3/4 dos animais do grupo IM (do dia 4 ao 8pi); em 2/4 animais do grupo IV (dias 6 e 8pi), mas não no grupo TD. Bezerros de todos os grupos inoculados soroconverteram o BoHV-2 em títulos de 4 a 64, conforme indicado por ensaios de vírus-neutralização (VN) realizados em soro coletado no dia 15pi. Administração de dexametasona (Dex) nos bezerros inoculados no dia 48pi, não resultou em reativação do vírus, como indicado pela falta de detecção de vírus no sangue e/ou nos locais de inoculação e pela ausência de aumento nos títulos de anticorpos. Estes resultados demonstraram que o BoHV-2 foi capaz de replicar eficientemente em bezerros seguindo diferentes vias de inoculação, produziu viremia após a inoculação IM e IV e não foi reativado pelo tratamento com Dex.(AU)

Immunogenicity in sheep of Uruguayan commercial vaccines against bovine alphaherpesvirus 1, 5 and bovine pestiviruses / Imunogenicidade em ovelhas de vacinas comerciais Uruguaias para alfaherpesvírus bovino 1, 5 e pestivírus de bovinos

The serological responses induced by four commercial inactivated Uruguayan vaccines against bovine alphaherpesviruses (BoHV)-1 and -5 and bovine pestiviruses (BVDV-1, BVDV-2, and HoBiPeV) were evaluated in sheep. Thirty-seven sheep were immunized twice (day 0 and 25) and their serum samples were tested at different intervals (days 0, 25, 40, 60, and 90) post-vaccination (PV). Among the four vaccines tested, only one (G4) could induce the production of moderate neutralizing antibody titers against BoHV-1 and -5 and BVDV-1 and -2. The G3 vaccine showed a neutralizing serological response against the bovine alphaherpesviruses only. The G1 and G2 vaccines produced extremely low levels of antibodies in a few vaccinated animals only (geometric mean titers (GMT) 2.2). Similar levels of immunological responses were induced by the G4 vaccine against BoHV-1 and -5, and titers of neutralizing antibodies induced in approximately 70% of the animals are known to confer protection (GMT > 8). For bovine pestiviruses, the vaccine stimulated response of G4 against BVDV-2 was higher compared to that against BVDV-1, and extremely low for HoBiPeV. The peak of neutralizing antibodies to BoHV-1 and BVDV-1 was observed on days 40 and 60 PV, respectively. Thereafter, a remarkably decrease in neutralizing antibody response was observed at day 90 PV. These results demonstrated that tested commercial Uruguayan vaccines did not induce a serological response of adequate magnitude and duration. Thus, it is important to periodically review formulations and compositions of commercial vaccines against bovine alphaherpesviruses and pestiviruses.(AU)

A resposta sorológica induzida por quatro vacinas comerciais uruguaias inativadas contra os alfaherpesvírus bovinos (BoHV-1 e -5) e pestivírus de bovinos (BVDV-1, BVDV-2 e HoBiPeV) foi avaliada em ovinos. Os animais foram imunizados duas vezes (dia 0 e dia 25) e o soro testado em diferentes intervalos (dias 0, 25, 40, 60 e 90) após a vacinação (PV). Dentre as quatro vacinas testadas, apenas uma (G4) apresentou títulos de anticorpos neutralizantes moderados para os BoHV-1 e -5, BVDV-1 e 2. A vacina G3 apresentou resposta somente para alfaherpesvírus bovinos. As vacinas G1 e G2 estimularam resposta somente em alguns animais vacinados. Para a vacina G4, observou-se que a resposta imunológica frente ao BoHV-1 e 5 foi semelhante e pelo menos 70% dos animais apresentaram níveis protetivos de anticorpos neutralizantes. Para os pestivírus bovinos, a vacina G4 estimulou resposta para o BVDV-2 mais elevada quando comparada com o BVDV-1, e quase que indetectável para HoBiPeV. O pico de anticorpos neutralizantes para o BoHV-1 foi observado no dia 40 PV e no dia 60 PV para o BVDV-1. Após isso, observou-se um decréscimo considerável na resposta de anticorpos neutralizantes. Os resultados demonstraram que vacinas comerciais uruguaias testadas não induziram resposta sorológica de magnitude e duração adequadas. Assim, ressalva-se a importância de rever periodicamente a formulação e composição das vacinas comerciais para alfaherpesvírus e pestivírus bovinos.(AU)

Tracheal stenosis in a Holstein cow / Estenose de traqueia em uma vaca Holandesa

Tracheal stenosis, also known as Honker syndrome, is characterized by tracheal edema and hemorrhage, leading to partial obstruction of the lumen; therefore, death. Its etiology is not yet well elucidated. A 3-year-old Holstein cow, with a history of dyspnea, and a large amount of reddish foam flowing from the mouth and nose, had died after 10 minutes of clinical signs. Macroscopic examination revealed focally extensive hemorrhage and clot organization in tracheal mucosa extending to the submucosa, surrounded by well-differentiated fibrous connective tissue. In adjacent mucosa was observed moderate multifocal inflammatory infiltrate composed by lymphocytes and plasma cells, as well as moderate squamous cell metaplasia. The bacterial culture showed growth of contaminant and environmental bacteria and the RT-PCR to detect Herpesvirus 1 (BoHV-1) and 5 (BoHV-5) was negative. To the authors knowledge, this is the first report of tracheal stenosis in South America, as well as the first report of this condition described in a Holstein cow.(AU)

A estenose traqueal, também conhecida como síndrome de Honker, caracteriza-se pela formação edema e hemorragia na traqueia, causando obstrução parcial do lúmen e consequentemente morte dos animais. Sua etiologia ainda não está bem esclarecida. Descreve-se um caso de um bovino, fêmea de aptidão leiteira, três anos de idade com manifestação clínica de dispneia, e secreção de grande quantidade de espuma avermelhada pela boca e narina, e óbito após 10 minutos de evolução do quadro. No exame macroscópico, observou-se em traqueia área focalmente extensa de coágulo circundado por tecido conjuntivo na região dorsal, em áreas adjacentes havia espessamento da mucosa causado por edema e tecido conjuntivo. No exame microscópico observou-se em traqueia, hemorragia e coágulo em organização na submucosa estendendo-se para a mucosa, circundada por tecido conjuntivo fibroso bem diferenciado. Em mucosa adjacente, observou-se infiltrado inflamatório multifocal, moderado de linfócitos e plasmócitos e metaplasia escamosa do epitélio respiratório, multifocal moderada. Verificou-se no cultivo bacteriano que houve crescimento misto abundante somente de bactérias contaminantes e bactérias ambientais. Além disso, a técnica de RT-PCR para detecção Herpesvírus tipo 1 (BoHV-1) e 5 (BoHV-5) resultou negativa. Este foi o primeiro relato ao conhecimento dos autores, de estenose traqueal na América do Sul, bem como o primeiro descrito em bovino de aptidão leiteira.(AU)

Soroprevalence of bovine alphaherpesvirus type 1 (BoHV-1) and risk factors associated with dairy properties of the municipality of Senador Guiomard, Acre, Brazil / Soroprevalência de alfaherpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) e fatores de risco associados em propriedades leiteiras do município de Senador Guiomard, Acre, Brasil

Bovine alphaherpesvirus type 1 (BoHV-1) is the etiological agent responsible for serious infections that compromise the respiratory and genital tracts of affected cattle. In order to estimate the seroprevalence of BoHV-1 and to identify the associated risk factors in dairy farms in the city of Senador Guiomard, Acre, Brazil, the present study was carried out through the analysis of 180 blood serum samples submitted to the screening of anti-BoHV-1 by the virus neutralization test (VN) and by means of the evaluation of the epidemiological questionnaire applied in the eight investigated properties. The prevalence of seropositivity for BoHV-1 was 61.1%, ranging from 43.3 to 86.2% among the analyzed properties. The variable absence of veterinary assistance showed statistically significant association (odds ratio ­ OR = 2.10; p < 0.001) with alphaherpesvirus infection. The results demonstrate that the frequency of BoHV-1 is high and needs to be controlled through prophylactic and health management measures.(AU)

O alfaherpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) é o agente etiológico responsável por graves infecções que comprometem os tratos respiratório e genital dos bovinos acometidos. Com o objetivo de estimar a soroprevalência de BoHV-1 e identificar os fatores de risco associados em propriedades leiteiras do município de Senador Guiomard, Acre, foi realizado o presente estudo, por meio da análise de 180 amostras de soro sanguíneo submetidas à pesquisa de anticorpos anti-BoHV-1 pelo teste de vírus neutralização (VN) e por meio da avaliação do questionário epidemiológico aplicado nas oito propriedades investigadas. A prevalência de soropositividade para BoHV-1 foi de 61,1% variando de 43,3 a 86,2% entre as propriedades analisadas. A variável ausência de assistência veterinária apresentou associação estatisticamente significativa (odds ratio ­ OR = 2,10; p < 0,001) com a infecção pelo alfaherpesvírus. Os resultados demonstram que a frequência de BoHV-1 é alta e precisa ser controlada através de medidas profiláticas e de manejo sanitário.(AU)

Soroprevalence of bovine alphaherpesvirus type 1 (BoHV-1) and risk factors associated with dairy properties of the municipality of Senador Guiomard, Acre, Brazil / Soroprevalência de alfaherpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) e fatores de risco associados em propriedades leiteiras do município de Senador Guiomard, Acre, Brasil

Bovine alphaherpesvirus type 1 (BoHV-1) is the etiological agent responsible for serious infections that compromise the respiratory and genital tracts of affected cattle. In order to estimate the seroprevalence of BoHV-1 and to identify the associated risk factors in dairy farms in the city of Senador Guiomard, Acre, Brazil, the present study was carried out through the analysis of 180 blood serum samples submitted to the screening of anti-BoHV-1 by the virus neutralization test (VN) and by means of the evaluation of the epidemiological questionnaire applied in the eight investigated properties. The prevalence of seropositivity for BoHV-1 was 61.1%, ranging from 43.3 to 86.2% among the analyzed properties. The variable absence of veterinary assistance showed statistically significant association (odds ratio ­ OR = 2.10; p < 0.001) with alphaherpesvirus infection. The results demonstrate that the frequency of BoHV-1 is high and needs to be controlled through prophylactic and health management measures.(AU)

O alfaherpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) é o agente etiológico responsável por graves infecções que comprometem os tratos respiratório e genital dos bovinos acometidos. Com o objetivo de estimar a soroprevalência de BoHV-1 e identificar os fatores de risco associados em propriedades leiteiras do município de Senador Guiomard, Acre, foi realizado o presente estudo, por meio da análise de 180 amostras de soro sanguíneo submetidas à pesquisa de anticorpos anti-BoHV-1 pelo teste de vírus neutralização (VN) e por meio da avaliação do questionário epidemiológico aplicado nas oito propriedades investigadas. A prevalência de soropositividade para BoHV-1 foi de 61,1% variando de 43,3 a 86,2% entre as propriedades analisadas. A variável ausência de assistência veterinária apresentou associação estatisticamente significativa (odds ratio ­ OR = 2,10; p < 0,001) com a infecção pelo alfaherpesvírus. Os resultados demonstram que a frequência de BoHV-1 é alta e precisa ser controlada através de medidas profiláticas e de manejo sanitário.(AU)

Bovine alphaherpesvirus 1 and 5 in semen from bulls presenting genital lesions under field conditions in Brazil / Alfaherpesvírus bovino 1 e 5 em sêmen de touros com lesões genitais, sob condições a campo no Brasil

Bovine alphaherpesviruses 1 and 5 (BoHV-1/5) are main pathogens of respiratory, reproductive and neurological diseases in cattle. The aim of this study was to investigate the frequency of neutralizing antibodies against BoHV-1/5 in serum samples and to detect viral DNA in semen of bulls from beef cattle farms located in RS. A total of 372 serum and semen sample from bulls were collected in eighteen farms. Serum samples were submitted to virus neutralization (VN) assay, while semen samples were used to detect BoHV-1 and BoHV-5 DNA by PCR. VN results showed that BoHV-1/5 antibodies were detected in bulls of 66.7% (12/18) of the farms, 295 (79.5%) BoHV positive bulls, 287 for BoHV-1 and 234 for BoHV-; at 43 vaccinated bulls 72.1% (31/43) showing serology negative. BoHV-1/5 DNA was detected in the semen of three bulls; one of the them presenting BoHV-1, one out three presenting BoHV-5 and one BoHV-1/5.co-infection All BoHV DNA positive samples came from animals presenting posthitis and other genital lesions at sampling. Results showed a high seroprevalence of BoHV-1/5 antibodies in bulls as well as strong evidence that these viruses are actively circulating in the cattle farms. A remarkable finding is that in the presence of clinically evident lesions in the genital tract, both BoHV-1 and 5 may found in semen.(AU)

Os alfa-herpesvírus bovinos 1 e 5 (BoHV-1/5) são importantes patógenos de doença respiratória, reprodutiva e neurológica em bovinos. O objetivo deste estudo foi investigar a frequência de detecção de anticorpos neutralizantes contra BoHV-1/5 em amostra de soro e detectar DNA viral em sêmen de touros do rebanho bovino localizado nas fazendas de gado de corte do RS. Um total de 371 amostras de soro e sêmen foi coletado de touros em 18 fazendas, 325 das quais são provenientes de touros não vacinados e 43 de vacinados. Amostras de soro foram submetidas à técnica de vírus-neutralização (VN), enquanto as amostras de sêmen foram submetidas à extração de DNA e posterior PCR (polymerase chain reaction) para detecção de BoHV-1 e 5. Os resultados da VN demostraram que anticorpos contra BoHV-1/5 foram detectados nos touros não vacinados em 66,7% (12/18) das fazendas, 295 (79,5%) touros mostraram-se positivos para BoHV, 287 para BoHV-1 e 234 para BoHV-5; e para 43 touros vacinados, observou-se que 72,1% (31/43) foram negativos na sorologia DNA de BoHV-1/5, detectado no sêmen de três touros: um deles apresentava BoHV-1, outro BoHV-5 e em um foi detectada coinfecção por BoHV-1/5. Todas as amostras positivas para o DNA viral eram provenientes de animais que apresentavam lesões de postite e outras lesões genitais. Esses resultados demonstram que há uma alta soroprevalência de BoHV-1/5 em touros, bem como uma forte evidência de que esses vírus estão circulando ativamente no rebanho bovino dessas fazendas. Um achado interessante foi a detecção de BoHV-1 e 5 em touros com lesões na região do trato genital.(AU)

Bovine alphaherpesvirus 1 and 5 in semen from bulls presenting genital lesions under field conditions in Brazil / Alfaherpesvírus bovino 1 e 5 em sêmen de touros com lesões genitais, sob condições a campo no Brasil

Bovine alphaherpesviruses 1 and 5 (BoHV-1/5) are main pathogens of respiratory, reproductive and neurological diseases in cattle. The aim of this study was to investigate the frequency of neutralizing antibodies against BoHV-1/5 in serum samples and to detect viral DNA in semen of bulls from beef cattle farms located in RS. A total of 372 serum and semen sample from bulls were collected in eighteen farms. Serum samples were submitted to virus neutralization (VN) assay, while semen samples were used to detect BoHV-1 and BoHV-5 DNA by PCR. VN results showed that BoHV-1/5 antibodies were detected in bulls of 66.7% (12/18) of the farms, 295 (79.5%) BoHV positive bulls, 287 for BoHV-1 and 234 for BoHV-; at 43 vaccinated bulls 72.1% (31/43) showing serology negative. BoHV-1/5 DNA was detected in the semen of three bulls; one of the them presenting BoHV-1, one out three presenting BoHV-5 and one BoHV-1/5.co-infection All BoHV DNA positive samples came from animals presenting posthitis and other genital lesions at sampling. Results showed a high seroprevalence of BoHV-1/5 antibodies in bulls as well as strong evidence that these viruses are actively circulating in the cattle farms. A remarkable finding is that in the presence of clinically evident lesions in the genital tract, both BoHV-1 and 5 may found in semen.(AU)

Os alfa-herpesvírus bovinos 1 e 5 (BoHV-1/5) são importantes patógenos de doença respiratória, reprodutiva e neurológica em bovinos. O objetivo deste estudo foi investigar a frequência de detecção de anticorpos neutralizantes contra BoHV-1/5 em amostra de soro e detectar DNA viral em sêmen de touros do rebanho bovino localizado nas fazendas de gado de corte do RS. Um total de 371 amostras de soro e sêmen foi coletado de touros em 18 fazendas, 325 das quais são provenientes de touros não vacinados e 43 de vacinados. Amostras de soro foram submetidas à técnica de vírus-neutralização (VN), enquanto as amostras de sêmen foram submetidas à extração de DNA e posterior PCR (polymerase chain reaction) para detecção de BoHV-1 e 5. Os resultados da VN demostraram que anticorpos contra BoHV-1/5 foram detectados nos touros não vacinados em 66,7% (12/18) das fazendas, 295 (79,5%) touros mostraram-se positivos para BoHV, 287 para BoHV-1 e 234 para BoHV-5; e para 43 touros vacinados, observou-se que 72,1% (31/43) foram negativos na sorologia DNA de BoHV-1/5, detectado no sêmen de três touros: um deles apresentava BoHV-1, outro BoHV-5 e em um foi detectada coinfecção por BoHV-1/5. Todas as amostras positivas para o DNA viral eram provenientes de animais que apresentavam lesões de postite e outras lesões genitais. Esses resultados demonstram que há uma alta soroprevalência de BoHV-1/5 em touros, bem como uma forte evidência de que esses vírus estão circulando ativamente no rebanho bovino dessas fazendas. Um achado interessante foi a detecção de BoHV-1 e 5 em touros com lesões na região do trato genital.(AU)

Infecção latente pelo herpesvírus bovino tipo 1 em búfalos (Bubalus bubalis) no Rio Grande do Sul / Bovine herpesvirus type 1 latent infection in buffalo (Bubalus bubalis) in Rio Grande do Sul

Apesar dos bovinos serem considerados os hospedeiros naturais do BoHV-1, estudos sorológicos têm sugerido que búfalos podem ser suscetíveis ao BoHV-1 e a outros alfa-herpesvírus geneticamente relacionados. O objetivo deste estudo foi detectar a presença de DNA viral de BoHV-1 em 202 amostras de gânglios trigêmeos de búfalos, pela técnica de semi-nested PCR, para detecção de um segmento do gene codificante da glicoproteína D (gD) do BoHV-1. Além disso, 242 amostras de soro foram analisadas pela técnica de soroneutralização (SN) para a detecção de anticorpos neutralizantes contra BoHV-1, BoHV-5 e BuHV. Todas as amostras clínicas foram coletadas em um matadouro na cidade de Pelotas, RS, Brasil. O DNA de BoHV-1 foi detectado em 61 (30,1%) gânglios, e os resultados da SN demonstraram que 27,6% dos animais apresentaram anticorpos contra, pelo menos, um dos vírus testados. O sequenciamento genômico e a análise de 14 amplicons confirmaram a presença do DNA do BoHV-1 nos tecidos analisados. Em resumo, os resultados indicam que o BoHV-1 está distribuído em rebanhos bubalinos provenientes da região Sul do Brasil. Entretanto, são necessárias investigações adicionais, no sentido de elucidar o papel exato dos búfalos na epidemiologia das infecções pelo BoHV-1.(AU)

Although bovines are natural hosts for BoHV-1, serologic studies in several countries have suggested that buffaloes (Bubalus bubalis) may be susceptible to BoHV-1 and other genetically related alphaherpesvirus. This study aimed to investigate the presence of BoHV-1 DNA in trigeminal ganglia from 202 buffaloes by a semi-nested PCR to amplify partially the glycoprotein D (gD) gene of BoHV-1. Additionally, 242 serum samples were tested by serum neutralization (SN) for the detection of antibodies against BoHV-1, BoHV-5 and BuHV. All clinical samples were collected in a slaughterhouse located in Pelotas, RS, Brazil. BoHV-1 DNA was detected in 61 (30.1%) of the samples and SN revealed 27.6% of the animals with neutralizing antibodies against at least one of the tested viruses. Nucleotide sequencing of 15 amplicons followed by BLAST analysis confirmed the presence of BoHV-1 DNA in the analyzed tissues. Taken together, these data indicate that BoHV-1 infection is distributed in buffaloes in southern Brazil. However, the role of buffaloes in the BoHV-1 epidemiology needs further investigation.(AU)

Infecção latente pelo herpesvírus bovino tipo 1 em búfalos (Bubalus bubalis) no Rio Grande do Sul / Bovine herpesvirus type 1 latent infection in buffalo (Bubalus bubalis) in Rio Grande do Sul

Apesar dos bovinos serem considerados os hospedeiros naturais do BoHV-1, estudos sorológicos têm sugerido que búfalos podem ser suscetíveis ao BoHV-1 e a outros alfa-herpesvírus geneticamente relacionados. O objetivo deste estudo foi detectar a presença de DNA viral de BoHV-1 em 202 amostras de gânglios trigêmeos de búfalos, pela técnica de semi-nested PCR, para detecção de um segmento do gene codificante da glicoproteína D (gD) do BoHV-1. Além disso, 242 amostras de soro foram analisadas pela técnica de soroneutralização (SN) para a detecção de anticorpos neutralizantes contra BoHV-1, BoHV-5 e BuHV. Todas as amostras clínicas foram coletadas em um matadouro na cidade de Pelotas, RS, Brasil. O DNA de BoHV-1 foi detectado em 61 (30,1%) gânglios, e os resultados da SN demonstraram que 27,6% dos animais apresentaram anticorpos contra, pelo menos, um dos vírus testados. O sequenciamento genômico e a análise de 14 amplicons confirmaram a presença do DNA do BoHV-1 nos tecidos analisados. Em resumo, os resultados indicam que o BoHV-1 está distribuído em rebanhos bubalinos provenientes da região Sul do Brasil. Entretanto, são necessárias investigações adicionais, no sentido de elucidar o papel exato dos búfalos na epidemiologia das infecções pelo BoHV-1.(AU)

Although bovines are natural hosts for BoHV-1, serologic studies in several countries have suggested that buffaloes (Bubalus bubalis) may be susceptible to BoHV-1 and other genetically related alphaherpesvirus. This study aimed to investigate the presence of BoHV-1 DNA in trigeminal ganglia from 202 buffaloes by a semi-nested PCR to amplify partially the glycoprotein D (gD) gene of BoHV-1. Additionally, 242 serum samples were tested by serum neutralization (SN) for the detection of antibodies against BoHV-1, BoHV-5 and BuHV. All clinical samples were collected in a slaughterhouse located in Pelotas, RS, Brazil. BoHV-1 DNA was detected in 61 (30.1%) of the samples and SN revealed 27.6% of the animals with neutralizing antibodies against at least one of the tested viruses. Nucleotide sequencing of 15 amplicons followed by BLAST analysis confirmed the presence of BoHV-1 DNA in the analyzed tissues. Taken together, these data indicate that BoHV-1 infection is distributed in buffaloes in southern Brazil. However, the role of buffaloes in the BoHV-1 epidemiology needs further investigation.(AU)

Serological response against bovine herpesvirus and bovine viral diarrhea virus induced by commercial vaccines in Holstein heifers / Resposta sorológica contra herpesvírus bovino e vírus da diarreia viral bovina induzida por vacinas comerciais em novilhas Holandesas

Vaccination is a strategy to the prevention and control of reproductive diseases caused by bovine viral diarrhea virus (BVDV) and bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1), however the various compositions of commercial vaccines should be evaluated for their ability to induce protection mediated by antibodies. The objective of this research was to evaluate the production of specific neutralizing Abs against BVDV-1 and 2, and BoHV-1 induced by commercial vaccines composed by different adjuvants. Holstein heifers were vaccinated and distributed in three experimental groups: Group I (G1) was vaccinated with a commercial vaccine containing inactivated BVDV-1, BVDV-2 and BoHV-1 diluted in alum hydroxide as adjuvant (n=9); Group II (G2) was vaccinated with an product containing inactivated strains of BVDV-1, BVDV-2, BoHV-1 and BoHV-5 diluted in oil emulsion as adjuvant (n=10); Group III (G3) was vaccinated with a commercial vaccine containing inactivated BVDV-1 and BVDV-2, besides live modified thermosensitive BoHV-1, diluted in Quil A, amphigen and cholesterol (n=10); A control, non-vaccinated group (n=6) was mock vaccinated with saline. Heifers received two subcutaneous doses of 5mL of each commercial vaccine on the right side of the neck, with 21 days interval. Humoral immune response was assessed by the virus neutralization test (VN) against BVDV-1 (NADL and Singer strains), BVDV-2 (SV253 strain) and BoHV-1 (Los Angeles strain) in serum samples collected on vaccination days zero (D0), 21 (D21) and 42 (D42; 21 days after boosting). Neutralizing Abs against BVDV-1 NADL was detected only in D42, regardless of the vaccine used. Similar geometric mean titers (GMT) for BVDV-1 NADL were observed between G1 (log2=5.1) and G3 (log2=5.1). The seroconversion rate (%) was higher in G1 (78%) when compared to G2 (10%) and G3 (40%)...

A vacinação é utilizada como estratégia para a prevenção e controle das doenças reprodutivas, causadas pelos vírus da diarreia viral bovina (BVDV) e herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1), entretanto, as diversas composições de vacinas comerciais devem ser avaliadas quanto a sua eficiência protetiva mediada por anticorpos (Acs). O objetivo desta pesquisa foi avaliar a produção Acs neutralizantes específicos para cepas de BVDV-1 e 2, e BoHV-1 induzida por vacinas comerciais contendo diferentes tipos de adjuvantes. Para tal, novilhas Holandesas foram vacinadas e distribuídas em três grupos experimentais: Grupo I (G1) foi vacinado com uma vacina comercial composta por cepas inativadas de BVDV-1, BVDV-2 e BoHV-1 diluídas em hidróxido de alumínio como adjuvante (n=9); Grupo II (G2) foi vacinado com produto contendo as cepas inativadas de BVDV-1, BVDV-2, BoHV-1 e BoHV-5 em uma emulsão oleosa como adjuvante (n=10); O Grupo III (G3) foi vacinado com uma vacina comercial contendo BVDV-1 e BVDV-2 inativado, além do BoHV-1 vivo modificado e termosensivel, diluídos em adjuvante contendo Quil A, Amphigem e colesterol (n=10); O Grupo Controle não vacinado (n=6) foi inoculado com solução salina. As novilhas receberam duas doses das respectivas vacinas ou solução salina (5mL), com intervalo de 21 dias, por via subcutânea, na tábua do pescoço do lado direito. A resposta imune humoral foi avaliada pelo teste de vírus neutralização (VN) contra o BVDV-1 (cepas NADL e Singer), BVDV-2 (cepa SV253) e BoHV-1 (cepa Los Angeles) em amostras de soro coletadas nos dias (D) de vacinação zero (D0), 21 dias após 1ª dose (D21)e 42 (D42; 21 dias após A 2ª dose). Os anticorpos neutralizantes contra o BVDV-1 NADL foram detectados apenas em D42, independentemente da vacina utilizada. Os títulos médios geométricos (GMT) de anticorpos foram semelhantes entre G1 (log2=5,1) e G3 (log2=5,1). A taxa de soroconversão foi maior no G1 (78%) quando comparado ao G2 (10%) e G3 (40%)...(AU)

Spatiotemporal expression pattern of alpha, beta, and gamma genes during BoHV-5 infection / Expressão temporal de genes alfa, beta e gama durante ainfecção pelo BoHV-5

Bovine herpesvirus 5 is an alphaherpesvirus that causes nonsuppurative meningoencephalitis in cattle. This disease occurs naturally in either outbreaks or isolated cases, and exhibits low morbidity and high lethality. Although previous studies elucidated crucial aspects involved in the pathogenesis of the disease, there is a paucity of information regarding the molecular events contributing to infection and replication of BoHV-5. The objective of the present study was to determine the in vitro gene expression pattern of BoHV-5 (e.g., alpha, beta, and gamma genes) and host cells genes (GAPDH and 18S) over time utilizing different quantities of inoculated virus. Three BoHV-5 genes (bICP0, UL9, US4) and one structural bovine cell gene had their expression accessed by real-time PCR. While the expression of BoHV-5 genes increased during the course of infection, GAPDH gene expression decreased in the host cells, evidencing the effect of viral infection on the expression of bovine cell genes. The 18S ribosomal RNA (rRNA) gene was constitutively expressed throughout BoHV-5 infection. Our data clearly demonstrates that GAPDH gene should not be used as a reference gene in studies of BoHV-5 infection because it was influenced by viral infection. However, 18S rRNA was constitutively expressed and, therefore, is recommended for normalization of BoHV-5 infection studies in bovine cells. The expression of viral genes transcripts was not altered by increasing number of viral particles added to the culture. All viral genes included here demonstrated the same expression pattern over time and there was no difference in the expression of viral genes among the various time points. Our data show important differences comparing to classical studies regarding herpesvirus alpha, beta, and gamma genes expression. More research is necessary to improve our understanding about the BoHV-5 biology during infection. Studies employing next-generation sequencing (i.e., RNA-seq), using both in vitro and in vivo models, would be the next logical step to grasp the virus and host cell's transcriptome changes over the course of infection.(AU)

Herpesvirus bovino 5 é um alfaherpesvírus causador de meningoencefalite não supurativa em bovinos. Esta doença possui ocorrência natural em surtos ou casos isolados, associadas a baixa morbidade e alta letalidade. Embora estudos anteriores tenham elucidado aspectos relacionados a patogenia da doença, há uma lacuna de conhecimento relacionado aos eventos moleculares que contribuem para a infecção e replicação do BoHV-5. O objetivo do presente estudo foi determinar a expressão gênica in vitro de genes virais (i.e., alfa, beta e gama) e das células hospedeiras (GAPDH e 18S) durante a infecção considerando diferentes momentos de infecção e quantidade de vírus utilizado. Três genes do BoHV-5 (bICP0, UL9, US4), um gene estrutural (GAPDH) e um gene constitutivo (18S) da célula bovina tiveram suas expressões avaliadas por PCR quantitativa (qPCR). Enquanto os genes virais tiveram sua expressão aumentada ao longo do tempo de infecção, o gene hospedeiro teve sua expressão diminuída, demonstrando a ação do vírus na expressão gênica de células bovinas in vitro. O gene constitutivo 18S teve sua expressão mantida durante todos os momentos do experimento. Nossos resultados claramente demonstraram que o GAPDH não deve ser usado como gene de referência em estudos com infecção por BoHV-5 pois é influenciado pela infecção viral. Entretanto, o 18S rRNA foi constitutivamente expresso e pode ser recomendado para normalização em células bovinas infectadas pelo vírus. A expressão de mRNA viral não foi alterada pela quantidade de vírus usada. Todos os genes virais demonstraram o mesmo padrão de expressão ao longo do tempo de infecção. Nossos resultados trazem importantes diferenças comparando aos estudos clássicos que avaliaram a expressão de genes alfa, beta e gama. Mais estudos são necessários para aumentar o conhecimento da biologia molecular do BoHV-5. Estudo utilizando sequenciamento de última geração (i.e., RNA-seq), usando modelos in vitro e in vivo, aparentam ser o próximo passo lógico para acessar as alterações do transcriptoma do hospedeiro e viral ao longo do curso da infecção.(AU)