Neoplasias em equinos, asininos e muares

Os equinos, asininos e muares têm importante participação na economia e as neoplasias nestas espécies são importantes causas de perdas econômicas. As neoplasias em equídeos são diagnosticadas através de necropsias e biópsias, sendo o principal sistema afetado o tegumentar, principalmente em decorrência do sarcoide. No entanto é importante incluir neoplasias de outros sistemas, inclusive em órgãos internos como importantes diagnósticos diferenciais que causam debilidade e podem até levar a morte. Esta dissertação foi elaborada em dois capítulos, compostos por dois artigos originais. O primeiro a ser submetido à revista Pesquisa Veterinária Brasileira relata a frequência de tumores diagnosticados em nove sistemas primários de equídeos, descrevendo aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos. Foram diagnosticadas 186 neoplasias em 167 equídeos. O sistema mais afetado foi o tegumentar seguindo do reprodutor masculino e feminino, ocular/periocular, respiratório, digestório, hepático, nervoso e hematopoiético. A neoplasia mais diagnosticada foi o sarcoide, seguida do carcinoma de células escamosas e melanoma. Metástases ocorreram em 14 casos e os sinais clínicos foram variáveis de acordo com a localização anatômica. O segundo artigo será submetido à Journal of Equine Veterinary Science e descreve-se três casos de tumor das células da granulosa diagnosticados em éguas, abordando os aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos. As éguas apresentavam alterações comportamentais e reprodutivos como infertilidade, repetição de cio (ninfomania), comportamento de garanhão (virilidade), indiferença ao garanhão e ausência de sinais de estro. As neoplasias foram visualizados através da ultrassonografia e removidos cirurgicamente pela ovariectomia e enviados para exames histopatológicos. Macroscopicamente as massas variavam de 9 a 20 cm de diâmetro, eram firmes e bem delimitadas com superfícies lisas e ao corte observou-se múltiplas cavidades císticas circundadas por trabéculas de tecido amarelo-esbranquiçado e firmes. Microscopicamente observou-se massas multilobuladas, bem delimitadas, compostas por células dispostas em ninhos semelhantes a folículos abortados ou formando cistos, apoiadas em moderado estroma fibrocolagenoso. Pseudorosetas foram observadas. Na neoplasia da égua 2, observou-se formações semelhantes a túbulos de sertoli e células semelhantes a células de Leydig. Na imuno-histoquímica, houve marcação pela inibina e vimetina, de células da granulosa maduras e neoplásicas que compunham os ninhos e revestiam cistos. Após a cirurgia, a égua 1 não exibiu mais as alterações comportamentais, apresentou cio duas vezes, ficou prenhe e abortou. A égua 3 também ficou prenhe e pariu a termo. Não há informações referentes a éguas 2 após a cirurgia. Foi possível constatar com esta dissertação que embora a maioria das neoplasias diagnosticadas em equídeos no Laboratório de Patologia Animal do Hospital Veterinário Universitário da UFCG, envolvam órgãos relacionados ao tegumento, neoplasias que acometem órgãos internos ocorrem esporadicamente e é importante incluí-las como diagnósticos diferenciais.

Horses, donkeys and mules play an important role in the economy and neoplasms in these species are important causes of economic losses. Neoplasms in equines are diagnosed through necropsies and biopsies, with the integumentary system being the main affected system, mainly due to the sarcoid. However, it is important to include neoplasms from other systems, including internal organs as important differential diagnoses that cause debility and can even lead to death. This dissertation was elaborated in two chapters, composed by two original articles. The first to be submitted to the journal Pesquisa Veterinária Brasileira reports the frequency of tumors diagnosed in nine primary equine systems, describing epidemiological, clinical and pathological aspects. 186 neoplasms were diagnosed in 167 horses. The most affected system was the integumentary, followed by the male and female, ocular/periocular, respiratory, digestive, hepatic, nervous and hematopoietic systems. The most diagnosed neoplasm was sarcoid, followed by squamous cell carcinoma and melanoma. Metastases occurred in 14 cases and clinical signs varied according to anatomical location. The second article will be submitted to the Journal of Equine Veterinary Science and describes three cases of granulosa cell tumor diagnosed in mares, addressing the epidemiological, clinical and pathological aspects. The mares showed behavioral and reproductive changes such as infertility, repetition of heat (nymphomania), stallion behavior (virility), indifference to the stallion and absence of signs of estrus. The neoplasms were visualized through ultrasonography and surgically removed by ovariectomy and sent for histopathological exams. Macroscopically, as masses ranged from 9 to 20 cm in diameter, they were firm and well delimited with smooth surfaces and, when cut, multiple cystic cavities surrounded by firm yellow-white tissue trabeculae were observed. Microscopically, well-delimited, multilobulated masses were observed, composed of cells arranged in nests similar to aborted follicles or forming cysts, supported by a moderate fibrocollagenous stroma. Pseudorosettes were observed. In mare 2 neoplasm, formations similar to sertoli tubules and cells similar to Leydig cells were observed. In immunohistochemistry, there was inhibin and vimetin marking of mature and neoplastic granulosa cells that made up the nests and lined the cysts. After surgery, mare 1 no longer exhibited behavioral changes, presented heat twice, became pregnant and miscarried. Mare 3 also became pregnant and gave birth to term. There is no information regarding mares 2 after surgery. It was possible to verify with this dissertation that although most neoplasms diagnosed in horses in the Animal Pathology Laboratory of the University Veterinary Hospital of UFCG involve organs related to the integument, neoplasms that affect internal organs occur sporadically and it is important to include them as differential diagnoses.

Goat ovarian follicles express different levels of mRNA for inhibin-ßA subunit and activin-A stimulates secondary follicle growth in vitro

This study investigated the levels of messenger ribonucleic acids (mRNA) for inhibin-ßA subunit in goat primordial, primary and secondary follicles, as well as in cumulus-oocyte complexes (COCs) and mural granulosa / theca cells of antral follicles. The effects of activin-A (100ng mL-1) and/or follicle stimulating hormone (FSH, 50ng mL-1) on growth and expression of mRNA for activin-A and FSH receptor (FSH-R) in secondary follicles cultured for six days were evaluated. The data showed that the expression of inhibin-ßA is lower in secondary follicles than in primary follicles and is higher in large antral follicles than in small antral follicles. After culture, activin-A and/or FSH promoted growth of secondary follicles, while FSH increased the levels of mRNA for inhibin-ßA, and activin-A increased the levels of FSH-R mRNA. In conclusion, mRNA for inhibin-ßA is expressed at different levels in pre-antral and antral follicles and activin-A acts as a stimulator of the FSH-R expression in goat follicles. On its turn, the expression of inhibin-ßA is stimulated by FSH, which together with activin-A promotes secondary follicle growth in-vitro.

Este estudo investigou os níveis de ácidos ribonucleicos (RNAm) para a subunidade ßA da inibina em folículos primordiais, primários e secundários caprinos, bem como em complexos cumulus-oócitos (CCOs) e células da granulosa mural/teca de folículos antrais. Além disso, avaliaram-se os efeitos da ativina-A (100ng mL-1) e/ou hormônio folículo estimulante (FSH, 50ng mL-1) sobre o crescimento e a expressão do RNAm para inibina-ßA e receptores de FSH (FSH-R) em folículos secundários cultivados por seis dias. Os dados mostraram que a expressão de inibina-ßA é menor em folículos secundários do que em folículos primários e é maior em grandes folículos antrais que nos pequenos folículos antrais. Após o cultivo, ativina-A e/ou FSH promoveram o crescimento de folículos secundários. Enquanto o FSH aumentou os níveis de RNAm para inibina-ßA, a ativina-A aumentou os níveis de RNAm para FSH-R. Em conclusão, a inibina-ßA é expressa em diferentes níveis em folículos pré-antrais e antrais e a ativina-A atua como um estimulador da expressão de FSH-R em folículos caprinos. Por sua vez, a expressão de inibina-ßA é estimulada pelo FSH, que, juntamente com ativina, promove o crescimento de folículos secundários in vitro.

Goat ovarian follicles express different levels of mRNA for inhibin-ßA subunit and activin-A stimulates secondary follicle growth in vitro

This study investigated the levels of messenger ribonucleic acids (mRNA) for inhibin-ßA subunit in goat primordial, primary and secondary follicles, as well as in cumulus-oocyte complexes (COCs) and mural granulosa / theca cells of antral follicles. The effects of activin-A (100ng mL-1) and/or follicle stimulating hormone (FSH, 50ng mL-1) on growth and expression of mRNA for activin-A and FSH receptor (FSH-R) in secondary follicles cultured for six days were evaluated. The data showed that the expression of inhibin-ßA is lower in secondary follicles than in primary follicles and is higher in large antral follicles than in small antral follicles. After culture, activin-A and/or FSH promoted growth of secondary follicles, while FSH increased the levels of mRNA for inhibin-ßA, and activin-A increased the levels of FSH-R mRNA. In conclusion, mRNA for inhibin-ßA is expressed at different levels in pre-antral and antral follicles and activin-A acts as a stimulator of the FSH-R expression in goat follicles. On its turn, the expression of inhibin-ßA is stimulated by FSH, which together with activin-A promotes secondary follicle growth in-vitro.

Este estudo investigou os níveis de ácidos ribonucleicos (RNAm) para a subunidade ßA da inibina em folículos primordiais, primários e secundários caprinos, bem como em complexos cumulus-oócitos (CCOs) e células da granulosa mural/teca de folículos antrais. Além disso, avaliaram-se os efeitos da ativina-A (100ng mL-1) e/ou hormônio folículo estimulante (FSH, 50ng mL-1) sobre o crescimento e a expressão do RNAm para inibina-ßA e receptores de FSH (FSH-R) em folículos secundários cultivados por seis dias. Os dados mostraram que a expressão de inibina-ßA é menor em folículos secundários do que em folículos primários e é maior em grandes folículos antrais que nos pequenos folículos antrais. Após o cultivo, ativina-A e/ou FSH promoveram o crescimento de folículos secundários. Enquanto o FSH aumentou os níveis de RNAm para inibina-ßA, a ativina-A aumentou os níveis de RNAm para FSH-R. Em conclusão, a inibina-ßA é expressa em diferentes níveis em folículos pré-antrais e antrais e a ativina-A atua como um estimulador da expressão de FSH-R em folículos caprinos. Por sua vez, a expressão de inibina-ßA é estimulada pelo FSH, que, juntamente com ativina, promove o crescimento de folículos secundários in vitro.

Goat ovarian follicles express different levels of mRNA for inhibin-ßA subunit and activin-A stimulates secondary follicle growth in vitro

This study investigated the levels of messenger ribonucleic acids (mRNA) for inhibin-ßA subunit in goat primordial, primary and secondary follicles, as well as in cumulus-oocyte complexes (COCs) and mural granulosa / theca cells of antral follicles. The effects of activin-A (100ng mL-1) and/or follicle stimulating hormone (FSH, 50ng mL-1) on growth and expression of mRNA for activin-A and FSH receptor (FSH-R) in secondary follicles cultured for six days were evaluated. The data showed that the expression of inhibin-ßA is lower in secondary follicles than in primary follicles and is higher in large antral follicles than in small antral follicles. After culture, activin-A and/or FSH promoted growth of secondary follicles, while FSH increased the levels of mRNA for inhibin-ßA, and activin-A increased the levels of FSH-R mRNA. In conclusion, mRNA for inhibin-ßA is expressed at different levels in pre-antral and antral follicles and activin-A acts as a stimulator of the FSH-R expression in goat follicles. On its turn, the expression of inhibin-ßA is stimulated by FSH, which together with activin-A promotes secondary follicle growth in-vitro.

Este estudo investigou os níveis de ácidos ribonucleicos (RNAm) para a subunidade ßA da inibina em folículos primordiais, primários e secundários caprinos, bem como em complexos cumulus-oócitos (CCOs) e células da granulosa mural/teca de folículos antrais. Além disso, avaliaram-se os efeitos da ativina-A (100ng mL-1) e/ou hormônio folículo estimulante (FSH, 50ng mL-1) sobre o crescimento e a expressão do RNAm para inibina-ßA e receptores de FSH (FSH-R) em folículos secundários cultivados por seis dias. Os dados mostraram que a expressão de inibina-ßA é menor em folículos secundários do que em folículos primários e é maior em grandes folículos antrais que nos pequenos folículos antrais. Após o cultivo, ativina-A e/ou FSH promoveram o crescimento de folículos secundários. Enquanto o FSH aumentou os níveis de RNAm para inibina-ßA, a ativina-A aumentou os níveis de RNAm para FSH-R. Em conclusão, a inibina-ßA é expressa em diferentes níveis em folículos pré-antrais e antrais e a ativina-A atua como um estimulador da expressão de FSH-R em folículos caprinos. Por sua vez, a expressão de inibina-ßA é estimulada pelo FSH, que, juntamente com ativina, promove o crescimento de folículos secundários in vitro.

Estratégias e entraves na superovulação de éguas

A superovulação é uma biotécnica que traz benefícios para a reprodução equina, advindos do maior número de ovulações por ciclo. Ainda não é usada rotineiramente, e isso se deve a alguns entraves, em especial, a baixa resposta ovariana aos diferentes hormônios empregados. A presente revisão teve como objetivo abordar as principais estratégias e entraves na superovulação de éguas. Diversas substâncias já foram testadas, como: extrato de pituitária equina (EPE), hormônio folículoestimulante suíno (p-FSH), vacinas anti-inibina, gonadotrofina coriônica equina (eCG), hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH), hormônio folículo estimulante equino (e-FSH) e hormônio folículo estimulante recombinante (re-FSH) em associação com hormônio luteinizante recombinante (re-LH). Somente algumas destas substâncias mostram-se eficientes, por este motivo as pesquisasse direcionaram para protocolos que utilizam EPE, e-FSH e mais recentemente o re-FSH associado ao re-LH. Estes protocolos vêm apresentando um aumento no número de ovulações e embriões produzidos, mas barreiras como a falta de um produto comercial padronizado e o baixo número de embriões produzidos em relação à taxa de ovulação impedem a introdução desta biotécnica no manejo reprodutivo dos haras.

Folliculogenesis in ewes: estimulation and inhibition factors of follicular growth / Foliculogênese em ovelhas: fatores de estímulo e inibição do crescimento folicular

The regulatory mechanisms of females´ reproduction are crucial to the success of conventional or assisted breeding. The follicle is the functional unit of the ovary of the female mammal species, being its major functions the growth and maturation of oocytes, as well as the production of steroid hormones. Several factors act jointly on the regulation of these activities through endocrine, autocrine and pa­racrine mechanisms stimulating the mitogenic activity of quiescent oocytes and also steroidogenic activity of the theca cells and of the granulosa. Among the regulatory factors, there are some that act in a stimulant way, such as the receptor of the binding protein (c-KITL), the system of growth factors related to insulin (IGFs), the activin and follistatin complex, and the super family of growth- transforming factor (TGF-). Other agents are inhibitory, such as inhibin, the retinoblastoma protein, expressed in oocytes, as the Wilms gene (WTI). This paper aims to review the regulatory mecha¬nisms of folliculogenesis and its importance in the reproductive physiology of ewes.

Os mecanismos de regulação da reprodução de fêmeas são de impor­tância fundamental para o sucesso da reprodução convencional ou assistida. O folículo é a unidade funcional do ovário de fêmeas das espécies mamíferas, tendo como principais funções o crescimento e a maturação dos oócitos, bem como a produção de hormônios esteróides. Vários fatores agem de forma conjunta na regulação destas atividades por meio de mecanismos endócrinos, autócrinos e parácrinos, estimulando a atividade mitogênica de oócitos quiescentes e, ativi­dade esteroidogênica de células da teca e da granulosa. Entre os fatores regu­latórios existem alguns que agem de forma estimulante, tais como o receptor da proteína ligante (c-KITL), o sistema de fatores de crescimento ligados à insulina (IGFs), o complexo ativina e folistatina e a superfamília do fator transformador de crescimento- (TGF-). Outros fatores agem de forma inibitória, tais como a inibi­na, a proteína retinoblastoma, expressa em oócitos, igualmente ao gene de Wilms (WTI). No presente trabalho, objetivou-se abordar os mecanismos regulatórios da foliculogênese e sua importância na fisiologia reprodutiva de ovelhas.

A superfamília dos fatores de crescimento transformante-β e o controle da foliculogênese em mamíferos / Transforming growth factors -β superfamily members and control of folliculogenesis in mammals

A foliculogênese ovariana é um processo complexo caracterizado pela formação, crescimento e maturação folicular. Esta revisão discute a localização, os sítios de ação e as funções de fatores da família TGF-β [proteínas morfogenéticas ósseas dos tipos 2 (BMP-2), 4 (BMP-4), 6 (BMP-6), 7 (BMP-7), 15 (BMP-15), fator de diferenciação do crescimento-9 (GDF-9), ativina-A, inibina, hormônio anti-Mülleriano (AMH) e fator de crescimento transformante-ß (TGF-ß)] na regulação da foliculogênese em mamíferos. Alguns fatores, como o AMH, atuam inibindo o crscimento dos folículos primordiais e reduzindo a sensibilidadade dos folículos em crescimento ao FSH, enquanto vários outros (BMP-2, 4, 7, 15, GDF-9, ativina-A e TGF-ß) estimulam o crecimento folicular. Em geral, a foliculogênese é regulada por uma complexa interação desses fatores de crescimento com as gonadotrofinas.(AU)

Ovarian folliculogenesis is a complex process that includes follicular formation, growth and maturation. This review discuss the localization and functions of TGF-β family members [bone morphogenetic proteins 2 (BMP-2), 4 (BMP-4), 6 (BMP-6), 7 (BMP-7), 15 (BMP-15), growth and differentiation factor-9 (GDF-9), activin-A, inibin, anti-Müllerian hormony (AMH) and transforming growth factor-ß (TGF-ß)] in the regulation of ovarian folliculogenesis in mammals. Some of these factors, such as AMH, inhibit growth of primoridal follicles and reduce sensitity of growing follicles to FSH, while various others (BMP-2, 4, 7, 15, GDF-9, activina-A and TGF-ß) stimulate follicular growth. In general, folliculogenesis is regulated by a complex interaction of these factors with gonadotrophins.(AU)

A superfamília dos fatores de crescimento transformante-β e o controle da foliculogênese em mamíferos / Transforming growth factors -β superfamily members and control of folliculogenesis in mammals

A foliculogênese ovariana é um processo complexo caracterizado pela formação, crescimento e maturação folicular. Esta revisão discute a localização, os sítios de ação e as funções de fatores da família TGF-β [proteínas morfogenéticas ósseas dos tipos 2 (BMP-2), 4 (BMP-4), 6 (BMP-6), 7 (BMP-7), 15 (BMP-15), fator de diferenciação do crescimento-9 (GDF-9), ativina-A, inibina, hormônio anti-Mülleriano (AMH) e fator de crescimento transformante-ß (TGF-ß)] na regulação da foliculogênese em mamíferos. Alguns fatores, como o AMH, atuam inibindo o crscimento dos folículos primordiais e reduzindo a sensibilidadade dos folículos em crescimento ao FSH, enquanto vários outros (BMP-2, 4, 7, 15, GDF-9, ativina-A e TGF-ß) estimulam o crecimento folicular. Em geral, a foliculogênese é regulada por uma complexa interação desses fatores de crescimento com as gonadotrofinas.

Ovarian folliculogenesis is a complex process that includes follicular formation, growth and maturation. This review discuss the localization and functions of TGF-β family members [bone morphogenetic proteins 2 (BMP-2), 4 (BMP-4), 6 (BMP-6), 7 (BMP-7), 15 (BMP-15), growth and differentiation factor-9 (GDF-9), activin-A, inibin, anti-Müllerian hormony (AMH) and transforming growth factor-ß (TGF-ß)] in the regulation of ovarian folliculogenesis in mammals. Some of these factors, such as AMH, inhibit growth of primoridal follicles and reduce sensitity of growing follicles to FSH, while various others (BMP-2, 4, 7, 15, GDF-9, activina-A and TGF-ß) stimulate follicular growth. In general, folliculogenesis is regulated by a complex interaction of these factors with gonadotrophins.

Concentrações hormonais e desenvolvimento folicular de vacas leiteiras em hipertermia sazonal e aguda / Hormone concentration and follicular development in dairy cows under seasonal and acute hyperthermia

Avaliaram-se as concentrações hormonais e os parâmetros de desenvolvimento folicular de vacas leiteiras expostas ao calor sazonal e agudo. Dividiram-se os animais em quatro grupos: verão (n=5), outono (n=5), inverno com hipertermia aguda (grupo câmara climática, (CC), n=5) e inverno (n=9). Os animais foram abatidos no sétimo dia após a ovulação, e os parâmetros de desenvolvimento folicular avaliados. O líquido folicular do maior folículo foi aspirado e armazenado para posterior análise de hormônios esteróides e inibina. O número de células da granulosa vivas no verão e no outono foi 40 e 45% respectivamente, menor que no inverno (P<0,05). A concentração de estradiol (E2) no inverno foi 62% maior que no outono (P<0,05) e 34% superior ao grupo verão (P<0,06). Houve um aumento na quantidade de androstenediona no verão em relação aos grupos inverno (P<0,08) e outono (P<0,05). A concentração de inibina foi maior no inverno do que no verão e CC (P<0,05). A exposição ao calor sazonal e agudo modificou os parâmetros de desenvolvimento do folículo e as concentrações hormonais no líquido folicular, podendo explicar em parte a queda nas taxas de concepção no verão.(AU)

The present study evaluated the seasonal and acute heat stress on follicular development and steroid and inhibin concentrations in follicular fluid, in bovine dominant follicle. Cows were distributed into four treatments: summer (n=5), autumn (n=5), animals heat stressed during the winter (n=5) and winter (n=9). On day 7 of the estrous cycle, animals were slaughtered and parameters related to follicle development were evaluated. The follicular fluid (FF) was aspirated and stored for further hormonal analysis. During the summer, the number of viable granulosa cells was 40% lower than during the winter, and there was a 45% decrease in this parameter during the autumn (P<0.05). In the winter, estradiol concentration was 62% higher than during the autumn (P<0.05) and 42% higher than during the summer (P<0.06). There was an increase in androstenedione concentration in summer group, when compared to winter (P<0.08) and autumn (P<0.05) groups. Inhibin concentration was higher in winter groups than summer and winter heat stressed groups (P<0.05). Seasonal and acute heat stress altered developmental parameters in dominant follicle and hormonal concentration in follicular fluid, those effects can partially explain the decrease in conception rates during summer.(AU)

Taxa de ovulação e concentração plasmática de progesterona em fêmeas bovinas imunizadas com líquido folicular suíno

This study aimed to evaluate the effects of active immunization against swine follicular liquid in Limousin cows and heifers, based on progesterone plasma levels, estrous cycle length and ovulation rate. Two immunization procedures were performed with 15 days interval, administering an immunogenic substance containing the proteic content of 25ml of swine follicular fluid, plus 1ml aluminum hydroxide gel, subcutaneous. The ovulation was measured by rectal palpation and ultra-sonographic evaluation, seven to nine days after each estrus period. Results show that after the last immunization, the animals presented higher double ovulation incidence (41.7%). The average ovulation before and after immunization were 1.00±0.00 and 1.40±0.31 ovulations/cycle, respectively (P 0.01; chi2). The immunization method used was effective to stimulate a higher ovulation number. No differences on mean estrous cycle length and progesterone levels were observed. Physiological inhibin action may be an alternative method to induce multiple ovulations of bovines.

O presente estudo objetivou avaliar os efeitos da imunização ativa contra proteínas do líquido folicular suíno sobre a taxa de ovulação, duração do ciclo estral e concentração plasmática de progesterona em vacas e novilhas da raça Limousin. Realizaram-se duas imunizações com 15 dias de intervalo, aplicando-se um imunógeno composto do conteúdo protéico de 25ml de fluido folicular suíno adicionados de 1ml de gel de hidróxido de alumínio, via subcutânea. O número de ovulações foi mensurado por palpação retal e ultra-sonografia sete a nove dias após cada período de estro. Após a última imunização, os animais apresentaram maior incidência de ovulações duplas (41,7%). As médias de ovulações pré e pós-imunização foram 1,00+0,00 e 1,40+0,31 ovulações/ciclo, respectivamente (P 0,01;chi2). A imunização foi efetiva em aumentar o número de ovulações. Não foram observadas diferenças na duração do ciclo estral e na concentração de progesterona nos diferentes dias do ciclo. A manipulação das ações fisiológicas da inibina pode ser utilizada como alternativa para indução de ovulações múltiplas em bovinos.

Estratégias e entraves na superovulação de éguas

A superovulação é uma biotécnica que traz benefícios para a reprodução equina, advindos do maior número de ovulações por ciclo. Ainda não é usada rotineiramente, e isso se deve a alguns entraves, em especial, a baixa resposta ovariana aos diferentes hormônios empregados. A presente revisão teve como objetivo abordar as principais estratégias e entraves na superovulação de éguas. Diversas substâncias já foram testadas, como: extrato de pituitária equina (EPE), hormônio folículoestimulante suíno (p-FSH), vacinas anti-inibina, gonadotrofina coriônica equina (eCG), hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH), hormônio folículo estimulante equino (e-FSH) e hormônio folículo estimulante recombinante (re-FSH) em associação com hormônio luteinizante recombinante (re-LH). Somente algumas destas substâncias mostram-se eficientes, por este motivo as pesquisasse direcionaram para protocolos que utilizam EPE, e-FSH e mais recentemente o re-FSH associado ao re-LH. Estes protocolos vêm apresentando um aumento no número de ovulações e embriões produzidos, mas barreiras como a falta de um produto comercial padronizado e o baixo número de embriões produzidos em relação à taxa de ovulação impedem a introdução desta biotécnica no manejo reprodutivo dos haras.

Avaliação do perfil endócrino de éguas submetidas a tratamentos superovulatórios com extrato de pituitária e FSH equino purificado

Respostas superovulatórias satisfatórias têm sido reportadas em éguas com o uso do Extrato de Pituitária Eqüina (EPE) e FSH purificado eqüino (eFSH), contudo as taxas de recuperação embrionária permanecem inconsistentes. O objetivo deste estudo foi avaliar as concentrações plasmáticas de estradiol, inibina, FSH e LH em éguas superovuladas com eFSH e EPE (em doses constantes ou decrescentes): antes, durante e imediatamente após o término da administração hormonal. Foram utilizadas seis éguas as quais foram submetidas aos seguintes tratamentos: Grupo I (GI) recebeu 25mg de EPE intramuscular (I.M.), Grupo II (GII) foram tratadas com EPE (I.M.) em doses decrescentes. No Grupo IIl (GIII), o EPE foi substituído por 12,5mg de eFSH (I.M.). O Grupo IV (GIV) foi utilizado como controle. Sangue foi coletado diariamente para avaliar as concentrações hormonais por radioimunoensaio. As coletas foram iniciadas dois dias antes da primeira aplicação medicamentosa, encerrando 48horas após a última ovulação do estro. As diferenças nos níveis plasmáticos hormonais foram comparadas utilizando-se o ANOVA, sendo considerada diferença estatística quando P?0,05. O número médio de ovulações foi de 3,3; 4,8; 5,0 e 1,0 nos grupos 1 a 4, respectivamente, tendo sido maior (P<0,05) em todos os grupos superovulados em relação ao controle. As concentrações de estrógeno, inibina, FSH e LH não diferiram entre os grupos durante o período 1. No período 2, os valores de estradiol foram maiores (P<0,05) em éguas sob tratamento superovulatório com eFSH (GIII) 29,52pg/ml, os grupos I e II, apresentaram valores intermediários (GI: 16,75pg/ml, GII: 16,26pg/ml) e o GIV (7,78pg/ml) menor estatisticamente aos demais. Foi verificada uma correlação altamente positiva (R=0,615; P=0,01) entre os valores de estradiol e inibina, os quais, durante os tratamentos, foram maiores (P<0,05)...

Satisfactory superovulatory responses have been reported in mares with the use of equine pituitary extract (EPE) and purified equine FSH (eFSH), however embryo recovery rates are still inconsistent. Recent studies demonstrated that the superovulatory treatment disturbs oocyte maturation and transport. The main objective of the present study was to evaluate the plasmatic concentrations of estradiol, inhibin, FSH and LH in super ovulated mares treated with eFSH and EPE (with constant or decreasing doses): Six mares were used in a crossover experiment in four different groups: Group I mares received 25mg of EPE every twelve hours, Group II received EPE in decreasing doses and Group IlI mares received 12.5mg of eFSH (IM). Group IV served as control. Embryo flushes were performed 8 days pos ovulation. Blood was collected daily to evaluate hormonal concentrations through radioimuneassay, starting two days before the first administration, until 48 hours post-ovulation. Mean and daily hormonal concentrations of estradiol, inhibin, FSH and LH were evaluated. Hormonal concentrations were submitted to statistical analysis using ANOVA. Significance levels were set as P<0.05. Mean number of ovulations was 3.3; 4.8; 5.0 and 1.0 in groups 1 to 4, respectively, being higher (P<0.05) in all super ovulated groups, when compared to control. Concentrations of estrogen, inhibin, FSH and LH did not differ between groups during the first period. In period 2, estradiol levels were higher (P<0.05) in mares with superovulatory treatment eFSH (GIII) 29.52pg/ml, the groups GI and GII (GI: 16.75pg/ml, GII: 16.26pg/ml) values intermediary, and GIV (7.78pg/ml) levels lower. A positive correlation between estradiol levels and number of follicles ?30mm (R=0.917; P<0.05), recovered embryos (R=0.945; P<0.05) and ovulations (R=0.75; P<0.05) was identified in super ovulated mares. A positive correlation (R=0.615; P=0.01) between estradiol and inhibin concentrations

Efeito da pré-estimulação ovariana sobre características de oócitos após punção folicular em bovinos / Effect of ovarian pre-stimulation on the ultrasound-guided follicular puncture

Avaliaram-se os efeitos da pré-estimulação ovariana com FSH e da imunização ativa contra inibina suína sobre o número e classificação morfológica de oócitos recuperados por punção folicular. Catorze vacas da raça Gir, pluríparas e não-lactantes, foram distribuídas em: TI - submetidas a pré-estimulação com 250 UI de FSH (n=4), TII - submetidas a imunização ativa contra inibina suína (n=4) e TIII - não tratadas (n=6; controle). Todos os animais tiveram seus folículos com diâmetro superior a três milímetros aspirados uma vez por semana, durante 10 semanas consecutivas. O TI apresentou aumento na população folicular total (P<0,05) e no número de folículos puncionados (P<0,001), porém a taxa de recuperação foi inferior à dos tratamentos II e III (68,8 por cento vs. 78,4 por cento e 76,3 por cento, respectivamente; P<0,01). O TII não afetou as principais características ovarianas, exceto pelo aumento no número de folículos de tamanho médio (P<0,01). O TI produziu maior percentual de oócitos viáveis (77,2 por cento vs. 69,8 por cento; P<0,05) e de oócitos de Grau I (19,8 por cento vs. 11,6 por cento; P<0,001) do que o TIII. Os tratamentos I e II reduziram o percentual de oócitos degenerados (16,4 por cento e 16,8 por cento vs. 22,3 por cento; P<0,05). A pré-estimulação ovariana com FSH demonstrou ser a alternativa mais consistente para aumentar a qualidade dos oócitos recuperados de vacas zebuínas.(AU)

The aim of this study was to evaluate the effects of ovarian pre-stimulation with FSH and active immunization against swine inhibin on the number and quality of oocytes recovered by follicular puncture. Pluriparous, non-lactating Gir cows (n=14) were distributed as: TI - pre-treatment with 250 IU of FSH (n=4), TII - active immunization against swine inhibin (n=4) and TIII - not treated (n=6; control group). All animals had their ovarian follicles above three millimeters in diameter aspirated once a week during 10 consecutive weeks. The TI presented an increase in total follicular population (P<0.05) and in the number of punctured follicles (P<0.001), but reduced recovery rate when compared to treatments II and III (68.8% vs. 78.4% and 76.3%, respectively; P<0.01). The TII did not affect the main ovarian characteristics, except for an increase in the number of medium follicles (P<0.01). Treatment I yielded a higher percentage of viable oocytes (77.2% vs. 69.8%; P<0.05) and oocytes Grade I (19.8% vs. 11.6%; P<0.001) than TIII. Both treatments I and II resulted in reduction of the percentage of degenerated oocytes (16.4% and 16.8% vs. 22.3%; P<0.05). Ovarian pre-stimulation with FSH was the most consistent treatment for increasing quality of oocytes recovered from Zebu cattle.(AU)

Folliculogenesis in ewes: estimulation and inhibition factors of follicular growth / Foliculogênese em ovelhas: fatores de estímulo e inibição do crescimento folicular

The regulatory mechanisms of females´ reproduction are crucial to the success of conventional or assisted breeding. The follicle is the functional unit of the ovary of the female mammal species, being its major functions the growth and maturation of oocytes, as well as the production of steroid hormones. Several factors act jointly on the regulation of these activities through endocrine, autocrine and pa­racrine mechanisms stimulating the mitogenic activity of quiescent oocytes and also steroidogenic activity of the theca cells and of the granulosa. Among the regulatory factors, there are some that act in a stimulant way, such as the receptor of the binding protein (c-KITL), the system of growth factors related to insulin (IGFs), the activin and follistatin complex, and the super family of growth- transforming factor (TGF-). Other agents are inhibitory, such as inhibin, the retinoblastoma protein, expressed in oocytes, as the Wilms gene (WTI). This paper aims to review the regulatory mecha¬nisms of folliculogenesis and its importance in the reproductive physiology of ewes.

Os mecanismos de regulação da reprodução de fêmeas são de impor­tância fundamental para o sucesso da reprodução convencional ou assistida. O folículo é a unidade funcional do ovário de fêmeas das espécies mamíferas, tendo como principais funções o crescimento e a maturação dos oócitos, bem como a produção de hormônios esteróides. Vários fatores agem de forma conjunta na regulação destas atividades por meio de mecanismos endócrinos, autócrinos e parácrinos, estimulando a atividade mitogênica de oócitos quiescentes e, ativi­dade esteroidogênica de células da teca e da granulosa. Entre os fatores regu­latórios existem alguns que agem de forma estimulante, tais como o receptor da proteína ligante (c-KITL), o sistema de fatores de crescimento ligados à insulina (IGFs), o complexo ativina e folistatina e a superfamília do fator transformador de crescimento- (TGF-). Outros fatores agem de forma inibitória, tais como a inibi­na, a proteína retinoblastoma, expressa em oócitos, igualmente ao gene de Wilms (WTI). No presente trabalho, objetivou-se abordar os mecanismos regulatórios da foliculogênese e sua importância na fisiologia reprodutiva de ovelhas. 

Efeitos do diabetes mellitus sobre a função testicular de ratos Wistar / Study of the diabetes mellitus on testicular function of Wistar rat

Utilizaram-se 27 ratos Wistar, machos com 98 dias de idade, originados do Biotério da FMVZ-USP, com o objetivo de avaliar os possíveis efeitos do diabetes mellitus, sobre a função reprodutiva relacionada ao macho.Os animais foram divididos em três grupos, grupo A (GA) constituído de 10 animais sadios, grupo B (GB) constituído de oito ratos Wistar, com diabetes mellitus induzida quimicamente através da administração intraperitonial de estreptozotocina (65mg/Kg) e grupo C (GC) constituído por nove animais com diabetes mellitus induzida quimicamente pela administração intraperitonial de estreptozotocina (65mg/Kg), associada a insulinoterapia (3UI/rato por dia). Após quatro dias da administração da droga (GB e GC), os animais pertencentes ao grupo C (GC) receberam insulinoterapia (três IU/rato/dia) durante 42 dias. No final do experimento (46 dias após a administração da estreptozotocina), os animais foram sacrificados e foram observados os seguintes resultados; O diabetes mellitus leva ao aumento da glicemia, diminuição do peso corpóreo, diminuição do peso e tamanho testicular, diminuição das concentrações séricas de testosterona e FSH. Porém através da avaliação dos níveis séricos de inibina B, foi constatado que o diabetes não promove nem redução, nem aumento das concentrações séricas desse hormônio. Conclui-se também que a reposição exógena de insulina foi capaz de impedir a diminuição do peso corporal, redução do peso testicular, diminuição dos níveis de testosterona e FSH, porém apesar da insulinoterapia ter impedido a diminuição do peso corpóreo, não foi capaz de proporcionar o mesmo desenvolvimento corporal observado nos animais controle

The objective of the present experiment was to evaluate the possible effect of diabetes mellitus, on the reproductive function in male rats. Towards this end, 27 male Wistar rats (98 days old), housed at the FMVZ-USP animal holding facility, were randomly assigned into three groups: Group A (GA) consisting of 10 healthy animals; Group B(GB) consisting of eight Wistar rats, with diabetes mellitus chemically induced through the intraperitoneal administration of estreptozotocin (65mg/Kg); and C group (GC) constituted by nine animals with diabetes mellitus chemically induced by the intraperitoneal administration of estreptozotocin (65mg/Kg), associate to an insulin treatment (3IU/rat per day for 42 days) that begun 4 days after the streptozotocin administration. Animals were euthanized 46 days after the administration of the estreptozotocin and the following results were obtained: diabetes mellitus led to an increase of the glicemia, reduction of the corporeal weight, decreased testicular wheight, serum concentrations of testosterone and FSH. No effect of diabeted were found for the serum levels of inhibin B. Results suggested that the exogen replacement of insulin was capable of hindering the reduction on corporal weight, reduction of testicular weight and reduction of the testosterone levels and FSH. On the other hand despite the fact that insulin treatament was capable of avoiding the reduction on bofy weight, it was not capable to provide similar body development observed in the normal animals

The equine female is considered a seasonal mono-ovulatory specie, which is a restrictive factor in respect to embryo production throughout the year. This limitation could be minimized if an efficient superovulatory response and consequent improvement of embryo production were possible. More recent protocols developed in our lab using EPE (equine pituitary extract) have allowed a good superovulatory response. However, the number of embryos recovered has been inferior to the number of ovulations detected due to unknown factors. The present study has the following objectives: Verify if the EPE treatment administered twice daily would alter the oocyte cytoplasmic and nuclear maturation; and to evaluate the follicular environment by measuring estradiol 17-?, testosterone, progesterone, inhibin and nitric oxide. The electrophoresis pattern of proteins in follicular fluid from superovulated and non- superovulated mares was determined. In addition, the oocyte transport through the oviduct was investigated. The present study was divided into four experiments. Experiment I: Study of oocyte transport to the oviduct in superovulated mares using equine pituitary extract. Experiment II: Effect of superovulation on oocyte recovery using transvaginal ultrasound guided follicular aspiration. Experiment III: Evaluation of follicular environment in superovulated mares. Experiment IV: Oocyte maturation in superovulated in mares using equine pituitary extract. Experiment I was performed at Rio Cuarto University, Argentina. In the related study, 22 mares aging from 3 to 12 years were used (9 control mares, 13 EPE treated mares). These mares were monitored daily by ultrasound until the presence of a follicle ? 30mm in diameter, being then examined twice daily. The superovulation protocol used consisted in 25mg of EPE twice a day, intramuscularly, starting at day 7 post- ovulation... / Estudo do fluido folicular, transporte, recuperaçao e maturação de oócitos em éguas superovuladas com estrato de pituitária equina / 20070000

A fêmea da espécie eqüina é considerada monovulatória sazonal, o que é "ator limitante a produção de embriões ao longo do ano. Esta limitação poderia inimizada se houvesse uma resposta superovulatória eficiente em melhorar a ção de embriões. Protocolos mais recentes desenvolvidos em nosso atório utilizando-se o Extrato de Pituitária Eqüina (EPE) têm permitido uma esposta superovulatória. Contudo o número de embriões recuperados ainda sido inferior ao das ovulações, em conseqüência de fatores ainda não inados. O presente estudo teve por objetivo: verificar se o tratamento com o - administrado duas vezes ao dia, altera a maturação nuclear e citoplasmática I ito, avaliar o ambiente folicular mensurando os níveis de 17(3-estradiol, E5

)tlerona, progesterona, inibina e óxido nítrico, bem como o perfil eletroforético eínas no fluido folicular entre éguas superovuladas e não superovuladas. amos também o transporte do oócito para o oviduto. Este trabalho foi o em quatro experimentos: Experimento I "Estudo do transporte dos oócitos oviduto de éguas superovuladas com extrato de pituitária eqüina"; ento II "Efeito da superovulação na recuperação de oócitos quando da

Efeitos do diabetes mellitus sobre a função testicular em ratos Wistar

Utilizaram-se 27 ratos Wistar, machos com 98 dias de idade, originados do Biotério da FMVZ-USP, com o objetivo de avaliar os possíveis efeitos do diabetes mellitus, sobre a função reprodutiva relacionada ao macho.Os animais foram divididos em três grupos, grupo A (GA) constituído de 10 animais sadios, grupo B (GB) constituído de oito ratos Wistar, com diabetes mellitus induzida quimicamente através da administração intraperitonial de estreptozotocina (65mg/Kg) e grupo C (GC) constituído por nove animais com diabetes mellitus induzida quimicamente pela administração intraperitonial de estreptozotocina (65mg/Kg), associada a insulinoterapia (3UI/rato por dia). Após quatro dias da administração da droga (GB e GC), os animais pertencentes ao grupo C (GC) receberam insulinoterapia (três IU/rato/dia) durante 42 dias. No final do experimento (46 dias após a administração da estreptozotocina), os animais foram sacrificados e foram observados os seguintes resultados; O diabetes mellitus leva ao aumento da glicemia, diminuição do peso corpóreo, diminuição do peso e tamanho testicular, diminuição das concentrações séricas de testosterona e FSH. Porém através da avaliação dos níveis séricos de inibina B, foi constatado que o diabetes não promove nem redução, nem aumento das concentrações séricas desse hormônio. Conclui-se também que a reposição exógena de insulina foi capaz de impedir a diminuição do peso corporal, redução do peso testicular, diminuição dos níveis de testosterona e FSH, porém apesar da insulinoterapia ter impedido a diminuição do peso corpóreo, não foi capaz de proporcionar o mesmo desenvolvimento corporal observado nos animais controle