Estimating the relationship of sugarcane borer larvae and crop damage based on adult captures and climate variables

ABSTRACT: Sugarcane borer Diatraea saccharalis (F.) is the primary sugarcane pest in Brazil. To estimate the relationship between larvae in sugarcane stalks and captures of male adults of D. saccharalis, we collected samples weekly: (1) adults with one delta trap with three virgin females and three female pupae and (2) larvae in 120 stalks per plot of 12.6 hectares (355 × 355 m). The study was conducted in two sites with five plots each, in the municipalities of Nova Ponte and Tupaciguara, Minas Gerais State, Brazil, from July 2016 to May 2017. Relationships between (1) males trapped per week and the number of larvae outside of stalks (LOS) were estimated and (2) we evaluated climate variables, namely average temperature, average relative air humidity, hours with relative air humidity below 30 %, rainfall and number of rainy days, and adults and larvae of D. saccharalis. We obtained generalized linear models for LOS in autumn and for larvae inside the stalks (LIS) in spring and autumn and trapped males in both sites. A significant and direct relationship between LIS and males trapped allows predicting larvae density based on captures of males. In addition, plant damage can be estimated based on accumulated captures of males. There was a negative relationship between hours of air humidity < 30 % and larvae outside of stalks. Densities of LIS can be estimated from male captures and by the humidity variables in the trapping week. Nevertheless, the models require validation in the field.

Down-regulation of complement genes in lipopolysaccharide-challenged zebrafish (Danio rerio) larvae exposed to Indonesian propolis / Regulação negativa dos genes do complemento em larvas de peixe-zebra (Danio rerio) desafiadas com lipopolissacarídeo expostas à própolis indonésia

Abstract Although propolis has been reported for having anti-inflammatory activities, its effects on complement system has not been much studied. This research was conducted to find out the effects of Indonesian propolis on the expression levels of C3, C1r/s, Bf, MBL, and C6 in zebrafish larvae which were induced by lipopolysaccharide (LPS). Counting of macrophages migrating to yolk sac and liver histology were carried out. Larvae were divided into four groups: CON (cultured in E3 medium only), LPS (cultured in a medium containing 0.5 μg/L LPS), LPSIBU (cultured in a medium containing LPS, and then treated with 100 μg/L ibuprofen for 24 hours), and LPSPRO (cultured in a medium containing LPS, and then immersed in 14,000 μg/L propolis for 24 hours) groups. The results showed that complement gene expression in larvae from the LPSIBU and LPSPRO groups were generally lower than in larvae from the LPS group. The number of macrophage migrations to the yolk in the LPSPRO group was also lower than in the LPS group. Histological structure of liver in all groups were considered normal. This study shows that Indonesian propolis has the potential to be used as an alternative to the substitution of NSAIDs.

Resumo Embora a própolis tenha sido relatada por ter atividade anti-inflamatória, seus efeitos no sistema complemento, uma parte do sistema imunológico inato, não foram muito estudados. Esta pesquisa foi conduzida para descobrir os efeitos da própolis da Indonésia nos níveis de expressão de C3, C1r/s, Bf, MBL e C6 em larvas de peixe-zebra induzidas por lipopolissacarídeo (LPS). Foram realizadas contagens de macrófagos que migram para o saco vitelino e histologia do fígado. As larvas foram divididas em quatro grupos: CON (cultivadas apenas em meio E3), LPS (cultivadas em meio contendo 0,5 μg/L de LPS), LPSIBU (cultivadas em meio contendo LPS e, em seguida, tratadas com 100 μg/L de ibuprofeno por 24 horas) e LPSPRO (cultivado em meio contendo LPS, e então imerso em própolis 14,000 μg/L por 24 horas). Os resultados mostraram que a expressão do gene do complemento em larvas dos grupos LPSIBU e LPSPRO foi geralmente menor que em larvas do grupo LPS. O número de migrações de macrófagos para a gema no grupo LPSPRO também foi menor que no grupo LPS. A estrutura histológica do fígado em todos os grupos foi considerada normal. Este estudo mostra que a própolis indonésia tem potencial para ser utilizada como alternativa na substituição dos AINEs (anti-inflamatórios não esteroides).

Influence of garlic extract on larval performance and survival of juvenile angelfish Pterophyllum scalare during transport / Influência do extrato de alho no desempenho larval e na sobrevivência durante o transporte de juvenis de acará bandeira Pterophyllum scalare

Abstract The objective of this study was to evaluate the properties of garlic as a growth promoter in larvae of angelfish Pterophyllum scalare and its benefits during transport of juveniles of this species. The experiment was conducted in recirculation aquaculture system, consisting of 20 tanks of 40 L equipped with independent water input and output. We used 1,400 larvae distributed among five treatments, with four repetitions, which totaled 20 experimental units. The treatments were 0, 50, 100, 200, and 400 mg of garlic extract per kilo of feed. The results showed that the inclusion of levels of garlic extract in the feed did not significantly effect the fish's development or their transport. Neither did the inclusion of levels of garlic extract affect the survival of the larvae during the trial period. New research with extracts of higher dosages should be performed to elucidate the effect of garlic extract as a growth promoter.

Resumo O estudo teve como objetivo avaliar as propriedades do alho como promotor de crescimento em larvas de acará bandeira Pterophyllum scalare e seus benefícios no transporte de juvenis da mesma espécie. O experimento foi conduzido em sistema de recirculação composto por 20 aquários de 40 L de volume útil, dotado de entrada e saída de água independentes e teve a duração de 40 dias. O delineamento experimental adotado foi o inteiramente casualizado (DIC), com cinco tratamentos e quatro repetições, totalizando 20 unidades experimentais. Foram utilizadas 1.400 larvas de acará bandeira (Pterophyllum scalare) divididas entre os tratamentos. Os tratamentos consistiram em: 0, 50, 100, 200 e 400 mg de extrato de alho por quilo de ração. Os resultados mostraram que não houve efeito significativo dos níveis de inclusão do extrato do alho sobre os índices zootécnicos avaliados e posteriormente no transporte dos juvenis. Também não foi observado influência na sobrevivência das larvas durante o período experimental. Novas pesquisas com dosagens maiores de extratos devem ser realizados para melhor elucidação do efeito do extrato de alho como promotor de crescimento.

How omnivory affects the survival and choices of earwig Doru luteipes (Scudder) (Dermaptera: Forficulidae)? / Como a onivoria afeta a sobrevivência e escolhas da tesourinha Doru luteipes (Scudder) (Dermaptera: Forficulidae)?

Abstract Doru luteipes (Scudder, 1876) is an omnivorous predator that finds different food resources in the corn plant: eggs of Spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797), uredospores of Puccinia polysora (Underw, 1897), and pollen. Knowing the survival and food preferences of this predator is essential to define its relevance as a biological control agent. We hypothesize that the foraging behavior and predatory capacity of D. luteipes may be affected when several food resources, especially eggs of S. frugiperda, uredospores of P. polysora, and pollen are concurrently in the same plant. The survival of D. luteipes in the nymph stage and their preference among food resources, often available in corn plants, were determined. To verify the survival of D. luteipes, newly hatched nymphs were fed exclusively with 1- uredospores of P. polysora, 2- eggs of S. frugiperda, 3- corn pollen, 4- a combination of uredospores + eggs, and 5- artificial diet (control). In another experiment, nymphs and adults of D. luteipes with 24 and 48 hours of fasting were individually released in the center of a container with four diets: 1- uredospores of P. polysora, 2- eggs of S. frugiperda, 3- corn pollen, 4- artificial diet, and maintained for 10 minutes, to evaluate the food choice and feeding time. The exclusive feeding with S. frugiperda eggs caused low nymph survival (8%), but the combination of P. polysora uredospores + S. frugiperda eggs allowed 58.3% survival. D. luteipes preferred feeding during the nighttime and the most significant proportions of choices by nymphs and adults were for pollen and diet, with adults spending more time eating pollen. These findings indicate that the trophic choices of D. luteipes are relevant to understand its contribution as an agent to control pest insects and fungal diseases in corn.

Resumo Doru luteipes (Scudder, 1876) é um predador onívoro, que encontra na planta do milho diferentes recursos alimentares: ovos de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797), uredósporos de Puccinia polysora (Underw, 1897) e pólen. Para definição da relevância desse predador como agente de controle biológico, conhecer a sobrevivência e preferência alimentar é essencial. Nós hipotetizamos que o comportamento de forrageamento e a capacidade de predação de D. luteipes podem ser afetados quando uma mesma planta oferece ovos, uredósporos e pólen, concomitantemente. A sobrevivência de D. luteipes na fase de ninfa e sua preferência entre os recursos alimentares, frequentemente disponíveis nas plantas de milho, foram determinados. Para verificar a sobrevivência de D. luteipes, ninfas recém eclodidas foram alimentadas exclusivamente com 1- uredósporos de P. polysora, 2- ovos de S. frugiperda, 3- pólen de milho, 4- combinação de uredósporos + ovos e 5- dieta artificial (controle). Em outro experimento, ninfas e adultos de D. luteipes com 24 e 48 horas de jejum foram liberadas individualmente, em recipientes contendo quatro dietas: 1- uredósporos de P. polysora, 2- ovos de S. frugiperda, 3- pólen de milho, 4- dieta artificial e mantidas durante 10 min, sendo avaliados a escolha pelo alimento e o tempo de alimentação. A alimentação exclusiva com ovos de S. frugiperda ocasionou baixa sobrevivência das ninfas (8%), porém a combinação de uredósporos de P. polysora + ovos de S. frugiperda possibilitou sobrevivência de 58,3%. D. luteipes preferiu se alimentar durante o período noturno e as maiores proporções de escolhas das ninfas e dos adultos ocorreram no pólen e na dieta, sendo que os adultos gastaram mais tempo se alimentando de pólen. Estas descobertas indicam que as escolhas tróficas de D. luteipes são relevantes para compreender sua contribuição como agente de controle de insetos-praga e doença fúngicas em milho.

Evaluation in vitro of the virulence of two entomopathogenic heterorhabditid nematodes in the control of Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) larvae in byproducts of the sugar and alcohol industry / Avaliação in vitro da virulência de dois nematoides entomopatogênicos heterorhabditídeos no controle de larvas de Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) em subprodutos da indústria sucroalcooleira

Stomoxys calcitrans causes losses to livestock, mainly to cattle. This study aimed to determine the pathogenic potential of Heterorhabditis bacteriophora HP88 and H. baujardi LPP7 against S. calcitrans larvae after being exposed to byproducts of the sugar and alcohol industry. The efficacy of EPNs on stable fly larvae was evaluated in bioassays with vinasse at three temperatures (16, 25 and 35 °C) and concentrations (0, 50 and 100%), as well as in relation to larva age (4, 6 and 8 days) in filter cake and EPNs concentration (100, 300 and 500 IJs/larva) in sugarcane bagasse. H. bacteriophora showed higher efficacy than H. baujardi at all temperatures. Vinasse did not have a negative effect on the virulence of H. bacteriophora. The age of fly larvae did not affect the mortality rates caused by the EPNs. In bagasse, H. bacteriophora presented higher mortality rates than the control group. It is concluded that EPNs can be a potential component in integrated strategies of stable fly control and outbreak prevention in areas of sugar and alcohol production.(AU)

Stomoxys calcitrans causa perdas à agropecuária, principalmente na bovinocultura. Este estudo objetivou verificar o potencial patogênico de Heterorhabditis bacteriophora HP88 e H. baujardi LPP7 para larvas de S. calcitrans, após serem expostos a subprodutos da indústria sucroalcooleira. A eficácia dos NEPs sobre larvas da mosca-dos-estábulos foi avaliada em bioensaios com vinhaça em três temperaturas (16, 25 e 35 °C) e concentrações (0, 50 e 100%), bem como em relação à idade da larva (4, 6 e 8 dias) em torta de filtro e concentração de NEPs (100, 300 e 500 JIs/larva) em bagaço de cana-de-açúcar. H. bacteriophora apresentou maior eficácia do que H. baujardi em todas as temperaturas. O vinhoto não apresentou efeito negativo sobre a virulência de H. bacteriophora. A idade das larvas não influenciou no aumento ou diminuição da mortalidade dos NEPs. Em bagaço de cana, H. bacteriophora apresentou taxas de mortalidade superiores à do grupo controle. Conclui-se que os NEPs podem ser um potencial componente em estratégias de controle integrado e prevenção de surtos da mosca-dos-estábulos, em áreas de produção de açúcar e álcool.(AU)

Toxicity and larvicidal activity on Aedes aegypti of citronella essential oil submitted to enzymatic esterification / Toxicidade e atividade larvicida sobre Aedes aegypti de óleo essencial de citronella submetido à esterificação enzimática

Abstract The essential oil of citronella (Cymbopogon winterianus) has several biological activities, among them the insect repellent action. Some studies showed that cinnamic acid esters can be applied as natural pesticides, insecticides and fungicides. In this context, the objective of the present work was to evaluate the production of esters from citronella essential oil with cinnamic acid via enzymatic esterification. Besides, the essential oil toxicity before and after esterification against Artemia salina and larvicidal action on Aedes aegypti was investigated. Esters were produced using cinnamic acid as the acylating agent and citronella essential oil (3:1) in heptane and 15 wt% NS 88011 enzyme as biocatalysts, at 70 °C and 150 rpm. Conversion rates of citronellyl and geranyl cinnamates were 58.7 and 69.0% for NS 88011, respectively. For the toxicity to Artemia salina LC50 results of 5.29 μg mL-1 were obtained for the essential oil and 4.36 μg mL-1 for the esterified oils obtained with NS 88011. In the insecticidal activity against Aedes aegypti larvae, was obtained LC50 of 111.84 μg mL-1 for the essential oil of citronella and 86.30 μg mL-1 for the esterified oils obtained with the enzyme NS 88011, indicating high toxicity of the esters. The results demonstrated that the evaluated samples present potential of application as bioinsecticide.

Resumo O óleo essencial de citronela (Cymbopogon winterianus) possui diversas atividades biológicas, entre elas a ação repelente a insetos. Alguns estudos mostraram que os ésteres do ácido cinâmico podem ser aplicados como pesticidas naturais, inseticidas e fungicidas. Nesse contexto, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a produção de ésteres a partir do óleo essencial de citronela com ácido cinâmico via esterificação enzimática. Além disso, foi investigada a toxicidade do óleo essencial antes e após a esterificação contra Artemia salina e a ação larvicida sobre Aedes aegypti. Os ésteres foram produzidos utilizando ácido cinâmico como agente acilante e óleo essencial de citronela (3: 1) em heptano e 15% em peso da enzima NS 88011 como biocatalisadores, a 70 ° C e 150 rpm. As taxas de conversão de cinamatos de citronelil e geranil foram 58,7 e 69,0% para NS 88011, respectivamente. Para a toxicidade sobre Artemia salina foram obtidos CL50 de 5,29 μg mL-1 para o óleo essencial e 4,36 μg mL-1 para os óleos esterificados com NS 88011. Na atividade inseticida contra larvas de Aedes aegypti, obteve-se CL50 de 111,84 μg mL-1 para o óleo essencial de citronela e 86,30 μg mL-1 para os óleos esterificados com a enzima NS 88011, indicando alta toxicidade dos ésteres. Os resultados demonstraram que as amostras avaliadas apresentam potencial de aplicação como bioinseticida.

Identification of locally isolated entomopathogenic Fusarium species from the soil of Changa Manga Forest, Pakistan and evaluation of their larvicidal efficacy against Aedes aegypti / Identificação de espécies de Fusarium entomopatogênicas localmente isoladas do solo da Floresta de Changa Manga, Paquistão e avaliação de sua eficácia larvicida contra Aedes aegypti

Abstract Dengue fever vectored by the mosquito Aedes aegypti is one of the most rapidly spreading insect-borne diseases. Current reliance of dengue vector control is mostly on chemical insecticides. Growing insecticide resistance in the primary mosquito vector, Aedes aegypti, limits the effectiveness of vector control through chemical insecticides. These chemical insecticides also have negative environmental impacts on animals, plants and human health. Myco-biocontrol agents are naturally occurring organisms and are found to be less damaging to the environment as compared to chemical insecticides. In the present study, entomopathogenic potential of local strains of fungi isolated from soil was assessed for the control of dengue vector. Local fungal isolates presents better alternative to introducing a foreign biocontrol strain, as they may be better adapted to environmental conditions of the area to survive and may have more entomopathogenic efficacy against target organism. Larvicidal efficacy of Fusarium equiseti and Fusarium proliferatum was evaluated against Aedes aegypti. Local strains of F. equiseti (MK371718) and F. proliferatum (MK371715) were isolated from the soil of Changa Manga Forest, Pakistan by using insect bait method. Larvicidal activity of two Fusarium spp. was tested against forth instar larvae of A. aegypti in the laboratory, using concentrations 105, 106, 107 and 108 conidia /ml. LC50 values for F. equiseti after 24h, 48h, 72h and 96h of exposure were recorded as 3.8x 108, 2.9x107, 2.0x107, and 7.1x106 conidia /ml respectively while LC50 values for F. proliferatum were recorded as 1.21x108, 9.6x107, 4.2x107, 2.6x107 conidia /ml respectively after 24h, 48h, 72h and 96h of exposure. The results indicate that among two fungal strains F. equiseti was found to be more effective in terms of its larvicidal activity than F. proliferatum against larvae of A. aegypti.

Resumo A dengue transmitida pelo mosquito Aedes aegypti é uma das doenças transmitidas por insetos de propagação mais rápida. A dependência atual do controle do vetor da dengue é principalmente de inseticidas químicos. O aumento da resistência a inseticidas no principal vetor do mosquito, Aedes aegypti, limita a eficácia do controle do vetor por meio de inseticidas químicos. Esses inseticidas químicos também têm impactos ambientais negativos sobre os animais, plantas e saúde humana. Os agentes de micobiocontrole são organismos que ocorrem naturalmente e são menos prejudiciais ao meio ambiente em comparação com os inseticidas químicos. No presente estudo, avaliou-se o potencial entomopatogênico de cepas locais de fungos isolados do solo para o controle do vetor da dengue. Isolados de fungos locais apresentam melhor alternativa para a introdução de uma cepa de biocontrole estrangeira, pois podem ser mais bem adaptados às condições ambientais da área para sobreviver e podem ter maior eficácia entomopatogênica contra o organismo-alvo. A eficácia larvicida de Fusarium equiseti e Fusarium proliferatum foi avaliada contra Aedes aegypti. Cepas locais de F. equiseti (MK371718) e F. proliferatum (MK371715) foram isoladas do solo de Changa Manga Forest, Paquistão, usando o método de isca para insetos. Atividade larvicida de dois Fusarium spp. foi testado contra larvas de quarto ínstar de A. aegypti em laboratório, nas concentrações 105, 106, 107 e 108 conídios / ml. Os valores de LC50 para F. equiseti após 24 h, 48 h, 72 h e 96 h de exposição foram registrados como 3,8x 108, 2,9x107, 2,0x107 e 7,1x106 conídios / ml, respectivamente, enquanto os valores de LC50 para F. proliferatum foram registrados como 1,21x108, 9,6 x107, 4,2x107, 2,6x107 conídios / ml, respectivamente, após 24 h, 48 h, 72 h e 96 h de exposição. Os resultados indicam que entre duas cepas de fungos F. equiseti se mostrou mais eficaz em termos de atividade larvicida do que F. proliferatum contra larvas de A. aegypti.

Mosquitocidal activities of Chenopodium botrys whole plant n-hexane extract against Culex quinquefasciatus / Atividades mosquitocidas do extrato de n-hexano de planta inteira de Chenopodium botrys contra Culex quinquefasciatus

Abstract This research aimed to investigate various mosquitocidal activities of Chenopodium botrys whole- plant n-hexane extract against Culex quinquefasciatus. The extract showed remarkable larvicidal, pupicidal, adulticidal, oviposition deterrent and adult emergence inhibitory activities against Cx. quinquefasciatus. During the larvicidal and pupicidal activities, the 24-hour lethal concentration (LC50) of extract against 2nd instar larvae, 4th instar larvae and pupae were 324.6, 495.6 and 950.8 ppm, respectively. During the CDC (Centers for Disease Control and Prevention) bottle bioassay for adulticidal activity, the median knockdown times (KDT50) at 1.25% concentration was 123.4 minutes. During the filter paper impregnation bioassay for adulticidal activity, the KDT50 value at 0.138 mg/cm2 concentration was 48.6 minutes. The extract was fractionated into 14 fractions through silica gel column chromatography which were then combined into six fractions on the basis of similar retention factor (Rf) value. These fractions were screened for adulticidal activity by applying CDC bottle bioassay. The fraction obtained through 60:40 to 50:50% n-hexanes-chloroform mobile phase with 0.5 Rf value showed 100% adulticidal activity at 0.2% concentration. During oviposition deterrent activity, the highest concentration (1000 ppm) showed 71.3 ± 4.4% effective repellence and 0.6 ± 0.1 oviposition activity index. During adult emergence inhibition activity, the median emergence inhibition (EI50) value was 312.3 ppm. From the outcome of the present investigation, it is concluded that the n-hexane extract of C. botrys whole- plant possesses strong larvicidal, pupicidal, adulticidal, oviposition deterrent and adult emergence inhibitory activities against Cx. quinquefasciatus.

Resumo Esta pesquisa teve como objetivo investigar várias atividades mosquitocidas do extrato n-hexano de planta inteira de Chenopodium botrys contra Culex quinquefasciatus. O extrato mostrou atividades larvicida, pupicida, adulticida, dissuasora de oviposição e inibidora da emergência de adultos contra a Cx. quinquefasciatus. Durante as atividades larvicida e pupicida, a concentração letal de 24 horas (CL50) do extrato contra larvas de 2º estádio, larvas de 4º estádio e pupa foi de 324,6, 495,6 e 950,8 ppm, respectivamente. Durante o bioensaio com frasco do CDC (Centros para Controle e Prevenção de Doenças) para adulticida, o tempo médio de desativação (KDT50) na concentração de 1,25% foi de 123,4 minutos. Durante o bioensaio de impregnação com papel de filtro para a atividade adulticida do extrato, o valor KDT50 na concentração de 0,138 mg / cm2 foi de 48,6 minutos. O extrato foi fracionado em 14 frações através de cromatografia em coluna de gel de sílica que foram então combinadas em seis frações com base em um valor de fator de retenção (Rf) semelhante. Essas frações foram selecionadas quanto à atividade adulticida por meio da aplicação do bioensaio com garrafa do CDC. A fração obtida através da fase móvel de n-hexanos-clorofórmio 60:40% a 50:50% com valor de 0,5 Rf apresentou atividade adulticida de 100% na concentração de 0,2%. Durante a atividade de dissuasão da oviposição, a maior concentração de extrato (1000 ppm) apresentou repelência efetiva de 71,3 ± 4,4% e índice de atividade de oviposição de 0,6 ± 0,1. Durante a atividade de inibição da emergência de adultos, o valor médio de inibição da emergência (EI50) foi de 312,3 ppm. A partir do resultado da presente investigação, conclui-se que o extrato de n-hexano da planta inteira de C. botrys possui fortes atividades larvicida, pupicida, adulticida, dissuasora da oviposição e inibidora da emergência de adultos contra a Cx. quinquefasciatus.

Evaluation of indigenous plants' extracts for mosquitocidal activity against different stages of Culex quinquefasciatus say (Diptera: Culicidae) / Avaliação de extratos de plantas indígenas quanto à atividade mosquitocida contra diferentes estágios de culex quinquefasciatus say (Diptera: Culicidae)

Abstract Being vector of West Nile Virus and falariasis the control of Culex quinquefasciatus is likely to be essential. Synthetic insecticide treatment is looking most effective for vectors mosquito control. However, these products are toxic to the environment and non-target organisms. Consequently, ecofriendly control of vectors mosquito is needed. In this regard botanical insecticide is looking more fruitful. Therefore, the present research aimed to investigate the effectiveness of methanolic extract and various fractions, including, n-hexane, ethyl-acetate, chloroform, and aqueous fraction, obtained from methanolic extract of Ailanthus altissima, Artemisia scoparia, and Justicia adhatoda using separating funnel against larval, pupal, and adult stages of Culex quinquefasciatus. The larvae and pupae of Culex quinquefasciatus were exposed to various concentrations (31.25-1000 ppm) of methanolic extract and its fractions for 24 hours of exposure period. For knock-down bioassay (filter paper impregnation bioassay) different concentration of the methanolic extract and its various fractions (i.e. 0.0625, 0.125, 0.25, 0.5 and 1mg/mL) were applied for 1 hour exposure period. The results were statistically analysed using standard deviation, probit analysis, and linear regression. The R2 values of larvae, pupae, and adult range from 0.4 to 0.99. The values of LC50 (concentration causing 50% mortality) for late 3rd instar larvae after 24 hours exposure period range from 93-1856.7 ppm, while LC90 values range from 424 -7635.5ppm. The values of LC50for pupae range form 1326.7-6818.4ppm and and values of LC90 range from 3667.3-17427.9ppm, respectively. The KDT50 range from 0.30 to 2.8% and KDT90 values range from1.2 to 110.8%, respectively. In conclusion, Justicia adhatoda may be effective for controlling populations of vector mosquito.

Resumo Por ser o vetor do vírus do Nilo Ocidental e da falaríase, o controle de Culex quinquefasciatus Say é provavelmente essencial. O tratamento com inseticida sintético parece ser mais eficaz para o controle dos mosquitos vetores. No entanto, esses produtos são tóxicos para o meio ambiente e organismos não visados. Consequentemente, o controle ecológico dos mosquitos vetores é necessário. Nesse sentido, o inseticida botânico parece mais produtivo. Portanto, a presente pesquisa teve como objetivo investigar a eficácia do extrato metanólico e de várias frações, incluindo n-hexano, acetato de etila, clorofórmio e fração aquosa, obtidos do extrato metanólico de Ailanthus altissima (Mill.) Swingle, Artemisia scoparia Waldst. & Kit. e Justicia adhatoda L. usando funil de separação contra os estágios larval, pupal e adulto de C. quinquefasciatus. As larvas e pupas de C. quinquefasciatus foram expostas a várias concentrações (31,25-1000 ppm) de extrato metanólico, e suas frações por 24 horas de período de exposição. Para o bioensaio knock-down (bioensaio de impregnação de papel de filtro), diferentes concentrações do extrato metanólico e suas várias frações (ou seja, 0,0625, 0,125, 0,25, 0,5 e 1 mg / mL) foram aplicadas por um período de exposição de 1 hora. Os resultados foram analisados ​​estatisticamente usando desvio padrão, análise Probit e regressão linear. Os valores de R2 de larvas, pupas e adultos variaram de 0,4 a 0,99. Os valores de LC50 (concentração que causa 50% de mortalidade) para larvas de terceiro estádio tardio após 24 horas de período de exposição variaram de 93-1856,7 ppm, enquanto os valores de LC90 variaram de 424-7635,5ppm. Os valores de LC50 para pupas variaram de 1326,7-6818,4 ppm e os valores de LC90 variaram de 3667,3-17427,9 ppm, respectivamente. O KDT50 variou de 0,30 a 2,8% e os valores de KDT90 variaram de 1,2 a 110,8%, respectivamente. Por fim, a espécie J. adhatoda pôde ser eficaz para controlar populações de mosquitos vetores.

Evaluation of Pelleting Mealworm (Tenebrio Molitor) Powder with Chokeberry By-product Meal To improve Duck Production and Meat Quality Traits

This study aimed to evaluate the effects of dietary supplementation pelleted Tenebrio molitor (TM) powder with chokeberry by-product (CBP) meal on duck production and meat quality traits. A total of 180 0-day-old Pekin ducks were allocated randomly between three dietary groups viz., control, Treatment 1, and Treatment 2, with three pens per group and twenty birds per pen, characterized by increasing levels of pelleted TM powder with CBP meal in concentration of 0%, 1.5%, and 3%, respectively, and reared until 42 days of age in a completely randomized design. On day 42, the ducks were sacrificed, and breast and thigh muscles were used for meat quality evaluations. Feeding pelleted TM powder with CBP meal resulted in a significant difference in final body weight, weight gain and feed conversion ratio (p<0.05). Additionally, a significant difference was observed in the pH of the breast meat samples (p<0.05). As the only significant difference between the breast and thigh meat, 1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl radical scavenging was influenced significantly by the dietary inclusion of pelleted TM powder with CBP meal (p<0.05). However, the values of thiobarbituric acid reactive substances and meat color in both breast and thigh meat were insignificant (p>0.05) different among all groups. To conclude, the inclusion of up to 3 % of pelleted TM powder with CBP meal in the diets of ducks did improve the growth production and antioxidant characteristics effects, which could decrease TBARS and reflected by changes in 1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl free DPPH radical scavenging values.(AU)

Chemical composition, in vitro larvicidal and antileishmanial activities of the essential oil from Citrus reticulata Blanco fruit peel / Composição química, atividades larvicida e leishmanicida in vitro do óleo essencial da casca do fruto de Citrus reticulata Blanco

Abstract Numerous studies have investigated the chemical composition and biological activities of essential oils from different Citrus species fruit peel, leaves and flowers. This paper aims to investigate the chemical composition, larvicidal and antileishmanial activities of essential oil from Citrus reticulata fruit peel (CR-EO). CR-EO was obtained by hydrodistillation in a Clevenger-type apparatus and its chemical composition was analyzed by GC-MS and GC-FID. Limonene (85.7%), ɣ-terpinene (6.7%) and myrcene (2.1%) were identified as its major components. CR-EO showed high activity against promastigote forms of Leishmania amazonensis (IC50 = 8.23 µg/mL). CR-EO also exhibited high larvicidal activity against third instar Aedes aegypti larvae at a lethal concentration (LC50 = 58.35 µg/mL) and 100% mortality at 150 µg/mL. This study suggests, for the first time, the potential use of CR-EO against this important mosquito-borne viral disease caused by the genus Aedes.

Resumo Numerosos estudos têm investigado a composição química e as atividades biológicas de óleos essenciais extraídos de cascas dos frutos, folhas e flores de diferentes espécies de Citrus. Este trabalho tem como objetivo investigar a composição química e as atividades larvicida e leishmanicida in vitro do óleo essencial das cascas dos frutos de Citrus reticulata (CR-EO). CR-EO foi obtido pela técnica de extração em aparelho Clevenger e sua composição química foi determinada por CG-EM e CG-DIC. Limoneno (85,7%), ɣ-terpineno (6,7%) and mirceno (2,1%) foram identificados como os constituintes majoritários. CR-EO mostrou alta atividade contra as formas promastigota de Leishmania amazonensis (CI50 = 8,23 µg/mL). CR-EO também exibiu alta atividade larvicida contra as larvas do terceiro estágio do Aedes aegypti com concentração letal (CL50 = 58,35 µg/mL) e mortalidade de 100% em 150 µg/mL. Este estudo sugere, pela primeira vez, o uso potencial de CR-EO contra esta importante doença viral transmitida por mosquitos do gênero Aedes.

Impact of nitrogen and phosphorus fertilizers on Cry1Ac protein contents in transgenic cotton / Impacto de fertilizantes de nitrogênio e fósforo nos conteúdos de proteína Cry1Ac em algodão transgênico

Abstract Application of different fertilizers to check the efficiency of expression of Bt (Bacillus thuringiensis) gene in one of the leading commercialized crops (cotton) against Lepidopteran species is of great concern. The expression of Cry protein level can be controlled by the improvement of nutrients levels. Therefore, the myth of response of Cry toxin to different combinations of NP fertilizers was explored in three Bt cotton cultivars. Combinations include three levels of nitrogen and three levels of phosphorus fertilizers. Immunostrips and Cry gene(s) specific primer based PCR (Polymerase Chain Reaction) analysis were used for the presence of Bt gene that unveiled the presence of Cry1Ac gene only. Further, the ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) kit was used to quantify the expression of Cry1Ac protein. Under various NP fertilizers rates, the level of toxin protein exhibited highly significant differences. The highest toxin level mean was found to be 2.3740 and 2.1732 µg/g under the treatment of N150P75 kg ha-1 combination while the lowest toxin level mean was found to be 0.9158 and 0.7641 µg/g at the N50P25 kg ha-1 level at 80 and 120 DAS (Days After Sowing), respectively. It was concluded from the research that the usage of NP fertilizers has a positive relation with the expression of Cry1Ac toxin in Bt cotton. We recommend using the N150P50 kg ha-1 level as the most economical and practicable fertilizer instead of the standard dose N100P50 kg ha-1 to get the desired level of Cry1Ac level for long lasting plant resistance (<1.5). The revised dose of fertilizer may help farmers to avoid the cross-resistance development in contradiction of insect pests.

Resumo A aplicação de diferentes fertilizantes para verificar a eficiência da expressão do gene Bt (Bacillus thuringiensis) em uma das principais culturas comercializadas (algodão) contra espécies de lepidópteros é uma grande preocupação. A expressão do nível de proteína Cry pode ser controlada pela melhoria dos níveis de nutrientes. Portanto, o mito da resposta da toxina Cry a diferentes combinações de fertilizantes NP foi explorado em três cultivares de algodão Bt. As combinações incluem três níveis de nitrogênio e três níveis de fertilizantes de fósforo. A análise de PCR (reação em cadeia da polimerase) específica para o gene (s) Immunostrips e Cry (s) foi usada para a presença do gene Bt que revelou a presença do gene Cry1Ac apenas. Além disso, o kit ELISA (ensaio de imunoabsorção enzimática) foi usado para quantificar a expressão da proteína Cry1Ac. Sob várias taxas de fertilizantes NP, o nível de proteína de toxina exibiu diferenças altamente significativas. A média do nível mais alto de toxina foi de 2,3740 e 2,1732 µg / g sob o tratamento da combinação N150P75 kg ha-1, enquanto a média do nível mais baixo de toxina foi de 0,9158 e 0,7641 µg / g no nível de N50P25 kg ha-1 em 80 e 120 DAS (dias após a semeadura), respectivamente. Concluiu-se com a pesquisa que o uso de fertilizantes NP tem relação positiva com a expressão da toxina Cry1Ac no algodão Bt. Recomendamos o uso do nível de N150P50 kg ha-1 como o fertilizante mais econômico e praticável em vez da dose padrão N100P50 kg ha-1 para obter o nível desejado de nível de Cry1Ac para resistência de planta de longa duração (<1,5). A dose revisada de fertilizante pode ajudar os agricultores a evitar o desenvolvimento de resistência cruzada em contradição com as pragas de insetos.

Insecticidal activity of essential oil of Cannabis sativa against the immature and adult stages of Ctenocephalides felis felis / Atividade inseticida do óleo essencial de Cannabis sativa frente aos estágios imaturos e adultos de Ctenocephalides felis felis

Essential oil (EO) of Cannabis sativa (C. sativa) was evaluated against the egg, larval, pupal, and adult stages of the flea Ctenocephalides felis felis. The chemical composition of EO was determined by gas chromatography with flame ionization and mass spectrometry. EO mainly comprised γ-elemene (16.2%) and caryophyllene oxide (14.2%) as major compounds. To evaluate the mortality of flea stages in vitro, filter paper tests were performed at different concentrations. EO of C. sativa showed insecticidal activity (100% mortality at the highest concentrations) for flea control at egg, larval, pupal, and adult stages, with lethal concentrations (LC50) of 32.45; 91.61; 466.41 and 927.92 µg/cm2, respectively. EO of C. sativa indicated the potential for the development of ectoparasiticide for veterinary use, especially for fleas in egg and larval stages.(AU)

O óleo essencial (OE) de Cannabis sativa (C. sativa) foi avaliado contra os estágios de ovo, larva, pupa e adulto da pulga Ctenocephalides felis felis. A composição química do OE foi determinada por cromatografia gasosa com ionização de chama e espectrometria de massa. O OE foi composto principalmente de γ-elemeno (16,2%) e óxido de cariofileno (14,2%) como compostos majoritários. Para avaliar a mortalidade dos estágios de pulgas in vitro, foram realizados testes de papel filtro em diferentes concentrações. O OE de C. sativa apresentou atividade inseticida (100% de mortalidade nas maiores concentrações), para controle de pulgas nos estágios de ovo, larva, pupa e adulto, com concentrações letais (CL50) de 32,45; 91,61; 466,41 e 927,92 µg/cm2, respectivamente. O OE de C. sativa indicou potencial para o desenvolvimento de ectoparasiticida para uso veterinário, principalmente para pulgas em fase de ovo e larva.(AU)

Early life history of two Neotropical Triportheidae fish (Characiformes)

The early ontogeny of Triportheus albus and T. angulatus, two fish species of Triportheidae, is described using morphological, meristic, and morphometric characters. These species are exploited by subsistence fisheries and have potential as an alternative source of fish, given the decline in the natural stocks of other commercially important fish species in the Amazon. The specimens were collected in the open water limnetic zone, under of the macrophyte stands, and in subsurface areas near sandbars in the Amazon basin. Intra and interspecific morphometric analyzes were performed to evaluate growth models between species. The combination of color pattern, body morphology, morphometric proportions and myomeres number distinguishes the species from each other and from other congeners. Some morphometric relationships related to head as snout length and eye diameter as well as length from the snout to the origins of anal and length from the snout to the origins of pelvic, related with standard length were different between the two species of Triportheus, reflecting different growth models between them. An identification key for larvae and juveniles of some species of Triportheus from the Eastern Amazon is presented.(AU)

A ontogenia inicial de Triportheus albus e T. angulatus, duas espécies de peixes pertencentes a Triportheidae, é descrita usando caracteres morfológicos, merísticos e morfométricos. Essas espécies são exploradas pela pesca de subsistência e têm potencial como fonte alternativa de pescado, dado o declínio nos estoques naturais de outras espécies de peixes comercialmente importantes na Amazônia. Os espécimes foram coletados na zona limnética de águas abertas, sob bancos de macrófitas e em áreas subsuperficiais próximas a bancos de areia na bacia amazônica. Análises morfométricas, intra e interespecíficas, foram realizadas para avaliar modelos de crescimento entre as espécies. A combinação do padrão de coloração, morfologia corporal, proporções morfométricas e número de miômeros distingue as espécies entre si e de outras congêneres. Algumas relações morfométricas relacionadas à cabeça, como comprimento do focinho e diâmetro do olho, assim como o comprimento do focinho à origem da nadadeira anal e o comprimento do focinho à origem da nadadeira pélvica, relacionadas ao comprimento padrão foram diferentes entre as duas espécies de Triportheus, refletindo modelos distintos de crescimento entre elas. Uma chave de identificação para larvas e juvenis de algumas espécies de Triportheus da Amazônia Oriental é apresentada.(AU)

Agro-industrial residues in the control of gastrointestinal nematodes of small ruminants and fertilization of forages / Resíduos agroindustriais no controle de nematóides gastrointestinais de pequenos ruminantes e adubação de forrageiras

Verminosis in small ruminants can render rural activity impractical, which is still controlled through the administration of anthelmintics. The present study evaluated four agro-industrial residues as fertilizer in the control of GIN of small ruminants in the free-living stage. Crab shell, manipueira, biochar, and organomineral residues were used in pots (5.0 kg of soil) and cultivated with Massai grass (Megathyrsus maximum cv. Massai). Further, the pots were contaminated with feces from sheep carrying a natural multispecific infection by GIN. Next, the residues were applied individually to the soil, with 50 mL/pot for liquid and 50 g/pot for solid residues. Treatment with manipueira showed the lowest number of L3.kg MS-1 recovered from the grass (202.44), when compared with treatments using organomineral (823.89) and biochar (689.34). However, there was no statistically significant difference (P < 0.05) between the four treatments as compared to the control group. These agro-industrial residues can be used as organic fertilizers; however, these will not help in the control of GIN in sheep.

A verminose em pequenos ruminantes é uma doença que pode inviabilizar a atividade rural. Embora o sucesso no controle dos nematóides gastrointestinais de pequenos ruminantes dependa da adoção associada de diferentes estratégias e tecnologias, ainda é possível notar a escolha, por parte de alguns ovinocaprinocultores, pelo tratamento exclusivamente baseado na administração de anti-helmínticos aos animais. Contudo, é no ambiente que encontramos um elevado número de formas imaturas de nematóides gastrointestinais. Objetivou-se com o presente trabalho avaliar quatro resíduos agroindustriais como adubo no controle dos nematóides gastrointestinais de pequenos ruminantes, em estádio de vida livre. Casca de caranguejo, manipueira, biochar e organomineral foram os resíduos empregados nos vasos com capacidade média de 5,0 kg de solo, onde foi cultivado o capim Massai (Megathyrsus maximus cv. Massai). Após corte de uniformização do capim, os vasos foram contaminados utilizando-se fezes de ovinos portadores de infecção natural multiespecífica por nematóides gastrointestinais. E, na sequência, os resíduos foram aplicados individualmente no solo, na quantidade de 50 mL/vaso para o resíduo líquido e 50 g/vaso para os sólidos. O tratamento com a manipueira foi o que apresentou o menor número de larvas infectantes de terceiro estádio (L3) recuperado do capim (202,44 L3.kg MS-1) quando comparado com os tratamentos utilizando organomineral (823,89 L3.kg MS-1) e biochar (689,34 L3.kg MS-1). Contudo, não houve diferença estatística significativa (P < 0,05) entre os quatro tratamentos testados quando comparado ao grupo controle. Os resíduos agroindustriais podem ser utilizados como adubos orgânicos, mas não vão auxiliar no controle dos nematóides gastrintestinais dos ovinos.

Effect of feeding frequency and water salinization on early development of Pyrrhulina brevis, an Amazonian ornamental fish / Efeito da frequência alimentar e da salinização da água sobre o desenvolvimento inicial de Pyrrhulina brevis, um peixe ornamental da Amazônia

Pyrrhulina brevis is an endemic fish from the Amazon basin that is valued in the ornamental fish market. In larviculture, fish are very sensitive to stressors and have a high mortality rate. Salinized water may provide more energy to overcome stress and feeding frequency is an important strategy to improve productive performance. Therefore, the aim of this study was to evaluate the best feeding frequency and the best level of water salinization for larval development of P. brevis. A total of 360 post-larvae of P. brevis (5.26 ± 1.65 mg, 5.57 ± 0.68 mm) were randomly distributed in 36 aquariums (1 L) in a 3x4 factorial scheme, to evaluate three concentrations of salt in water (0, 1 and 2 g L-1) and four feeding frequencies (once, twice, three and four times a day). We offered 150 Artemia nauplii per day and per post-larvae during 15 days. The fish kept at 1 g L-1 salinized water, and those fed 3 and 4 times a day presented significantly greater final length and weight, weight gain, and specific growth rate for length and weight. An interaction between salinized water and feeding frequency was observed for survival rate. We conclude that, during the initial rearing phase of P. brevis, feeding frequency of three times a day and salinized water at 1 g L-1 is recommended.(AU)

Pyrrhulina brevis é um peixe endêmico da bacia amazônica que apresenta bons valores no mercado de peixes ornamentais. Na larvicultura, os peixes são muito sensíveis aos estressores e apresentam alta taxa de mortalidade. A água salinizada pode fornecer mais energia para superar o estresse e a frequência alimentar é uma estratégia importante para melhorar o desempenho produtivo. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a melhor frequência alimentar e o melhor nível de salinização da água para o desenvolvimento larval de P. brevis. Um total de 360 pós-larvas de P. brevis (5,26 ± 1,65 mg, 5,57 ± 0,68 mm) foram distribuídos aleatoriamente em 36 aquários (1 L) em esquema fatorial 3x4, para avaliar três concentrações de sal na água (0, 1 e 2 g L-1) e quatro frequências de alimentação (uma, duas, três e quatro vezes ao dia). Foram oferecidas 150 náuplios de Artemia por dia e por pós-larva, durante 15 dias. Os peixes mantidos com 1 g L-1 de água salinizada e os alimentados 3 e 4 vezes ao dia apresentaram comprimento e peso finais, ganho de peso e taxa de crescimento específico para comprimento e peso significativamente maiores. Uma interação entre água salinizada e frequência alimentar foi observada para a taxa de sobrevivência. Concluímos que, durante a fase inicial de criação de P. brevis, recomenda-se uma frequência alimentar de três vezes ao dia e água salinizada a 1 g L-1.(AU)

Eustrongylides spp. (Nematoda: Eustrongylidae) in Polypterus endlicheri in central Rio Grande do Sul, Brazil / Eustrongylides spp. (Nematoda: Eustrongylidae) em Polypterus endlicheri na região central do Rio Grande do Sul, Brasil

The demand for ornamental fish has increased in recent years in Brazil, however, the aquatic environment of artificial breeders facilitates the invasion of pathogens, including parasitic zoonoses, which are a limiting factor for production causing economic losses in creations. Knowledge of the distribution of agents causing parasitic diseases is important so that we can intervene in breeders, therefore, the objective of the present work is to report the occurrence of infection by Eustrongylides sp. (Nematoda: Eustrongylidae) in Polypterus endlicherii (Polypteriformes: Polypteridae) in central Rio Grande do Sul, Brazil. The nematode was identified after being released a cyst in the scales, of a fish of the species P. endlicherii. It can be concluded that this is the first record of the occurrence of Eustrongylides sp. larvae in fish in Rio Grande do Sul, showing that the parasite is present in the central region of the state. Therefore, further studies should be carried out in order to verify the presence of the parasites in fish intended for human consumption. It should also be noted the need to be more careful when feeding fish with oligochaetes, especially those intended for human consumption.

A criação de peixes para ornamentação teve sua demanda aumentada nos últimos anos no Brasil, no entanto, o ambiente aquático dos criatórios artificiais facilita a invasão por agentes patogênicos, incluindo zoonoses parasitárias, que são um fator limitante para produção causando perdas econômicas nas criações. O conhecimento da distribuição de agentes causadores de enfermidades parasitárias é importante para que se possa intervir nos criatórios, portanto, o objetivo do presente trabalho é relatar a ocorrência da infecção por larva de Eustrongylides sp. (Nematoda: Eustrongylidae) em Polypterus endlicherii (Polypteriformes: Polypteridae) na região central do Rio Grande do Sul, Brasil. O nematódeo foi identificado após ser liberado de um cisto nas escamas, de um peixe da espécie P. endlicherii. Pode-se concluir que este é o primeiro registro da ocorrência de larvas de Eustrongylides sp. em peixes no Rio Grande do Sul, evidenciando que o parasito está presente na região central do estado. Portanto, mais estudos devem ser realizados a fim de verificar a presença dos parasitos em peixes destinados ao consumo humano. Salienta-se ainda, a necessidade de se ter maior cuidado ao alimentar peixes com oligoquetas, principalmente os destinados para alimentação humana.

In vitro culture of parasitic stages of Haemonchus contortus / Cultivo in vitro de estádios parasitários de Haemonchus contortus

Haemonchus contortus is a constraint to sheep production. Seeking to reduce the use of hosts and produce parasitic stages in large-scale, a 42-day in vitro culture protocol of H. contortus third-stage larvae was optimized using Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM). In cell-free culture, larvae were maintained at 39.6°C, in acidic media (pH 6.1) for 3 or 6 days with Δ4-dafachronic acid followed by DMEM pH 7.4 supplemented or not with Fildes' reagent. In DMEM pH 7.4 at 37°C, supplementation with Caco-2 cells was compared to Fildes. On Day 14, fourth-stage larvae (L4) development rates in acidic media supplemented (86.8-88.4%) or not (74.4-77.8%) with Fildes and in Caco-2 cell co-culture (92.6%) were similar, and superior to DMEM pH 7.4 with Fildes (0.0%). On Day 21, Caco-2 cell co-culture resulted in higher larvae differentiation (25.0%) and lower degeneration (13.9%) compared to acidic media (1.5-8.1% and 48.6-69.9%, respectively). This is the first report of prolonged in vitro culture of H. contortus larvae using commercial media in co-culture with Caco-2 cells. Although no progression to the adult stage, Caco-2 cell co-culture resulted in morphological differentiation of H. contortus L4 and larval viability for up to 28 days.(AU)

Haemonchus contortus provoca grandes prejuízos à ovinocultura. Visando reduzir a utilização de ovinos hospedeiros e produzir estágios parasitários em larga escala, um protocolo para o cultivo in vitro por 42 dias de larvas de terceiro estádio de H. contortus foi realizado em meio Eagle, modificado por Dulbecco (DMEM). No cultivo sem células, as larvas foram mantidas a 39,6°C e incubadas em DMEM ácido (pH 6,1) por 3 ou 6 dias com 4Δ-ácido dafacrônico seguido por DMEM pH 7,4 suplementado ou não com reagente de Fildes. Em DMEM pH 7,4 a 37°C, a suplementação com células Caco-2 foi comparada à suplementação com Fildes. No Dia 14, as taxas de desenvolvimento até o quarto estádio larvar (L4) foram similares em meio ácido sem células suplementado (86,8-88,4%) ou não (74,4-77,8%) com Fildes e em co-cultura com células Caco-2 (92,6%), e superiores ao desenvolvimento em DMEM pH 7,4 com Fildes (0,0%). No Dia 21, o co-cultivo com células Caco-2 resultou em maior diferenciação (25,0%) e menor degeneração (13,9%) das larvas em comparação ao meio ácido (1,5-8,1% e 48,6-69,9%, respectivamente). Este é o primeiro relato de cultivo in vitro prolongado de H. contortus em meio comercial em co-cultivo com células Caco-2. Apesar da ausência de progressão até o estágio adulto, o co-cultivo com células Caco-2 resultou em diferenciação de L4 e manutenção da viabilidade das larvas de H. contortus por até 28 dias in vitro.(AU)

Larvas de helmintos no solo de praças públicas de Caxias, Maranhão, Brasil / Helminth larvae in the soil of public squares in Caxias, Maranhão, Brazil / Larvas de helmintos en el suelo de plazas públicas en Caxias, Maranhão, Brasil

Solos de praças públicas são comumente contaminados por helmintos devido ao fácil acesso de cães e gatos infectados. Esses animais ao defecarem podem liberar ovos desses parasitos e, em condições ambientais favoráveis, tornam-se ovos embrionados ou larvas infectantes. O objetivo deste trabalho foi investigar a existência de larvas de helmintos no solo de duas praças públicas do município de Caxias, Maranhão, Brasil, durante a estação chuvosa e seca na região. A pesquisa foi realizada em março de 2018, considerado período chuvoso, e em outubro do mesmo ano, período seco, sendo que foram coletadas trinta amostras de areia, quinze de cada praça, nos dois períodos do ano. O material foi coletado e levado para o Laboratório de Parasitologia do Departamento de Parasitologia e Microbiologia da Universidade Federal do Piauí para análise. Na estação chuvosa, das quinze amostras analisadas na praça A, cinco foram positivas para larvas de ancilostomídeos e das quinze na praça B, três estavam contaminadas com os mesmos helmintos. No período seco, na praça A havia apenas uma amostra com essas larvas e na praça B não foram encontrados parasitos. Os resultados revelaram a presença de larvas de helmintos de caráter zoonótico no solo de praças públicas de Caxias, Maranhão, principalmente no período chuvoso, servindo de alerta à população local.(AU)

Soil in public squares is commonly contaminated by helminths due to the easy access of infected dogs and cats. These animals, when defecating, can release helminth eggs and, under favorable environmental conditions, those eggs can become embryonated or infective larvae. The purpose of this work was to investigate the existence of helminth larvae in the soil of two public squares in the city of Caxias, in the state of Maranhão, Brazil, during the rainy and dry seasons in the region. The study was carried out in March 2018, which is considered the rainy season, and in October of the same year, the dry season. A total of thirty sand samples were collected, fifteen from each square, in both periods of the year. The material was collected and taken to the Parasitology Laboratory of the Department of Parasitology and Microbiology of the Federal University of Piauí for analysis. In the rainy season, from the fifteen samples analyzed in square A, five were positive for hookworm larvae; and from the fifteen samples collected from square B, three were contaminated with the same helminths. During the dry period, only one sample from square A presented these larvae while no parasites were found in square B. The results revealed the presence of zoonotic helminth larvae in the soil of public squares in Caxias, Maranhão, mainly in the rainy season, which can be used as a warning sign to the local population.(AU)

Los suelos de las plazas públicas son comúnmente contaminados por helmintos debido al fácil acceso de perros y gatos infectados. Esos animales, al defecar, pueden liberar huevos de esos parásitos y, en condiciones ambientales favorables, convertirse en huevos embrionados o larvas infectantes. El objetivo de este trabajo fue investigar la existencia de larvas de helmintos en el suelo de dos plazas públicas de la ciudad de Caxias, Maranhão, Brasil, durante la estación lluviosa y seca de la región. La investigación se realizó en marzo de 2018, considerada época de lluvias, y en octubre del mismo año, época seca, y se recolectaron treinta muestras de arena, quince de cada plaza, en ambos períodos del año. El material fue recolectado y llevado al Laboratorio de Parasitología del Departamento de Parasitología y Microbiología de la Universidad Federal de Piauí para su análisis. En época de lluvias, de las quince muestras analizadas en la plaza A, cinco resultaron positivas a larvas de anquilostomiasis y de las quince de la plaza B, tres estaban contaminadas con los mismos helmintos. En el período poco lluvioso, en la plaza A solo hubo una muestra con esas larvas y en la plaza B no se encontraron parásitos. Los resultados revelaron la presencia de larvas de helmintos zoonóticos en el suelo de las plazas públicas de Caxias, Maranhão, principalmente en la época de lluvias, sirviendo de alerta a la población local.(AU)

Acute and chronic immunomodulatory response mechanisms against Toxocara canis larvae infection in mice / Mecanismos da resposta imunomoduladora aguda e crônica contra a infecção por larvas de Toxocara canis em camundongos

The objective of this work was to evaluate the early and late immunological modulation of an experimental infection of T. canis larvae in mice. Mice were infected with 100 infective larvae and euthanized at different period: 24, 48 hours post infection (HPI), 15- and 30 days post infection (DPI). The humoral response was evaluated by indirect ELISA. Quantitative RT-PCR (qPCR) was used to quantify the mRNA transcription of cytokines IL4, IL10, IL12 and Ym1 in the early and late infection periods. Infection with T. canis was able to generate specific total IgG at 15- and 30- DPI. Analyzing the IgG isotype revealed a significant differentiation for IgG1 compared with IgG2a, IgG2b and IgG3, characterizing a Th-2 response. Evaluating the gene transcription at the early phase of infection, higher transcription levels of IL10, IL4 and Ym1 and a downregulation of IL12 were observed. By the late phase, increased transcription levels of IL4, Ym1 and IL12 were observed, and downregulation of IL-10 transcription was observed. The data obtained suggest that during experimental infection with T. canis, the participation of the IL4, IL10, IL12 cytokines and Ym1 can play an important role in T. canis immunomodulation.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a modulação imunológica precoce e tardia da infecção experimental de larvas de T. canis em camundongos. Estes foram infectados com 100 larvas infectantes e eutanasiados em diferentes períodos: 24 e 48 horas pós infecção (HPI), 15 e 30 dias após a infecção (DPI). A resposta humoral foi avaliada por ELISA indireto. RT-PCR quantitativo (qPCR) foi usado para quantificar a transcrição de mRNA das citocinas IL4, IL10, IL12 e Ym1 nos períodos de infecção precoce e tardia. A infecção por T. canis foi capaz de gerar IgG total específico aos 15 e 30 DPI. A análise do isótipo IgG revelou uma diferenciação significativa para IgG1 em comparação com IgG2a, IgG2b e IgG3, caracterizando uma resposta Th-2. Avaliando-se a transcrição gênica na fase inicial da infecção, foram observados níveis mais elevados de transcrição de IL10, IL4 e Ym1 e a regulação negativa de IL12. Na fase tardia, foram observados níveis aumentados de transcrição de IL4, Ym1 e IL12, e foi observada regulação negativa da transcrição de IL-10. Os dados obtidos sugerem, que durante a infecção experimental com T. canis, a participação das citocinas IL4, IL10, IL12 e Ym1 podem desempenhar um papel importante na imunomodulação de T. canis.(AU)