Larvicidal activity of the crude methanolic extract from leaves of Clibadium surinamense against Aedes aegypti / Ação larvicida do extrato de folhas de Clibadium surinamense sobre Aedes aegypti

ABSTRACT: The continuous use of synthetic insecticides for controlling the arboviral vector Aedes aegypti has led to the natural selection of mosquito populations resistant to different chemical groups. Thus, plant-derived compounds have emerged as a viable alternative for vectorcontrol. This study determined whether the crude methanolic extract (CME) from leaves of Clibadium surinamense has larvicidal activity against Ae. aegypti. Third- and fourth-instar Ae. Aegyptilarvae were kept in recipients containing 99 mL of water and 1mL of ethanol-diluted CMEat concentrations of 250, 500, 750, and 1000 ppm. The control group contained 99 mL of water and 1 mL of ethanol. Three trials were performed in triplicate for each group.After 24 hours of treatment, the LC50 and LC90 values were determined to be 283 and 430 ppm, respectively, according to one-way analysis of variance. In conclusion, we have demonstrated for the first time that the CME from leaves of C. surinamense show larvicidal activity against Ae. aegypti under laboratory conditions.

RESUMO: O uso contínuo de inseticidas sintéticos para o controle do mosquito vetor de arbovírus, Aedes aegypti, tem levado à seleção natural de populações resistentes a diferentes grupos químicos. Assim, compostos derivados de plantas surgiram como uma alternativa viável para o controle desses vetores. Desse modo, este estudo foi realizado para determinar se o extrato metanólico bruto (CME) das folhas de Clibadium surinamense possui atividade larvicida contra Ae. aegypti. Para isso, Larvas de terceiro e quarto instar de Ae. aegypti foram mantidas em recipientes contendo 99 mL de água e 1 mL de CME diluído em etanol nas concentrações de 250, 500, 750 e 1000 ppm. O grupo controle continha 99 mL de água e 1 mL de etanol. Três ensaios foram realizados em triplicata para cada grupo. Após 24 horas de observação, de acordo com a análise de variância de uma via,os valores de CL50 e CL90 foram de 283 e 430 ppm, respectivamente. Em conclusão, demonstramos pela primeira vez que o CME das folhas de C. surinamense apresenta atividade larvicida contra Ae. aegypti em condições de laboratório.

Larvicidal activity of the crude methanolic extract from leaves of Clibadium surinamense against Aedes aegypti / Ação larvicida do extrato de folhas de Clibadium surinamense sobre Aedes aegypti

The continuous use of synthetic insecticides for controlling the arboviral vector Aedes aegypti has led to the natural selection of mosquito populations resistant to different chemical groups. Thus, plant-derived compounds have emerged as a viable alternative for vectorcontrol. This study determined whether the crude methanolic extract (CME) from leaves of Clibadium surinamense has larvicidal activity against Ae. aegypti. Third- and fourth-instar Ae. Aegyptilarvae were kept in recipients containing 99 mL of water and 1mL of ethanol-diluted CMEat concentrations of 250, 500, 750, and 1000 ppm. The control group contained 99 mL of water and 1 mL of ethanol. Three trials were performed in triplicate for each group.After 24 hours of treatment, the LC50 and LC90 values were determined to be 283 and 430 ppm, respectively, according to one-way analysis of variance. In conclusion, we have demonstrated for the first time that the CME from leaves of C. surinamense show larvicidal activity against Ae. aegypti under laboratory conditions.

O uso contínuo de inseticidas sintéticos para o controle do mosquito vetor de arbovírus, Aedes aegypti, tem levado à seleção natural de populações resistentes a diferentes grupos químicos. Assim, compostos derivados de plantas surgiram como uma alternativa viável para o controle desses vetores. Desse modo, este estudo foi realizado para determinar se o extrato metanólico bruto (CME) das folhas de Clibadium surinamense possui atividade larvicida contra Ae. aegypti. Para isso, Larvas de terceiro e quarto instar de Ae. aegypti foram mantidas em recipientes contendo 99 mL de água e 1 mL de CME diluído em etanol nas concentrações de 250, 500, 750 e 1000 ppm. O grupo controle continha 99 mL de água e 1 mL de etanol. Três ensaios foram realizados em triplicata para cada grupo. Após 24 horas de observação, de acordo com a análise de variância de uma via,os valores de CL50 e CL90 foram de 283 e 430 ppm, respectivamente. Em conclusão, demonstramos pela primeira vez que o CME das folhas de C. surinamense apresenta atividade larvicida contra Ae. aegypti em condições de laboratório.

Activity of essential oils from leaves, flower buds and stems of Tetradenia riparia on Rhipicephalus (Boophilus) microplus larvae / Atividade dos óleos essenciais das folhas, botões florais e caules de Tetradenia riparia sobre as larvas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus

Around the world, the main problems of livestock are caused by ectoparasites, however, commercial acaracide are toxic to the environment and detrimental to One Health. Therefore, research has increasingly focused on development of natural products as alternatives for tick control. The purpose of this study was to evaluate the larvicidal effect on Rhipicephalus (Boophilus) microplus, through use of essential oils (EOs) extracted from the leaves, flower buds and stems of Tetradenia riparia. The chemical composition of these EOs was determined through gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). They were tested on larvae at concentrations of 100.000 to 40 µg/mL, using the larval packet test and under semi-natural conditions. The main class of compounds in the chemical composition was sesquiterpenes (both oxygenates and hydrocarbons), whereas the predominant compounds in the leaves, flower buds and stems were 14-hydroxy-9-epi-caryophyllene, T-cadinol and 6-7-dehydroroyleanone, respectively. The leaves proved to be the most effective, with highest larvicidal activity (LC99.9 = 83.53 µg/mL). When tested under semi-natural conditions, the oils obtained efficiency above 98% in all compound tests. The results indicated that these EOs were effective against R. (B.) microplus larvae in vitro and ex-situ, proving that this plant has bioactive molecules with significant larvicidal activity.(AU)

Os principais problemas para a pecuária estão relacionados às ectoparasitoses, e ao fato dos carrapaticidas apresentarem elevada toxicidade ao meio ambiente e à saúde única. Surgem, então, demandas na busca por inovações e desenvolvimento de produtos naturais, como alternativas para o controle dos carrapatos. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial da atividade larvicida sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus a partir dos óleos essenciais de Tetradenia riparia (TrOEs) extraídos das folhas, botões florais e caules. A composição química foi determinada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa (GC/MS). Os TrOEs foram testados sobre larvas nas concentrações de 100.000 a 40 µg/mL pelo teste de pacote de larvas e em condições seminaturais. Na composição química, a classe majoritária foi os sesquiterpenos (oxigenados e hidrocarbonetos); já os compostos em destaques foram 14-hidroxy-9-epi-caryophyllene, T-cadinol e 6-7-dehidroroyleanone para folhas, botões florais e caules, respectivamente. As folhas demonstraram ser mais eficientes e com maior poder larvicida (CL99.9 = 83.53 µg/mL). Quando testado em condições seminaturais os óleos obtiveram eficiência acima de 98% em todos os compostos testados. Os resultados indicaram que os TrOEs, foram eficazes sobre as larvas de R. (B.) microplus in vitro e ex-situ, evidenciando que esta planta possui moléculas bioativas com ação larvicidas significativas.(AU)

Larvicide potential of genus CrotonL. (Euphorbiaceae)inbiological control of Aedes aegyptiL. (Diptera: Culicidae)

The reemerging diseases caused by Aedes aegyptiare one of the main public health problems in the world. The control of mosquitoes using larvicidal compounds from products of plant origin is anexcellent alternative. This study aims to evaluate the larvicidal potential of fractions in hexane, chloroform, ethyl acetate and hydromethanol from the ethanolicleaf extract of two species of the genus CrotonL. (Euphorbiaceae) against larval forms of A. aegypti, as an alternative tool to control this vector. Dry leaves of Croton betaceusBaill. and Croton lundianus(Didr.) Müll.Arg. were used for biological tests. The compounds were extracted with ethanol (99.8%). The ethanolic extracts of the leaves were suspended in a methanol / water solution and were successively subjected to the liquid-liquid division process with solvents of different polarities: hexane, chloroform and ethyl acetate, giving rise to the four fractions. Larvicidal tests were performed with the ethanol extract and fractions resulting from the partition. In the study, the crude extract and the fractions showed larvicidal potential, being hexane fractionthe one with greatest activity.Mortality in C. betaceusfractions was up to 40%. Croton lundianuspresented mortality of up to 93.33% of the larvaesubmitted to the test. Data analysis showed larvicidal activity in the crude extract and fractions. The hexane fraction was more effective, especially in C. lundianus.

Biocidal potential of Eugenia pyriformis essential oil in the control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus in the free-living cycle

ABSTRACT: Brazil has one of the largest commercial cattle herds in the world, which naturally coexist with an enormous number of parasitic species. Southern cattle tick, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, is among these species, interfering with animal productivity and causing losses to the beef and dairy cattle sector. The use of chemical acaricides in the control of this mite has resulted in the emergence of resistant populations. In this sense, alternative control measures using plants as sources of botanical acaricides have shown to be effective. Eugenia pyriformis Cambess is a Brazilian plant with antioxidant and antimicrobial activity; however, there are no reports on its acaricidal activity in the literature. The present study aimed to evaluate the acaricidal and larvicidal potential of E. pyriformis leaf essential oil (EO) on southern cattle tick at different stages of the reproductive cycle. E. pyriformis leaves were collected and dried, and had their EO extracted by hydrodistillation (3h) using a modified Clevenger apparatus. Chemical analysis was performed by gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC/MS), and 32 compounds belonging to the sesquiterpene class were identified: hydrocarbons (17.98%) and oxygenated forms (81.96%), with spathulenol (43.65%) and caryophyllene oxide (12.17%) as the most common. The EO was evaluated by the Adult Immersion Test at the concentrations (500.00 to 3.12mg/mL) in which the following parameters were measured: mortality of females (%), hatchability of eggs (%), and product efficiency (%). Larvae were assessed by the Larval Packet Test at concentrations ranging from 25.00 to 0.00004mg/mL. Lethal concentrations (LC) required for killing 50 and 99.9% of adult females and larvae were determined using Probit analysis. LC50 and LC99.9 of EO were 0.06 and 24.60mg/mL and 1,208.80 and 2,538mg/mL for larvae and adult females, respectively. Action of the EO in the free-living cycle of R. (B.) microplus larvae was another parameter assessed. To this end, the larvae were deposited in pots containing Brachiaria decumbens and, after migration to the leaf apex, a solution containing LC99.9 (24.60mg/mL) of the EO was sprayed. After 24h, 72.25% of the larvae had died, indicating stability of the EO when subjected to uncontrolled temperature and humidity conditions. The mechanism of action through which the EO killed the larvae and adult females was investigated by the Bioautographic Method, which showed inhibition of 3.15mg/mL of the EO on the acetylcholinesterase (AChE) enzyme. The results found in the present experiment indicate that E. pyriformis essential oil is an alternative in the control of southern cattle tick in the larval (parasitic) and free-living cycle (non-parasitic) stages under field conditions.

RESUMO: O Brasil dispõe de um dos maiores rebanhos bovinos comerciais do mundo, sendo natural que junto a esse rebanho, coexista uma enorme quantidade de espécies parasitárias; dentre estes o carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus que interfere na produtividade animal, causando prejuízos à pecuária de corte e leite. A utilização de acaricidas químicos no controle deste ácaro tem causado o surgimento de populações resistentes e neste sentido, controles alternativos utilizando plantas como fontes de acaricidas botânicos têm se mostrado eficazes. Eugenia pyriformis Cambess é uma planta brasileira com atividades antioxidante e antimicrobiana, entretanto não há relatos da atividade acaricida. O objetivo do presente estudo consistiu na avaliação do potencial acaricida e larvicida do óleo essencial das folhas de E. pyriformis sobre o carrapato bovino nos diferentes estágios do ciclo reprodutivo. As folhas foram coletadas, secas e o OE extraído por hidrodestilação (3 horas) em aparelho Clevenger modificado. A análise química foi realizada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG/EM) sendo identificados 32 compostos, pertencentes à classe sesquiterpenos: hidrocarbonetos (17.98%) e oxigenados (81.96%); tendo como majoritários o spathulenol (43,65%) e caryophylene oxide (12,17%). O OE foi avaliado pelo teste de imersão de adultos nas concentrações (500,00 a 3,12mg/mL) onde foram mensurados os parâmetros: mortalidade das fêmeas (%), eclodibilidade dos ovos (%) e eficiência do produto (%). As larvas foram avaliadas pelo teste de imersão larval (Larval Packet Test) nas concentrações que variaram de 25,00 a 0,00004mg/mL. Foram determinadas as concentrações letais (CLs) necessárias para matar 50 e 99,9% das fêmeas adultas e das larvas utilizando a análise de Probitos. As CL50 e CL99,9 do OE foram (0,06 e 24,60mg/mL) para as larvas e (1.208,80 e 2.538mg/mL) para as fêmeas adultas, respectivamente. Outro parâmetro avaliado em nossa pesquisa foi mensurar a ação do OE no ciclo de vida livre das larvas de R.(B.) microplus; onde as larvas foram depositadas em vasos com Brachiaria decumbens e após migração destas para o ápice das folhas, foi aspergido solução contendo a CL99,9 (24,60mg/mL) do OE. Após 24 horas, 72,25% das larvas morreram indicando que houve estabilidade do OE quando submetido a condições de temperatura e umidade não controladas. O mecanismo de ação pelo qual o OE matou as larvas e fêmeas adultas foi investigado pelo método bioautográfico, indicando uma inibição de 3,15mg/mL do óleo essencial sobre a enzima acetilcolinesterase (AChE). Os resultados encontrados no presente experimento indicaram que o óleo essencial de E. pyriformis é uma alternativa no controle do carrapato bovino no estágio larval (parasitário) e no ciclo de vida livre (estágio não parasitário) em condições de campo.

Biocidal potential of Eugenia pyriformis essential oil in the control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus in the free-living cycle / Potencial biocida do óleo essencial de Eugenia pyriformis Cambess no controle de Rhipicephalus (Boophilus) microplus no ciclo de vida livre

Brazil has one of the largest commercial cattle herds in the world, which naturally coexist with an enormous number of parasitic species. Southern cattle tick, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, is among these species, interfering with animal productivity and causing losses to the beef and dairy cattle sector. The use of chemical acaricides in the control of this mite has resulted in the emergence of resistant populations. In this sense, alternative control measures using plants as sources of botanical acaricides have shown to be effective. Eugenia pyriformis Cambess is a Brazilian plant with antioxidant and antimicrobial activity; however, there are no reports on its acaricidal activity in the literature. The present study aimed to evaluate the acaricidal and larvicidal potential of E. pyriformis leaf essential oil (EO) on southern cattle tick at different stages of the reproductive cycle. E. pyriformis leaves were collected and dried, and had their EO extracted by hydrodistillation (3h) using a modified Clevenger apparatus. Chemical analysis was performed by gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC/MS), and 32 compounds belonging to the sesquiterpene class were identified: hydrocarbons (17.98%) and oxygenated forms (81.96%), with spathulenol (43.65%) and caryophyllene oxide (12.17%) as the most common. The EO was evaluated by the Adult Immersion Test at the concentrations (500.00 to 3.12mg/mL) in which the following parameters were measured: mortality of females (%), hatchability of eggs (%), and product efficiency (%). Larvae were assessed by the Larval Packet Test at concentrations ranging from 25.00 to 0.00004mg/mL. Lethal concentrations (LC) required for killing 50 and 99.9% of adult females and larvae were determined using Probit analysis. LC50 and LC99.9 of EO were 0.06 and 24.60mg/mL and 1,208.80 and 2,538mg/mL for larvae and adult females, respectively. Action of the EO in the free-living cycle of R. (B.) microplus larvae was another parameter assessed. To this end, the larvae were deposited in pots containing Brachiaria decumbens and, after migration to the leaf apex, a solution containing LC99.9 (24.60mg/mL) of the EO was sprayed. After 24h, 72.25% of the larvae had died, indicating stability of the EO when subjected to uncontrolled temperature and humidity conditions. The mechanism of action through which the EO killed the larvae and adult females was investigated by the Bioautographic Method, which showed inhibition of 3.15mg/mL of the EO on the acetylcholinesterase (AChE) enzyme. The results found in the present experiment indicate that E. pyriformis essential oil is an alternative in the control of southern cattle tick in the larval (parasitic) and free-living cycle (non-parasitic) stages under field conditions.(AU)

O Brasil dispõe de um dos maiores rebanhos bovinos comerciais do mundo, sendo natural que junto a esse rebanho, coexista uma enorme quantidade de espécies parasitárias; dentre estes o carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus que interfere na produtividade animal, causando prejuízos à pecuária de corte e leite. A utilização de acaricidas químicos no controle deste ácaro tem causado o surgimento de populações resistentes e neste sentido, controles alternativos utilizando plantas como fontes de acaricidas botânicos têm se mostrado eficazes. Eugenia pyriformis Cambess é uma planta brasileira com atividades antioxidante e antimicrobiana, entretanto não há relatos da atividade acaricida. O objetivo do presente estudo consistiu na avaliação do potencial acaricida e larvicida do óleo essencial das folhas de E. pyriformis sobre o carrapato bovino nos diferentes estágios do ciclo reprodutivo. As folhas foram coletadas, secas e o OE extraído por hidrodestilação (3 horas) em aparelho Clevenger modificado. A análise química foi realizada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG/EM) sendo identificados 32 compostos, pertencentes à classe sesquiterpenos: hidrocarbonetos (17.98%) e oxigenados (81.96%); tendo como majoritários o spathulenol (43,65%) e caryophylene oxide (12,17%). O OE foi avaliado pelo teste de imersão de adultos nas concentrações (500,00 a 3,12mg/mL) onde foram mensurados os parâmetros: mortalidade das fêmeas (%), eclodibilidade dos ovos (%) e eficiência do produto (%). As larvas foram avaliadas pelo teste de imersão larval (Larval Packet Test) nas concentrações que variaram de 25,00 a 0,00004mg/mL. Foram determinadas as concentrações letais (CLs) necessárias para matar 50 e 99,9% das fêmeas adultas e das larvas utilizando a análise de Probitos. As CL50 e CL99,9 do OE foram (0,06 e 24,60mg/mL) para as larvas e (1.208,80 e 2.538mg/mL) para as fêmeas adultas, respectivamente. Outro parâmetro avaliado em nossa pesquisa foi mensurar a ação do OE no ciclo de vida livre das larvas de R.(B.) microplus; onde as larvas foram depositadas em vasos com Brachiaria decumbens e após migração destas para o ápice das folhas, foi aspergido solução contendo a CL99,9 (24,60mg/mL) do OE. Após 24 horas, 72,25% das larvas morreram indicando que houve estabilidade do OE quando submetido a condições de temperatura e umidade não controladas. O mecanismo de ação pelo qual o OE matou as larvas e fêmeas adultas foi investigado pelo método bioautográfico, indicando uma inibição de 3,15mg/mL do óleo essencial sobre a enzima acetilcolinesterase (AChE). Os resultados encontrados no presente experimento indicaram que o óleo essencial de E. pyriformis é uma alternativa no controle do carrapato bovino no estágio larval (parasitário) e no ciclo de vida livre (estágio não parasitário) em condições de campo.(AU)

Biocidal potential of Eugenia pyriformis essential oil in the control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus in the free-living cycle / Potencial biocida do óleo essencial de Eugenia pyriformis Cambess no controle de Rhipicephalus (Boophilus) microplus no ciclo de vida livre

Brazil has one of the largest commercial cattle herds in the world, which naturally coexist with an enormous number of parasitic species. Southern cattle tick, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, is among these species, interfering with animal productivity and causing losses to the beef and dairy cattle sector. The use of chemical acaricides in the control of this mite has resulted in the emergence of resistant populations. In this sense, alternative control measures using plants as sources of botanical acaricides have shown to be effective. Eugenia pyriformis Cambess is a Brazilian plant with antioxidant and antimicrobial activity; however, there are no reports on its acaricidal activity in the literature. The present study aimed to evaluate the acaricidal and larvicidal potential of E. pyriformis leaf essential oil (EO) on southern cattle tick at different stages of the reproductive cycle. E. pyriformis leaves were collected and dried, and had their EO extracted by hydrodistillation (3h) using a modified Clevenger apparatus. Chemical analysis was performed by gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC/MS), and 32 compounds belonging to the sesquiterpene class were identified: hydrocarbons (17.98%) and oxygenated forms (81.96%), with spathulenol (43.65%) and caryophyllene oxide (12.17%) as the most common. The EO was evaluated by the Adult Immersion Test at the concentrations (500.00 to 3.12mg/mL) in which the following parameters were measured: mortality of females (%), hatchability of eggs (%), and product efficiency (%). Larvae were assessed by the Larval Packet Test at concentrations ranging from 25.00 to 0.00004mg/mL. Lethal concentrations (LC) required for killing 50 and 99.9% of adult females and larvae were determined using Probit analysis. LC50 and LC99.9 of EO were 0.06 and 24.60mg/mL and 1,208.80 and 2,538mg/mL for larvae and adult females, respectively. Action of the EO in the free-living cycle of R. (B.) microplus larvae was another parameter assessed. To this end, the larvae were deposited in pots containing Brachiaria decumbens and, after migration to the leaf apex, a solution containing LC99.9 (24.60mg/mL) of the EO was sprayed. After 24h, 72.25% of the larvae had died, indicating stability of the EO when subjected to uncontrolled temperature and humidity conditions. The mechanism of action through which the EO killed the larvae and adult females was investigated by the Bioautographic Method, which showed inhibition of 3.15mg/mL of the EO on the acetylcholinesterase (AChE) enzyme. The results found in the present experiment indicate that E. pyriformis essential oil is an alternative in the control of southern cattle tick in the larval (parasitic) and free-living cycle (non-parasitic) stages under field conditions.(AU)

O Brasil dispõe de um dos maiores rebanhos bovinos comerciais do mundo, sendo natural que junto a esse rebanho, coexista uma enorme quantidade de espécies parasitárias; dentre estes o carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus que interfere na produtividade animal, causando prejuízos à pecuária de corte e leite. A utilização de acaricidas químicos no controle deste ácaro tem causado o surgimento de populações resistentes e neste sentido, controles alternativos utilizando plantas como fontes de acaricidas botânicos têm se mostrado eficazes. Eugenia pyriformis Cambess é uma planta brasileira com atividades antioxidante e antimicrobiana, entretanto não há relatos da atividade acaricida. O objetivo do presente estudo consistiu na avaliação do potencial acaricida e larvicida do óleo essencial das folhas de E. pyriformis sobre o carrapato bovino nos diferentes estágios do ciclo reprodutivo. As folhas foram coletadas, secas e o OE extraído por hidrodestilação (3 horas) em aparelho Clevenger modificado. A análise química foi realizada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG/EM) sendo identificados 32 compostos, pertencentes à classe sesquiterpenos: hidrocarbonetos (17.98%) e oxigenados (81.96%); tendo como majoritários o spathulenol (43,65%) e caryophylene oxide (12,17%). O OE foi avaliado pelo teste de imersão de adultos nas concentrações (500,00 a 3,12mg/mL) onde foram mensurados os parâmetros: mortalidade das fêmeas (%), eclodibilidade dos ovos (%) e eficiência do produto (%). As larvas foram avaliadas pelo teste de imersão larval (Larval Packet Test) nas concentrações que variaram de 25,00 a 0,00004mg/mL. Foram determinadas as concentrações letais (CLs) necessárias para matar 50 e 99,9% das fêmeas adultas e das larvas utilizando a análise de Probitos. As CL50 e CL99,9 do OE foram (0,06 e 24,60mg/mL) para as larvas e (1.208,80 e 2.538mg/mL) para as fêmeas adultas, respectivamente. Outro parâmetro avaliado em nossa pesquisa foi mensurar a ação do OE no ciclo de vida livre das larvas de R.(B.) microplus; onde as larvas foram depositadas em vasos com Brachiaria decumbens e após migração destas para o ápice das folhas, foi aspergido solução contendo a CL99,9 (24,60mg/mL) do OE. Após 24 horas, 72,25% das larvas morreram indicando que houve estabilidade do OE quando submetido a condições de temperatura e umidade não controladas. O mecanismo de ação pelo qual o OE matou as larvas e fêmeas adultas foi investigado pelo método bioautográfico, indicando uma inibição de 3,15mg/mL do óleo essencial sobre a enzima acetilcolinesterase (AChE). Os resultados encontrados no presente experimento indicaram que o óleo essencial de E. pyriformis é uma alternativa no controle do carrapato bovino no estágio larval (parasitário) e no ciclo de vida livre (estágio não parasitário) em condições de campo.(AU)

Larvicidal, cytotoxic and genotoxic effects of aqueous leaf extract ofJatropha mollissima (Pohl) Baill / Efeitos larvicida, citotóxico e genotóxico do extrato aquoso das folhas de Jatrophamollissima (Pohl) Baill

The present study aimed to evaluate the larvicidal effect of aqueous leaf extract fromJatropha mollissima on the larvae of Aedes aegypti and analyze its cytotoxic and genotoxic activity in the Alliumcepa test. Larvae of the mosquito were exposed to the negative and positive controls (distilled water anddiflubenzuron, 0.003 mg mL-1, respectively) and to leaf extract concentrations of 0.001, 0.005, 0.01, 0.02,0.04, 0.06, 0.08 and 0.1 mg mL-1. The mortality rate was evaluated every 24 hours over five days. For thecytotoxic and genotoxic analyses, roots of A. cepa were exposed to the negative (distilled water) and positivecontrol (trifluralin, 0.84 ppm) and to different leaf extract concentrations (0.01, 0.1, 1 and 10 mg mL-1) for24 hours. The statistical analyses were performed by Kruskal-Wallis test (p < 0.05). The leaf extractpresented promising larvicidal activity at the concentrations of 0.08 and 0.1 mg mL-1, and none of theconcentrations evaluated in A. cepa exhibited cytotoxic or genotoxic effect. Since the larvicidal action of J.mollissima and the absence of cellular toxicity have been demonstrated, further studies are recommended todetermine the mechanism of action of the extract as a possible natural larvicide.(AU)

O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito larvicida do extrato aquoso das folhas deJatropha mollissima sobre as larvas de Aedes aegypti e analisar sua atividade citotóxica e genotóxica no testeAllium cepa. As larvas do mosquito foram expostas aos controles negativo e positivo (água destilada ediflubenzuron, 0,003 mg mL-1, respectivamente) e ao extrato foliar nas concentrações de 0,001; 0,005; 0,01;0,02; 0,04; 0,06; 0,08 e 0,1 mg mL-1. A taxa de mortalidade foi avaliada a cada 24horas durante cinco dias.Para as análises citotóxica e genotóxica, as raízes de A. cepa foram expostas ao controle negativo (águadestilada) e positivo (trifluralina, 0,84 ppm) e nas concentrações (0,01; 0,1; 1 e 10 mg mL-1) do extrato foliarpor 24 horas. Análises estatísticas foram realizadas pelo teste de Kruskal-Wallis (p < 0,05). O extrato foliarapresentou atividade larvicida promissora nas concentrações de 0,08 e 0,1 mg mL-1, e nenhuma dasconcentrações avaliadas em A. cepa exibiu efeito citotóxico ou genotóxico. Uma vez demonstrada a açãolarvicida de J. mollissima e a ausência de toxicidade celular, mais estudos são recomendados para determinaro mecanismo de ação do extrato como um possível larvicida natural.(AU)

Larvicidal, cytotoxic and genotoxic effects of aqueous leaf extract ofJatropha mollissima (Pohl) Baill / Efeitos larvicida, citotóxico e genotóxico do extrato aquoso das folhas de Jatrophamollissima (Pohl) Baill

The present study aimed to evaluate the larvicidal effect of aqueous leaf extract fromJatropha mollissima on the larvae of Aedes aegypti and analyze its cytotoxic and genotoxic activity in the Alliumcepa test. Larvae of the mosquito were exposed to the negative and positive controls (distilled water anddiflubenzuron, 0.003 mg mL-1, respectively) and to leaf extract concentrations of 0.001, 0.005, 0.01, 0.02,0.04, 0.06, 0.08 and 0.1 mg mL-1. The mortality rate was evaluated every 24 hours over five days. For thecytotoxic and genotoxic analyses, roots of A. cepa were exposed to the negative (distilled water) and positivecontrol (trifluralin, 0.84 ppm) and to different leaf extract concentrations (0.01, 0.1, 1 and 10 mg mL-1) for24 hours. The statistical analyses were performed by Kruskal-Wallis test (p < 0.05). The leaf extractpresented promising larvicidal activity at the concentrations of 0.08 and 0.1 mg mL-1, and none of theconcentrations evaluated in A. cepa exhibited cytotoxic or genotoxic effect. Since the larvicidal action of J.mollissima and the absence of cellular toxicity have been demonstrated, further studies are recommended todetermine the mechanism of action of the extract as a possible natural larvicide.

O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito larvicida do extrato aquoso das folhas deJatropha mollissima sobre as larvas de Aedes aegypti e analisar sua atividade citotóxica e genotóxica no testeAllium cepa. As larvas do mosquito foram expostas aos controles negativo e positivo (água destilada ediflubenzuron, 0,003 mg mL-1, respectivamente) e ao extrato foliar nas concentrações de 0,001; 0,005; 0,01;0,02; 0,04; 0,06; 0,08 e 0,1 mg mL-1. A taxa de mortalidade foi avaliada a cada 24horas durante cinco dias.Para as análises citotóxica e genotóxica, as raízes de A. cepa foram expostas ao controle negativo (águadestilada) e positivo (trifluralina, 0,84 ppm) e nas concentrações (0,01; 0,1; 1 e 10 mg mL-1) do extrato foliarpor 24 horas. Análises estatísticas foram realizadas pelo teste de Kruskal-Wallis (p < 0,05). O extrato foliarapresentou atividade larvicida promissora nas concentrações de 0,08 e 0,1 mg mL-1, e nenhuma dasconcentrações avaliadas em A. cepa exibiu efeito citotóxico ou genotóxico. Uma vez demonstrada a açãolarvicida de J. mollissima e a ausência de toxicidade celular, mais estudos são recomendados para determinaro mecanismo de ação do extrato como um possível larvicida natural.

Atividade de Pleurotus ostreatus, P. florida e P. djamor em larvas e adultos de Lucilia cuprina

Lucilia cuprina (Diptera: Calliphoridae), é de distribuição mundial e possui grande importância como vetor de doenças para humanos e animais, sendo que em ovinos pode resultar na perda de lã, redução da qualidade da lã e morte. O uso de inseticidas é a forma mais aplicada para o controle desses dípteros, no entanto, com a crescente resistência do inseto aos diversos princípios ativos utilizados, esses tratamentos estão se tornando ineficazes e o impacto pelo uso excessivo desses produtos pode implicar em perdas na saúde humana, animal e desequilíbrio ambiental. Diante do exposto apresentado, estudos têm sido realizados com produtos naturais de origem vegetal, de algas e fungos no controle desses insetos. Os cogumelos do gênero Pleurotus estão distribuídos em uma ampla variedade de cores, e espécies que apresentam compostos bioativos potencialmente medicinais, com ação antiparasitária. Devido ao potencial do uso de fungos no controle de patógenos objetivou-se, neste estudo, verificar a ação do gênero Pleurotus, um cogumelo comestível, no controle da mosca Lucilia cuprina. Os efeitos de extratos aquosos (EA) dos fungos Pleurotus ostreatus, Pleurotus djamor e Pleurotus florida foram avaliados em larvas e adultos de Lucilia cuprina. Nos testes de imersão de larvas, o EA de P. florida foi o único que apresentou atividade larvicida contra L. cuprina, com EC50 de 11,42 mg/ml. No ensaio com moscas, onde foi realizada a técnica de borrifamento contendo 1ml de cada solução do extrato em 30 insetos adultos por concentração, todos os EA apresentaram atividade adulticida em todas as concentrações, sendo que P. ostreatus apresentou os melhores resultados, com mortalidade entre 75,86 a 100%. As análises químicas dos extratos aquosos indicaram a presença de ácido tridecanóico, ácido tetradecanóico, ácido linolelaídico, ácido 9,15 octadecadiênico e ácido oxálico no EA de P. ostreatus, de ácido tridecanóico, ácido linolelaídico, ácido undecanóico, ácido tetradecanóico, ácido oxálico em P. djamor. Nossos resultados demonstraram um importante efeito larvicida de P. florida e adulticida de todos os extratos aquosos, com destaque para P. ostreatus. No entanto, mais investigações são necessárias para estabelecer a atividade de Pleurotus sobre L. cuprina.

Lucilia cuprina, Diptera, Calliphoridae, has great importance due to being a disease vector for humans and animals, having global distribution and its infestation in sheep can result in loss and reduction of wool quality and death. The use on pesticides is the way to control these diptera, however, with the growing insect resistance to several of the active principles used, these treatments are becoming ineffective and the impact of excessive use of these products can cause loss to human and animal health and environmental imbalance. In light of this, studies have been performed using natural products from plants, algae and fungi in the control of these insects. The mushrooms of the Pleurotus genus are available in a wide variety of colors and species that present potentially medicinal bio-active compounds, with anti-parasitic action. Due to the potential of using fungi in pathogen control, this study aimed to verify the action of the Pleurotus genus, an edible mushroom, in the control of the Lucilia cuprina fly. The effects of aqueous extracts (AE) of the Pleurotus ostreatus, Pleurotus djamor and Pleurotus florida fungi were evaluated in Lucilia cuprina larvae and adults. In the larvae immersion tests, the P. florida AE was the only one that presented larvicide activity against L. cuprina, with EC50 of 11.42 mg/ml. In the assay with flies, where the spraying technique was applied with 1ml of each extract solution in 30 adult insects, all AE presented adulticide activity in all concentrations, P. ostreatus presenting the best results, with mortality between 75.86 and 100%. The chemical analysis of the aqueous extracts indicated the presence of tridecanoic acid, tetradecanoic acid, linolenic acid, 9,15 octadecadienoic acid and oxalic acid in the P. ostreatus AE, the presence of tridecanoic acid, linolenic acid, undecanoic acid, tetradecanoic acid and oxalic acid in the P. djamor AE and, in P. florida, none of these compounds was found. Our results showed an important larvicide effect of P. florida and adulticide effect of all aqueous extracts, highlighting P. ostreatus. However, more research is needed to establish the activity of Pleurotus on L. cuprina.

EEFICÁCIA DO LOTILANER NO TRATAMENTO DE MIÍASE CAUSADA POR Dermatobia hominis (DIPTERA: CUTEREBRIDAE) EM CÃES NATURALMENTE INFESTADOS

Larvas de Dermatobia hominis promovem lesões cutaneas conhecidas como dermatobiose. Estas são intensamente incômodas, dolorosas e a presença concomintante de infecções bacterianas e miiases acarreta no gravamento do quadro. Um tratamento eficaz deve eliminar ou matar as larvas existentes e promover a cicatrização da ferida o mais precoce possível. A extração manual de larvas por digito pressão e o método de tratamento mais empregado, entretanto, pode acarretar em inteso desconforto ao animal. Uma terapia segura, indolor e eficaz tem incetivado a busca de novas opções farmaceuticas. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia de lotilaner no controle de D. hominis em cães naturalmente infectados. Para as avaliaçãoes foram utilizados 12 cães, sem raça definada, com idade entre um e dez anos de vida, de ambos os sexos, com peso variando de 10 a 20 kg, com no mínimo três larvas em cada, localizadas em qualquer região do corpo. Os indivíduos foram medicados com lotilaner, seguindo as recomendações de bula para o tratamento de outras ectoparasitoses, na dose mínima de 20 mg/kg, administrado por via oral em dose única. Após a administração os animais permaneceram em ambiente domiciliar, onde foi realizada a avaliação e a retirada larval com +6horas para verificar a atividade bernecida da medicação. As larvas que apresentassem um mínimo de motilidade após a remoção foram consideradas vivas. A eficácia do lotilaner, foi calculada pela seguinte fórmula: [100 x (número de larvas mortas - número de larvas vivas) / número total de larvas]. Foram recuperadas 19 larvas vivas, representado eficácia de 80,6% após seis horas da administração da isoxazolina lotilaner. Ressalta-se que as demais larvas recuperadas apresentaram discreta motilidade, sugerindo que a eficácia poderia ser maior, caso a retirada fosse realizada em um período posterior. Conclui-se que o lotilaner administrado por via oral em dose única de 20mg / kg foi eficaz no controle de D. hominis em cães naturalmente infectados.

The human bot-fly cause skin lesions known as dermatobiosis. These are intensely uncomfortable, painful and the concomitant presence of bacterial infections and myiasis causes recording of the condition. Effective treatment should eliminate or kill existing larvae and promote wound healing as early as possible. Manual extraction of larvae by digital pressure and the most used treatment method, however, can cause intense discomfort to the animal. Safe, painless and effective therapy has encouraged the search for new pharmaceutical options. The aim of this study was to evaluate the efficacy of lotilaner in the control of D. hominis in naturally infected dogs. For the evaluations, 12 dogs, of a defined breed, aged between one and ten years old, of both sexes, weighing between 10 and 20 kg, with at least three larvae in each, located in any region of the body, were used. The individuals were medicated with lotilaner, following the recommendations of the package insert for the treatment of other ectoparasitosis, at a minimum dose of 20 mg/kg, administered orally in a single dose. After administration, the animals remained in the home environment, where the evaluation and larval removal was carried out with +6 hours to verify the activity provided by the medication. Larvae that showed minimal motility after removal were considered alive. The lotilaner efficacy was calculated by the following formula: [100 x (number of dead larvae - number of live larvae) / total number of larvae]. Nineteen live larvae were recovered, representing an efficacy of 80.6% six hours after the administration of isoxazoline lotilaner. It is noteworthy that the other recovered larvae showed mild motility, suggesting that the effectiveness could be greater if removal was performed at a later period. It is concluded that lotilaner administered orally in a single dose of 20mg/kg was effective in controlling D. hominis in naturally infected dogs

Assessment of different Lippia sidoides genotypes regarding their acaricidal activity against Rhipicephalus (Boophilus) microplus / Avaliação da atividade carrapaticida do óleo essencial de diferentes genótipos de Lippia sidoides sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus

Abstract The aim of this study was to select different genotypes of Lippia sidoides with the highest activity against larvae and engorged females of the tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus. The germplasms studied were LSID006, LSID102, LSID103 and LSID104. The LSID104 genotype, that presented carvacrol as a major constituent, was the germplasm with the worst larvicide effect (LC50 2.99 mg/mL). The LSID006 genotype was the least effective against engorged females (LC50 12.46 mg/mL), and it was chemically similar to the LSID102 genotype, which presented the highest acaricide activity (LC50 2.81 mg/mL). We conclude that chemical similarity of the germplasms was not correlated with acaricide activity against R. (B.) microplus. The essential oil of L. sidoides is a potent natural agent. However, the findings of this work provide a better understanding for product development based on this natural product, which must consider synergic effects or the action of minor compounds.(AU)

Resumo O objetivo deste trabalho foi selecionar genótipos de Lippia sidoides que apresentem maiores atividades em larvas e fêmeas ingurgitadas do carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Os genótipos estudados foram LSID006, LSID102, LSID103 e LSID104. O genótipo LSID104, o único a conter o monoterpeno carvacrol como um dos principais constituintes, foi o que apresentou o menor efeito larvicida (CL50 2,99 mg/mL). O genótipo LSID006 apresentou menor efeito sobre fêmeas ingurgitadas (CL50 12,46 mg/mL), entretanto foi quimicamente similar ao genótipo LSID102, que apresentou a maior atividade carrapaticida (CL50 2,81 mg/mL). Conclui-se que a semelhança química dos genótipos não se correlaciona com a atividade carrapaticida contra R. (B.) microplus. O óleo essencial de L. sidoides é um agente natural potente e os resultados deste trabalho proporcionam um melhor entendimento para o desenvolvimento de produtos com base neste produto natural, devendo ser considerado os efeitos sinérgicos ou a ação de compostos presentes em menores concentrações.(AU)

EFICÁCIA DO SAROLANER NO TRATAMENTO DE MIÍASES EM CÃES CAUSADAS POR Dermatobia hominis (DIPTERA: CUTEREBRIDAE)

As lesões causadas por bernes são bastante desconfortáveis e dolorosas para os cães, podendo causar infecções bacterianas secundárias e predispor a outras miíases. Um tratamento eficaz deve eliminar ou matar as larvas existentes e promover a cicatrização da ferida o mais precoce possível. Entretanto, atualmente, o tratamento recomendado para esse parasito consiste na retirada manual das larvas, o que causa muito desconforto para o animal parasitado, tanto que, em alguns casos, há a necessidade de sedação para realização do procedimento. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia bernicida do sarolaner para o tratamento de Dermatobia hominis em cães naturalmente infestados. Foram incluídos dez cães, sem raça definida, com idade variando entre dois e seis anos, independente da variável sexo, com peso entre 11,4 e 19,1 kg, com no mínimo três larvas. No total foram contabilizadas 75 larvas, com média de 7,5 larvas por animal. A maior parte do parasitismo (46 larvas) estava localizado na região lateral dos animais. Os animais foram medicados com sarolaner na dose de 2,0 mg/kg, administrado por via oral em dose única, seguindo as recomendações em bula para o tratamento de outras ectoparasitoses. Após o tratamento, os animais foram mantidos em seus domicílios e foram feitas observações para verificar a atividade de eliminação e o efeito bernicida do fármaco após 24 horas da administração da medicação. Foi considerada larva viva qualquer parasito que apresentasse motilidade após remoção mecânica. Como critérios de avaliação da eficácia do sarolaner, o efeito larvicida foi calculado para cada animal pela fórmula: [Número de larvas vivas após o tratamento número de larvas vivas antes do tratamento) / Número de larvas vivas antes do tratamento] × 100. Após 24 horas da administração da medicação todas as larvas foram encontradas mortas, ainda que localizadas na derme dos animais. Nenhum animal apresentou efeito adverso ou alteração do comportamento após a utilização da isoxazolina. Conclui-se que o sarolaner administrado em dose única de 2,0mg/kg, por via oral, foi 100% eficaz em cães naturalmente infestados por D. hominis.

Lesions caused by breeds are quite uncomfortable and painful for dogs, and can cause secondary bacterial infections and predispose to other myiasis. Effective treatment should eliminate or kill existing larvae and promote wound healing as early as possible. However, currently, the recommended treatment for this parasite consists of manual removal of the larvae, which causes a lot of discomfort for the parasitized animal, so much so that, in some cases, there is a need for sedation to perform the procedure. The aim of this study was to evaluate the bernicidal efficacy of sarolaner for the treatment of Dermatobia hominis in naturally infested dogs. Ten mongrel dogs were included, aged between one and ten years, regardless of the sex variable, weighing between 11.4 and 19.1 kg, with at least three larvae. In total 75 larvae were counted, with an average of 7.5 larvae per animal. Most of the parasitism (46 larvae) was located in the lateral region of the animals. The animals were medicated with sarolaner at a dose of 2.0 mg / kg, administered orally in a single dose, following the recommendations in the package insert for the treatment of other ectoparasitoses. After treatment, the animals were kept in their homes and observations were made to verify the elimination activity and the bernicidal effect of the drug after 24 hours of medication administration. Any parasite that showed motility after mechanical removal was considered a live larva. As criteria for assessing the efficacy of sarolaner, the larvicidal effect was calculated for each animal using the formula: [Number of live larvae after treatment - number of live larvae before treatment) / Number of live larvae before treatment] × 100. After 24 hours after medication administration, all larvae were found dead, although located in the animals' dermis. No animal had an adverse effect or behavior change after using isoxazoline. It is concluded that sarolaner administered in a single dose of 2.0mg / kg, orally, was 100% effective in dogs naturally infested by D. hominis.

PRODUÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE ENZIMAS QUITINOLÍTICAS PRODUZIDAS PELO FUNGO Trichoderma asperellum E SUA APLICAÇÃO NO BIOCONTROLE DO CARRAPATO Rhipicephalus microplus E DO INSETO Aedes aegypti

Os acaricidas ou inseticidas químicos são amplamente utilizados para o controle de pragas ou vetores de interesse agropecuário e saúde pública em todo o mundo. As moléculas existentes no mercado possuem em média uma duração de uma década devido à seleção genética de indivíduos resistentes. Além disso, estes compostos químicos podem afetar outros organismos vivos, contribuindo para a poluição ambiental e contaminação de produtos de origem animal ou vegetal para consumo humano. Com opções para o controle químico de pragas e parasitos cada vez mais escassos, trabalhos são descritos estimulando a pesquisa de métodos de controle alternativos e eficazes. O uso de organismos vivos ou produtos de seu metabolismo para o controle de pragas ou doenças, sejam eles obtidos por manipulação genética ou não, são chamados de biocontrole. Diversos estudos demonstram o uso de fungos como agentes alternativos ou auxiliares para o controle de vetores, com baixo impacto ambiental, fácil aplicação e degradação. Como exemplo destes microrganismos destaca-se o fungo Trichoderma asperellum. O gênero Trichoderma corresponde a fungos de vida livre em sua maioria, de reprodução assexuada, encontrados de clima temperado a tropical. Estes fungos são conhecidos pela sua capacidade de agentes de controle biológico, frente à fitopatógenos. Esta ação pode ocorrer pela liberação de enzimas ou outros metabólitos secundários. Objetivou-se com este trabalho avaliar o potencial uso do fungo Trichoderma asperellum cultivado em diferentes fontes de carbono (quitina comercial (CWDE), tegumento externo quitinoso do carrapato Rhipicephalus microplus (T-CWDE) e larvas de Aedes aegypti (L-CWDE)), como agente produtor de enzimas do complexo quitinilítico, para o biocontrole dos vetores Rhipicephalus microplus e Aedes aegypti. O fungo foi cultivado em meio MEA e os esporos, juntamente com diferentes fontes quitinosas, foram adicionados ao meio TLE e levados a incubação por seis dias em temperatura de 38ºC. O extrato bruto, resultante da indução pelas fontes de carbono, após passar por processo de diálise e liofilização, foi utilizado para realização dos testes de biocarrapaticidograma e larvicida. Os resultados demonstraram que os meios T-CWDE e L-CWDE apresentaram uma maior atividade contra ambas as larvas de carrapato Rhipicephalus microplus e L3 de Aedes aegypti em comparação com o CWDE. A ação enzimática nos vetores alvo também foi evidenciada por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e microscopia eletrônica de transmissão (MET), sugerindo que a estratégia biotecnológica proposta neste trabalho tem potencial para ser explorada para o biocontrole desses vetores, visto a sua viabilidade e os prováveis benefícios como a geração de compostos naturais bioativos e biodegradáveis comparados aos pesticidas convencionais.

Chemical acaricides or insecticides are widely used to control pests or vectors of agricultural interest and public health worldwide. The molecules on the market have an average duration of a decade due to the genetic selection of resistant individuals. In addition, these chemical compounds can affect other living organisms, contributing to environmental pollution and contamination of products of animal or vegetable origin for human consumption. With options for chemical control of pests and parasites increasingly scarce, studies are described stimulating the search for alternative and effective control methods. The use of living organisms or products of their metabolism to control pests or diseases, whether obtained by genetic manipulation or not, are called biocontrol. Several studies demonstrate the use of fungi as alternative or auxiliary agents for vector control, with low environmental impact, easy application and degradation. As an example of these microorganisms, the fungus Trichoderma asperellum stands out. The genus Trichoderma corresponds to free-living fungi, mostly of asexual reproduction, found from temperate to tropical climates. These fungi are known for their capacity as biological control agents, against phytopathogens. This action can occur by the release of enzymes or other secondary metabolites. The objective of this work was to evaluate the potential use of the fungus Trichoderma asperellum grown on different carbon sources (commercial chitin (CWDE), external chitinous tegument of the tick Rhipicephalus microplus (T-CWDE) and Aedes aegypti (L-CWDE) larvae) , as an agent producing enzymes of the chitinylitic complex, for the biocontrol of the vectors Rhipicephalus microplus and Aedes aegypti. The fungus was grown in MEA medium and the spores, together with different chitinous sources, were added to the TLE medium and incubated for six days at a temperature of 38ºC. The crude extract, resulting from the induction by carbon sources, after undergoing the process of dialysis and lyophilization, was used to perform the biocarrapaticidogram and larvicide tests. The results showed that the T-CWDE and L-CWDE media showed greater activity against both the tick larvae Rhipicephalus microplus and L3 of Aedes aegypti compared to CWDE. The enzymatic action in the target vectors was also evidenced by scanning electron microscopy (SEM) and transmission electron microscopy (MET), suggesting that the biotechnological strategy proposed in this work has the potential to be explored for the biocontrol of these vectors, given their viability and the likely benefits such as the generation of natural bioactive and biodegradable compounds compared to conventional pesticides.

Implantação e avaliação da estratégia de controle das arboviroses em residências de gestantes no município de Caruaru, PE

A globalização e as transformações sociais, econômicas e geográficas, ocorrida nas últimas décadas, têm sido considerados fatores que contribuíram para as epidemias e emergência e reemergências de doenças infecciosas no mundo, entre elas as arboviroses, transmitidas por artrópode, como por exemplo, os da família Culicidae do gênero Aedes. A estratégia implantada no município de Caruaru, Pernambuco, Brasil, objetivou monitorar a residência de gestantes para evitar que as mesmas fossem acometidas pelas arboviroses. Foram cadastradas e georreferenciadas todas as gestantes que realizaram o pré-natal na rede pública de saúde e residentes na zona urbana do município no período de outubro de 2017 a 2018 e posteriormente a residência foi visitada mensalmente pelo ACE, com o intuito de inspecionar, orientar e eliminar possíveis criadouros do vetor. Foram cadastradas 2.365 gestantes, das quais 1.112 (47%) deram a luz, 53 (2,2%) tiveram a gestação interrompida, 241 (10,2%) mudaram de endereço impossibilitando prosseguir o acompanhamento e 959 (40,5%) ainda continuam sendo acompanhadas. Foram realizadas 10.049 visitas e 8.510 ações de controle equivalentes a uma cobertura de 84,7% das residências, inspecionados 22.618 depósitos, dos quais 1.650 (7,3%) foram eliminados e 11.828 (52,3%) depósitos vulneráveis foram tratados com larvicida. Em relação ao índice de infestação vetorial, foram observados valores de 13,4%, 11,5% e 9,9%, respectivamente, na primeira, segunda e terceira visitas, chegando a 6,0% nas ultimas visitas. Durante o período do estudo não houve confirmação de nenhum caso de arbovirose em gestantes, cujas residências foram monitoradas no município, enquanto os casos confirmados das arboviroses na população geral do município atingiu a incidência de 186,6 casos/100 mil habitantes no mesmo período. Este estudo sugere a intensificação, fortalecimento e a redução do intervalo de tempo das visitas realizadas pelos ACEs, principalmente nas residências de gestantes, devido às graves sequelas provocadas pelas arboviroses em gestantes.

Globalization and the social, economic and geographic transformations had occurred in the last decades and factors that contributed to the epidemics and emergence and reemergence of infectious diseases in the world, among them arboviruses, transmitted by an arthropod of the Culicidae (Endotoxin) family of the genus Aedes. The strategy implemented in the city of Caruaru, Pernambuco, Brazil, aimed to monitor the residence of pregnant women to prevent them from being affected by arboviruses. All the pregnant women who underwent prenatal care in the public health system and were residents of the urban area of the city from October 2017 to 2018 were registered and georeferenced, and later the residence was visited monthly by the ACE, with the purpose of inspecting, guiding and eliminate possible breeding sites of the vector. There were 2,365 pregnant women, of whom 1,112 (47%) gave birth, 53 (2.2%) had gestation interrupted, 241 (10.2%) changed their address and it was not possible to follow up and 959 (40.5%) are still being followed. A total of 10,049 visits and 8,510 control actions equivalent to a coverage of 84.7% of households were inspected, 22,618 of which were inspected, of which 1,650 (7.3%) were eliminated and 11,828 (52.3%) vulnerable deposits were treated with larvicide. Regarding the vector infestation index, values of 13.4%, 11.5% and 9.9%, respectively, were observed in the first, second and third visits, reaching 6.0% in the last visits. During the study period there was no confirmation of any case of arbovirose in pregnant women, whose residences were monitored in the municipality, while the confirmed cases of arboviruses in the population of the municipality reached the incidence of 186.6 cases / 100 thousand inhabitants in the same period. This study suggests the intensification, strengthening and reduction of the time interval of the visits performed by the ACEs, mainly in the residences of pregnant women, due to the severe sequels provoked by the arboviruses in pregnant women.

Avaliação ex situ de extratos vegetais no controle de Odonata com interesse na aquicultura

Insetos, da ordem Odonata, podem ser encontrados em viveiros de aquicultura, causando grandes prejuízos. O controle desses animais vem sendo feito com uso de inseticidas químicos, entretanto essas substâncias podem causar prejuízos ao meio ambiente, sendo o uso de bioinseticidas uma saída para a sua substituição. Este trabalho tem como objetivo utilizar extratos das plantas Azandirachta indica (nim), Melia azederach (cinamomo), Momordica charantia (melão de São Caetano), no controle de Odonata e verificar sua toxicidade em alevinos de tilápia do Nilo. Para isso foram confeccionados extratos de folhas das três plantas coletadas no estado do Paraná. Esse material foi submetido à secagem, à temperatura de 40°C por 48 horas, trituradas e peneiradas até dois mm. Para obtenção dos extratos foram utilizados 21,8g desse material misturado em 125ml de solução hidroalcoólica, agitado por 24 horas, e filtrado por duas vezes. Foram realizados dois pré-ensaios para refinar as doses a serem testadas, e ao final foi realizado o ensaio definitivo de toxidade aguda. Para o ensaio de de toxicidade aguda em Odonata realizou-se diluições para cada um dos três extratos, sendo para o nim: 0; 12,0; 12,5; 13,0; 13,5; 14,0; 14,5; 15,0; 15,5; 16,0; 16,5; 17,0; 17,5 mL/L, melão de São Caetano: 0; 7,0; 7,5; 8,0; 8,5; 9,0; 9,5 e 10 mL/L, e para o cinamomo: 0; 14,0; 14,5; 15,0; 15,5; 16,0; 16,5; 17,0; 17,5; 16,0; 16,5; 17,0;17,5; 18,0; 18,5; 19,0 mL/L. Todos tratamentos tiveram 10 repetições, totalizando 130 unidades experimentais (UE) para o nim, 80 para o melão de São Caetano e 160 para o cinamomo, distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, sendo que cada UE consistia em um recipientes de vidro de 250 ml compostas de uma Odonata e 150 ml da solução. Os indivíduos foram monitorados a cada seis horas por 48 h, a cada verificação foram contabilizados os indivíduos mortos. Esse bioensaio foi repetido três vezes. Após o experimento, calculou-se as concentrações letais que provocaram mortalidade em 50% e 99% dos indivíduos em 24 e 48 horas usando o cálculo de probits. As concentrações letais para as Odonata do extrato mais eficiente foram testadas para alevinos de tilápia do Nilo durante um período de 21 dias. Para isso, 80 alevinos com 2 a 3 g foram submetidos à essas concentrações. As concentrações letais de extrato de nim para as Odonata em 24 horas foram: CL50(24h)=16,62, e CL99(24h)=21,01mL/L. Para um período de 48h a CL50(48h)=14,8 e CL99(48h)=18,63mL/L. Para o extrato de cinamomo, a CL50(24h) foi de 17,6 e a CL99(24h)=21,40mL/L, para o período de 48h as concentrações letais foram CL50(48h)=16,32 e CL99(48h)=19,62mL/L. As Concentrações letais de melão de São Caetano foram: CL50(24h)=8,7; CL99(24h)=12,33; CL50(48h)=7,87 e CL99(48h)=11,35mL/L. Não foi verificada mortalidade dos alevinos durante o período do ensaio de toxicidade crônica, as brânquias dos peixes apresentaram baixo índice de lesões em concentrações mais baixas quando comparadas com as concentrações mais altas. Os três extratos, apresentaram potencial inseticida, contudo são necessárias altas concentração para provocar mortalidade nesses animais. O extrato de melão de São Caetano não apresentou toxidade aos alevinos, e diminuiu os parasitas branquiais nos peixes, no entanto causou mais lesões em concentrações altas.

Insects of the order Odonata can be found in aquaculture ponds, causing great damage. The control of these animals is performed using chemical insecticides, however these substances can cause damage to the environment, and the use of bioinsecticides is an outlet for their replacement. This work aims to use extracts of Azandirachta indica (neem), Melia azederach (chinaberry), Momordica charantia (bitter melon) plants in the control of Odonata and to verify their toxicity in Tilapia fingerlings. For this, leaf extracts of the 3 plants collected in the state of Paraná were made. This material was dried at 40 °C for 48 hours, crushed and sieved to 2 mm. To obtain the extracts, 21.8g of this material was mixed in 125ml of 70% alcohol solution, stirred for 24 hours, filtered twice. For the acute toxicity test in Odonata, dilutions were made for each of the three extracts, with neem: 0; 12.0; 12.5; 13.0; 13.5; 14.0; 14.5; 15.0; 15.5; 16.0; 16.5; 17.0; 17.5 mL /L, Bitter melon: 0; 7.0; 7.5; 8.0; 8.5; 9.0; 9.5 and 10 mL/L, and for chinaberry: 0; 14.0; 14.5; 15.0; 15.5; 16.0; 16.5; 17.0; 17.5; 16.0; 16.5; 17.0; 17.5; 18.0; 18.5; 19.0 m/ L. All treatments had 10 replications, totaling 130 experimental units for neem, 80 for Bitter melon and 160 for chinaberry, distributed in a completely randomized design, each UE consisted of a 250 ml glass container composed of one Odonata and 150 ml of the solution. Subjects were monitored every six hours for 48 h, at each check dead individuals were counted. This bioassay was repeated three times. After the experiment, lethal concentrations that caused mortality in 50% and 99% of individuals at 24 and 48 hours were calculated using the calculation of probits. Lethal concentrations for the most efficient extract Odonata were tested for Tilapia fingerlings over a period of 21 days, so 80 fingerlings with 2 to 3 g were submitted to these concentrations. Lethal concentrations of Neem extract to Odonata at for 24 hour period were: LC50 (24h) = 16.62, and LC99 (24h) = 21.01mL / L. For a period of 48h at LC50 (48h) = 14.8 and LC99 (48h) = 18.63mL / L. For cinnamom extract, LC50 (24h) was 17.6 and LC99 (24h) = 21.40mL / L, for the 48h period lethal concentrations were LC50 (48h) = 16.32 and CL99 (48h ) = 19.62mL / L. The lethal concentrations of São Caetano melon were: LC50 (24h) = 8.7; LC99 (24h) = 12.33; LC50 (48h) = 7.87 and LC99 (48h) = 11.35mL / L. No fingerling mortality was observed during the chronic toxicity test period, the fish gills had a low rate of injury at lower concentrations when compared to the highest concentrations. The three extracts showed potential insecticide, however high concentrations are necessary to cause mortality in these animals. São Caetano melon extract showed no toxicity to fingerlings, and decreased gill parasites in fish, however caused more lesions at high concentrations.

Ação de inseticidas sobre os ovos e lagartas da broca-pequena-dofruto do tomate, em bioensaio de laboratório / Action of insecticides on the eggs and larvae of the borer small-fruit tomato in laboratory bioassay

A broca-pequena-do-fruto é praga-chave na cultura do tomate por causar danos significativos às partes reprodutivas. Devido a isto, foi objetivo deste trabalho avaliar a eficiência de inseticidas sobre ovos e lagartas recém-emergidas, com e sem a adição de óleo vegetal (0,25%), em bioensaios de laboratório. Frutos com ovos foram coletados em cultivo de tomate estaqueado na quinzena posterior à última aplicação de agrotóxicos, sendo selecionados os frutos com ovos de coloração variável de branco a marrom claro, com 1 e 4 dias de incubação, e imersos em 1 L da calda inseticida por 5 segundos. O delineamento estatístico utilizado foi o inteiramente casualizado, com média de 18 frutos nos tratamentos e de, aproximadamente, 4 ovos/fruto. A avaliação da ação inseticida de 24 produtos foi realizada após a imersão na calda inseticida, observando-se, sob microscópio estereoscópico, os ovos quanto à integridade do córion, textura e coloração, lagartas emergidas, bem como os orifícios de entrada e de saída das larvas (aos 7 e 21 dias). Os produtos testados diferiram da testemunha quanto à densidade de lagartas eclodidas, bem como quanto à redução populacional de lagartas, podendo-se destacar Trebon 100 SC (etofenprox; 200 mL do produto comercial/100 L), Lannate BR (methomil; 100 mL), Thiobel 500 (cartap; 250 g) e Vertimec 18 CE (abamectin; 100 mL). A adição de óleo vegetal resultou em incremento na eficiência dos produtos.

Action of insecticides on tomato fruit borer eggs and larvae using laboratory bioassay. The tomato fruit borer is a key tomato pest in light of its damages to the plants’ reproductive parts. Therefore, the present study was aimed to evaluate the effectiveness of insecticides on the eggs and newly hatched larvae, when applied alone or associated with vegetable oil (0.25%), in laboratory bioassays. Fruits with eggs were collected in staked tomato crops fifteen days after the last application of agro-chemicals, selecting the fruits with eggs colored from white to light brown, which had between 1 and 4 days of incubation, followed by immersion of the fruit for 5 seconds in 1 L of the insecticide solutions. The experimental design was completely randomized, with an average of 18 fruits per treatment (24 insecticides and a control) and about 4 eggs per fruit. The evaluations were performed 7 and 21 days after immersion, using a stereomicroscope to observe the corion integrity, egg color, number of larvae emerged, and larvae fruit holes (entry and exit). The insecticides differed significantly from the control, most notably Trebon SC 100 (etofenprox; 200 mL of the commercial product/100 L), Lannate BR (methomil; 100 mL), Thiobel 500 (cartap; 250 g) and Vertimec 18 CE (abamectin; 100 mL). The addition of vegetable oil increased the insecticides’ effectiveness.

Ação de inseticidas sobre os ovos e lagartas da broca-pequena-dofruto do tomate, em bioensaio de laboratório / Action of insecticides on the eggs and larvae of the borer small-fruit tomato in laboratory bioassay

A broca-pequena-do-fruto é praga-chave na cultura do tomate por causar danos significativos às partes reprodutivas. Devido a isto, foi objetivo deste trabalho avaliar a eficiência de inseticidas sobre ovos e lagartas recém-emergidas, com e sem a adição de óleo vegetal (0,25%), em bioensaios de laboratório. Frutos com ovos foram coletados em cultivo de tomate estaqueado na quinzena posterior à última aplicação de agrotóxicos, sendo selecionados os frutos com ovos de coloração variável de branco a marrom claro, com 1 e 4 dias de incubação, e imersos em 1 L da calda inseticida por 5 segundos. O delineamento estatístico utilizado foi o inteiramente casualizado, com média de 18 frutos nos tratamentos e de, aproximadamente, 4 ovos/fruto. A avaliação da ação inseticida de 24 produtos foi realizada após a imersão na calda inseticida, observando-se, sob microscópio estereoscópico, os ovos quanto à integridade do córion, textura e coloração, lagartas emergidas, bem como os orifícios de entrada e de saída das larvas (aos 7 e 21 dias). Os produtos testados diferiram da testemunha quanto à densidade de lagartas eclodidas, bem como quanto à redução populacional de lagartas, podendo-se destacar Trebon 100 SC (etofenprox; 200 mL do produto comercial/100 L), Lannate BR (methomil; 100 mL), Thiobel 500 (cartap; 250 g) e Vertimec 18 CE (abamectin; 100 mL). A adição de óleo vegetal resultou em incremento na eficiência dos produtos. (AU)

Action of insecticides on tomato fruit borer eggs and larvae using laboratory bioassay. The tomato fruit borer is a key tomato pest in light of its damages to the plants reproductive parts. Therefore, the present study was aimed to evaluate the effectiveness of insecticides on the eggs and newly hatched larvae, when applied alone or associated with vegetable oil (0.25%), in laboratory bioassays. Fruits with eggs were collected in staked tomato crops fifteen days after the last application of agro-chemicals, selecting the fruits with eggs colored from white to light brown, which had between 1 and 4 days of incubation, followed by immersion of the fruit for 5 seconds in 1 L of the insecticide solutions. The experimental design was completely randomized, with an average of 18 fruits per treatment (24 insecticides and a control) and about 4 eggs per fruit. The evaluations were performed 7 and 21 days after immersion, using a stereomicroscope to observe the corion integrity, egg color, number of larvae emerged, and larvae fruit holes (entry and exit). The insecticides differed significantly from the control, most notably Trebon SC 100 (etofenprox; 200 mL of the commercial product/100 L), Lannate BR (methomil; 100 mL), Thiobel 500 (cartap; 250 g) and Vertimec 18 CE (abamectin; 100 mL). The addition of vegetable oil increased the insecticides effectiveness. (AU)

Determination of diflubenzuron residues in milk and cattle tissues / Determinação de resíduos de diflubenzuron em leite e tecidos bovinos

Diflubenzuron (DFB) is used to control ectoparasitic infestation by inhibiting larvae development in the manure and feces of treated animals. It is also currently been used to control tick infestations. In this study, milk and tissues from cattle treated orally with DFB for a 77-120 day period with a commercial product containing the compound were analyzed for the presence of residues. DFB residues were determined by using extraction with acetonitrile, cleanup with C18 SPE and chromatographic analysis by HPLC with UV detection (254nm). DFB was not detected in any of the analysed samples (<0.006mg kg-1 for fat, <0.014mg kg-1 for muscle, <0.015mg kg-1 for kidney, <0.016mg kg-1 for liver and <0.0006mg kg-1 for milk). In this manner, the use of this compound, according to the manufacturer's suggested doses may result in cattle milk, liver, kidneys, fat and muscles being considered safe regarding the presence of DFB residues.(AU)

O diflubenzuron (DFB) é um inibidor de desenvolvimento de insetos que inibe a síntese de quitina com atividade ovicida e larvicida e está sendo utilizado na pecuária para o controle do carrapato. Leite e tecidos provenientes de bovinos tratados por um período de 77 a 120 dias com um produto comercial contendo DFB foram analisados quanto à presença de resíduos. Os resíduos de DFB foram determinados utilizando-se extração com acetonitrila, limpeza por SPE C18 e cromatografia líquida de alta eficiência com detecção por UV (254nm). DFB não foi detectado em nenhuma das amostras analisadas (<0.006mg kg-1 para gordura, <0,014mg kg-1 para músculo, <0,015mg kg-1 para rim, <0,016mg kg-1 para fígado e <0.0006mg kg-1 para leite). Dessa forma, a utilização do princípio ativo conforme recomendado pelo fabricante e em níveis suficientes para se obter o efeito larvicida desejado deve resultar em leite, fígado, rins, gordura e músculos que podem ser considerados seguros para o consumo em termos da presença DFB.(AU)

Eficácia do diflubenzuron 25% no controle da Haematobia irritans (Diptera: Muscidae): desafio in vitro e a campo

In this experiment, the in vitro and in vivo efficacy of a 25% diflubenzuron commercial formulation were evaluated for control of Haematobia irritans infestation on cattle. For the in vitro test, horn-fly eggs were cultivated in feces from untreated or treated with 25% diflubenzuron for verification of adult emergence. In the in vivo test, 40 crossbred female bovines were divided into 2 experimental groups: Controls (C) and treated (T) with 25% diflubenzuron, with similar horn-fly infestations. In the in vitro test, the control group had a mean emergence of 86% (± 8.4%) while the group cultivated in feces from cattle treated with 25% diflubenzuron had a mean emergence rate of only 1% (± 0.2%), showing product efficacy of 98.83%. In the in vivo test no significant reduction was observed in the fly count of the C group, whereas the T group showed a clear reduction in the infestation (t = 16.46, p 0.0001). The efficacy of the product under field conditions was 99.20%. In conclusion, the formulation of 25% diflubenzuron demonstrated efficacy against H. irritans, and is therefore indicated for this purpose.

Avaliou-se, neste experimento, a eficácia in vitro e in vivo do diflubenzuron a 25% para uso em bovinos, no controle da infestação por Haematobia irritans. Para o teste in vitro, ovos de moscas-dos-chifres foram mantidos em recipientes contendo fezes de animais não-tratados ou tratados com diflubenzuron a 25%, e acompanhados até emergência dos adultos. No teste in vivo, foram utilizadas 40 fêmeas aneloradas, divididas em dois grupos: controle (C) e tratado (T) com intensidade parasitária equivalente. Durante o experimento, o grupo C recebeu apenas suplementação mineral, enquanto o grupo T recebeu suplementação mineral e diflubenzuron a 25%. A contagem de moscas nos animais foi realizada na região dorsal, desde a nuca até as pontas da anca de cada animal, no início e ao final de um período de cinco meses. Na avaliação in vitro, o grupo controle apresentou média de emergência de 86% (± 8,4%), enquanto o grupo cultivado em fezes de bovinos tratados com diflubenzuron a 25% apresentou taxa de emergência média de 1% (± 0,2%), sendo a eficácia calculada de 98,83%. No teste in vivo, não foi observada redução significativa na contagem de moscas no grupo C, porém, no grupo T houve significativa redução da infestação por H. irritans (t = 16,46, p 0,0001). A eficácia do produto, em condições de campo, foi de 99,20%. O diflubenzuron a 25% adicionado ao sal mineral mostrou-se eficaz contra H. irritans, sendo indicado para esse fim.