Bacterial communities in artisanal raw bovine milk cheeses from the southern region of Brazil / Comunidades bacterianas em queijos artesanais de leite bovino cru da região sul do Brasil

The production of artisanal cheeses made with raw bovine milk has grown in the southern region of Brazil. It is important to obtain information about the risks of this practice, especially concerning food safety. In this study, next-generation sequencing was used to identify and characterize the bacterial communities of artisanal raw milk cheeses. We analyzed one pool of five raw milk samples (control group M1) from different dairy farms and nine pools (M2-M10) of 45 artisanal raw milk cheeses.The characterization of the bacterial communities included 199 species distributed across 59 different genera dispersed among the samples. Among the genera observed, 11 were classified as beneficial to the aroma, flavour, colour, and texture of the cheese. Thirty-one genera were classified as harmful to these characteristics. Another 17 were classified as potential pathogens for animals and humans, including Aeromonas, Bacillus, Cronobacter, Salmonella, Staphylococcus, and bacteria of the coliform group, including E. coli and Klebsiella. There was a significant difference (P < 0.05) in the number of bacterial communities identified between the control group (M1) and the two pools of artisanal raw milk cheeses (M2 and M8). This study demonstrated that next-generation sequencing provides in-depth information on the composition of the microbiota in artisanal raw milk cheeses, characterizing bacterial communities, identifying the wide microbial diversity, and identifying microbial benefits and risks.

Devido ao aumento da produção de queijos artesanais com leite bovino cru na região sul do Brasil, é importante obter informações sobre os riscos desta prática, principalmente no que se refere à segurança do alimento. Neste estudo foi utilizada a técnica de Next Generation Sequencing (NGS) para identificar e caracterizar comunidades bacterianas de queijos artesanais de leite cru. Foram analisados um pool de cinco amostras de leite cru como grupo controle (M1) de diferentes propriedades leiteiras localizadas na região norte do estado do Rio Grande do Sul, e nove pools (M2-M10) de 45 queijos artesanais de leite cru. A caracterização das comunidades bacterianas incluiu 199 espécies distribuídas em 59 gêneros diferentes dispersos entre as amostras. Dentre os gêneros observados, 11 foram classificados como benéficos ao aroma, sabor, cor e textura do queijo, enquanto 31 gêneros foram classificados como prejudiciais a essas características. Outros 17 foram classificados como potenciais patogênicos para animais e humanos, incluindo Aeromonas, Bacillus, Cronobacter, Salmonella, Staphylococcus, bactérias do grupo coliforme como Escherichia coli e Klebsiella. Houve diferença significativa (P < 0,05) entre o número de comunidades bacterianas identificadas no grupo controle (M1) e dois pools de queijos artesanais de leite cru (M2 e M8). Este estudo demonstra que o NGS fornece informações detalhadas sobre a composição da microbiota em queijos artesanais de leite cru, caracterizando comunidades bacterianas, identificando a ampla diversidade microbiana, os benefícios e riscos microbianos.

Retrospective evalution of non-fatty solids in samples of raw milk in the state of Rio Grande do Sul according to season, Brazil / Estudo retrospectivo dos sólidos não gordurosos em amostras de leite cru no estado do Rio Grande do Sul de acordo com as estações do ano

ABSTRACT: The present study described the chemical composition and somatic cell score (SCS) of samples of refrigerated raw milk collected from commercial farms in the state of Rio Grande do Sul in order to better understand the behavior of constituents present in non-fatty solids (NFS) in milk according to the season of the year. Means were used to describe statistical data. To estimate the probability of NFS levels meeting IN 76 (BRAZIL, 2018), binary logistic regression was used. It was reported that 18.2% (233.817) of analytical results showed NFS below 8.4%, representing the minimum required by IN 76. The highest average NFS level observed in the five-year period was registered in the micro-region of Passo Fundo (8.70%) in winter. The microregion with the lowest results was Porto Alegre (8.53%); however, it still demonstrated levels within the limits established by IN 76. The study indicates that milk constituents show differences between seasons. In autumn and winter, the constituents remained equal to or higher than those required by current legislation, while spring and summer were the periods with the lowest NFS values. The SCS was also influenced by the seasons, with the highest rates in spring, summer, and autumn.

RESUMO: O presente estudo teve como objetivo descrever os resultados de composição química e escore de células somáticas (ECS) de amostras de leite cru refrigerado coletado em fazendas comerciais no estado do Rio Grande do Sul, para melhor entendimento do comportamento dos constituintes presentes nos sólidos não gordurosos (SNG) no leite de acordo com as estações do ano. As médias foram estudadas para descrever as estatísticas dos dados. Para estimar a probabilidade de os teores de SNG atenderem à IN 76 de 2018, foi utilizada a regressão logística binária. Foi constatado que 18,2% (233.817) dos resultados analíticos apresentaram SNG abaixo de 8,4%, que representa o mínimo exigido pela IN 76 (BRASIL, 2018). A maior média de SNG observada no período de cinco anos foi registrada na microrregião de Passo Fundo (8,70%), no inverno. A microrregião com menores resultados foi a de Porto Alegre (8,53%), no entanto com teores dentro do estabelecido pela IN 76/2018. O estudo demonstrou que os constituintes do leite apresentaram diferenças entre as estações do ano. O outono e inverno foram os períodos em que os constituintes se mantiveram iguais ou superiores aos exigidos pela legislação vigente, enquanto que a primavera e o verão foram os períodos com os menores valores de SNG. O ECS também foi influenciado pelas estações do ano. Na primavera, verão e outono ocorreram os maiores índices.

Ring test in milk samples preserved with Bronopol® / Teste do anel em amostras de leite conservadas com Bronopol ®

ABSTRACT: This study evaluated if the milk ring test (MRT) used to the brucellosis diagnostic at dairy herd level can be done in milk samples with conservative (Bronopol®) collected to the somatic cell count (SCC) that is used to mastitis monitoring. It were analyzed 38 bulk tank milk samples (BTMS) from 19 dairy herds artisanal cheese producers and 36 BTMS from a brucellosis free dairy herd, used as negative control (NC) and positive control (PC), when was added serum from vaccinated animals. The milk samples were collected in two different bottles (with or without Bronopol®). All the 38 BTMS from artisanal cheese producers (samples with and without Bronopol®) were non-reagent to MRT, as all NC. All PC were reagent to MRT, without interference of Bronopol®. Results showed that the milk sample used to SCC presented the proportion of agreement of results in all milk samples (100%), that is, false positive and false negative results were not observed. Results indicated that Bronopol® did not interfere with the color in the time of MRT reading suggesting that the same milk samples could be used to monitoring mastitis and brucellosis.

RESUMO: O objetivo deste estudo foi avaliar se o teste do anel do leite (TAL), utilizado para o diagnóstico da brucelose em nível de rebanho leiteiro, pode ser realizado em amostras de leite com conservador (Bronopol®) coletado para contagem de células somáticas (CCS) que é utilizado para monitoramento de mastite. Foram analisadas 38 amostras de leite de tanques de expansão (ALTE) de 19 rebanhos leiteiros produtores de queijo artesanal e 36 ALTE de rebanho leiteiro livre de brucelose, utilizadas como controle negativo (CN) e controle positivo (CP), quando foi adicionado soro de animais vacinados. As amostras de leite foram coletadas em dois frascos diferentes (com e sem Bronopol®). Todos as 38 ALTE de produtores artesanais de queijo (amostras com e sem Bronopol®) foram não reagentes ao TAL, como todos os CN. Todos os CP foram reagentes ao TAL, sem interferência do Bronopol®. Os resultados mostraram que a amostra de leite utilizada para CCS apresentaram a proporção de concordância dos resultados em todas as amostras de leite (100%), ou seja, não foram observados resultados falso-positivos e falso-negativos. Os resultados indicam que o Bronopol® não interferiu na cor no momento da leitura do TAL, sugerindo que as mesmas amostras de leite poderiam ser usadas para monitorar mastite e brucelose.

Resistant enterococci isolated from raw sheep's milk and cheeses from South region of Brazil / Enterococos resistentes isolados de leite cru de ovelha e queijos da região Sul do Brasil

Enterococci have been used as sentinel organisms for monitoring antimicrobial resistance in food, humans, and other animals. In this sense, the present study evaluated the antimicrobial susceptibility profile and the presence of genes associated with resistance to erythromycin (msrC and ermB) and tetracycline [tet(M) and/or tet(L)] in enterococci isolated from raw sheep's milk and cheeses (colonial, feta-, and pecorino-type) from South region of Brazil. A total of 156 enterococci were isolated from milk (n=80) and cheese (n=76) samples, identified by MALDI-TOF. Enterococcus faecalis (50.6%; n=79) was the most frequent species isolated from both samples. According to in vitro susceptibility tests, enterococci strains were not susceptible to the most commonly antimicrobial agents used in human and veterinary medicine. The frequency of MDR strains in enterococci isolated from milk (53.7%) was higher than those from cheese (24.2%). The tet(M) gene was the most commonly detected among tetracycline not-susceptible strains. The present study provided the first evidence of antimicrobial not-susceptible enterococci in raw sheep's milk and cheeses in South Brazil. Drug-resistant strains, particularly those that are MDR, constitute a One Health issue.

Os enterococos têm sido usados como organismos sentinela para monitorar o padrão de suscetibilidade a antimicrobianos em alimentos, humanos e outros animais. Neste sentido, o presente estudo objetivou avaliar o perfil de susceptibilidade a antimicrobianos e os genes associados com a resistência a eritromicina (msrC and ermB) e à tetraciclina [tet(M) and/or tet(L)] em enterococos isolados de leite cru de ovelha e queijos (colonial, tipo-feta e tipo-pecorino) do Sul do Brasil. Um total de 156 enterococos foram isolados de leite (n=80) e queijo (n=76), identificados por MALDI-TOF. Enterococcus faecalis (50,6%; n=79) foi a espécie mais frequentemente isolada de ambas as amostras. De acordo com o teste de suscetibilidade in vitro, as cepas de enterococos não foram susceptíveis aos agentes antimicrobianos mais comumente utilizados na clínica humana e veterinária. A frequência de cepas de enterococos MDR isoladas do leite (53,7%) foi superior à do queijo (24,2%). O gene tet(M) foi o mais comumente detectado entre as cepas não susceptíveis à tetraciclina. O presente estudo fornece as primeiras evidências de enterococos não susceptíveis aos antimicrobianos em leite cru de ovelha e queijos no Sul do Brasil. Cepas resistentes a drogas, particularmente as que são MDR, representam uma preocupação de Saúde Única.

In vitro evaluation of probiotic and technological properties of lactic acid bacteria isolated from artisanal cheese produced in the Serra Geral - Minas Gerais - Brazil / Avaliação in vitro de propriedades probióticas e tecnológicas de bactérias ácido-láticas isoladas de queijo artesanal da Serra Geral (MG)

O presente estudo avaliou o potencial probiótico in vitro de bactérias ácido-láticas (BAL) isoladas de queijo artesanal da Serra Geral (MG), com 14 e 21 dias de maturação, leite cru e pingo, utilizados em sua elaboração, e de bancadas de produção. As bactérias foram submetidas aos testes de antibiograma, à tolerância a ácido gástrico artificial e a sais biliares e ao antagonismo contra micro-organismos indicadores. Levilactobacillus brevis (Q521) e Lactococcus lactis (LLSG) apresentaram os melhores resultados e foram selecionados para a produção de leite fermentado. Apenas LLSG foi capaz de fermentar o leite. O produto apresentou qualidade microbiológica e físico-química adequada, exceto para os teores de proteína, segundo a legislação vigente para leites fermentados, demonstrando potencial tecnológico. A partir dos resultados apresentados, sugere-se que testes in vivo sejam realizados para que LLSG possa vir a ser utilizado como probiótico.

Ring test in milk samples preserved with Bronopol® / Teste do anel em amostras de leite conservadas com Bronopol®

This study evaluated if the milk ring test (MRT) used to the brucellosis diagnostic at dairy herd level can be done in milk samples with conservative (Bronopol®) collected to the somatic cell count (SCC) that is used to mastitis monitoring. It were analyzed 38 bulk tank milk samples (BTMS) from 19 dairy herds artisanal cheese producers and 36 BTMS from a brucellosis free dairy herd, used as negative control (NC) and positive control (PC), when was added serum from vaccinated animals. The milk samples were collected in two different bottles (with or without Bronopol®). All the 38 BTMS from artisanal cheese producers (samples with and without Bronopol®) were non-reagent to MRT, as all NC. All PC were reagent to MRT, without interference of Bronopol®. Results showed that the milk sample used to SCC presented the proportion of agreement of results in all milk samples (100%), that is, false positive and false negative results were not observed. Results indicated that Bronopol® did not interfere with the color in the time of MRT reading suggesting that the same milk samples could be used to monitoring mastitis and brucellosis.

O objetivo deste estudo foi avaliar se o teste do anel do leite (TAL), utilizado para o diagnóstico da brucelose em nível de rebanho leiteiro, pode ser realizado em amostras de leite com conservador (Bronopol®) coletado para contagem de células somáticas (CCS) que é utilizado para monitoramento de mastite. Foram analisadas 38 amostras de leite de tanques de expansão (ALTE) de 19 rebanhos leiteiros produtores de queijo artesanal e 36 ALTE de rebanho leiteiro livre de brucelose, utilizadas como controle negativo (CN) e controle positivo (CP), quando foi adicionado soro de animais vacinados. As amostras de leite foram coletadas em dois frascos diferentes (com e sem Bronopol®). Todos as 38 ALTE de produtores artesanais de queijo (amostras com e sem Bronopol®) foram não reagentes ao TAL, como todos os CN. Todos os CP foram reagentes ao TAL, sem interferência do Bronopol®. Os resultados mostraram que a amostra de leite utilizada para CCS apresentaram a proporção de concordância dos resultados em todas as amostras de leite (100%), ou seja, não foram observados resultados falso-positivos e falso-negativos. Os resultados indicam que o Bronopol® não interferiu na cor no momento da leitura do TAL, sugerindo que as mesmas amostras de leite poderiam ser usadas para monitorar mastite e brucelose.

Retrospective evalution of non-fatty solids in samples of raw milk in the state of Rio Grande do Sul according to season, Brazil / Estudo retrospectivo dos sólidos não gordurosos em amostras de leite cru no estado do Rio Grande do Sul de acordo com as estações do ano

The present study described the chemical composition and somatic cell score (SCS) of samples of refrigerated raw milk collected from commercial farms in the state of Rio Grande do Sul in order to better understand the behavior of constituents present in non-fatty solids (NFS) in milk according to the season of the year. Means were used to describe statistical data. To estimate the probability of NFS levels meeting IN 76 (BRAZIL, 2018), binary logistic regression was used. It was reported that 18.2% (233.817) of analytical results showed NFS below 8.4%, representing the minimum required by IN 76. The highest average NFS level observed in the five-year period was registered in the micro-region of Passo Fundo (8.70%) in winter. The microregion with the lowest results was Porto Alegre (8.53%); however, it still demonstrated levels within the limits established by IN 76. The study indicates that milk constituents show differences between seasons. In autumn and winter, the constituents remained equal to or higher than those required by current legislation, while spring and summer were the periods with the lowest NFS values. The SCS was also influenced by the seasons, with the highest rates in spring, summer, and autumn.

O presente estudo teve como objetivo descrever os resultados de composição química e escore de células somáticas (ECS) de amostras de leite cru refrigerado coletado em fazendas comerciais no estado do Rio Grande do Sul, para melhor entendimento do comportamento dos constituintes presentes nos sólidos não gordurosos (SNG) no leite de acordo com as estações do ano. As médias foram estudadas para descrever as estatísticas dos dados. Para estimar a probabilidade de os teores de SNG atenderem à IN 76 de 2018, foi utilizada a regressão logística binária. Foi constatado que 18,2% (233.817) dos resultados analíticos apresentaram SNG abaixo de 8,4%, que representa o mínimo exigido pela IN 76 (BRASIL, 2018). A maior média de SNG observada no período de cinco anos foi registrada na microrregião de Passo Fundo (8,70%), no inverno. A microrregião com menores resultados foi a de Porto Alegre (8,53%), no entanto com teores dentro do estabelecido pela IN 76/2018. O estudo demonstrou que os constituintes do leite apresentaram diferenças entre as estações do ano. O outono e inverno foram os períodos em que os constituintes se mantiveram iguais ou superiores aos exigidos pela legislação vigente, enquanto que a primavera e o verão foram os períodos com os menores valores de SNG. O ECS também foi influenciado pelas estações do ano. Na primavera, verão e outono ocorreram os maiores índices.

Physicochemical and microbiological quality of refrigerated raw bovine milk commercialized in Presidente Médici, Rondônia state, Western Amazon, Brazil / Qualidade físico-química e microbiológica de leite bovino cru refrigerado comercializado em Presidente Médici, estado de Rondônia, Amazônia Ocidental, Brasil

The aimed of the study was to evaluate the quality of raw milk from some suppliers in rural and urban areas and to test the hypothesis that it is unsafe for direct consumption. The study was conducted with suppliers in rural and urban areas in Presidente Médici municipality, Rondônia state. The method of the Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA), was used, which consists of titrating a portion of the sample with a sodium hydroxide solution of known concentration, using phenolphthalein as an indicator. According to Brazilian legislation and literature, stability of Alizarol, foreign substances, Chloride, Hypochlorite, Hydrogen Peroxide and Colostrum were analyzed. Microbiological analysis, standard plate count (SPC) and quantification of thermotolerant coliforms were also performed using the most probable number (MPN) technique. Values above the limits established by legislation were found, mainly for temperature and titleable acidity, in addition to stability results against Alizarol and the presence of colostrum. There were high microbial contents with regard to SPC, and, in this case, the presence of pathogenic microorganisms cannot be disregarded. The presence of thermotolerant coliforms may indicate probable contact of milk with feces. Therefore, it is considered that the samples analyzed here are not safe for ingestion in the raw form.(AU)

O objetivo do estudo foi avaliar a qualidade do leite cru de alguns fornecedores da zona rural e urbana e tes-tar a hipótese de que não são seguros para o consumo direto. O estudo foi conduzido em fornecedores da zona rural e urbana do município de Presidente Médici, estado de Rondônia. Empregou-se o método do Ministério da Agricultura Pecuária e Abastecimento (MAPA), que consiste na titulação de uma porção da amostra por uma solução hidróxido de sódio de concentração conhecida, utilizando como indicador a fenolftaleína. Conforme a legislação brasileira e a lite-ratura, foram analisados estabilidade do Alizarol, substâncias estranhas, Cloreto, Hipoclorito, peróxido de Hidrogênio e Colostro. Foram realizadas também análises microbiológicas, contagem Padrão em Placa (CPP) e quantificação dos coliformes termotolerantes através da técnica do número mais provável (NMP). Foram encontrados valores acima dos limites estabelecidos pela legislação, principalmente para temperatura e acidez titulável, além dos resultados de estabili-dade frente ao Alizarol e da presença de colostro. Houve altos teores microbianos no que se refere à CPP, e, nesse caso, a presença de microrganismos patogênicos não pode ser desconsiderada. A presença de coliformes termotolerantes pode indicar provável contato do leite com fezes. Portanto, considera-se que as amostras aqui analisadas não são seguras para ingestão na forma crua.(AU)

Characterization of colonial cheese: appreciation a traditional product from southern Brazil / Caracterização do queijo colonial: valorização de um produto tradicional do Sul do Brasil

South Brazil produces colonial cheese based on Italian immigration recipes. This study characterized colonial cheese produced in the state of Rio Grande do Sul. The sampling method was by conglomerate. A total of 293 rural producers were interviewed; they also provided cheeses for physicochemical and microbiologicanalyses. For the characterization of colonial cheese, parameters related to milk, processes, social aspects, physical aspects and ingredients were selected and cluster analysis was performed. Results showed that the colonial cheese is made with whole milk, rennet and salt, with a round shape, weighing an average of 1.22 kg, with an average maturation of 9.4 days, high moisture, fat, using raw or pasteurized milk. The recipe is familiar, passed down through generations and the sale is made directly to the consumer.

O Sul do Brasil produz queijo colonial com base nas receitas da imigração italiana. O objetivo deste estudo foi promover a valorização do queijo colonial produzido no estado do Rio Grande do Sul, por meio de sua caracterização. O método de amostragem foi por conglomerado. Foram entrevistados 293 produtores rurais; também forneceram queijos para análises físico-químicas. Para a caracterização do queijo colonial, foram selecionados parâmetros relacionados ao leite, processos, aspectos sociais, aspectos físicos e ingredientes e realizada análise de agrupamento. Os resultados mostram que o queijo colonial é feito com leite integral, coalho e sal, de formato redondo, pesando em média 1,22 kg, com maturação média de 9,4 dias, de alta umidade, gordo, utilizando leite cru ou pasteurizado. A receita é familiar, passada de geração em geração e a venda é feita diretamente ao consumidor.

Implementation of a milking system and quality management for buffalo milk at an experimental station in Rio Grande do Sul, Brazil / Implementação de um sistema de ordenha e manejo da qualidade do leite bubalino em uma estação experimental no Rio Grande do Sul, Brasil

Buffalo milk production is an activity that has grown in recent years, mainly due to the physicochemical characteristics found in this type of milk, which is the second most produced in the world. The objective of this study was to implement a milking system and monitor the identity and quality standards of buffalo milk produced at the Experimental Agronomic Station of the Federal University of Rio Grande do Sul. Samples were collected fortnightly between June and November 2021, totaling ten collections. The means obtained at the end of the monitoring were 4.84 g/100 g for fat, 4.64 g/100 g for protein, 5.06 g/100 g for lactose, 15.26 g/100 g for total solids, 10.42 g/100g for non-fat solids, 0.18 g lactic acid/100 mL of milk for acidity, 1.037 g/cm3 for density, -0.533°C for cryoscopic index, 3.5 x 105 cells/mL for somatic cell count, and 8.0 x103 CFU/ml for standard plate count. Residues of antibiotics and antiparasitics were not found. An increase in the concentration and frequency of some fatty acids was observed, after an increment in the nutritional management of the animals, in addition to predominance of palmitic acid (C16:0) and oleic acid (C18:1- cis (n9)). The results indicate a significant improvement in the quality of the milk in the assessment period, due to the corrective actions that were established, and the standard plate count showed good agricultural practices as to milk sourcing and the hygiene of the materials, being below the limits required by NI 76. The buffalo milk produced by the herd at the Experimental Station showed physicochemical and microbiological results in accordance with the legislation, being a raw material to be explored in the prospection of derivative products.

A produção de leite bubalino é uma atividade que tem crescido nos últimos anos, principalmente devido às características físico-químicas apresentadas pelo leite, que é o segundo mais produzido no mundo. O objetivo deste trabalho foi implementar um sistema de ordenha e monitorar os padrões de identidade e qualidade do leite bubalino produzido na Estação Experimental Agronômica da Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Amostras foram coletadas quinzenalmente entre os meses de junho e novembro de 2021, totalizando dez coletas. As médias obtidas ao final do monitoramento foram de 4,84 g/100 g para gordura, 4,64 g/100 g para proteína, 5,06 g/100g para lactose, 15,26 g/100 g sólidos totais, 10,42 g/100g para sólidos não gordurosos, 0,18 g ácido lático/100 mL de leite para acidez, 1,037 g/cm3 para densidade, -0.533°C para índice crioscópico, 3.5 x105 cél/mL para contagem de células somáticas e 8.0 x103 UFC/ml para contagem padrão em placa. Não foram identificados resíduos de antibióticos e antiparasitários. Observou-se aumento de concentração e frequência de alguns ácidos graxos, após incremento de manejo nutricional dos animais, além da predominância dos ácidos palmítico (C16:0) e oleico (C18:1- cis (n9). Os resultados indicam que houve uma melhora significativa na qualidade do leite no período avaliado, decorrente das ações corretivas que foram estabelecidas, e a contagem padrão em placa demonstrou boas práticas agropecuárias na obtenção do leite e na higienização dos materiais, estando abaixo dos limites exigidos pela IN 76. O leite de búfala produzido pelo rebanho da Estação Experimental apresentou resultados físico-químicos e microbiológicos de acordo com a legislação, sendo uma matéria-prima a ser explorada na prospecção de produtos derivados.

Toxoplasma gondii in lactating animals: potential risk to milk consuming population in Khyber Pakhtunkhwa / Toxoplasma gondii em animais lactantes: risco potencial para população consumidora de leite em Khyber Pakhtunkhwa

Toxoplasma gondii is an intracellular zoonotic protozoan parasite usually infects human and animal worldwide. This study aimed to analyze the sero-prevalence of T. gondii in blood of lactating animals and human living in close proximity and also to detect Toxoplasma DNA in unpasteurized milk of the studied animals. A total of 233 blood and milk samples were collected from lactating animals, and 735 blood samples were taken from humans in District Upper Dir, Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan. The blood samples were analyzed through ELISA while the milk samples were analyzed by PCR for the presence of T. gondii DNA. A standard questionnaire was introduced to collect the data from the participants. In animals, the reported sero-prevalence was 32.18% for IgM, 17.16% for IgG, and 6.4% for both IgM and IgG. The reported positivity for T. gondii DNA in milk was 14.44%, 34.8%, 20%, and 26% in sheep, goats, cows, and buffaloes, respectively. In the human blood samples, 9.8% were found positive for IgM and 11.2% for IgG while none of the samples was found positive for both IgM and IgG. Overall sero-prevalence reported in females was significantly higher than the male (p< 0.0001) were the significant risk factors associated with T. gondii infections in animals. In conclusion, T. gondii infection is prevalent in lactating animals and humans using their raw milk in the study area. It is suggested that raw milk should be considered as a vehicle for the transmission of T. gondii to humans. Proper pasteurization of milk is very useful in limiting the transmission of infection. Awareness and control programs should be implemented to prevent the infection.

Toxoplasma gondii é um protozoário parasita intracelular zoonótico que geralmente infecta humanos e animais em todo o mundo. Este estudo teve como objetivo analisar a soroprevalência de T. gondii no sangue de animais lactantes e humanos que vivem em proximidade, além de detectar o DNA de Toxoplasma no leite não pasteurizado dos indivíduos estudados. Um total de 233 amostras de sangue e leite foram coletadas de animais lactantes e 735 amostras de sangue foram coletadas de humanos no Distrito Upper Dir Khyber Pakhtunkhwa, no Paquistão. As amostras de sangue foram analisadas pelo método ELISA enquanto as amostras de leite foram analisadas por PCR para a presença de DNA de T. gondii. Um questionário padrão foi introduzido para coletar os dados dos participantes. Em animais, a soroprevalência relatada foi de 32,18% para IgM, 17,16% para IgG e 6,4% para IgM e IgG. A positividade relatada para DNA de T. gondii encontrada no leite foi de 14,44%, 34,8%, 20% e 26% em ovelhas, cabras, vacas e búfalas, respectivamente. Nas amostras de sangue humano, 9,8% foram consideradas positivas para IgM e 11,2% para IgG, enquanto nenhuma das amostras foi considerada positiva para IgM e IgG. A soroprevalência geral relatada em mulheres foi significativamente maior do que em homens (p < 0,05). Neste estudo, contato com gatos (p < 0,0001), hábitos alimentares (p < 0,0001), fonte de água para beber (p < 0,0001) e más condições de higiene (p < 0,0001) foram os fatores de risco significativos associados a infecções por T. gondii em animais. Em conclusão, a infecção por T. gondii é prevalecente em animais lactantes e humanos que utilizam leite cru, isto é, não-pasteurizado, na área de estudo. Sugere-se que o leite não-pasteurizado seja considerado um veículo de transmissão do T. gondii para humanos. A pasteurização adequada do leite é muito útil para limitar a transmissão de infecções. Programas de conscientização e controle devem ser implementados para prevenir a infecção.

Antagonistic activity of lactic acid bacteria isolated from Minas artisanal cheeses against Brucella abortus / Atividade antagonista de bactérias lácticas isoladas de queijos Minas artesanais contra Brucella abortus

This study aimed to evaluate methods for studying the in vitro antimicrobial activity of lactic acid bacteria (LAB) against Brucella abortus and to evaluate the antagonistic effect of LAB on the viability of this pathogen. A total of 18 LAB strains (Lactobacillus plantarum, n = 11; Pediococcus acidilactici, n = 1; Lactobacillus rhamnosus, n = 4; and Lactobacillus brevis,n = 2), isolated from Minas artisanal cheeses produced in three regions (Canastra, Campos das Vertentes, and Araxá) of Minas Gerais State, Brazil, were tested for their antimicrobial activity against B. abortus using three methods: spot-on-lawn, agar well diffusion assay, and antagonistic activity of the culture supernatants. None of the tested LAB strains could inhibit B. abortus in the spot-on-lawn and agar-well diffusion assays. The supernatants produced by LAB had an acidic pH, with intensity depending on bacterial growth and strain, and could inhibit the growth of B. abortus. In contrast, pH-neutralized (pH 7.0) LAB supernatants did not suppress the growth of B. abortus. The results showed that the best technique to study the in vitro antagonism of LAB against B. abortus was the antagonistic activity of culture supernatants. The growth of B. abortus may have been inhibited by acid production.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar métodos de estudo in vitro da atividade antimicrobiana de bactérias lácticas contra Brucella abortus e avaliar o efeito antagônico das mesmas sobre a viabilidade deste patógeno. Um total de 18 amostras de bactérias lácteas (Lactobacillus plantarum, n = 11; Pediococcus acidilactici, n = 1; Lactobacillus rhamnosus, n = 4; e Lactobacillus brevis, n = 2), isoladas de exemplares de Queijo Minas Artesanal produzidos em três regiões (Canastra, Campos das Vertentes e Araxá) do estado de Minas Gerais, Brasil, foram testados quanto à sua atividade antimicrobiana contra B. abortus usando três métodos: spot-on-lawn, ensaio de difusão em poço e atividade antagonista de sobrenadante de cultura. Nenhuma das cepas testadas foi capaz de inibir B. abortus nos ensaios spot-on-lawm e de difusão em poço. Os sobrenadantes produzidos pelas bactérias lácteas apresentaram pH ácido, com intensidade dependente do crescimento bacteriano e da amostra, podendo inibir o crescimento de B. abortus. Em contraste, os sobrenadantes com pH neutralizado (pH 7,0) não inibiram o crescimento de B. abortus. Os resultados mostraram que a melhor técnica para estudar o antagonismo in vitro de bactérias lácteas contra B. abortus foi a atividade antagonista de sobrenadante de cultura. O crescimento de B. abortus pode ter sido inibido pela produção de ácido.(AU)

Physicochemical and microbiological quality of bovine milk from Vale do Taquari in Rio Grande do Sul, Brazil / Qualidade físico-química e microbiológica do leite bovino do Vale do Taquari no Rio Grande do Sul, Brasil

The goal of the present study was to verify the quality of refrigerated raw milk from dairy properties and also of refrigerated raw milk, pasteurized and Ultra High Temperature (UHT) milk from industries in Vale do Taquari in Rio Grande do Sul, Brazil. Physicochemical, microbiological and milk composition analysis were carried out, as established by legislation, in addition to total and thermotolerant coliforms and psychrotrophic counts in the three types of milk and mesophiles count in pasteurized milk and UHT milk from the industries. The collections took place in two industries and 33 dairy properties. Regarding the properties, two (6%) had milk with acidity above that established by legislation and three (9%) had milk with a total bacterial count (TBC) above the established. The milk from industry 1 presented acidity, TBC and density out of the established standards. The two industries and 53.2% of the properties had milk with somatic cell counts (SCC) above that determined by legislation. The milk from the industries showed higher amounts of SCC, TBC, psychrotrophic and total and thermotolerant coliforms than the milk from the dairy properties, and the milk from industry 1 showed higher amounts than the industry 2, in the microbiological parameters.

O objetivo do presente estudo foi verificar a qualidade do leite cru refrigerado das propriedades produtoras de leite e do leite cru refrigerado, pasteurizado e Ultra High Temperature (UHT) das indústrias do Vale do Taquari no Rio Grande do Sul, Brasil. Foram realizadas análises de composição do leite, análises físico-químicas e análises microbiológicas, estabelecidas pela legislação, além de coliformes totais e termotolerantes, contagem de psicrotróficos nos três tipos de leite, contagem de mesófilos no leite pasteurizado e no leite UHT das indústrias. As coletas ocorreram em duas indústrias e 33 propriedades produtoras de leite. Em relação às propriedades, duas (6%) apresentaram leite com acidez acima do estabelecido pela legislação e três (9%) apresentaram leite com contagem bacteriana total (CBT) acima do estabelecido. O leite da indústria 1 apresentou acidez, CBT e densidade fora dos padrões estabelecidos. As duas indústrias e 53,2% das propriedades apresentaram leite com contagem de células somáticas (CCS) acima do determinado pela legislação. O leite das indústrias demonstrou maiores quantidades de CCS, CBT, psicrotróficos e coliformes totais e termotolerantes que o leite das propriedades produtoras de leite e o leite da indústria 1 apresentou maiores quantidades que a indústria 2, nos parâmetros microbiológicos.

Effect of bactofugation of raw milk on total bacterial and aerobic spore counts and on microbial diversity of sporeformers / Efeito da bactofugação do leite cru nas contagens bacteriana total, esporos aeróbios e na diversidade microbiana de formadores de esporos

This study describes the effect of bactofugation (10,000 × g in a continuous flow of 10,000 L/h) of three batches of raw milk on total bacterial count (TBC) and aerobic spore count, and it also shows the effect on the microbial diversity of spore-forming bacteria by analysing their genetic variability through molecular approaches. Given that milk must be preheated to approximately 55 °C before being bactofuged, for comparison, the three batches were evaluated at different stages as refrigerated raw, preheated, and bactofuged milk. For preheated milk, it was found that bactofugation caused a significant reduction (p < 0.05) of 99.52% (from 4.5 × 106 to 2.1 × 104 CFU/mL) in the mean TBC and of 95% (from 333 to 17 CFU/mL) in the aerobic mesophilic spore count. Due to the effect of bactofugation on preheated milk, a reduction of 82% was observed in both TBC and aerobic spore count. With respect to diversity, 107 isolates from raw milk, prior to bactofugation, and 16 isolates from bactofuged milk were recovered and grouped into 40 and 8 clusters, respectively. The predominant species detected in raw and preheated milk were Bacillus toyonensis (63% - 20 clusters) and Lysinibacillus fusiformis (15% - 8 clusters). Proportionally, B. toyonensis (69% - 6 clusters) and L. fusiformis (25% - 1 cluster) were predominant in bactofuged milk. B. pumilus, L. varians, B. flexus, B. invictae, and B. megaterium, bacteria with a known milk spoilage potential, were isolated from milk prior to bactofugation, and they reduced to undetectable levels in bactofuged milk. Bactofugation of milk, therefore, reduces the TBC and aerobic spore count, with a significant effect in reducing the microbial diversity of spore-forming bacteria, proportional to their incidence in raw milk. Therefore, bactofugation can be an alternative to increase the shelf life and technological potential of milk.(AU)

Esse estudo descreve o efeito da bactofugação (10,000 × g em fluxo contínuo de 10,000 L/h) de três lotes de leite cru nas contagens bacterianas totais (CBT) e de esporos aeróbios, verificando também o efeito sobre a diversidade microbiana dos formadores de esporos por abordagem molecular de variabilidade genética. Como o leite a ser bactofugado deve ser pré-aquecido (≈55ºC), os três lotes foram avaliados enquanto cru refrigerado, pré-aquecido e bactofugado. Em associação com o pré-aquecimento, foi verificado que a bactofugação promoveu a redução significativa (p < 0.05) de 99,52% (4,5 x 106 para 2,1 x 104 UFC/mL) na contagem bacteriana total e 95% (333 para 17 UFC/mL) dos esporos aeróbios mesófilos. Considerando o efeito isolado da bactofugação sobre o leite já pré-aquecido, foi observada a redução de 82% tanto para CBT quanto para formadores de esporos. Em relação à diversidade, foram recuperados 107 isolados do leite anterior à bactofugação e 16 isolados do leite bactofugado, agrupados em 40 e 8 clusters, respectivamente. Foi observado predomínio das espécies Bacillus toyonensis (63% - 20 clusters) e Lysinibacillus fusiformis (15% - 8 clusters) no leite cru e pré-aquecido e, proporcionalmente, B. toyonensis (69% - 6 clusters) e L. fusiformis (25% - 1 cluster) no leite bactofugado. Bacillus pumilus, Lysinibacillus varians, B. flexus, B. invictae, e B. megaterium, isolados do leite antes da bactofugação e com potencial deteriorante conhecido, foram reduzidos a níveis indetectáveis no leite bactofugado. A bactofugação do leite, portanto, reduz a CBT e as contagens de esporos aeróbios, também com efeito significativo na redução da diversidade de formadores de esporos, proporcionalmente, conforme a sua incidência no leite cru, tendo potencial para ser utilizado como alternativa para aumento da vida útil e potencial tecnológico do leite.(AU)

Qualidade do leite cru refrigerado avaliado por diferentes laboratórios credenciados pelo MAPA / Quality of refrigerated raw milk evaluated by different laboratories accredited by MAPA

O objetivo deste trabalho foi analisar e correlacionar os resultados de qualidade do leite cru refrigerado de dez propriedades rurais de Viçosa (MG) obtidos por métodos de referências do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento e por espectrofotômetros de luz infravermelha em três laboratórios (A, B e C) credenciados pelo mesmo órgão de fiscalização. As amostras de leite foram analisadas quanto à contagem bacteriana, contagem de células somáticas (CCS) e teores de gordura, proteína e extrato seco desengordurado (ESD). Não houve discordância de amostras de leite quanto aos teores de proteína e gordura. Porcentagens diferentes de discordância foram observadas entre os resultados dos laboratórios e método de referência quanto à CCS, contagem bacteriana e teores de ESD. Os teores médios de proteína dos laboratórios A e B e os teores médios de ESD de todos laboratórios não foram estatisticamente iguais (p<0,05) aos teores obtidos pelo método de referência. Os teores de gordura obtidos no laboratório B não tiveram correlação estatística (p>0,05) com os teores obtidos pelo método de referência. Observou-se que as CCS e contagens bacterianas médias de todos os laboratórios foram estatisticamente iguais (p>0,05) e correlacionadas (p<0,05) às contagens médias obtidas pelos métodos de referência. Conclui-se que os teores de proteína em dois laboratórios e ESD em todos os laboratórios não são equivalentes com os métodos de referência do MAPA. É importante que os laboratórios revejam a calibração dos seus equipamentos quanto à quantificação dos teores de sólidos do leite.

The objective of this study was to analyze and to correlate the results of refrigerated raw milk quality in ten farms of Viçosa (MG). The milk was analyzed by the Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento standard methods and by infrared spectrophotometers in three laboratories (A, B and C) accredited by the same institution. The milk samples were analyzed for bacterial counts, somatic cell count (SCC) and fat, protein and solids not fat (SNF) tenors. There were no disagreement milk samples as the protein and fat tenors. Different percentages of disagreement were observed between the results of laboratory and standard method as the SCC, bacterial count and SNF tenor. The protein mean tenor of A and B laboratories and the SNF mean tenor of all laboratories were not statistically equal (p<0.05) the tenors obtained by standard method. The fat tenors obtained in B laboratory were not statistically correlated (p>0.05) with tenors obtained by the standard method. It was observed that the means of SCC and bacterial counts of all laboratories were statistically the same (p>0.05) and correlated (p<0.05) to the means counts obtained by standard methods. It is concluded that the protein tenors in two laboratories and SNF in all laboratories are not equivalent with the reference methods of MAPA. It is important that laboratories review the calibration of the equipment on the quantification of milk solids tenors.

Detection of antimicrobial residues in informal raw milk in the central-west of Minas Gerais / Detecção de resíduos de antimicrobianos em leite cru informal no centro-oeste de Minas Gerais

The presence of antimicrobial residues in informal milk, sold in inland cities, a situation commonly found in Brazilian cities, since the inspection of this type of product is incipient. As a case study, the municipalities of Arcos, Lagoa da Prata and Santo Antônio do Monte, in the center-west of Minas Gerais, were considered. Two collections were carried out in 22 informal sales points in 2020. To detect antimicrobial residues, the Trisensor® test was used, in which the presence of three groups of antimicrobials can be observed: beta-lactams, tetracyclines and sulfonamides. After performing the analyses, negative results were observed for the groups of tetracyclines and sulfonamides. However, when evaluating the beta-lactam group, positive results were observed: in a total of 44 samples, 54.5% were positive for the presence of beta-lactams (24 samples). The high incidence of antimicrobial residues in the analyzed samples (54.5%) confirms the need for surveillance of the product that is commercialized, and it is extremely important to adopt strict measures by inspection bodies since the presence of residues of antimicrobials in raw milk can, directly and indirectly, affect health.(AU)

O objetivo do presente estudo consiste em avaliar a presença de resíduos de antimicrobianos em leite informal, comercializados em cidades interioranas, situação comumente encontrada nas cidades brasileiras, visto que a fiscalização sobre este tipo de produto é incipiente. Como estudo de caso, foram considerados os municípios de Arcos, Lagoa da Prata e Santo Antônio do Monte, no centro-oeste de Minas Gerais. Foram realizadas duas coletas em 22 pontos de venda informal em 2020. Para detecção dos resíduos de antimicrobianos foi utilizado o teste Trisensor®, onde pode ser observada a presença de três grupos de antimicrobianos: beta-lactâmicos, tetraciclinas e sulfonamidas. Após a realização das análises, observou-se resultados negativos para os grupos das tetraciclinas e sulfonamidas. Entretanto, ao se avaliar o grupo dos beta-lactâmicos, observou-se resultados positivos significativos, onde em um total de 44 amostras, 54,5% foram positivas para a presença de beta-lactâmicos (24 amostras). A alta incidência de resíduos de antimicrobianos nas amostras analisadas (54,5%), confirma a necessidade da vigilância acerca do produto que é comercializado, sendo de extrema importância a adoção de medidas rigorosas por parte dos órgãos fiscalizadores, pois a presença de resíduos de antimicrobianos no leite cru pode afetar direta e indiretamente a saúde.(AU)

Isolation of Escherichia coli and Staphylococcus aureusin raw milk from refrigeration tanks: identification and antimicrobial resistance profiles / Isolamento de Escherichia coli e Staphylococcus aureus em leite cru de tanques de refrigeração: identificação e perfis de resistência antimicrobiana

Escherichia coli and Staphylococcus aureus in milk cooling tank reflects a hygienic deficit in animal management, production environment, and milk obtainment. With implications for public health as agents of infection and food poisoning, and the presence of antimicrobial-resistant strains. Therefore, were investigated in cooling tanks with high counts of somatic cells and total bacteria in milk. Microorganisms, in which a profile of resistance to antimicrobials was investigated, and whether there was a similarity in this profile between the strains of the eight dairy properties.Therefore, eighty-eight samples were obtained, and inoculated on Compact Dry® plates. Of this total, 27.27% (24/88) samples tested positive for E. coli and 56.81% (50/88) for S. aureus. Among 24 E. coli strains subjected to disk-diffusion antibiograms, 70.83% were resistant to rifampicin, 50% to ampicillin and 41.67% to cefoxitin and erythromycin, while of the 51 S. aureus strains, 94.32% expressed resistance to azetroanam, 86.27% to ampicillin and nalidixic acid, 76.47% to rifampicin and 47.06 % to erythromycin and cefoxitin. A criterion of resistance to over three antibiotics was observed for 8.33% (2/24) of the isolated E. coli strains and 17.65% (9/51) of the S. aureus strains, characterizing them as multidrug resistant (MDR) strains. Resistance phenotypes displayed high similarity between properties F5 and F6 for S. aureus, and properties F6 and F8 for E. coli when applying the Jaccard index. The presence of these antibiotic-resistant pathogenic microorganisms indicate flaws in milk production handling and sanitary conditions, representing risk to milk consumers.(AU)

Escherichia coli e Staphylococcus aureus no tanque de resfriamento de leite refletem um déficit higiênico no manejo animal, ambiente de produção e obtenção de leite. Com implicações para a saúde pública como agentes de infecção e intoxica-ção alimentar e presença de cepas resistentes a antimicrobianos. Portanto, foram investigados em tanques de resfriamento com altas contagens de células somáticas e bactérias totais no leite. Microrganismos, nos quais foi investigado o perfil de resistência aos antimicrobianos e se havia semelhança nesse perfil entre as cepas das oito propriedades leiteira. Para tanto, oitenta e oito amostras foram coletadas inoculadas em placas de Compact Dry®, destas 27,27% (24/88) amostras revelaram contaminação com E. coli, e 56,81% (50/88) com S. aureus. Entre 24 cepas de E. coli submetidas a antibiograma por disco-difusão 70,83% foram resistentes a rifampicina, 50% ampicilina, 41,67% cefoxitina e eritromicina, enquanto das 51 cepas de S. aureus 94,32% expressaram resistência a azetroanam, 86,27% a ampicilina e nalidíxico ácido, 76,47 % a rifampicina, e 47,06% a cefoxitina e eritromicina. O critério de resistência a mais de três antibióticos caracterizou 8,33% (2/24) das cepas de E. coli, e 17,65% (9/51) de S. aureus como multidroga resistente (MDR). O fenótipo resistência mostrou elevada similaridade entre as proprie-dades (F5 e F6) para S. aureus, e das propriedades (F6 e F8) para E. coli aplicando-se o índice de Jaccard. Estes microrganis-mos patogênicos resistentes a antibióticos, indicam falhas no manuseio e obtenção higiênica do leite, e que estes representam risco aos consumidores do leite.(AU)

Potentially pathogenic Staphylococcus aureus and Listeria spp. in Brazilian unpasteurized cheese production / Staphylococcus aureus e Listeria spp. potencialmente patogênicos na produção de queijos não pasteurizados

This study aimed to identify potentially pathogenic microorganisms (Listeria innocua, L. seeligeri, L. ivanovii, L. monocytogenes, Staphylococcus aureus, and several virulence genes) in unpasteurized cheese production in the northeastern region of the state of São Paulo, Brazil. Listeria species were detected in 68 (64.14%) out of 106 samples of bovine feces, swabs from milkers' and cheese handlers' hands, milking buckets, raw milk, whey, water, cheese processing surface,s and utensils. All the samples collected at one farm were contaminated with Listeria spp. L. innocua, L. seeligeri, L. ivanovii, or L. monocytogenes were not detected in the samples collected in this study. A set of 391 Staphylococcus spp. isolates were obtained in these samples, from which 60 (15.31%) were identified as S. aureus using PCR (Polymerase Chain Reaction). S. aureus carrying virulence genes (eta, hlg, seg, seh, sei) were detected in milk, in swabs from cheese handler's hands, whey, milk, sieves, buckets, and cheese. The hlg gene (encodes gamma hemolysin) was detected in all the S. aureus isolates. These findings show that poor hygienic practice is associated with a higher risk of pathogenic bacteria in milk or cheese, providing useful information for public health authorities to increase food safety surveillance and prevent the dissemination of pathogens.

O objetivo desse estudo foi identificar microrganismos potencialmente patogênicos (Listeria innocua, L. seeligeri, L. ivanovii, L. monocytogenes, Staphylococcus aureus e diversos genes de virulência) na produção de queijos de leite cru na região noroeste do Estado de São Paulo, Brasil. Listeria foram detectadas em 68 (64,14%) das 106 amostras obtidas de fezes bovinas, suabes das mãos de ordenhadores e queijeiros, baldes, leite cru, soro, água, superfícies e utensílios da produção de queijos. Todas as amostras coletadas em uma fazenda estavam contaminadas com Listeria spp. L. innocua, L. seeligeri, L. ivanovii, e L. monocytogenes não foram detectadas nas amostras coletadas nesse estudo. Um conjunto de 391 isolados de Staphylococcus spp. foram obtidos das amostras, e desses 60 (15,31%) foram identificados como S. aureus pela PCR (Polymerase Chain Reaction). S. aureus contendo genes de virulência (eta, hlg, seg, seh, sei) foram detectados em leite, mãos dos ordenhadores, soro, utensílios e queijos. O gene hlg (gama-hemolisina)foi detectado em todos os isolados de S. aureus.Esses resultados demonstram que práticas inadequadas de higiene estão associadas com um maior risco da presença de bactérias patogênicas no leite e queijos crus, fornecendo informações para as autoridades de saúde pública para incrementarem a vigilância e prevenirem a disseminação de patógenos.

Fat content in fermented milk beverages: determination by the Gerber method / Determinação do teor de gordura de bebidas lácteas fermentadas pelo método de Gerber

Fermented milk beverage is a product containing milk, whey and/or other ingredients, fermented by specific microorganisms and/or added with fermented milks. Fat determination in this product is important to quality control and inspection. The Gerber method is used worldwide as a simple and rapid method for fat content analysis in raw and processed milks. In Brazil, Roese-Gottlieb is the official method for analysis of fat content in milk beverages. However, the use of Gerber method for fat content determination in fermented milk beverages is widespread throughout the industry in the country. Several authors have tested the use of Gerber method for some dairy products, but there is no report on this evaluation for fermented milk beverages. In this context, the objectives of this work were to determine the fat content of fermented milk beverages by the Gerber method and evaluate the performance of this test, using Roese-Gottlieb as a reference method. Thirty samples of fermented milk beverages were analyzed by both methods. The fat contents ranged from 1.25 to 2.40% by the Gerber method and from 1.24 to 2.50% by the Roese-Gottlieb method. There was no difference (p > 0.05) between the methods. The Gerber method can be used to determine the fat content of fermented milk beverages, without prejudice to the results obtained.(AU)

Bebida láctea fermentada é um produto que contém leite, soro e/ou outros ingredientes, fermentada pela ação de microrganismos específicos e/ou adicionada de leites fermentados. A determinação do teor de gordura nesse produto é importante para o controle de qualidade e inspeção. O método de Gerber é utilizado em todo o mundo como um método simples e rápido para a análise do teor de gordura em leites cru e processado. No Brasil, Roese-Gottlieb é o método oficial para análise do teor de gordura em bebidas lácteas. No entano, a utilização do método de Gerber para determinação do teor de gordura em bebidas lácteas é frequente nas indústrias do país. Vários autores testaram o método de Gerber para alguns products lácteos, mas não há relato dessa avaliação para bebidas lácteas fermentadas. Tendo em vista o que foi exposto, os objetivos deste trabalho foram determinar o teor de gordura de bebidas lácteas fermentadas pelo método de Gerber e avaliar o desempenho desse teste, utilizando Roese-Gottlieb como método de referência. Trinta amostras de bebidas lácteas fermentadas foram analisadas por ambos os métodos. Os teores de gordura variaram de 1,25 a 2,40% pelo método de Gerber e de 1,24 a 2,50% pelo método de Roese-Gottlieb. Não foi constatada diferença (p > 0,05) entre os métodos. O método de Gerber pode ser utilizado para determinação do teor de gordura de bebidas lácteas fermentadas, sem prejuízo dos resultados obtidos.(AU)

Synthesis of silver nanoparticles using Lactobacillus bulgaricus and assessment of their antibacterial potential

Abstract Many pathogenic strains have acquired multidrug-resistant patterns in recent a year, which poses a major public health concern. The growing need for effective antimicrobial agents as novel therapies against multidrug-resistant pathogens has drawn scientist attention toward nanotechnology. Silver nanoparticles are considered capable of killing multidrug-resistant isolates due to their oligo-dynamic effect on microorganisms. In this research study NPs were synthesized using the gram-positive bacteria Lactobacillus bulgaricus and its activity against selected pathogenic strains. Lactobacillus bulgaricus pure cultures were isolated from raw milk and grown in De Man, Rogasa, and Sharp broth for synthesis of nanoparticles. Lactobacillus bulgaricus culture was centrifuged and Cell- free supernatant of it was employed with aqueous silvery ions and evaluated their antibacterial activities against bacterial strains i.e. Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and Salmonella typhi using agar well diffusion assay. Antibiotic profiling against selected pathogenic strains were also conducted using disc diffusion method. The synthesis and characterization of silver nanoparticles were monitored primarily by the conversion of the pale-yellow color of the mixture into a dark-brown color and via ultraviolet-visible absorption spectroscopy and Scanning electron microscopy respectively. The result showed that that AgNPs with size (30.65-100 nm) obtained from Lactobacillus bulgaricus were found to exhibit antibacterial activities against selected bacterial strains. Taken together, these findings suggest that Lactobacillus bulgaricus has great potential for the production of AgNPs with antibacterial activities and highly effective in comparison to tested antibiotics.

Resumo Muitas cepas patogênicas adquiriram padrões multirresistentes nos últimos anos, o que representa um grande problema de saúde pública. A crescente necessidade de agentes antimicrobianos eficazes como novas terapias contra patógenos multirresistentes atraiu a atenção dos cientistas para a nanotecnologia. As nanopartículas de prata são consideradas capazes de matar isolados multirresistentes por causa de seu efeito oligodinâmico em microrganismos. Neste estudo de pesquisa, as NPs foram sintetizadas usando a bactéria Gram-positiva Lactobacillus bulgaricus e sua atividade contra cepas patogênicas selecionadas. Culturas puras de Lactobacillus bulgaricus foram isoladas do leite cru e cultivadas em caldo De Man, Rogasa e Sharp para síntese de nanopartículas. A cultura de Lactobacillus bulgaricus foi centrifugada, e o sobrenadante livre de células foi empregado com íons prateados aquosos, avaliando-se suas atividades antibacterianas contra cepas bacterianas, isto é, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis e Salmonella typhi usando ensaio de difusão em poço de ágar. O perfil de antibióticos contra cepas patogênicas selecionadas também foi conduzido usando o método de difusão em disco. A síntese e a caracterização das nanopartículas de prata foram monitoradas principalmente pela conversão da cor amarelo-pálida da mistura em uma cor marrom-escura e por espectroscopia de absorção visível e ultravioleta e por microscopia eletrônica de varredura, respectivamente. O resultado mostrou que AgNPs com tamanho de 30,65-100 nm, obtidas de Lactobacillus bulgaricus, exibiram atividades antibacterianas contra cepas bacterianas selecionadas. Tomados em conjunto, esses achados sugerem que o Lactobacillus bulgaricus tem um grande potencial para a produção de AgNPs com atividades antibacterianas e altamente eficazes em comparação aos antibióticos testados.