Study of digital palmar and plantar arteries of horses and mules by B-mode and Doppler ultrasonography / Estudo das artérias digitais palmares e plantares de equinos e muares por ultrassonografia modo-B e Doppler

The present study aimed to evaluate and compare the palmar and plantar digital arteries of 10 horses and 10 mules through B-mode and spectral Doppler ultrasound. Likewise, compare the plantar arteries of the pelvic limbs with the palmar arteries of the thoracic limbs, in addition to verifying the differences of the digital arteries in the contralateral limbs (right and left) in horses and mules using B-mode and spectral Doppler ultrasonography. The evaluated parameters were the diameter and the intima-media thickness (IMT), resistivity index (RI), pulsatility index (PI), peak of systolic velocity (pSV), final diastolic velocity (fDV) and mean velocity (MV) of the lateral and medial palmar and plantar arteries digital in healthy horses and mules. The horses presented higher diameters values, IMT, pSV, fDV and MV in comparison to the mules. The variables RI and PI also presented differences between horses and mules. Also, both species showed higher values in the variables of B-mode and Doppler ultrasonography in the thoracic limbs. Differences were also detected in the comparison between the limb sides (right and left) in the two modalities. The B-Mode and spectral Doppler ultrasound techniques are viable tools to identify differences in the palmar and plantar digital arteries in healthy horses and mules, highlight the differences between the thoracic and pelvic limbs and their respective sides (right and left) as well.

O presente estudo teve como objetivo avaliar e comparar as artérias digitais palmares e plantares de 10 equinos e 10 muares, por meio de ultrassom modo B e Doppler espectral. Da mesma forma, buscou-se comparar as artérias plantares dos membros pélvicos com as artérias palmares dos membros torácicos, além de se verificarem as diferenças das artérias digitais nos membros contralaterais (direito e esquerdo) em equinos e mulas, por meio de ultrassonografia modo B e Doppler espectral. Os parâmetros avaliados foram o diâmetro e a espessura médio-intimal (EMI), o índice de resistividade (IR), o índice de pulsatilidade (IP), o pico de velocidade sistólica (pVS), a velocidade diastólica final (VDf) e a velocidade média (VM) das artérias palmares e plantares lateral e medial digitais em equinos e muares sadios. Os equinos apresentaram maiores valores de diâmetros, EMI, pVS, VDf e VM em comparação aos muares. As variáveis IR e IP também apresentaram diferenças entre equinos e muares. Cavalos e mulas apresentaram maiores valores nas variáveis de ultrassonografia modo B e Doppler nos membros torácicos. Também foram detectadas diferenças na comparação entre os lados dos membros (direito e esquerdo) nas duas modalidades. As técnicas de ultrassom modo-B e Doppler espectral são ferramentas viáveis para identificar diferenças nas artérias digitais palmares e plantares em equinos e muares saudáveis, bem como para destacar as diferenças entre os membros torácicos e pélvicos e seus respectivos lados (direito e esquerdo).

Evaluation of antioxidant, photoprotective and antinociceptive activities of Marcetia macrophylla extract: potential for formulation of sunscreens / Avaliação da atividade antioxidante, photoprotetora e antinociceptiva de Marcetia macrophylla: potencial formulação fotoprotetora

Abstract The antioxidant, photoprotective and antinociceptive Marcetia macrophylla active extract was investigated as an active ingredient in a sunscreen cream formulation. Thus, the M. macrophylla extract showed IC50 of 3.43 mg/ml of the antioxidant (DPPH∙ scavenging test) and Sun Protection Factor of 20.25 (SPF/UV-B, at 250 µg/ml) and UV-A of 78.09% (photobleaching trans-resveratrol test). The antinociceptive activity was superior to all standards tested using the in vivo acetic acid-induced writhing test (99.14% at the dose of 200 mg/kg) and the high-performance liquid chromatography coupled with diode array detector and mass spectroscopy multi-stage (HPLC-DAD-MS/MS) enabled the structural characterization of the quercetin-3-O-hexoside, quercetin-3-O-pentoside and quercetin-3-O-desoxihexoside. The pharmaceutical formulation containing the Marcetia macrophylla crude active extract was prepared and the physicochemical tests (organoleptic characteristics, pH analysis and centrifugation), the in vitro UVB (sun protection factor, SPF) and UVA (β-carotene) using the spectroscopic method were investigated. The formulation showed satisfactory results concerning the physicochemical parameters evaluated and active against the UV test. Thus, M. macrophylla showed biological activities with potential use in pharmaceutical preparations.

Resumo O extrato bruto de Marcetia macrophylla mostrou atividade antioxidante, fotoprotetora e antinociceptiva, sendo em seguida investigado como ingrediente ativo em uma formulação fotoprotetora. Assim, o extrato de M. macrophylla apresentou atividade antioxidante com IC50 de 3,43 mg/mL (teste de sequestro do DPPH∙) e Fator de Proteção Solar de 20,25 (FPS/UV-B, 250 µg/mL) e UV-A de 78,09% (teste de fotobranqueamento do trans-resveratrol). A atividade antinociceptiva usando o teste in vivo de contorções abdominais induzidas por ácido acético foi superior a todos os padrões testados (99,14% na dose de 200 mg/Kg). A análise por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a detector de fotodiodos e espectroscopia de massas multi-estágio (CLAE-DAD-EM/EM) possibilitou a caracterização dos flavonoides quercetina-3-O-hexosídeo, quercetina-3-O-pentosídeo e quercetina-3-O-desoxihexosídeo. A formulação farmacêutica contendo o extrato ativo bruto de Marcetia macrophylla foi preparada e os testes físico-químicos (características organolépticas, análise de pH e centrifugação), o UVB in vitro (fator de proteção solar, FPS) e UVA (β-caroteno) foram investigados. A formulação apresentou resultados satisfatórios frente aos parâmetros físico-químicos avaliados e ativos contra UV. Assim, M. macrophylla apresentou atividades biológicas com potencial uso em preparações fitofarmacêuticas.

B-mode and Doppler ultrasound of bitches' kidneys with mammary neoplasia submitted to adjuvant chemotherapy / Ultrassonografia modo-B e Doppler dos rins de cadelas com neoplasias mamárias submetidas à quimioterapia adjuvante

Mammary neoplasia represents the most frequently diagnosed type of neoplasia in bitches. Although surgical removal is the procedure of choice for therapeutic management, chemotherapy protocols appear as important allies and adjuvants. Despite the great advances that have occurred in the field of cancer therapy, the systemic repercussions of these drugs still impose important limitations on their use. In this sense, the development of increasingly targeted therapeutic protocols and preventive monitoring of patients represent important strategies to avoid possible complications - among them, Acute Kidney Injury (AKI). Routinely, ultrasound evaluation is used to identify morphological or metastatic variations in abdominal cavity organs. Acting complementary to the B-mode evaluation, Doppler mapping proves to be efficient in recognizing alterations in vascular hemodynamics. Therefore, the objective of the present study was to evaluate the use of B-mode and Doppler ultrasound to identify renal morphological and hemodynamic alterations in bitches with mammary neoplasia submitted to adjuvant chemotherapy protocols that associate gemcitabine with carboplatin. Thirteen bitches were included, without distinction of breed and between seven and 13 years of age. The animals were evaluated ultrasonographically at two different times during three consecutive chemotherapy cycles: before (T0) and one and a half hours after each cycle (T1), for 42 days. No morphological changes were observed in B-mode throughout the chemotherapy protocol. However, the Doppler velocimetry indices demonstrated statistical differences before (T0) and after (T1) the administration of the drugs. It was concluded that Doppler ultrasound could be used as a complementary method for monitoring the renal response of patients exposed to nephrotoxic drugs and potentially causing renal injury.

As neoplasias mamárias representam o tipo de neoplasma mais frequentemente diagnosticado em fêmeas da espécie canina. Embora a remoção cirúrgica seja o procedimento de eleição para a conduta terapêutica, os protocolos quimioterápicos aparecem como importantes aliados e adjuvantes. Apesar dos grandes avanços ocorridos na área da terapia oncológica, as repercussões sistêmicas destes fármacos ainda impõem importantes limitações ao seu uso. Neste sentido, o desenvolvimento de protocolos terapêuticos cada vez mais direcionados e o monitoramento preventivo dos pacientes representam estratégias importantes para evitar possíveis complicações - dentre elas, a injúria renal aguda (IRA). Rotineiramente, a avaliação ultrassonográfica é utilizada para identificação de variações morfológicas ou metastáticas em órgãos da cavidade abdominal. Atuando de forma complementar à avaliação em modo-B, o mapeamento Doppler mostra-se eficiente no reconhecimento de alterações na hemodinâmica vascular. Portanto, o objetivo do presente estudo foi avaliar a utilização da ultrassonografia modo-B e Doppler como método para identificação de alterações morfológicas e hemodinâmicas renais em cadelas com neoplasias mamárias submetidas a protocolos quimioterápicos adjuvantes que associam a gencitabina à carboplatina. Foram incluídas 13 fêmeas caninas, sem distinção quanto a raça e com idades entre sete e 13 anos. Os animais foram avaliados ultrassonograficamente em dois momentos distintos durante três ciclos quimioterápicos consecutivos: antes (T0) e uma hora e meia após a realização de cada ciclo (T1), totalizando 42 dias. Não foram observadas alterações morfológicas em modo-B ao longo do protocolo quimioterápico. Entretanto, os índices dopplervelocimétricos demonstraram diferenças estatísticas antes (T0) e após (T1) a administração dos fármacos. Concluiu-se que a ultrassonografia Doppler pode ser utilizada como método complementar para o monitoramento da resposta renal de pacientes expostos a fármacos nefrotóxicos e potencialmente causadores de injúrias renais.

Down-regulation of complement genes in lipopolysaccharide-challenged zebrafish (Danio rerio) larvae exposed to Indonesian propolis / Regulação negativa dos genes do complemento em larvas de peixe-zebra (Danio rerio) desafiadas com lipopolissacarídeo expostas à própolis indonésia

Abstract Although propolis has been reported for having anti-inflammatory activities, its effects on complement system has not been much studied. This research was conducted to find out the effects of Indonesian propolis on the expression levels of C3, C1r/s, Bf, MBL, and C6 in zebrafish larvae which were induced by lipopolysaccharide (LPS). Counting of macrophages migrating to yolk sac and liver histology were carried out. Larvae were divided into four groups: CON (cultured in E3 medium only), LPS (cultured in a medium containing 0.5 μg/L LPS), LPSIBU (cultured in a medium containing LPS, and then treated with 100 μg/L ibuprofen for 24 hours), and LPSPRO (cultured in a medium containing LPS, and then immersed in 14,000 μg/L propolis for 24 hours) groups. The results showed that complement gene expression in larvae from the LPSIBU and LPSPRO groups were generally lower than in larvae from the LPS group. The number of macrophage migrations to the yolk in the LPSPRO group was also lower than in the LPS group. Histological structure of liver in all groups were considered normal. This study shows that Indonesian propolis has the potential to be used as an alternative to the substitution of NSAIDs.

Resumo Embora a própolis tenha sido relatada por ter atividade anti-inflamatória, seus efeitos no sistema complemento, uma parte do sistema imunológico inato, não foram muito estudados. Esta pesquisa foi conduzida para descobrir os efeitos da própolis da Indonésia nos níveis de expressão de C3, C1r/s, Bf, MBL e C6 em larvas de peixe-zebra induzidas por lipopolissacarídeo (LPS). Foram realizadas contagens de macrófagos que migram para o saco vitelino e histologia do fígado. As larvas foram divididas em quatro grupos: CON (cultivadas apenas em meio E3), LPS (cultivadas em meio contendo 0,5 μg/L de LPS), LPSIBU (cultivadas em meio contendo LPS e, em seguida, tratadas com 100 μg/L de ibuprofeno por 24 horas) e LPSPRO (cultivado em meio contendo LPS, e então imerso em própolis 14,000 μg/L por 24 horas). Os resultados mostraram que a expressão do gene do complemento em larvas dos grupos LPSIBU e LPSPRO foi geralmente menor que em larvas do grupo LPS. O número de migrações de macrófagos para a gema no grupo LPSPRO também foi menor que no grupo LPS. A estrutura histológica do fígado em todos os grupos foi considerada normal. Este estudo mostra que a própolis indonésia tem potencial para ser utilizada como alternativa na substituição dos AINEs (anti-inflamatórios não esteroides).

Study of resveratrol against bone loss by using in-silico and in-vitro methods / Estudo do resveratrol contra a perda óssea usando métodos in silico e in vitro

Abstract By applying the in-silico method, resveratrol was docked on those proteins which are responsible for bone loss. The Molecular docking data between the resveratrol and Receptor activator of nuclear factor-kappa-Β ligand [RANKL] receptors proved that resveratrol binds tightly to the receptors, showed the highest binding affinities of −6.9, −7.6, −7.1, −6.9, −6.7, and −7.1 kcal/mol. According to in-vitro data, Resveratrol reduced the osteoclasts after treating Marrow-Derived Macrophages [BMM] with Macrophage colony-stimulating factor [MCSF] 20ng / ml and RANKL 50ng / ml, with different concentrations of resveratrol (2.5, 10 μg / ml) For 7 days, the cells were treated with MCSF (20 ng / ml) and RANKL (40 ng / ml) together with concentrated trimethyl ether and resveratrol (2.5, 10 μg / ml) within 12 hours. Which, not affect cell survival. After fixing osteoclast cells with formaldehyde fixative on glass coverslip followed by incubation with 0.1% Triton X-100 in PBS for 5 min and after that stain with rhodamine phalloidin staining for actin and Hoechst for nuclei. Fluorescence microscopy was performed to see the distribution of filaments actin [F.actin]. Finally, resveratrol reduced the actin ring formation. Resveratrol is the best bioactive compound for drug preparation against bone loss.

Resumo Com a aplicação do método in-silico, o resveratrol foi ancorado nas proteínas responsáveis ​​pela perda óssea. Os dados de docking molecular entre o resveratrol e o ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa-Β [Receptor Activator of Nuclear Factor kappa-B Ligant (RANKL)] provaram que o resveratrol se liga fortemente aos receptores, mostraram as afinidades de ligação mais altas de −6,9, −7,6, −7,1, −6,9, - 6,7 e -7,1 kcal / mol. De acordo com dados in-vitro, o resveratrol reduziu os osteoclastos após o tratamento de macrófagos derivados da medula óssea [Bone Marrow-derived Macrophage (BMM)] com fator estimulador de colônias de macrófagos [Macrophage Colony-Stimulating Factor (MCSF)] 20ng / ml e RANKL 50ng / ml, com diferentes concentrações de resveratrol (2,5, 10 μg / ml). Durante sete dias, as células foram tratadas com MCSF (20 ng / ml) e RANKL (40 ng / ml) juntamente com éter trimetílico concentrado e resveratrol (2,5, 10 μg / ml) em 12 horas, processo que não afeta a sobrevivência celular. Após a fixação de células de osteoclastos com fixador de formaldeído em lamela de vidro seguido de incubação com 0,1% Triton X-100 em PBS por 5 min, foi realizado posteriormente o procedimento para corar com rodamina faloidina a actina e Hoechst os núcleos. A microscopia de fluorescência foi realizada para ver a distribuição dos filamentos de actina [F.actina]. Finalmente, o resveratrol reduziu a formação do anel de actina. O resveratrol é o melhor composto bioativo para o preparo de medicamentos contra a perda óssea.

Mitigation of cisplatin induced nephrotoxicity by casticin in male albino rats / Mitigação da nefrotoxicidade induzida pela cisplatina pela casticina em ratos albinos machos

Cisplatin (CP) is a commonly used, powerful antineoplastic drug, having numerous side effects. Casticin (CAS) is considered as a free radical scavenger and a potent antioxidant. The present research was planned to assess the curative potential of CAS on CP persuaded renal injury in male albino rats. Twenty four male albino rats were distributed into four equal groups. Group-1 was considered as a control group. Animals of Group-2 were injected with 5mg/kg of CP intraperitoneally. Group-3 was co-treated with CAS (50mg/kg) orally and injection of CP (5mg/kg). Group-4 was treated with CAS (50mg/kg) orally throughout the experiment. CP administration substantially reduced the activities of catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), peroxidase (POD), glutathione S-transferase (GST), glutathione reductase (GSR), glutathione (GSH) content while increased thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), and hydrogen peroxide (H2O2) levels. Urea, urinary creatinine, urobilinogen, urinary proteins, kidney injury molecule-1 (KIM-1), and neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) levels were substantially increased. In contrast, albumin and creatinine clearance was significantly reduced in CP treated group. The results demonstrated that CP significantly increased the inflammation indicators including nuclear factor kappa-B (NF-κB), tumor necrosis factor-α (TNF-α), Interleukin-1β (IL-1β), Interleukin-6 (IL-6) levels and cyclooxygenase-2 (COX-2) activity and histopathological damages. However, the administration of CAS displayed a palliative effect against CP-generated renal toxicity and recovered all parameters by bringing them to a normal level. These results revealed that the CAS is an effective compound having the curative potential to counter the CP-induced renal damage.

A cisplatina (CP) é uma droga antineoplásica poderosa, comumente usada, com vários efeitos colaterais. Casticin (CAS) é considerado um eliminador de radicais livres e um potente antioxidante. A presente pesquisa foi planejada para avaliar o potencial curativo da CAS em lesão renal induzida por PC em ratos albinos machos. Vinte e quatro ratos albinos machos foram distribuídos em quatro grupos iguais. O Grupo 1 foi considerado grupo controle. Os animais do Grupo 2 foram injetados com 5 mg / kg de PB por via intraperitoneal. O Grupo 3 foi cotratado com CAS (50 mg / kg) por via oral e injeção de CP (5 mg / kg). O Grupo 4 foi tratado com CAS (50 mg / kg) por via oral durante todo o experimento. A administração de CP reduziu substancialmente as atividades de catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD), peroxidase (POD), glutationa S-transferase (GST), glutationa redutase (GSR), glutationa (GSH), enquanto aumentou as substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e níveis de peróxido de hidrogênio (H2O2). Os níveis de ureia, creatinina urinária, urobilinogênio, proteínas urinárias, molécula 1 de lesão renal (KIM-1) e lipocalina associada à gelatinase de neutrófilos (NGAL) aumentaram substancialmente. Em contraste, a albumina e a depuração da creatinina foram significativamente reduzidas no grupo tratado com PC. Os resultados demonstraram que a CP aumentou significativamente os indicadores de inflamação, incluindo fator nuclear kappa-B (NF-κB), fator de necrose tumoral-α (TNF-α), interleucina-1β (IL-1β), interleucina-6 (IL-6) níveis e atividade da ciclooxigenase-2 (COX-2) e danos histopatológicos. No entanto, a administração de CAS apresentou um efeito paliativo contra a toxicidade renal gerada por CP e recuperou todos os parâmetros, trazendo-os a um nível normal. Estes resultados revelaram que o CAS é um composto eficaz com potencial curativo para combater o dano renal induzido por CP.

Mitigation of cisplatin induced nephrotoxicity by casticin in male albino rats / Mitigação da nefrotoxicidade induzida pela cisplatina pela casticina em ratos albinos machos

Cisplatin (CP) is a commonly used, powerful antineoplastic drug, having numerous side effects. Casticin (CAS) is considered as a free radical scavenger and a potent antioxidant. The present research was planned to assess the curative potential of CAS on CP persuaded renal injury in male albino rats. Twenty four male albino rats were distributed into four equal groups. Group-1 was considered as a control group. Animals of Group-2 were injected with 5mg/kg of CP intraperitoneally. Group-3 was co-treated with CAS (50mg/kg) orally and injection of CP (5mg/kg). Group-4 was treated with CAS (50mg/kg) orally throughout the experiment. CP administration substantially reduced the activities of catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), peroxidase (POD), glutathione S-transferase (GST), glutathione reductase (GSR), glutathione (GSH) content while increased thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), and hydrogen peroxide (H2O2) levels. Urea, urinary creatinine, urobilinogen, urinary proteins, kidney injury molecule-1 (KIM-1), and neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) levels were substantially increased. In contrast, albumin and creatinine clearance was significantly reduced in CP treated group. The results demonstrated that CP significantly increased the inflammation indicators including nuclear factor kappa-B (NF-κB), tumor necrosis factor-α (TNF-α), Interleukin-1β (IL-1β), Interleukin-6 (IL-6) levels and cyclooxygenase-2 (COX-2) activity and histopathological damages. However, the administration of CAS displayed a palliative effect against CP-generated renal toxicity and recovered all parameters by bringing them to a normal level. These results revealed that the CAS is an effective compound having the curative potential to counter the CP-induced renal damage.(AU)

A cisplatina (CP) é uma droga antineoplásica poderosa, comumente usada, com vários efeitos colaterais. Casticin (CAS) é considerado um eliminador de radicais livres e um potente antioxidante. A presente pesquisa foi planejada para avaliar o potencial curativo da CAS em lesão renal induzida por PC em ratos albinos machos. Vinte e quatro ratos albinos machos foram distribuídos em quatro grupos iguais. O Grupo 1 foi considerado grupo controle. Os animais do Grupo 2 foram injetados com 5 mg / kg de PB por via intraperitoneal. O Grupo 3 foi cotratado com CAS (50 mg / kg) por via oral e injeção de CP (5 mg / kg). O Grupo 4 foi tratado com CAS (50 mg / kg) por via oral durante todo o experimento. A administração de CP reduziu substancialmente as atividades de catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD), peroxidase (POD), glutationa S-transferase (GST), glutationa redutase (GSR), glutationa (GSH), enquanto aumentou as substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e níveis de peróxido de hidrogênio (H2O2). Os níveis de ureia, creatinina urinária, urobilinogênio, proteínas urinárias, molécula 1 de lesão renal (KIM-1) e lipocalina associada à gelatinase de neutrófilos (NGAL) aumentaram substancialmente. Em contraste, a albumina e a depuração da creatinina foram significativamente reduzidas no grupo tratado com PC. Os resultados demonstraram que a CP aumentou significativamente os indicadores de inflamação, incluindo fator nuclear kappa-B (NF-κB), fator de necrose tumoral-α (TNF-α), interleucina-1β (IL-1β), interleucina-6 (IL-6) níveis e atividade da ciclooxigenase-2 (COX-2) e danos histopatológicos. No entanto, a administração de CAS apresentou um efeito paliativo contra a toxicidade renal gerada por CP e recuperou todos os parâmetros, trazendo-os a um nível normal. Estes resultados revelaram que o CAS é um composto eficaz com potencial curativo para combater o dano renal induzido por CP.(AU)

Detection of microorganisms with antibacterial activities from different industrial wastes and GC-MS analysis of crude microbial extract / Detecção de microrganismos com atividades antibacterianas de diferentes resíduos industriais e análise por GC-MS do extrato microbiano bruto

Abstract Many soil microorganisms' i.e., bacteria and fungi produce secondary metabolites called antibiotics. These are used for the treatment of some of the bacterial, fungal and protozoal diseases of humans. There is a need for isolation of a broad spectrum of antibiotics from microorganisms due to the emergence of antibiotic resistance. In the present study two antibiotic producing bacteria Klebsiella pneumoniae and Bacillus cereus were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry of Hattar, Haripur Pakistan. Total 10 waste samples were collected from different industries (Marble, Ghee, Soap, Mineral, Steel, Poultry Feed, Pharmaceutical, Qarshi, Cosmetic and Glass). Thirty-three bacterial strains were isolated from industrial wastes of these ten different industries. Fourteen out of thirty-three bacterial strains exhibited antimicrobial activities against at least one of the test microbes considered in this study including Escherchia coli, Staphylococcus aureus and Salmonella typhi. The bacteria were isolated by standard serial dilution spread plate technique. Morphological characterization of the isolates was done by Gram staining. Nine bacterial isolates out of fourteen were initially identified as B. cereus and five as K. pneumoniae through biochemical characterization. The antibacterial activities were tested by well diffusion method. Maximum number of antibiotic producing bacteria were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry based on the results of primary screening, the most potential isolates S9, S19, S20, S22 and S23 were selected for secondary screening. The maximum activity against E. coli and S. aureus was recorded by bacterial isolate S19 i.e zones of inhibition of 6.5mm and 9mm while S20 showed 7.5mm and 6mm zones respectively. Molecular identification was carried out on the basis of 16S rRNA sequence analysis. Finally, the isolates were identified as B. cereus accession number LC538271and K. pneumoniae accession number MT078679. Analysis of bacterial extract S20 through GC-MS indicated the presence of 8 compounds of diverse nature and structure. Present study suggests that wastes of pharmaceutical and poultry feed industry may have antibiotic producing bacteria. These bacteria could be utilized for the production of antibiotics. B. cereus and K. pneumoniae isolated from wastes of poultry feed and pharmaceutical industries have the potential to produce antibiotics and could be used to control the microbial growth.

Resumo Muitos microrganismos do solo, ou seja, bactérias e fungos produzem metabólitos secundários chamados antibióticos. Eles são usados ​​para tratamento de algumas doenças bacterianas, fúngicas e protozoárias em humanos. Há necessidade de isolamento de um amplo espectro de antibióticos de microrganismos devido ao surgimento de resistência aos antibióticos. No presente estudo, duas bactérias produtoras de antibióticos, Klebsiella pneumoniae e Bacillus cereus, foram isoladas da indústria farmacêutica e de ração avícola de Hattar, Haripur, Paquistão. Um total de 10 amostras de resíduos foi coletado de diferentes indústrias (mármore, ghee, sabão, mineral, aço, ração para aves, farmacêutica, Qarshi, cosmética e vidro). Trinta e três cepas bacterianas foram isoladas de resíduos industriais dessas dez diferentes indústrias. Quatorze das 33 cepas bacterianas exibiram atividades antimicrobianas contra pelo menos um dos micróbios de teste considerados neste estudo, incluindo Escherchia coli, Staphylococcus aureus e Salmonella typhi. As bactérias foram isoladas pela técnica de placa de diluição em série padrão. A caracterização morfológica dos isolados foi feita por coloração de gram. Nove isolados bacterianos de 14 foram inicialmente identificados como B. cereus e cinco como K. pneumoniae por meio de caracterização bioquímica. As atividades antibacterianas foram testadas pelo método de difusão em poço. O número máximo de bactérias produtoras de antibióticos foi isolado da indústria farmacêutica e de ração avícola com base nos resultados da triagem primária, os isolados mais potenciais S9, S19, S20, S22 e S23 foram selecionados para a triagem secundária. A atividade máxima contra E. coli e S. aureus foi registrada pelo isolado bacteriano S19, ou seja, zonas de inibição de 6,5 mm e 9 mm, enquanto S20 mostrou zonas de 7,5 mm e 6 mm, respectivamente. A identificação molecular foi realizada com base na análise da sequência 16S rRNA. Finalmente, os isolados foram identificados como B. cereus número de acesso LC538271 e K. pneumoniae número de acesso MT078679. A análise do extrato bacteriano S20 por meio de GC-MS indicou a presença de oito compostos de natureza e estrutura diversas. O presente estudo sugere que resíduos da indústria farmacêutica e de ração para aves podem conter bactérias produtoras de antibióticos. Essas bactérias podem ser utilizadas para a produção de antibióticos B. cereus e K. pneumoniae isolados de resíduos de rações de aves e indústrias farmacêuticas têm potencial para produzir antibióticos e podem ser usados ​​para controlar o crescimento microbiano.

Study of resveratrol against bone loss by using in-silico and in-vitro methods / Estudo do resveratrol contra a perda óssea usando métodos in silico e in vitro

By applying the in-silico method, resveratrol was docked on those proteins which are responsible for bone loss. The Molecular docking data between the resveratrol and Receptor activator of nuclear factor-kappa-Β ligand [RANKL] receptors proved that resveratrol binds tightly to the receptors, showed the highest binding affinities of −6.9, −7.6, −7.1, −6.9, −6.7, and −7.1 kcal/mol. According to in-vitro data, Resveratrol reduced the osteoclasts after treating Marrow-Derived Macrophages [BMM] with Macrophage colony-stimulating factor [MCSF] 20ng / ml and RANKL 50ng / ml, with different concentrations of resveratrol (2.5, 10 μg / ml) For 7 days, the cells were treated with MCSF (20 ng / ml) and RANKL (40 ng / ml) together with concentrated trimethyl ether and resveratrol (2.5, 10 μg / ml) within 12 hours. Which, not affect cell survival. After fixing osteoclast cells with formaldehyde fixative on glass coverslip followed by incubation with 0.1% Triton X-100 in PBS for 5 min and after that stain with rhodamine phalloidin staining for actin and Hoechst for nuclei. Fluorescence microscopy was performed to see the distribution of filaments actin [F.actin]. Finally, resveratrol reduced the actin ring formation. Resveratrol is the best bioactive compound for drug preparation against bone loss.

Com a aplicação do método in-silico, o resveratrol foi ancorado nas proteínas responsáveis pela perda óssea. Os dados de docking molecular entre o resveratrol e o ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa-Β [Receptor Activator of Nuclear Factor kappa-B Ligant (RANKL)] provaram que o resveratrol se liga fortemente aos receptores, mostraram as afinidades de ligação mais altas de −6,9, −7,6, −7,1, −6,9, - 6,7 e -7,1 kcal / mol. De acordo com dados in-vitro, o resveratrol reduziu os osteoclastos após o tratamento de macrófagos derivados da medula óssea [Bone Marrow derived Macrophage (BMM)] com fator estimulador de colônias de macrófagos [Macrophage Colony-Stimulating Factor (MCSF)] 20ng / ml e RANKL 50ng / ml, com diferentes concentrações de resveratrol (2,5, 10 μg / ml). Durante sete dias, as células foram tratadas com MCSF (20 ng / ml) e RANKL (40 ng / ml) juntamente com éter trimetílico concentrado e resveratrol (2,5, 10 μg / ml) em 12 horas, processo que não afeta a sobrevivência celular. Após a fixação de células de osteoclastos com fixador de formaldeído em lamela de vidro seguido de incubação com 0,1% Triton X-100 em PBS por 5 min, foi realizado posteriormente o procedimento para corar com rodamina faloidina a actina e Hoechst os núcleos. A microscopia de fluorescência foi realizada para ver a distribuição dos filamentos de actina [F.actina]. Finalmente, o resveratrol reduziu a formação do anel de actina. O resveratrol é o melhor composto bioativo para o preparo de medicamentos contra a perda óssea.

Study of resveratrol against bone loss by using in-silico and in-vitro methods / Estudo do resveratrol contra a perda óssea usando métodos in silico e in vitro

By applying the in-silico method, resveratrol was docked on those proteins which are responsible for bone loss. The Molecular docking data between the resveratrol and Receptor activator of nuclear factor-kappa-Β ligand [RANKL] receptors proved that resveratrol binds tightly to the receptors, showed the highest binding affinities of −6.9, −7.6, −7.1, −6.9, −6.7, and −7.1 kcal/mol. According to in-vitro data, Resveratrol reduced the osteoclasts after treating Marrow-Derived Macrophages [BMM] with Macrophage colony-stimulating factor [MCSF] 20ng / ml and RANKL 50ng / ml, with different concentrations of resveratrol (2.5, 10 μg / ml) For 7 days, the cells were treated with MCSF (20 ng / ml) and RANKL (40 ng / ml) together with concentrated trimethyl ether and resveratrol (2.5, 10 μg / ml) within 12 hours. Which, not affect cell survival. After fixing osteoclast cells with formaldehyde fixative on glass coverslip followed by incubation with 0.1% Triton X-100 in PBS for 5 min and after that stain with rhodamine phalloidin staining for actin and Hoechst for nuclei. Fluorescence microscopy was performed to see the distribution of filaments actin [F.actin]. Finally, resveratrol reduced the actin ring formation. Resveratrol is the best bioactive compound for drug preparation against bone loss.(AU)

Com a aplicação do método in-silico, o resveratrol foi ancorado nas proteínas responsáveis pela perda óssea. Os dados de docking molecular entre o resveratrol e o ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa-Β [Receptor Activator of Nuclear Factor kappa-B Ligant (RANKL)] provaram que o resveratrol se liga fortemente aos receptores, mostraram as afinidades de ligação mais altas de −6,9, −7,6, −7,1, −6,9, - 6,7 e -7,1 kcal / mol. De acordo com dados in-vitro, o resveratrol reduziu os osteoclastos após o tratamento de macrófagos derivados da medula óssea [Bone Marrow derived Macrophage (BMM)] com fator estimulador de colônias de macrófagos [Macrophage Colony-Stimulating Factor (MCSF)] 20ng / ml e RANKL 50ng / ml, com diferentes concentrações de resveratrol (2,5, 10 μg / ml). Durante sete dias, as células foram tratadas com MCSF (20 ng / ml) e RANKL (40 ng / ml) juntamente com éter trimetílico concentrado e resveratrol (2,5, 10 μg / ml) em 12 horas, processo que não afeta a sobrevivência celular. Após a fixação de células de osteoclastos com fixador de formaldeído em lamela de vidro seguido de incubação com 0,1% Triton X-100 em PBS por 5 min, foi realizado posteriormente o procedimento para corar com rodamina faloidina a actina e Hoechst os núcleos. A microscopia de fluorescência foi realizada para ver a distribuição dos filamentos de actina [F.actina]. Finalmente, o resveratrol reduziu a formação do anel de actina. O resveratrol é o melhor composto bioativo para o preparo de medicamentos contra a perda óssea.(AU)

Informação nutricional de doces de abóbora moranga ao leite / Nutritional information on pumpkin jam with milk

A abóbora moranga é um alimento rico em vitaminas e minerais. É uma fonte de fibras alimentares e pode fazer parte de receitas doces e salgadas. O objetivo deste trabalho foi comparar a informação nutricional de cinco formulações de doces preparados com 40% de abóbora moranga e 20% de açúcar. Entre as formulações, variaram os teores de leite e água potável, do seguinte modo: 40% de leite no doce A; 30% de leite e 10% de água potável no doce B; 20% de leite e 20% de água potável no doce C; 10% de leite e 30% de água potável no doce D; e 40% de água potável no doce E. A partir dos pesos dos ingredientes e dos doces prontos foram efetuados os cálculos necessários para a elaboração das tabelas de informação nutricional dos doces. Os resultados foram analisados através de ANOVA e teste de Tukey. Houve diferença entre as médias dos valores calóricos da porção dos doces A e D; A e E; B e E; C e E. Não houve diferença entre as médias dos valores calóricos dos doces A, B e C; B, C e D; D e E. Houve diferença entre as médias das quantidades de carboidratos, proteínas e gorduras totais da porção de todos os doces avaliados. O doce E, sem leite, apresentou a porção mais calórica, e o doce A, com maior teor de leite, foi o menos calórico e o de maior teor proteico.(AU)

The pumpkin is a food rich in vitamins and minerals. It is a source of dietary fiber and can be part of sweet and savory recipes. The objective of this project was to compare the nutritional information of five formulations of sweets prepared with 40% pumpkin and 20% sugar. Among the formulations, the contents of milk and drinking water varied, as follows: 40% milk in sweet A; 30% milk and 10% drinking water in sweet B; 20% milk and 20% drinking water in sweet C; 10% milk and 30% drinking water in sweet D; and 40% of drinking water in sweet E. Based on the weights of ingredients and ready-made sweets, the necessary calculations were made for the preparation of nutritional information tables for sweets. The results were analyzed using ANOVA and Tukey's test. There was a difference between the average caloric values ​​of the portion of sweets A and D; A and E; B and E; C and E. There was no difference between the average caloric values ​​of sweets A, B and C; B, C and D; D and E. There was a difference between the average amounts of carbohydrates, proteins and total fat in the portion of all sweets evaluated. Sweet E, without milk, presented the most caloric portion, and sweet A, with the highest milk content, was the least caloric and the one with the highest protein content.(AU)

Use of melatonin as an inhibitor of apoptotic process for cryopreservation of zebrafish (Danio rerio) embryos / Uso da melatonina como inibidor do processo apoptotico para a criopreservação de embriões de zebrafish (Danio rerio)

This study investigated the use of melatonin to arrest the effects of apoptosis in vitrified zebrafish (D. rerio) embryos. Dechorionated embryos at 22-24 somite-stage were divided (n = 60/treatment) into a non-vitrified (Control Group, 0 M melatonin) and vitrified treatments with 0 M (T1), 1 µM (T2) and 1 mM of melatonin (T3). For vitrified treatments, a solution methanol/propylene glycol based was used and the embryos stored in -196 °C for a week. After thaw, survival rate, scanning electron microscopy, expression of anti (bcl-2) and pro-apoptotic (bax/caspase-3) genes, reactive oxygen species (ROS) formation and DNA fragmentation analyses were performed. No live embryos were obtained from vitrified treatments, observing a rapid degeneration immediately after thawing, with the vitelline layer rupture and leakage of its content, followed by breakdown of epithelial cells and melanisation of the tissue. Regarding the apoptotic process, T3 had the highest relative gene expression, for the three genes (P < 0.05) furthermore, T2 had similar expression of pro-apoptotic genes to CG (P < 0.05). ROS formation revealed that CG presented lower percentage of embryo surface area affected (3.80 ± 0.40%) (P < 0.05), in contrast, no differences were found among the other groups. T1 was most significantly (P < 0.05) damaged by DNA fragmentation. The vitrified groups with melatonin had similar damage levels of CG (P > 0.05). The inclusion of 1 µM of melatonin in the vitrifying solution, countered the effects of apoptotic process in post-thaw embryos, suggesting its utility in cryopreserving fish embryos.

Este estudo investigou o uso da melatonina para conter os efeitos da apoptose em embriões vitrificados de zebrafish (D. rerio). Embriões descorionados no estágio de 22-24 somitos foram divididos (n = 60 / tratamento) em tratamento não vitrificado (Grupo Controle, melatonina 0 M) e tratamentos vitrificados com 0 M (T1), 1 µM (T2) e 1 mM de melatonina (T3). Para os tratamentos vitrificados, utilizou-se uma solução à base de metanol/propilenoglicol e os embriões foram armazenados em -196 °C por uma semana. Após o descongelamento, foram realizadas análises de taxa de sobrevivência, microscopia eletrônica de varredura, expressão dos genes anti (bcl-2) e pró-apoptóticos (bax/caspase-3), formação de espécies reativas de oxigênio (EROS) e análises de fragmentação de DNA. Não foram obtidos embriões vivos a partir dos tratamentos vitrificados, observando uma rápida degeneração imediatamente após o descongelamento, com ruptura da camada vitelina e vazamento de seu conteúdo, seguida de quebra das células epiteliais e melanização do tecido. Em relação ao processo apoptótico. T3 apresentou expressão gênica relativa alta para os três genes (P <0,05), além disso, T2 apresentou expressão semelhante as dos genes pró-apoptóticos de GC (P <0,05). A formação de EROS revelou que GC apresentou menor percentual de área de superfície embrionária afetada (3,80 ± 0,40%) (P <0,05), ao contrário, não foram encontradas diferenças entre os outros grupos. T1 foi mais significativamente (P <0,05) danificado pela fragmentação do DNA. Os grupos vitrificados com melatonina apresentaram níveis de dano semelhantes ao do GC (P> 0,05). A inclusão de 1 µM de melatonina na solução de vitrificação, contrariou os efeitos do processo apoptótico em embriões pós-descongelamento, sugerindo sua utilidade na criopreservação de embriões de peixes.

Inhibitory activities of propolis, nisin, melittin and essential oil compounds on Paenibacillus alvei and Bacillus subtilis

Background: Natural products represent important sources of antimicrobial compounds. Propolis and compounds from essential oils comprise good examples of such substances because of their inhibitory effects on bacterial spores, including bee pathogens. Methods: Ethanol extracts of propolis (EEP) from Apis mellifera were prepared using different methods: double ultrasonication, double maceration and maceration associated with ultrasonication. Together with the antimicrobial peptides nisin and melittin, and compounds present in the essential oils of clove (Syzygium aromaticum) and cinnamon (Cinnamomum zeylanicum), assays were carried out on one Bacillus subtilis isolate and Paenibacillus alvei (ATCC 6344) against vegetative and sporulated forms, using the resazurin microtiter assay. Synergism with all the antimicrobials in association with tetracycline was verified by the time-kill curve method. Potassium and phosphate efflux, release of proteins and nucleic acids were investigated. Results: EEPs showed the same MIC, 156.25 µg/mL against B. subtilis and 78.12 µg/mL against P. alvei. The peptides showed better activities against B. subtilis (MIC of 12 µg/ mL for melittin and 37.50 µg/mL for nisin). Antimicrobials showed similar inhibitory effects, but cinnamaldehyde (39.06 µg/mL) showed the best action against P. alvei. Melittin and nisin showed the greatest capacity to reduce spores, regarding B. subtilis there was a 100% reduction at 6.25 and 0.78 µg/mL, respectively. Concerning P. alvei, the reduction was 93 and 98% at concentrations of 80 µg/mL of melittin and 15 µg/ mL of nisin. EEPs showed the highest effects on the protein release against B. subtilis and P. alvei. Nucleic acid release, phosphate and potassium efflux assays indicated bacterial cell membrane damage. Synergism between antimicrobials and tetracycline was demonstrated against both bacteria. Conclusion: All antimicrobials tested showed antibacterial activities against vegetative and sporulated forms of P. alvei and B. subtilis, especially nisin and melittin. Synergism with tetracycline and damage on bacterial cell membrane also occurred.(AU)

Assessment of melatonin-alpha adrenergic receptor complexes by molecular docking analysis / Avaliação dos complexos melatonina-receptores alfa-adrenérgicos por análises de docagem molecular

The pineal melatonin (N-acetyl-5-methoxytryptamine) is a molecule associated in a way or another with probably all physiological systems, aiming to fulfil its functional integrative roles in central nervous system activity, sleep and wakefulness cycles, energy metabolism and thermoregulation, immune, reproductive, endocrine, cardiovascular, respiratory and excretory systems. Within this context, the present study aimed to assess in silico the formation of complexes between ligand melatonin and other potential receptor proteins by molecular docking analyses. The main steps established in this experimental procedure were: a) search and selection of the 3D structure of the melatonin from DrugBank; b) search and selection of 3D structures of other target receptor proteins using STRING, protein BLAST and database PDB; and c) formation of the complexes between melatonin and receptors selected using AutoDock4.0 server by molecular docking analyses. High reliability score and significant similarity were only identified between type 1B melatonin and alpha-2A adrenergic receptor. Thus, molecular docking assays were carried out using ligand melatonin and crystallographic structures of the alpha-2A adrenergic receptor coupled to an antagonist (ID PDB 6kux) and a partial agonist (ID PDB 6kuy) available in the database PDB. Binding energy values of -6.79 and -6.98 kcal/mol and structural stability by non-covalent intermolecular interactions were predicted during the formation of complexes between melatonin and alpha-2A adrenergic receptor 6kux and 6kuy, respectively. In this way, the findings described in current study may indicate strong interactions between melatonin and adrenoceptors, suggesting its possible partial agonist effect on the activation of the alfa-2A adrenergic receptor.(AU)

A melatonina pineal (N-acetil-5-metoxitriptamina) é uma molécula associada de um modo ou outro com provavelmente todos os sistemas fisiológicos, visando cumprir seus papéis funcionais integradores na atividade do sistema nervoso central, ciclos de sono e vigília, metabolismo energético e termorregulação, sistemas imunológico, reprodutivo, endócrino, cardiovascular, respiratório e excretor. Assim, o presente estudo objetivou avaliar in silico a formação de complexos entre o ligante melatonina e outras proteínas potenciais receptoras por meio de análises de docagem molecular. As principais etapas estabelecidas neste procedimento experimental foram: a) busca e seleção da estrutura 3D da melatonina a partir do banco de dados DrugBank; b) busca e seleção de estruturas 3D de outras proteínas receptoras-alvo utilizando STRING, proteína BLAST e o banco de dados PDB; e c) avaliação da formação dos complexos entre melatonina e receptores selecionados a partir do servidor AutoDock4.0 para análises de docagem molecular. Alto escore de confiabilidade e similaridade significativa foram identificados apenas entre a melatonina do tipo 1B e o receptor alfa-2A adrenérgico. Valores de energia de ligação de -6,79 e -6,98 kcal/mol e estabilidade estrutural pela presença de interações intermoleculares não covalentes foram preditos durante a formação de complexos entre o ligante melatonina e os receptores adrenérgico alfa-2A 6kux e 6kuy, respectivamente. Dessa forma, os achados descritos no presente estudo podem indicar fortes interações entre melatonina e adrenoceptores, sugerindo seu possível efeito agonista parcial na ativação do receptor alfa-2A adrenérgico.(AU)

Phenotypic and molecular characterization of fluoroquinolone resistant Pseudomonas aeruginosa isolates in Palestine / Caracterização fenotípica e molecular de isolados de Pseudomonas aeruginosa resistentes a fluoroquinolonas na Palestina

Fluoroquinolones are important antimicrobial agents for the treatment of Pseudomonas infections. A total of 11 isolates of P. aeruginosa were collected from different clinical samples from different medical centers in the North West Bank-Palestine during 2017. In this study, resistance to fluoroquinolones and secretions of ß-lactamases were detected by phenotypic methods, while presence of ß-lactamase gene sequences and other virulence factors were detected by PCR technique. PCR product for gyrA, parC and parE genes were sequenced for further analyses. The phylogenetic analyses, population diversity indices and haplotypes determination were conducted using computer programs MEGA version 6, DnaSP 5.1001 and median-joining algorithm in the program Network 5, respectively. Results of this study showed that the MIC for ciprofloxacin and norfloxacin had a range of 32-256 µg/ml. In addition, all isolates carried either exoT or exoT and exoY genes, different ß-lactamase genes and 82% of these isolates harbored class 1 integrons. Analyses of the gyrA, parC and parE sequences were found to be polymorphic, had high haplotype diversity (0.945-0.982), low nucleotide diversity (0.01225-0.02001) and number of haplotypes were 9 for each gyrA and parE genes and 10 haplotypes for parC gene. The founder haplotypes being Hap-1 (18%), Hap-2 (27.3%) and Hap-6 (9.1%) for gyrA, parC and parE genes, respectively. Two of ParE haplotypes were detected as indel haplotypes. The Median-joining- (MJ) networks constructed from haplotypes of these genes showed a star-like expansion. The neutrality tests (Tajima's D test and Fu's Fs test) for these genes showed negative values. Palestinian fluoroquinolone resistant P. aeruginosa strains showed high MIC level for fluoroquinolones, ß-lactamase producers, carried type III secretion exotoxin-encoding genes, most of them had integrase I gene and had high level of mutations in QRDR regions in gyrA, parC and parE genes. All these factors may play an important role in the invasiveness of these strains and make them difficult to treat. Isolation of these strains from different medical centers, indicate the need for a strict application of infection control measures in Medical centers in the North West Bank-Palestine that aim to reduce expense and damage caused by P. aeruginosa infections. Molecular analyses showed that Palestinian fluoroquinolone resistant P. aeruginosa haplotypes are not genetically differentiated; however, more mutations may exist in these strains.

Fluoroquinolonas são agentes antimicrobianos importantes para o tratamento de infecções por Pseudomonas. Um total de 11 bacilos isolados de P. aeruginosa foram coletados de diferentes amostras clínicas provenientes de diferentes centros médicos na Cisjordânia-Palestina durante o ano de 2017. Neste estudo, resistência a fluoroquinolonas e secreções de ß-lactamases foram detectadas por métodos fenotípicos, enquanto a presença de sequências do gene ß-lactamase e outros fatores de virulência foram detectados pela técnica de PCR (Proteína C-reativa). O produto de PCR para os genes gyrA, parC e parE foram sequenciados para análises posteriores. As análises filogenéticas, os índices de diversidade populacional e a determinação de haplótipos foram realizados utilizando os softwares MEGA versão 6, DnaSP 5.1001 e o algoritmo de junção de mediana do programa Network 5, respectivamente. Os resultados deste estudo mostraram que a MIC para ciprofloxacina e norfloxacina tinha um intervalo de 32-256 µg/ml. Além disso, todos os bacilos isolados carregavam genes exoT ou exoT e exoY, genes de ß-lactamase diferentes e 82% desses isolados continham integrons de classe 1. As análises das sequências gyrA, parC e parE foram consideradas polimórficas, com alta diversidade de haplótipos (0,945-0,982), baixa diversidade de nucleotídeos (0,01225-0,02001) e o número de haplótipos foi de 9 para cada gene de gyrA e parE e 10 haplótipos para o gene parC. Os haplótipos fundadores são Hap-1 (18%), Hap-2 (27,3%) e Hap-6 (9,1%) para os genes gyrA, parC e parE, respectivamente. Dois dos haplótipos parE foram detectados como haplótipos InDel. As redes Median-joining (MJ) construídas a partir de haplótipos desses genes mostraram uma expansão semelhante à de uma estrela. Os testes de neutralidade (teste D de Tajima e teste Fs de Fu) para esses genes apresentaram valores negativos. As cepas palestinas de P. aeruginosa resistentes a fluoroquinolonas mostraram alto nível de MIC para fluoroquinolonas, produtores de ß-lactamase, genes codificadores de exotoxina de secreção tipo III, a maioria deles tinha o gene integrase I e tinha alto nível de mutações nas regiões QRDR nos genes gyrA, parC e parE. Todos esses fatores podem desempenhar um papel importante na invasão dessas cepas e torná-las difíceis de tratar. O isolamento dessas cepas em diferentes centros médicos, indica a necessidade de uma aplicação estrita de medidas de controle de infecção em centros médicos da Cisjordânia-Palestina que visam reduzir despesas e danos causados por infecções por P. aeruginosa. As análises moleculares mostraram que os haplótipos de P. aeruginosa resistentes à fluoroquinolona palestina não são geneticamente diferenciados; no entanto, mais mutações podem existir nessas cepas.

Nutrient requirements of paricá (Schizolobium parahyba var. amazonicum): optimizing seedling quality for reforestation programs / Exigências nutricionais do paricá (Schizolobium parahyba var. amazonicum): otimizando a qualidade de mudas para programas de reflorestamento

Amazonian reforestation programs emphasize the use of species native to the region. However, reforestation using native species requires the production of high-quality seedlings. The present study aimed to evaluate the development and quality of seedlings of paricá (Schizolobium parahyba var. amazonicum), a species native to the Amazon with high potential for reforestation activities. We carried out a greenhouse experiment in which seedlings were subjected to treatments with varying presence of major and micronutrients in the substrate, and evaluated the effect on functional attributes (plant height, stem diameter, specific leaf area, shoot and root dry matter) and physiological response (chlorophyll a, b and carotenoid concentrations). Our results showed that nutrient omission significantly affects paricá seedling growth. Considering the assessed biometric and physiological variables, the highest nutritional requirements of seedlings were for N, P, K, micronutrients, Mg and S, while seedling quality was maintained in the absence of Ca. Overall, this species shows efficient use of available nutrients and potential for growth in soils with low concentrations of bases. Therefore, for the production of high-quality paricá seedlings, major and micronutrients should be added and lime is essential, but the good seedling performance under Ca omission suggested that this element does not need to be added to the soil.(AU)

Os programas de reflorestamento da Amazônia enfatizam o uso de espécies nativas da região. No entanto, o reflorestamento com espécies nativas requer a produção de mudas de alta qualidade. O presente estudo teve como objetivo avaliar o desenvolvimento e a qualidade de mudas de paricá (Schizolobium parahyba var. amazonicum), espécie nativa da Amazônia com alto potencial para atividades de reflorestamento. Realizamos um experimento em casa de vegetação no qual mudas foram submetidas a tratamentos com presença variável de macro e micronutrientes no substrato, e avaliamos o efeito sobre os atributos funcionais (altura da planta, diâmetro do caule, área foliar específica, matéria seca da parte aérea e raiz) e resposta fisiológica (concentração de clorofila a, b e carotenóides). Nossos resultados mostraram que a omissão de nutrientes afeta significativamente o crescimento do paricá. Considerando as variáveis biométricas e fisiológicas avaliadas, as maiores exigências nutricionais das plântulas foram para N, P, K, micronutrientes, Mg e S, enquanto a qualidade das plântulas foi mantida na ausência de Ca. De modo geral, esta espécie apresenta uso eficiente dos nutrientes disponíveis e potencial de crescimento em solos com baixas concentrações de bases. Portanto, para a produção de mudas de paricá de alta qualidade, devem ser adicionados macro e micronutrientes e o calcário é essencial, mas o bom desempenho das mudas sob omissão de Ca sugere que este elemento não precisa ser adicionado ao solo.(AU)

Productive and reproductive performance of crossbred dairy heifers with induced lactation and efficacy of antimicrobial therapy associated with internal teat sealants / Desempenho produtivo e reprodutivo de novilhas com lactação induzida e eficácia da terapia antimicrobiana associada com selante interno de tetos

This study evaluated (a) the efficacy of an association between injectable antibiotic therapy and sealant (ATBS) on milk yield (MY), somatic cell count (SCC), and prevalence of intramammary infections (IMI); and (b) the efficacy of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) on follicular cyst (FCs) resolution (cyclicity at the 45th day in milk; DIM) and cumulative pregnancy rate (CPR) in heifers submitted to a lactation induction protocol (LIP). A total of 114 crossbred (Holstein × Jersey) heifers, with 34.7 ± 4.8 months and 439 ± 56.35 kg were submitted to LIP. On the 5th day of the LIP, the heifers were assigned to (i) ATBS (n = 57) with 7 mg/kg of norfloxacin associated with sealant and (ii) Control 1 (n = 57; CONT1) with no treatments. Lactation began on the 21st day of LIP and the 15th DIM, FCs were diagnosed and 106 heifers were randomized into two treatment groups with 53 heifers each: (i) GnRH (5 mL injectable GnRH) and (ii) Control 2 (CONT2; no treatment). Of the 114 heifers initially induced, 83.33% (n = 95) responded to LIP with an average MY of 15.19 kg/milk/day during 22 weeks of lactation. In the first 14 DIM, the IMI prevalence was 18% and 28% for heifers ATBS and CONT1 treated, respectively. Additionally, coagulase-negative Staphylococcus was the most frequently isolated group of pathogens. Mammary quarters that received ATBS treatment had a lower risk of IMI and SCC than CONT1. The cyclicity at 45 DIM was 68% (ATBS) and 35% (CONT1), and 57% and 46% for animals in the GnRH and CONT2. CPR was 60% in the ATBS group and 89% in CONT1, but GnRH treatment did not affect the CPR. In conclusion, LIP was effective in stimulating MY in heifers, and the IMI prevalence decreased with ATBS treatment. Also, the use of GnRH did not affect the FC regression, cyclicity at 45 DIM, and CPR.(AU)

Este estudo avaliou a (i) eficácia da associação entre antibioticoterapia injetável e selante interno de tetos (ATBS) na produção de leite (PL), contagem de células somáticas (CCS), e prevalência de infecções intramamárias (IIM); e (ii) eficácia do hormônio liberador de gonadotrofina (GnRH) na resolução de cistos foliculares (CFs), ciclicidade ao 45º dia em lactação (DEL) e taxa de prenhez cumulativa (TPC) em novilhas submetidas a um protocolo de indução de lactação (PIL). Um total de 114 novilhas mestiças (Holandês × Jersey), com 34,7 ± 4,8 meses e 439 ± 56,35 kg foram submetidas ao PIL. No 5º dia do PIL, as novilhas receberam: (i) ATBS (n = 57) com 7 mg/kg de norfloxacina associada ao selante interno de tetos e (ii) Controle 1 (n = 57; CONT1) sem tratamento. A lactação teve início no 21º dia do PIL e no 15º DEL, foram diagnosticados CFs e 106 novilhas foram agrupadas em dois grupos de tratamento com 53 novilhas em cada: (i) GnRH (5 mL de GnRH injetável) e (ii) Controle 2 (CONT2; sem tratamento). Das 114 novilhas inicialmente induzidas, 83,33% (n = 95) responderam ao PIL com PL média de 15,19 kg/leite/d durante 22 semanas de lactação. Nos primeiros 14 DEL a prevalência de IIM foi de 18% e 28% para as novilhas tratadas com ATBS e CONT1, respectivamente. Além disso, estafilococos coagulase negativa foram o grupo de patógenos mais frequentemente isolados. Quartos mamários tratados com ATBS tiveram menor risco (0,56) de IIM e menor CCS do que CONT1. A ciclicidade a 45 DEL foi de 68% (ATBS) e 35% (CONT1), e 57% e 46% para os animais no GnRH e CONT2. A TPC foi de 60% no grupo ATBS e 89% no CONT1, porém o tratamento com GnRH não afetou a TPC. Em conclusão, o PIL foi eficaz em estimular a PL em novilhas tardias e a prevalência de IIM diminiuiu com o tratamento ATBS. Além disso, o uso de GnRH não afetou a regressão de CF, ciclicidade em 45 DEL e a TPC.(AU)

Métodos ultrassonográficos na avaliação das afecções prostáticas em cães ­ revisão de literatura / Ultrasonographic methods in the evaluation of prostatic disorders in dogs ­ paper review

O objetivo desta revisão foi descrever as principais técnicas de avaliação e achados ultrassonográficos da próstata canina. A ultrassonografia é o método de escolha para avaliação da glândula prostática, sendo imprescindível como auxílio no diagnóstico na detecção de anormalidades, principalmente quando há suspeita da presença de tumores. Com inovação dos equipamentos, surgiram técnicas complementares à ultrassonografia modo Bidimensional (B), tais como Doppler, ultrassonografia contrastada e elastografia, que aumentam a acurácia diagnóstica. O Doppler fornece informações sobre arquitetura vascular e aspectos hemodinâmicos dos vasos sanguíneos. A ultrassonografia contrastada permite determinar parâmetros relacionados à perfusão sanguínea das estruturas pelos agentes de contraste (ex.: microbolhas), definindo, portanto, padrões de alta e baixa intensidade da arquitetura vascular. A elastografia proporciona a avaliação da rigidez tecidual tanto de forma qualitativa, por meio de elastogramas, quanto quantitativa, por meio das velocidades de cisalhamento. Espera-se que esta revisão possa contribuir com informações relevantes aos leitores e veterinários da área de ultrassonografia e reprodução animal.(AU)

The purpose of this review was to describe the main assessment techniques and ultrasound findings of the canine prostate. Ultrasonography is the method of choice for assessing the prostate gland, being essential as an aid in the diagnosis in the detection of abnormalities, especially when the presence of tumors is suspected. With the innovation of the equipment, complementary techniques to B-mode ultrasonography have emerged, such as Doppler, contrasted ultrasound and elastography, which increase the diagnostic accuracy. Doppler provides information on vascular architecture and hemodynamic aspects of blood vessels. Contrast ultrasonography allows to determine parameters related to the blood perfusion of structures by contrast agents (eg, microbubbles), thus defining high and low intensity patterns of vascular architecture. ARFI elastography provides assessment of tissue stiffness both qualitatively, using elastograms, and quantitative, using shear speeds. It is hoped that this review can contribute with relevant information to readers and veterinarians in the area of asound and animal reproduction.(AU)

Applicability of B-mode ultrasonography, ARFI elastography and contrast-enhanced ultrasound in the evaluation of chronic kidney disease in dogs

ABSTRACT: The objective of this study was to verify the applicability of B-mode ultrasonography, ARFI elastography and CEUS in the diagnosis of chronic kidney disease and its Stages in dogs. 24 healthy dogs and 28 with CKD were included. In B-mode, the echogenicity, echotexture and cortico-medullary ratio of the kidneys were verified. By elastography, the shear-wave velocity of the cortical (SWVcort) and medullary (SWVmed) regions were determined and tissue deformity was evaluated. Wash-in, wash-out and peak enhancement (TPic) of the contrast in the renal parenchyma were calculated and homogeneity, presence of filling gaps and distinction of filling phases were evaluated by CEUS. Changes in echogenicity, echotexture and cortico-medullary ratio were observed only in sick patients. There was an increase in SWVcort in CKD, with a cutoff point >2.91m/s. Healthy kidneys were non-deformable and 25% had changes in gray scales. There was an increase in wash-in and TPic, changes in filling characteristics, filling failures and difficulty in distinguishing between the Stages in CEUS in CKD. It was found that dogs with CKD 2, 3 and 4 had greater SWVcort and wash-in values than CKD 1. Elastographic and CEUS changes were observed in dogs with CKD, demonstrating the applicability of ultrasonographic techniques in their diagnosis.

RESUMO: O objetivo deste estudo foi verificar a aplicabilidade da ultrassonografia modo-B, elastografia ARFI e CEUS no diagnóstico da doença renal crônica e seus estágios em cães. Foram incluídos 24 cães saudáveis e 28 com DRC. Pelo modo-B, verificou-se ecogenicidade, ecotextura e relação córtico-medular dos rins. Pela elastografia, foram determinadas as velocidades de cisalhamento das regiões cortical (SWVcort) e medular (SWVmed) e foi avaliada a deformidade tecidual. Calculou-se os temos de wash-in, wash-out e pico de intensidade (TPic) do parênquima renal e avaliou-se homogeneidade, presença de falhas e distinção das fases de preenchimento por contraste por meio de CEUS. Alterações em ecogenicidade, ecotextura e relação córtico-medular foram observadas somente em pacientes doentes. Houve aumento da SWVcort na DRC, com ponto de corte >2.91m/s. Rins saudáveis foram não-deformáveis e 25% apresentou alterações nas escalas de cinza. Houve aumento do wash-in e TPic, alterações nas características de preenchimento, falhas e dificuldade para distinguir as fases de preenchimento do contraste nos rins com DRC. Verificou-se que cães com DRC graus 2, 3 e 4 tiveram valores de SWVcort e wash-in maiores que cães com DRC grau 1. Foram obsrervadas alterações elastográfica e de CEUS em cães com DRC, demonstrando a aplicabilidade destas técnicas ultrassonográficas no seu diagnóstico.

Accuracy of B-mode ultrasonography for detecting malignancy in canine cutaneous neoplasms: preliminary results

ABSTRACT: The aim of this study was to verify the applicability and accuracy of B-mode ultrasonography in detecting malignancy in dog cutaneous neoplasms. Forty-two neoplasms (12 benign and 30 malignant) of mesenchymal, round cells, epithelial and melanocytic origins from 24 dogs of different breeds and ages were included. The ultrasound evaluation was performed with a linear multi-frequency transducer (7.0 to 12MHz), with frequency dependent on the mass dimension. Ultrasonographic characteristics of echogenicity (hypo/hyperechogenic), echotexture (homogeneous/heterogeneous), regularity, invasiveness in adjacent tissues were classified. Dimensions were also measured to calculate the depth/width ratio. Neoplasms were classified as malignant or benign after cytological and/or histopathological analysis and the results were associated with ultrasound characteristics. There was a significant association (P 0.05) between malignancy and echogenicity, echotexture and invasiveness in adjacent tissues, so that 84.6% of hypoechogenic neoplasms, 76.9% of heterogeneous masses and 88.2% of invasive neoplasms were classified as malignant. However, for all these associations, moderate predictive values were obtained, which may be due to the small experimental number included in this study. Therefore, although it has been observed that hypoechogenic, heterogeneous and invasive neoplasms were more prone to malignancy, these findings should be used with caution until new studies are developed with a greater number and variety of cutaneous neoplasms in dogs.

RESUMO: O objetivo deste estudo foi verificar a aplicabilidade e acurácia da ultrassonografia modo-B na detecção de malignidade em neoplasmas cutâneos de cães. Foram incluídos 42 neoplasmas (12 benignos e 30 malignos) de origens mesenquimal, células redondas, epitelial e melanocítica provenientes de 24 cães de diferentes raças e idades. O exame ultrassonográfico foi realizado com transdutor linear multifrequencial (7.0 a 12MHz), com frequência dependente da dimensão da massa. Foram classificadas características ultrassonográficas de ecogenicidade (hipo/hiperecogênicos), ecotextura (homogêneos/heterogêneos), regularidade, invasividade em tecidos adjacentes. As dimensões foram mensuradas para cálculo da razão profundidade/largura. Os neoplasmas foram classificados como malignos ou benignos após análise cito e/ou histopatológica e os resultados foram associados com as características ultrassonográficas. Verificou-se associação significativa (P 0.05) entre malignidade e ecogenicidade, ecotextura e invasividade em tecidos adjacentes, de forma que 84.6% dos neoplasmas hipoecogênicos, 76.9% das massas heterogêneas e 88.2% dos neoplasmas invasivos foram classificados como malignos. Entretanto, para todas essas associações, foram obtidos valores preditivos moderados, que podem ser decorrentes do baixo número experimental incluso neste estudo. Sendo assim, embora tenha sido observado que os neoplasmas hipoecogênicos, heterogêneos e invasivos tiveram maior propensão à malignidade, esses achados devem ser utilizados com cautela até novos trabalhos sejam desenvolvidos com maior número e variedade de neoplasmas cutâneos de cães.