Biological control of Biomphalaria, the intermediate host of Schistosoma spp.: a systematic review / Controle biológico de Biomphalaria, hospedeiro intermediário do Schistosoma spp.: uma revisão sistemática

ABSTRACT: Schistosomiasis is an important vector-borne disease transmitted by an intermediate host: a freshwater mollusk. Control of these snail vectors is one of the strategies of the World Health Organization against the disease. The present study was based on a systematic review of published scientific papers concerning the biological control of snails (genus Biomphalaria), and identified the ongoing challenges and propose future perspectives. The review methodology was based on the PRISMA statement, the international databases Web of Science and Scopus for the period 1945-2021. In total, 47 papers were analyzed, published by authors from 14 different countries, the majority being from: France, Brazil, the United States, and Egypt. The most widely used strategy for biological control was predation by fish (12 studies). Fourteen papers were published in the most prolific decade 2010-2019; during which there was also a greater diversity of biological control agents in studies. In this context, we believed that one of the principal challenges of this approach is the successful simultaneous use of multiple types of biological control agent: predators, competitors, and/or microbial agents. This new approach may provide important insights for the development of new biological control agents or microbial-based products, with the potential to reduce the parasite load carried by schistosomiasis snail vector and control its transmission in a sustainable way.

RESUMO: A esquistossomose é uma importante doença transmitida por vetor, um hospedeiro intermediário: um molusco de água doce. O controle desses caramujos vetores é uma das estratégias da Organização Mundial da Saúde para controle da doença. O presente estudo foi baseado em uma revisão sistemática de artigos científicos publicados sobre o controle biológico de caramujos (gênero Biomphalaria), e teve como objetivo identificar os desafios atuais e propor perspectivas futuras. A metodologia de revisão foi baseada na declaração PRISMA, nas bases de dados internacionais, Web of Science e Scopus, entre 1945-2021. No total, foram analisados 47 artigos, publicados por autores de 14 países diferentes, sendo a maioria: França, Brasil, Estados Unidos e Egito. A estratégia mais utilizada para controle biológico foi a predação por peixes (12 estudos). Quatorze artigos foram publicados na década mais produtiva 2010-2019, durante a qual também houve uma maior diversidade de agentes de controle biológico em estudos. Neste contexto, acreditamos que um dos principais desafios desta abordagem é a utilização simultânea bem-sucedida de múltiplos tipos de agentes de controle biológico: predadores, concorrentes e/ou agentes microbianos. Esta nova abordagem fornece importantes subsídios para o desenvolvimento de novos agentes de controle biológico ou produtos de base microbiana, com o potencial de reduzir a carga parasitária transportada pelo vetor esquistossomose de caramujos e controlar sua transmissão de forma sustentável.

Cryptosporidium sp. in cultivated oysters and the natural oyster stock of the state of Maranhão, Brazil / Detecção de Cryptosporidium sp. em ostras de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão, Brasil

ABSTRACT: This study detected Cryptosporidium spp. in cultivated oysters and the natural oyster stock of the state of Maranhão and determine the elective tissue(s) to examine this protozoan. For this purpose, 200 cultivated oysters were purchased from the municipality of Raposa and another 100 from Paço do Lumiar. Additionally, 100 oysters were extracted from the natural stock of the municipality of Primeira Cruz, thus making up a total of 400 oysters. They were grouped into 80 pools consisting of 5 oysters each. From each pool, the gills and visceral mass were removed to obtain 160 pools, 80 pools for the gill group and another 80 for the visceral mass group. Then, DNA was extracted from each pool using a commercial kit with modifications. Subsequently, the protozoan DNA was detected using nested polymerase chain reaction. With this technique, the DNA of the protozoan under investigation was detected in 2.5% (n = 2/80) of the pools containing gills, with 1.25% of the pools (n = 1/80) belonging to the cultivation group of oysters and the other 1.25% (n = 1/80) to the natural stock. With the results obtained in this study, it was concluded that the analyzed oysters of the genus Crassostrea, from cultivation and natural stock groups, found in the state of Maranhão, were contaminated by Cryptosporidium spp. and may become potential sources of infection in humans and other animals. In addition, the gills are the elective tissue for the study of Cryptosporidium spp. in oysters.

RESUMO: Objetivou-se com o estudo detectar Cryptosporidium sp. em ostras de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão e determinar o(s) tecido(s) eletivo(s) para pesquisa desse protozoário. Para a realização do estudo foram adquiridas 200 ostras de cultivo do município de Raposa e 100 de Paço do Lumiar, além de 100 ostras extraídas de estoque natural do município de Primeira Cruz, totalizando 400 ostras. Estas foram agrupadas em 80 pools constituídos por cinco animais. De cada pool, as brânquias e a massa visceral foram removidas totalizando 160 pools, sendo 80 para o grupo das brânquias e 80 para o grupo de massa visceral. Na sequência, procedeu-se à extração de DNA de cada pool com a utilização de kit comercial com modificações. Posteriormente, realizou-se a detecção do DNA do protozoário por meio da técnica de Nested-PCR. Com a técnica utilizada, foi detectado o DNA do protozoário pesquisado em 2,5% (n=2/80) pools apenas de brânquias, sendo 1,25% pools (n=1/80) oriundos de cultivo e os outros 1,25% (n=1/80) de estoque natural. Com os resultados obtidos nesse estudo, conclui-se que as ostras analisadas do gênero Crassostrea sp., oriundas de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão, estavam contaminadas por Cryptosporidium sp. e podem se reverter em fontes potenciais para seres humanos e outros animais. Para a pesquisa de Cryptosporidium sp. em ostras, as brânquias são o tecido eletivo.

Cryptosporidium sp. in cultivated oysters and the natural oyster stock of the state of Maranhão, Brazil / Detecção de Cryptosporidium sp. em ostras de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão, Brasil

This study detected Cryptosporidium spp. in cultivated oysters and the natural oyster stock of the state of Maranhão and determine the elective tissue(s) to examine this protozoan. For this purpose, 200 cultivated oysters were purchased from the municipality of Raposa and another 100 from Paço do Lumiar. Additionally, 100 oysters were extracted from the natural stock of the municipality of Primeira Cruz, thus making up a total of 400 oysters. They were grouped into 80 pools consisting of 5 oysters each. From each pool, the gills and visceral mass were removed to obtain 160 pools, 80 pools for the gill group and another 80 for the visceral mass group. Then, DNA was extracted from each pool using a commercial kit with modifications. Subsequently, the protozoan DNA was detected using nested polymerase chain reaction. With this technique, the DNA of the protozoan under investigation was detected in 2.5% (n = 2/80) of the pools containing gills, with 1.25% of the pools (n = 1/80) belonging to the cultivation group of oysters and the other 1.25% (n = 1/80) to the natural stock. With the results obtained in this study, it was concluded that the analyzed oysters of the genus Crassostrea, from cultivation and natural stock groups, found in the state of Maranhão, were contaminated by Cryptosporidium spp. and may become potential sources of infection in humans and other animals. In addition, the gills are the elective tissue for the study of Cryptosporidium spp. in oysters.

Objetivou-se com o estudo detectar Cryptosporidium sp. em ostras de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão e determinar o(s) tecido(s) eletivo(s) para pesquisa desse protozoário. Para a realização do estudo foram adquiridas 200 ostras de cultivo do município de Raposa e 100 de Paço do Lumiar, além de 100 ostras extraídas de estoque natural do município de Primeira Cruz, totalizando 400 ostras. Estas foram agrupadas em 80 pools constituídos por cinco animais. De cada pool, as brânquias e a massa visceral foram removidas totalizando 160 pools, sendo 80 para o grupo das brânquias e 80 para o grupo de massa visceral. Na sequência, procedeu-se à extração de DNA de cada pool com a utilização de kit comercial com modificações. Posteriormente, realizou-se a detecção do DNA do protozoário por meio da técnica de Nested-PCR. Com a técnica utilizada, foi detectado o DNA do protozoário pesquisado em 2,5% (n=2/80) pools apenas de brânquias, sendo 1,25% pools (n=1/80) oriundos de cultivo e os outros 1,25% (n=1/80) de estoque natural. Com os resultados obtidos nesse estudo, conclui-se que as ostras analisadas do gênero Crassostrea sp., oriundas de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão, estavam contaminadas por Cryptosporidium sp. e podem se reverter em fontes potenciais para seres humanos e outros animais. Para a pesquisa de Cryptosporidium sp. em ostras, as brânquias são o tecido eletivo.

Biological control of Biomphalaria, the intermediate host of Schistosoma spp, a systematic review / Controle biológico de Biomphalaria, hospedeiro intermediário do Schistosoma spp, uma revisão sistemática

Schistosomiasis is an important vector-borne disease transmitted by an intermediate host: a freshwater mollusk. Control of these snail vectors is one of the strategies of the World Health Organization against the disease. The present study was based on a systematic review of published scientific papers concerning the biological control of snails (genus Biomphalaria), and identified the ongoing challenges and propose future perspectives. The review methodology was based on the PRISMA statement, the international databases Web of Science and Scopus for the period 1945-2021. In total, 47 papers were analyzed, published by authors from 14 different countries, the majority being from: France, Brazil, the United States, and Egypt. The most widely used strategy for biological control was predation by fish (12 studies). Fourteen papers were published in the most prolific decade 2010-2019; during which there was also a greater diversity of biological control agents in studies. In this context, we believed that one of the principal challenges of this approach is the successful simultaneous use of multiple types of biological control agent: predators, competitors, and/or microbial agents. This new approach may provide important insights for the development of new biological control agents or microbial-based products, with the potential to reduce the parasite load carried by schistosomiasis snail vector and control its transmission in a sustainable way.

A esquistossomose é uma importante doença transmitida por vetor, um hospedeiro intermediário: um molusco de água doce. O controle desses caramujos vetores é uma das estratégias da Organização Mundial da Saúde para controle da doença. O presente estudo foi baseado em uma revisão sistemática de artigos científicos publicados sobre o controle biológico de caramujos (gênero Biomphalaria), e teve como objetivo identificar os desafios atuais e propor perspectivas futuras. A metodologia de revisão foi baseada na declaração PRISMA, nas bases de dados internacionais, Web of Science e Scopus, entre 1945-2021. No total, foram analisados 47 artigos, publicados por autores de 14 países diferentes, sendo a maioria: França, Brasil, Estados Unidos e Egito. A estratégia mais utilizada para controle biológico foi a predação por peixes (12 estudos). Quatorze artigos foram publicados na década mais produtiva 2010-2019, durante a qual também houve uma maior diversidade de agentes de controle biológico em estudos. Neste contexto, acreditamos que um dos principais desafios desta abordagem é a utilização simultânea bem-sucedida de múltiplos tipos de agentes de controle biológico: predadores, concorrentes e/ou agentes microbianos. Esta nova abordagem fornece importantes subsídios para o desenvolvimento de novos agentes de controle biológico ou produtos de base microbiana, com o potencial de reduzir a carga parasitária transportada pelo vetor esquistossomose de caramujos e controlar sua transmissão de forma sustentável.

Isolation and characterization of five novel disulfide-poor conopeptides from Conus marmoreus venom

Background: Conopeptides from cone snail venom have aroused great interest related to the discovery of novel bioactive candidates, due to their excellent prospects for the treatment of various health problems such as pain, addiction, psychosis and epilepsy. In order to explore novel biopeptides, we investigated the structure and function of five novel conopeptides isolated from the venom of Conus marmoreus from South China Sea. Methods: C. marmoreus crude venom was prepared, fractionated and purified by HPLC system. The primary sequences of the five novel disulfide-poor conopeptides Mr-1 to Mr-5 were identified by comprehensive analysis of de novo MALDI-TOF tandem mass spectrometry and Edman degradation data. In order to investigate their function, these five conopeptides were synthesized by Fmoc-SPPS chemistry, and their biological effects at several heterologous rat nicotinic acetylcholine receptor (nAChR) subtypes (α1β1δε, α3β2, α3β4, α4β2) were determined by electrophysiological technique. Results: Five novel disulfide-poor conopeptides were identified and named as follows: Mr-1 (DWEYHAHPKPNSFWT), Mr-2 (YPTRAYPSNKFG), Mr-3 (NVIQAPAQSVAPP NTST), Mr-4 [KENVLNKLKSK(L/I)] and Mr-5 [NAVAAAN(L/I)PG(L/I)V]. None of them contains a disulfide bond. The sequences of conopeptides Mr-2 to Mr-5 do not belong to any category of the known disulfide-poor conopeptides. No significant activity against the above nAChR subtypes were observed for the five conopeptides at 100 µM. Conclusion: We purified and structurally characterized five novel disulfide-poor conopeptides from C. marmoreus crude venom and first investigated their nAChR inhibitory effects. This work expanded our knowledge on the structure and function of disulfide-poor conopeptides from this cone snail venom.(AU)

Bioaccumulation and depuration of Escherichia coli in the tropical clam Anomalocardia brasiliana at different salinities / [Bioacumulação e depuração de Escherichia coli no molusco de areia Anomalocardia brasiliana em diferentes salinidades]

Anomalocardia brasiliana is an intertidal filter-feeding clam that can accumulate enterobacteria, such as Escherichia coli, and consequently affect human health. Shellfish depuration is a procedure which reduces microbiological contaminants; however, salinity and depuration time can vary across species to adequately reduce bacteria load. To analyze the effect of salinity on the bioaccumulation and depuration of E. coli by A. brasiliana, this study evaluated salinity and depuration time in animals artificially contaminated with E. coli. Each experimental group of clams were acclimated for 6 hours in a recirculating aquaculture system (RAS) and then exposed to E. coli for 18 hours. Following exposure, clams were then held at one of four salinities (35, 30, 25 e 20) for a period of one of four depuration times (0, 12, 24, 36 and 48h). The highest bioaccumulation of E. coli in A. brasiliana was observed in clams held at salinities of 35, 30 and 25. The greatest reduction of E. coli in A. brasiliana was observed in clams held at 25 for 48 hours. A salinity of 20 showed low bioaccumulation and depuration of E. coli. The results of this study will contribute to developing a protocol for depurating A. brasiliana to mitigate human health concerns.

Anomalocardia brasiliana é um molusco de areia filtrador que habita entremarés, o qual pode acumular enterobactérias como E. coli e, consequentemente, afetar o ser humano. A depuração de moluscos é o procedimento para reduzir a contaminação; para isso, é necessária uma adequada qualidade da água. A fim de analisar o efeito da salinidade na bioacumulação e na depuração de E. coli por A. brasiliana, o presente estudo avaliou quatro salinidades (35, 30, 25 e 20) e quatro tempos de depuração (0, 12, 24, 36 e 48h) em animais contaminados artificialmente com E. coli. Todos os moluscos foram aclimatados por seis horas e posteriormente expostos a E. coli por 18h no sistema de depuração. O experimento de depuração foi realizado em um sistema de recirculação de água (RAS). A maior bioacumulação de E. coli em A. brasiliana foi observada nas salinidades de 35, 30 e 25, e a maior redução de E. coli nos animais foi observada na salinidade de 25, após 48h de depuração. A salinidade de 20 apresentou uma baixa bioacumulação de E. coli. A maior redução de E. coli em A. brasiliana foi observada na salinidade 25 depois de 48h de depuração. Os resultados do presente estudo podem contribuir para o desenvolvimento de um protocolo de depuração para essa espécie.

Aspects of the population dynamics of Anomalocardia brasiliana: subsidies for sustainable fishing in the west coast of Ceará, Brazil / Aspectos da dinâmica populacional de Anomalocardia brasiliana: subsídios para a pesca sustentável no Litoral Oeste do Ceará, Brasil

Shellfish gathering is an artisanal activity and a means of family subsistence for several coastal communities along the Brazilian coast and Anomalocardia brasiliana is one of the main exploited mollusk species. This paper aimed to obtain information about the temporal distribution, growth, yield, and gonadosomatic index of the bivalve mollusk A. brasiliana in a natural stock to provide subsidies for the sustainable extraction of this resource. The study was carried out in an area of the Acaraú River estuary, on Volta do Rio Beach, municipality of Acaraú, Ceará, Brazil. Samples were collected monthly for one year at spring low tide, using the random squares method. Water and sediment temperature and salinity were measured in situ. Sediment samples were collected for granulometric analysis. The specimens were individually quantified, measured, and weighed. A total of 8,507 A. brasiliana specimens were sampled, and the highest density recorded was 2,534 individuals/m2, whose longest shell length reached between 21 and 25 mm, while the mean meat yield was 12.42%. The means of biometric variables of individuals showed significant differences during the sample period. Frequency histograms evidenced the presence of adult and juvenile individuals, showing a continuous reproductive cycle in the studied natural stock. These results can assist the sustainable shellfish gathering activity on Volta do Rio Beach. We recommend that A. brasiliana is above 20 mm in length to be captured and the reduction in the capture effort from April to September, when the highest density of juveniles was observed, to guarantee the sustainability of this stock.

A mariscagem é uma atividade artesanal e meio de subsistência familiar de diversas comunidades litorâneas ao longo da costa brasileira, sendo Anomalocardia brasiliana uma das principais espécies de molusco exploradas. Esse trabalho objetivou obter informações sobre a distribuição temporal, crescimento, rendimento e o índice gonadossomático do molusco bivalve A. brasiliana em um estoque natural a fim de fornecer subsídios para a extração sustentável deste recurso. O estudo foi realizado em uma área do estuário do rio Acaraú, na Praia Volta do Rio, município de Acaraú, Ceará, Brasil. As coletas foram realizadas mensalmente durante um ano na maré baixa de sizígia, utilizando o método dos quadrados aleatórios. A temperatura da água, do sedimento e a salinidade foram aferidas in situ. Foram coletadas amostras de sedimento para análise granulométrica. Os espécimes foram quantificados, mensurados e pesados individualmente. Foram amostrados um total de 8.507 exemplares de A. brasiliana, a maior densidade registrada teve 2.534 indivíduos/m2, aqueles com maior comprimento de concha tinham entre 21 e 25 mm, o rendimento da carne apresentou um valor médio de 12,42%. As médias das variáveis biométricas dos indivíduos apresentaram diferenças significativas durante o período amostral. Os histogramas de frequência evidenciaram a presença de indivíduos adultos e juvenis, indicando um ciclo reprodutivo contínuo no estoque natural estudado. Estes resultados auxiliarão no exercício da mariscagem sustentável na praia da Volta do Rio. Recomenda-se a captura de A. brasiliana com comprimento acima de 20 mm e a redução do esforço de captura nos meses de abril a setembro, período em que foi observada a maior densidade de juvenis, a fim de garantir a sustentabilidade desse estoque.

Proteomic analysis of Red Sea Conus taeniatus venom reveals potential biological applications

Diverse and unique bioactive neurotoxins known as conopeptides or conotoxins are produced by venomous marine cone snails. Currently, these small and stable molecules are of great importance as research tools and platforms for discovering new drugs and therapeutics. Therefore, the characterization of Conus venom is of great significance, especially for poorly studied species. Methods: In this study, we used bioanalytical techniques to determine the venom profile and emphasize the functional composition of conopeptides in Conus taeniatus, a neglected worm-hunting cone snail. Results: The proteomic analysis revealed that 84.0% of the venom proteins were between 500 and 4,000 Da, and 16.0% were > 4,000 Da. In C. taeniatus venom, 234 peptide fragments were identified and classified as conotoxin precursors or non-conotoxin proteins. In this process, 153 conotoxin precursors were identified and matched to 23 conotoxin precursors and hormone superfamilies. Notably, the four conotoxin superfamilies T (22.87%), O1 (17.65%), M (13.1%) and O2 (9.8%) were the most abundant peptides in C. taeniatus venom, accounting for 63.40% of the total conotoxin diversity. On the other hand, 48 non-conotoxin proteins were identified in the venom of C. taeniatus. Moreover, several possibly biologically active peptide matches were identified, and putative applications of the peptides were assigned. Conclusion: Our study showed that the composition of the C. taeniatus-derived proteome is comparable to that of other Conus species and contains an effective mix of toxins, ionic channel inhibitors and antimicrobials. Additionally, it provides a guidepost for identifying novel conopeptides from the venom of C. taeniatus and discovering conopeptides of potential pharmaceutical importance.(AU)

Proteomic analysis of Red Sea Conus taeniatus venom reveals potential biological applications

Diverse and unique bioactive neurotoxins known as conopeptides or conotoxins are produced by venomous marine cone snails. Currently, these small and stable molecules are of great importance as research tools and platforms for discovering new drugs and therapeutics. Therefore, the characterization of Conus venom is of great significance, especially for poorly studied species. Methods: In this study, we used bioanalytical techniques to determine the venom profile and emphasize the functional composition of conopeptides in Conus taeniatus, a neglected worm-hunting cone snail. Results: The proteomic analysis revealed that 84.0% of the venom proteins were between 500 and 4,000 Da, and 16.0% were > 4,000 Da. In C. taeniatus venom, 234 peptide fragments were identified and classified as conotoxin precursors or non-conotoxin proteins. In this process, 153 conotoxin precursors were identified and matched to 23 conotoxin precursors and hormone superfamilies. Notably, the four conotoxin superfamilies T (22.87%), O1 (17.65%), M (13.1%) and O2 (9.8%) were the most abundant peptides in C. taeniatus venom, accounting for 63.40% of the total conotoxin diversity. On the other hand, 48 non-conotoxin proteins were identified in the venom of C. taeniatus. Moreover, several possibly biologically active peptide matches were identified, and putative applications of the peptides were assigned. Conclusion: Our study showed that the composition of the C. taeniatus-derived proteome is comparable to that of other Conus species and contains an effective mix of toxins, ionic channel inhibitors and antimicrobials. Additionally, it provides a guidepost for identifying novel conopeptides from the venom of C. taeniatus and discovering conopeptides of potential pharmaceutical importance.(AU)

Isolation and structural identification of a new T1-conotoxin with unique disulfide connectivities derived from Conus bandanus

Background: Conopeptides are neuropharmacological peptides derived from the venomous salivary glands of cone snails. Among 29 superfamilies based on conserved signal sequences, T-superfamily conotoxins, which belong to the smallest group, include four different frameworks that contain four cysteines denominated I, V, X and XVI. In this work, the primary structure and the cysteine connectivity of novel conotoxin of Conus bandanus were determined by tandem mass spectrometry using collision-induced dissociation. Methods: The venom glands of C. bandanus snails were dissected, pooled, and extracted with 0.1% trifluoroacetic acid in three steps and lyophilized. The venom was fractionated and purified in an HPLC system with an analytical reversed-phase C18 column. The primary peptide structure was analyzed by MALDI TOF MS/MS using collision-induced dissociation and confirmed by Edman's degradation. The peptides cysteine connectivity was determined by rapid partial reduction-alkylation technique. Results: The novel conotoxin, NGC1C2(I/L)VREC3C4, was firstly derived from de novo sequencing by MS/MS. The presence of isoleucine residues in this conotoxin was confirmed by the Edman degradation method. The conotoxin, denominated Bn5a, belongs to the T1-subfamily of conotoxins. However, the disulfide bonds (C1-C4/C2-C3) of Bn5a were not the same as found in other T1-subfamily conopeptides but shared common connectivities with T2-subfamily conotoxins. The T1-conotoxin of C. bandanus proved the complexity of the disulfide bond pattern of conopeptides. The homological analysis revealed that the novel conotoxin could serve as a valuable probe compound for the human-nervous-system norepinephrine transporter. Conclusion: We identified the first T1-conotoxin, denominated Bn5a, isolated from C. bandanus venom. However, Bn5a...(AU)

First report of detection of Toxoplasma gondii DNA in oysters (Crassostrea sp) in the state of Maranhão / Primeiro relato da detecção de DNA de Toxoplasma gondii em ostras (Crassostrea sp) no Estado do Maranhão

The aim of this study was to report on detection of Toxoplasma gondii DNA in oysters (Crassostrea sp.) in the state of Maranhão. To conduct this study, 200 farmed oysters were acquired in the municipality of Raposa and 100 in Paço do Lumiar; and a further 100 oysters were taken from the natural stock in the municipality of Primeira Cruz. This total of 400 specimens sampled was divided into 80 pools composed of five animals each. The gills and visceral mass of each oyster were removed for DNA extraction (per pool of oysters), using a commercial kit. The nested PCR technique (with the primer SAG-1) was then used to investigate any presence of protozoa. This molecular technique demonstrated the presence of DNA of T. gondii in 2.5% of the pools of oysters (n = 2/80): these oysters were exclusively from farms. The results from this study allow the conclusion that oysters of the genus Crassostrea that are farmed in the state of Maranhão are capable of filtering oocysts of T. gondii and maintaining them in their tissues. They are therefore potential sources of contamination for humans and other animals.(AU)

Objetivou-se com este estudo relatar a detecção do DNA de Toxoplasma gondii em ostras (Crassostrea sp.) no estado do Maranhão. Para a realização do estudo foram adquiridas 200 ostras de cultivo do município de Raposa, e 100 de Paço do Lumiar, além de 100 ostras extraídas de estoque natural do município de Primeira Cruz. Do total de 400 exemplares amostrados, formaram-se 80 pools em que cada pool foi constituído por cinco animais. De cada ostra foi procedida à retirada das brânquias e massa visceral, seguido da extração de DNA de cada pool de ostras, com a utilização de kit comercial. Posteriormente, realizou-se a pesquisa do protozoário por meio da técnica de nested PCR (primer SAG-1). Com a técnica molecular utilizada, foi diagnosticado o DNA do protozoário pesquisado em 2,5% (n=2/80) pools de ostras oriundas exclusivamente de cultivo. Com os resultados obtidos neste estudo, conclui-se que ostras do gênero Crassostrea sp., cultivadas no estado do Maranhão, são capazes de filtrar e manter nos seus tecidos oocistos de T. gondii, sendo, portanto, fontes potenciais de contaminação para seres humanos e outros animais.(AU)

New record of the invasive snail Melanoides tuberculata (Gastropoda, Thiaridae) - Ceará State, Brazil / Novo registro do gastropode invasor Melanoides tuberculata (Gastropoda, Thiaridae) Estado do Ceará, Brasil

Melanoides tuberculata is a freshwater gastropod native to Africa and Asia, and currently presents distributed worldwide. The first record of Melanoides tuberculata in South America occurred in Brazil, in the city of Santos, state of São Paulo, in 1967. Therefore, the objective of the present study is to report the occurrence of Melanoides tuberculata for Banana Lagoon and to characterize the current population situation. The gastropods were collected through direct visualization of shells, morphometric measurements of Melanoides tuberculata shells were determined using a digital caliper. After identifying the gastropod and its first distribution in the area, a preliminary descriptive analysis of the population was carried out. The gastropods were classified by grouping the individuals into four classes according to the shell width (mm). This is the first record of the occurrence of Melanoides tuberculata, in Banana Lagoon, Caucaia municipality, Ceará state, Northeast Brazil, being the largest specimen cited in the literature (33.77 mm) and 92.65% of the gastropods present in sizes above the first reproduction stages.(AU)

Melanoides tuberculata é um gastrópode de água doce nativo da África e da Ásia e atualmente apresenta-se distribuído mundialmente. O primeiro registro de Melanoides tuberculata na América do Sul ocorreu no Brasil, na cidade de Santos, estado de São Paulo, em 1967. Portanto, o objetivo do presente estudo é relatar a ocorrência de Melanoides tuberculata para Lagoa do Banana, caracterizando a situação atual da população no local. Os gastrópodes foram coletados através da visualização direta de conchas, e as medidas morfométricas das conchas de Melanoides tuberculata foram determinadas por meio de um paquímetro digital. Após identificar o gastrópode e constando sua primeira distribuição na área, realizou-se uma análise preliminar descritiva da população. Os gastrópodes foram classificados agrupando os indivíduos em quatro classes de acordo com a largura da concha (mm). Este é o primeiro registro da ocorrência de Melanoides tuberculata, na Lagoa da Banana, município de Caucaia, estado do Ceará, Nordeste do Brasil, sendo o maior exemplar citado na literatura (33,77 mm) já registrado e 92,65% dos gastrópodes apresentam-se em tamanhos acima do primeiro estágios de reprodução.(AU)

Morphometric analysis of Littoraria angulifera (Caenogastropoda) in estuarine regions of northeastern Brazil / Análise morfométrica de Littoraria angulifera (Caenogastropoda) em regiões estuarinas do Nordeste do Brasil

The gastropod Littoraria angulifera (Littorinidae) is an exclusively estuarine mollusk with Neotropical anfiatlantic distribution. Recent studies indicate a possible use of the species as bioindicator. The aim of this study was to analyze the shell height, as well as to perform a morphometric analysis of the reproductive apparatus of L. angulifera collected in 22 sampling points located between latitudes 13º54'S and 15º44'S in the South Atlantic, State of Bahia, Northeastern Brazil. The specimens were obtained in different estuarine environments including mangroves, as well as on rocks and concrete walls in places close to ports, shipyards and berths during January and February 2014. All specimens (n = 880) were analyzed regarding the sex and shell height/morphology, 440 were analyzed about the reproductive apparatus morphometry and 15 in histological description. The average shell height of animals from artificial substrates in nautical areas was lower (p 0.05) than the animals from mangroves, mainly in preserved areas, evidencing relation with human impacts and desiccation. The morphometric analysis of L. angulifera reproductive tract allowed us to conclude that the length of prostate in males and of palial oviduct in females may be useful in the reproductive evaluation of the species.(AU)

O gastrópode Littoraria angulifera (Littorinidae) é um molusco exclusivamente estuarino com distribuição anfiatlântica neotropical. Estudos recentes indicam um possível uso dessa espécie como bioindicadora. No presente estudo teve-se por objetivos analisar a altura da concha, assim como realizar uma análise morfométrica do aparato reprodutor de L. angulifera coletada em 22 pontos amostrais localizados entre as latitudes 13º54'S e 15º44'S no Atlântico Sul, Estado da Bahia, Nordeste do Brasil. Os exemplares foram obtidos em diferentes ambientes estuarinos, incluindo manguezais, assim como sobre rochas e paredes de concreto em lugares próximos a portos, estaleiros e atracadouros, durante janeiro e fevereiro de 2014. Todos os espécimes (n = 880) foram analisados quanto à morfologia/ altura da concha e sexo, 440 quanto à morfometria do aparelho reprodutor e 15 em descrição histológica. A média de altura da concha de animais de substratos artificiais em áreas náuticas foi menor (p 0,05) do que de animais de manguezais, principalmente de áreas preservadas, evidenciando relação com o impacto antrópico e a dessecação. A análise morfométrica do trato reprodutivo de L. angulifera levou à conclusão que o comprimento da próstata em machos e do oviduto palial em fêmeas pode ser útil na avaliação reprodutiva da espécie.(AU)

Achatina fulica (Gastropoda: Pulmonata): Occurrence, environmental aspects and presence of nematodes in Sergipe, Brazil / Achatina fulica (Gastropoda: Pulmonata): ocorrencia, aspectos ambientais e presença de nematódeos em Sergipe, Brasil

The objective of this study was to identify the occurrence of Achatina fulica in the Great Aracaju-SE Territory. This research was developed during the months of June 2016 to May 2017. The plots methodology was used for the monthly collections, following the collection time of 20 minutes per area. The mollusks were measured and soon afterwards the parasitological analysis of the mucus and faeces was performed. Molecular identification was performed to evaluate the possible presence of Angiostrongylus sp. We observed that the occurrence of A. fulica was more representative in urban areas, especially in vacant lots with the presence of litter and decomposing materials. In the specimens of A. fulica examined were male and female nematodes of the genus Rhabditis, in the research municipalities, except in Barra dos Coqueiros. No parasites of the genus Angiostrongylus were found in the mollusks examined. The influence of the presence of litter on the plots associated with the frequency of A. fulica was statistically significant. There was a correlation between the influence of rainfall and the frequency of A. fulica. A significant relationship between moisture and frequency and nematode positivity was identified. It was also observed that the larger the mollusk, the greater the chances of being infected by nematodes. Scientific knowledge about the biology of the A. fulica species associated with human intervention such as the maintenance of land and adequate sanitary measures may be important factors for a better control of this invasive mollusk.(AU)

O objetivo deste estudo foi verificar a ocorrência de A. fulica no território da Grande Aracaju, Sergipe, avaliando a infecção destes moluscos por nematódeos, a influência das condições climáticas e das características do ambiente. Esta pesquisa foi desenvolvida durante os meses de junho de 2016 a maio de 2017. Foi utilizada a metodologia de parcelas para as coletas mensais de 20 min por área, um total de 15 parcelas distribuídas em 5 municípios. Os moluscos foram mensurados e logo em seguida realizada a análise parasitológica do muco e fezes. Foi realizada a identificação molecular para avaliar a possível presença de Angiostrongylus sp. Observamos que a ocorrência de A. fulica foi mais representativa em áreas urbanas, sobretudo em terrenos baldios com a presença de lixo e materiais em decomposição. Nos exemplares de A. fulica examinados foram encontrados nematódeos do gênero Rhabditis, nos municípios da pesquisa, exceto em Barra dos Coqueiros. Não foram encontrados parasitos do gênero Angiostrongylus nos moluscos examinados. A influência da presença de lixo nas parcelas associado à frequência da A. fulica mostrou-se estatisticamente significativa. Houve correlação entre a influência da chuva e a frequência de A. fulica. Foi identificada uma relação significativa entre a umidade e a frequência e a positividade para nematódeos. Foi também observado que quanto maior o molusco, maiores são as chances deste apresentar nematódeos. O conhecimento científico a respeito da biologia da espécie A. fulica associado à intervenção humana como, a manutenção de terrenos e medidas sanitárias adequadas podem ser fatores importantes para um controle malacológico mais adequado para esta espécie invasora.(AU)

Fish predators of the golden mussel limnoperna fortunei in different environments in a south american subtropical river / Peixes predadores do mexilhão-dourado Limnoperna fortunei em diferentes ambientes de um rio subtropical da América do Sul

This study aimed to evaluate whether the golden mussel, Limnoperna fortunei, identified in the upper Uruguay River for the first time in 2012, has been incorporated into the diet of the ichthyofauna present in different environments of a Neotropical reservoir. To achieve this, we analyzed the digestive tract of fish that were collected seasonally between August 2015 and May 2016. The results showed that 22 fish species had L. fortunei in the digestive tract, of which 11 were previously not known to comprise the diet of this mollusk. Furthermore, it was observed that species belonging to the orders Characiformes and Cichliformes were the main consumers of L. fortunei in the lentic environment, whereas in the lotic and transition environments, the main consumers belonged to the order Siluriformes. The degree of digestion of L. fortunei in the digestive tract of fish indicated that although most fish could digest this food resource, some Siluriformes found it difficult. Thus, it can be concluded that the availability of L. fortunei in the upper Uruguay River forms a new food resource for the endemic ichthyofauna.

O presente estudo teve como objetivo avaliar se o mexilhão-dourado Limnoperna fortunei, identificado na região do alto rio Uruguai pela primeira vez em 2012, vem sendo incorporado na dieta da ictiofauna presente nos diferentes compartimentos de um reservatório neotropical. Para isto, foi analisado o trato digestório de peixes através de coletas sazonais realizadas entre agosto de 2015 e maio de 2016. Os resultados mostraram que 22 espécies de peixes apresentaram L. fortunei no trato digestório, sendo que o registro de consumo deste molusco era desconhecido para 11 delas. Além disso, foi possível observar que espécies das ordens Characiformes e Cichliformes foram as principais consumidoras de L. fortunei no ambiente lêntico, enquanto que nos ambientes lóticos e de transição (lótico/lêntico) os principais consumidores deste mesmo recurso foram espécies pertencentes a ordem Siluriformes. Quando avaliado o grau de digestão de L. fortunei encontrado no trato digestório dos peixes, foi observado que a maioria dos peixes consegue digerir esse recurso alimentar, entretanto, merece destaque o fato de que algumas espécies de Siluriformes encontram dificuldade em digerir esse molusco invasor. Diante dessas informações é possível concluir que a disponibilidade de L. fortunei no alto rio Uruguai vem proporcionando uma nova oferta de alimento para diferentes espécies de peixes, e que os consumidores variam de acordo com o compartimento do reservatório.

Fish predators of the golden mussel limnoperna fortunei in different environments in a south american subtropical river / Peixes predadores do mexilhão-dourado Limnoperna fortunei em diferentes ambientes de um rio subtropical da América do Sul

This study aimed to evaluate whether the golden mussel, Limnoperna fortunei, identified in the upper Uruguay River for the first time in 2012, has been incorporated into the diet of the ichthyofauna present in different environments of a Neotropical reservoir. To achieve this, we analyzed the digestive tract of fish that were collected seasonally between August 2015 and May 2016. The results showed that 22 fish species had L. fortunei in the digestive tract, of which 11 were previously not known to comprise the diet of this mollusk. Furthermore, it was observed that species belonging to the orders Characiformes and Cichliformes were the main consumers of L. fortunei in the lentic environment, whereas in the lotic and transition environments, the main consumers belonged to the order Siluriformes. The degree of digestion of L. fortunei in the digestive tract of fish indicated that although most fish could digest this food resource, some Siluriformes found it difficult. Thus, it can be concluded that the availability of L. fortunei in the upper Uruguay River forms a new food resource for the endemic ichthyofauna.(AU)

O presente estudo teve como objetivo avaliar se o mexilhão-dourado Limnoperna fortunei, identificado na região do alto rio Uruguai pela primeira vez em 2012, vem sendo incorporado na dieta da ictiofauna presente nos diferentes compartimentos de um reservatório neotropical. Para isto, foi analisado o trato digestório de peixes através de coletas sazonais realizadas entre agosto de 2015 e maio de 2016. Os resultados mostraram que 22 espécies de peixes apresentaram L. fortunei no trato digestório, sendo que o registro de consumo deste molusco era desconhecido para 11 delas. Além disso, foi possível observar que espécies das ordens Characiformes e Cichliformes foram as principais consumidoras de L. fortunei no ambiente lêntico, enquanto que nos ambientes lóticos e de transição (lótico/lêntico) os principais consumidores deste mesmo recurso foram espécies pertencentes a ordem Siluriformes. Quando avaliado o grau de digestão de L. fortunei encontrado no trato digestório dos peixes, foi observado que a maioria dos peixes consegue digerir esse recurso alimentar, entretanto, merece destaque o fato de que algumas espécies de Siluriformes encontram dificuldade em digerir esse molusco invasor. Diante dessas informações é possível concluir que a disponibilidade de L. fortunei no alto rio Uruguai vem proporcionando uma nova oferta de alimento para diferentes espécies de peixes, e que os consumidores variam de acordo com o compartimento do reservatório.(AU)

Distribution of cysts of Strongyluris sp. (Nematoda) in the pallial system of Achatina fulica Bowdich, 1822 from Vila Dois Rios and Vila do Abraão, Ilha Grande, Angra dos Reis, Rio de Janeiro / Distribuição de cistos de Strongyluris sp. (Nematoda) no complexo pallial de Achatina fulica Bowdich, 1822 da Vila Dois Rios e da Vila do Abraão, Ilha Grande, Angra dos Reis, Rio de Janeiro

This work aimed to assessing Strongyluris sp. cysts distribution pattern in the several inner organs from pallial system of Achatina fulica Bowdich, 1822. Also we verified if there is a relationship between the mollusk size and the number of specimens from parasites collected from two touristic villages in Ilha Grande (Angra dos Reis, Rio de Janeiro state): Vila Dois Rios (VDR) and Vila do Abraão (ABR). The samples were obtained through a field work conducted bimonthly during 2007, 2008, 2010, and 2011, at both locations. Height and width were measured from shells collected, and the all specimens were classified in different classes: class 1 - 4.0 cm, class 2 - 4.1-9.0 cm and class 3 - 9.0 cm. After the specimens were dissected in order to find and count the number cysts in the pallial system. In specimens from both locations, the pulmonary and secondary veins showed a high number of cysts. No significance difference was found both in the abundance of cysts among the specimens in ABR (p=0.138) and VDR (p=0.181). Achatina fulica showed different intensities of cyst infection based on the size classes: the class-3 specimens, at both locations, showed the greatest cyst average (ABR Anova F= 3.8; p=0.02); (VDR T of Student T= -2.04; p=0.04). The results suggested that the highest number of cysts in the vascularized area in pallial system of A. fulica was a consequence of a greater hemolymph circulation in that area, delivering more nutrients for larvae development. We think that bigger individuals host a higher number of cysts, as they usually present a larger biomass and a larger area of the pallial system, allowing an efficient parasite colonization. Other possible explanation could be the long exposure of the molluscs of class 3 to the parasites, which allowed a longer time to the larvae to allocate themselves.(AU)

O objetivo do estudo foi analisar o padrão de distribuição dos cistos de Strongyluris sp. nos diversos órgãos do complexo pallial de Achatina fulica Bowdich, 1822 e verificar se existe relação entre o tamanho do molusco e o número de parasitos em espécimes procedentes de dois vilarejos da Ilha Grande, Vila Dois Rios (VDR) e Vila do Abraão (ABR), município de Angra dos Reis, Rio de Janeiro. As coletas foram realizadas bimestralmente nos anos de 2007, 2008, 2010 e 2011 nas duas localidades. A altura e largura das conchas foram medidas, os espécimes classificados em classe 1 - 4,0 cm; classe 2 - 4,1-9,0 cm e classe 3 - 9,0 cm e posteriormente dissecados sob estereomicroscópio para a busca e contagem dos cistos no complexo pallial. Em ambas localidades, VDR e ABR, as veias pulmonares e secundárias apresentaram predominância de alocação dos cistos. Não foi encontrada diferença na abundância de cistos entre os espécimes de ABR (p=0,138) e VDR (p=0,181). Achatina fulica apresentou intensidades diferentes de infecção de acordo com as classes de tamanho: os espécimes pertencentes a classe 3, nas duas localidades, apresentaram a maior média de cistos visíveis (ABR Anova F= 3,8; p=0,02); (VDR T de Student T= -2,04; p=0,04). Os resultados sugerem que o maior número de cistos na região vascularizada de A. fulica foi decorrente do maior aporte de hemolinfa nesta área, proporcionando mais nutrientes para o desenvolvimento das larvas. Acreditamos que indivíduos maiores albergam um elevado número de cistos, pois, geralmente, apresentam maior biomassa e maior área da cavidade pallial, possibilitando uma eficiente colonização dos parasitos, outra causa pode ser explicada pelo maior tempo de exposição dos moluscos da classe 3 aos parasitas, que possibilitou um período maior para as larvas se alocarem.(AU)

New record of the invasive snail Melanoides tuberculata (Gastropoda, Thiaridae) - Ceará State, Brazil

Abstract Melanoides tuberculata is a freshwater gastropod native to Africa and Asia, and currently presents distributed worldwide. The first record of Melanoides tuberculata in South America occurred in Brazil, in the city of Santos, state of São Paulo, in 1967. Therefore, the objective of the present study is to report the occurrence of Melanoides tuberculata for Banana Lagoon and to characterize the current population situation. The gastropods were collected through direct visualization of shells, morphometric measurements of Melanoides tuberculata shells were determined using a digital caliper. After identifying the gastropod and its first distribution in the area, a preliminary descriptive analysis of the population was carried out. The gastropods were classified by grouping the individuals into four classes according to the shell width (mm). This is the first record of the occurrence of Melanoides tuberculata, in Banana Lagoon, Caucaia municipality, Ceará state, Northeast Brazil, being the largest specimen cited in the literature (33.77 mm) and 92.65% of the gastropods present in sizes above the first reproduction stages.

Resumo Melanoides tuberculata é um gastrópode de água doce nativo da África e da Ásia e atualmente apresenta-se distribuído mundialmente. O primeiro registro de Melanoides tuberculata na América do Sul ocorreu no Brasil, na cidade de Santos, estado de São Paulo, em 1967. Portanto, o objetivo do presente estudo é relatar a ocorrência de Melanoides tuberculata para Lagoa do Banana, caracterizando a situação atual da população no local. Os gastrópodes foram coletados através da visualização direta de conchas, e as medidas morfométricas das conchas de Melanoides tuberculata foram determinadas por meio de um paquímetro digital. Após identificar o gastrópode e constando sua primeira distribuição na área, realizou-se uma análise preliminar descritiva da população. Os gastrópodes foram classificados agrupando os indivíduos em quatro classes de acordo com a largura da concha (mm). Este é o primeiro registro da ocorrência de Melanoides tuberculata, na Lagoa da Banana, município de Caucaia, estado do Ceará, Nordeste do Brasil, sendo o maior exemplar citado na literatura (33,77 mm) já registrado e 92,65% dos gastrópodes apresentam-se em tamanhos acima do primeiro estágios de reprodução.

Xiphidiocercariae from naturally infected Lymnaea columella (Mollusca, Gastropoda) in urban area: morphology and ultrastructure of the larvae and histological changes in the mollusc host / Xifidiocercárias obtidas em Lymnaea columella (Mollusca, Gastropoda) naturalmente infectadas em área urbana: morfologia e ultraestrutura da larva e alterações histológicas do molusco hospedeiro

Urban agriculture is very common in the cities, as Rio de Janeiro and adjacencies, being important as economic activity. However, this practice can create appropriate conditions for establishment and maintenance of life cycle of many parasites. Lymneid snails can act as intermediate hosts of many trematodes species, including those that infect humans and wild and domestic. In the present study, the snail Lymnaea columella was collected from an urban watercress plantations and the morphology of cercariae released by them was analyzed by light and scanning electron microscopy. The specimens were identified as xiphidiocercariae, belonging to the Cercariae Ornatae group, of the order Plagiorchiiformes. Histological examination of the digestive gland of the infected snails revealed the presence of developing sporocysts, with hemocitary infiltration and metaplasia in the epithelial tissue.(AU)

Agricultura urbana é muito comum nas cidades, como Rio de Janeiro e adjacências, sendo uma importante atividade econômica de subsistência. No entanto, esta prática pode criar condições adequadas para o estabelecimento e manutenção do ciclo de vida de muitos parasitos. Os moluscos limneídeos podem atuar como hospedeiros intermédios de muitas espécies de trematódeos, incluindo aqueles que infectam humanos e animais selvagens e domésticos. No presente estudo, o molusco Lymnaea columella foi coletado de plantações urbanas de agrião e a morfologia das cercárias liberadas por eles foi analisada por microscopia eletrônica de varredura leve e de varredura. As larvas foram identificadas como xifidiocercárias, pertencentes ao grupo das Cercariae Ornatae, Ordem Plagiorchiiformes. Análises histológicas da glândula digestiva dos moluscos infectados evidenciaram esporocistos, com formação de granuloma e metaplasia do tecido epitelial.(AU)

Morphometric analysis of Littoraria angulifera (Caenogastropoda) in estuarine regions of northeastern Brazil

Abstract The gastropod Littoraria angulifera (Littorinidae) is an exclusively estuarine mollusk with Neotropical anfiatlantic distribution. Recent studies indicate a possible use of the species as bioindicator. The aim of this study was to analyze the shell height, as well as to perform a morphometric analysis of the reproductive apparatus of L. angulifera collected in 22 sampling points located between latitudes 13º54'S and 15º44'S in the South Atlantic, State of Bahia, Northeastern Brazil. The specimens were obtained in different estuarine environments including mangroves, as well as on rocks and concrete walls in places close to ports, shipyards and berths during January and February 2014. All specimens (n = 880) were analyzed regarding the sex and shell height/morphology, 440 were analyzed about the reproductive apparatus morphometry and 15 in histological description. The average shell height of animals from artificial substrates in nautical areas was lower (p 0.05) than the animals from mangroves, mainly in preserved areas, evidencing relation with human impacts and desiccation. The morphometric analysis of L. angulifera reproductive tract allowed us to conclude that the length of prostate in males and of palial oviduct in females may be useful in the reproductive evaluation of the species.

Resumo O gastrópode Littoraria angulifera (Littorinidae) é um molusco exclusivamente estuarino com distribuição anfiatlântica neotropical. Estudos recentes indicam um possível uso dessa espécie como bioindicadora. No presente estudo teve-se por objetivos analisar a altura da concha, assim como realizar uma análise morfométrica do aparato reprodutor de L. angulifera coletada em 22 pontos amostrais localizados entre as latitudes 13º54'S e 15º44'S no Atlântico Sul, Estado da Bahia, Nordeste do Brasil. Os exemplares foram obtidos em diferentes ambientes estuarinos, incluindo manguezais, assim como sobre rochas e paredes de concreto em lugares próximos a portos, estaleiros e atracadouros, durante janeiro e fevereiro de 2014. Todos os espécimes (n = 880) foram analisados quanto à morfologia/ altura da concha e sexo, 440 quanto à morfometria do aparelho reprodutor e 15 em descrição histológica. A média de altura da concha de animais de substratos artificiais em áreas náuticas foi menor (p 0,05) do que de animais de manguezais, principalmente de áreas preservadas, evidenciando relação com o impacto antrópico e a dessecação. A análise morfométrica do trato reprodutivo de L. angulifera levou à conclusão que o comprimento da próstata em machos e do oviduto palial em fêmeas pode ser útil na avaliação reprodutiva da espécie.