In vitro development and acclimatization of Cyrtopodium aliciae L. Linden & Rolfe, an endemic species of the Chapada Diamantina / Desenvolvimento in vitro e aclimatização de Cyrtopodium aliciae L. Linden & Rolfe: uma bela e endêmica espécie da Chapada Diamantina

ABSTRACT: Orchids are valued as ornamental plants, bioindicators, and medicinal plants, which implies that some species may be over-collected. Some inhabit very fragile environments and are under threat by the misuse of habitats and anthropogenic impacts. The search for beautiful plants and flowers has increased the number of facilities for micropropagation either by seeding or by cloning plants using in vitro techniques. However, not all species have appropriate media for growth and development that would help in conservation efforts. Cyrtopodium aliciae is an endemic species of rupestrian grassland in Brazil t. It has appeal as an ornamental plant or for use in hybridisation programs dueo its small size and white brownish-purple dotted flowers. This study compared three different media, namely ½ concentration Murashige and Skoog (MS), Vacin and Wendt, and Knudson C, during plant growth and their effect on the acclimatization of Cyrtopodium aliciae. The number and length of shoots and roots, increase in mass, and survival in vitro and ex vitro were analyzed. The experiment was conducted as completely random with a factorial arrangement of treatments (3 × 3) with 10 repetitions per treatment containing 10 plants for the in vitro experiment and 3 repetitions of 10 plants for the ex vitro experiment. Cyrtopodium aliciae performed better in the ½ concentration MS medium with a higher increase in mass, plant development, and survival under both in vitro and ex vitro conditions.

RESUMO: As orquídeas são valiosas como plantas ornamentais, bioindicadores ou medicinais, o que implica que algumas espécies podem ser coletadas em demasia. Algumas habitam ambientes muito frágeis e devido ao impacto antrópico, estão sob ameaça devido ao mau uso destes habitats. A busca por belas plantas e flores aumentou as facilidades para micropropagação, seja por semeadura ou por clonagem de plantas com técnicas in vitro. No entanto, nem todas as espécies possuem meios apropriados para crescimento e desenvolvimento que ajudem nos esforços de conservação. Cyrtopodium aliciae é uma bela espécie endêmica de campos rupestres do Brasil, apresenta bom apelo tanto como planta ornamental quanto como potencial para ser usada em programas de hibridização, devido ao seu pequeno tamanho de planta e belas flores brancas pontilhadas com marrom-púrpura. Este trabalho teve como objetivo comparar três meios diferentes, Murashige e Skoog à ½ concentração (MS); Vacin e Wendt (VW) e Knudson C (KC), durante o crescimento e na aclimatização. Foram analisadas as seguintes variáveis: número e comprimento de brotos e raízes, aumento de massa, sobrevivência in vitro e ex vitro. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, com os tratamentos em um arranjo fatorial 3x3 (meios x tempo) com 10 repetições por tratamento contendo 10 plantas cada para a fase in vitro e três repetições com 10 plantas para a fase ex vitro. Cyrtopodium aliciae teve melhor desempenho na concentração de ½ MS com o maior aumento de massa, desenvolvimento da planta e sobrevivência tanto em condições in vitro quanto em condições ex vitro.

In vitro development and acclimatization of Cyrtopodium aliciae L. Linden & Rolfe, an endemic species of the Chapada Diamantina / Desenvolvimento in vitro e aclimatização de Cyrtopodium aliciae L. Linden & Rolfe: uma bela e endêmica espécie da Chapada Diamantina

Orchids are valued as ornamental plants, bioindicators, and medicinal plants, which implies that some species may be over-collected. Some inhabit very fragile environments and are under threat by the misuse of habitats and anthropogenic impacts. The search for beautiful plants and flowers has increased the number of facilities for micropropagation either by seeding or by cloning plants using in vitro techniques. However, not all species have appropriate media for growth and development that would help in conservation efforts. Cyrtopodium aliciae is an endemic species of rupestrian grassland in Brazil t. It has appeal as an ornamental plant or for use in hybridisation programs dueo its small size and white brownish-purple dotted flowers. This study compared three different media, namely ½ concentration Murashige and Skoog (MS), Vacin and Wendt, and Knudson C, during plant growth and their effect on the acclimatization of Cyrtopodium aliciae. The number and length of shoots and roots, increase in mass, and survival in vitro and ex vitro were analyzed. The experiment was conducted as completely random with a factorial arrangement of treatments (3 × 3) with 10 repetitions per treatment containing 10 plants for the in vitro experiment and 3 repetitions of 10 plants for the ex vitro experiment. Cyrtopodium aliciae performed better in the ½ concentration MS medium with a higher increase in mass, plant development, and survival under both in vitro and ex vitro conditions.

As orquídeas são valiosas como plantas ornamentais, bioindicadores ou medicinais, o que implica que algumas espécies podem ser coletadas em demasia. Algumas habitam ambientes muito frágeis e devido ao impacto antrópico, estão sob ameaça devido ao mau uso destes habitats. A busca por belas plantas e flores aumentou as facilidades para micropropagação, seja por semeadura ou por clonagem de plantas com técnicas in vitro. No entanto, nem todas as espécies possuem meios apropriados para crescimento e desenvolvimento que ajudem nos esforços de conservação. Cyrtopodium aliciae é uma bela espécie endêmica de campos rupestres do Brasil, apresenta bom apelo tanto como planta ornamental quanto como potencial para ser usada em programas de hibridização, devido ao seu pequeno tamanho de planta e belas flores brancas pontilhadas com marrom-púrpura. Este trabalho teve como objetivo comparar três meios diferentes, Murashige e Skoog à ½ concentração (MS); Vacin e Wendt (VW) e Knudson C (KC), durante o crescimento e na aclimatização. Foram analisadas as seguintes variáveis: número e comprimento de brotos e raízes, aumento de massa, sobrevivência in vitro e ex vitro. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, com os tratamentos em um arranjo fatorial 3x3 (meios x tempo) com 10 repetições por tratamento contendo 10 plantas cada para a fase in vitro e três repetições com 10 plantas para a fase ex vitro. Cyrtopodium aliciae teve melhor desempenho na concentração de ½ MS com o maior aumento de massa, desenvolvimento da planta e sobrevivência tanto em condições in vitro quanto em condições ex vitro.

Tenuipalpus Donnadieu, 1875 and Brevipalpus Donnadieu, 1775 in cultivation of orchid Dendrobium phalaenopsis Fitzg / Ácaros Tenuipalpus Donnadieu, 1875 e Brevipalpus Donnadieu, 1775 em cultivo de orquídea Dendrobium phalaenopsis Fitzg

The transit of infested plants may favor the introduction of herbivores into pest-free regions. In this study, we reported the occurrence of pest mites in Dendrobium phalaenopsis Fitzg. Mites were collected from orchid leaves with lesions. We identified Brevipalpus californicus (Banks, 1904) (sensu latu), Brevipalpus yothersi Baker, 1949 and Tenuipalpus orchidofilo Moraes & Freire, 2001 (Tenuipalpidae). These species had not been registered in D. phalaenopsis. This study reinforces the importance of adequate phytosanitary care for orchid cultivation, since these mites can infest other cultivated plants and damage orchids.

O trânsito de plantas infestadas pode favorecer a introdução de herbívoros em regiões livres de pragas. Neste estudo, relata-se a presença de ácaros-praga em Dendrobium phalaenopsis Fitzg. Os ácaros foram coletados de folhas de orquídeas com danos. Identificou-se Brevipalpus californicus (BANKS, 1904) (sensu latu), Brevipalpus yothersi Baker, 1949 e Tenuipalpus orchidofilo Moraes & Freire, 2001 (Tenuipalpidae). Até o momento, essas espécies não haviam sido registradas em D. phalaenopsis. O estudo alerta sobre a importância de cuidados fitossanitários adequados para o cultivo e comercialização de orquídeas, uma vez que esses ácaros também podem infestar outras plantas cultivadas, além de danificar orquídeas.

Methodology of the tetrazolium test for identifying viable seeds of orchids of the genus Cattleya native to the Brazilian Cerrado / Metodologia do teste de tetrazólio para identificação de sementes viáveis de orquídeas do gênero Cattleya nativas do Cerrado brasileiro

Orchids need measures for conservation of their species, among them the creation of seed banks. This study analyzes suitable methodologies to identify the viability of Cattleya seeds through the tetrazolium test. Seeds of Cattleya nobilior Rchb. and Cattleya walkeriana Gardn. were submitted to three preconditioning: no soaking (control); sucrose (10%); or distilled water. After 24 hours, they were submitted to tetrazolium solution with three types of conditioning: oven (40 °C); water bath (40 °C); or room temperature. Subsequently, the percentage of viable seeds (VS) was calculated and in vitro sowing was carried out. Germination percentage (G) was determined after 45 days. A completely randomized design was used for each species studied, with treatments arranged in a 3x3 factorial scheme (three preconditioning and three conditioning), with eight replicates of one tube each. The experiment was performed in duplicate. The highest viability values found in the tetrazolium test were close to those of germination (C. nobilior: VS = 88% e G = 97%; C. walkeriana: VS = 88% e G = 95%) for Cattleya species native to the Cerrado. The conditioning at ambient temperature had a greater effect on seed visualization for both species studied, suggesting that the tetrazolium test should be performed at this conditioning temperature.(AU)

As orquídeas necessitam de medidas para a conservação de suas espécies, entre essas a criação de bancos de sementes. Objetivou-se identificar metodologia adequada para a identificação da viabilidade de sementes de Cattleya por meio do teste de tetrazólio. Sementes de Cattleya nobilior Rchb. e Cattleya walkeriana Gardn. foram submetidas a três pré-condicionamentos: sem embebição (controle); sacarose (10%) ou água destilada. Decorridas 24 horas, foram submetidas à solução de tetrazólio, com três tipos de condicionamento: estufa (40 °C), banho maria (40 °C) ou temperatura ambiente. Após esse período foi calculada a porcentagem de sementes viáveis (SV). Foi realizada a semeadura in vitro e, após 45 dias, determinada a porcentagem de germinação (G). Para cada espécie estudada, foi utilizado o delineamento inteiramente casualizado e os tratamentos foram arranjados em esquema fatorial 3x3 (três précondicionamentos e três condicionamentos) com oito repetições de um tubo de ensaio cada, sendo o experimento realizado em duplicata. Os maiores valores de viabilidade encontrados no teste de tetrazólio foram próximos aos de germinação (C. nobilior: SV = 88% e G = 97%; C. walkeriana: SV = 88% e G = 95%) para essas espécies de Cattleya nativas do Cerrado. Para as duas espécies estudadas, o condicionamento em temperatura ambiente apresentou melhor visualização das sementes, sugerindo que o teste de tetrazólio deve ser realizado nesta temperatura de condicionamento.(AU)

Padronização de um protocolo para assepsia de segmentos nodais de Phalaenopsispara clonagem in vitro / Standardization of a protocol for assepsis of nodal Phalaenopsissegments for in vitrocloning

A biotecnologia vegetal é uma área de elevada importância, uma vez que tem a função de obter organismos vegetais com características superiores aos já existentes no mercado. A clonagem é uma das ferramentas que podem ser utilizadas para essa função, através dela, seleciona-se organismos com características de interesse e realiza-se a multiplicação deste individuo, garantindo que as plantas regeneradas sejam geneticamente idênticas a matriz desejada, estabelecendo uma padronização. Sabendo que o setor de plantas ornamentais contribui de maneira expressiva com a economia e dentre as plantas ornamentais de mais estima entre os brasileiros, encontram-se as orquídeas, que vem adquirindo visibilidade cultural e um grande número de colecionadores nos últimos anos. O objetivo, do presente trabalho, foi estabelecer um protocolo de assepsia eficiente para meristemas laterais e obtenção de clones da orquídea do gênero Phalaenopsis. Para metodologia, visando a padronização de um protocolo de assepsia, foram elaborados e testados 4 tratamentos que possuíam diferentes combinações (concentração x tempo) de agentes como o hipoclorito de sódio, álcool, cobre, tween e lavagem dos explantes com água destilada estéril para meristemas laterais da orquídea de gênero Phalaenopsis. Os meristemas, também conhecidos como gemas laterais, foram retirados do caule das plântulas, de suas hastes florais...

Plant biotechnology is an área of high importance since it has the function of obtaining plant organisms with characteristics superior to those already on the market. Cloning is one of the tools that can be used for this function, through it, organisms with characteristics of interest are selected and this individual is multiplied, ensuring that the regenerated plants are genetically identical to the desired matrix, establishing a standardization. Knowing that the ornamental plants sector contributes significantly to the economy and among the most esteemed ornamental plants among Brazilians, there are orchids which have acquired cultural visibility and a large number of collectors in recent years.  The objective of the present work was to establish an efficient assepsis protocol for lateral meristems and to obtain clones of the orchid of the genus Phalaenopsis. For methodology, aiming at the standardization o fan asepsis protocol, 4 treatments were developed and tested with different combinations (concentration x time) of agents such as sodium hypochlorite, alcohol, copper, tween and washing the explants with sterile distilled wáter for meristems of the orchid of the genus Phalaenopsis. The meristems, also known as lateral buds, were removed from the stem of the seedlings, from their floral stems. As for obtained clones, the experiment carried out consisted of...

Padronização de um protocolo para assepsia de segmentos nodais de Phalaenopsispara clonagem in vitro / Standardization of a protocol for assepsis of nodal Phalaenopsissegments for in vitrocloning

A biotecnologia vegetal é uma área de elevada importância, uma vez que tem a função de obter organismos vegetais com características superiores aos já existentes no mercado. A clonagem é uma das ferramentas que podem ser utilizadas para essa função, através dela, seleciona-se organismos com características de interesse e realiza-se a multiplicação deste individuo, garantindo que as plantas regeneradas sejam geneticamente idênticas a matriz desejada, estabelecendo uma padronização. Sabendo que o setor de plantas ornamentais contribui de maneira expressiva com a economia e dentre as plantas ornamentais de mais estima entre os brasileiros, encontram-se as orquídeas, que vem adquirindo visibilidade cultural e um grande número de colecionadores nos últimos anos. O objetivo, do presente trabalho, foi estabelecer um protocolo de assepsia eficiente para meristemas laterais e obtenção de clones da orquídea do gênero Phalaenopsis. Para metodologia, visando a padronização de um protocolo de assepsia, foram elaborados e testados 4 tratamentos que possuíam diferentes combinações (concentração x tempo) de agentes como o hipoclorito de sódio, álcool, cobre, tween e lavagem dos explantes com água destilada estéril para meristemas laterais da orquídea de gênero Phalaenopsis. Os meristemas, também conhecidos como gemas laterais, foram retirados do caule das plântulas, de suas hastes florais...(AU)

Plant biotechnology is an área of high importance since it has the function of obtaining plant organisms with characteristics superior to those already on the market. Cloning is one of the tools that can be used for this function, through it, organisms with characteristics of interest are selected and this individual is multiplied, ensuring that the regenerated plants are genetically identical to the desired matrix, establishing a standardization. Knowing that the ornamental plants sector contributes significantly to the economy and among the most esteemed ornamental plants among Brazilians, there are orchids which have acquired cultural visibility and a large number of collectors in recent years.  The objective of the present work was to establish an efficient assepsis protocol for lateral meristems and to obtain clones of the orchid of the genus Phalaenopsis. For methodology, aiming at the standardization o fan asepsis protocol, 4 treatments were developed and tested with different combinations (concentration x time) of agents such as sodium hypochlorite, alcohol, copper, tween and washing the explants with sterile distilled wáter for meristems of the orchid of the genus Phalaenopsis. The meristems, also known as lateral buds, were removed from the stem of the seedlings, from their floral stems. As for obtained clones, the experiment carried out consisted of...(AU)

Light sources on the germination and initial in vitro establishment of Schomburgkia crispa Lindl., a species of the Brazilian Cerrado / Fontes de luz na germinação e estabelecimento inicial in vitro de Schomburgkia crispa Lindl. uma espécie do Cerrado brasileiro

Light is one of the factors that influence the germination and initial establishment of orchids under in vitro cultivation. This study evaluated the effect of different light sources on these stages in in vitro cultivation of Schomburgkia crispa Lindl. After sowing in an aseptic environment, we stored the cultures in a screened greenhouse (natural light) or in a growth room with the following light sources: 3,000 K yellow LED; 6,500 K white LED [1]; 6,500 K white LED [2]; or 6,500 K white fluorescent lamp (control). We assessed germination percentage and initial seedling establishment at 45 and 90 days after sowing. Light did not influence the germination of S. crispa. However, the use of 3,000 K LED provided a faster initial establishment of S. crispa when compared to the other light sources, also presenting lower seedling mortality. Thus, the light source 3,000 K LED is a potential substitute for the 6,500 K fluorescent lamps and LEDs used in growth rooms in in vitro culture laboratories.(AU)

A luz é um dos fatores que influenciam a germinação e o estabelecimento inicial no cultivo in vitro de orquídeas. Assim, objetivou-se avaliar o efeito de diferentes fontes de luz na germinação e no estabelecimento inicial in vitro de Schomburgkia crispa Lindl. Após semeadura em ambiente asséptico, as culturas foram acondicionadas em viveiro telado (luz natural) ou em sala de crescimento nas seguintes fontes luminosas: LEDs amarelo 3.000 K, branco 6.500 K [1], branco 6.500 K [2] ou lâmpada fluorescente branca 6.500 K (controle). Aos 45 e 90 dias após a semeadura foi avaliada a porcentagem de germinação e o estabelecimento inicial dos propágulos. A luz não influenciou a germinação das sementes de S. crispa, mas a utilização do LED 3.000 K proporcionou estabelecimento inicial de S. crispa em menor período e com menor mortalidade das plântulas, quando comparado com as demais fontes de luz utilizadas. A fonte de luz LED 3.000 K pode ser indicada como um substituto potencial para as lâmpadas fluorescentes e LEDs 6.500 K, utilizadas em salas de crescimento em laboratórios de cultivo in vitro.(AU)

Bokashi, simple superphosphate, and fertigation for the growth and nutrition of hybrid Cattleya (Orchidaceae) / Bokashi, superfosfato simples e fertirrigação no crescimento e nutrição de Cattleya híbrida (Orchidaceae)

Potted flower production is an important floricultural activity. However, there have been few studies on the fertilization management of orchids. Fertigation with urea and potassium chloride is feasible, but little information is available regarding the interaction of these fertilizers with other sources of nutrients. Thus, the present study evaluated the effects of application of bokashi and a simple superphosphate and their interactions with fertigation on the growth and nutrition of hybrid Cattleya. Seedlings of Laeliocattleya Drumbeat × Laeliocattleya Gold Digger hybrid were submitted to two ferti-irrigation levels (absent and present) using urea and potassium chloride as nitrogen and potassium sources, respectively. As complementary fertilization, bokashi and superphosphate were applied singly and in combination. A commercial fertilizer (Peters®) was used as an additional control. Fertigation increased plant height; leaf area; number, length, and diameter of pseudobulbs; dry mass of leaves, pseudobulbs, and roots; and content of chlorophyll, carotenoid, and nitrogen. The application of bokashi resulted in dry mass gain in all plant organs. The combination of fertigation and bokashi was superior to the commercial fertilizer in terms of increased leaf area, chlorophyll A content, carotenoid content, and dry mass.

A produção de flores em vaso é uma importante atividade da floricultura. Todavia, são escassos os estudos sobre o manejo da fertilização em orquídeas. A fertirrigação com ureia e cloreto de potássio é uma prática comum; porém, pouco se sabe sobre suas interações com outras fontes de nutrientes. Nesse sentido, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito do bokashi e do superfosfato simples e suas interações com a fertirrigação no crescimento e nutrição de um híbrido de Cattleya. Mudas do híbrido entre Laeliocattleya Drumbeat × Laeliocattleya Gold Digger foram submetidas à dois regimes de fertirrigação (ausência e presente) utilizando ureia e cloreto de potássio como fonte de nitrogênio (N) e potássio (K), respectivamente. Além disso, como fertilização complementar foi utilizado o bokashie superfosfato, aplicados isolados e em combinação. O fertilizante comercial Peters® foi utilizado como testemunha adicional. A fertirrigação propiciou incrementos na altura, área foliar, número, comprimento e diâmetro dos pseudobulbos, bem como na massa seca de folhas, pseudobulbos e raízes, além de aumento nos teores de clorofila, carotenoides e teor de N. O uso do bokashi resultou em ganhos na massa seca em todos os órgãos da planta. A utilização combinada entre a fertirrigação e bokashi foi superior ao fertilizante comercial para as características área foliar, teor de clorofila A, carotenoides, além das características de massa seca.

Bokashi, simple superphosphate, and fertigation for the growth and nutrition of hybrid Cattleya (Orchidaceae) / Bokashi, superfosfato simples e fertirrigação no crescimento e nutrição de Cattleya híbrida (Orchidaceae)

Potted flower production is an important floricultural activity. However, there have been few studies on the fertilization management of orchids. Fertigation with urea and potassium chloride is feasible, but little information is available regarding the interaction of these fertilizers with other sources of nutrients. Thus, the present study evaluated the effects of application of bokashi and a simple superphosphate and their interactions with fertigation on the growth and nutrition of hybrid Cattleya. Seedlings of Laeliocattleya Drumbeat × Laeliocattleya Gold Digger hybrid were submitted to two ferti-irrigation levels (absent and present) using urea and potassium chloride as nitrogen and potassium sources, respectively. As complementary fertilization, bokashi and superphosphate were applied singly and in combination. A commercial fertilizer (Peters®) was used as an additional control. Fertigation increased plant height; leaf area; number, length, and diameter of pseudobulbs; dry mass of leaves, pseudobulbs, and roots; and content of chlorophyll, carotenoid, and nitrogen. The application of bokashi resulted in dry mass gain in all plant organs. The combination of fertigation and bokashi was superior to the commercial fertilizer in terms of increased leaf area, chlorophyll A content, carotenoid content, and dry mass.(AU)

A produção de flores em vaso é uma importante atividade da floricultura. Todavia, são escassos os estudos sobre o manejo da fertilização em orquídeas. A fertirrigação com ureia e cloreto de potássio é uma prática comum; porém, pouco se sabe sobre suas interações com outras fontes de nutrientes. Nesse sentido, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito do bokashi e do superfosfato simples e suas interações com a fertirrigação no crescimento e nutrição de um híbrido de Cattleya. Mudas do híbrido entre Laeliocattleya Drumbeat × Laeliocattleya Gold Digger foram submetidas à dois regimes de fertirrigação (ausência e presente) utilizando ureia e cloreto de potássio como fonte de nitrogênio (N) e potássio (K), respectivamente. Além disso, como fertilização complementar foi utilizado o bokashie superfosfato, aplicados isolados e em combinação. O fertilizante comercial Peters® foi utilizado como testemunha adicional. A fertirrigação propiciou incrementos na altura, área foliar, número, comprimento e diâmetro dos pseudobulbos, bem como na massa seca de folhas, pseudobulbos e raízes, além de aumento nos teores de clorofila, carotenoides e teor de N. O uso do bokashi resultou em ganhos na massa seca em todos os órgãos da planta. A utilização combinada entre a fertirrigação e bokashi foi superior ao fertilizante comercial para as características área foliar, teor de clorofila A, carotenoides, além das características de massa seca.(AU)

Degree of moisture in seeds for the cryopreservation of orchids native to Brazil / Grau de umidade para criopreservação de sementes de orquídeas nativas do Brasil

The objective of this study was to determine the ideal moisture degree for the cryopreservation of Cattleya labiata Lindl. and Miltonia regnellii Rchb.f. orchid seeds. Orchid seeds were standardized in relation to the desired moisture degrees (4, 6, 8, 10, 12, and 15%) and were subjected to rapid freezing in liquid nitrogen (-196 °C) for 24 h; then, the seeds were defrosted and analyzed. For both orchid species, the seeds that were immersed in liquid nitrogen with 4% moisture content had the highest viability percentage, averaging 95% and 68% of viable seeds for C. labiata and M. regnellii, respectively. The seeds with 12% and 15% moisture content had no viable seeds. For the fresh mass of seedlings, there was no significant difference between moisture content treatments for either species.(AU)

O objetivo deste trabalho foi determinar o grau de umidade ideal para criopreservação das sementes das orquídeas Cattleya labiata Lindl. e Miltonia regnelli Rchb.f.. As sementes das orquídeas foram padronizadas em relação aos graus de umidade desejados (4, 6, 8, 10, 12 e 15%) e submetidas ao congelamento rápido em nitrogênio líquido (-196 ºC) durante 24 horas; em seguida, descongeladas e analisadas. O maior percentual de viabilidade, tanto para as sementes de C. labiata quanto para M. regnelli, ocorreu quando as sementes foram imersas em nitrogênio líquido com 4% de umidade, atingindo 95 e 68% de sementes viáveis, respectivamente, sendo que, as sementes com 12 e 15% de umidade não apresentaram sementes viáveis. Em relação à massa fresca de plântula, não houve diferença entre os tratamentos (grau de umidade)para as espécies avaliadas.(AU)

Uso de ferramentas da bioinformática para determinação dos possíveis efeitos do beta-caroteno no cultivo in vitro de Phalaenopsis / Use of bioinformatics tools for determination of possible effects of beta-carotene in in vitro Phalaenopsis cultivation

Ornamentais demonstram interesse econômico, dentre elas o maior número de comercializações resulta de orquídeas do gênero Phalaenopsis. O cultivo in vitro tem como objetivo propagar um número elevado de plantas com qualidade fitossanitárias. A bioinformática, auxilia na busca por genomas semelhantes de organismos, cujas informações genéticas estejam armazenadas em bancos de dados. O objetivo do trabalho foi determinar os efeitos do β-caroteno no desenvolvimento da Phalaenopsis cultivada in vitro, e determinar o meio de cultura adequado para germinação e desenvolvimento da Phalaenopsis, analisando o gene e a proteína do β-caroteno da Daucus carota. Foram testados três tratamentos para germinação de sementes de Phalaenopsis híbrida, um meio de cultura Knudson, meio de cultura Murashige Skoog (MS) e o meio de cultura Knudson com incremento de 10% (v/v) de suco de cenoura. Seguido de um teste para o cultivo das plântulas de Phalaenopsis híbrida em quatro tratamentos, o meio de cultura Knudson, o meio Murashige e Skoog, meio Knudson com incremento de reguladores de crescimento (BAP/ANA) e o meio Knudson suplementado com suco de cenoura em 10% (v/v). Os resultados demonstram que o suco de cenoura é benéfico para a germinação e desenvolvimento de orquídeas do gênero Phalaenopsis. Através da análise de bioinformática com uso do CLUSTAL e do BLAST, obteve-se informações sobre o gene e a proteína do β-caroteno da Daucus carota e verificou-se que, um substituto para a cenoura na elaboração dos meios de cultura é a Citrus sinensis. A Citrus sinensis é uma fonte abundante de ácido cítrico, que auxilia na redução de oxidação em plantas cultivadas in vitro...

Ornamental plants show economic interest, among the greatest number of commercializations results from orchids of the genus Phalaenopsis. In vitro cultivation aims to propagate a high number of plants with phytosanitary quality. Bioinformatics, helps in the search for similar genomes of organisms, whose genetic information is stored in database. The objective of the work was to determine the effects of β-carotene on the development of Phalaenopsis grown in vitro, and to determine the appropriate culture médium for germination and development of Phalaenopsis, analyzing the gene and protein of Daucus carota β-carotene. Three treatments for germination of hybrid Phalaenopsis seeds were tested, a Knudson culture médium, Murashige and Skoog (MS) and Knudson with a 10% (v/v) incremente of carrot juice. Followed by test for the cultivation of hybrid Phalaenopsis seedlings in four treatments, the Knudson culture médium, MS, Knudson whit increased growth regulators (BAP/ANA) and Knudson médium supplemented with carrot juice 10% (v/v). The results demonstrate that carrot juice is beneficial for the germination and development of orchids of the genus Phalaenopsis. Through bioinformatics analysis using CLUSTAL and BLAST, information was obtained on the Daucus carota β-carotene gene and protein and it was found that a substitute for carrots in the preparation of culture médium is Citrus sinensis. Citrus sinensis is na abundant source of citric acid, which helps to reduce oxidation in plants grown in vitro. It is concluded that the médium suitable for the cultivation of Phalaenopsisis the médium supplemented whith carrot juice and that it is possibly the β-carotene presente in the carrot, which is responsible for the benefits in the seedling development.

Uso de ferramentas da bioinformática para determinação dos possíveis efeitos do beta-caroteno no cultivo in vitro de Phalaenopsis / Use of bioinformatics tools for determination of possible effects of beta-carotene in in vitro Phalaenopsis cultivation

Ornamentais demonstram interesse econômico, dentre elas o maior número de comercializações resulta de orquídeas do gênero Phalaenopsis. O cultivo in vitro tem como objetivo propagar um número elevado de plantas com qualidade fitossanitárias. A bioinformática, auxilia na busca por genomas semelhantes de organismos, cujas informações genéticas estejam armazenadas em bancos de dados. O objetivo do trabalho foi determinar os efeitos do β-caroteno no desenvolvimento da Phalaenopsis cultivada in vitro, e determinar o meio de cultura adequado para germinação e desenvolvimento da Phalaenopsis, analisando o gene e a proteína do β-caroteno da Daucus carota. Foram testados três tratamentos para germinação de sementes de Phalaenopsis híbrida, um meio de cultura Knudson, meio de cultura Murashige Skoog (MS) e o meio de cultura Knudson com incremento de 10% (v/v) de suco de cenoura. Seguido de um teste para o cultivo das plântulas de Phalaenopsis híbrida em quatro tratamentos, o meio de cultura Knudson, o meio Murashige e Skoog, meio Knudson com incremento de reguladores de crescimento (BAP/ANA) e o meio Knudson suplementado com suco de cenoura em 10% (v/v). Os resultados demonstram que o suco de cenoura é benéfico para a germinação e desenvolvimento de orquídeas do gênero Phalaenopsis. Através da análise de bioinformática com uso do CLUSTAL e do BLAST, obteve-se informações sobre o gene e a proteína do β-caroteno da Daucus carota e verificou-se que, um substituto para a cenoura na elaboração dos meios de cultura é a Citrus sinensis. A Citrus sinensis é uma fonte abundante de ácido cítrico, que auxilia na redução de oxidação em plantas cultivadas in vitro...(AU)

Ornamental plants show economic interest, among the greatest number of commercializations results from orchids of the genus Phalaenopsis. In vitro cultivation aims to propagate a high number of plants with phytosanitary quality. Bioinformatics, helps in the search for similar genomes of organisms, whose genetic information is stored in database. The objective of the work was to determine the effects of β-carotene on the development of Phalaenopsis grown in vitro, and to determine the appropriate culture médium for germination and development of Phalaenopsis, analyzing the gene and protein of Daucus carota β-carotene. Three treatments for germination of hybrid Phalaenopsis seeds were tested, a Knudson culture médium, Murashige and Skoog (MS) and Knudson with a 10% (v/v) incremente of carrot juice. Followed by test for the cultivation of hybrid Phalaenopsis seedlings in four treatments, the Knudson culture médium, MS, Knudson whit increased growth regulators (BAP/ANA) and Knudson médium supplemented with carrot juice 10% (v/v). The results demonstrate that carrot juice is beneficial for the germination and development of orchids of the genus Phalaenopsis. Through bioinformatics analysis using CLUSTAL and BLAST, information was obtained on the Daucus carota β-carotene gene and protein and it was found that a substitute for carrots in the preparation of culture médium is Citrus sinensis. Citrus sinensis is na abundant source of citric acid, which helps to reduce oxidation in plants grown in vitro. It is concluded that the médium suitable for the cultivation of Phalaenopsisis the médium supplemented whith carrot juice and that it is possibly the β-carotene presente in the carrot, which is responsible for the benefits in the seedling development.(AU)

Substrates for the cultivation of epiphytic orchids / Substratos para o cultivo de orquídeas epífitas

Orchids are among the most commercialized flowers in the market of potted plants, cut flowers, and landscaping, making necessary studies that allow the optimization of its cultivation. One of the most important aspects for success in production areas is the use of quality seedlings, which requires the use of an appropriate substrate with appropriate physical, chemical, and biological properties to the species. Thus, this review aimed to report the importance and diversity of substrates used for producing epiphytic orchids. Several substrates have been studied for the cultivation of epiphytic orchids, among which can be cited coconut fiber and powder, pine bark, coffee husk, carbonized rice husk, almond bark, sugarcane bagasse, charcoal, vermiculite, S-10 Beifort®, among others, which provided satisfactory results in the production of seedlings and development of orchid plants. Studies with the substrates are directed to the ecologically correct cultivation and the rational use of agroindustrial residues available in each region in order to reduce their volume in the environment, in addition to allowing the adequacy in production costs.(AU)

As orquídeas estão entre as flores mais comercializadas no mercado de planta de vaso, flor de corte e paisagismo, tornando-se necessários estudos que permitam a otimização do seu cultivo. Um dos aspectos primordiais para o sucesso nas áreas de produção é a utilização de mudas de qualidade, que por sua vez, demanda o uso do substrato adequado, com propriedades físicas, químicas e biológicas adequadas à espécie em questão. Assim, essa revisão objetivou reportar a importância e a diversidade dos substratos utilizados para a produção de orquídeas epífitas. Vários substratos vêm sendo estudados no cultivo de orquídeas epífitas, entre os quais podem ser citados a fibra e o pó de coco, a casca de pinus, a casca de café, a casca de arroz carbonizada, a casca de amendoeira, o bagaço de cana-de-açúcar, o carvão vegetal, a vermiculita, o S-10 Beifort®, entre outros, os quais propiciaram resultados satisfatórios na produção de mudas bem como no desenvolvimento das plantas de orquídeas. Os estudos com os substratos estão voltados ao cultivo ecologicamente correto e ao aproveitamento racional de resíduos da agroindústria disponíveis em cada região, de modo a reduzir o volume desses materiais no meio ambiente, além de possibilitar a adequação nos custos de produção.(AU)

Bioprospecting and selection of growth-promoting bacteria for Cymbidium sp. orchids

Inoculants containing bacteria which promote growth in plants can increase productivity and both the economic and the environmental cost in plant crop systems. Similarly, in the flower and ornamental plant sector, the use of diazotrophic bacteria is a promising approach for improving orchid propagation from tissue culture to the ex vitro environment. We isolated diazotrophic bacteria from the roots and leaves of Cymbidium sp. The isolates were used to inoculate Cymbidium sp. plantlets during acclimatization in the nursery. After 150 days, plants were collected and their morphological and nutritional characteristics assessed. Eight bacterial strains were isolated containing traits that promote plant growth: Bacillus thuringiensis, Burkholderia cepacia, Burkholderia gladioli, Herbaspirillum frisingense, Pseudomonas stutzeri, Rhizobium cellulosilyticum, Rhizobium radiobacter, and Stenotrophomonas maltophilia. The isolated Herbaspirillum frisingense and Stenotrophomonas maltophilia increased 26 % and 29 % in dry matter in Cymbidium sp. plants, respectively, compared to the control. In addition, H. frisingense led to higher contents of N and P, by 68 % and 28 %, respectively, than those found in the control plants. These isolates, therefore, have potential for application as biostimulants and biofertilizers to promote growth and development of Cymbidium sp. during acclimatization.

Bioprospecting and selection of growth-promoting bacteria for Cymbidium sp. orchids

Inoculants containing bacteria which promote growth in plants can increase productivity and both the economic and the environmental cost in plant crop systems. Similarly, in the flower and ornamental plant sector, the use of diazotrophic bacteria is a promising approach for improving orchid propagation from tissue culture to the ex vitro environment. We isolated diazotrophic bacteria from the roots and leaves of Cymbidium sp. The isolates were used to inoculate Cymbidium sp. plantlets during acclimatization in the nursery. After 150 days, plants were collected and their morphological and nutritional characteristics assessed. Eight bacterial strains were isolated containing traits that promote plant growth: Bacillus thuringiensis, Burkholderia cepacia, Burkholderia gladioli, Herbaspirillum frisingense, Pseudomonas stutzeri, Rhizobium cellulosilyticum, Rhizobium radiobacter, and Stenotrophomonas maltophilia. The isolated Herbaspirillum frisingense and Stenotrophomonas maltophilia increased 26 % and 29 % in dry matter in Cymbidium sp. plants, respectively, compared to the control. In addition, H. frisingense led to higher contents of N and P, by 68 % and 28 %, respectively, than those found in the control plants. These isolates, therefore, have potential for application as biostimulants and biofertilizers to promote growth and development of Cymbidium sp. during acclimatization.(AU)

Dynamics in global DNA methylation and endogenous polyamine levels during protocorm-like bodies induction of Cattleya tigrina A. Richard / Dinâmica da metilação do DNA global e níveis endógenos de poliaminas durante a induçãode estruturas semelhantes a protocormos de Cattleya tigrina A. Richard

Cattleya tigrina is endemic to the Atlantic forest biome and classified as vulnerable in the Red Book of Brazilian Flora. In vitro techniques comprise valuable tools for the conservation of endangered plant species. The aim of the present study was to evaluate the morphological features, global DNA methylation levels and free polyamines during protocorm-like bodies (PLBs) induction of C. tigrina. Along with that, an efficient protocol for in vitro propagation of this species is proposed. The first evidences of PLBs induction in C. tigrina occurred at seven days in culture, starting from the basal portion of the leaf abaxial surface. A hypomethylation marked the beginning of cell differentiation, followed by an increased global DNA methylation at 35 days in culture, coinciding with a subtle change in the structures morphogenetic development. During PLBs induction, putrescine exhibited higher levels as compared to spermidine and spermine, and apparently presents a major role during the PLBs induction in C. tigrina. Due to the apparent secondary PLBs formation, this protocol can represent a highly efficient method for in vitro propagation of this species.(AU)

Cattleya tigrina é uma espécie endêmica do bioma Mata Atlântica e classificada como vulnerávelno Livro Vermelho da Flora Brasileira. As técnicas in vitro compreendem ferramentas valiosas a seremempregadas na conservação de espécies de plantas ameaçadas. O objetivo do presente estudo foi avaliar ascaracterísticas morfológicas, os níveis globais de metilação do DNA e as poliaminas livres durante a induçãode estruturas semelhantes a protocormos (ESPs). Paralelamente, um protocolo eficiente para a propagaçãoin vitro desta espécie é apresentado. As primeiras evidências de indução de ESPs em C. tigrina foramobservadas aos sete dias de cultivo, a partir da porção basal da superfície abaxial da folha. Umahipometilação foi observada concomitante ao início da diferenciação celular, e um aumento da metilaçãoglobal do DNA foi encontrada aos 35 dias de cultivo, coincidindo com uma sutil mudança nodesenvolvimento morfogenético das estruturas. Durante a indução de ESPs, a putrescina exibiu níveisaumentados em comparação a espermidina e espermina e, aparentemente, apresenta um papel importantedurante a indução dessas estruturas em C. tigrina. Devido à aparente formação secundária de ESPs, esteprotocolo pode representar um método altamente eficiente para a propagação in vitro desta espécie.(AU)

Anatomy and micromorphometric analysis of leaf Catasetum x apolloi Benelli & Grade with addition of potassium silicate under different light sources / Anatomia e análise micromorfométrica foliar de Catasetum x apolloi Benelli & Grade com adição de silicato de potássio em diferentes fontes de luz

The aim of this study was to compare vitroplants Catasetum x apolloi grown under natural light and artificial light and different concentrations of potassium silicate, providing data on the anatomical differentiation that aids the acclimatization process of this species. Plants from in vitro seeding were used; 5 protocorms of approximately 0.5 cm were inoculated into vials with a capacity of 500 mL containing 100 mL of alternative culture medium plus potassium silicate (0.0, 0.5; 1.0 mL L–1), pH adjusted to 5.5 ± 0.5 and gelated with 4GL–1 agar before the autoclaving process. Cultures were maintained under natural light (TNE) and artificial light (TAE) for 90 days, and micromorphometric analysis was performed for polar and equatorial diameter, density and stomatal index, blade thickness in the central rib, and secondary veins. Applications in K2SiO4 alternative medium provided the following: elongation of the hypodermis, thicker mesophyll, and more prominent midrib; elipptical guard cells; formation of epistomatal chamber; and lower stomatal density and stomatal with lower equatorial and polar diameters. The conditions that favored the acclimatization were lower light intensities and lower potassium silicate doses.(AU)

O objetivo desse trabalho foi comparar vitroplantas de Catasetum x apolloi cultivadas sob luz natural e luz artificial e diferentes concentrações de silicato de potássio, fornecendo dados sobre diferenciação anatômica que auxiliem no processo de aclimatação dessa espécie. Utilizou-se plantas provenientes da semeadura in vitro, 5 protocormos de aproximadamente 0,5 cm foram inoculados em frascos com capacidade para 500 mL contendo 100 mL de meio de cultura alternativo, acrescido de silicato de potássio (0,0; 0,5; 1,0 mL L–1), pH ajustado para 5,5 ±0,5 e gelificado com 4gL–1 de ágar antes do processo de autoclavagem. As culturas foram mantidas sob luz natural (TAA) e luz artificial (TAN) por 90 dias, e feitas análises micromorfométricas (diâmetro polar e equatorial, densidade e índice estomático, espessura do limbo na nervura central e nervuras secundárias). As aplicações de K2SiO4 em meio alternativo, propiciaram: alongamento da hipoderme; mesofilo mais espesso e nervura central mais proeminente; células guardas elípticas; formação de câmaras supraestomáticas; menor densidade estomática e estômatos com menores diâmetros equatorial e polar. As condições que podem favorecer a aclimatação são menores intensidades de luz e menores doses de silicato de potássio.(AU)

Oncidiinae (Orchidaceae) on the great curve of the Xingu River, Pará state, Brazil

Abstract Among the studies on Orchidaceae in the Amazon, none comprised the region of the Great Curve of the Xingu River, located in the lower Xingu river. The aim of this study was to inventory and taxonomically study the species of Oncidiinae (Orchidaceae) in the Great Curve of the Xingu River, Pará state. The floristic survey was performed in the area of the Belo Monte hydroelectric plant, in the Vitória do Xingu municipality, centrally inserted in the called Great Curve of the Xingu River. Botanical collections were accomplished between June 2011 and December 2013. A total of 27 species of Oncidiinae, distributed in 15 genera, was inventoried in the study area. Notylia Lindl. and Trichocentrum Poepp. & Endl. were the richest genera, with five and four species, respectively, followed by Erycina Lindl., Ionopsis Kunth, Lockhartia Hook., Macradenia R.Br., and Ornithocephalus Hook., with two species each. The remaining eight genera are represented by a single species each in the study area. Morphological descriptions, a key for taxonomic identification, illustrations, and comments on distribution, ecology, phenology and morphology are provided for all inventoried species.

Resumo Entre os estudos com Orchidaceae na Amazônia, nenhum compreende a região da Volta Grande do rio Xingu, localizada no baixo Xingu. O objetivo deste estudo foi inventariar e estudar taxonomicamente as espécies de Oncidiinae (Orchidaceae) na Volta Grande do rio Xingu, estado do Pará, Brasil. O levantamento florístico foi realizado na área da Usina Hidrelétrica de Belo Monte, no município de Vitória do Xingu, inserido centralmente na chamada Volta Grande do Xingu. Foram realizadas coletas botânicas entre junho de 2011 e dezembro de 2013. Na área de estudo, foram inventariadas 27 espécies de Oncidiinae, distribuídas em 15 gêneros. Notylia Lindl. e Trichocentrum Poepp. & Endl. foram os mais ricos, com cinco e quatro espécies respectivamente, seguidos por Erycina Lindl., Ionopsis Kunth, Lockhartia Hook., Macradenia R.Br., e Ornithocephalus Hook., com duas espécies cada. Os oito gêneros restantes estão representados na área de estudo por uma única espécie. São fornecidas descrições morfológicas, chave taxonômica para identificação, ilustrações e comentários sobre distribuição, ecologia, fenologia e morfologia para todas as espécies inventariadas.

Oncidiinae (Orchidaceae) on the great curve of the Xingu River, Pará state, Brazil / Oncidiinae (Orchidaceae) na volta grande do Rio Xingu, Pará, Brasil

Among the studies on Orchidaceae in the Amazon, none comprised the region of the Great Curve of the Xingu River, located in the lower Xingu river. The aim of this study was to inventory and taxonomically study the species of Oncidiinae (Orchidaceae) in the Great Curve of the Xingu River, Pará state. The floristic survey was performed in the area of the Belo Monte hydroelectric plant, in the Vitória do Xingu municipality, centrally inserted in the called Great Curve of the Xingu River. Botanical collections were accomplished between June 2011 and December 2013. A total of 27 species of Oncidiinae, distributed in 15 genera, was inventoried in the study area. Notylia Lindl. and Trichocentrum Poepp. & Endl. were the richest genera, with five and four species, respectively, followed by Erycina Lindl., Ionopsis Kunth, Lockhartia Hook., Macradenia R.Br., and Ornithocephalus Hook., with two species each. The remaining eight genera are represented by a single species each in the study area. Morphological descriptions, a key for taxonomic identification, illustrations, and comments on distribution, ecology, phenology and morphology are provided for all inventoried species.

Entre os estudos com Orchidaceae na Amazônia, nenhum compreende a região da Volta Grande do rio Xingu, localizada no baixo Xingu. O objetivo deste estudo foi inventariar e estudar taxonomicamente as espécies de Oncidiinae (Orchidaceae) na Volta Grande do rio Xingu, estado do Pará, Brasil. O levantamento florístico foi realizado na área da Usina Hidrelétrica de Belo Monte, no município de Vitória do Xingu, inserido centralmente na chamada Volta Grande do Xingu. Foram realizadas coletas botânicas entre junho de 2011 e dezembro de 2013. Na área de estudo, foram inventariadas 27 espécies de Oncidiinae, distribuídas em 15 gêneros. Notylia Lindl. e Trichocentrum Poepp. & Endl. foram os mais ricos, com cinco e quatro espécies respectivamente, seguidos por Erycina Lindl., Ionopsis Kunth, Lockhartia Hook., Macradenia R.Br., e Ornithocephalus Hook., com duas espécies cada. Os oito gêneros restantes estão representados na área de estudo por uma única espécie. São fornecidas descrições morfológicas, chave taxonômica para identificação, ilustrações e comentários sobre distribuição, ecologia, fenologia e morfologia para todas as espécies inventariadas.

Teste de deterioração controlada em sementes de quatro espécies de orquídeas para avaliação do comportamento fisiológico / Controlled deterioration test in seeds of four orchids’ species to evaluate the physiological behavior

Uma alternativa para conservação de espécies é um banco de sementes, onde é possível conservar e propagar estas plantas, porém para isto é necessário se ter uma noção da qualidade das sementes estocadas. Uma alternativa é utilizar testes de vigor, entre eles a deterioração controlada. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da deterioração controlada sobre sementes de orquídeas e determinar qual o tempo de exposição destas a este tipo de tratamento. Sementes de Cattleya schilleriana, C. tigrina, C. crispata e C. labiata foram submetidas à deterioração de zero a 48h a 43°C. Para sementes de C. crispata não foi encontrado um período adequado para o teste de deterioração controlada. Recomenda-se para as sementes de C. tigrina, C. labiata e C. schilleriana a utilização de 27 h a 43°C, todavia variáveis como o tempo e a temperatura ainda precisam ser melhores estabelecidos para este grupo de plantas. O teste de tetrazólio não foi eficiente para avaliar a qualidade das sementes após a deterioração controlada.

An alternative for conservation of this species is seed banking, based in that is possible to make conservation and propagations of the endangered species. But for this the seed quality must be monitored. Vigour tests can offer an option, and one of this is the controlled deterioration, which expose the seeds with high moisture to high temperatures during a determined period of time. The present work aimed to evaluate the controlled deterioration test over four orchid species in different times. Seeds of C. schilleriana, C. tigrina, C. crispata and C. labiata was submitted to deterioration from times ranging from zero to 48h at 43°C. For Cattleya crispata it was not found a effective time for the test. did not suffer any deterioration at any time. It is recommended for C. tigrina, C. labiata and C. schilleriana the use of 27 h at 43°C. However, time and temperature should be better studied for this group of plants. Tetrazolium test was not efficient to evaluate the seed quality after controlled deterioration.