Gonadal characterization of the Amazonian fish Serrapinnus kriegi (Characidae: Cheirodontinae) / Caracterização gonadal do peixe Amazônico Serrapinnus kriegi (Characidae: Cheirodontinae)

Abstract The knowledge of the testicular and ovarian morphology of a particular fish species is of paramount importance. Such analyze enables the development of studies and techniques aiming the improvement of their reproduction, management, commercialization and even their conservation. This study performed the ovarian and testicular characterization of the ornamental Amazon fish Serrapinnus kriegi. A total of three males and three females had their gonads analyzed by optical microscopy. Females present ovaries filled with oocytes in asynchronous development, indicating partial spawning in the species. Moreover, the micropyle and micropilar cell formation was observed in primary growing oocytes, representing a precocious oocyte development; and the zona radiata in the final vitellogenic oocytes is thicker than other related species, evidencing the development of a better protection to the embryos in function of the waters' turbulence that characterize it spawning sites in the Amazonian streams. The male specimens' present anastomosed tubular testes with unrestricted spermatogonia spread along the entire seminiferous tubules. The present data elucidate the dynamic of spermatogenesis and oogenesis of an ornamental Amazonian species, through the description of the male and female germ cells development.

Resumo O conhecimento da morfologia testicular e ovariana de uma determinada espécie de peixe é de suma importância, pois através destas análises é possível o desenvolvimento de estudos e técnicas visando o melhoramento de sua reprodução, manejo e comercialização e até mesmo auxiliar em sua conservação. Este estudo realizou a caracterização ovariana e testicular do peixe Amazônico ornamental Serrapinnus kriegi. Um total de três machos e três fêmeas tiveram suas gônadas analisadas através de microscopia óptica. As fêmeas apresentam ovários preenchidos por oócitos em desenvolvimento assincrônico, indicando desova parcelada da espécie. Além disso, observou-se a formação de micrópila e célula micropilar em oócitos em crescimento primário, representando o desenvolvimento precoce do oócito; a zona radiata nos oócitos vitelogênicos finais é mais espessa em comparação a outras espécies relacionadas, evidenciando o desenvolvimento de uma melhor proteção aos embriões, em função das águas turbulentas que caracterizam seu local de desova nos córregos amazônicos. Os machos apresentam testículos do tipo tubular anastomosado com espermatogônias irrestritas, espalhadas por todo o túbulo seminífero. Os dados apresentados elucidam a dinâmica da espermatogênese e oogênese de uma espécie de peixe ornamental amazônica, por meio da descrição das células germinativas masculinas e femininas.

Lipopolysaccharide effects on activation and apoptosis of primordial ovarian follicles in heifers / Efeitos de lipopolissacarídeos na ativação e apoptose de folículos ovarianos primordiais em novilhas

The objective of the present study was to evaluate the effect of lipopolysaccharide (LPS) administration on activation and apoptosis of primordial follicles. There was no difference in the total number of follicles as well as in the different types of follicles. Furthermore, the LPS challenge didn't modulate the expression of genes related with ovarian reserve (HAM), oocyte survival (Survivin), activation rate (Pten, KIT, KITL1, KITL2, AKT1, SIRT1), and follicular abnormalities. Therefore, the LPS exposure with 24h interval had no effect on activation rate and primordial follicles abnormalities, and also had no effect on expression of anti-apoptotic genes and genes related with ovarian reserve, oocyte survival, activation rate, and primordial follicles abnormalities.

O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da administração de lipopolissacarídeo (LPS) na ativação e a apoptose de folículos primordiais. Dez novilhas saudáveis (Bos taurus taurus), com idade média de 14 meses, alojadas em sistema de confinamento e alimentadas com TMR, foram utilizadas neste experimento. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos: grupo LPS (LPS; n = 5), que recebeu duas injeções intravenosas de 0,5µg/kg de peso corporal de lipopolissacarídeo (Sigma Aldrich®) diluído em 2mL de solução salina (0,9% de NaCl), com intervalo de 24h; e grupo controle (CTR; n = 5), que recebeu duas injeções intravenosas de 2mL de solução salina (0,9% de NaCl), com intervalo de 24h. A primeira injeção de LPS foi realizada no d 1, e no d 5 os animais foram abatidos, os ovários foram pesados e as amostras dos ovários foram coletadas para avaliação histológica e molecular. Não houve diferença no número total de folículos, bem como nos diferentes tipos de folículos. Além disso, o desafio com LPS não modulou a expressão de genes relacionados à reserva ovariana (HAM), à sobrevivência oocitária (Survivin), à taxa de ativação (Pten, KIT, KITL1, KITL2, AKT1, SIRT1) e às anormalidades foliculares. Portanto, a exposição ao LPS com intervalo de 24h não teve efeito sobre a taxa de ativação e as anormalidades dos folículos primordiais, bem como não teve efeito sobre a expressão de genes antiapoptóticos e de genes relacionados com a reserva ovariana, a sobrevivência oocitária, a taxa de ativação e as anormalidades dos folículos primordiais.

Gonadal characterization of the Amazonian fish Serrapinnus kriegi (Characidae: Cheirodontinae)

Abstract The knowledge of the testicular and ovarian morphology of a particular fish species is of paramount importance. Such analyze enables the development of studies and techniques aiming the improvement of their reproduction, management, commercialization and even their conservation. This study performed the ovarian and testicular characterization of the ornamental Amazon fish Serrapinnus kriegi. A total of three males and three females had their gonads analyzed by optical microscopy. Females present ovaries filled with oocytes in asynchronous development, indicating partial spawning in the species. Moreover, the micropyle and micropilar cell formation was observed in primary growing oocytes, representing a precocious oocyte development; and the zona radiata in the final vitellogenic oocytes is thicker than other related species, evidencing the development of a better protection to the embryos in function of the waters turbulence that characterize it spawning sites in the Amazonian streams. The male specimens present anastomosed tubular testes with unrestricted spermatogonia spread along the entire seminiferous tubules. The present data elucidate the dynamic of spermatogenesis and oogenesis of an ornamental Amazonian species, through the description of the male and female germ cells development.

Resumo O conhecimento da morfologia testicular e ovariana de uma determinada espécie de peixe é de suma importância, pois através destas análises é possível o desenvolvimento de estudos e técnicas visando o melhoramento de sua reprodução, manejo e comercialização e até mesmo auxiliar em sua conservação. Este estudo realizou a caracterização ovariana e testicular do peixe Amazônico ornamental Serrapinnus kriegi. Um total de três machos e três fêmeas tiveram suas gônadas analisadas através de microscopia óptica. As fêmeas apresentam ovários preenchidos por oócitos em desenvolvimento assincrônico, indicando desova parcelada da espécie. Além disso, observou-se a formação de micrópila e célula micropilar em oócitos em crescimento primário, representando o desenvolvimento precoce do oócito; a zona radiata nos oócitos vitelogênicos finais é mais espessa em comparação a outras espécies relacionadas, evidenciando o desenvolvimento de uma melhor proteção aos embriões, em função das águas turbulentas que caracterizam seu local de desova nos córregos amazônicos. Os machos apresentam testículos do tipo tubular anastomosado com espermatogônias irrestritas, espalhadas por todo o túbulo seminífero. Os dados apresentados elucidam a dinâmica da espermatogênese e oogênese de uma espécie de peixe ornamental amazônica, por meio da descrição das células germinativas masculinas e femininas.

Assessment of thermal response, cardiorespiratory parameters and post-operative analgesia in dogs undergoing ovariohysterectomy with different combinations of epidural analgesia and isoflurane

This study aimed to evaluate the thermal response of the eyelids and lacrimal gland of the left eye (LETG) through infrared thermography (IRT), cardiorespiratory parameters, and their association with nociception and pain in bitches undergoing elective ovariohysterectomy (OVH) anesthetized with isoflurane and epidural analgesia. Twenty-one healthy bitches of different breeds were randomized into three groups receiving epidural blocks: GL (n=7), lidocaine (2 mg Kg-1 ); GLF (n=7), lidocaine (2 mg Kg-1 ) and fentanyl (3 µg Kg-1 ); and GLM (n=7), lidocaine (2 mg Kg-1 ) with morphine (0.1 mg Kg-1 ). IRT and cardiorespiratory parameters were evaluated at baseline (Ebasal), thirty minutes before anesthetic premedication, and at different surgical events: first incision (EInc), ligature and section of the left (ELoV), and right (ERoV) ovarian pedicle, ligature, and re-section of the cervix (EUt), and skin suture (ESut). The assessment of acute pain in the immediate post-operative period was registered at E1h, E2h, and E3h using IRT, the Dynamic Interactive Visual Analogic Scale (DIVAS), and the University of Melbourne Pain Scale (UMPS) scales. The results showed a statistically significant decrease in the lower eyelid surface temperature (LELT) during EInc for GL (32.9°C ± 0.62), in comparison to GLF (34.2°C ± 0.62) and GLM (35.3°C ± 0.62) (P = 0.006). Regarding LETG, a significant increase (P = 0.03) in the IRT of Ebasal (36.8°C ± 0.63) and EInc (36.1°C ± 0.63) for GLM was observed in comparison to the thermographic values for both perioperative events and groups. The GLM showed a significant decrease in IRT values of ERoV at E3h in the upper and lower eyelids (P = 0.03 and P = 0.01, respectively). A progressive and significant reduction of the IRT values of LETG was also recorded in GLM, with differences in ERoV (35.2 °C ± 0.63) (P = 0.02) and E3h (35.3 °C ± 0.63) (P = 0.01). The cardiovascular parameters (SAP, DAP, and MAP) did not differ between treatments, but in GL, there was a significant difference (P = 0.01) during EInc and ESut, compared to Ebasal. In the body temperature, EInc and ESut gradually decreased in all treatment groups (P = 0.01). In conclusion, hemodynamic and cardiorespiratory stability was associated with IRT readings and the absence of nociception. Changes in superficial temperature in the immediate post-operative period were lessened using isoflurane and epidural analgesia of lidocaine alone or in combination with pure opioids. These findings were clinically validated to the DIVAS and UMPS acute pain assessment scales.

Antral follicle count classification selects fertile heifers without influencing the carcass traits / A classificação da contagem folicular antral seleciona novilhas mais férteis sem influenciar as características da carcaça

This study aimed to evaluate the ovarian structure, estrus intensity, ultrasound carcass measurements, and pregnancy rate of Nelore breed heifers and cows in accordance with antral follicle counts (AFCs). We evaluated 503 heifers and 565 Nelore cows, with a mean age of 15.5±2.2 and 69.8±36.1 months, respectively, submitted to a fixed-time artificial insemination (FTAI) protocol. On day zero, all bovine females were examined using ultrasound to determine the AFC. The mean AFC of the heifers and cows were 20±8.6 and 22.5±8.4, respectively. The rib-eye area (REA) and fat thickness (FT) of the heifers (n = 119 for REA and n = 219 for FT) were measured using ultrasound imaging. The average conception rates at the first FTAI and at the end of the breeding season were 35.8% and 57.5%, respectively, for heifers and 45.1% and 78.9%, respectively, for cows. We demonstrated that the probability of pregnancy at the first FTAI and at the end of the breeding season for both young heifers and cows increased as the AFC decreased (P>0.001 and P=0.0123, respectively). FT and REA showed no correlation with AFC in heifers. The intensity of estrus expression was negatively correlated with AFC (−0.46; P<0.0001). In conclusion, Nelore heifers and cows with low AFC had a high probability of pregnancy during the entire breeding season. Thus, AFC can be used as a tool to select heifers with increased fertility without affecting carcass traits (REA and FT).

Este estudo teve como objetivo avaliar as estruturas ovarianas, intensidade do cio, medidas de carcaça por ultrassonografia e taxa de gestação de novilhas e vacas da raça Nelore com diferentes contagens de folículos antrais (CFA). Avaliamos 503 novilhas e 565 vacas Nelore, com idade média de 15,5 ± 2,2 e 69,8 ± 36,1 meses, respectivamente, submetidas a um protocolo de inseminação artificial em tempo fixo (IATF). No dia zero, todas as fêmeas foram examinadas por ultrassom para determinar a CFA. A CFA média das novilhas foi de 20 ± 8,6 e a das vacas foi de 22,5 ± 8,4 folículos. A área de olho de lombo (AOL) e a espessura de gordura (EG) das novilhas (n = 119 para AOL e n = 219 para EG) foram medidas utilizando imagens ultrassonográficas. As taxas médias de concepção na primeira IATF e no final da estação de monta foram de 35,8% e 57,5% e 45,1% e 78,9% para as novilhas e vacas, respectivamente. Demonstramos que a probabilidade de gestação na primeira IATF e no final da estação de monta, tanto para novilhas jovens quanto para vacas, foi maior quando a CFA era menor (P>0,001 e P=0,0123, respectivamente). A espessura da gordura e a AOL não mostraram nenhuma correlação com a CFA. A intensidade da expressão do cio foi negativamente correlacionada com o CFA (-0,46; P < 0,0001). Em conclusão, novilhas jovens e vacas da raça Nelore com menor CFA apresentam maior probabilidade de prenhez durante toda a estação de monta. Nenhuma relação entre a CFA e as características de carcaça foram observadas em novilhas Nelore. A CFA pode ser usada como uma ferramenta de seleção de novilhas com maior fertilidade sem influenciar as características de carcaça (AOL e EG).

Gonadal characterization of the Amazonian fish Serrapinnus kriegi (Characidae: Cheirodontinae) / Caracterização gonadal do peixe Amazônico Serrapinnus kriegi (Characidae: Cheirodontinae)

The knowledge of the testicular and ovarian morphology of a particular fish species is of paramount importance. Such analyze enables the development of studies and techniques aiming the improvement of their reproduction, management, commercialization and even their conservation. This study performed the ovarian and testicular characterization of the ornamental Amazon fish Serrapinnus kriegi. A total of three males and three females had their gonads analyzed by optical microscopy. Females present ovaries filled with oocytes in asynchronous development, indicating partial spawning in the species. Moreover, the micropyle and micropilar cell formation was observed in primary growing oocytes, representing a precocious oocyte development; and the zona radiata in the final vitellogenic oocytes is thicker than other related species, evidencing the development of a better protection to the embryos in function of the waters’ turbulence that characterize it spawning sites in the Amazonian streams. The male specimens’ present anastomosed tubular testes with unrestricted spermatogonia spread along the entire seminiferous tubules. The present data elucidate the dynamic of spermatogenesis and oogenesis of an ornamental Amazonian species, through the description of the male and female germ cells development.

O conhecimento da morfologia testicular e ovariana de uma determinada espécie de peixe é de suma importância, pois através destas análises é possível o desenvolvimento de estudos e técnicas visando o melhoramento de sua reprodução, manejo e comercialização e até mesmo auxiliar em sua conservação. Este estudo realizou a caracterização ovariana e testicular do peixe Amazônico ornamental Serrapinnus kriegi. Um total de três machos e três fêmeas tiveram suas gônadas analisadas através de microscopia óptica. As fêmeas apresentam ovários preenchidos por oócitos em desenvolvimento assincrônico, indicando desova parcelada da espécie. Além disso, observou-se a formação de micrópila e célula micropilar em oócitos em crescimento primário, representando o desenvolvimento precoce do oócito; a zona radiata nos oócitos vitelogênicos finais é mais espessa em comparação a outras espécies relacionadas, evidenciando o desenvolvimento de uma melhor proteção aos embriões, em função das águas turbulentas que caracterizam seu local de desova nos córregos amazônicos. Os machos apresentam testículos do tipo tubular anastomosado com espermatogônias irrestritas, espalhadas por todo o túbulo seminífero. Os dados apresentados elucidam a dinâmica da espermatogênese e oogênese de uma espécie de peixe ornamental amazônica, por meio da descrição das células germinativas masculinas e femininas.

Gonadal characterization of the Amazonian fish Serrapinnus kriegi (Characidae: Cheirodontinae) / Caracterização gonadal do peixe Amazônico Serrapinnus kriegi (Characidae: Cheirodontinae)

The knowledge of the testicular and ovarian morphology of a particular fish species is of paramount importance. Such analyze enables the development of studies and techniques aiming the improvement of their reproduction, management, commercialization and even their conservation. This study performed the ovarian and testicular characterization of the ornamental Amazon fish Serrapinnus kriegi. A total of three males and three females had their gonads analyzed by optical microscopy. Females present ovaries filled with oocytes in asynchronous development, indicating partial spawning in the species. Moreover, the micropyle and micropilar cell formation was observed in primary growing oocytes, representing a precocious oocyte development; and the zona radiata in the final vitellogenic oocytes is thicker than other related species, evidencing the development of a better protection to the embryos in function of the waters turbulence that characterize it spawning sites in the Amazonian streams. The male specimens present anastomosed tubular testes with unrestricted spermatogonia spread along the entire seminiferous tubules. The present data elucidate the dynamic of spermatogenesis and oogenesis of an ornamental Amazonian species, through the description of the male and female germ cells development.(AU)

O conhecimento da morfologia testicular e ovariana de uma determinada espécie de peixe é de suma importância, pois através destas análises é possível o desenvolvimento de estudos e técnicas visando o melhoramento de sua reprodução, manejo e comercialização e até mesmo auxiliar em sua conservação. Este estudo realizou a caracterização ovariana e testicular do peixe Amazônico ornamental Serrapinnus kriegi. Um total de três machos e três fêmeas tiveram suas gônadas analisadas através de microscopia óptica. As fêmeas apresentam ovários preenchidos por oócitos em desenvolvimento assincrônico, indicando desova parcelada da espécie. Além disso, observou-se a formação de micrópila e célula micropilar em oócitos em crescimento primário, representando o desenvolvimento precoce do oócito; a zona radiata nos oócitos vitelogênicos finais é mais espessa em comparação a outras espécies relacionadas, evidenciando o desenvolvimento de uma melhor proteção aos embriões, em função das águas turbulentas que caracterizam seu local de desova nos córregos amazônicos. Os machos apresentam testículos do tipo tubular anastomosado com espermatogônias irrestritas, espalhadas por todo o túbulo seminífero. Os dados apresentados elucidam a dinâmica da espermatogênese e oogênese de uma espécie de peixe ornamental amazônica, por meio da descrição das células germinativas masculinas e femininas.(AU)

Biochemical and immunohistochemical examination of the effects of ephedrine in rat ovary tissue

Purpose: It was aimed to investigate the biochemical and immunohistochemical effects of ephedrine (EPH) in bilateral ovariectomized rats. Methods: Twenty-four Sprague Dawley female rats were divided into three groups: control group: The abdomen was opened and closed without any treatment; ischemia-reperfusion (IR) group: 2 h of ischemia followed by 2 h of reperfusion were allowed to cause IR injury; IR+EPH group: oral EPH solution (5 mg/kg) was administered for 28 days. Results: Biochemical parameters were statistically significant in group comparisons. Increased interleukin-6 (IL-6) expression, degenerative preantral and antral follicle cells and inflammatory cells around blood vessels were seen in IR group. Negative IL-6 expression was observed in seminal epithelial cells, preantral and antral follicle cells in IR+EPH group. While caspase-3 activity increased in granulosa cells and stromal cells in IR group, caspase-3 expression was negative in preantral and antral follicle cells in the germinal epithelium and cortex in IR+EPH group. Conclusion: The effect of apoptosis, which occurs with the signaling that starts in the cell nucleus, caused the cessation of the stimulating effect at the nuclear level after EPH administration, and a decrease in the antioxidative effect in IR damage and inflammation in the apoptotic process.

Relationships between antral follicle counts and ovarian morphology of Bos indicus of different ages / Relações entre a contagem de folículos antrais e a morfologia ovariana de Bos indicus de diferentes idades

This study aimed to evaluate the relationship between the antral follicle count (AFC) and the ovarian morphology of Bos indicus in different age groups: 12-23 months (G1), 24-35 months (G2), 36-47 months (G3), 48-59 months (G4), and >60 months (G5). Ovaries were collected individually and sent to the laboratory, where we measured AFC, the diameter and weight of the ovaries, dominant follicle (DF, >8mm), corpus luteum (CL), and small follicles (SF, <8mm). AFC were classified as high, intermediate-high, intermediate-low, and low. A group of ovaries was subjected to follicular aspiration to evaluate the morphological quality of the recovered cumulus oocyte complexes (COCs). Mean AFC did not vary between ages. The morphological characteristic that was most closely correlated with AFC was the weight of the small follicles. There was no relationship between AFC and the weight and diameter of the DF and CL. Quality of the COCs was superior in ovaries in which the CL was present, but it did not vary between the AFC classes. We conclude that AFC can be performed on a single ovary, regardless of the presence, diameter, and weight of the CL and DF in zebu between 12 and 60 months old.

O presente estudo teve como objetivo avaliar a relação entre a contagem de folículos antrais (CFA) e a morfologia ovariana de Bos indicus em diferentes faixas etárias: 12-23 meses (G1), 24-35 meses (G2), 36-47 meses (G3), 48-59 meses (G4) e >60 meses (G5). Os ovários foram coletados individualmente e enviados ao laboratório, onde suas características morfológicas foram medidas: CFA, diâmetro e peso dos ovários, do folículo dominante (FD, ≥8 mm), do corpo lúteo (CL) e dos folículos pequenos (SF, <8 mm). A CFA foi classificada como alta, intermediária-alta, intermediária-baixa e baixa. Um grupo de ovários foi submetido à aspiração folicular para avaliar a qualidade morfológica dos complexos cumulus oócitos (COCs) recuperados. A CFA média não variou entre as idades. A característica morfológica que se correlacionou mais intimamente com a CFA foi o peso dos folículos pequenos. Não houve relação entre a CFA e o peso e o diâmetro do FD e do CL. A qualidade dos COCs foi superior em ovários em que o CL estava presente, mas não variou entre as classes de CFA. Concluiu-se que a CFA pode ser realizada em um único ovário, independentemente da presença, do diâmetro e do peso do CL e do FD em zebuínos entre 12 e 60 meses de vida.

Ovarian development of Xiphopenaeus kroyeri (Crustacea: Penaeidae) from Espírito Santo, southeastern Brazil / Desenvolvimento ovariano de Xiphopenaeus kroyeri (Crustacea: Penaeidae) no Espírito Santo, sudeste do Brasil

This study aimed to describe and characterize the stages of gonadal development of females of Xiphopenaeus kroyeri caught by artisanal fishers in Espírito Santo state, southeastern region of Brazil. All females (n= 1,831) were subjected to macroscopic and microscopic morphological analysis (n= 333) of the ovaries. From the morphology, coloration and degree of turgidity of the fresh ovary, macroscopic analysis determined five stages of gonadal development. The macroscopic analysis showed difficulties in differentiating the immature and spawning stages due to the similarity between the colors of the ovaries, which confirms the need to perform the macroscopic and histological analysis simultaneously for fisheries management studies. Microscopic observations allowed us to analyze the following six stages of cell development: oogonia, previtellogenic oocytes, primary vitellogenic oocytes, secondary vitellogenic oocytes, mature oocytes and atretic oocytes. From this, five stages of gonadal development were defined, i.e., immature, early development, advanced development, mature and spawned. The presence of peripheral bodies was not observed in this species. These results help to clarify and better understand the reproductive and population aspects of the Atlantic Seabob, which are fundamental for the establishment of management and conservation measures of this resource.

Este estudo teve como objetivo descrever e caracterizar os estágios de desenvolvimento gonadal de fêmeas de Xiphopenaeus kroyeri capturado por pescadores artesanais no Estado do Espírito Santo, região sudeste (Região sudeste = Rio de Janeiro, São Paulo, Minas Gerais e Espírito Santo) do Brasil. Todas as fêmeas (n= 1.831) foram submetidas à análise morfológica macroscópica e microscópica (n= 333) dos ovários. A partir da morfologia, coloração e grau de turgidez do ovário fresco, a análise macroscópica determinou cinco estágios de desenvolvimento gonadal. A análise macroscópica mostrou dificuldades em diferenciar os estágios imaturo e reprodutivo devido à semelhança entre as cores dos ovários, o que confirma a necessidade de realizar a análise macroscópica e histológica simultaneamente para estudos de manejo pesqueiro. As observações microscópicas permitiram analisar os seguintes seis estágios de desenvolvimento celular: oogônias, ovócitos prévitelogênicos, ovócitos em vitelogênese primária, ovócitos em vitelogênese secundária, ovócitos maduros e ovócitos atrésicos. A partir disso, foram definidos cinco estágios de desenvolvimento gonadal, ou seja, imaturo, desenvolvimento inicial, desenvolvimento avançado, maduro e desovado. A presença de corpos periféricos não foi observada nesta espécie. Estes resultados ajudam a esclarecer e compreender melhor os aspetos reprodutivos e populacionais do camarão do Atlântico, que são fundamentais para o estabelecimento de medidas de gestão e conservação deste recurso.

Clinical, sonographic and anatomopathological aspects of ovarian teratoma in a heifer / Aspectos clínicos, ultrassonográficos e anatomopatológicos do teratoma ovariano em uma novilha

Teratomas rarely occur in domestic species, especially in cattle. These tumors originate in fetal life and are characterized by rapid growth, which justifies their frequent detection in young animals. This study reported a case of ovarian teratoma in a heifer. On physical examination, the main signs identified were apathy, abdominal distention and tension, empty rumen, and mushy diarrhea. During rectal palpation, a mass was identified in the pelvic region, which was suggestive of cysts on ultrasound examination. The animal underwent laparotomy, followed by euthanasia due to a poor prognosis. At necropsy, a 54 x 43 x 52 cm (length x width x thickness) tumor was observed in the right ovary with multiple cystic areas, in addition to masses associated with multiple adhesions of the intestinal loops and peritonitis. On histopathology, muscle, cartilage, bone, nervous and epithelial tissue, glands, hair with follicles, were identified in the affected ovary. There was mixed inflammation and foci of necrosis observed with a complete absence of ovarian architecture in both the ovaries. Infiltrations were identified in the lymph nodes and mesenteric vessels. Glandular ducts were seen from the serosa to the intestinal mucosa. A locally infiltrative and expansile ovarian teratoma was diagnosed accordingly. It is considered that this kind of tumor can induce abdominal distension and absence of estrus in previously healthy, non-pregnant heifers.

Os teratomas são tumores raros nas espécies domésticas, sobretudo em bovinos. Esses tumores são caracterizados por crescimento rápido e origem durante a vida fetal, o que justifica seu diagnóstico frequente em animais jovens. O presente trabalho relata um caso de teratoma ovariano em uma novilha. No exame físico, os principais sinais identificados foram apatia, distensão e tensão abdominal, rúmen vazio e diarreia pastosa. Durante a palpação retal, uma massa foi identificada na região pélvica. Ao exame ultrassonográfico, a massa era sugestiva de cistos. O animal foi submetido a laparotomia, seguido de eutanásia devido ao mau prognóstico. Na necropsia foi observado um tumor de 54 x 43 x 52 cm (comprimento x largura x espessura) no ovário direito com múltiplas áreas císticas, além de massas associadas à múltiplas aderências das alças intestinais e peritonite. Na histopatologia foram identificados no ovário acometido a presença de tecidos muscular, cartilaginoso, ósseo, nervoso e epitelial, com glândulas, pelos e folículos. Havia inflamação mista e focos de necrose com ausência completa de arquitetura ovariana em ambos os ovários. Infiltrações foram identificadas em linfonodos e vasos mesentéricos. Ductos glandulares foram vistos desde a serosa até mucosa intestinal. Diagnosticou-se um teratoma ovariano localmente infiltrativo e expansivo. Considera-se que este tumor pode induzir distensão abdominal e ausência de estro em novilhas previamente sadias e não gestantes.

Protective effect of kaempferol against cisplatin-induced acute ovarian damage in a mouse model / [Efeito protetor do kaempferol contra o dano ovariano agudo induzido pela cisplatina em um modelo murino]

The flavonoid kaempferol has attracted research attention as a potential adjuvant during chemotherapy. This study aimed to evaluate the protective effects of kaempferol against ovarian damage in cisplatin-treated mice. Two groups of mice received saline solution (intraperitoneal injection [i.p.]; control) or a single dose of cisplatin (5 mg/kg body weight, i.p.). Moreover, two other mice groups were pretreated with kaempferol (1 or 10 mg/kg body weight, i.p.) 30 min before of the cisplatin administration. Thereafter, their ovaries were harvested and subjected to histological (follicular morphology and activation) and fluorescence (reactive oxygen species [ROS] production, glutathione [GSH] concentration, and mitochondrial activity) analyses. Compared with cisplatin treatment alone, pretreatment with 1 mg/kg kaempferol maintained normal follicular morphology, reduced ROS production and mitochondrial damage, and enhanced GSH concentration. However, pretreatment with 10 mg/kg kaempferol did not prevent cisplatin-induced damage. The rate of primordial follicle activation was greater in mice pretreated with 1 mg/kg kaempferol than in the other treatment groups. In conclusion, pretreatment with 1 mg/kg kaempferol prevents cisplatin-induced ovarian damage and stimulates primordial follicle activation in mice.

O flavonoide kaempferol tem atraído a atenção como um potencial adjuvante durante a quimioterapia. O presente estudo objetivou avaliar os efeitos do kaempferol contra os danos ovarianos em camundongos tratados com cisplatina. Fêmeas de camundongos receberam solução salina (injeção intraperitoneal [ip]; controle) ou uma dose única de cisplatina (5 mg/kg, ip) ou foram pré-tratadas com kaempferol (1 ou 10 mg/kg, ip) 30 min antes da administração de cisplatina. Os ovários foram recuperados e destinados para as análises histológicas (morfologia e ativação folicular) e de fluorescência (produção de espécies reativas de oxigênio [ERO], concentração de glutationa [GSH] e atividade mitocondrial). Em comparação ao tratamento apenas com cisplatina, o pré-tratamento com 1 mg/kg de kaempferol manteve a morfologia folicular normal, reduziu a produção de ERO, bem como os danos mitocondriais, e aumentou a concentração de GSH. Entretanto, o pré-tratamento com 10 mg/kg de kaempferol não preveniu os danos induzidos pela cisplatina. A taxa de ativação do folículo primordial foi maior em camundongos pré-tratados com 1 mg/kg de kaempferol do que nos outros grupos experimentais. Em conclusão, o pré-tratamento com 1 mg/kg de kaempferol previne o dano ovariano induzido pela cisplatina e estimula a ativação do folículo primordial em camundongos.

Tópicos do ciclo estral em cadelas / Estrous cycle topics in bitches

As cadelas possuem características especiais da fisiologia da reprodução que as diferenciam das outras espécies domésticas. Elas são monoéstricas não sazonais com ovulação espontânea. A puberdade ocorre com variação entre 6 e 24 meses de idade conforme raça, tamanho individual e predisposições individuais. O interestro ocorre com intervalos de 5 a 12 meses sendo em média com 6 meses. O ciclo reprodutivo das cadelas é composto de 4 fases distintas: proestro (duração de 5 a 20 dias), estro (duração de 5 a 15 dias), diestro (duração de 50 a 80 dias) e anestro (duração de 80 a 240 dias). O diagnóstico e acompanhamento das fases do ciclo estral é feito com observação de comportamento reprodutivo, sintomas e sinais anatômicos e fisiológicos, citologia vaginal, dosagem do nível sérico de progesterona, vaginoscopia e utrassonografia dos órgãos do sistema reprodutivo, em especial dos ovários em cada fase do ciclo estral.(AU)

Female dogs have special features of reproduction physiology that differentiate them from other domestic species. Theu are non-seasonal monoestrus with spontaneous ovulation. Puberty occurs with a variation between 6 and 24 months of age according to breed, individual size, and individual predispositions. The inter-estrus occurs at intervals of 5 to 12 months, with an average of 6 months. The reproductive cycle of bitches is composed of 4 distinct phases: proestrus (duration from 5 to 20 days), estrus (duration from 5 to 15 days), diestrus (duration from 50 to 80 days) and anestrus (duration from 80 to 240 days). The diagnosis and monitoring of the phases of the estrous cycle is made with observation of reproductive behavior, symptoms and anatomical and physiological signs, vaginal cytology, measurement of serum progesterone levels, vaginoscopy and ultrasound of the organs of the reproductive system, especially the ovaries in each phase of the estrus cycle.(AU)

Pathomorphological lesions in the ovaries of water buffaloes

Background: Buffalo breeding is common in many countries. Buffalo's milk is used in the production of mozzarella, yoghurt, ice cream, and various dairy desserts; meat is preferred in sausage production. The female buffaloes are bred to benefit from their milk and to obtain offspring. These animals, which are not suitable for feeding in barns, generally live in pastures, especially on wet land, and are very difficult to follow. Therefore, diseases occur randomly in slaughterhouses. Studies on genital system problems are very limited. Water buffaloes (Bubalus bubalis) are animals with economic value as many buffalo products are provided. In this respect, inspection and control of female genital disorders is fundamental to ensure good reproductive performance of female buffaloes. The aim of the study was to investigate pathomorphological lesions occurring in the ovaries of water buffaloes which were sent to slaughterhouses. Materials, Methods & Results: A total of 198 ovaries of water buffaloes were collected from various slaughterhouses located in Adapazari, Istanbul, Kocaeli, Samsun and Trabzon cities of Turkey. After macroscopic examination; tissue samples were fixed in 10 % buffered formalin, processed routinely and were stained with hematoxylin-eosin (HE). As a histochemical staining, Masson's trichrome staining was applied to characterize the lesions. Immunohistochemistry (IHC) was performed on 10 % neutral formalin fixed, paraffin-embedded, 4-6-µm-thick sections from ovaries using progesterone receptor (PR) with streptavidin-biotin complex peroxidase (StrepABC-P) method. Histopathologically, follicular cysts (n:147) and luteal cysts (n:22) were seen. While the cyst lumens were sometimes surrounded by granulosa and/or luteal cells, most of them were limited by the connective tissue capsule structure. This capsule structure was shown in blue by Masson's trichrome staining. Hemorrhage was observed in some cystic corpus luteum, diagnosed as corpus hemorrhagicum. In addition, cysts giving papillary extension into the lumen and inflammation of some ovaries were observed. Immunohistochemically, the staining with PR antibody in ovarian cysts showed no immunolabelling around the follicular cyst, while the nuclei of some of the luteal cells forming the luteal cyst had strongly nuclear positivity and slightly cytoplasmic positivity. In the biochemical examination of the fluids obtained from cystic ovaries (n: 37), the average of estradiol was 2.84 ng/mL (min: 0.01 ng/mL, max: 4.30 ng/mL) and progesterone average is 49.09 ng/mL (min: 1.88 ng/mL, max: 254.2 ng/mL). Discussion: Ovarian cysts in buffaloes seem to be among the serious fertility problems as in cattle. Although the exact cause of ovarian cyts has not been determined yet, it is known that the hypothalamic-pituitary-gonadal (HPG) axis is disrupted in cyst formation in general. In this study, the mean estradiol value was within the standard range but close to the lower limit; progesterone value was above the limit. The increase in progesterone level was compatible with the pathogenesis of cyst genesis. Beside this result, staining with PR was positive in the luteal cells that formed the luteal cyst immunohistochemically. In addition, although the hemorrhages observed in the corpus luteum are considered physiological, it should not be forgotten that they can be vital if they rupture. All these results show us the animals sent for slaughtering mostly have serious genital problems threatening their fertility.

Hipoplasia testicular em Mugil curema / Testicular hypoplasia in Mugil curema

Mugil curema valenciennes, 1836 (Osteichthyes: Mugilidae) é um peixe cosmopolita e é conhecido popularmente como parati no Sudeste e Sul do Brasil e como tainha no Nordeste, sendo encontrado em mar aberto e em estuários. Esta espécie não expressa dimorfismo sexual entre machos e fêmeas externamente. Machos e as fêmeas possuem um par de gônadas (testículos e ovários, respectivamente), as quais são alongadas, fusiformes e simétricas. Este trabalho descreve a ocorrência de hipoplasia testicular em um peixe da espécie Mugil curema, procedente da Baía da Babitonga, Santa Catarina, Brasil. Foi identificada hipoplasia testicular unilateral, a qual macroscopicamente, estava diminuído de volume e, microscopicamente, apresentava atividade espermatogênica ausente e redução do número de espermatozoides. Não foi possível determinar os fatores que possam ter contribuído para o desenvolvimento de tal alteração reprodutiva. Porém, como a espécie animal pode ter suas características de vida e reprodutiva influenciadas pela ação antrópica, é importante um estudo contínuo da vida dos peixes nesse ambiente. Existem poucos estudos direcionados à espécie, principalmente aos aspectos reprodutivos. Desta forma, este relato contribuirá para elevar o histórico de informações a respeito desta espécie na região.

Mugil curema valenciennes, 1836 (Osteichthyes: Mugilidae) is a cosmopolitan fish popularly known as parati in Southeast and South Brazil and as mullet in Northeast, being found in the open sea and estuaries. This species does not express sexual dimorphism between males and females externally. Males and females have a pair of gonads (testes and ovaries, respectively), which are elongated, fusiform, and symmetrical. This paper describes the occurrence of testicular hypoplasia in a fish of the species Mugil curema, from Babitonga Bay, Santa Catarina, Brazil. Unilateral testicular hypoplasia was identified, which macroscopically showed a decrease in testis volume and, microscopically, the absence of spermatogenic action and a reduction in the number of spermatozoa. It was not possible to determine the factors that may have contributed to the development of such reproductive alteration. However, as the living and reproductive traits of this animal species may be influenced by anthropic action, a continuous study of its life in this environment is important. There are few studies directed at this species, mainly on its reproductive aspects. Thus, this report will contribute to raising the information historic about this species in the region.

Effect of different gonadotropins on in vitro maturation of sheep oocytes / Efeito de diferentes gonadotrofinas na maturação in vitro de oócitos ovinos

The aim of this study was to examine the effect of replacing the use of follicle-stimulating hormone (FSH) with equine chorionic gonadotropin (eCG) and human chorionic gonadotropin (hCG) on the in vitro maturation (IVM) of sheep oocytes. After sheep ovaries were collected (n=300), the cumulus-oocyte complexes were aspirated, selected, and divided into four groups according to the IVM medium: CON group, in which the basic IVM medium was used; and eCG, hCG, and FSH groups, in which the oocytes were immersed in basic IVM medium with 10 IU/mL eCG, 10 IU/mL hCG, and 10 µg/mL FSH-p, respectively. In vitro maturation of the oocytes was performed at 38.5 °C, in a humidified atmosphere of 5% CO2 in air, for 24 h. Subsequently, the oocytes were evaluated for the degree of cumulus-cell expansion, chromatin configuration, GSH levels, and active mitochondria. There were no significant differences for the rate of cumulus cell expansion. The percentage of oocytes in MII was higher in the eCG group than in the CON and hCG groups (P<0.05) and similar to that of the FSH group. In conclusion, eCG can be used as a substitute for FSH in IVM of sheep oocytes.

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da gonadotrofina coriônica equina (eCG) e da gonadotrofina coriônica humana (hCG), em substituição ao uso de hormônio folículo estimulante (FSH) na maturação in vitro (MIV) de oócitos ovinos. Após a coleta de ovários (n=300) ovinos, os complexos cúmulus-oócitos (CCOs) foram aspirados, selecionados e divididos em quatro grupos de acordo com o meio de MIV: grupo CON, em que foi utilizado o meio MIV base; e grupos ECG, HCG e FSH, em que os oócitos foram imersos em meio MIV base adicionado de 10 UI/mL de eCG, 10 UI/mL de hCG e 10 µg/mL de FSH-p, respectivamente. A MIV dos oócitos foi realizada a 38,5°C, em atmosfera umidificada de 5% de CO2 em ar, durante 24 horas. Posteriormente, os oócitos foram avaliados, quanto grau de expansão das células do cumulus, configuração da cromatina, níveis de GSH e mitocôndrias ativas. Não foram observadas diferenças significativas com relação à taxa de expansão de células do cumulus. A percentagem de oócitos em MII foi maior no grupo ECG do que no grupo CON e HCG (P<0,05) e semelhante ao grupo FSH. Em conclusão, a eCG pode ser utilizada em substituição ao FSH na MIV de oócitos ovinos.

Nova técnica de ligadura do pedículo ovariano e coto uterino em cadela com utilização de duas pinças / Novel technique of ligature of the ovarian pedicle and uterine stump in bitches using two clamps

A ovariosalpingohisterectomia (OSH), que consiste na retirada cirúrgica de ovários, tubas uterinas e útero, é um dos procedimentos cirúrgicos mais realizados em cadelas na rotina veterinária. É utilizado para evitar prenhez indesejada e no tratamento e profilaxia de enfermidades reprodutivas. Classicamente, na técnica de ligadura do pedículo ovariano e coto uterino na OSH em cadelas e gatas, são empregadas três pinças para expor a área de ligadura, por isso, a técnica é conhecida como técnica das três pinças. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi propor uma técnica diferente para executar tais ligaduras, reduzindo o tempo do procedimento por meio da diminuição do número de pinças usadas para a exposição dos locais a serem feitas as ligaduras. Desta forma, o experimento foi conduzido com 20 cadelas hígidas submetidas à OSH. Os animais foram divididos em dois grupos: animais submetidos ao procedimento de ligadura pela técnica das três pinças e animais submetidos a ligadura pela técnica proposta neste estudo. A abertura da cavidade abdominal, para expor as estruturas a serem ligadas, foi a mesma para as duas técnicas (laparotomia mediana ventral). Foi mensurado, por meio de cronômetro digital, o tempo despendido na realização de todas as cirurgias. Não ocorreram óbitos e não houve dificuldades na execução das duas técnicas. Além disso, no transoperatório, não houve intercorrências dignas de nota. Os resultados demonstraram que o tempo de execução foi estatisticamente menor para a técnica proposta, indicando a aplicação preferencial deste procedimento para realização de OSH em cadelas.

The ovariohysterectomy (OH), which consists of the surgical removal of ovaries, uterine tubes, and uterus, is one of the most common surgical procedures performed on bitches in the veterinary routine. It is used to prevent unwanted pregnancy and in the treatment and prophylaxis of reproductive diseases. Classically, in the technique of ligation of the ovarian pedicle and uterine stump in OH in bitches and cats, three clamps are used to expose the ligature area, that is why the technique is known as the three clamps technique. Thus, this study aimed to propose a different technique to perform such ligatures, reducing the procedure time by reducing the number of clamps used to expose the sites to be ligated. Therefore, the experiment was carried out with twenty healthy bitches submitted to OH. The animals were divided into two groups: animals submitted to the ligation procedure using the three clamps technique and animals submitted to ligation using the technique proposed in this study. The opening of the abdominal cavity, to expose the structures to be ligated, was the same for both techniques (ventral median laparotomy). The time spent performing all surgeries was measured using a digital timer. There were no deaths and there were no difficulties in performing both techniques. Besides, in the transoperative period, there were no noteworthy complications. The results demonstrated that the execution time was statistically shorter for the proposed technique, indicating the preferential application of this procedure for performing OH in bitches.

Copper deficiency in dairy goats and kids / Deficiência de cobre em cabras leiteiras e cabritos

The clinical, pathological and reproductive aspects of an outbreak of copper deficiency in dairy goats and kids from the semiarid region of Pernambuco, Brazil are described. Ten adult dairy goats with clinical signs of deficiency and four kids presenting enzootic ataxia born from copper deficient does were separated from the herd, and examined. In the dairy goats, the average serum concentration of copper was 6.1±2.8mmol/L and iron was 39.5±8.2mmol/L. In kids, the average serum concentration of copper was 3.8±0.9mmol/L and iron was 38.5±4.1mmol/L. Clinical signs in dairy goats consisted of pale mucous membranes, anemia, emaciation, diarrhea, achromotrichia, brittle hair and alopecia. The main reproductive alterations consisted of prolonged anestrus, embryonic resorption and high indices of retained placenta. The kids born from copper deficient dairy goats were weak, and presented neonatal or late ataxia until 70 days of life. Six dairy goats and four kids were necropsied. Most ovaries examined were small, firm and did not present viable follicles on their surface. Microscopically, there was reduction of viable follicles in addition to disorganization of follicular and stromal structures, with marked follicular atresia. Microscopically, changes in kids with enzootic ataxia consisted of neuronal chromatolysis and axonal degeneration, mainly in neurons of the spinal cord. In this study, the source of high iron was not identified, but it is known that outbreaks of copper deficiency can occur due to excess iron intake, mainly when adequate mineral supplementation is not provided for the goat herds.

Descrevem-se os aspectos clínicos, patológicos e reprodutivos de um surto de deficiência de cobre em cabras leiteiras e em cabritos da região semiárida de Pernambuco, Brasil. Dez cabras leiteiras adultas com sinais clínicos de deficiência de cobre e quatro cabritos com ataxia enzoótica nascidos dessas cabras foram separados do rebanho e examinados. Nas cabras leiteiras, a concentração média de cobre sérico foi de 6,1±2,8mmol/L e a concentração média de ferro sérico foi de 39,5±8,2mmol/L. Nos cabritos, a concentração média de cobre sérico foi de 3,8±0,9mmol/L e a concentração média de ferro sérico foi de 38,5±4,1mmol/L. Os sinais clínicos nas cabras consistiram em mucosas pálidas, anemia, diarreia, acromotriquia, pelos opacos e quebradiços e alopecia. As principais alterações reprodutivas consistiram em anestro prolongado, reabsorção embrionária e aumento da taxa de retenção de placenta. Os cabritos nascidos vivos dessas cabras nasceram fracos, com ataxia neonatal ou desenvolveram ataxia tardia em até 70 dias de vida. Seis cabras leiteiras e quatro cabritos foram necropsiados. Nas cabras, a maioria dos ovários examinados macroscopicamente eram pequenos, firmes e não apresentavam folículos viáveis em sua superfície. Microscopicamente, houve redução de folículos viáveis, além de desorganização das estruturas foliculares, com marcada atresia folicular. Macroscopicamente não foram observadas alterações nos cabritos com ataxia enzoótica. As lesões histológicas observadas nesses cabritos consistiram em cromatólise neuronal e degeneração axonal, principalmente em neurônios da medula espinhal. Neste estudo a fonte dos altos teores de ferro no soro não foi identificada, mas sabe-se que surtos de deficiência de cobre podem ocorrer devido ao excesso de ingestão de ferro, principalmente quando não é fornecida suplementação mineral adequada para os rebanhos caprinos.

Bilateral dysgerminoma in a senile bitch associated with nodular lymphoid hyperplasia in spleen and pyometra: a case report / Disgerminoma bilateral em cadela senil associado a hiperplasia nodular linfoide em baço e piometra: relato de caso

Ovarian neoplasms affect a low percentage of female dogs, and these tumors are classified according to their cellular origin and are considered rare. Dysgerminoma is a tumor derived from undifferentiated primordial ovarian germinal epithelium cells. In the male, this neoplasm is diagnosed as seminoma. Thus, dysgerminoma is not linked to the production of ovarian hormones such as estrogen and progesterone, which play a fundamental role in the establishment of pyometra. At Araujo Veterinary Hospital (HVA), a 15-year-old female Pinscher was admitted with mucopurulent vaginal discharge, abdominal enlargement, anorexia, polydipsia, and prostration clinical signs indicative of pyometra, radiographic and ultrasound examinations were requested, as well as a blood collection for hemogram and serum biochemistry. Ultrasound examination revealed uterine enlargement and hypoechoic content, in addition to bilateral ovarian cysts, measuring 7 cm in the right ovary and 3 cm in the left. The blood count revealed normal values in the erythrogram and the leukogram showed monocytosis and lymphopenia, in addition to macroplatelets. Biochemical examination revealed increased GGT values of 10 U/L. Ovariohysterectomy was performed and, in the trans-surgical period, nodules in the spleen were observed. So, the ovaries and a fragment of the lymphoid organ, were fixed and sent to the histopathology laboratory after surgical resection. Histopathology revealed ovarian dysgerminoma and lymphoid nodular hyperplasia. Ten days after the surgical procedure, the dog returned to the HVA for clinical evaluation and suture removal. However, three days after the return, the patient presented a convulsive condition evolving to death.

Neoplasias ovarianas acometem baixa porcentagem de cadelas, e estes tumores são classificados de acordo com a origem celular, sendo considerados raros. O disgerminoma é um tumor derivado de células do epitélio germinativo primordial ovariano, indiferenciado. No macho, essa neoplasia é diagnosticada como seminoma. Assim, o disgerminoma não está ligado a produção de hormônios ovarianos, como o estrógeno e a progesterona, que desempenham papel fundamental para o estabelecimento da piometra. No Hospital Veterinário Araújo (HVA), uma cachorra da raça Pinscher, com 15 anos, foi antendida apresentando, secreção vaginal mucopurulenta, aumento abdominal, anorexia, polidipsia e prostração sinais clínicos indicativos de piometra, solicitou-se exame de radiográfico e ultrassonografia, bem como a coleta de sangue para hemograma e bioquímico sérico. O exame ultrassonográfico revelou aumento uterino e conteúdo hipoecóico, além de cistos ovarianos bilaterais, com mensurações de 7 cm no ovário direito e 3 cm no esquerdo. O hemograma revelou valores normais no eritrograma e o leucograma apresentou monocitose e linfopenia, além de macroplaquetas. O exame bioquímico revelou valores de GGT aumentados, em 10 U/L. A ovariohisterectomia foi realizada e no trans cirúrgico observou-se nódulos no baço. Assim, os ovários e um fragmento do órgão linfoide, após a ressecção cirúrgica, foram fixados e encaminhadas para laboratório de histopatologia. A histopatologia revelou disgerminoma ovariano e hiperplasia nodular linfoide. Dez dias após o procedimento cirúrgico, a paciente retornou ao HVA para avaliação clínica e retirada da sutura. No entanto, três dias após o retorno, o animal apresentou um quadro convulsivo evoluindo ao óbito.

Relative transcript level of BMP15, BAX and CASP3 with qRT-PCR in vitrified equine immature cumulus-oocytes complexes / Relative transcript level of BMP15, BAX and CASP3 with qRT-PCR in vitrified equine immature cumulus-oocytes complexes

Research focused on female gamete vitrification has increased attention to develop a reliable cryopreservation method to preserve immature equine oocytes. Despite the intensive implementation of biotechnological procedures for horse breeding, vitrification of immature equine cumulus-oocyte complexes (COCs) remain to be clearly elucidated. We aimed to determine the relative transcript level of target genes Bone morphogenetic protein 15 (BMP15); Bcl-2-associated X protein (BAX); and Caspase 3 (CASP3) in equine COCs prior to and after vitrification. Ovarian follicles were aspirated from ovaries collected from an abattoir. A total of 240 COCs were collected and distributed into vitrified COCs (VIT, n=120) and nonvitrified (Non-VIT, n=120) groups. Then, COCs were preserved and relative transcript expressions of BMP15, BAX, CASP3 were measured and normalized against GAPDH performed by qRT-PCR. In addition, 38 COCs were evaluated to assess chromatin configuration of germinal vesicl e stage prior and after vitrification by exposure to 10 µg/ml of bisbenzimide. A difference was observed in the COCs' mRNA level of abundance for the BAX gene between the VIT (2.05 ± 0.47) and (0.85 ± 0.08) Non-VIT groups. There was no difference in mRNA relative transcript level of CASP3 and BMP15 in Non-VIT (0.63 ± 0.20 and 1.55 ± 0.73, respectively) compared to VIT (0.64 ± 0.01 and 2.84 ± 2.20, respectively) equine COCs. All COCs where considered at immature stage of development even though COCs in Non-VIT group showed higher condensed chromatin configuration compared to VIT (100% vs 60.7%, respectively). We demonstrate that BMP15 and CASP3 are detected in VIT and Non-VIT immature COCs. In conclusion, BAX is expressed highly in vitrified immature equine COCs and indicates that activation of apoptosis signaling cascades in cells exposed to vitrification.(AU)

Pesquisas sobre a vitrificação de gametas femininos estão sendo realizadas para o desenvolvimento de um método confiável de criopreservação dos complexos cumulus-oócitos (CCOs) na espécie equina. Apesar da implementação intensiva de biotecnologias reprodutivas em equinos, a vitrificação dos CCOs imaturos permanece em estágio experimental em relação à competência celular. O objetivo do estudo foi determinar o nível de transcrição relativo dos genes Proteína morfogenética óssea 15 (BMP15); Proteína X associada a Bcl-2 (BAX); e Caspase 3 (CASP3) em CCOs equinos antes e após a vitrificação. Folículos ovarianos foram aspirados de ovários coletados em matadouro. O total de 240 CCOs foi coletado e distribuído em grupos vitrificados (VIT, n=120) e não vitrificados (N-VIT, n=120). Os CCOs foram preservados e as expressões transcritas relativas de BMP15, BAX, CASP3 foram determinadas pela técnica de qRT-PCR sendo normalizadas em relação ao GAPDH. Além disso, 38 CCOs foram avaliados para determinar a configuração da cromatina no estágio de vesícula germinativa antes e após a vitrificação pela exposição a 10 µg/ml de bisbenzimida. Os resultados mostraram uma diferença no nível de abundância de mRNA dos CCOs para o gene BAX entre os grupos VIT (2,05 ± 0,47) e N-VIT (0,85 ± 0,08). Não houve diferença no nível de transcrição relativa do mRNA de CASP3 e BMP15 nos CCOs do grupo N-VIT (0,63 ± 0,20 e 1,55 ± 0,73, respectivamente) em comparação com VIT (0,64 ± 0,01 e 2,84 ± 2,20, respectivamente). Todos os CCOs foram considerados em estágio imaturo de desenvolvimento, embora os CCOs no grupo N-VIT apresentaram a configuração de cromatina condensada em maior número de células avaliadas em comparação com VIT (100% vs 60,7%, respectivamente). Demonstramos que BMP15 e CASP3 são detectados em CCOs imaturos em VIT e N-VIT. Conclui-se que o BAX é altamente expresso em CCOs equinos imaturos vitrificados sendo relacionado à sinalização de apoptose em células expostas ao processo de vitrificação.(AU)