Reproducibility of double agar gel immunodiffusion test using stored serum and plasma from paracoccidioidomycosis patients

Background: Serological evaluation performed by double agar gel immunodiffusion test (DID) is used for diagnosis, evaluation of severity, management of paracoccidioidomycosis patients, and development of new clinical studies. For these reasons, the Botucatu Medical School of UNESP maintains a serum bank at the Experimental Research Unit with patient clinical data. This study aimed to evaluate the influence of the freeze-thaw cycle and different blood matrices on the titration of circulating antibodies. Methods: The study included 207 patients with confirmed (etiology-demonstrated) or probable (serology-demonstrated) paracoccidioidomycosis, and DID was performed with culture filtrate from Paracoccidioides brasiliensis B339 as antigen. First experiment: the antibody levels were determined in serum samples from 160 patients with the chronic form and 20 with the acute/subacute form, stored at ­80o C for more than six months. Second experiment: titers of 81 samples of serum and plasma with ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) or heparin, from 27 patients, were compared according to matrix and effect of storage at ­20o C for up to six months. Differences of titers higher than one dilution were considered discordant. Results: First experiment: test and retest presented concordant results in serum stored for up to three years, and discordant titers in low incidence in storage for four to six years but high incidence when stored for more than six years, including conversion from reagent test to non-reagent retest. Second experiment: serum, plasma-EDTA and plasma-heparin samples showed concordant titers, presenting direct correlation, with no interference of storage for up to six months. Conclusions: Storage at ­80o C for up to six years has no or little influence on the serum titers determined by DID, permitting its safe use in studies depending on this parameter. The concordant titrations in different blood matrices demonstrated that the plasma can be used for immunodiffusion test in paracoccidioidomycosis, with stability for at least six months after storage at ­20o C.(AU)

Effect of plasma and heat treatments on orange juice quality / Efeito de plasma e tratamento térmico na qualidade do suco de laranja

Heat treatment is used in the orange juice industry to neutralize the action of pathogenic microorganisms. However, it can reduce the nutritional value of the juice. Thus, our study assessed the cold plasma treatment as an alternative method against Escherichia coli and Candida albicans in 'Lima' orange juice. Both, plasma and heat treatments, reduced the amount of E. coli in the juice, inactivating 16.72 and 100%, respectively. Plasma did not inactivate C. albicans, but heat treatment inactivated 100%. Plasma and heat treatment increased Hue angle and luminosity (more yellowish juice). Plasma reduced vitamin C, carotenoids, and polyphenols content, while increased flavonoids. Heat treatment reduced the carotenoid content. However, neither heat nor plasma treatment altered the antioxidant activity. The plasma treatment reduced the intensity of color (chroma), the soluble solids content and the acidity ratio, total sugars, and the vitamin C content of juice compared to the heat-treated and control juices. Plasma-treated juice showed increased levels of yellow flavonoids, total phenolics and antioxidant activity until the 12th day of storage.

O tratamento térmico é utilizado na indústria de suco de laranja para neutralizar a ação de microrganismos patogênicos. No entanto, pode reduzir o valor nutricional do suco. Assim, o estudo avaliou o tratamento com plasma frio como método alternativo contra Escherichia coli e Candida albicans em suco de laranja 'Lima'. Ambos os tratamentos, plasma e calor, reduziram a quantidade de E. coli no suco, inativando 16.72 e 100%, respectivamente. O plasma não inativou C. albicans, mas o tratamento térmico inativou 100%. Plasma e tratamento térmico aumentaram o ângulo Hue e a luminosidade do suco (tom mais amarelo). O plasma reduziu o conteúdo de vitamina C, carotenóides e polifenóis, enquanto aumentou os flavonóides. O tratamento térmico reduziu o teor de carotenóides. No entanto, nem o calor nem o tratamento com plasma alteraram a atividade antioxidante. O tratamento com plasma reduziu a intensidade da cor (croma), o teor de sólidos solúveis e a razão de acidez, açúcares totais e o teor de vitamina C do suco em comparação com os sucos tratados termicamente e controle. O suco tratado com plasma apresentou maiores teores de flavonóides amarelos, fenólicos totais e atividade antioxidante até o 12º dia de armazenamento.

Efecto de la morfología espermática y la concentración de colesterol y triglicéridos del plasma seminal sobre la supervivencia espermática del semen congelado en felinos / Effect of sperm morphology and seminal plasma cholesterol and triacylglycerides concentrations on semen freezability in felines

Se ha documentado la gran variedad y el alto porcentaje de morfoanomalías espermáticas presentes en gatos fértiles. Estudios recientes han demostrado que el semen de buena calidad tiene una alta concentración de colesterol (CHOL) y triglicéridos (TAG) en gatos. Sin embargo, en el gato doméstico hay escasa información sobre el efecto de la composición bioquímica del plasma seminal y la morfología espermática sobre la supervivencia espermática luego de la congelación y descongelación del semen. Estudios recientes sugieren que concentraciones plasmáticas seminales más altas de CHOL y TAG podrían mejorar la capacidad de congelación del semen. Sin embargo, no hay evidencia de que la morfología de los espermatozoides afecte la resistencia de los espermatozoides a la criopreservación.(AU)

The great variety and high percentage of sperm morpho-anomalies present in fertile cats have been documented. Recent studies have shown that good-quality semen has high cholesterol (CHOL) and triglycerides (TAG) in cats. However, in the domestic cat, there is little information on the effect of seminal plasma biochemical composition and sperm morphology on sperm survival after semen frozen-thawed. Recent studies suggest that higher seminal plasma concentrations of CHOL and TAG could improve semen freezing. However, no evidence exists that sperm morphology affects sperm resistance to cryopreservation.(AU)

Importância do plasma seminal na qualidade e preservação do espermatozoide suíno / Importance of seminal plasma in the quality and preservation of boar sperm

Ao preservar o espermatozoide suíno no estado líquido ou criopreservado, os componentes do plasma seminal (PS) contidos nos ejaculados podem alterar a capacidade de fertilização desses gametas. O PS contém substâncias essenciais para a manutenção da viabilidade e fertilidade dos espermatozoides. No entanto, esses componentes podem ser deletérios dependendo da quantidade ou duração do tempo de contato entre a ejaculação e a remoção do PS durante o processamento do sêmen para a conservação na forma refrigerada ou congelada. Foram identificadas substâncias que prejudicam (principal proteína plasmática seminal PSPI) ou melhoram (espermadesina PSP-I) a capacidade de fertilização dos espermatozoides. Dependendo dos cachaços e dos procedimentos de colheita de sêmen, a remoção do PS pode ser benéfica antes da preservação no estado líquido ou criopreservado. Em alguns casos, o PS removido antes da congelação pode ser adicionado de volta ao diluente de descongelamento, com efeitos positivos no sêmen descongelado e na viabilidade do espermatozoide no trato reprodutivo da porca. Neste texto, há um foco nos diferentes efeitos de PS em amostras de sêmen refrigerado e criopreservado de suínos com ênfase em como PS modula a função e morfologia das células espermáticas antes, durante e após a preservação de forma refrigerada ou criopreservada.(AU)

When preserving sperm in the liquid or cryopreserved state, seminal plasma (SP) components within ejaculates can alter fertilizing capacity of these gametes. The SP contains substances essential for maintenance of sperm viability and fertility; however, these components can be deleterious depending on quantity, or duration of time before there is removal of SP from sperm in semen processing. Substances that impair (Major seminal plasma protein PSPI - boar) or improve (e.g., spermadhesin PSP-I - boar) sper- matozoa fertilizing capacity have been identified. Depending on individual males and semen collection procedures, SP removal may be beneficial before preservation in the liquid or cryopreserved state. In some cases, SP that is removed can be added back to thawing extender with there being positive effects in thawed sperm and for sperm viability in the female reproductive tract. In this review article, there is a focus on different effects of SP in samples of cooled and cryopreserved semen from boar with there being emphasis on how SP modulates the function and morphology of sperm cells before, during, and after preservation in the refrigerated or cryopreserved state.(AU)

Use of antioxidants and time of cold storage: effects over viability parameters and enzymatic levels in semen of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum, 1792)

Abstract The cold storage of milt implies potentials alterations in its quality because the storage generates as main process, free radicals that produce spermatozoa membrane lipids damage with the consequent motility and fertilising capacity disruptions. To decrease the damage generated by free radicals the cells have antioxidant defences (proteins, enzymes, and low molecular weight substances). The objective of the present study evaluated the time storage effect and different antioxidants prepared in spermatic diluents on sperm viability of O. mykiss milt stored at 4°C. The two-way ANOVA denoted that the time storage and antioxidant influence have significant effects separated or combined on viability parameters (sperm motility and viability, proteins concentrations and superoxide dismutase enzymatic activity in seminal plasma). In contrast, only the storage time affected the fertilising capacity and catalase enzymatic activity in seminal plasma. The resulting analysis can conclude that the antioxidant presence improves the viability of cold stored milt, especially the transport conditions and the antioxidants allow the fecundity despite motility decrease.

Resumo O armazenamento a frio de leite implica potenciais alterações em sua qualidade, pois gera como processo principal radicais livres que provocam danos aos lipídios da membrana dos espermatozoides, com as consequentes alterações na motilidade e na capacidade de fertilização. Para diminuir os danos causados pelos radicais livres, as células têm defesas antioxidantes (proteínas, enzimas e substâncias de baixo peso molecular). O presente estudo avaliou o efeito do tempo de armazenamento e diferentes antioxidantes preparados em diluentes espermáticos no armazenamento de viabilidade de O. mykiss milt a 4°C. A ANOVA de duas vias denotou que o armazenamento no tempo e a influência antioxidante têm efeitos significativos separados ou combinados nos parâmetros de viabilidade (motilidade espermática, viabilidade espermática, concentrações de proteínas e atividade enzimática da superóxido dismutase no plasma seminal), enquanto apenas o tempo de armazenamento afetou a capacidade de fertilização e atividade enzimática da catalase no plasma seminal. A análise resultante pode concluir que a presença de antioxidante melhora a viabilidade do leite frio, especialmente as condições de transporte, e os antioxidantes permitem a fecundidade apesar da diminuição da motilidade.

Dependence between behavioural acts and sperm parameters of boars of modern and local breeds of Ukraine

This study aimed to investigate the relationship between behavioural activities and sperm parameters in modern and local breeds of Ukrainian boars. Visual observations were conducted on 30 boars, aged 12 and 24 months, with five boars from each of the following breeds: Large White, Landrace, Ukrainian Meat, Pietrain, intrabreed type of Duroc breed of Ukrainian selection "Steppovyi", and the terminal line "Maxter". Behaviours such as rest, movement, feed, and water intake during 24 hours were recorded. Semen samples were manually collected from each boar and evaluated for quantitative and qualitative indicators of sperm quality and fertilizing capacity according to the "Instructions for Artificial Insemination of Pigs", which included parameters such as ejaculate volume, sperm concentration in the ejaculate, percentage of correctly motile spermatozoa, survival of spermatozoa, and fertilizing ability of boars. The study found that certain behavioural activities significantly influenced the qualitative and quantitative indicators of sperm parameters in boars of different breeds. Specifically, time spent on rest and movement, as well as the index of movement activity (at 12 months of age), significantly (P < 0.05) influenced ejaculate volume, sperm concentration, and the percentage of correctly motile spermatozoa. Moreover, the effect of these behavioural acts on ejaculate volume had a curvilinear character. On the other hand, the survival of spermatozoa and fertilizing ability of boars were mainly determined by their time spent on feed and water intake (at 24 months of age), and the relationship detected in this case was asymptotic.

Ozonioterapia, PRP, fitoterapia, misoprostol e imunomodulação: Novas abordagens terapêuticas para a solução de velhos problemas / Ozone therapy, PRP, phytotherapy, misoprostol and immunomodulation: New therapeutic approaches to solving old problems

A resistência aos antimicrobianos representa uma ameaça sanitária global crescente, que deve ser abordada com urgência na saúde pública, na produção animal, agrícola e no meio ambiente. Essa circunstância põe em risco a eficiência do tratamento e diminui a eficácia contra infecções causadas pelos mais diversos agentes etiológicos, resultando em enfermidades mais prolongadas afetando diretamente os índices de fertilidade. Dessa forma, o objetivo dessa revisão foi abordar diferentes formas terapêuticas para sub/infertilidade em equinos, com o intuito de minimizar os problemas acarretados pelo uso indiscriminado de fármacos, relatando novas terapias alternativas, tais como ozonioterapia, plasma rico em plaquetas, uso de prostaglandina E1 e imunomoduladores na tentativa de solucionar velhos problemas.(AU)

Antimicrobial resistance represents a growing global health threat that must be urgently addressed in public health, animal production, agriculture and the environment. This circumstance jeopardizes the efficiency of the treatment and decreases the effectiveness against infections caused by the most diverse etiological agents, resulting in more prolonged illnesses, directly affecting fertility rates. Thus, the objective of this review was to address different therapeutic forms for sub/infertility in horses, with the aim of minimizing the problems caused by the indiscriminate use of drugs, reporting new alternative therapies, such as ozone therapy, platelet-rich plasma, use of prostaglandin E1 and immunomodulators in an attempt to solve old problems.(AU)

Immune response dynamics of recent and chronic small ruminant lentivirus infection in the male reproductive system / Dinâmica da resposta imunológica da infecção recente e crônica por lentivírus de pequenos ruminantes no sistema reprodutor de machos

The objective of this study was to analyze the immune responses of bucks to small ruminant lentivirus (SRLV) with a focus on the reproductive system of males with recent and chronic infection. A total of 12 bucks were selected, six seronegative and six seropositive with chronic natural infection for more than 18 months (chronic infection group). After selecting the animals, the six seronegative males were intravenously inoculated with caprine arthritis-encephalitis virus (CAEV)-Co viral strain at a titer of 10-5,6 TCID50/mL. After viral inoculation, this group was called the recent infection group and was monitored weekly with the chronically infected group for 180 days with blood serum and seminal plasma Western Blot (WB) analysis. Of the animals with chronic SRLV infection, 18.94% (50/264) showed anti-SRLV antibodies in at least one of the samples, and 81.06% (214/264) were negative. Anti-SRLV antibodies were detected in 27.27% (36/132) of the blood serum samples from this group, while 10.60% (14/132) were reactive in the seminal plasma WB test. The animals inoculated with CAEV-Co became seropositive after the third week of viral inoculation. In this group, 31.06% (41/132) of seminal plasma samples had anti-SRLV antibodies, and of these, 70.73% (29/41) coincided with blood serum results. Of the remaining 29.27% (12/41), the seminal plasma sample of only three animals (RIA2, RIA3, and RIA5) had anti-SRLV antibodies. One of the animals with a recent infection presented anti-SRLV antibodies only in seminal plasma samples, possibly due to virus compartmentalization. Intermittent viral shedding was observed in both biological samples, regardless of the infection stage. The immune response in bucks with recent SRLV infection is more significant than in chronically infected animals. Regardless of the stage of infection, there is a fluctuation in antibody levels, therefore, this creates a risk of false-negative samples when performing the diagnosis.

O objetivo desse estudo foi analisar a resposta imunológica aos lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR) com enfoque no sistema reprodutor de machos com infecção recente e crônica. Para isso, foram selecionados 12 reprodutores caprinos, sendo seis soronegativos e seis soropositivos com infecção natural crônica há mais de 18 meses (grupo com infecção crônica). Após seleção dos animais, os seis machos soronegativos foram inoculados com a cepa viral do vírus da artrite encefalite caprina (CAEV)-Co, título 10-5,6 TCID50/mL, por via intravenosa. A partir da inoculação viral este agrupamento passou a ser denominado de grupo com infecção recente e juntamente com o grupo com infecção crônica foram acompanhados, semanalmente por 180 dias, com análise dos testes de Western Blot (WB) no soro sanguíneo e plasma seminal. Nos animais com infecção crônica para LVPR, 18,94% (50/264) apresentaram anticorpos anti-LVPR em pelo menos uma das distintas amostras, e 81,06% (214/264) tiveram resultados negativos. Das amostras de soro sanguíneo do referido grupo, em 27,27% (36/132) detectou-se anticorpos anti-LVPR, enquanto que no plasma seminal 10,60% (14/132) foram reagentes no teste de WB. Nos animais inoculados com o CAEV-Co, ocorreu a soroconversão após a terceira semana da inoculação viral. Nesse grupo, 31,06% (41/132) das amostras de plasma seminal tiveram anticorpos anti-LVPR, sendo que dessas 41, 70,73% (29/41) coincidiram com resultado das amostras de soro sanguíneo. Nos 29,27% (12/41) restante, houve a detecção somente no plasma seminal e eram amostras provenientes de três animais (AIR2, AIR3 e AIR5). Em um dos animais com infecção recente, só foi identificado anticorpos anti-LVPR em amostras de plasma seminal, possivelmente em função da compartimentalização do vírus. Intermitência viral foi observada em ambas as amostras biológicas, independentemente do estágio de infecção. Conclui-se que a resposta imunológica em reprodutores com infecção recente LVPR é mais acentuada do que em animais cronicamente infectados. E, independentemente do estágio da infecção há uma flutuação nos níveis de anticorpos, sendo, portanto, um fator de risco, em virtude da existência de amostras falso-negativo ao realizar o diagnóstico.

Hyperhomocysteinemia as an Independent Risk Factor for Coronary Heart Disease. Comparison with Conventional Risk Factors

Abstract The present study was designed to evaluate the strength of association of raised plasma homocysteine concentration as a risk factor for coronary heart disease independent of conventional risk factor. It was a case control study conducted at Punjab Institute of Cardiology Lahore. A total of 210 subjects aged 25 to 60 years comprising of 105 newly admitted patients of CHD as cases and 105 age and sex matched healthy individuals with no history of CHD as control were recruited for the study. Fasting blood samples were obtained from cases and controls. Plasma homocysteine was analyzed by fluorescence polarization immunoassay (FPIA) method on automated immunoassay analyzer (Abbott IMX). Total cholesterol, triglyceride and HDL cholesterol were analyzed using calorimetric kit methods. The concentration of LDL cholesterol was calculated using Friedewald formula. The patients were also assessed for traditional risk factors such as age, sex, family history of CVD, hypertension, smoking and physical activity, and were compared with control subjects. The collected data was entered in SPSS version 24 for analysis and interpretation.The mean age in controls and experimental groups were 43.00± 8.42 years and 44.72± 8.59 years with statistically same distribution (p- value= 0.144). The mean plasma homocysteine for cases was 22.33± 9.22 µmol/L where as it was 12.59±3.73 µmol/L in control group. Highly significant difference was seen between the mean plasma level of homocysteine in cases and controls (p0.001).Simple logistic regression indicates a strong association of coronary heart disease with hyperhomocysteinemia (OR 7.45), which remained significantly associated with coronary heart disease by multivariate logistic regression (OR 7.10, 95%C1 3.12-12.83, p=0.000). The present study concludes that elevated levels of Plasma homocysteine is an independent risk factor for coronary heart disease independent of conventional risk factors and can be used as an indicator for predicting the future possibility for the onset of CVD.

Resumo O presente estudo foi desenhado para avaliar a força da associação da concentração elevada de homocisteína no plasma como um fator de risco para doença cardíaca coronária independente do fator de risco convencional. Foi um estudo de caso-controle realizado no Punjab Institute of Cardiology Lahore. Um total de 210 indivíduos com idade entre 25 e 60 anos, compreendendo 105 pacientes recém-admitidos de CHD como casos e 105 indivíduos saudáveis pareados por idade e sexo sem histórico de CHD como controle, foi recrutado para o estudo. Amostras de sangue em jejum foram obtidas de casos e controles. A homocisteína plasmática foi analisada pelo método de imunoensaio de polarização de fluorescência (FPIA) em analisador de imunoensaio automatizado (Abbott IMX). Colesterol total, triglicerídeos e colesterol HDL foram analisados usando métodos de kit calorimétrico. A concentração de colesterol LDL foi calculada pela fórmula de Friedewald. Os pacientes também foram avaliados para fatores de risco tradicionais, como idade, sexo, história familiar de DCV, hipertensão, tabagismo e atividade física, e foram comparados com indivíduos de controle. Os dados coletados foram inseridos no SPSS versão 24 para análise e interpretação. A média de idade nos grupos controles e experimentais foi de 43,00 ± 8,42 anos e 44,72 ± 8,59 anos com distribuição estatisticamente igual (p-valor = 0,144). A homocisteína plasmática média para os casos foi de 22,33 ± 9,22 µmol / L, enquanto no grupo controle foi de 12,59 ± 3,73 µmol / L. Diferença altamente significativa foi observada entre o nível plasmático médio de homocisteína em casos e controles (p 0,001). A regressão logística simples indica uma forte associação de doença cardíaca coronária com hiper-homocisteinemia (OR 7,45), que permaneceu significativamente associada com doença cardíaca coronária por multivariada regressão logística (OR 7,10, 95% C1 3,12-12,83, p = 0,000). O presente estudo conclui que níveis elevados de homocisteína plasmática são fator de risco independente para doença cardíaca coronária, independentemente dos fatores de risco convencionais, e pode ser usado como um indicador para prever a possibilidade futura de aparecimento de DCV.

Spectrophotometric method for determination of Colossoma macropomum (tambaqui) sperm concentration / Determinação da concentração espermática de tambaqui (Colossoma macropomum) por espectrofotometria

To assist the reproductive management of tambaqui (Colossoma macropomum) males in laboratory and commercial fish farming, a linear regression model was obtained from concentration curves using the spectrophotometric method. Twenty-two tambaqui males with an average age of three years old were selected and divided into two groups containing 11 animals each. Both groups alternately received a single dose of carp pituitary extract (CPE; 2.0 mg/kg body weight, intracoelomic). Sperm was collected 14 h after hormonal treatment and diluted (1:4000; sperm:formaldehyde saline). The concentration was estimated by counting spermatozoa in a Neubauer chamber and by using a spectrophotometer (λ=540 nm). Individual sperm concentration ranged from 11.40 to 71.13 × 109 sperm/mL. The degree of transmittance ranged from 62.1% to 95.0%. There was a significant correlation (r2 = 0.966; p < 0.0001) between sperm concentration analyzed in a Neubauer chamber and transmittance at 540 nm. Analysis by spectrophotometry and the prediction provided by the equation Y=100.293 - 0.509X proved to be an efficient and fast method for estimating sperm concentration in tambaqui and can be used in routine procedures in artificial fish reproduction laboratories.

Visando auxiliar o manejo reprodutivo de machos de tambaqui (Colossoma macropomum) em piscicultura de laboratório e comercial, obteve-se um modelo de regressão linear a partir de curvas de concentração por método espectrofotométrico. Foram selecionados 22 machos de tambaqui com idade média de três anos. Eles foram divididos em dois grupos contendo 11 animais cada. Ambos os grupos receberam alternadamente uma única dose de extrato de hipófise de carpa (EHC; 2,0 mg/kg de peso corporal, intracelomático). O esperma foi coletado 14 horas após o tratamento hormonal e diluído (1:4000; esperma: solução salina formaldeído). A concentração foi estimada por contagem de espermatozoides em câmara de Neubauer e por espectrofotômetro (λ=540 nm). A concentração espermática individual variou de 11,40 a 71,13 × 109 espermatozoides/mL. O grau de transmitância variou de 62,1 a 95,0%. Houve correlação significativa (r2 = 0,966; p < 0,0001) entre a concentração espermática analisada em câmara de Neubauer e a transmitância em 540 nm. A análise por espectrofotometria e a predição pela equação Y=100,293 - 0,509X mostrou ser um método eficiente e rápido para estimar a concentração espermática de tambaqui, podendo ser utilizado em procedimentos de rotina em laboratórios de reprodução artificial de peixes.

Semen collection using electroejaculation and sperm parameters in pacas (Cuniculus paca, Linnaeus, 1766) / Coleta de sêmen com uso da eletroejaculação e parâmetros espermático em pacas (Cuniculus paca, Linnaeus, 1766)

Pacas (Cuniculus paca) are highly hunted animals because of the flavor of their meat, and commercial breeding is recommended. However, this species has a relatively low reproductive rate. This study aimed to collect semen from pacas through electroejaculation and obtain the sperm parameters of this species for the first time. Seven male pacas were used, submitted to an anesthetic protocol before stimulation by an electroejaculator appropriate for the species. The stimulus protocol was performed in three series: series I, 10 stimuli with 1 and 2 V; series II, 10 stimuli with 3 and 4 V; and series III, 10 stimuli with 5 V and interval between series of 2 s. The collected material was evaluated for color, volume, motility, vigor, and concentration. The sperm parameters collected showed a mean volume of 0.43±0.33 mL, concentration of 45.5±42.44×106 sperm/mL, motility of 33.33±32.14%, and mean vigor of 2.6±1.15. In this study, the anesthetic protocol did not seem to favor semen collection by electroejaculation in the pacas. The electrical stimulation protocol was able to stimulate all animals in the study; however, there were few samples with sperm cells and a low rate of motility and vigor in most ejaculates.

Pacas (Cuniculus paca) são animais altamente caçados devido ao sabor de sua carne, sendo a criação comercial delas, recomendada. Entretanto, é uma espécie com baixa taxa reprodutiva. O objetivo deste estudo foi efetuar coleta de sêmen em pacas por meio da eletroejaculação e da obtenção, pela primeira vez, dos parâmetros espermáticos dessa espécie. Foram utilizadas sete pacas machos, as quais, antes dos estímulos por eletroejaculador apropriado para a espécie, foram submetidas a protocolo anestésico. O protocolo de estímulo foi realizado em três séries: série I, 10 estímulos com 1 e 2V; série II, 10 estímulos com 3 e 4V; série III, 10 estímulos com 5V, e intervalo entre as séries de dois segundos. O material coletado foi avaliado quanto à cor, ao volume, à motilidade, ao vigor e à concentração. Os parâmetros espermáticos coletados demonstraram volume médio de 0,43±0,33mL, concentração de 45,5±42,44x106 espermatozoides/mL, motilidade de 33,33±32,14% e vigor médio de 2,6±1,15. Neste estudo, o protocolo anestésico parece não ter favorecido a coleta de sêmen por eletroejaculação em pacas. Entretanto, o protocolo de estímulos elétricos foi capaz de estimular todos os animais do estudo. Assim, chegou-se ao resultado de poucas amostras com a presença de células espermáticas, bem como baixo índice de motilidade e vigor na maioria dos ejaculados.

Canine sperm vitrification with nonpermeable cryoprotectants and coconut water extender

This study was aimed to assess the efficiency of coconut water extender with addition of soy lecithin and sucrose as nonpermeable cryoprotectants for canine semen vitrification, using a simple method that yields a high survival rate of spermatozoa for clinical use. Twelve ejaculates from 12 adult normozoospermic dogs were collected separately by digital manipulation and only the second semen fraction was used in this study. After evaluation of volume, concentration, viability, total and progressive motility, velocity parameters and morphology, semen was diluted with a coconut water extender (50% (v/v(volume per volume)) coconut water, 25% (v/v) distilled water and 25% (v/v) 5% anhydrous monosodium citrate solution) with addition of soy lecithin and fructose at 1% and 0.25M sucrose until final concentration of 100x106 spermatozoa/ml. After equilibration at 5ºC for 60 minutes, semen was vitrified by "direct dropping method" into liquid nitrogen in spheres with a volume of 30 µl. After a week of storage the spheres were devitrified as three of them were dropped into 0.5 mL of CaniPlus AI medium (Minitüb, Germany), which was previously warmed in a water bath at 42ºC for 2 minutes and evaluated about the above mentioned parameters. It was found that vitrification resulted in a lower percentage of viable sperms, normal morphology, total and progressive motilities (p0.05) compared to fresh semen samples. In conclusion, our results demonstrate that vitrification with coconut water extender with addition of 1% soy lecithin and 0.25M sucrose as cryoprotectants, has an excellent potential for routine canine sperm cryopreservation.(AU)

Use of antioxidants and time of cold storage: effects over viability parameters and enzymatic levels in semen of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum, 1792) / Uso de antioxidantes e tempo de armazenamento a frio: efeitos sobre parâmetros de viabilidade e níveis enzimáticos no sêmen da truta arco-íris (Oncorhynchus mykiss, Walbaum, 1792)

The cold storage of milt implies potentials alterations in its quality because the storage generates as main process, free radicals that produce spermatozoa membrane lipids damage with the consequent motility and fertilising capacity disruptions. To decrease the damage generated by free radicals the cells have antioxidant defences (proteins, enzymes, and low molecular weight substances). The objective of the present study evaluated the time storage effect and different antioxidants prepared in spermatic diluents on sperm viability of O. mykiss milt stored at 4°C. The two-way ANOVA denoted that the time storage and antioxidant influence have significant effects separated or combined on viability parameters (sperm motility and viability, proteins concentrations and superoxide dismutase enzymatic activity in seminal plasma). In contrast, only the storage time affected the fertilising capacity and catalase enzymatic activity in seminal plasma. The resulting analysis can conclude that the antioxidant presence improves the viability of cold stored milt, especially the transport conditions and the antioxidants allow the fecundity despite motility decrease.

O armazenamento a frio de leite implica potenciais alterações em sua qualidade, pois gera como processo principal radicais livres que provocam danos aos lipídios da membrana dos espermatozoides, com as consequentes alterações na motilidade e na capacidade de fertilização. Para diminuir os danos causados pelos radicais livres, as células têm defesas antioxidantes (proteínas, enzimas e substâncias de baixo peso molecular). O presente estudo avaliou o efeito do tempo de armazenamento e diferentes antioxidantes preparados em diluentes espermáticos no armazenamento de viabilidade de O. mykiss milt a 4°C. A ANOVA de duas vias denotou que o armazenamento no tempo e a influência antioxidante têm efeitos significativos separados ou combinados nos parâmetros de viabilidade (motilidade espermática, viabilidade espermática, concentrações de proteínas e atividade enzimática da superóxido dismutase no plasma seminal), enquanto apenas o tempo de armazenamento afetou a capacidade de fertilização e atividade enzimática da catalase no plasma seminal. A análise resultante pode concluir que a presença de antioxidante melhora a viabilidade do leite frio, especialmente as condições de transporte, e os antioxidantes permitem a fecundidade apesar da diminuição da motilidade.

Use of antioxidants and time of cold storage: effects over viability parameters and enzymatic levels in semen of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum, 1792) / Uso de antioxidantes e tempo de armazenamento a frio: efeitos sobre parâmetros de viabilidade e níveis enzimáticos no sêmen da truta arco-íris (Oncorhynchus mykiss, Walbaum, 1792)

The cold storage of milt implies potentials alterations in its quality because the storage generates as main process, free radicals that produce spermatozoa membrane lipids damage with the consequent motility and fertilising capacity disruptions. To decrease the damage generated by free radicals the cells have antioxidant defences (proteins, enzymes, and low molecular weight substances). The objective of the present study evaluated the time storage effect and different antioxidants prepared in spermatic diluents on sperm viability of O. mykiss milt stored at 4°C. The two-way ANOVA denoted that the time storage and antioxidant influence have significant effects separated or combined on viability parameters (sperm motility and viability, proteins concentrations and superoxide dismutase enzymatic activity in seminal plasma). In contrast, only the storage time affected the fertilising capacity and catalase enzymatic activity in seminal plasma. The resulting analysis can conclude that the antioxidant presence improves the viability of cold stored milt, especially the transport conditions and the antioxidants allow the fecundity despite motility decrease.(AU)

O armazenamento a frio de leite implica potenciais alterações em sua qualidade, pois gera como processo principal radicais livres que provocam danos aos lipídios da membrana dos espermatozoides, com as consequentes alterações na motilidade e na capacidade de fertilização. Para diminuir os danos causados pelos radicais livres, as células têm defesas antioxidantes (proteínas, enzimas e substâncias de baixo peso molecular). O presente estudo avaliou o efeito do tempo de armazenamento e diferentes antioxidantes preparados em diluentes espermáticos no armazenamento de viabilidade de O. mykiss milt a 4°C. A ANOVA de duas vias denotou que o armazenamento no tempo e a influência antioxidante têm efeitos significativos separados ou combinados nos parâmetros de viabilidade (motilidade espermática, viabilidade espermática, concentrações de proteínas e atividade enzimática da superóxido dismutase no plasma seminal), enquanto apenas o tempo de armazenamento afetou a capacidade de fertilização e atividade enzimática da catalase no plasma seminal. A análise resultante pode concluir que a presença de antioxidante melhora a viabilidade do leite frio, especialmente as condições de transporte, e os antioxidantes permitem a fecundidade apesar da diminuição da motilidade.(AU)

Use of convalescent plasma to treat COVID-19: case studies / Uso de plasma convalescente para tratar COVID-19: estudos de caso

There have been several efforts to minimize the effects caused by the COVID-19 virus around the world. Vaccines were developed in record time and alternative therapies were studied and applied in several countries, such as the use of plasma from recovered patients. Identifying, systematically evaluating and summarizing the best available scientific evidence on the efficacy and safety of using plasma from recovered COVID-19 patients remains the objective of this study. The studies carried out showed that the application of convalescent plasma contributes to the reduction of mortality, viral load and length of hospital stay. However, the effectiveness of the therapy still raises doubts due to the number of patients evaluated in clinical studies, in addition to its high cost and limitations in terms of availability and implementation, with the drug being authorized only for hospital use.

Houve vários esforços para minimizar os efeitos causados pelo vírus COVID-19 em todo o mundo. As vacinas foram desenvolvidas em tempo recorde e terapias alternativas foram estudadas e aplicadas em vários países, como o uso de plasma de pacientes recuperados. Identificar, avaliar sistematicamente e resumir as melhores evidências científicas disponíveis sobre a eficácia e segurança do uso de plasma de pacientes recuperados com COVID-19 continua sendo o objetivo deste estudo. Os estudos realizados mostraram que a aplicação de plasma convalescente contribui para a redução da mortalidade, carga viral e tempo de internação hospitalar. No entanto, a eficácia da terapia ainda gera dúvidas devido ao número de pacientes avaliados em estudos clínicos, além de seu alto custo e limitações em termos de disponibilidade e implementação, sendo o medicamento autorizado apenas para uso hospitalar.

The Influence of porcine parity on colostrum cytokine levels and their passive transfer to piglets / A influência da paridade suína na diferença dos níveis de citocinas no colostro e na transferência passiva para leitões

The limited ability of newborn piglets to produce cytokines may influence lymphocyte development and response to antigen exposure. As a result, colostrum intake is crucial because it contains nutrients that contribute to immune system development in piglets. Our goal was to investigate the effect of sow parity on the transfer of maternal cytokines to nursing piglets. Sixty piglets from nine sows were divided into six groups: piglets from gilts or sows kept with their dams and allowed to suckle normally; piglets from gilts or sows having their dams exchanged and then allowed to suckle normally; piglets from gilts or sows isolated from their dams and bottle-fed a commercial milk replacer formula for pigs. All piglets remained in the diet groups for 24 hours after birth. Concentrations of cytokines in colostrum and serum of gilt/ sows and serum of piglets were then evaluated. The 13 evaluated cytokines had higher concentrations in colostrum and serum of sows than in gilts. Concentrations of GM-CSF, IFNγ, IL-1α, IL-1ß, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, IL-18, and TNFα were higher in piglets suckling sows. Piglets that received commercial formula showed higher concentrations of the cytokines IL1-RA and IL-8 than piglets fed colostrum. This outcome can influence piglets' development into adulthood. In short, our findings demonstrated that maternal parity influenced colostrum cytokine composition and its maternal transfer patterns.(AU)

A capacidade limitada dos leitões recém-nascidos de produzir citocinas pode influenciar o desenvolvimento de linfócitos e a resposta à exposição ao antígeno. Portanto, a ingestão de colostro é importante porque contém nutrientes, que contribuem para o desenvolvimento do sistema imunológico do leitão. O objetivo do estudo foi investigar o efeito da paridade da porca na transferência de citocina materna para leitões lactentes. Sessenta leitões de nove porcas foram divididos em seis grupos: leitões de marrãs/porcas mantidas com suas próprias mães e amamentadas normalmente; leitões de marrãs/porcas que foram trocados de mães e amamentados normalmente; leitões de marrãs/porcas que foram isolados das mães e alimentados com mamadeira com substituto do leite para suínos. Os leitões permaneceram nos grupos por 24 horas após o nascimento. Foram avaliadas as concentrações de citocinas no colostro e plasma das marrãs/porcas e no plasma dos leitões. O colostro e o plasma das porcas apresentaram maiores concentrações das 13 citocinas analisadas do que as marrãs. No mesmo sentido, as concentrações de GM-CSF, IFNγ, IL-1α, IL-1ß, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, IL-18 e TNFα foram significantemente maiores nos leitões que mamaram o colostro de porcas. Os leitões que receberam fórmula comercial apresentaram, em especial, concentrações das citocinas IL1-RA e IL-8 superiores aos leitões amamentados com colostro. Isso pode influenciar o desenvolvimento até a fase adulta. Portanto, nossos dados demonstraram que a paridade materna influenciou a composição das citocinas do colostro, bem como as características das citocinas na transferência materna.(AU)

Physical and Semen Characteristics of Mexican Creole Roosters in Summer and Autumn, at 19° North Latitude with a Constant Photoperiod

The objective of this study was to evaluate the effect of the seasons (Summer and Autumn), on live weight, body condition, mass motility, percentage of live spermatozoa, and sperm-cell concentration of Creole roosters (Gallus domesticus) from Mexico. Semen from 35-week-old Creole roosters was collected weekly during 10 weeks in Summer and Autumn, through the dorso-abdominal massage technique. Roosters were individually kept under a constant photoperiod (16 hours light:8 hours dark). The average live weight was 4.5% higher (p<0.05) in Autumn (2.78 kg) than in Summer (2.66 kg), therefore this variable increased with age (r = 0.85, p<0.05). Category 2 of body condition occurred (p<0.05) with higher probability than the others (0, 1 and 3), being practically the same (p>0.05) in Autumn (99.96%) and in Summer (99.81%). On average (and in weeks 1 and 3-10), the percentage of live spermatozoa was higher in Summer than in Autumn. Accordingly, the percentage of live spermatozoa decreased with age (r = -0.82, p<0.05). However, on average, sperm-cell concentration did not change between seasons (p>0.05). In conclusion, Mexican Creole roosters showed higher percentage of live spermatozoa in Summer than in Autumn. Therefore, it is advisable to select these animals of about 2.7 kg and reproduce them in Summer.(AU)

Dimethyl acetamide and dimethyl sulfoxide associated at glucose and egg yolk for cryopreservation of Pseudoplatystoma corruscans semen

This study aimed to develop a protocol for the cryopreservation of Pseudoplatystoma corruscans semen. For this, mature males were hormonally induced with a single dose of carp pituitary extract (5 mg/kg body weight). Semen was collected and evaluated. Two cryoprotectants were tested to compose the diluents: dimethyl acetamide (DMA) and dimethyl sulfoxide (Me2SO), in two concentrations (8% and 10%), + 5.0% glucose + 10% egg yolk. The semen was diluted in a 1: 4 ratio (semen: extender), packed in 0.5 mL straws and frozen in a dry shipper container in liquid nitrogen vapors. After thawing, sperm kinetics, sperm morphology and DNA integrity of cryopreserved sperm were evaluated. Pseudoplatystoma corruscans males produced semen with sperm motility > 80%. After thawing, all treatments provided semen with total sperm motility > 40%, with no significant difference (P < 0.05) between them, as well as between the other sperm kinetic parameters evaluated. The treatments with DMA provided a smaller fragmentation of the DNA of the gametes. Sperm malformations were identified in both fresh and cryopreserved semen, with a slight increase in these malformations being identified in sperm from thawed P. corruscans semen samples.(AU)

Este estudo teve como objetivo desenvolver um protocolo para a criopreservação do sêmen de Pseudoplatystoma corruscans. Para tal, machos maduros foram induzidos hormonalmente com uma dose única de extrato de hipófise de carpa (5 mg/kg de peso vivo). O sêmen foi coletado e avaliado. Sendo testados para compor os diluentes, dois crioprotetores: dimetil acetamida (DMA) e dimetil sulfóxido (Me2SO), em duas concentrações (8% e 10%), + 5,0% glicose + 10% gema de ovo. O sêmen foi diluído na proporção 1: 4 (sêmen: extensor), embalado em palhetas de 0,5 mL e congelado em container dryshipper em vapores de nitrogênio líquido. Após o descongelamento, foram avaliados os aspectos cinéticos espermáticos, a morfologia espermática e a integridade do DNA dos espermatozoides criopreservados. Os machos de P. corruscans produziram sêmen com motilidade espermática > 80%. Todos os tratamentos proporcionaram após o descongelamento sêmen com motilidade espermática total > 40%, sem diferença significativa (P < 0,05) entre eles, como também entre os demais parâmetros cinéticos espermáticos avaliados. Os tratamentos com DMA proporcionaram uma menor fragmentação do DNA dos gametas. Malformações espermáticas foram identificadas, tanto no sêmen fresco, como no criopreservado, sendo identificado um aumento discreto dessas malformações nos espermatozoides das amostras de sêmen descongeladas de P. corruscans.(AU)

Comparison of efficiency between two artificial insemination methods using fresh semen in domestic cat (Felis Catus) / Comparação da eficiência entre dois métodos de inseminação artificial utilizando sêmen fresco em gata doméstica (Felis Catus)

This study aimed to compare domestic cats' pregnancy rates using fresh semen for the bilateral intrauterine insemination (BIUI) method and the novel uterine body insemination (UBI) method. Queens received a single injection of equine chorionic gonadotropin (eCG) (200 IU; IM) to induce ovarian follicular development and, after 83 h, an injection of human chorionic gonadotropin (hCG) (100 IU; IM) for final oocyte maturation and ovulation induction. Thirty-four hours after hCG administration, 3 × 106fresh spermatozoa were used for insemination by the BIUI (n = 8 queens) or by the UBI (n = 7 queens) techniques,respectively. Pregnancy rates were 75.00% (6/8) by BIUI and 42.85% (3/7) by the UBI method. Themean litter size was 3.0 ± 0.86 for the BIUI, and 2.0 ± 1.0 for the UBI method. Spontaneous abortion occurred on day 35 of pregnancy in one queen following the UBI method. Our findings showed that the BIUI of queens with fresh semen resulted in higher pregnancy rates than the novel UBI method; also, acceptable pregnancy rates were achieved following BIUI with fresh semen in the domestic cat.(AU)

O objetivo deste estudo foi comparar as taxas de prenhez em gatas domésticas usando sêmen fresco para o método de inseminação intrauterina bilateral (BIUI) e o novo método de inseminação do corpo uterino (UBI). As gatas receberam uma única injeção de gonadotrofina coriônica equina (eCG) (200 UI; IM) para induzir o desenvolvimento folicular ovariano e, após 83 h, uma injeção de gonadotrofina coriônica humana (hCG) (100 UI; IM) para maturação final do oócito e ovulação indução. Trinta e quatro horas após a administração de hCG, 3 × 106 espermatozoides frescos foram utilizados para inseminação pelas técnicas de BIUI (n = 8 gatas) ou UBI (n = 7 gatas), respectivamente. As taxas de gravidez foram de 75,00% (6/8) pela BIUI e 42,85% (3/7) pelo método UBI. O tamanho médio da ninhada foi de 3,0 ± 0,86 para o método BIUI e 2,0 ± 1,0 para o método UBI. Aborto espontâneo ocorreu no dia 35 de gestação em uma gata seguindo o método UBI. Nossos achados mostraram que a BIUI de gatas com sêmen fresco resultou em maiores taxas de prenhez do que o novo método UBI; também, taxas de prenhez aceitáveis foram alcançadas após BIUI com sêmen fresco no gato doméstico.(AU)

Chemical elements in sediments and in bivalve mollusks from estuarine regions in the south of Bahia State, northeast Brazil

Abstract Estuaries receive daily inputs of chemical elements which can impact the quality of water and sediment, as well as the health of biota. In addition to the sediment, bivalve mollusks have been used in the chemical monitoring of these systems. This study investigated the presence and contents of As, Ba, Cd, Co, Cr, Cu, Fe, Mn, Ni, Pb and Zn in superficial sediment and in bivalves (Crassostrea gasar, C. rhizophorae and Mytella guyanensis) from estuaries in the south / extreme south of Bahia State, northeast Brazil. The samples were evaluated with inductively coupled plasma optical emission spectrometry (ICP-OES, Varian 710). Except for Cd, all other elements were found in the samples, being that Co was exclusive in the sediment. The estuaries equivalent to sampling stations /1 - Valença, /2 - Taperoá, /3 - Ilhéus and /4 - Belmonte showed levels of metals compatibles with those established by the Brazilian legislation, however, the /5 - Santa Cruz Cabrália, in addition to the presence of As, presented a high level of Pb and Cu in C. gasar, which was attributed to the impacts of nautical activities in that locality.

Resumo Estuários recebem entradas diárias de elementos químicos, que podem impactar a qualidade de água e do sedimento, assim como a saúde da biota. Além do sedimento, moluscos bivalves têm sido utilizados no monitoramento químico desses sistemas. Neste estudo investigou-se a presença e os teores de As, Ba, Cd, Co, Cr, Cu, Fe, Mn, Ni, Pb e Zn no sedimento superficial e em bivalves (Crassostrea gasar, C. rhizophorae e Mytella guyanensis) de estuários do sul / extremo sul do estado da Bahia, Nordeste do Brasil. As amostras foram avaliadas por espectrometria de emissão óptica de plasma indutivamente acoplado (ICP-OES, Varian 710). Exceto Cd, todos os demais elementos foram encontrados nas amostras, sendo que Co foi exclusivo no sedimento. Os estuários equivalentes às estações amostrais /1 - Valença, /2 - Taperoá, /3 - Ilhéus e /4 - Belmonte mostraram níveis de metais compatíveis com os estabelecidos pela legislação brasileira, porém, a /5 - Santa Cruz Cabrália, além da presença de As, apresentou alto nível de Pb e de Cu em C. gasar, o que foi atribuído aos impactos por atividades náuticas nesse local.