Effect of 10% Proanthocyanidin gel on demineralized organic matrix degradation: ELISA method / Efeito do gel de Proantocianidina a 10% na degradação da matriz orgânica desmineralizada: método ELISA

Objective: This study evaluated Proanthocyanidin protective effect on dentin subjected to erosion and its inhibition on degradation of the demineralized organic matrix (DOM). Material and Methods: The tested groups were: G1 - 10% Proanthocyanidin gel (test group), G2 - 1.23% NaF (positive control 1), G3 - 0.012% Chlorhexidine (positive control 2) and G4 ­ Placebo (negative control with no active compound) and two methodologies were performed: contact profilometry and ICTP ELISA method. To quantify dentin wear, profilometry was performed. Data were submitted to Analysis of Variance followed by Fisher's LSD Test. To assess the collagen degradation, ICTP ELISA method was performed. Data were submitted to the Kruskal-Wallis followed by the Dunn ́s test. Simple linear regression and Pearson Correlation test were also performed (p<0.05). Results: The profilometry showed significantly lower wear of G1 when compared to other groups and G2, G3 and G4, which did not present significant difference among them. In the ICTP ELISA analysis, G1 and G4 did not show significant differences and the same happened between G2 and G3. However, G1 and G4 had lower values of collagen degradation compared to groups G2 and G3. Data showed that degraded DOM is a significant predictor to explain the values obtained through the ICTP ELISA. Conclusions: The results allow to verify that 10% proanthocyanidin provided less tooth wear and decreased degradation of the DOM, suggesting a good ability to prevent dentin erosion. The regression analysis also suggests that contact profilometry is a good strategy to quantify dentin wear (AU)

Objetivo: Este estudo avaliou o efeito protetor da proantocianidina na dentina submetida à erosão e sua inibição na degradação da matriz orgânica desmineralizada (MOD). Material e Métodos: Os grupos testados foram: G1 - gel de Proantocianidina 10% (grupo teste), G2 - NaF 1,23% (controle positivo 1), G3 - Clorexidina 0,012% (controle positivo 2) e G4 - Placebo (controle negativo sem princípio ativo) e duas metodologias foram realizadas: perfilometria de contato e método ICTP ELISA. Para quantificar o desgaste da dentina, a perfilometria foi realizada. Os dados foram submetidos à Análise de Variância seguida do Teste LSD de Fisher. Para avaliar a degradação do colágeno, foi realizado o método ICTP ELISA. Resultados: Os dados foram submetidos ao teste de Kruskal-Wallis seguido do teste de Dunn. Regressão linear simples e teste de correlação de Pearson também foram realizados (p<0,05). A perfilometria mostrou desgaste significativamente menor do G1 quando comparado aos outros grupos e G2, G3 e G4, que não apresentaram diferença significativa entre si. Na análise ICTP ELISA, G1 e G4 não apresentaram diferenças significativas e o mesmo ocorreu entre G2 e G3. No entanto, G1 e G4 apresentaram valores menores de degradação do colágeno em relação aos grupos G2 e G3. Os dados mostraram que a MOD degradada é um preditor significativo para explicar os valores obtidos pelo ICTP ELISA. Conclusão: Os resultados permitem verificar que a proantocianidina a 10% proporcionou menor desgaste dentário e diminuição da degradação da MOD, sugerindo uma boa capacidade de prevenir a erosão dentinária. Também sugere que a perfilometria de contato é uma boa estratégia para quantificar o desgaste da dentina (AU)

Phosphoric acid containing proanthocyanidin enhances bond stability of resin/dentin interface

Abstract Proanthocyanidin (PA) is a promising dentin biomodifier due to its ability to stabilize collagen fibrils against degradation by matrix metalloproteinases (MMPs); however, the most effective protocol to incorporate PA into bonding procedures is still unclear. This study evaluated the effect of dentin biomodification with a PA acid etchant on MMP activity, adhesive interface morphology and resin-dentin microtensile bond strength. Sound extracted human molars were flattened to expose dentin and acid-etched for 15 s according to the groups: EXP - experimental phosphoric acid; EXP+PA - experimental phosphoric acid 10% PA; TE - total-etching system; SE - self-etching system. Samples were restored with composite resin and stored in distilled water (37ºC). MMP activity and interface morphology were analyzed after 24 h by in situ zymography (n=6) and scanning electron microscopy (n=3), respectively. The resin-dentin microtensile bond strength (μTBS) was evaluated after 24 h and 6 months storage (n=6). Significantly higher MMP activity was detected in etched dentin compared with untreated dentin (p<0.05), but no difference among acid groups was found. Resin tags and microtags, indicative of proper adhesive system penetration in dentinal tubules and microtubules, were observed along the hybrid layer in all groups. There was no difference in μTBS between 24 h and 6 months for EXP+PA; moreover, it showed higher long-term μTBS compared with TE and EXP (p<0.05). The results suggest that 15 s of biomodification was not sufficient to significantly reduce MMP activity; nonetheless, EXP+PA was still able to improve resin-dentin bond stability compared with total- and self-etching commercial systems.

Resumo A proantocianidina (PA) é um biomodificador dentinário promissor devido a sua capacidade de estabilizar as fibrilas colágenas contra a degradação por metaloproteinases da matriz (MMPs); no entanto, o protocolo mais eficaz para a incorporação de PA em procedimentos adesivos ainda não está claro. Este estudo avaliou o efeito da biomodificação da dentina com um condicionador ácido contendo PA na atividade de MMPs, morfologia da interface adesiva e resistência à microtração resina-dentina. Molares humanos extraídos foram lixados para exposição da dentina e condicionados com ácido por 15 s de acordo com os grupos: EXP - ácido fosfórico experimental; EXP+PA - ácido fosfórico experimental com 10% PA; TE - sistema total-etch; SE - sistema self-etch. As amostras foram restauradas com resina composta e armazenadas em água destilada (37ºC). A atividade de MMP e morfologia da interface foram analisadas após 24 h por zimografia in situ (n=6) e microscopia eletrônica de varredura (n=3), respectivamente. A resistência à microtração resina-dentina (μTBS) foi avaliada após 24 horas e 6 meses de armazenamento (n=6). Atividade de MMP detectada na dentina condicionada foi significativamente maior em comparação com a dentina não tratada (p <0,05), mas não houve diferenças entre os diferentes ácidos. Tags e microtags de resina, indicativos de uma penetração adequada do sistema adesivo nos túbulos e microtúbulos dentinários, foram observadas ao longo da camada híbrida em todos os grupos. Não houve diferença entre os valores de μTBS de 24 h e 6 meses para EXP+PA; além disso, EXP+PA apresentou maiores valores de μTBS após 6 meses em comparação com TE e EXP (p <0,05). Os resultados sugerem que a biomodificação por 15 s não foi suficiente para reduzir significativamente a atividade de MMP; apesar disso, EXP + PA foi capaz de melhorar a estabilidade da interface resina-dentina em comparação com sistemas total- e self-etch comerciais.

Comparative analysis on immunity of volleyball players before and after taking grape procyanidins sports supplement / Análise comparativa da função de voleibol em suplemento extra-corpóreo para vegetarianos desportivos / Análisis comparativo de la función de inmunodeficiencia del voleibol utilizado por el suplemento deportivo vitro vegetariano

ABSTRACT Grape proanthocyanidin is a good health product, without side effects and excellent biological activity, but research in the field of sports tonic is still relatively slow. Currently, the technology of preparation and extraction of grape proanthocyanidins is relatively mature. This fact laid the groundwork for sports tonic proanthocyanidin research. This study first described the biological structure of proanthocyanidin in grapes, and built the immune system of volleyball players before and after taking proanthocyanidin sports supplements. He then analyzed the factors that influence immunity. The results show that the primary index subsystem is consistent with the total system in each phase, but there are still few differences over time, which can be divided into four phases: development, recession, recovery and stability; at the level of scientific training it is reasonable. Male and female athletes take exercise supplements containing proanthocyanidin at each level of training. Regarding humoral immunity and cellular immunity, there was no adverse reaction. This study may offer some reference value for other athletes before and after taking proanthocyanidin as a sports supplement.

RESUMO A proantocianidina da uva é um produto bom para a saúde, sem efeitos colaterais e excelente atividade biológica, mas a pesquisa no campo do tônico esportivo ainda é relativamente lenta. Atualmente, a tecnologia de preparação e extração das proantocianidinas de uva está relativamente madura. Este fato lançou as bases para a investigação da proantocianidina desportiva tónica. Este estudo descreveu, em primeiro lugar, a estrutura biológica da proantocianidina das uvas, e construiu o sistema imunitário dos jogadores de voleibol antes e depois de tomar suplementos desportivos de proantocianidina. Em seguida analisou os fatores que influenciam a imunidade. Os resultados mostram que o subsistema de índice primário é coerente com o sistema total em cada fase, mas ainda há poucas diferenças no tempo, que podem ser divididas em quatro fases: desenvolvimento, recessão, recuperação e estabilidade; no plano de formação científico e razoável. Os atletas do sexo masculino e feminino tomam suplementos de exercício contendo proantocianidina em cada estágio de treinamento. Com respeito à imunidade humoral e à imunidade celular não houve reação adversa. Este estudo pode oferecer algum valor de referência para outros atletas antes e depois de tomar proantocianidina como suplemento desportivo.

RESUMEN La proantocianidina de la uva es un producto bueno para la salud, sin efectos colaterales y excelente actividad biológica, pero la investigación en el campo del tónico deportivo aun es relativamente lenta. Actualmente, la tecnología de preparación y extracción de las proantocianidinas de uva está relativamente madura. Este hecho lanzó las bases para la investigación de la proantocianidina deportiva tónica. Este estudio describió, en primer lugar, la estructura biológica de la proantocianidina de las uvas, y construyó el sistema inmunitario de los jugadores de voleibol antes y después de tomar suplementos deportivos de proantocianidina. Enseguida analizó los factores que influencian la inmunidad. Los resultados muestran que el subsistema de índice primario es coherente con el sistema total en cada fase, pero aun hay pocas diferencias en el tiempo, que pueden ser divididas en cuatro fases: desarrollo, recesión, recuperación y estabilidad; en el plano de la formación científica es razonable. Los atletas del sexo masculino y femenino toman suplementos de ejercicio conteniendo proantocianidina en cada nivel de entrenamiento. Con respecto a la inmunidad humoral y a la inmunidad celular no hubo reacción adversa. Este estudio puede ofrecer algún valor de referencia para otros atletas antes y después de tomar proantocianidina como suplemento deportivo.

Collagen cross-linking agents + dimethyl sulfoxide improving the adhesive properties of erosive lesion dentin

Abstract To investigate the effect of the dimethyl sulfoxide combined with cross-linking agents on microtensile bond strength, silver nitrate penetration and in situ degree of conversion analysis of adhesives to the erosive dentin treatment with Cola-based soft drink. One hundred and sixty-six molars were assigned to 20 groups: (1) Treatment: Sound dentin; Erosive dentin; Erosive dentin treated with primer of dimethyl sulfoxide; Erosive dentin treated with DMSO primer containing proanthocyanidin and rivoflavin; (2) Adhesive systems: iBond Universal and Scotchbond Universal; and (3) adhesive strategy: etch-and-rinse or self-etch strategy. After restoration, specimens were sectioned into sticks to be tested. The data from microtensile bond strength (MPa), silver nitrate penetration (%) and in situ degree of conversion (%) were analyzed by (three- and two-factor ANOVA; Tukey's test α=5%). The application of dimethyl sulfoxide combined of not with cross-linkers improved all properties evaluated when compared to only erosive dentin treatment with Cola-based soft drink. However, only when dimethyl sulfoxide was combined to cross-linkers, the values of the microtensile bond strength, silver nitrate penetration and in situ degree of conversion in erosive dentin treatment with Cola-based soft drink was similar to sound dentin, for both adhesives and adhesive strategies. The application of dimethyl sulfoxide combined with the collagen cross-linking agent contributed to increasing the bond strength and degree of conversion in erosive lesion dentin, at the same time that significantly reduction of nanoleakage in this substrate.

Resumo Este estudo investigou o efeito do dimetil sulfóxido combinado a agentes de reticulação de colágeno na resistência de união à microtração, infiltração de nitrato de prata e análise do grau de conversão por Micro-Raman de sistemas adesivos universais para a dentina erosionada por refrigerante a base de Cola. Cento e sessenta molares foram divididos em 20 grupos: (1) Tratamento: Dentina sadia; Dentina erosionada; Dentina erosionada tratada com primer de dimetil sulfóxido; Dentina erosionada tratada com primer contendo 6,5% de proantocianidina e; Dentina erosionada tratada com primer contendo 0,1% de rivoflavina; (2) Sistemas adesivos: iBond Universal e Scotchbond Universal; e (3) estratégia adesiva: estratégia condicionamento e lavagem ou autocondicionate. Após a restauração, os espécimes foram seccionados em palitos e testados. Os dados dos três testes foram analisados estatisticamente (ANOVA de 2 e 3 fatores e teste de Tukey; α = 5%). A aplicação de dimetil sulfóxido combinado ou não agentes de reticulação de colágeno melhorou todas as propriedades avaliadas quando comparado a dentina erosionada. Entretanto, apenas quando o dimetil sulfóxido foi combinado com agentes de reticulação de colágeno, os valores de adesão a dentina, infiltração de nitrato de prata e grau de conversão em dentina erosionada foi semelhante a dentina sadia, para os dois adesivos e estratégias adesivas. A aplicação de dimetil sulfóxido combinado com agentes de reticulação de colágeno contribuiu para aumentar a resistência de união e o grau de conversão dentro da camada híbrida na dentina erodida, ao mesmo tempo que reduziu significativamente a nanoinfiltração neste substrato.

CONTENIDO DE POLIFENOLES, CAPACIDAD ANTIOXIDANTE Y TOXICIDAD DE Solanum ferrugineum (SOLANACEAE) CON POTENCIAL MEDICINAL / Polyphenol content, antioxidant capacity and toxicity of Solanum ferrugineum (Solanaceae) with medicinal potential

RESUMEN Solanum ferruginium es una planta que crece en lugares perturbados como maleza, es de uso medicinal poco utilizada que presenta un gran potencial como fuente de antioxidantes debido a su alto contenido en polifenoles. Debido a esto se analizó el contenido de polifenoles, flavonoides, proantocianidinas y capacidad antioxidante in vitro (ensayo de captación de radicales DPPH) en hojas, tallos y planta completa de tres localidades (Las agujas, Parque el Nabo y Bosque la Primavera) de Zapopan, Jalisco, así como su toxicidad subcronica en hojas. En general se observó diferencia significativa (p≤ 0,05), en las muestras de las tres localidades, las hojas presentaron el mayor contenido de polifenoles (15,3±0,7 a 22±0,4 mg expresado como equivalente de ácido gálico (EAG/g) en muestras de Parque el Nabo, flavonoides (7,8±0,3 a 13,3±0,3 mg EC/g) y proantocianidinas (3,4±0,1 a 4,2±0,05 mg expresado como equivalente de catequina (EC/g) en el Bosque la Primavera. La capacidad antioxidante fue similar en todas las muestras, con valores de 8,3 a 17 μg/mL de concentración media inhibitora (CI50). En la prueba toxicológica, los ratones no mostraron signos de toxicidad a ninguna dosis por efecto de la administración de la planta en estudio, por lo que la dosis letal media (DL50) es > 15 000 mg/kg de peso corporal. El contenido de polifenoles y actividad antioxidante en S. ferruginium sobre todo en hojas indican un alto potencial con propiedades farmacológicas además de su inocuidad, por lo que es importante realizar estudios de sus compuestos fenólicos individuales, antes de ser utilizada en farmacología.

ABSTRACT Solanum ferrugineum is a plant that grows like a weed. It is a new medicinal plant with great potential as an antioxidant source due to its high polyphenol content. Because of this, polyphenol, flavonoid, proanthocyanidin, and antioxidant capacity in vitro (radical scavenging test by DPPH) were analyzed in leaves, stems, and whole plants from three localities (Las agujas, Nabo Park, and La Primavera Forest) as well as the subchronic toxicity evaluation in leaves. In general, there was a significant difference (p≤ 0.05) in all samples from the three localities. The leaves showed the highest polyphenol content (15.3±0.7 to 22±0.4 mg AGE/g) in samples from the Nabo Park, flavonoid (7.8±0.3 to 13.3±0,3 mg CE/g) and proanthocyanidins (3.4±0.1 to 4.2±0.05 mg CE/g) in La Primavera Forest. Antioxidant capacity was similar across all samples, showing values of 8.3 to 17 μg/mL of IC50. During the toxicology assay, animal specimens showed no signs of toxicity to the doses resulting from the administration of the plant under study so that LD50 > 15 000 mg/kg Bodyweight. The polyphenol content and antioxidant capacity obtained from S. ferruginium leaves, together with its safety, indicate a high pharmacological potential of this plant. Therefore, it is important to carry out studies of its phenolic compounds before being used in pharmacology.

Influência do uso da proantocianidina em um adesivo autocondicionante: avaliação da resistência de união / Influence of the use of proanthocyanidinin a self-etching adhesive: evaluation of bond strength / Influenciadel uso de proantocianidinaem um adesivo autograbante: evaluación de la fuerza de unión

Introdução:Os sistemas adesivos possibilitama execução de restaurações estéticas e minimamente invasivas, sendo, portanto,objeto de pesquisas para contornar os problemas que se apresentam no procedimento restaurador.Objetivo:Avaliar in vitroa resistência de união de um sistema adesivo autocondicionante, e deste modificado com soluções extrativas de semente de uva.Metodologia:Duas soluções extrativas foram preparadas comextrato de semente de uva em pó dissolvido em acetona e etanol. A partir delas e de umadesivo,seis sistemas adesivos autocondicionantes experimentais foram preparados, diferindo quanto aosolvente utilizado eàsproporções entre adesivo puro e solução extrativa(7,5%, 15% e 30%). Setenta incisivos bovinos hígidos tiveram as raízes removidas com disco de carborundum e as faces vestibulares desgastadas comlixas d'água de granulação 120, 240, 600 e 1200 sob refrigeração até expor a dentina superficial. Os dentes foram distribuídos aleatoriamenteem sete grupos distintos: Controle; A7,5; A15; A30; E7,5; E15; e E30, contendo 10 elementos cada. A aplicação dos adesivos foi executada de acordo com as recomendações do fabricante do adesivo controle. A restauração foi realizada com uma matriz de silicone com dimensões 2mm de altura e 4mm de diâmetro e inserido o material restaurador em incremento único e fotopolimerizado por 40s. Após três meses armazenados em água destilada, os espécimes foram submetidos ao teste de resistência de união. Foi empregado ométodo estatísticoTeste Paramétrico Anova 1 Fator e pós-teste de Tamhane (p<0,05). Resultados:Os grupos A7,5, E7,5 e E30 não apresentaram diferença em relação ao grupo Controle; A15 e A30 mostraram desempenho estatisticamente semelhante entre si; e E15 não apresentou diferença estatística em relação aos outros adesivos.Conclusões:A adição de proantocianidina teve efeitos diferentes,dependendodos solventes e das concentrações utilizadas, mas sem alterar significativamente o desempenho do adesivo (AU).

Introduction:Adhesive systems make it possible to perform aestheticand minimally invasive restorations, being the subject of research to circumvent the problems that arise in the restorative procedure.Objective:Evaluate in vitrothe bond strength of a self-etching adhesive system,and modified with extractive grape seed solutions. Methodology:Two extractive solutions were prepared with powdered grape seed extract dissolved in acetone and ethanol. From them and an adhesive, six experimental self-etching adhesive systems were prepared, differing in terms of the solvent used and the proportions between pure adhesive and extractive solution(7.5%, 15% and 30%). Seventy healthy bovine incisors had their roots removed with carborundum disc and the vestibular faces were worn with sandpaper with granulation water 120, 240, 600 and 1200 under refrigeration until the superficial dentin was exposed. The teeth were randomly assigned to seven different groups: Control; A7.5; A15; A30; E7.5; E15; and E30, containing 10 elements each. The application of the adhesives was carried out according to the recommendations of the manufacturer of the control adhesive. The restoration was performed with a silicone matrix with dimensions 2mm high and 4mm indiameter and the restorative material was inserted in a single increment and light cured for 40s. After three months stored in distilled water, the specimens were submitted to the bond strength test. The statistical method Parametric Test Anova 1 Factor and Tamhane post-test (p<0.05) were used. Results:Groups A7.5, E7.5 and E30 showed no difference in relation to the Control group; A15 and A30 showed a statistically similar performance; and E15 showed no statistical difference in relation to the other adhesives. Conclusions:The addition of proanthocyanidin had different effects, depending on the solvents and concentrations used, but without significantly altering the performance ofthe adhesive (AU).

Introducción: Sistemas adhesivos permiten realizar restauraciones estéticas y mínimamente invasivas, siendo objeto de investigación para sortear problemas que surgen en elprocedimiento restaurador. Objetivo: Evaluar in vitrola fuerza de unión de un sistema adhesivoautograbante y modificado con soluciones extractivas de semilla de uva. Metodología: Se prepararon dos soluciones extractivas con extracto de semilla de uva en polvo disuelto en acetona y etanol. A partir de ellos y de un adhesivo, se prepararon seis sistemas experimentales de adhesivos autograbantes, que se diferencian en cuanto al solvente utilizado y las proporciones entre adhesivo puro y solución extractiva (7,5%, 15% y 30%). Setenta incisivos bovinos sanos fueron removidos con un disco de carborundo y las caras vestibulares fueron usadas com lija de agua de granulación 120, 240, 600 y 1200 bajo refrigeración hasta que la dentina superficial quedo expuesta. Los dientes se asignaron aleatoriamente a siete grupos diferentes: Control; A7,5; A15; A30; E7,5; E15; y E30, que contiene 10 elementos cada uno. La aplicación de los adhesivos se realizó siguiendo las recomendaciones del fabricante del adhesivo de control. La restauración se realizó con matriz de silicona con 2mm de altura y 4mm de diámetro y el material restaurador se insertó en un solo incremento y se fotopolimerizó durante 40s. Tres meses después, almacenados em agua destilada, las muestras se sometieron a la prueba de resistencia de la unión. Se utilizó el método estadístico Prueba Paramétrica Factor Anova 1 y post-prueba de Tamhane (p<0,05). Resultados: Los grupos A7,5, E7,5 y E30 no mostraron diferencias em relación con el grupo Control; A15 y A30 mostraron un desempeño estadísticamente similar; y E15 no mostró diferencia estadística en relación con los otros adhesivos. Conclusiones: La adición de proantocianidina tuvo diferentes efectos, dependiendo de los disolventes y concentraciones utilizadas, pero sin alterar significativamente el rendimiento del adhesivo (AU).

Viabilidade ovariana com o uso do extrato de semente de uva: uma revisão sistemática / Ovarian viability with the use of grape seed extract: a systematic review / Viabilidad ovárica con extracto de semilla de uva: una revisión sistemática

El objetivo fue analisar sistemáticamente la literatura para verificar la influencia del extracto de semilla de uva como factor antioxidante en el tratamiento de la salud ovárica. Por medio de búsqueda y selección de literatura en artículos publicados en inglés en las bases de datos Lilacs, PubMed, SciELO, Science Direct / Elvesier y Google Scholar. Los descriptores utilizados fueron uva (uva) "AND" semilla (semilla) "AND" ovario (ovario) "OR" ovárico (ovario), con 9,100 artículos encontrados. Se realizaron lecturas de títulos, resúmenes y textos completos, 03 manuscritos cumplieron los criterios de inclusión. El uso de extracto de procianidina de semilla de uva y extracto de proantocianidina de semilla de uva obtuvo una reducción en ROS, mientras que se observó una reducción de LDL en el uso de extracto de semilla de uva. El extracto de semilla de uva puede ser beneficioso para la...(AU)

The objective was to review systematically the literature to verify the influence of grape seed extract as an antioxidant factor in the treatment of ovarian health by search and selection of literature in articles published in English in the Lilacs, PubMed, SciELO, Science Direct / Elvesier and Google Scholar databases. Descriptors used were grape (grape) AND seed (seed) AND ovary (ovary) OR ovarian (ovarian), with 9,100 articles found. Readings of titles, abstracts and full texts were performed, 03 manuscripts fulfilled the inclusion criteria. The use of grape seed procyanidin extract and grape seed proanthocyanidin extract obtained a reduction in ROS, while LDL reduction was observed in the use of grape seed extract. Conclusion: Grape seed extract can be beneficial for the viability of ovarian health, as it causes homeostasis regarding oxidative stress, however, further studies are necessary.(AU)

O objetivo foi examinar sistematicamente a literatura para verificar a influência do extrato de semente de uva como fator antioxidante no tratamento da saúde ovariana. por meio de busca e seleção da literatura em artigos publicados em língua inglesa nas bases de dados Lilacs, PubMed, SciELO, Science Direct/Elvesier e Google Acadêmico. Descritores utilizados foram grape (uva) AND seed (semente) AND ovary (ovário) OR ovarian (ovariano), sendo localizados 9.100 artigos. Realizadas leituras de títulos, resumos e textos completos, 03 manuscritos preencheram os critérios de inclusão. O uso do extrato de procianidina de semente de uva e do extrato proantocianidina de semente de uva obtiveram redução de ROS, quanto ao uso do extrato de semente de uva foi observado redução de LDL. O extrato de semente de uva pode ser benéfico para a viabilidade da saúde ovariana, pois causa homeostase a respeito do estresse oxidativo, no entanto, faz-se necessário estudos mais aprofundados.(AU)

Viabilidade ovariana com o uso do extrato de semente de uva: uma revisão sistemática / Ovarian viability with the use of grape seed extract: a systematic review / Viabilidad ovárica con extracto de semilla de uva: una revisión sistemática

El objetivo fue analisar sistemáticamente la literatura para verificar la influencia del extracto de semilla de uva como factor antioxidante en el tratamiento de la salud ovárica. Por medio de búsqueda y selección de literatura en artículos publicados en inglés en las bases de datos Lilacs, PubMed, SciELO, Science Direct / Elvesier y Google Scholar. Los descriptores utilizados fueron uva (uva) "AND" semilla (semilla) "AND" ovario (ovario) "OR" ovárico (ovario), con 9,100 artículos encontrados. Se realizaron lecturas de títulos, resúmenes y textos completos, 03 manuscritos cumplieron los criterios de inclusión. El uso de extracto de procianidina de semilla de uva y extracto de proantocianidina de semilla de uva obtuvo una reducción en ROS, mientras que se observó una reducción de LDL en el uso de extracto de semilla de uva. El extracto de semilla de uva puede ser beneficioso para la...

The objective was to review systematically the literature to verify the influence of grape seed extract as an antioxidant factor in the treatment of ovarian health by search and selection of literature in articles published in English in the Lilacs, PubMed, SciELO, Science Direct / Elvesier and Google Scholar databases. Descriptors used were grape (grape) AND seed (seed) AND ovary (ovary) OR ovarian (ovarian), with 9,100 articles found. Readings of titles, abstracts and full texts were performed, 03 manuscripts fulfilled the inclusion criteria. The use of grape seed procyanidin extract and grape seed proanthocyanidin extract obtained a reduction in ROS, while LDL reduction was observed in the use of grape seed extract. Conclusion: Grape seed extract can be beneficial for the viability of ovarian health, as it causes homeostasis regarding oxidative stress, however, further studies are necessary.

O objetivo foi examinar sistematicamente a literatura para verificar a influência do extrato de semente de uva como fator antioxidante no tratamento da saúde ovariana. por meio de busca e seleção da literatura em artigos publicados em língua inglesa nas bases de dados Lilacs, PubMed, SciELO, Science Direct/Elvesier e Google Acadêmico. Descritores utilizados foram grape (uva) AND seed (semente) AND ovary (ovário) OR ovarian (ovariano), sendo localizados 9.100 artigos. Realizadas leituras de títulos, resumos e textos completos, 03 manuscritos preencheram os critérios de inclusão. O uso do extrato de procianidina de semente de uva e do extrato proantocianidina de semente de uva obtiveram redução de ROS, quanto ao uso do extrato de semente de uva foi observado redução de LDL. O extrato de semente de uva pode ser benéfico para a viabilidade da saúde ovariana, pois causa homeostase a respeito do estresse oxidativo, no entanto, faz-se necessário estudos mais aprofundados.

Evaluation the Effect of Different Antioxidants Applied After Bleaching on Teeth Color Stability / Avaliação do efeito de diferentes antioxidantes aplicados após o clareamento na estabilidade da cor dos dentes

Objective: Vital bleaching is a popular treatment option for discolored teeth; but at post-treatment stage, loss of adhesion is highly reported. Literature focused on antioxidant application for the answer of this issue. The aim of this study was to compare the effects of six different antioxidants on color stability of bleached teeth. Material and Methods: This study included total of 84 extracted intact non-carious lower incisors. 35% hydrogen peroxide was applied on the labial surfaces of specimens in accordance with manufacturer's instructions. The bleached teeth were divided into 7 groups. No antioxidants were applied to the control group. For the experimental groups, the following antioxidants were applied for 10 minutes each: 5% proanthocyanidin, 5% sodium ascorbate, 5% lycopene, %5 green tea, %5 white tea and %5 α-tocopherol. CIE L*, a* and b* values of the teeth were measured by a spectrophotometer. One-way ANOVA was used to determine the differences among the groups. Multiple comparisons were examined with Tukey HSD. Results: The one-way ANOVA test revealed a statistically significant difference between the groups (p < 0.005). Highest color change was observed in lycopene group and the lowest in green tea group. Conclusion: Proanthocyanidin, white tea and green tea could be considered as post-bleaching antioxidant alternatives based on their herbal nature. (AU)

Objetivo: O clareamento vital é uma opção popular de tratamento para dentes descoloridos, mas na fase pós-tratamento, a perda de adesão é altamente relatada. A literatura enfocou a aplicação de antioxidantes para a resposta desta questão. O objetivo deste estudo foi comparar os efeitos de seis diferentes antioxidantes na estabilidade da cor de dentes clareados. Material e Métodos: Este estudo incluiu um total de 84 incisivos inferiores extraídos, intactos e não cariados. Peróxido de hidrogênio a 35% foi aplicado nas superfícies labiais dos espécimes de acordo com as instruções do fabricante. Os dentes clareados foram divididos em 7 grupos. Nenhum antioxidante foi aplicado ao grupo controle. Para os grupos experimentais, os seguintes antioxidantes foram aplicados por 10 minutos cada: proantocianidina a 5%, ascorbato de sódio a 5%, licopeno a 5%, chá verde a 5%, chá branco a 5% e α-tocoferol a 5%. Os valores CIE L *, a * e b * dos dentes foram medidos por um espectrofotômetro. ANOVA um fator foi usada para determinar as diferenças entre os grupos. As comparações múltiplas foram examinadas com Tukey HSD. Resultados: O teste ANOVA revelou uma diferença estatisticamente significativa entre os grupos (p <0,005). A maior mudança de cor foi observada no grupo do licopeno e a menor no grupo do chá verde. Conclusão: Proantocianidina, chá branco e chá verde podem ser considerados como alternativas antioxidantes pós-clareamento com base em sua natureza fitoterápica. (AU)

Efeito Biomodificador de Diferentes Agentes de Ligações Cruzadas nas Propriedades Mecânicas do Colágeno Dentinário / Biomodifying Effect of Different Cross-Linking Agents on the Mechanical Properties of Dentin Collagen

Objetivo: avaliar o efeito biomodificador dos agentes de ligações cruzadas nas propriedades mecânicas do colágeno dentinário. Material e Métodos: Trata-se de um estudo laboratorial in vitro, nos quais foram confeccionadas 18 barras de dentina a partir de terceiros molares humanos extraídos e livres de cárie. Os espécimes foram desmineralizados em ácido fosfórico a 10%, por 5 horas, distribuídos aleatoriamente nos grupos distintos e mantidos em suas respectivas soluções de pré-tratamento: água destilada (AD), Proantocianidina a 6,5% (PAC6,5) e Cardanol a 6,5% (CAR6,5) por períodos de 1 hora. Foram realizados os testes de flexão de três pontos para obtenção do módulo de elasticidade (ME) e modificação de massa (MM). Foram submetidos ao teste de Kolmogorov-Smirnoff seguido, do teste de ANOVA à um critério e pós teste de Tukey para a MM, e Dunns para diferença de ME (p<0,05). Resultados: Os valores obtidos no ME mostraram mudanças estatísticas notáveis em todos os grupos testados, quando comparados ao controle negativo (p<0,001), assim como na variação de massa foram encontradas diferenças estatísticas nos valores médios entre os grupos testados (p=0,012). Conclusão: o uso da PAC6,5 irá melhorar as propriedades mecânicas do colágeno

Objective: to evaluate the biomodifying effect of cross-linking agents on the mechanical properties of the teeth. Material and Methods: this is an in vitro laboratory study, in which 18 bars of dentin were made from extracted, caries-free human third molars. The samples were demineralized in 10% phosphoric acid for 5 hours, randomly distributed in different groups and kept in their pre-treatment solutions: distilled water (AD), Proanthocyanidin at 6.5% (PAC6.5) and Cardanol at 6.5% (CAR6.5) for periods of 1 hour. Three-point bending tests were performed to obtain the modulus of elasticity (ME) and mass modification (MM). They were submitted to the Kolmogorov-Smirnoff test followed by the Kruskal-Wallis' test and the Tukey's post-test for mass modification, and Kruskal-Wallis' test after a Dunn's test for difference in the modulus of elasticity(p <0.05). Results: the values selected in the ME show possible statistical changes in all groups tested, when compared to the negative control (p<0.001), as well as the mass variation. Data were shown in the average values between the groups tested (p = 0.012). Conclusion: The use of PAC6.5 will improve the mechanical properties of the collection

EFEITO DOS AGENTES DE CROSS-LINKING NA DURABILIDADE DA INTERFACE ADESIVA / EFFECT OF CROSS-LINKING AGENTS ON THE DURABILITY OF THE ADHESIVE INTERFACE

As metaloproteinases (MMPs) são enzimas colagenolítcas endó- genas, capazes de degradar as fibrilas de colágeno presentes na dentina, gerando falhas da interface adesiva. Foram propostos agentes de cross-linking para diminuir essa degradação. O objetivo desta revisão de literatura foi analisar a ação de diferentes agentes de cross-linking sobre as MMPs. A seleção dos artigos foi realizada por meio de uma busca na base de dados PubMed/MEDLINE. A amostra final foi composta por 40 estudos publicados entre 2018 e 2010. Os estudos atuais apresentaram os agentes de cros-s-linking (cabordiimida, glutaraldeído, proantocianidina, riboflavina/ UV-A e quitosana) com vantagens como inespecificidade em relação aos tipos de MMPs, aumento da resistência da fibra colágena e possibilidade de bloquear o sítio de clivagem da enzima. Ob- servou-se que a cabordiimida, riboflavina/UV-A, o glutaraldeído, a proantocianidina e a quitosana apresentaram resultados positivos na diminuição da degradação da interface adesiva. A carbodiimida e riboflavina/UV-A não são citotóxicas, diferentemente do glutaraldeído. A proantocianidina, quando incorporada no adesivo, apesar de interferir na polimerização dos monômeros adesivos, pode ser efetiva quando utilizada incorporada ao condicionamen- to ácido. A quitosana é capaz de reforçar as fibrilas de colágeno. Assim, foi possível conhecer mais sobre a ação dos agentes de cross-linking disponíveis. No entanto, há necessidade de mais pesquisas sobre esses agentes.

Metalloproteases are endogenous collagenolytic enzymes, capable of degrading the collagen fibrils present in the dentin, producing adhesive interface failures. Cross-linking agents has been proposed to reduce this degradation. The aim of this literature review was to analyze the action of different cross-linking agents on MMPs. The search was conducted in the PubMed database. The final sample consisted of 40 studies published between 2018 and 2010. Current studies have shown cross-linking agents (cabordiimide, glutaraldehyde, proanthocyanidin, riboflavin / UV-A and chitosan) present some advantages as non- specificity to type of MMPs, collagen fiber's toughness development and prevent bonding to the cleavage site of the enzyme. For this reason, it is necessary to know the action of the available cross-linking agents. It was observed that Cabordiimide, riboflavin / UV-A, glutaraldehyde, proanthocyanidin and chitosan presented positive results in reducing degradation of the adhesive interface. Carbodiimide and riboflavin / UV-A are non-cytotoxic, unlike glutaraldehyde. Proanthocyanidin incorporated into the adhesive interferes with the polymerization of the adhesive monomers. Chitosan is able to reinforce collagen fibrils. Thus, it was possible to know more about the action of the available cross-linking agents. However, there is a need for more research on these agents.

Ácido tânico como agente biomodificador de dentina / Tanic acid as biomodificator of collagen dentin

Introdução: a utilização de diferentes polifenóis no aumento das propriedades mecânicas do colágeno dentinário tem sido bastante empregada, sendo o ácido tânico um polifenol com propriedade biológica bastante pronunciada. Objetivo: avaliar o potencial biomodificador do ácido tânico (AT) em diferentes concentrações em colágeno dentinário. Métodos: os fatores sob investigação foram módulo de elasticidade, mensurado por meio de um ensaio de flexão de três pontos (n=10) e variação de massa (n=10), aferidos com uma balança de precisão, sendo, para tanto, avaliados os seguintes elementos: ácido tânico (0,1; 1 e 10%), proantocianidina (6,5%) e água destilada (controle). Resultados: quanto ao módulo de elasticidade, os grupos tratados com ácido tânico apresentaram valores, estatisticamente, superiores (p<0,05) aos demais grupos, não sendo observadas diferenças entre suas diferentes concentrações. Para os valores de variação de massa, os grupos que foram imersos em agentes biomodificadores apresentaram valores estatisticamente (p<0,05) superiores ao grupo controle. Conclusão: o ácido tânico se apresenta como um potencial agente biomodificador do colágeno dentinário, independente da concentração utilizada, aumentando o seu módulo de elasticidade e gerando um ganho de massa após uma hora de imersão.

Introduction: The use of different polyphenols in the increase of the mechanical properties of dentin collagen has been widely used, thus, tannic acid being a polyphenol with very pronounced biological proprieties. Objective: to evaluate the biomodifying potential of tannic acid (AT) in different concentrations in dentin collagen. Methods: the factors under investigation were modulus of elasticity, measured by a three-point bending test (n = 10), and mass variation (n = 10), measured by means of a precision scale, being the following substances evaluated: tannic acid (0.1, 1 and 10%), proanthocyanidin (6.5%) and distilled water (control). Results: As for the modulus of elasticity, the groups treated with tannic acid presented statistically higher values (p <0.05) in relation to the other groups, and no differences were observed between the different concentrations. For the values of mass variation, the groups that were immersed in biomodifiers showed statistically (p <0.05) values higher than the control group. Conclusion: tannic acid presents as a potential biomodifying agent of dentin collagen, regardless of the concentration used, increasing its modulus of elasticity and generating a mass gain after one hour of immersion.

Therapeutic effects of proanthocyanidin and coenzyme Q10 on nitrogen mustard-induced ocular injury / Efeitos terapêuticos da proantocianidina e da coenzima q10 em lesão ocular induzida por mostarda de nitrogênio

ABSTRACT Purpose: Nitrogen mustard (NM) is a devastating casualty agent in chemical warfare. There is no effective antidote to treat NM-induced ocular injury. We aimed to assess the effects of proanthocyanidin (PAC) and coenzyme Q10 (CoQ10) on NM-induced ocular injury. Methods: Eighteen male rats were divided into the following 4 groups: NM, NM + PAC, NM + CoQ10, and control. The 3 NM groups received a single dose of NM (0.02 mg/μL) on the right eye to induce ocular injury. The control group received saline only. Thirty minutes after the application of NM, the NM + PAC group received PAC (100 mg/kg) via gastric gavage, while the NM + CoQ10 group received CoQ10 (10 mg/kg) via intraperitoneal injection. PAC and CoQ10 were administered once a day for 5 consecutive days. The rats were then sacrificed. Macroscopic images of the eyes were examined and eye tissues were collected for histology. Results: The treatment groups were compared to the control group with regard to both corneal opacity and lid injury scores. The findings were not significantly different for both the NM + PAC and NM + CoQ10 groups. In both the NM + PAC and NM + CoQ10 groups, the histological changes seen in the NM group demonstrated improvement. Conclusions: Our results indicate that PAC and CoQ10 treatments have therapeutic effects on NM-induced ocular injury in a rat model. PAC and CoQ10 may be novel options in patients with NM-induced ocular injury.

RESUMO Objetivo: A mostarda de nitrogênio (MN) é um agente de guerra química devastador. Não existe um antídoto eficaz para tratar lesões oculares induzidas por MN. Nosso objetivo foi avaliar os efeitos da proantocianidina (PAC) e da coenzima Q10 (CoQ10) na lesão ocular induzida por MN. Métodos: Dezoito ratos machos foram divididos em 4 grupos: MN, MN + PAC, MN + CoQ10 e Controle. Três grupos receberam uma dose única de MN (0,02 mg/μL) destilada no olho direito para gerar lesão ocular. Os animais do grupo controle receberam apenas solução salina. Trinta minutos após a aplicação de MN nos animais, o grupo MN + PAC recebeu PAC (100 mg/kg) por gavagem gástrica, enquanto a CoQ10 (10 mg/kg) foi administrada ao grupo MN + CoQ10 por meio de injeção intraperitoneal. A administração de PAC e de CoQ10 foi realizada uma vez por dia, durante 5 dias consecutivos. Os ratos foram, então, sacrificados. Imagens macroscópicas dos olhos foram examinadas e tecidos oculares foram coletados para histologia. Resultados: Os grupos de tratamento foram comparados ao grupo de controle quanto à opacidade da córnea e quanto aos escores de lesão da cobertura da córnea. Os resultados foram insignificantes para ambos os grupos. Ambos, o grupo MN+PAC e o grupo MN+CoQ10, apresentaram melhoras das alterações histológicas observadas no grupo MN. Conclusões: Nossos resultados indicam que os tratamentos com PAC e com CoQ10 têm efeitos terapêuticos sobre lesões oculares induzidas por MN em um modelo em ratos. A proantocianidina e a CoQ10 podem ser uma nova opção nesses casos.

Dentin Sealing and Bond Strength Evaluation of Hema-Free and Multi-Mode Adhesives to Biomodified Dentin

Abstract This study evaluated the effect of dentin biomodification on the bond strength (BS) and sealing ability (SA) of HEMA-free and multi-mode adhesives after 24 h and 6 months of water storage. Four adhesives were tested: two multi-mode (Scotchbond Universal - SU, and Prime & Bond Elect - PB) and two HEMA-free (All-Bond 3 - AB, and G-Aenial - GA). Human third molars were selected and dentin was treated with two cross-linking agents (5% glutaraldehyde and 6.5% proanthocyanidin-rich grape seed extract - PACs) for 10 min or kept untreated (control group) (n=6). Teeth were sectioned and prepared for BS test and SA analysis. The SA measurements were taken with the presence of smear layer (minimum permeability), EDTA treatment (maximum permeability), PACs application, adhesive application and after 6 months of water storage. BS data were analyzed by Proc Mixed and Tukey-Kramer test (α=5%). PACs application increased the BS for all adhesives tested at 24 h. However, BS decreased for SU and AB after six months. In general, multi-mode adhesives (SU and PB) did not differ from AB HEMA-free. GA presented the lowest BS values at both times of evaluation. Dentin permeability was reduced after PACs application and remained the same after 6 months, regardless adhesive application. PACs can increase the BS regardless the type of adhesive, however only for PB and GA the BS kept stable after 6-months of water storage. PACs was able to seal the dentin as the minimum permeability and also remained stable after 6 months.

Resumo Este estudo avaliou o efeito da biomodificação da dentina na resistência de união (BS) e capacidade de selamento (SA) de adesivos "HEMA-free" e "multi-mode" após 24 horas e 6 meses de armazenamento em água. Quatro adesivos foram testados: dois "multi-mode" (Scotchbond Universal - SU, e Prime & Bond Elect - PB) e dois "HEMA-free" (All-Bond 3 - AB, e G-Aenial - GA). Terceiros molares humanos foram selecionados e a dentina desses dentes foi tratada com dois agentes "cross-linking" (glutaraldeído 5% e extrato de uva contendo proantocianidina 6.5% - PACs) por 10 min ou permaneceram sem tratamento (grupo controle) (n=6). Os dentes foram seccionados e preparados para teste de BS e análise de SA. As mensurações de SA foram adquiridas com a presença de "smear layer" (mínima permeabilidade), tratamento com EDTA (máxima permeabilidade), aplicação dos PACs, aplicação de adesivo e após 6 meses de armazenamento em água. Os dados de BS foram analisados pelo Proc Mixed e teste de Tukey-Kramer (α=5%). A aplicação dos PACs aumentaram a BS para todos os adesivos testados no tempo de 24 h. Entretanto, a BS reduziu para o adesivo SU e AB após 6 meses. Em geral, os adesivos "multi-mode" (SU e PB) não diferiram do AB "HEMA-free". O adesivo GA apresentou o menor valor de BS em ambos tempos de avaliação. A permeabilidade dentinária foi reduzida após a aplicação dos PACs e permaneceu a mesma até 6 meses, independente da aplicação do adesivo. Os PACs podem aumentar a BS independente do tipo de adesivo, entretanto somente para o adesivos PB e GA a BS manteve estável após 6 meses de armazenamento em água. Os PACs foram capazes de selar a dentina como a permeabilidade mínima da dentina, que permaneceram estável após 6 meses.

Redução da atividade proteolítica da dentina após curtos períodos de aplicação de proantocianidina / Reduction of the dentin proteolytic activity after short periods of application of proanthocyanidin

Introdução: Agentes promotores de ligações cruzadas têm sido investigados como inibidores da atividade enzimática da dentina, o que favoreceria a longevidade das restaurações adesivas. Objetivo: Avaliar o efeito do tratamento da dentina com proantocianidina (PA), em curtos períodos de tempo, na inibição da atividade de MMPs in situ. Material e método: Quarenta espécimes de dentina (1×1×6 mm) foram obtidos de molares hígidos e divididos em quatro grupos (n=10). Os espécimes foram condicionados com ácido fosfórico por 15 s, seguido de lavagem em água deionizada. A dentina condicionada foi tratada com: água, 5% PA por 5 s, 15 s ou 30 s. A atividade de MMP foi analisada colorimetricamente (SensoLyte®) e os dados de absorbância (412 nm) foram submetidos aos testes de ANOVA e Tukey (alfa =0,05). Resultado: Todos os períodos de tratamento foram capazes de reduzir a atividade de MMPs, sendo que os melhores resultados foram observados para a dentina tratada com PA por 15 s (63,1% redução) e 30 s (70,2%). O tratamento por 5 s foi capaz de inibir 39,9% das MMPs. Conclusão: A aplicação de PA sobre a dentina condicionada foi capaz de reduzir a atividade de MMPs mesmo em períodos de tempo extremamente curtos, como 5 s. No entanto, melhores resultados foram obtidos com os maiores períodos de tratamento.

Introduction: Collagen cross-linkers have been investigated as inhibitors of the enzymatic activity of dentin, therefore improving the longevity of adhesive restorations. Purpose: To evaluate the effect of etched dentin treatment with proanthocyanidin (PA) in short periods of time on the inhibition of dentin metalloproteinases (MMP) activity in situ. Material and method: Forty dentin specimens (1x1x6mm) were obtained from sound third molars and divided into 4 groups (n=10). The specimens were etched with 37% phosphoric acid for 15s and rinsed in deionized water. Then they were treated with the following solutions: water, 5% PA for 5s, 15s or 30s. The total MMP activity was analyzed by a colorimetric test (SensoLyte®). Absorbance data (412nm) were submitted to ANOVA and Tukey tests (alfa =0.05). Result: All treatment periods were able to reduce the total activity of MMPs. The best results were observed for dentine treated with PA for 15s (63.1% reduction) and 30s (70.2%). Treatment for 5s was capable of inhibiting only 39.9% of the total MMP activity. Conclusion: Application of PA on the etched dentin in extremely short periods of time reduced the MMPs activity of dentin, even after 5s. However, the best results were obtained for the longer periods.

Efeito isolado ou combinado de flavonoides e peptídeos catiônicos sobre biofilme endodôntico e sua influência na viabilidade celular, capacidade de migração e inibição de citocinas em fibroblastos / Effect of flavonoids and cationic peptides, alone or in combination, on endodontic biofilm and their influence on cell viability, migration capacity and inhibition of cytokines in fibroblasts

Este trabalho foi dividido em dois capítulos que objetivou avaliar: 1) o efeito isolado ou combinado do flavonoide epigallocatechin-3-gallate (EGCG) em associação com o peptídeo LL-37 e seu análogo KR-12-a5 sobre a viabilidade celular de fibroblastos e sobre cultura planctônica, biofilme simples, dual-espécies e túbulos dentináios e 2) as interações sinérgicas do EGCG e proantocianidina do oxicoco (A-type cranberry proanthocyanidins, AC-PAC), quando usado em combinação com LL-37 ou KR-12-a5 sobre a viabilidade celular, a capacidade de migração e inibição das citocinas em cultura de fibroblastos (HGF-1), quando estimuladas ou não pelo lipopolissacarídeo de A. actinomycetencomitans (LPS). No capítulo 1, a concentração inibitória mínima (MIC), a concentração bactericida mínima (MBC) e concentração inibitória fracionária (FIC) de EGCG, LL-37 e KR-12-a5 foram determinadas a partir de valores decrescentes dos compostos por meio dos métodos de microdiluição e checkerboard contra Streptococcus mutans, Enterococcus faecalis, Actinomyces israelii e Fusobacterium nucleatum após 24 horas de tratamento. Fibroblastos da linhagem L-929 foram expostos a combinações de EGCG com peptídeos em diferentes concentrações e o metabolismo celular avaliado por ensaios de MTT. Os compostos com melhor efeito antimicrobiano e citotóxico foram avaliados por 24-36h, isoladamente ou em combinação, em biofilmes individuais ou biofilmes de dual-espécies com E. faecalis formados em placas de poliestireno por 48h por meio de contagem bacteriana. Os biofilmes de E. faecalis também foram cultivados em túbulos dentinários por 2 semanas, tratados com EGCG, KR-12-a5 e EGCG + KR-12-a5 e a porcentagem de células mortas foi determinada pela análise de imagens usando Microscopia Confocal. No capítulo 2, a linhagem celular de fibroblastos gengivais humanos primários HGF-1 foi pré-tratada durante 2 h com EGCG ou AC-PAC a 25 e 12,5 µg / mL, LL-37 ou KR-12-a5 a 0,06 e 0,03 µM ou com uma combinação de EGCG + ACPAC; AC-PAC + KR-12-a5; AC-PAC + LL-37; EGCG + KR-12-a5 ou EGCG + LL-37, nas mesmas concentrações. As culturas celulares foram então estimuladas com 50 µg/mL de LPS por 24-48h. A viabilidade celular e migração foram analisadas usando ensaios colorimétricos e fluorescentes, respectivamente. A quantificação de citocinas foi determinada por ensaios multiplex ELISA. Os resultados mostraram que em condições planctônicas, EGCG + KR-12-a5 apresentaram efeito sinérgico ou aditivo contra todas as bactérias testadas, com FIC menor que os valores de MIC obtidos pelos compostos isolados. As combinações de EGCG e peptídeos testados não foram tóxicas para os fibroblastos, uma vez que o crescimento celular foi superior a 70%. Em condições de biofilme simples, EGCG + KR-12-a5 eliminou S. mutans e A. israelii e reduziu E. faecalis e F. nucleatum. Para biofilmes de duas espécies, quando E. faecalis foi combinado com S. mutans, EGCG + KR-12-a5 teve efeito sinérgico eliminando S. mutans e reduzindo estatisticamente as contagens de E. faecalis. Em biofilmes associando E. faecalis e A. israelii ou F. nucleatum, EGCG + KR-12-a5 eliminaram E. faecalis e promoveram redução de A. israelii e F. nucleatum, embora não tenha sido observada diferença estatística entre os compostos. EGCG + KR-12-a5 reduziu mais de 80% dos biofilmes de E. faecalis nos túbulos dentinários. Dentre os grupos experimentais estudados, o EGCG, principalmente a 25 e 12,5 µg/mL estimulou o crescimento de fibroblastos, protegendo-os dos efeitos do LPS. Efeito sinérgico entre EGCG + AC-PAC, EGCG + LL-37 e EGCG + KR-12-a5 no metabolismo celular também foi observado na presença de LPS. Combinações do EGCG com AC-PAC ou KR-12-a5 e AC-PAC com LL-37 foram capazes de aumentar estatisticamente a migração celular. EGCG, AC-PAC, LL-37 e KR-12-a5 promoveram a redução de citocinas individualmente ou em combinação (EGCG + AC-PAC e EGCG + KR12-a5) mais especificamente para IL-6, IL-8, GM- CSF e TNF-α. Conclui-se que a associação de EGCG e KR-12-a5 é citocompatível e promove um efeito sinérgico contra bactérias associadas a infecções endodônticas, sob condições planctônicas e de biofilme. O EGCG, isoladamente ou associado ao AC-PAC e ao KR-12-a5, aumenta a viabilidade e migração celular, bem como a inibição de citocinas por fibroblastos estimulados por LPS. A associação de EGCG com KR-12-a5 poderia ser uma opção de princípio ativo em medicações para fins endodônticos(AU)

This study was divided in two chapters that aimed to evaluate: 1) the effect of flavonoid epigallocatechin-3-gallate (EGCG), cationic peptide LL-37 peptide and its analogue KR12-a5, alone or in combination, on fibroblast cell viability and on bacteria in planktonic and single/dual-species biofilms/dentin tubules; 2) the synergistic interactions of EGCG and cranberry proanthocyanidins (A-type cranberry proanthocyanidins, AC-PAC), when used in combination with LL-37 or KR-12-a5 on cell viability, the ability to induce cell migration and inhibit cytokines in culture of fibroblasts (HGF-1) when stimulated or not by the lipopolysaccharide of A. actinomycetencomitans (LPS). For the chapter 1, Minimum inhibitory concentration (MIC), minimum bactericidal concentration (MBC) and fractional inhibitory concentration (FIC) of EGCG, LL-37 and KR-12-a5 were determined from decreasing values of the compounds by Streptococcus mutans, Enterococcus faecalis, Actinomyces israelii and Fusobacterium nucleatum against microdilution and checkerboard after 24 hours of treatment. L-929 fibroblasts were exposed to combinations of EGCG with peptides at different concentrations and cell metabolism assessed by MTT assays. The compounds if the best antimicrobial and cytotoxic effect were also evaluated for 24-36h, alone or in combination, in 48h singleor dual-species biofilms with E. faecalis formed on polystyrene plates by bacterial counting. E. faecalis biofilms were also cultured in dentin tubules for 2 weeks and treated with EGCG, KR-12-a5 and EGCG + KR-12-a5 to determine the percentage of dead cells by analysis of images using Confocal Microscopy. For the chaper 2, primary human gingival fibroblast HGF-1 cell line was pretreated for 2 h with either EGCG or AC-PAC at 25 and 12.5 µg/mL, LL-37 or KR-12-a5 at 0.03 and 0.06 µM or with a combination of EGCG + AC-PAC; AC-PAC + KR-12-a5; AC-PAC + LL-37; EGCG + KR-12-a5 or EGCG + LL37, at the same concentrations. Cell cultures were then stimulated with 50 µg/mL LPS for 24-48h. Cell viability and migration were analyzed using colorimetric and fluorescent assays, respectively. Quantification of cytokines was determined by multiplex ELISA assays. The results show that in planktonic conditions, EGCG + KR-12- a5 showed a synergistic or additive effect against all the bacteria tested, with FIC lower than the MIC values obtained by the compounds alone. Combinations of EGCG and peptides tested were not toxic to fibroblasts, since cell growth was higher than 70%. Under single biofilm conditions, EGCG + KR-12-a5 eliminated S. mutans and A. israelii and reduced E. faecalis and F. nucleatum. For dual- species biofilms, when E. faecalis was combined with S. mutans, EGCG + KR-12-a5 had a synergistic effect by eliminating S. mutans and statistically reducing E. faecalis counts. In biofilms associated with E. faecalis and A. israelii or F. nucleatum, EGCG + KR-12-a5 eliminated E. faecalis and promoted reduction of A. israelii and F. nucleatum, although no statistical difference was observed between the compounds. EGCG + KR-12-a5 reduced more than 80% of the E. faecalis biofilms in the dentin tubules. Among the experimental groups studied, EGCG, mainly at 25 and 12.5 µg/mL stimulated the growth of fibroblasts, protecting them from the effects of LPS. Synergistic effect between EGCG + AC-PAC, EGCG + LL-37 and EGCG + KR12-a5 on cell metabolism was also observed in the presence of LPS. Combinations of EGCG with AC-PAC or KR-12-a5 and AC-PAC with LL-37 were able to increase statistically cell migration. EGCG, AC-PAC, LL-37 and KR-12-α5 promoted cytokine reduction individually or in combination (EGCG + AC-PAC and EGCG + KR-12-a5) more specifically for IL-6, IL-8, GM-CSF and TNF-α. The association of EGCG and KR-12-a5 was cytocompatible and promoted a synergistic effect against bacteria associated with endodontic infections under planktonic and biofilm conditions. EGCG, alone or in combination with AC-PAC and KR-12-a5, increases cell viability and migration, as well as inhibition of cytokines by LPS-stimulated fibroblasts. The association of EGCG with KR12-a5 could be an option as active principle for medications to be used for endodontic purposes(AU)

Características de silagens de pornunça adicionadas de níveis de tanino comercial e seu uso em dietas para cabras leiteiras

A dissertação foi dividida em dois capítulos. O primeiro capítulo teve como objetivo avaliar o perfil fermentativo, perdas relacionadas à fermentação e produção de gás in vitro de silagens de pornunça adicionadas de níveis de tanino comercial. Para isso foram confeccionados silos experimentais com pornunça: sem adição de tanino (controle) e com inclusão de 4, 8 e 12% de tanino comercial com base na matéria seca. Foi utilizado delineamento experimental inteiramente casualizado em esquema fatorial 4 x 5 composto dos quatro tratamentos e cinco períodos de fermentação (3, 7, 14, 28 e 56 dias) com tres repetições cada. A adição do tanino promoveu incremento nos teores de matéria seca (MS) avaliada em 25,40% no tratamento controle, para 29,36% nas silagens com adição de 12% tanino. Os teores de PIDN% de PB total aumentaram com inclusão dos níveis de tanino passando de 54,07% sem adição de tanino para 61,60% com 12% de tanino. Efeito contrário foi observado sobre os teores de PB e FDN com taxas de reduções de 17,10% e 10,6%, respectivamente, comparando o tratamento sem tanino com 12% de tanino. A queda do pH das silagens com 12% de tanino foi mais lenta e apresentaram aumento do N-NH3 passando de 3,55% no tratamento sem adição de tanino para 6,02% com adição de 12% em silagens com 56 dias de fermentação. As perdas por gases e a recuperação de MS apresentaram comportamento quadrático. O ponto de menor perda por gases foi encontrado com 5,03% de tanino e o ponto máximo de recuperação de MS foi com 5,6% de tanino. Observou-se redução de 17,42 mL de gás/g de MS no potencial máximo de produção de gases dos carboidratos totais e 1,2% na degradabilidade da fração potencialmente degradável (b) comparando o tratamento sem tanino com 12% de tanino. O segundo capítulo teve como objetivo avaliar o efeito do tanino comercial acrescido na ensilagem de pornunça sobre o consumo de MS, digestibilidade dos nutrientes, produção de leite e estimativas de emissão de gases com potencial de efeito estufa em cabras leiteiras. Os tratamentos foram compostos de silagens de pornunça sem adição de tanino (controle) e com adição de 2,4; 3,6 e 4,8% de tanino com base na MS da dieta total. Foram utilizadas oito cabras, da raça Saanen em delineamento experimental quadrado latino duplo (4X4). O consumo de MS, MO, MM, PB e FDN e consumo de água apresentaram comportamento linear decrescente, representando taxas de reduções de 31,0%; 37,5%; 30,0%; 40,0%; 34,0% e 30,2%, respectivamente comparando o tratamento controle com 4,8% de tanino. Os coeficientes de digestibilidade aparente da MS, MO, PB e FDN apresentaram comportamento linear decrescente com taxa de redução de 14,34%; 14,39%; 31,21%; e 33,98%, respectivamente comparando-se o tratamento sem tanino com 4,8% de tanino. A produção de leite e todos os parâmetros estimados pela produção de gases in vitro apresentaram comportamento linear decrescente. Houve redução de 34,51% na produção de leite e 13,15% na produção de gases por kg de leite produzido. Pode-se concluir que o tanino comercial modificou a composição bromatológica das silagens e que o maior nível de inclusão tanino afetou a queda do pH das silagens aumentando as concentrações de N-NH3 e perdas por gases, além disso reduziu a produção de gases in vitro, o consumo e digestibilidade dos nutrientes, produção de leite e emissão de gases efeito estufa por kg de leite produzido em cabras da raça Saanen.

The dissertation was divided into two chapters. The first chapter aimed to evaluate the fermentation profile, losses related to fermentation and "in vitro" gas production of pornunça silage added levels of commercial tannin. For this, experimental silos were prepared with pornunça:without addition of tannin (control) and with inclusion of 4, 8 and 12% commercial tannin based on dry matter. It used a completely randomized design in a factorial 4 x 5 composed of four treatments and five periods of fermentation (3, 7, 14, 28 and 56 days) with three replicates each. The addition of tannin promoted increase in dry matter (DM) evaluated at 25.40% in control treatment to 29.36% in silages with addition of 12% tannin. The contents of NDIP% in total CP increased with inclusion of tannin levels going from 54.07% without adding tannin to 61.60% with 12% of tannin. Opposite effect was observed on the CP and NDF with reductions rates of 14.49% and 10.6%, respectively, comparing with no tannin treatment with 12% of tannin. The drop in pH of the silage with 12% tannin was slower than all treatments and had increased NH3 from 3.55% in control treatment going to 6.02% in 12% tannin treatment at 56 days silage fermentation. The losses by gases and MS recovery presented quadratic behavior. The point of least loss gases were found in 5.03% of tannin and the peak of dry matter recovery was 5.6% with tannin. There was a reduction of 17.42 mL gas / g DM maximum potential gas production of total carbohydrates and 1.2% in the degradability of potentially degradable fraction (b) comparing the tannin without treatment 12% of tannin. The second chapter aimed to evaluate the effect of commercial tannin increased by pornunça ensilage on DM intake, digestibility, milk production and estimates of emission potential greenhouse gas in dairy goats. The treatments consisted of pornunça without tannin (control) and with addition of 2.4; 3.6 and 4.8% tannin based DM in the diet. Eight Saanen goats were used, in double Latin square design (4x4). Intakes of: DM, OM, MM, CP and NDF and water consumption showed linearly decreased, representing reductions rates; 31.0%; 37.5%; 30.0%; 40.0%; 34.0% and 30.2% respectively comparing control treatment with 4.8%tannin. The apparent digestibility coefficient of DM, OM, CP and NDF showed linearly decreased with reduction rates of 14.34%; 14.39%; 31.21%; and 33.98% respectively comparing the control treatment with 4.8% tannin. The milk production and all parameters estimated by gas production in vitro showed decreasing linear effect. There was a reduction of 34.51% in milk production and 13.15% in the production of gas per kg of milk produced. We were concluded that the commercial tannin changed the chemical composition of silage and that the highest level of tannin inclusion affected the drop of pH of the silage, increasing N-NH3 concentrations and losses to gas, in addition to reduced in vitro gas production, the intake and digestibility of nutrients, milk production and emission of greenhouse gases per kg of milk produced in Saanen goats.

Efeitos comparativos de diferentes géis à base de cranberry e proantocianidina sobre a dentina submetida à erosão: estudo in vitro / In vitro effect of Cranberry and proanthocyanidin on dentin erosion

Considerando que a Proantocianidina e outros componentes do Cranberry possam inibir as metaloproteinases da dentina quando esta é exposta a ação de agentes erosivos e tal fato pode minimizar o desgaste dentinário, o presente trabalho tem como objetivo avaliar o efeito protetor in vitro de géis à base de extrato de Cranberry e Proantocianidina em diferentes concentrações, aplicados sobre a dentina posteriormente submetida à erosão. Para tal, 150 espécimes de dentina bovina (4 x 4 mm) foram confeccionados e igualmente divididos em 10 grupos: G1- gel de clorexidina a 0,012%; G2- gel placebo; G3- gel a base de extrato de Cranberry a 0,05%; G4- gel a base de extrato de Cranberry a 1%; G5- gel a base de extrato de Cranberry a 5%; G6- gel a base de extrato de Cranberry a 10%; G7- gel a base de Proantocianidina 0,05%; G8- gel a base de Proantocianidina 1%, G9- gel a base de Proantocianidina 5%; G10- gel a base de Proantocianidina 10%. Os diferentes géis foram aplicados uma única vez sobre os espécimes antes do primeiro desafio erosivo durante 5 minutos. Em seguida, os espécimes foram submetidos a 3 ciclagens erosivas seguidas (imersão em bebida à base de Cola por 5 minutos seguido de imersão em saliva artificial por 3 horas) por dia, durante 5 dias. Após as 3 cilclagens erosivas diárias, os espécimes foram mantidos em saliva artificial por 15 horas. A perfilometria foi utilizada para quantificar o desgaste dentinário (μm). Os dados foram analisados pelo teste ANOVA seguido do teste de Fisher (p<0,05). Os resultados (G1: 15,6 ± 2,4b; G2: 23,1 ± 1,4e; G3: 15,1 ± 2,3b; G4: 20,4 ± 1,9cd; G5: 19,0 ± 2,1ac; G6: 18,7 ± 1,4a; G7: 18,2 ± 1,6a; G8: 21,1 ± 1,2d; G9: 19,2 ± 2,6ac; G10: 15,2 ± 2,5b) mostraram que o gel de Cranberry a 0,05% (G3) e gel de Proantocianidina 10% (G10) apresentaram eficácia estatisticamente significante na redução da erosão dentinária em comparação aos outros grupos analisados...

Considering that Proanthocyanidin and other Cranberrys components might inhibit dentin metalloproteinases exposed to erosive agents and it can prevent dental wear, the aim of this in vitro study was to evaluate the effect of Cranberry and Proanthocyanidin gels used in different concentrations on dentin before an erosive challenge. For this purpose, 150 bovine root dentin blocks (4x4mm) were treated by different gels and randomly divided into 10 groups: G1- 0.012% Chlorhexidine Gel (positive control), G2- Placebo gel with no active principle (negative control), G3- 0.05% Cranberry gel, G4- 1% Cranberry gel, G5- 5% Cranberry gel, G6- 10% Cranberry gel, G7- 0.05% Proanthocyanidin gel, G8- 1% Proanthocyanidin gel, G9- 5% Proanthocyanidin gel and G10- 10% Proanthocyanidin gel. The gels were applied over specimens once before the first erosive challenge for 5 minutes. After that, the blocks were subjected to 3 sequential erosive cycles (cola drink for 5 minutes and artificial saliva for 3 hours, each) per day, during 5 days. After 3 daily erosive cycles, the blocks were maintained in artificial saliva for 15 h. Profilometry was used to quantify the dentin wear (μm). Data were analyzed by ANOVA and Fisher's test (p<0.05). Results (G1: 15,6 ± 2,4b; G2: 23,1 ± 1,4e; G3: 15,1 ± 2,3b; G4: 20,4 ± 1,9cd; G5: 19,0 ± 2,1ac; G6: 18,7 ± 1,4a; G7: 18,2 ± 1,6a; G8: 21,1 ± 1,2d; G9: 19,2 ± 2,6ac; G10: 15,2 ± 2,5b) showed that 0.05% Cranberry gel (G3) and 10% Proanthocyanidin gel (G10) presented similar results when compared to positive control group (G1), and these three groups showed statistically lowest wear when compared to all other evaluated groups. The results of this study suggest a significant efficacy of Cranberry and Proanthocyanidin gels in preventing wear of dentin subjected to dental erosion in vitro...

Efeitos comparativos de diferentes géis à base de cranberry e proantocianidina sobre a dentina submetida à erosão: estudo in vitro / In vitro effect of Cranberry and proanthocyanidin on dentin erosion

Considerando que a Proantocianidina e outros componentes do Cranberry possam inibir as metaloproteinases da dentina quando esta é exposta a ação de agentes erosivos e tal fato pode minimizar o desgaste dentinário, o presente trabalho tem como objetivo avaliar o efeito protetor in vitro de géis à base de extrato de Cranberry e Proantocianidina em diferentes concentrações, aplicados sobre a dentina posteriormente submetida à erosão. Para tal, 150 espécimes de dentina bovina (4 x 4 mm) foram confeccionados e igualmente divididos em 10 grupos: G1- gel de clorexidina a 0,012%; G2- gel placebo; G3- gel a base de extrato de Cranberry a 0,05%; G4- gel a base de extrato de Cranberry a 1%; G5- gel a base de extrato de Cranberry a 5%; G6- gel a base de extrato de Cranberry a 10%; G7- gel a base de Proantocianidina 0,05%; G8- gel a base de Proantocianidina 1%, G9- gel a base de Proantocianidina 5%; G10- gel a base de Proantocianidina 10%. Os diferentes géis foram aplicados uma única vez sobre os espécimes antes do primeiro desafio erosivo durante 5 minutos. Em seguida, os espécimes foram submetidos a 3 ciclagens erosivas seguidas (imersão em bebida à base de Cola por 5 minutos seguido de imersão em saliva artificial por 3 horas) por dia, durante 5 dias. Após as 3 cilclagens erosivas diárias, os espécimes foram mantidos em saliva artificial por 15 horas. A perfilometria foi utilizada para quantificar o desgaste dentinário (μm). Os dados foram analisados pelo teste ANOVA seguido do teste de Fisher (p<0,05). Os resultados (G1: 15,6 ± 2,4b; G2: 23,1 ± 1,4e; G3: 15,1 ± 2,3b; G4: 20,4 ± 1,9cd; G5: 19,0 ± 2,1ac; G6: 18,7 ± 1,4a; G7: 18,2 ± 1,6a; G8: 21,1 ± 1,2d; G9: 19,2 ± 2,6ac; G10: 15,2 ± 2,5b) mostraram que o gel de Cranberry a 0,05% (G3) e gel de Proantocianidina 10% (G10) apresentaram eficácia estatisticamente significante na redução da erosão dentinária em comparação aos outros grupos analisados.

Considering that Proanthocyanidin and other Cranberrys components might inhibit dentin metalloproteinases exposed to erosive agents and it can prevent dental wear, the aim of this in vitro study was to evaluate the effect of Cranberry and Proanthocyanidin gels used in different concentrations on dentin before an erosive challenge. For this purpose, 150 bovine root dentin blocks (4x4mm) were treated by different gels and randomly divided into 10 groups: G1- 0.012% Chlorhexidine Gel (positive control), G2- Placebo gel with no active principle (negative control), G3- 0.05% Cranberry gel, G4- 1% Cranberry gel, G5- 5% Cranberry gel, G6- 10% Cranberry gel, G7- 0.05% Proanthocyanidin gel, G8- 1% Proanthocyanidin gel, G9- 5% Proanthocyanidin gel and G10- 10% Proanthocyanidin gel. The gels were applied over specimens once before the first erosive challenge for 5 minutes. After that, the blocks were subjected to 3 sequential erosive cycles (cola drink for 5 minutes and artificial saliva for 3 hours, each) per day, during 5 days. After 3 daily erosive cycles, the blocks were maintained in artificial saliva for 15 h. Profilometry was used to quantify the dentin wear (μm). Data were analyzed by ANOVA and Fisher's test (p<0.05). Results (G1: 15,6 ± 2,4b; G2: 23,1 ± 1,4e; G3: 15,1 ± 2,3b; G4: 20,4 ± 1,9cd; G5: 19,0 ± 2,1ac; G6: 18,7 ± 1,4a; G7: 18,2 ± 1,6a; G8: 21,1 ± 1,2d; G9: 19,2 ± 2,6ac; G10: 15,2 ± 2,5b) showed that 0.05% Cranberry gel (G3) and 10% Proanthocyanidin gel (G10) presented similar results when compared to positive control group (G1), and these three groups showed statistically lowest wear when compared to all other evaluated groups. The results of this study suggest a significant efficacy of Cranberry and Proanthocyanidin gels in preventing wear of dentin subjected to dental erosion in vitro.

Citotoxicidade transdentinária e efeito da carbodiimida (EDC) na biomodificação do colágeno dentinário e na degradação da interface adesiva / Trandentinal cytotoxicity and effect of carbodiimide (EDC) on dentin collagen biomodification and adhesive interface degradation

O objetivo geral deste trabalho foi avaliar a citotoxicidade transdentinária da carbodiimida (EDC), bem como sua influência na degradação do colágeno dentinário e na estabilidade da união resina-dentina. No estudo 1, células MDPC23 foram plantadas na superfície pulpar de discos de dentina e a superfície oclusal foi tratada por 60s com uma das seguintes soluções: sem tratamento; EDC 0,1M; 0,3M ou 0,5M; glutaraldeído 5% (GA); tampão Sorensen ou H2O2 29%. A viabilidade e a morfologia celular foram analisadas pelos testes de MTT, Live/dead, produção de proteína total (PT), de colágeno e MEV. Os dados foram analisados pelos testes de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney (p<0,05). O GA promoveu aumento do metabolismo celular. A morte por necrose e a morfologia celular não foram influenciadas pelos agentes cross-linkers. Não houve redução na produção de PT e colágeno após 7 dias. Para o estudo 2, espécimes de dentina foram completamente desmineralizados e a variação do módulo de elasticidade (E), inibição de MMP, perda de massa, liberação de hidroxiprolina (HYP) e degradação térmica do colágeno (DTC) foram analisados após tratamento com uma das seguintes soluções por 30s ou 60s: água deionizada (controle); EDC 0,5M; EDC 1M; EDC 2M e GA 10%. Os dados referentes ao E, atividade de MMP e liberação de HYP foram submetidos aos testes de Wilcoxon e KruskalWallis ou Mann-Whitney. Os valores de perda de massa e DT foram analisados pelos testes de ANOVA e Tukey (p<0,05). Os melhores resultados quanto ao E foram observados para o GA. Todos os cross-linkers reduziram a atividade de MMP e a liberação de HYP e aumentaram a temperatura de DT do colágeno. No estudo 3, sessenta palitos de dentina foram divididos em 6 grupos de acordo com a solução de tratamento: água deionizada (controle); EDC 0,1M; EDC 0,5M; EDC 0,5M + HEMA 35%; proantocianidina 5% (PA) ou clorexidina (CHX) 2%. Após condicionamento ácido os palitos foram tratados por 60s. A atividade de MMP foi analisada por ensaio colorimétrico. Os dados expressos em valores de absorbância e em equivalentes a atividade de MMP-9 foram submetidos aos testes de Kruskall-Wallis e Mann-Whitney (p<0.05). Todas as soluções inibiram a atividade de MMP. O EDC 0,5M e sua mistura com HEMA obtiveram os melhores resultados. Finalmente, no estudo 4, superfícies planas de dentina foram condicionadas e tratadas por 30 ou 60s com solução de EDC 0,5M ou água deionizada. Após o tratamento, o adesivo Single Bond 2 (SB2) foi aplicado e as coroas reconstruídas em resina composta. Espécimes foram produzidos e submetidos aos testes de microtração e nanoinfiltração após 24h, 6 ou 12 meses em saliva artificial. Os testes de ANOVA e Tukey (p<0.05) foram aplicados. O tratamento da dentina com EDC preveniu a redução da RU e o aumento da nanoinfiltração após 12 meses de armazenamento. Desta forma, pôde ser concluído que o pré-tratamento da dentina com agentes cross-linkers não exerceu efeito citotóxico trandentinário sobre células odontoblastóides, favoreceu as propriedades mecânicas do colágeno, foi capaz de inibir MMPs e prevenir a degradação da interface adesiva

The purpose of this study was to evaluate the trandentinal cytotoxicity of carbodiimide (EDC), as well as its influence on dentinal collagen degradation and stability of resin-dentin bonds. In the first experiment, MDPC-23 cells were seeded on the pulp surface of the disks and one of the following solutions was applied on the occlusal surface for 60s: no treatment (negative control), 0.1M, 0.3M or 0.5M EDC; 5% glutaraldehyde (GA); Sorensen buffer or 29% hydrogen peroxide (positive control). Cell viability and morphology were analyzed by MTT, Live/Dead assays, total protein (TP) and collagen production and SEM. Data were analyzed by Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests (p<0.05). Only GA increased cellular metabolism. Cell death by necrosis and cell morphology were not affected by the cross-linker agents. There was no reduction in TP and collagen production after 7 days. For the second experiment, dentin beams were completely demineralized and the variation in elastic modulus (E), MMP activity, dry mass loss, hydroxyproline release (HYP) and collagen thermal degradation (CTD) were analyzed after the dentin treatment for 30s or 60s with the following solutions: water; 0.5M; 1M or 2M EDC and 10% GA. Data from E and MMP activity and HYP release were submitted to Wilcoxon and Kruskal-Wallis or Mann-Whitney tests. Dry mass loss and CTD data were analyzed by ANOVA and Tukey's tests (p>0.05). GA group obtained the highest E values. All cross-linking agents decreased MMP activity and HYP release and increased CTD. In the third experiment, sixty dentin beams were randomly divided into 6 groups according to the treatment solution: deionized water (control), 0.1M EDC, 0.5M EDC, 0.5M EDC+35% HEMA, 5% proanthocyanidin (PA) or 2% chlorhexidine (CHX). The beams were acid etched and treated for 60s. The total MMP activity was analyzed by a colorimetric assay (Sensolyte®). Data were expressed as absorbance values at 412nm and MMP-9 equivalents and subjected to Kruskal-Wallis and MannWhitney tests (p<0.05). All cross-liking solutions inhibited MMPs. The 0.5 M EDC solution and its mixture with HEMA had the highest inhibition values. Finally, in experiment 4, flat dentin surfaces were etched and treated for 30 or 60s with 0.5M EDC or deionized water. After treatment, Single Bond 2 (SB2) was applied and the crowns were reconstructed with composite resin. Dentin specimens were produced and submitted to microtensile and nanoleakage tests after 24h, 6 or 12 months in artificial saliva. Bond strength (BS) data (MPa) were analyzed by ANOVA and Tukey tests (p<0.05). The dentin treatment with EDC did not affect SB2 immediate BS and prevented the degradation of the adhesive interface, even after 12 months of saliva storage. Thus, the dentin treatment with cross-linking agents did not exert transdentinal cytotoxic effects on odontoblastlike cells, increased collagen mechanical properties, was able to inhibit MMPs and prevent the degradation of the adhesive interface