Osteossíntese de úmero em iguana verde (Iguana iguana) / Humerus osteosynthesis in green iguana (Iguana iguana)

Background: The Green iguana (Iguana iguana) is a reptile belonging to the Iguanidae family. It is an ectothermic animalwith arboreal habits and a daytime activity pattern. Leaves, fruits, and eggs are part of their diet. These animals can be foundin the South, North and Central America. Free-living Green iguanas may suffer stress during environmental changes, whichcan lead to a homeostatic imbalance. There is a correlation between stress and anorexia which results in an increase in theoccurrence of fractures. Reptile fractures are generally treated by providing rigid stabilization and alignment maintenance.The present study reports the use of locking-plate osteosynthesis in one iguana.Case: One female green iguana, weighing 1.690 kg, was assisted at the Hospital Veterinário (Hovet) - Federal da Universidade Federal de Mato Grosso (UFMT). During anamnesis, it was observed that this iguana was a non-captive animal,which had fallen from a tree. The animal was unable to perform physical movements with the forearm displaying bonecrepitation. It was also observed apathy and dehydration. The iguana was subjected to a range of supplementary examinations and on the x-ray image, it was detected that there was a complete right humerus fracture. Following examination,the animal underwent surgery for fracture stabilization. Humerus osteosynthesis was performed with compression in a 1.5mm 6-hole locking-plate. During the osteosynthesis procedure a morphogenetic graft was inserted. Immediate post-surgeryradiographic evaluation was performed, and that confirmed fracture reduction and bone alignment. The animal displayedclinical improvement after the second post-operative day once it returned to regular ingestion of diet. On the 30th postoperative day, the radiographic evaluation showed evidence of bone consolidation. On the 40th post-operative day, theanimal displayed satisfactory gait and voluntary ingestion of food, thus enabling its return to...

Osteossíntese de úmero em iguana verde (Iguana iguana) / Humerus osteosynthesis in green iguana (Iguana iguana)

Background: The Green iguana (Iguana iguana) is a reptile belonging to the Iguanidae family. It is an ectothermic animalwith arboreal habits and a daytime activity pattern. Leaves, fruits, and eggs are part of their diet. These animals can be foundin the South, North and Central America. Free-living Green iguanas may suffer stress during environmental changes, whichcan lead to a homeostatic imbalance. There is a correlation between stress and anorexia which results in an increase in theoccurrence of fractures. Reptile fractures are generally treated by providing rigid stabilization and alignment maintenance.The present study reports the use of locking-plate osteosynthesis in one iguana.Case: One female green iguana, weighing 1.690 kg, was assisted at the Hospital Veterinário (Hovet) - Federal da Universidade Federal de Mato Grosso (UFMT). During anamnesis, it was observed that this iguana was a non-captive animal,which had fallen from a tree. The animal was unable to perform physical movements with the forearm displaying bonecrepitation. It was also observed apathy and dehydration. The iguana was subjected to a range of supplementary examinations and on the x-ray image, it was detected that there was a complete right humerus fracture. Following examination,the animal underwent surgery for fracture stabilization. Humerus osteosynthesis was performed with compression in a 1.5mm 6-hole locking-plate. During the osteosynthesis procedure a morphogenetic graft was inserted. Immediate post-surgeryradiographic evaluation was performed, and that confirmed fracture reduction and bone alignment. The animal displayedclinical improvement after the second post-operative day once it returned to regular ingestion of diet. On the 30th postoperative day, the radiographic evaluation showed evidence of bone consolidation. On the 40th post-operative day, theanimal displayed satisfactory gait and voluntary ingestion of food, thus enabling its return to...(AU)

O desenvolvimento embrionário da Piapara, Leporinus elongatus (Pisces, Anostomidae), utilizando técnicas de histologia, microscopia eletrônica de varredura e imunológicas empregando marcadores ósseos / The embryonic development of Piapara, Leporinus elongatus (Pisces, Anostomidae), using histological techniques, electron microscopy and immunological techniques using bone markers

O desenvolvimento embrionário dos peixes é de grande importância para a piscicultura e na reintrodução de espécies ameaçadas de extinção em seus ambientes, e seu conhecimento constitui uma importante maneira para minimizar doenças e mortalidades dessas espécies. Com o auxílio de técnicas como a Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e a imuno-histoquimica para identificar proteínas ósseas, foi possível avaliar as fases de desenvolvimento com mais riqueza de detalhes, facilitando a compreensão de hábitos e da biologia da espécie. Neste trabalho pudemos observar a ontogenia e osteogênese da Piapara (Leporinus elongatus), desde a fecundação até a fase juvenil, sendo evidenciadas estruturas importantes como o tamanho do vitelo, essencial para a nutrição do embrião; o fechamento do blastóporo, evento principal da embriogênese, que indica as taxas de fertilização; a metamorfose, que indica a formação dos primeiros e principais órgãos do animal e a formação de sua estrutura óssea. As Proteínas Ósseas Morfogenéticas (BMP-2 e BMP-4), moléculas essenciais reguladoras no desenvolvimento embrionário e na formação óssea, foram observadas apenas no estádio larval até o período juvenil, não sendo evidenciadas nos estágios anteriores. Os resultados desse trabalho trouxeram novas informações quanto à biologia do desenvolvimento dessa espécie, que certamente poderão auxiliar no aprimoramento de técnicas reprodutivas visando uma melhora na sua produção seja para fins comerciais ou de repovoamento.(AU)

The embryonic development of fishes has great importance in fish culture and on reintroduction of species at risk of extinction into their environment; its knowledge constitutes an important way to minimize diseases and mortality of these species. By using techniques like electron microscopy and immunohistochemistry for bone markers identification, it was possible to evaluate the developmental stages of Leporinus elongatus in more details, helping to clarify the habits and biology of this species. Results showed the ontogeny and ostheogenesis of of Leporinus elongatus this species from fecundation to juvenile, evidencing important structures as size of the yolk, essential to embryo nutrition, the blastopores closure, important event in embryogenesis because it indicates fertilization indexes, and the metamorphosis, which shows the main organs' development including bones. Bone morphogenetic markers 1 and 4, essential regulatory molecules for bone development, had their expression restricted from larva to fry stages, and were not observed in their previous stages. In sum, these results provided new data that may improve reproductive techniques for L. elongatus, and will support commercial and repopulation purposes.(AU)

O desenvolvimento embrionário da Piapara, Leporinus elongatus (Pisces, Anostomidae), utilizando técnicas de histologia, microscopia eletrônica de varredura e imunológicas empregando marcadores ósseos

Abstract: The embryonic development of fishes has great importance in fish culture and on reintroduction of species at risk of extinction into their environment; its knowledge constitutes an important way to minimize diseases and mortality of these species. By using techniques like electron microscopy and immunohistochemistry for bone markers identification, it was possible to evaluate the developmental stages of Leporinus elongatus in more details, helping to clarify the habits and biology of this species. Results showed the ontogeny and ostheogenesis of of Leporinus elongatus this species from fecundation to juvenile, evidencing important structures as size of the yolk, essential to embryo nutrition, the blastopores closure, important event in embryogenesis because it indicates fertilization indexes, and the metamorphosis, which shows the main organs' development including bones. Bone morphogenetic markers 1 and 4, essential regulatory molecules for bone development, had their expression restricted from larva to fry stages, and were not observed in their previous stages. In sum, these results provided new data that may improve reproductive techniques for L. elongatus, and will support commercial and repopulation purposes.

Resumo O desenvolvimento embrionário dos peixes é de grande importância para a piscicultura e na reintrodução de espécies ameaçadas de extinção em seus ambientes, e seu conhecimento constitui uma importante maneira para minimizar doenças e mortalidades dessas espécies. Com o auxílio de técnicas como a Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e a imuno-histoquimica para identificar proteínas ósseas, foi possível avaliar as fases de desenvolvimento com mais riqueza de detalhes, facilitando a compreensão de hábitos e da biologia da espécie. Neste trabalho pudemos observar a ontogenia e osteogênese da Piapara (Leporinus elongatus), desde a fecundação até a fase juvenil, sendo evidenciadas estruturas importantes como o tamanho do vitelo, essencial para a nutrição do embrião; o fechamento do blastóporo, evento principal da embriogênese, que indica as taxas de fertilização; a metamorfose, que indica a formação dos primeiros e principais órgãos do animal e a formação de sua estrutura óssea. As Proteínas Ósseas Morfogenéticas (BMP-2 e BMP-4), moléculas essenciais reguladoras no desenvolvimento embrionário e na formação óssea, foram observadas apenas no estádio larval até o período juvenil, não sendo evidenciadas nos estágios anteriores. Os resultados desse trabalho trouxeram novas informações quanto à biologia do desenvolvimento dessa espécie, que certamente poderão auxiliar no aprimoramento de técnicas reprodutivas visando uma melhora na sua produção seja para fins comerciais ou de repovoamento.

Participação das proteínas morfogenéticas ósseas no crescimento folicular final, ovulação e função luteal

Fatores produzidos no ovário, como os membros da família dos fatores de crescimento transformantes beta (TGF) e seus receptores, exercem papel essencial durante a divergência folicular e ovulação. Interações entre ligantes e seus receptores estão envolvidas em distintas funções ovarianas sob condições fisiológicas ou patológicas. Em especial os fatores produzidos pelos oócitos como a proteína morfogenética óssea 15 (BMP15) e o fator de crescimento e diferenciação 9 (GDF9), desempenham papéis importantes na regulação das funções ovarianas como crescimento e diferenciação folicular. Entretanto, grande parte do conhecimento sobre esses fatores tem sido obtido em modelos in vitro ou através da observação de mutações espontâneas em ovelhas e, apesar da grande relevância, a função destes na fisiologia ovariana ainda é pouco conhecida. Além disso, o papel do sistema TGF na modulação do processo de regressão do corpo lúteo ainda não foi investigado nas espécies domésticas. Neste contexto, esta tese apresenta uma série de estudos acerca da participação de membros da família TGF, em especial das BMPs, na regulação de eventos ovarianos envolvendo o crescimento folicular final, ovulação, formação do corpo lúteo e luteólise. O primeiro estudo trata-se de uma revisão que teve por objetivo reunir a informação disponível na literatura sobre o tema. Posteriormente, um segundo estudo objetivou investigar o nível de transcritos de membros da família TGF e seus receptores durante a luteólise induzida in vivo. Foram utilizadas amostras de corpos lúteos bovinos coletados in vivo nos momentos 0, 2, 12, 24 e 48 h após a administração de uma dose de PGF2 no dia 10 do ciclo estral. Os níveis de RNAm de BMP4, BMP6 e INHBA foram regulados positivamente às 2 h após a administração de PGF2 (P<0,05) em comparação com 0 h. A expressão relativa de RNAm de BMP2, BMP4, ACVR1B, INHBA e INHBB foi regulada positivamente 12 h após a aplicação de PGF2 (P<0,05), enquanto que o TGFBR3 teve uma regulação negativa às 48 h. Coletivamente os dados demonstram que os RNAm de membros da família TGF são regulados pelo tratamento com PGF2, sugerindo um envolvimento no processo de luteólise funcional e morfológica em bovinos. Em um terceiro estudo, objetivou-se determinar o efeito da injeção intrafolicular da BMP15 sobre o crescimento folicular final e ovulação/luteinização. Ainda, avaliou-se o efeito do tratamento com gonadotrofinas em células da granulosa cultivadas in vitro, sobre o nível de transcritos dos receptores da BMP15. Foi realizada a injeções intrafoliculares de BMP15rh nas concentrações de 100 ng/mL, em folículos dominantes, e de 500 ng/mL, em folículos pré-ovulatórios. Os resultados da injeção intrafolicular de BMP15rh demonstram uma tendência (P=0,09) de inibição do crescimento folicular. Já os resultados em folículos pré-ovulatórios suportam a hipótese de um efeito inibitório sobre o crescimento folicular e ovulação, sem inibir a luteinização. Folículos tratados com BMP15 não ovularam e deram origem a estruturas císticas luteinizadas, o que foi confirmado através de dosagens de progesterona sérica. No cultivo das células da granulosa in vitro, a expressão de RNAm de BMPR2 e BMPR1B não foi alterada pelo tratamento com LH ou FSH. Conclui-se que o tratamento com BMP15 inibe o desenvolvimento folicular e a ovulação, induzindo à luteinização e formação de cistos em bovinos. Estudos moleculares futuros são necessários para elucidar os mecanismos de ação da BMP15. Um quarto estudo foi conduzido com o objetivo de validar um método de coleta in vivo de células da granulosa bovinas, para estudos de expressão gênica. Foram testados seis protocolos distintos de separação das células após a coleta, buscando a forma mais adequada para a extração do RNA, sem interferência de outras células eventualmente presentes nas amostras. A partir dos resultados sugerese que o tratamento dos pellets celulares obtidos após aspiração folicular com tampão de lise de eritrócitos possibilita uma melhor qualidade de RNA. Com um protocolo adequado de processamento das células, pode-se dar continuidade à investigação dos efeitos dos fatores foliculares nas células da granulosa in vivo. Coletivamente, os estudos acima descritos, além da gerar conhecimento básico para compreensão do papel dos fatores locais na fisiologia ovariana, podem contribuir no entendimento de processos patológicos e no desenvolvimento de tecnologias que tenham por finalidade a contracepção ou aumento da taxa ovulatória.

Factors produced in the ovary, such as transforming growth factors beta members (TGF) and their receptors, play a key role during follicular deviation and ovulation. The interactions between ligands and receptors are involved in different ovarian functions under physiological or pathological conditions. In particular, factors produced by oocytes such as bone morphogenetic protein 15 (BMP15) and growth and differentiation factor 9 (GDF9) are involved in the regulation of ovarian functions such as follicular development and differentiation. However, most of the knowledge about these factors has been obtained using in vitro models or through spontaneous mutations in ewes and, despite the great relevance, little is known about the function of the oocyte factors in the ovarian physiology. In addition, the regulation and function of the TGF system in the regression process of the corpus luteum has not been evaluated in domestic species. In this regard, this thesis presents a series of studies about the involvement of TGF family members, specially BMPs, in the regulation of ovarian function including final follicular growth, ovulation, corpus luteum formation and luteolysis. The first study aimed to review the information available in the literature on the regulation and function of TGF family members in ovarian function. The objective of the second study was to investigate mRNA regulation of some TGF family ligands and their receptors during induced-luteolysis in vivo. Cows received an injection of prostaglandin F2 (PGF2) on day 10 of the estrous cycle and luteal samples were obtained at 0, 2, 12, 24 or 48 h after treatment. The mRNA levels of BMP4, BMP6 and INHBA were upregulated at 2 h after administration of PGF2 (P<0.05) in comparison to 0 h. The relative mRNA expression of BMP2, BMP4, ACVR1B, INHBA and INHBB was upregulated at 12 h post PGF2 (P<0.05), whereas TGFBR3 was downregulated at 48 h. Collectively, the findings demonstrate that mRNA encoding several TGF family members are regulated after PGF2 administration in a time-specific manner, which suggests that this system is involved in both functional and morphological luteolysis in cattle. The objective of the third study was to evaluate the effect of BMP15 intrafollicular treatment on final follicular growth, ovulation and luteinization in cattle. Furthermore, it was evaluated the effect of gonadotrophins treatment in granulosa cells in vitro on the levels of transcripts encoding BMP15 receptors. Intrafollicular injections of rhBMP15 were performed at concentrations of 100 ng/mL, in dominant follicles, and 500 ng/mL, in preovulatory follicles. The intrafollicular injection of rhBMP15 tended (P=0.09) to inhibit follicular growth, whereas the treatment of preovulatory follicles support the hypothesis of an inhibitory effect on follicular growth and ovulation, without inhibiting luteinization. Follicles treated with BMP15 did not ovulate and became luteinized cysts, which was confirmed by serum progesterone levels. The mRNA expression of BMPR2 and BMPR1B in granulosa cells in vitro was not altered by the treatment with LH or FSH. In conclusion, the treatment with BMP15 inhibits follicular development and ovulation, inducing luteinization and cysts formation in cattle. Future molecular studies are needed to elucidate the mechanism of action of BMP15. The fourth study was conducted to validate a technique for in vivo granulosa cells collection for gene expression studies. Six different protocols for granulosa cells isolation after follicular aspiration were evaluated aiming to identify the more appropriate procedure to extract RNA without the interference of other cells potentially present in the samples. The results suggest that the treatment of granulosa cells pellets with red blood cell lysis buffer, just after follicular aspiration, allows obtaining samples with higher RNA quality. With a well-validated protocol for cells isolation, it will be possible to continue the investigation of the function of follicular factors on granulosa cells in vivo. Taken together, the above-described studies besides generating basic knowledge to understand the role of local factors in ovarian physiology, may contribute to the understanding of pathological processes and to the development of technologies to promote contraception or to increase ovulation rate.

Proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs) e seu papel na regulação da oogênese e da foliculogênese ovariana em mamíferos / The bone morphogenetic proteins (BMPs) and its role in the regulation of ovarian folliculogenesis and oogenesis in mammalian

O processo de foliculogênese é controlado por uma variedade de gonadotrofinas e de fatores de crescimento locais, que agem em conjunto para regular a formação e o desenvolvimento dos folículos ovarianos. Dentre esses fatores, destacam-se as proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs), que representam uma família de fatores de crescimento amplamente estudados e que se caracterizam por controlar as funções ovarianas em diferentes estágios do desenvolvimento folicular. Dessa forma, a presente revisão tem como foco principal descrever os locais de expressão das BMPs dos tipos 2, 4, 6, 7 e 15 e discutir o papel delas, bem como das gonadotrofinas FSH e LH durante a foliculogênese em mamíferos.(AU)

The process of folliculogenesis is controlled by a variety of gonadotropins and local growth factors that act together to regulate formation and development of ovarian follicles. Among these factors, the bone morphogenetic proteins (BMPs) represent a family of growth factors widely studied that have important functions at different stages of ovarian follicular development. Thus, this review aims to describe the local of expression and to discuss the role of BMPs 2, 4, 6, 7 and 15 as well as the gonadotropins FSH and LH during folliculogenesis in mammals. (AU)

Proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs) e seu papel na regulação da oogênese e da foliculogênese ovariana em mamíferos / The bone morphogenetic proteins (BMPs) and its role in the regulation of ovarian folliculogenesis and oogenesis in mammalian

O processo de foliculogênese é controlado por uma variedade de gonadotrofinas e de fatores de crescimento locais, que agem em conjunto para regular a formação e o desenvolvimento dos folículos ovarianos. Dentre esses fatores, destacam-se as proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs), que representam uma família de fatores de crescimento amplamente estudados e que se caracterizam por controlar as funções ovarianas em diferentes estágios do desenvolvimento folicular. Dessa forma, a presente revisão tem como foco principal descrever os locais de expressão das BMPs dos tipos 2, 4, 6, 7 e 15 e discutir o papel delas, bem como das gonadotrofinas FSH e LH durante a foliculogênese em mamíferos.

The process of folliculogenesis is controlled by a variety of gonadotropins and local growth factors that act together to regulate formation and development of ovarian follicles. Among these factors, the bone morphogenetic proteins (BMPs) represent a family of growth factors widely studied that have important functions at different stages of ovarian follicular development. Thus, this review aims to describe the local of expression and to discuss the role of BMPs 2, 4, 6, 7 and 15 as well as the gonadotropins FSH and LH during folliculogenesis in mammals.

Papel da Proteína Morfogenética Óssea 15 (BMP-15) e Kit Ligand (KL) na regulação da foliculogênese em mamíferos / Role of Bone Morphogenetic Protein 15 (BMP-15) and Kit Ligand (KL) in the regulation of folliculogenesis in mammalian

A foliculogênese é coordenada por diversos fatores de crescimento e hormônios responsáveis por garantir o sucesso do desenvolvimento folicular e oocitário. Para a obtenção de oócitos competentes, é necessária uma perfeita interação entre as células somáticas foliculares e o oócito, sendo esta potencialmente regulada por fatores parácrinos produzidos no ovário. Dentre estes fatores, destacam-se a BMP-15 e o KL, sintetizados pelo oócito e pelas células da granulosa, respectivamente. Este artigo revisa o importante papel da BMP-15 e do KL na foliculogênese, enfocando suas características, sítios de expressão, receptores e vias de sinalização, bem como a interação entre estas duas substâncias(AU)

Folliculogenesis is coordinated by many growth factors and hormones responsible for ensuring the success of follicular and oocyte development. To obtain competent oocytes is necessary to have a perfect interaction between follicular somatic cells and the oocyte, which is potentially regulated by paracrine factors produced in the ovary. Among these factors, we highlight BMP-15 and KL, synthesized by the oocyte and granulosa cells, respectively. This article reviews the important role of BMP-15 and KL in folliculogenesis, focusing on their characteristics, sites of expression, receptors and signaling pathways, as well as the interaction between these two substances(AU)

Papel da Proteína Morfogenética Óssea 15 (BMP-15) e Kit Ligand (KL) na regulação da foliculogênese em mamíferos / Role of Bone Morphogenetic Protein 15 (BMP-15) and Kit Ligand (KL) in the regulation of folliculogenesis in mammalian

A foliculogênese é coordenada por diversos fatores de crescimento e hormônios responsáveis por garantir o sucesso do desenvolvimento folicular e oocitário. Para a obtenção de oócitos competentes, é necessária uma perfeita interação entre as células somáticas foliculares e o oócito, sendo esta potencialmente regulada por fatores parácrinos produzidos no ovário. Dentre estes fatores, destacam-se a BMP-15 e o KL, sintetizados pelo oócito e pelas células da granulosa, respectivamente. Este artigo revisa o importante papel da BMP-15 e do KL na foliculogênese, enfocando suas características, sítios de expressão, receptores e vias de sinalização, bem como a interação entre estas duas substâncias

Folliculogenesis is coordinated by many growth factors and hormones responsible for ensuring the success of follicular and oocyte development. To obtain competent oocytes is necessary to have a perfect interaction between follicular somatic cells and the oocyte, which is potentially regulated by paracrine factors produced in the ovary. Among these factors, we highlight BMP-15 and KL, synthesized by the oocyte and granulosa cells, respectively. This article reviews the important role of BMP-15 and KL in folliculogenesis, focusing on their characteristics, sites of expression, receptors and signaling pathways, as well as the interaction between these two substances

Effect of bone morphogenetic protein-7 (BMP-7) on in vitro survival of caprine preantral follicles / Efeito da proteína morfogenética óssea 7 (BMP-7) para a sobrevivência in vitro de folículos pré-antrais caprinos

This study was conducted in order to verify the effect of different concentrations of BMP-7 in the in vitro survival and development of caprine preantral follicles. Fragments of caprine ovarian cortical tissue were cultured for 1 or 7 days in Minimum Essential Medium (MEM+) supplemented with different concentrations of BMP-7 (1, 10, 50 or 100ng/ml). Non-cultured fragments or those cultured for 1 or 7 days were processed for classical histology and transmission electron microscopy (TEM). Parameters such as follicular survival, activation and growth were evaluated. The results showed that, after 1 or 7 days of culture, the percentage of morphologically normal follicles was significantly reduced in all treatments when compared with fresh control, except at 1ng/ml of BMP-7 for 1 day. In addition, the concentration of 10ng/ml of BMP-7 significantly increases follicular diameter from day 1 to 7 of culture. There was no influence of the other concentrations of BMP-7 regarding to the follicular and oocyte diameter. Ultrastructure studies confirmed follicular integrity after 7 days of culture in 1ng/ml BMP-7. In conclusion, small concentrations of BMP-7 can improve the survival and growth of caprine preantral follicles during in vitro culture.(AU)

O presente trabalho foi conduzido de modo a se verificar o efeito de diferentes concentrações da BMP-7 no desenvolvimento in vitro de folículos pré-antrais caprinos. Fragmentos de tecido cortical ovariano caprino foram cultivados por 1 ou 7 dias em Minimum Essential Medium (MEM+) suplementado com diferentes concentrações de BMP-7 (1, 10, 50 ou 100ng/ml). Os fragmentos não cultivados ou aqueles cultivados por 1 ou 7 dias foram processados para histologia clássica e microscopia eletrônica de transmissão (TEM), sendo avaliados parâmetros morfológicos indicativos de viabilidade, ativação e crescimento. Os resultados mostraram que o percentual de folículos morfologicamente normais diminuiu significativamente em todos os tratamentos quando comparados ao controle, exceto na concentração de 1ng/ml por 1 dia de cultivo. Já no D7 todos os tratamentos reduziram significativamente os percentuais de folículos morfologicamente normais. Utilizando 10ng/ml de BMP-7 foi observado um aumento significativo no diâmetro folicular quando comparados os diferentes períodos de cultivo. Não houve influência das demais concentrações de BMP-7 quando avaliados além do diâmetro folicular o diâmetro oocitário. A análise por TEM confirmou a integridade ultra-estrutural nos folículos após 7 dias de cultivo com 1ng/ml de BMP-7 . Em conclusão, o BMP-7 em baixas concentrações pode melhorar a sobrevivência e o crescimento durante o cultivo in vitro de folículos pré-antrais caprinos.(AU)

Bone Morphogenetic Protein-6 (BMP-6) induces atresia in goat primordial follicles cultured in vitro / / A Proteína Morfogenética Óssea-6 (BMP-6) induz a atresia em folículos primordiais caprinos cultivados in vitro

This study investigated the effects of bone morphogenetic protein 6 (BMP-6) on in vitro primordial follicle development in goats. Samples of goat ovarian cortex were cultured in vitro for 1 or 7 days in Minimum Essential Medium (control medium) supplemented with different concentrations of BMP-6. Follicle survival, activation and growth were evaluated through histology and transmission electron microscopy (TEM). After 7 days of culture, histological analysis demonstrated that BMP-6 enhanced the percentages of atretic primordial follicles when compared to fresh control (day 0). Nevertheless, BMP-6 increased follicular and oocyte diameter during both culture periods. As the culture period progressed from day 1 to day 7, a significant increase in follicle diameter was observed with 1 or 50ng/ml BMP-6. However, on the contrary to that observed with the control medium TEM revealed that follicles cultured for up to 7 days with 1 or 50ng/ml BMP-6 had evident signs of atresia. In conclusion, this study demonstrated that BMP-6 negatively affects the survival and ultrastructure of goat primordial follicles.(AU)

O presente estudo investigou os efeitos da proteína morfogenética óssea-6 (BMP-6) no desenvolvimento in vitro de folículos primordiais caprinos. Amostras de córtex ovariano de cabras foram cultivados por 1 ou 7 dias em Meio Essencial Mínimo (meio controle) suplementado com diferentes concentrações de BMP-6. As taxas de sobrevivência, ativação e crescimento foram avaliadas por histologia clássica e microscopia eletrônica de transmissão (MET). Após 7 dias de cultivo, a análise histológica demonstrou que a BMP-6 aumentou o percentual de folículos primordiais degenerados no dia 7 quando comparados ao controle fresco (D0). Além disso, houve um aumento significativo do diâmetro folicular e oocitário em ambos os períodos de cultivo em todos os tratamentos na presença de BMP-6. Com a progressão do cultivo do dia 1 para o dia 7, nos tratamentos com 1 ou 50ng/ml de BMP-6, foi observado um aumento significativo no diâmetro folicular. Entretanto, contrário ao observado no meio controle, a MET revelou que os folículos cultivados nesses tratamentos apresentavam sinais evidentes de atresia. Em conclusão, esse estudo demonstrou que a BMP-6 afeta negativamente a sobrevivência e a ultra-estrutura de folículos primordiais caprinos.(AU)

Função e regulação de membros da família TGF beta no crescimento folicular final e ovulação em bovinos

A foliculogênese antral culmina com a ovulação, sendo controlada primariamente por mecanismos endócrinos bem estabelecidos. Após a emergência folicular, em espécies monovulares, apenas um folículo é selecionado para continuar o desenvolvimento, enquanto que os demais entram em processo de atresia. Uma vez que todos os folículos encontram-se sob o mesmo ambiente endócrino, fica evidente que fatores produzidos no ovário são reguladores do crescimento e da diferenciação folicular. Neste contexto, destacam-se fatores pertencentes à superfamília dos fatores de crescimento transformantes beta (TGF-) e seus receptores. Apesar da grande relevância, a real função dos TGF- na fisiologia ovariana ainda é desconhecida. Desta forma, o presente estudo teve por objetivo avançar no entendimento da função e regulação de fatores locais no ovário bovino, avaliando a função do fator de crescimento e diferenciação 9 (GDF9) no crescimento folicular final. Além disso, testou-se a hipótese de que os membros da família TGF-, em especial as proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs) e seus receptores, são regulados durante o processo de luteinização e ovulação em bovinos. A injeção intrafolicular de GDF9 nas concentrações finais de 100 ou 1000ng/mL não teve efeito sobre o crescimento folicular final, manifestação de estro e ovulação (P>0,05). Nas células da granulosa de folículos pré-ovulatórios (>12 mm), a expressão de RNAm das BMPs 1 e 4 não foi regulada pela aplicação i.m. de GnRH (hora 0), enquanto que a expressão de BMP2 aumentou significativamente 3 e 6 horas após (P<0,05). A expressão de RNAm dos receptores BMPR2 e TGFBR1 nas células da granulosa aumentou significativamente 12h após tratamento com GnRH. Os receptores BMPR1A e 1B foram mais expressos no momento do tratamento, diminuindo 3 e 6 h após, apresentando uma elevação às 12h, diminuindo novamente nas 24h. Houve uma correlação negativa entre a expressão dos receptores TGFBR1 (R2=0,46), BMPR1A (R2=0,5) e 1B (R2=0,5) e os níveis intrafoliculares de progesterona. Coletivamente, os dados sugerem que a elevação nos níveis de GDF9 em folículos diferenciados não altera o destino dos mesmos. A expressão da BMP2 sugere uma participação no processo de luteinização/ovulação enquanto que a expressão dos receptores sugere uma inibição no processo de luteinização. A elucidação do papel dos fatores locais na fisiologia ovariana pode contribuir com o entendimento de processos patológicos e no desenvolvimento de tecnologias que tenham por finalidade a contracepção ou o aumento da taxa ovulatória.

Antral follicle development culminates with ovulation, being mainly controlled by well-established endocrine mechanisms. After follicular emergence, in monovulatory species, only one follicle is selected to grow whereas all the others undergo atresia. During these processes, all the follicles are under the same endocrine environment, indicating the participation of locally produced factors in the regulation of follicular growth and differentiation. In this context, the involvement of transforming growth factors-beta (TGF-) family members and their receptors is highlighted. Despite their relevance, the real functions of TGF- proteins in ovarian physiology is still poorly understood. In this regard, the aim of this study was to gain insight into the function and regulation of ovarian factors, investigating the function of growth and differentiation factor 9 (GDF9) during dominant follicle growth. Furthermore, we tested the hypothesis that TGF- members, especially bone morphogenetic proteins (BMPs) and their receptors are regulated during luteinization and ovulation processes in cattle. The intrafollicular injection of GDF9 at final concentrations of 100 and 1000ng/mL did not affect follicular growth, estrus manifestation and ovulation (P>0.05). In granulosa cells from preovulatory follicles (>12mm), mRNA expression of BMPs 1 and 4 was not regulated after i.m. administration of GnRH (0h), while the BMP2 expression was significantly upregulated at 3 and 6h (P<0.05). The mRNA expression of BMPR2 and TGFBR1 in granulosa cells increased 12h after GnRH treatment (P<0.05). The receptors BMPR1A and 1B were more expressed at the moment of GnRH injection, decreasing at 3 and 6h, increasing at 12h and decreasing again at 24h. There was a negative correlation between mRNA expression of TGFBR1 (R2=0.46), BMPR1A (R2=0.5) and 1B (R2=0.5) and intrafollicular progesterone levels. Collectively, the results suggest that increasing the levels of GDF9 in differentiated follicles does not affect their fate. BMP2 expression pattern suggests an involvement in luteinization/ovulation processes, whereas the expression of TGF- receptors suggests an inhibitory action during luteinization. Elucidating the functions of local factors in ovarian physiology would allow to better understand pathological processes and the development of technologies aiming contraception or, paradoxally, increasing ovulation rates.

A superfamília dos fatores de crescimento transformante-β e o controle da foliculogênese em mamíferos / Transforming growth factors -β superfamily members and control of folliculogenesis in mammals

A foliculogênese ovariana é um processo complexo caracterizado pela formação, crescimento e maturação folicular. Esta revisão discute a localização, os sítios de ação e as funções de fatores da família TGF-β [proteínas morfogenéticas ósseas dos tipos 2 (BMP-2), 4 (BMP-4), 6 (BMP-6), 7 (BMP-7), 15 (BMP-15), fator de diferenciação do crescimento-9 (GDF-9), ativina-A, inibina, hormônio anti-Mülleriano (AMH) e fator de crescimento transformante-ß (TGF-ß)] na regulação da foliculogênese em mamíferos. Alguns fatores, como o AMH, atuam inibindo o crscimento dos folículos primordiais e reduzindo a sensibilidadade dos folículos em crescimento ao FSH, enquanto vários outros (BMP-2, 4, 7, 15, GDF-9, ativina-A e TGF-ß) estimulam o crecimento folicular. Em geral, a foliculogênese é regulada por uma complexa interação desses fatores de crescimento com as gonadotrofinas.(AU)

Ovarian folliculogenesis is a complex process that includes follicular formation, growth and maturation. This review discuss the localization and functions of TGF-β family members [bone morphogenetic proteins 2 (BMP-2), 4 (BMP-4), 6 (BMP-6), 7 (BMP-7), 15 (BMP-15), growth and differentiation factor-9 (GDF-9), activin-A, inibin, anti-Müllerian hormony (AMH) and transforming growth factor-ß (TGF-ß)] in the regulation of ovarian folliculogenesis in mammals. Some of these factors, such as AMH, inhibit growth of primoridal follicles and reduce sensitity of growing follicles to FSH, while various others (BMP-2, 4, 7, 15, GDF-9, activina-A and TGF-ß) stimulate follicular growth. In general, folliculogenesis is regulated by a complex interaction of these factors with gonadotrophins.(AU)

A superfamília dos fatores de crescimento transformante-β e o controle da foliculogênese em mamíferos / Transforming growth factors -β superfamily members and control of folliculogenesis in mammals

A foliculogênese ovariana é um processo complexo caracterizado pela formação, crescimento e maturação folicular. Esta revisão discute a localização, os sítios de ação e as funções de fatores da família TGF-β [proteínas morfogenéticas ósseas dos tipos 2 (BMP-2), 4 (BMP-4), 6 (BMP-6), 7 (BMP-7), 15 (BMP-15), fator de diferenciação do crescimento-9 (GDF-9), ativina-A, inibina, hormônio anti-Mülleriano (AMH) e fator de crescimento transformante-ß (TGF-ß)] na regulação da foliculogênese em mamíferos. Alguns fatores, como o AMH, atuam inibindo o crscimento dos folículos primordiais e reduzindo a sensibilidadade dos folículos em crescimento ao FSH, enquanto vários outros (BMP-2, 4, 7, 15, GDF-9, ativina-A e TGF-ß) estimulam o crecimento folicular. Em geral, a foliculogênese é regulada por uma complexa interação desses fatores de crescimento com as gonadotrofinas.

Ovarian folliculogenesis is a complex process that includes follicular formation, growth and maturation. This review discuss the localization and functions of TGF-β family members [bone morphogenetic proteins 2 (BMP-2), 4 (BMP-4), 6 (BMP-6), 7 (BMP-7), 15 (BMP-15), growth and differentiation factor-9 (GDF-9), activin-A, inibin, anti-Müllerian hormony (AMH) and transforming growth factor-ß (TGF-ß)] in the regulation of ovarian folliculogenesis in mammals. Some of these factors, such as AMH, inhibit growth of primoridal follicles and reduce sensitity of growing follicles to FSH, while various others (BMP-2, 4, 7, 15, GDF-9, activina-A and TGF-ß) stimulate follicular growth. In general, folliculogenesis is regulated by a complex interaction of these factors with gonadotrophins.

Effect of bovine bone morphogenetic proteins on radius fracture healing in rabbits / Efeito de proteínas morfogenéticas ósseas de origem bovina na consolidação de fraturas induzidas no rádio de coelhos

PURPOSE: To investigate the effect of bovine bone morphogenetic proteins (bBMPs) bound to hydroxyapatite plus collagen in the healing of unstable radius fractures. METHODS: A transverse fracture was induced at the mid of the diaphysis in both radii on 15 Norfolk rabbits with average age of 5.5 months and 3.5kg. A mixture of bBMPs bound to thin powdered hydroxyapatite (bBMP-HA) and bovine collagen as agglutinant was applied to the right radius fracture site. The left radius fracture was considered control and no treatment was used. After 30, 60 and 90 days (5 rabbits/period) the rabbits were euthanized and the radii were collected for histological analysis. RESULTS: The descriptive histological analysis revealed that repair was similar for both forelimbs. The histomorphometric analysis showed that the mean area of newly formed bone was 867442.16 mm², 938743.00 mm² and 779621.06 mm² for the control forelimbs, and 841118.47 mm², 788038.76mm² and 618587.24 mm² for the treated forelimbs at 30, 60 and 90 days, respectively. Thus the newly formed bone area was 12.17 percent larger in the forelimbs treated with bBMP-HA/collagen than in the control forelimbs (p<0.05, Tukey test) in the 60-day period after surgery. In both forelimbs the newly formed bone area increased throughout the experimental period until the complete fracture healing. CONCLUSION: Based on the result obtained here we concluded that bBMP-HA/collagen induced a lower but significant improvement in fracture consolidation.(AU)

OBJETIVO: Investigar a influência de Proteínas Morfogenéticas Osseas de origem bovina (bBMPs) ligadas a hidroxiapatita mais colágeno na consolidação de fraturas instáveis do rádio. MÉTODOS: Em 15 coelhos com aproximadamente 5,5 meses de idade e peso médio de 3,5kg foi realizada uma fratura transversa na porção média da diáfise do rádio de ambos os membros. Na fratura do rádio direito foi aplicada mistura de bBMPs ligadas à hidroxiapatita (bBMP-HA) e colágeno bovino como aglutinante e na do rádio esquerdo, considerada controle, nenhum tratamento foi usado. Os coelhos (cinco por período) foram submetidos à eutanásia aos 30, 60 e 90 dias após a cirurgia para realização do processamento histológico e análise microscópica. RESULTADOS: A análise histológica descritiva revelou que a consolidação foi similar para os membros tratado e controle. Pela análise histomorfométrica, a área de novo osso foi em média 867442,16 mm², 938743.00 mm² e 779621,06 mm² para os membros controles e 841118,47 mm², 788038,76mm² e 618587,24 mm² para os membros tratados, aos 30, 60 e 90 dias, respectivamente. Desta forma, aos 60 dias de pós-operatório a área de novo osso foi 12.17 por cento maior no membro tratado com bBMP-HA/colágeno em relação ao membro controle (p<0.05, teste de Tukey). Em ambos os membros a área de novo osso aumentou durante o período experimental até a total consolidação da fratura. CONCLUSÃO: Baseado nos resultados obtidos foi possível concluir que a mistura de bBMP-HA/colágeno induziu pequena, porém significante melhora na consolidação da fratura.(AU)

Effect of bovine bone morphogenetic proteins on radius fracture healing in rabbits / Efeito de proteínas morfogenéticas ósseas de origem bovina na consolidação de fraturas induzidas no rádio de coelhos

PURPOSE: To investigate the effect of bovine bone morphogenetic proteins (bBMPs) bound to hydroxyapatite plus collagen in the healing of unstable radius fractures. METHODS: A transverse fracture was induced at the mid of the diaphysis in both radii on 15 Norfolk rabbits with average age of 5.5 months and 3.5kg. A mixture of bBMPs bound to thin powdered hydroxyapatite (bBMP-HA) and bovine collagen as agglutinant was applied to the right radius fracture site. The left radius fracture was considered control and no treatment was used. After 30, 60 and 90 days (5 rabbits/period) the rabbits were euthanized and the radii were collected for histological analysis. RESULTS: The descriptive histological analysis revealed that repair was similar for both forelimbs. The histomorphometric analysis showed that the mean area of newly formed bone was 867442.16 mm², 938743.00 mm² and 779621.06 mm² for the control forelimbs, and 841118.47 mm², 788038.76mm² and 618587.24 mm² for the treated forelimbs at 30, 60 and 90 days, respectively. Thus the newly formed bone area was 12.17 percent larger in the forelimbs treated with bBMP-HA/collagen than in the control forelimbs (p<0.05, Tukey test) in the 60-day period after surgery. In both forelimbs the newly formed bone area increased throughout the experimental period until the complete fracture healing. CONCLUSION: Based on the result obtained here we concluded that bBMP-HA/collagen induced a lower but significant improvement in fracture consolidation.

OBJETIVO: Investigar a influência de Proteínas Morfogenéticas Osseas de origem bovina (bBMPs) ligadas a hidroxiapatita mais colágeno na consolidação de fraturas instáveis do rádio. MÉTODOS: Em 15 coelhos com aproximadamente 5,5 meses de idade e peso médio de 3,5kg foi realizada uma fratura transversa na porção média da diáfise do rádio de ambos os membros. Na fratura do rádio direito foi aplicada mistura de bBMPs ligadas à hidroxiapatita (bBMP-HA) e colágeno bovino como aglutinante e na do rádio esquerdo, considerada controle, nenhum tratamento foi usado. Os coelhos (cinco por período) foram submetidos à eutanásia aos 30, 60 e 90 dias após a cirurgia para realização do processamento histológico e análise microscópica. RESULTADOS: A análise histológica descritiva revelou que a consolidação foi similar para os membros tratado e controle. Pela análise histomorfométrica, a área de novo osso foi em média 867442,16 mm², 938743.00 mm² e 779621,06 mm² para os membros controles e 841118,47 mm², 788038,76mm² e 618587,24 mm² para os membros tratados, aos 30, 60 e 90 dias, respectivamente. Desta forma, aos 60 dias de pós-operatório a área de novo osso foi 12.17 por cento maior no membro tratado com bBMP-HA/colágeno em relação ao membro controle (p<0.05, teste de Tukey). Em ambos os membros a área de novo osso aumentou durante o período experimental até a total consolidação da fratura. CONCLUSÃO: Baseado nos resultados obtidos foi possível concluir que a mistura de bBMP-HA/colágeno induziu pequena, porém significante melhora na consolidação da fratura.

Proteínas morfogenéticas ósseas associadas a osso esponjoso autógeno na reparação de falhas experimentais na calota craniana de coelhos (Oryctolagus cuniculus) / Bone morphogenetic proteins associated with autogenous bone graft in the reparation of calvarial experimental defects of rabbits (Oryctolagus cuniculus)

Foi avaliada a reparação óssea após implantação de proteínas morfogenéticas ósseas (BMP) em diferentes concentrações e períodos de observação, carreadas por auto-enxerto ósseo esponjoso (EOE), em falhas ósseas, produzidas na região fronto-parietal do crânio de 20 coelhas. A falha I não foi preenchida, a II foi completamente preenchida com 3mg de EOE e as falhas III, IV, V e VI foram preenchidas com EOE associado a 0,5; 1; 2 e 5mg de BMP, respectivamente. Nas avaliações mesoscópicas, post mortem, verificou-se que, independentemente do período de tratamento, o preenchimento ósseo iniciou-se a partir das bordas para o centro e do fundo para a superfície das falhas. Na falha I manifestou-se o menor preenchimento ósseo quando comparada com as demais falhas, em todos os períodos, e nas que receberam 2mg de BMP exibiu-se a melhor cobertura óssea. Microscopicamente, verificou-se que, aos sete dias, o preenchimento ósseo iniciou-se a partir das bordas e do fundo da lesão, com mobilização e diferenciação de células provenientes do periósteo e das meninges, respectivamente e, nas avaliações subseqüentes, a atividade osteoblástica originou-se, também, de "ilhas de ossificação" semelhantes a centros de ossificação, localizadas no centro da falha. A formação trabecular aumentou, proporcionalmente, com a concentração utilizada de BMP, e a aposição e organização óssea aumentaram com o tempo de observação. Verificou-se também a presença de tecido cartilaginoso. A BMP associada ao EOE contribuiu para a formação de novo tecido ósseo, promovendo maior mobilização, diferenciação e organização celular, e abreviou o tempo de formação óssea, sugerindo processo de ossificação endocondral. Os melhores resultados foram observados com a associação de 2mg de BMP a 3mg de enxerto, e a adição de BMP, mesmo em menor quantidade, determinou precocidade de formação óssea. A maior quantidade de BMP não determinou maior preenchimento ósseo(AU)

Aspects of bone repair were evaluated after implantation of bone morphogenetic proteins (BMP) in different concentrations. They were carried by autogenous bone graft in defects created on skulls of 20 adult, young female rabbits, randomizedly divided into five experimental groups and were observed at five times. After exposure of skull bones, six bone defects on the fronto-parietal region of each animal were performed. The defect I was not filled, the II was completed filled with 3mg of autogenous bone graft and the defects III, IV, V, and VI were filled with autogenous bone graft associated with 0.5; 1; 2 and 5mg of BMP, respectively. In the post-mortem mesoscopic evaluations, it was observed that, independently of the treatment period of the defects, the bony filling began from the borders to the center, and from the botton to the surface of the lessions. The bony filling of the defect I was the smallest when compared with the others defects, in all the observation moments. It was also verified that until 2mg the higher the concentration of BMP used, better was the bone cover. Microscopically, it was verified in the first evaluations, on the seventh day, that the bony growth started from the borders and from the bottom of the lesion, with mobilization and differentiation of cells deriving from the periosteum and the meninges, respectively. In the subsequent evaluations, the osteoblastic activity also derived from "ossification islands" to ossification centers, located in the center of the flaw. The trabecular formation increased proportionally with the concentration of BMP used, and the apposition and bony organization increased proportionally with the time of observation. The presence of cartilaginous tissue was verified in all the flaws. In conclusion, the use the higher concentration of BMP did not determinate the better new bone formation. The association of BMP with autogenous bone graft contributed to the formation of new bony...(AU)

Comparação de osteossíntese com placa e osteossíntese com placa associada a enxerto de proteína morfogenética óssea em fratura bilateral distal de rádio e ulna em cão - Relato de Caso / Comparison between bone plate osteosinthesis and bone plate associated to bone morphogenetic protein in a bilateral distal fracture of radius and ulna in a dog - Case Report

Os cuidados e dificuldades em reparação de fraturas de rádio-ulna de cães de porte pequeno são conhecidos, com a ocorrência freqüente de não-união óssea, principalmente no que tange as fraturas distais, relacionadas a características anatômicas inerentes, como pouco recobrimento de tecido muscular, canal medular de diâmetro reduzido, e pouca vascularização. Tendo em vista esta realidade, descreve-se a comparação entre o tratamento com placa e parafuso e placa e parafuso com adição de proteína morfogenética óssea em fratura completa transversa de terço distal bilateral de rádio-ulna, de semelhante apresentação em cão da raça Pinscher, atendido no Serviço de Cirurgia de Pequenos Animais do HOVET / USP. Avaliou-se, comparativamente, o tempo de formação de calo ósseo, por exames radiográficos, aos 30, 60, 90 e 120 dias de pós-operatório, onde foi encontrado tempo de cicatrização de 90 dias no membro controle enquanto que, no membro tratado com a proteína morfogenética óssea, o tempo de cicatrização foi de 30 dias, demonstrando a possibilidade de incremento que o uso de fatores de crescimento podem trazer ao tratamento de fraturas em cães de pequeno porte.(AU)

The aims and difficulties in small breed dogs radius and ulna fracture repair are known, frequently occurring cases of nonunionn principally in distal part of these bones, by their inherent anatomical characteristics, as poor muscular recovering, small medullar channel and less vascular aport, that are the principal causes of complication in post surgical or conservative procedures. By this reallty, the comparison between treatment with bone plate and screws, with and without addition of bone morphogenetic protein (BMP), in distal fracture of radius and ulna in a Doberman Pinscher, cared in HOVET surgical area is described. It was evaluated the bone callus formation, by radiographic examination in 30th ,60th ,90th and 120th day of surgical procedure, being visualized total consolidation after 90 days in the control member and after 30 days in the BMP member, showing all the beneficial possibilities of the BMP use in cases of distal fractures in small breed dogs.(AU)

Estudo comparativo entre as osteossínteses com placas e osteossínteses com placas associadas a enxertos de proteína morfogenética óssea (Gen-Tech®) em fraturas distais de rádio-ulna em cães com menos de 6 quilos / A comparative study of osteosynthesis with plates and plates associated with grafts of bone morphogenic proteins (Gen-Tech®) in distal radio-ulna fractures in dogs with less than 6 quilograms

Sabe-se que Bone morphogenic proteins (BMP) são promotores de osteogênese, mas pesquisas ainda estão sendo feitas no intuito de descobrir sua atuação clínica na reparação de fraturas. As dificuldades inerentes da reparação de fraturas de rádio-ulna de cães abaixo de 6 quilos são conhecidas, principalmente, com a ocorrência freqüente de não-união óssea devido a pouca vascularização da porção distal do radio. Tendo em vista esta realidade objetivou-se a comparação da velocidade de formação de calo ósseo entre o tratamento com placas e parafusos e tratamento com placas e parafusos associados a BMP. Foram realizadas 33 osteossinteses de regiões distais de rádio-ulna de cães, sendo 17 animais do grupo controle (tratamento com placas e parafusos) e 16 animais do grupo BMP (tratamento com placas e parafusos com adição de proteína morfogenética óssea BMP). Avaliou-se, comparativa-mente, o tempo de formação de calo ósseo, por exames radiográficos, aos 30, 60, 90,120, 180 e 210 dias de pós-operatório. Foi encontrada a média de tempo de cicatrização de 127,5 +/- 34,15 dias no grupo controle e, no grupo tratado com a proteína morfogenética óssea, a média foi de 32 +/- 15 dias. Com isto pode-se concluir que as fraturas distais de rádio e ulna, em cães menos de 6 kg, tratadas com proteína morfogenética óssea sofreram redução significativa do tempo de formação de calo ósseo.(AU)

It is well known that bone morphogenic proteins (BMP) cause osteogenesis, yet clinical research must be performed in order to really show their benefits. Animals weighing less than 6 kg show well known difficulties regarding radius and ulna fracture repair mainly with bone non-union, due to poor vascularization of the distal portion of the radius. Therefore this study aimed to compare the velocity of bone callus formation in the treatment of fracture repair with plates and screws alone or with plates and screws plus BMP. Thirty three dogs with radius and ulna fractures were distributed into two groups, where animals of the control group received the conservative treatment performed with screws and plates alone, whilst the other group received the conservative treatment and BMP. The time of bone callus formation was evaluated comparatively through radiographic exams 30, 60, 90, 120, 180 and 210 days after the surgical procedure. Animals treated with BMP showed a healing time of 32±15 days, which was significantly different (p <0.001) from the control group which required 127±34 days. With the results obtained, it can be concluded that the distal radio-ulna fractures of dogs weighing less than 6 kg suffered a significant reduction of the bone callus formation time, which was around 90 days.(AU)

Assessment of bovine biomaterials containing bone morphogenetic proteins bound to absorbable hydroxyapatite in rabbit segmental bone defects / Avaliação de biomateriais bovinos contendo proteínas morfogenéticas ósseas absorvidas a hidroxiapatita em defeitos ósseos segmentares em coelhos

PURPOSE: To evaluate the osteo-regenerative capacity of two proprietary bone grafting materials, using a segmental defect model in both radial diaphyses of rabbits. METHODS: The right defect was filled with pooled bone morphogenetic proteins (pBMPs) bound to absorbable ultrathin powdered hydroxyapatite (HA) mixed with inorganic and demineralized bone matrix and bone-derived collagen, derived from bovine bone (Group A). The left defect was filled with bovine demineralized bone matrix and pBMPs bound to absorbable ultrathin powdered HA (Group B). In both groups, an absorbable membrane of demineralized bovine cortical was used to retain the biomaterials in the bone defects, and to guide the tissue regeneration. The rabbits were euthanized 30, 90 and 150 days after surgery. Radiographic, tomographic and histologic evaluations were carried out on all specimens. RESULTS: At 30 days, the demineralized cortical bone cover was totally resorbed in both groups. HA was totally resorbed from Group A defects, whereas HA persisted in Group B defects. A prominent foreign body reaction was evident with both products, more pronounced in sections from Group B. At 90 days, the defects in Group B exhibited more new bone than Group A. However, at 150 days after surgery, neither treatment had stimulated complete repair of the defect. CONCLUSION: The partial bone healing of the segmental defect occurred with low or none performance of the biomaterials tested.(AU)

OBJETIVO: Avaliar a capacidade osteo-regenerativa de dois biomateriais utilizando um modelo de defeito segmentar efetuado nas diáfises do rádio de coelhos. MÉTODOS: O defeito direito foi preenchido com pool de proteínas morfogenéticas ósseas (pBMPs) e hidroxiapatita em pó ultrafina absorvível (HA) combinada com matriz óssea inorgânica desmineralizada e colágeno, derivados do osso bovino (Grupo A). O defeito esquerdo foi preenchido com matriz óssea desmineralizada bovina com pBMPs e hidroxiapatita em pó ultrafina absorvível (Grupo B). Em ambos os defeitos utilizou-se membrana reabsorvível de cortical bovina desmineralizada para reter os biomateriais no defeito ósseo e guiar a regeneração tecidual. Os coelhos foram submetidos à eutanásia aos 30, 90 e 150 dias após a cirurgia. Foram efetuados exames radiográficos, tomográficos e histológicos em todos os espécimes. RESULTADOS: Aos 30 dias de pós-cirúrgico, o osso cortical desmineralizado foi totalmente reabsorvido em ambos os grupos. A HA tinha reabsorvido nos defeitos do Grupo A, mas persistiu nos do Grupo B. Uma reação de corpo estranho foi evidente com ambos os produtos, porém mais pronunciada no Grupo B. Aos 90 dias os defeitos do grupo B tinham mais formação óssea que os do Grupo A. Entretanto, aos 150 dias após a cirurgia, nenhum tratamento havia promovido o completo reparo do defeito. CONCLUSÃO: Os biomateriais testados contribuíram pouco ou quase nada para a reconstituição do defeito segmentar.(AU)