Estudo dos efeitos morfológicos, comportamentais e epigenéticos da administração de doxorrubicina no período da infância de ratos Wistar, tratados ou não com resveratrol ou curcumina, e avaliados em idade adulta

As antraciclinas são potentes agentes quimioterápicos que revolucionaram o manejo do câncer infantil. Elas formam a base de uma série de protocolos terapêuticos usados para tratar tumores sólidos e hematológicos em crianças. Efeitos físicos e psicológicos adversos de longo prazo acompanham a sobrevivência de muitas das crianças curadas e submetidas a protocolos quimioterapêuticos e podem não se manifestar até a idade adulta, afetando diversos aspectos da função cognitiva, incluindo alterações de atenção, memória, velocidade de processamento, intelecto, desempenho acadêmico e saúde emocional. Objetivo: O presente estudo busca investigar a ocorrência da disfunção cognitiva em ratos adultos tratados com doxorrubicina (DOX) durante a infância, em associação ou não com o resveratrol (RSV), um polifenol natural que possui efeitos nootrópicos, ou com a curcumina (CUR), um pigmento amarelo extraído da Curcuma longa, que possui ação antioxidante e anti-inflamatória, analisando-se os possíveis efeitos morfológicos, comportamentais e epigenéticos de tais administrações. Métodos: Foram utilizados ratos Wistar machos, com duas semanas de idade, injetados com DOX (2,5 mg/kg, uma vez por semana, via intraperitoneal - IP, durante três semanas e 0,1 mL/kg/dia de água destilada por via oral - VO), em associação ou não com RSV (10 mg/kg/dia, durante o mesmo período, VO), ou com CUR (100 mg/kg/dia, durante o mesmo período, VO). Os animais do grupo controle receberam uma injeção semanal de solução fisiológica a 0,9% por via IP (mesmo volume) e água destilada diariamente (VO). Durante o período experimental, foram realizados estudos comportamentais, incluindo o teste de campo aberto, o teste de reconhecimento de novos objetos e o teste do labirinto de Barnes. Os encéfalos foram coletados e analisados pela técnica de coloração com hematoxilina-eosina e por imuno-histoquímica para a GFAP (glial fibrillary acidic protein) em astrócitos; para o marcador de micróglia Iba1 e para o marcador de apoptose caspase-3. As áreas analisadas incluíram o córtex frontal, o hipocampo (CA1, CA2 e CA3) e o hipotálamo. A análise morfométrica demonstrou que os ratos injetados com DOX apresentaram maior expressão de GFAP, Iba1 e caspase 3 em todas as áreas analisadas e que, tanto o RSV, quanto a CUR, foram capazes de diminuir tais expressões. A administração de DOX durante a infância foi capaz de causar prejuízos à memória espacial, e às memórias de curto e de longo prazo na vida adulta dos animais. Tais alterações foram prevenidas pela CUR, mas não pelo RSV. A DOX, em associação ou não com RSV e CUR, também demonstrou interferir, a longo prazo, na atividade de enzimas modificadoras da metilação (SET1A, SUV39, EZH2, KDM5B, KDM4A e KDM6B) e da acetilação de histonas (HAT1, SIRT1 e PCAF) na região do hipocampo destes animais. Os resultados sugerem que a astrogliose, a microgliose e a apoptose apresentadas na idade adulta estão relacionadas com o uso de DOX durante a infância e que o tratamento com RSV ou CUR foi capaz de minimizar tais alterações. No entanto, só a CUR demonstrou exercer efeito protetor em relação aos déficits de memória induzidos pela quimioterapia. Conclusão: Por fim, as alterações encontradas em importantes enzimas moduladoras da metilação e da acetilação de histonas na região do hipocampo sugerem que tais alterações morfológicas e comportamentais podem ser influenciadas por fatores epigenéticos e que o RSV e a CUR podem exercer ações protetivas aos danos tardios induzidos pela quimioterapia na infância.

Anthracyclines are potent chemotherapeutic agents that have revolutionized childhood cancer management. They form the backbone of a range of therapeutic treatments used to treat solid, hematologic tumors in children. Long-term adverse physical and psychological effects accompany cured children following chemotherapeutic protocols and may not manifest until adulthood, affecting several aspects of cognitive function, including changes in attention, memory, processing speed, intellect, performance academic and emotional health. The present study aims to investigate the occurrence of cognitive dysfunction in adult rats treated with doxorubicin (DOX) during childhood, in association or not with resveratrol (RSV), a natural polyphenol that has nootropic effects, or with curcumin (CUR), a yellow pigment extracted from Curcuma longa, which has antioxidant and anti-inflammatory actions, analyzing the morphological, behavioral, and epigenetic effects of such administrations. Two-week-old male Wistar rats injected with DOX (2.5 mg / kg, once a week, intraperitoneally - IP, for three weeks and 0.1 mL / kg / day of distilled water by oral - VO), in association or not with RSV (10 mg / kg / day, during the same period, VO), or with CUR (100 mg / kg / day, during the same period, VO). The animals in the control group received a weekly injection of 0.9% saline solution via IP (same volume) and daily distilled water (VO). During the experimental period, behavioral studies were carried out, including the open field test, the new object recognition test, and the Barnes maze test. The brains were collected and analyzed by the hematoxylin-eosin staining technique and by immunohistochemistry for GFAP (glial fibrilary acidic protein) in astrocytes; for the microglia marker Iba1 and for the apoptosis marker caspase-3. Areas investigated included the frontal cortex, the hippocampus (CA1, CA2 and CA3) and the hypothalamus. Morphometric analysis showed that rats injected with DOX presented increased expression of GFAP, Iba1 and caspase 3 in all areas and that both RSV and CUR were able to prevent such increases. The administration of DOX during childhood was able to impair spatial memory, and short- and long-term memories during adult life. Such deficits were prevented by CUR administration, but not with RSV. DOX, in association or not with RSV and CUR also affected, in the long term, the activity of methylation modifying enzymes (SET1A, SUV39, EZH2, KDM5B, KDM4A and KDM6B) and of acetylation enzymes (HAT, SIRT1 and PCAF) for histones in the hippocampus of these animals. The results suggest that astrogliosis, microgliosis and apoptosis in adulthood are related to the use of DOX during childhood and that treatment with RSV or CUR was able to minimize changes. However, only CUR presented a protective effect in relation to chemotherapy-induced memory deficits. Finally, changes found in important histone methylation and acetylation modulating enzymes in the hippocampus suggest that morphological and behavioral changes may be influenced by epigenetic factors and that RSV and CUR may exert preventive actions against late changes induced by childhood chemotherapy.

Nosectomy in cats with squamous cell carcinoma - Seven cases report / Nosectomia em felinos portadores de carcinoma espinocelular - Relato de sete casos

Squamous cell carcinoma is a keratinocytes malignant tumor, the definitive diagnosis of this disease is based on histopathology examination of the lesions. The cats nostrils is one of regions commonly affected by this neoplasm. The response to chemotherapeutic agents, cryosurgery and radiotherapy is not good for this reason surgical resection is instituted for remove the greatest amount of tissue engaged and provide free margins, in case of nasal involvement are indicated nosectomy often needing reconstructive techniques using as advance flaps for synthesis of surgical wounds. Due to the high incidence of feline patients with this entity, this study aims to report and discuss the effectiveness of nosectomy in seven cats with the disease. It is concluded that nosectomy as a therapeutic technique effective in five of seven patients feline, resecting tumor margin and providing acceptable time and quality life.(AU)

O carcinoma de células escamosas é um tumor maligno dos queratinócitos, o diagnostico definitivo desta doença se baseia no exame histopatológico das lesões. As narinas dos gatos é uma das regiões comumente afetadas por esta neoplasia. A resposta aos agentes quimioterapêuticos, criocirurgia e radioterapia não é muito promissora, por este motivo a ressecção cirúrgica é instituída a fim de remover a maior quantidade de tecido comprometido e proporcionar margens cirúrgicas livres, nos casos de envolvimento nasal, realiza-se nosectomia, muitas vezes precisando utilizar técnicas reconstrutivas como os flapes de avanço para a síntese das feridas cirúrgicas. Devido a grande incidência de pacientes felinos com esta entidade, o presente estudo objetiva relatar e discutir a eficácia da nosectomia em sete felinos acometidos pela doença. Conclui-se que a nosectomia é uma técnica com fim terapêutica, eficaz em cinco dos setes pacientes felinos, resseccionando a massa tumoral com margem e proporcionando tempo e qualidade de vida aceitável.(AU)

Antibiotic resistence of Aeromonas hydrophila isolated from Piaractus mesopotamicus (Holmberg, 1887) and Oreochromis niloticus (Linnaeus, 1758)

One of the most important problems involving treatments with antibiotics against Aeromonas hydrophila isolated from fishes is that antibiotic resistance develops readily. The antimicrobial activity of chemotherapeutants in isolates from pacu Piaractus mesopotamicus (Holmberg, 1887) and tilapia Oreochromis niloticus (Linnaeus, 1758) was tested by the Kirby-Bauer disk method, over Mueller-Hinton surface agar previously inoculated with 100 µL of bacterial suspensions. After regular incubation, isolates from tilapia and pacu were uniformly resistant to amoxicillin, ampicillin, lincomycin, novobiocin, oxacillin, penicillin, and trimetoprim+sulfametoxazole. The A. hydrophila type strain presented resistance to the same antimicrobial substances and also against rifampicin; the bacterial isolate from pacu were the only strain resistant to tetracyclin. Isolates from both pacu and tilapia had intermediate reaction with erytromycin. The use of drugs in commercial fish farms in Brazil can favor the development of resistant bacterial strains in native fish species as already observed for exotic species, commercially produced for longer time.

Um dos maiores problemas envolvendo o tratamento com antibióticos contra Aeromonas hydrophila isolada de peixes confinados é a rápida resistência ao antibiótico desenvolvida pela bactéria. A atividade antimicrobiana de quimioterapêuticos em isolados a partir de pacu Piaractus mesopotamicus (Holmberg, 1887) e tilápia Oreochromis niloticus (Linnaeus, 1758) foi verificada pelo método de difusão de antibiótico em discos de Kirby-Bauer, sobre uma superfície de Agar Mueller-Hinton previamente inoculada com 100 µL de suspensão bacteriana. Após o período de incubação, os isolados de tilápia e pacu foram uniformemente resistentes a amoxicilina, ampicilina, lincomicina, novobiocina, oxacilina, penicilina e trimetoprim+sulfametoxazol. A cepa tipo para A. hydrophila apresentou resistência às mesmas substâncias antimicrobianas e também contra a rifampicina; o isolado bacteriano de pacu foi a única linhagem resistente a tetraciclina. Isolados de pacu e tilápia apresentaram resistência intermediária frente a eritromicina. O uso de medicamentos em pisciculturas comerciais no Brasil pode favorecer o desenvolvimento de linhagens bacterianas resistentes em espécies de peixes nativos, como já observado em espécies exóticas comercialmente produzidas há mais tempo.

Antibiotic resistence of Aeromonas hydrophila isolated from Piaractus mesopotamicus (Holmberg, 1887) and Oreochromis niloticus (Linnaeus, 1758)

One of the most important problems involving treatments with antibiotics against Aeromonas hydrophila isolated from fishes is that antibiotic resistance develops readily. The antimicrobial activity of chemotherapeutants in isolates from pacu Piaractus mesopotamicus (Holmberg, 1887) and tilapia Oreochromis niloticus (Linnaeus, 1758) was tested by the Kirby-Bauer disk method, over Mueller-Hinton surface agar previously inoculated with 100 µL of bacterial suspensions. After regular incubation, isolates from tilapia and pacu were uniformly resistant to amoxicillin, ampicillin, lincomycin, novobiocin, oxacillin, penicillin, and trimetoprim+sulfametoxazole. The A. hydrophila type strain presented resistance to the same antimicrobial substances and also against rifampicin; the bacterial isolate from pacu were the only strain resistant to tetracyclin. Isolates from both pacu and tilapia had intermediate reaction with erytromycin. The use of drugs in commercial fish farms in Brazil can favor the development of resistant bacterial strains in native fish species as already observed for exotic species, commercially produced for longer time.

Um dos maiores problemas envolvendo o tratamento com antibióticos contra Aeromonas hydrophila isolada de peixes confinados é a rápida resistência ao antibiótico desenvolvida pela bactéria. A atividade antimicrobiana de quimioterapêuticos em isolados a partir de pacu Piaractus mesopotamicus (Holmberg, 1887) e tilápia Oreochromis niloticus (Linnaeus, 1758) foi verificada pelo método de difusão de antibiótico em discos de Kirby-Bauer, sobre uma superfície de Agar Mueller-Hinton previamente inoculada com 100 µL de suspensão bacteriana. Após o período de incubação, os isolados de tilápia e pacu foram uniformemente resistentes a amoxicilina, ampicilina, lincomicina, novobiocina, oxacilina, penicilina e trimetoprim+sulfametoxazol. A cepa tipo para A. hydrophila apresentou resistência às mesmas substâncias antimicrobianas e também contra a rifampicina; o isolado bacteriano de pacu foi a única linhagem resistente a tetraciclina. Isolados de pacu e tilápia apresentaram resistência intermediária frente a eritromicina. O uso de medicamentos em pisciculturas comerciais no Brasil pode favorecer o desenvolvimento de linhagens bacterianas resistentes em espécies de peixes nativos, como já observado em espécies exóticas comercialmente produzidas há mais tempo.

Nosectomy in cats with squamous cell carcinoma - Seven cases report / Nosectomia em felinos portadores de carcinoma espinocelular - Relato de sete casos

Squamous cell carcinoma is a keratinocytes malignant tumor, the definitive diagnosis of this disease is based on histopathology examination of the lesions. The cats nostrils is one of regions commonly affected by this neoplasm. The response to chemotherapeutic agents, cryosurgery and radiotherapy is not good for this reason surgical resection is instituted for remove the greatest amount of tissue engaged and provide free margins, in case of nasal involvement are indicated nosectomy often needing reconstructive techniques using as advance flaps for synthesis of surgical wounds. Due to the high incidence of feline patients with this entity, this study aims to report and discuss the effectiveness of nosectomy in seven cats with the disease. It is concluded that nosectomy as a therapeutic technique effective in five of seven patients feline, resecting tumor margin and providing acceptable time and quality life.

O carcinoma de células escamosas é um tumor maligno dos queratinócitos, o diagnostico definitivo desta doença se baseia no exame histopatológico das lesões. As narinas dos gatos é uma das regiões comumente afetadas por esta neoplasia. A resposta aos agentes quimioterapêuticos, criocirurgia e radioterapia não é muito promissora, por este motivo a ressecção cirúrgica é instituída a fim de remover a maior quantidade de tecido comprometido e proporcionar margens cirúrgicas livres, nos casos de envolvimento nasal, realiza-se nosectomia, muitas vezes precisando utilizar técnicas reconstrutivas como os flapes de avanço para a síntese das feridas cirúrgicas. Devido a grande incidência de pacientes felinos com esta entidade, o presente estudo objetiva relatar e discutir a eficácia da nosectomia em sete felinos acometidos pela doença. Conclui-se que a nosectomia é uma técnica com fim terapêutica, eficaz em cinco dos setes pacientes felinos, resseccionando a massa tumoral com margem e proporcionando tempo e qualidade de vida aceitável.