Use of aerobic treadmill exercises on nerve regeneration after sciatic nerve injury in spontaneously hypertensive rats

Purpose: Various postoperative protocols have been proposed to improve outcomes and accelerate nerve regeneration. Recently, the use of physical exercise in a post-surgical neurorraphy procedure has shown good results when started early. We experimentally investigated the hypothesis that post-operative exercise speeds up results and improves clinical and morphologic parameters. Methods: Isogenic rats were randomly divided into four groups: 1 SHAM; 2 SHAM submitted to the exercise protocol (EP); 3 Grafting of the sciatic nerve; and 4 Grafting of the sciatic nerve associated with the EP. The EP was based on aerobic activities with a treadmill, with a progressive increase in time and intensity during 6 weeks. The results were evaluated by the sciatic functional index (SFI), morphometric and morphologic analysis of nerve distal to the lesion, and the number of spinal cord motor neurons, positive to the marker Fluoro-Gold (FG), captured retrogradely through neurorraphy. Results: Functional analysis (SFI) did not show a statistical difference between the group grafted with (­50.94) and without exercise (-65.79) after 90 days. The motoneurons count (Spinal cord histology) also showed no diference between these groups (834.5 × 833 respectively). Although functionally there is no difference between these groups, morphometric study showed a greater density (53.62) and larger fibers (7.762) in GRAFT group. When comparing both operated groups with both SHAM groups, all values were much lower. Conclusions: The experimental model that this aerobic treadmill exercises protocol did not modify nerve regeneration after sciatic nerve injury and repair with nerve graft.

Two-dimensional and three-dimensional techniques for determining the kinematic patterns for hindlimb obstacle avoidance during sheep locomotion / Técnicas bidimensionais e tridimensionais para determinar os padrões cinemáticos durante a ultrapassagem de obstáculos pelos membros pélvicosdurante a locomoção de ovinos

Analysis of locomotion is often used as a measure for impairment and recovery following experimental peripheral nerve injury. Compared to rodents, sheep offer several advantages for studying peripheral nerve regeneration. In the present study, we compared for the first time, two-dimensional (2D) and three-dimensional (3D) hindlimb kinematics during obstacle avoidance in the ovine model. This study obtained kinematic data to serve as a template for an objective assessment of the ankle joint motion in future studies of common peroneal nerve (CP) injury and repair in the ovine model. The strategy used by the sheep to bring the hindlimb over a moderately high obstacle, set to 10% of its hindlimb length, was pronounced knee, ankle and metatarsophalangeal flexion when approaching and clearing the obstacle. Despite the overall time course kinematic patterns about the hip, knee, ankle, and metatarsophalangeal were identical, we found significant differences between values of the 2D and 3D joint angular motion. Our results showed that the most apparent changes that occurred during the gait cycle were for the ankle (2D-measured STANCEmax: 157±2.4 degrees vs. 3D-measured STANCEmax: 151±1.2 degrees; P .05) and metatarsophalangeal joints (2D-measured STANCEmin: 151±2.2 degrees vs. 3D-measured STANCEmin: 162 ± 2.2 degrees; P .01 and 2D-measured TO: 163±4.9 degrees vs. 3D-measured TO: 177±1.4 degrees; P .05), whereas the hip and knee joints were much less affected. Data and techniques described here are useful for an objective assessment of altered gait after CP injury and repairin an ovine model.(AU)

A análise da locomoção é frequentemente usada como uma medida para avaliar a disfunção e sua recuperação após lesão nervosa periférica experimental. Quando comparadas com os roedores, as ovelhas oferecem várias características atrativas como modelo experimental para o estudo da regeneração nervosa periférica. Não existem estudos acerca dos resultados da locomoção após lesão e reparação do nervo periférico no modelo ovino. No presente estudo, realizámos e comparámos a cinemática bidimensional (2D) e, pela primeira vez, tridimensional (3D) do membro pélvico durante a ultrapassagem de obstáculos no modelo ovino. Este estudo teve como objetivo obter dados cinemáticos para servir de modelo para uma avaliação objetiva do movimento articular do tornozelo em estudos futuros de lesão e reparação do nervo fibular comum (FC) no modelo ovino. A estratégia usada pelas ovelhas para elevar o membro pélvico sobre um obstáculo com uma altura moderada, fixado em 10% do seu comprimento, caracteriza-se por uma flexão pronunciada do joelho, tornozelo e metatarso-falangeana ao se aproximar e ultrapassar o obstáculo. Apesar dos padrões cinemáticos do quadril, joelho, tornozelo e metatarso-falangeano terem sido idênticos, foram encontradas diferenças significativas entre os valores do movimento angular das articulações em 2D e 3D. Os nossos resultados mostram que as mudanças mais aparentes que ocorreram durante o ciclo da marcha foram nas articulações do tornozelo (em 2DSTANCEmax: 157±2.4 graus vs. em 3D STANCEmax: 151±1.2 graus; P .05) e metatarso-falangeana (em 2D STANCEmin: 151±2.2 graus vs. em 3D STANCEmin: 162 ± 2.2 graus; P .01 e em 2D TO: 163±4.9 graus vs. em 3D TO: 177±1.4 graus; P .05), enquanto as articulações do quadril e do joelho foram muito menos afetadas. É provável que os dados e técnicas descritas aqui sejam úteis para uma avaliação objetiva das alterações na marcha após lesão e reparação do PC no modelo ovino.(AU)

Stem cells in end-to-side neurorrhaphy: experimental study in rats

Purpose: To evaluate the influence of mesenchymal stem cells from adipose tissue in the end-to-side neurorrhaphy, focusing in the nerve regeneration and the muscle reinnervation in acute trauma. Methods: 140 animals were randomly divided in seven groups: control, denervated, end-to-side neurorrhaphy between distal stump of common peroneal nerve and tibial nerve (ESN), ESN wrapped in fascia, ESN wrapped in fascia and platelet gel, ESN wrapped in platelet gel, ESN wrapped in fascia and platelet gel within stem cells (without culture) removed from the adipose tissue. Mass measurements of the animal and of cranial tibial muscles, electromyography, walking track analysis tests and histological examinations of the nerves and muscles after 180 days was performed. Results: In the groups where the ESN was performed, the results were always better when compared to the denervated group, showing reinnervation in all ESN groups. The most sensitive methods were walking track and histological analysis. Only the group with stem cells showed values similar to the control group, as well as the functional indices of peroneal nerve and the number of nerve fibers in the peroneal nerve. Conclusions: Stem cells were effective in ESN according with the functional index of the peroneal nerve, evaluated by walking track analysis and the number of nerve fibers in the peroneal nerve.(AU)

Combination of heterologous fibrin sealant and bioengineered human embryonic stem cells to improve regeneration following autogenous sciatic nerve grafting repair

Background Peripheral nerve injury is a worldwide clinical problem, and the preferred surgical method for treating it is the end-to-end neurorrhaphy. When it is not possible due to a large nerve gap, autologous nerve grafting is used. However, these surgical techniques result in nerve regeneration at highly variable degrees. It is thus very important to seek complementary techniques to improve motor and sensory recovery. One promising approach could be cell therapy. Transplantation therapy with human embryonic stem cells (hESCs) is appealing because these cells are pluripotent and can differentiate into specialized cell types and have self-renewal ability. Therefore, the main objective of this study was to find conditions under which functional recovery is improved after sciatic nerve neurorrhaphy. We assumed that hESC, either alone or in combination with heterologous fibrin sealant scaffold, could be used to support regeneration in a mouse model of sciatic nerve injury and repair via autografting with end-to-end neurorrhaphy. Methods Five millimeters of the sciatic nerve of C57BL/6 J mice were transected off and rotated 180 degrees to simulate an injury, and then stumps were sutured. Next, we applied heterologous fibrin sealant and/or human embryonic stem cells genetically altered to overexpress fibroblast growth factor 2 (FGF2) at the site of the injury. The study was designed to include six experimental groups comprising neurorrhaphy (N), neurorrhaphy + heterologous fibrin sealant (N + F), neurorrhaphy + heterologous fibrin sealant + doxycycline (N + F + D), neurorrhaphy + heterologous fibrin sealant + wild-type hESC (N + F + W), neurorrhaphy + heterologous fibrin sealant + hESC off (N + F +T), and neurorrhaphy + heterologous fibrin sealant + hESC on via doxycycline (N + F + D + T). We evaluated the recovery rate using Catwalk and von Frey functional recovery tests, as well as immunohistochemistry analysis. Results The experiments indicated...

Combination of heterologous fibrin sealant and bioengineered human embryonic stem cells to improve regeneration following autogenous sciatic nerve grafting repair

Background Peripheral nerve injury is a worldwide clinical problem, and the preferred surgical method for treating it is the end-to-end neurorrhaphy. When it is not possible due to a large nerve gap, autologous nerve grafting is used. However, these surgical techniques result in nerve regeneration at highly variable degrees. It is thus very important to seek complementary techniques to improve motor and sensory recovery. One promising approach could be cell therapy. Transplantation therapy with human embryonic stem cells (hESCs) is appealing because these cells are pluripotent and can differentiate into specialized cell types and have self-renewal ability. Therefore, the main objective of this study was to find conditions under which functional recovery is improved after sciatic nerve neurorrhaphy. We assumed that hESC, either alone or in combination with heterologous fibrin sealant scaffold, could be used to support regeneration in a mouse model of sciatic nerve injury and repair via autografting with end-to-end neurorrhaphy. Methods Five millimeters of the sciatic nerve of C57BL/6 J mice were transected off and rotated 180 degrees to simulate an injury, and then stumps were sutured. Next, we applied heterologous fibrin sealant and/or human embryonic stem cells genetically altered to overexpress fibroblast growth factor 2 (FGF2) at the site of the injury. The study was designed to include six experimental groups comprising neurorrhaphy (N), neurorrhaphy + heterologous fibrin sealant (N + F), neurorrhaphy + heterologous fibrin sealant + doxycycline (N + F + D), neurorrhaphy + heterologous fibrin sealant + wild-type hESC (N + F + W), neurorrhaphy + heterologous fibrin sealant + hESC off (N + F +T), and neurorrhaphy + heterologous fibrin sealant + hESC on via doxycycline (N + F + D + T). We evaluated the recovery rate using Catwalk and von Frey functional recovery tests, as well as immunohistochemistry analysis. Results The experiments indicated...(AU)

Effect of ozone and methylprednisolone treatment following crush type sciatic nerve injury

PURPOSE:To assess and compare the histopathological effects of ozone therapy and/or methylprednisolone (MPS) treatment on regeneration after crush type sciatic nerve injury.METHODS:Forty Sprague-Dawley male rats were randomly allocated into four groups. Four groups received the following regimens intraperitoneally every day for 14 days after formation of crush type injury on sciatic nerve: Group I: ozone (20mcg/ml); Group II: methylprednisolone (2mg/kg); Group III: ozone (20 mcg/ml) and methylprednisolone (2mg/kg); Group IV: isotonic saline (0.9%). The histomorphological evaluation was made after biopsies were obtained from the sites of injury.RESULTS:Significant differences were noted between groups in terms of degeneration (p=0.019), nerve sheath cell atrophy (p=0.012), intraneural inflammatory cellular infiltration (p=0.002), perineural granulation tissue formation (p=0.019), perineural vascular proliferation (p=0.004), perineural inflammatory cellular infiltration (p<0.001) and inflammation in peripheral tissue (p=0.006). Degeneration was remarkably low in Group III, while no change in nerve sheath cell was noted in Group II.CONCLUSION:The combined use of methylprednisolone and ozone treatment can have beneficial effects for regeneration after crush type nerve injury.(AU)

CONDUTO DE ORIENTAÇÃO NERVOSA FUNCIONALIZADO COM CÉLULAS ESTROMAIS MESENQUIMAIS MULTIPOTENTES PROMOVE A REGENERAÇÃO DO NERVO ISQUIÁTICO EM RATOS

As lesões traumáticas do sistema nervoso periférico (SNP) são altamente debilitantes, levando a déficits sensório-motores a longo prazo. A regeneração nervosa depende de um microambiente permissivo para o crescimento axonal, associado a presença de moléculas solúveis bioativas. Neste sentido, o uso das células estromais mesenquimais multipotentes derivadas do tecido adiposo (AdMSC) em combinação com condutos de orientação nervosa (NGC) poderiam acarretar estratégias promissoras para a regeneração nervosa. Ratos Wistar foram submetidos a lesão crítica do nervo isquiático (12 mm de gap) e divididos em grupos experimentais: Sham (abordagem do nervo isquiático sem alterações), GA (técnica de autoenxerto), GPCL (tubulação com NGC vazio), GPCL+MSCc (tubulação com NGC + 106 AdMSC de cão embebidas em biopolímero de fibrina) e GPCL+MSCr (tubulação com NGC + 106 AdMSC de rato embebidas em biopolímero de fibrina). Os NGC de policaprolactona (PCL) foram fabricados por impressão 3D. As AdMSC de cão foram caracterizadas in vitro e foi avaliado o potencial neuroregenerativo após a estimulação com INF-y (BDNF, GDNF, HGF e IL-10). Foram avaliados o índice de funcionalidade do nervo isquiático e tibial durante 12 semanas in vivo. A análise da marcha e a eletroneuromiografia foram avaliadas nas semanas 8 e 12. Foi realizada a morfometria post-mortem nas semanas 8 e 12 após o reparo nervoso. Trinta dias após a lesão nos grupos GPCL+MSCc e Sham, foram analisadas a expressão de fatores neurotróficos (BDNF, GDNF e o receptor p75NTR) e a reatividade das células de Schwann (S-100 e neurofilamento) pela imunofluorescencia, e a expressão gênica na medula espinhal (BDNF, GDNF, HGF, IL-6 e IL-10). A estimulação com INF-y aumentou a expressão gênica de BDNF, GDNF, HGF e IL-10 nas AdMSC de cão. Os grupos GPCL+MSCc e GPCL+MSCr apresentaram recuperação motora e eletrofisiológica quando comparados ao grupo GPCL em 8 e 12 semanas. Porém, os valores não foram superiores ao autoenxerto. Os achados foram relacionados a presença de fibras mielinizadas, maior expressão de BDNF, GDNF e P75NTR no nervo isquiático e a up-regulation de BDNF, GDNF e HGF na medula espinhal. Foi observada tendência a maior reatividade das células de Schwann e ramificação axonal no nervo isquiático. A combinação de NGC impressos em 3D e funcionalizados com AdMSC de cão e de rato mostraram efeitos neuroprotetores. A associação de AdMSC e biopolímero de fibrina suportaram o microambiente trófico e estimularam o estado pró-regenerativo na lesão crítica do nervo isquiático em ratos.

Peripheral nervous injuries (PNS) are highly debilitating, leading to long-term motor and sensory deficits. Nerve regeneration depends of the permissive microenvironment for axonal growth associated to bioactive molecules. In this sense, the use of multipotent mesenchymal stromal cells adipose tissue derived (AdMSC) in combination with nerve guidance conduits (NGC) could be promising strategies for nerve regeneration. Wistar rats were submitted to critical sciatic nerve injury (12 mm gap) and divided into experimental groups: Sham, GA (autograft), GPCL (empty NGC), GPCL + MSCc (NGC + 106 plus canine AdMSC embedded in fibrin biopolymer), GPCL + MSCr (NGC + 106 plus rat AdMSC embedded in fibrin biopolymer). Polycaprolactone (PCL) NGC was manufactured by 3D printing. In vitro, regenerative potential was evaluated after INF- stimulation (BDNF, GDNF, HGF and IL-10). In vivo, were measure the sciatic ant tibial functional index for 12 weeks. Gait analysis and electroneuromyography were performed at 8 and 12 weeks. Post-mortem, morphometric analysis was made at 8 and 12 weeks after nerve repair. Thirty days after lesion in the GPLC+MSCc and Sham, were evaluated the expression of neurotrophins (BDNF, GDNF and p75NTR receptor), Schwann cells reactivity by immunofluorescence (S-100 and neurofilament) and gene expression in the spinal cord (BDNF, GDNF, HGF, IL-6 and IL-10). The stimulation with INF- increased gene expression on canine AdMSC in vitro for BDNF, GDNF, HGF and IL-10. The groups GPCL+MSCc and GPCL+MSCr showed functional motor and electrophysiological motor recovery when compared with the GPCL group at 8 and 12 weeks. However, the values were not superior to GA group. These findings were related to presence of myelinated fibers, increased of neurotrophins expression BDNF, GDNF and p75NTR on sciatic nerve and up-regulation of the BDNF, GDNF and HGF in the spinal cord. A trend towards greater reactivity of Schwann cells and axonal branching in the sciatic nerve were observed. The combination of NGC 3D-printing and functionalized with canine and rat AdMSC showed neuroprotective effects. The association of canine or rat AdMSC and fibrin biopolymer support trophic microenvironment and stimulate a pro-regenerative state in severe sciatic nerve injury in rats.

AVALIAÇÃO DOS EFEITOS DA OZONIOTERAPIA NA REGENERAÇÃO DE LESÕES DO NERVO CIÁTICO EM RATOS: REVISÃO SISTEMÁTICA

A lesão do nervo periférico é um problema comum que freqüentemente resulta em incapacidade. A dor neuropática é uma dor crônica devastadora causada por lesão primária ou disfunção, tanto periférica quanto no sistema nervoso central. A ozonioterapia foi desenvolvida e conhecida como uma abordagem alternativa e eficaz em certas circunstâncias clínicas. Promove regeneração nervosa periférica, aumentando os níveis de antioxidantes e diminuindo radicais livres oxidativos. A terapia com ozônio é considerada um método terapêutico alternativo, seguro e eficaz para o metabolismo do oxigênio, energia celular e defesa antioxidante. O objetivo deste estudo foi buscar evidências científicas sobre os efeitos da ozonioterapia na regeneração de lesões do nervo ciático em ratos, através de uma revisão sistemática. Foi realizada uma busca inicial nas bases secundárias que divulgam todas as revisões sistemáticas cadastradas, estando elas em andamento ou finalizadas. A busca foi realizada no período de setembro de 2019 a fevereiro de 2020, sendo atualizada nas bases de dados: LILACS, PUBMED (MEDLINE), WEB OF SCIENCE, COCHRANE LIBARY, BIREME, SCIELO. A partir da busca eletrônica nas bases de dados, foi encontrado um total de 140 estudos primários a partir do evento de interesse estudado na presente revisão, sendo 08 incluídos na revisão sistemática. Conclui-se que a ozonioterapia gera efeitos positivos na regeneração da lesão do nervo ciático em ratos, quando comparados a grupos controle ou a grupos em que foi utilizada associação de outros medicamentos.

Peripheral nerve injury is a common problem that often results in disability. Neuropathic pain is a devastating chronic pain caused by a primary injury or dysfunction, both peripheral and in the central nervous system. Ozone therapy has been developed and known as an alternative and effective approach in certain clinical circumstances. Ozone therapy promotes peripheral nerve regeneration, increasing the levels of antioxidants and decreasing oxidative free radicals. Ozone therapy is considered an alternative, safe and effective therapeutic method for oxygen metabolism, cellular energy and antioxidant defense. The aim of this study was to seek scientific evidence on the effects of ozone therapy on the regeneration of sciatic nerve injuries in rats, through a systematic review. An initial search was carried out on the secondary databases that disclose all registered systematic reviews, whether they are in progress or completed. The search was carried out from September 2019 to February 2020, being updated in the databases: LILACS, PUBMED (MEDLINE), WEB OF SCIENCE, COCHRANE LIBARY, BIREME, SCIELO. From the electronic search in the databases, a total of 140 primary studies were found based on the event of interest studied in the present review, of which 8 were included in the systematic review. It is concluded that ozone therapy generates positive effects in the regeneration of sciatic nerve damage in rats, when compared to control groups or the combination of other drugs.

INVESTIGAÇÃO IN VITRO E IN VIVO DO EFEITO REGENERATIVO NA MEDULA ESPINAL NA PRESENÇA DE FRAGMENTOS DO NERVO ISQUIÁTICO COM ADIÇÃO DOS ÓLEOS ESSENCIAIS DE Hyptis suaveolens (L.) Poit E Croton blanchetianus Baill

A medula espinal (ME) é afetada em casos de traumas diretos ou indiretos e alguns estudos apontam que os nervos periféricos induzem um ambiente propício para regeneração. Além disso, várias plantas medicinais possuem metabólitos secundários com atividades no Sistema Nervoso Central. Este estudo objetivou analisar o efeito regenerativo na ME in vitro e in vivo na presença de fragmentos do nervo isquiático (FGNI) com adição dos óleos essenciais (OES) de Hyptis suaveolens (HS) e Croton blanchetianus (CB). As plantas de HS e CB foram submetidas ao processo de hidrodestilação e a análise da composição química foi feita por cromatografia gasosa e espectrometria de massas. Para a avaliação da plasticidade na ME in vitro, células foram coletadas de ratos neonatos Wistar e cultivadas em 6 grupos: um controle (D-10) e os demais grupos com diferentes combinações de meio condicionado do nervo isquiático (MCNI) e os OES de HS e CB. A morfometria celular foi avaliada após 96 horas por microscopia de contraste de fases, sendo em seguida realizada a imunocitoquímica para GFAP, GAP-43, NeuN e a plasticidade analisada por Microscopia Eletronica de Varredura. Os grupos foram comparados estatisticamente através do teste de Tukey e Bonferroni (p<0,05). Assim, foi possível avaliar a aderência, o efeito plástico e trófico das células nos grupos cultivados em D-10 acrescidos dos OES, com alterações morfológicas mais visíveis quando comparados com os grupos controle. O OE de CB, especialmente, promoveu a manutenção da expansão das células, indicando sua ação na plasticidade das células da ME. Quanto à análise regenerativa na ME in vivo, foram utilizados 40 ratos Wistar e de 4 deles foi removido o nervo isquiático (NI). Os 36 animais restantes foram submetidos a uma transecção medular com 4 mm de espessura ao nível torácico baixo e divididos em 6 grupos (n=6): no grupo 1 foi inoculado 10l de solução salina (5%) (SS); no grupo 2 FGNI mais 10l de SS (SS + NI); no grupo 3 FGNI mais o OE de HS (HS + NI); no grupo 4 foi inoculado apenas o OE de HS; no grupo 5 FGNI mais o OE de CB (CB + NI) e no grupo 6 foi inoculado apenas o OE de CB. O desempenho dos membros posteriores foi avaliado por 12 semanas usando pontuação do comportamento motor (BBB) e o déficit funcional ligado ao comportamento da pontuação combinada (CBS) e os dados dos testes comportamentais dos grupos tratados foram comparados estatisticamente. Ocorreu recuperação dos movimentos dos membros posteriores dos animais pertencentes aos grupos com o FGNI e com os OES quando comparados ao grupo SS e SS + NI. Entretanto, nos grupos com o OE de CB ocorreram resultados mais significativos e superioridade frente aos grupos com o OE de HS. Portanto, a combinação de OES e nervos periféricos como o NI, in vitro e in vivo, proporcionou a plasticidade morfológica e a melhora da recuperação funcional da ME.

: The spinal cord (SC) is affected in cases of direct or indirect trauma and some studies indicate that the peripheral nerves induce an environment conducive to regeneration. In addition, several medicinal plants have secondary metabolites with activities in the central nervous system. This study aimed to analyze the regenerative effect on SC in vitro and in vivo in the presence of sciatic nerve fragments (SNFG) with the addition of essential oils (EOS) from Hyptis suaveolens (HS) and Croton blanchetianus (CB). The HS and CB plants were submitted to the hydrodistillation process and the analysis of the chemical composition of the EOS was perfomed by gas chromatography and mass spectrometry. For the evaluation of cellular plasticity on SC in vitro, the SC cells were collected from newborn Wistar rats, and then cultured in six groups: one control (D-10) and the others with different combinations of sciatic nerve conditioned medium (SNCM) and HS and CB EOS. Cell morphometry was evaluated after 96 hours by phase contrast microscopy, and then the immunocytochemistry was performed for GFAP, GAP-43, NeuN and plasticity was performed by scanning electron microscopy. The groups were statistically compared using the Tukey and Bonferroni tests (p <0.05). Thus, it was possible to evaluate the adherence, the plastic and trophic effect in groups cultured in D-10 plus EOS, with more visible morphological changes when compared to control groups. CB EO, especially, promoted the maintenance of cell expansion, indicating its action on the plasticity of SC cells. Regarding the regenerative analysis on SC in vivo, forty Wistar rats were used; sciatic nerve was removed from four animals, and thirty-six animals were submitted to a 4 mm thick medullary transection at the lower thoracic level; the animals were later separated in 6 groups (n=6): in group 1, 10l of saline solution (5%)(SS); in group 2, FGNS plus 10l of SS (SS + NS); in group 3, FGNS plus HS essential oil (EO) (HS + NS); in group 4, only HS EO; in group 5, FGNS plus CB EO (CB + NS) and in group 6, only CB EO (CB + NS) were inoculated. Posterior limb performance was assessed weekly for 12 weeks, using motor behavior score (BBB) and functional deficit associated with combined score behavior (CBS). Data from the behavioral tests of the treated groups were compared statistically. The different types of treatments allowed the recovery of the hind limbs movements of the animals of the FGNI and OES groups, and they showed a better recovery when compared to the SS and SS + NS groups. However, the groups with the EO of CB showed more significant results and superiority compared to the groups with the EO of HS. Therefore, the combination of OES and peripheral nerves such as NI, in vitro and in vivo, provided morphological plasticity and an improvement in the functional recovery of SC.

A Catuama e o bilobalide na regeneração nervosa periférica de ratos submetidos à secção do nervo isquiático / Catuama and bilobalide on peripheral nerve regeneration in rats following sciatic nerve section

A Catuama® é a associação de quatro extratos hidroalcoolicos obtidos de plantas brasileiras (Paullinia cupana, Trichilia catigua, Ptychopetalum olacoides e Zingiber officinale) com conhecida ação neuroprotetora, anti-inflamatória, antioxidante e antidepressiva. O bilobalide é um componente extraído das folhas do Ginkgo biloba, que tem comprovada ação neuroprotetora nos sistemas nervosos central e periférico. O presente estudo avaliou os efeitos da Catuama® e do bilobalide na regeneração nervosa periférica de ratos submetidos à secção do nervo isquiático. Foram utilizados 40 ratos com implante de tubo de silicone preenchido por colágeno líquido, deixando-se um intervalo entre os segmentos nervosos de 10mm. Os animais foram divididos em 4 grupos: o grupo controle (A); os grupos que receberam a Catuama® administrada por via oral nos primeiros 28 dias de pós-operatório, nas doses de 100 (B) e 400mg.kg-1 (C); e o grupo que recebeu o bilobalide na dose de 200µM (D), este, adicionado ao colágeno líquido utilizado no implante de silicone. Os animais foram avaliados na primeira, quinta e décima semanas de pós-operatório pelo teste de marcha. Na décima semana, foi realizada avaliação eletrofisiológica e análises quantitativa e qualitativa dos cortes histológicos de amostras do nervo isquiático e do músculo gastrocnêmio. Em todas as análises utilizadas observou-se excelente regeneração dos nervos, no entanto, não foi encontrada diferença significativa (P>0,05) entre os grupos experimentais e controle.(AU)

The Catuama® is composed of four Brazilian plants extracts (Paullinia cupana, Trichilia catigua, Ptychopetalum olacoides e Zingiber officinale). The Catuama® is known as having neuroprotector, anti-inflammatory, antioxidant and antidepressant effects. Bilobalide, extracted from leaves of Ginkgo biloba, is known by its neuroprotective effect in the central and peripheral nervous systems. The present study evaluates the effect of Catuama® and bilobalide on peripheral nerve regeneration in rats following a sciatic nerve section. Sciatic nerve of forty adult rats was transected with a 10-mm gap and the proximal and distal nerve stumps were fixed in a silicone tube filled with liquid collagen. The animals were divided into four groups: the control group (A), two groups treated with Catuama® by gavage along 28 days after the surgery in different doses of 100 (B) and 400mg.kg-1 (C) and the group using 200µM bilobalide (D) associated with the liquid collagen in the silicone tube. Evaluations were done by a walk test on the first, fifth and tenth week after the surgery. Electrophysiological stimulation and quantitative and qualitative histological analyses of the sciatic nerve and gastrocnemius muscle were also performed on the tenth week after the surgery. All groups showed good regeneration but no statistical difference was found between treatments and control groups (P>0.05).(AU)

Sciatic nerve regeneration in rats by a nerve conduit engineering with a membrane derived from natural latex / Regeneração do nervo ciático em ratos através de um conduto confeccionado com uma membrana de látex natural

PURPOSE: To evaluate the capacity of natural latex membrane to accelerate and improve the regeneration quality of the of rat sciatic nerves. METHODS: Forty male adult Wistar rats were used, anesthetized and operated to cut the sciatic nerve and receive an autograft or a conduit made with a membrane derived from natural latex (Hevea brasiliensis). Four or eight weeks after surgery, to investigate motor nerve recovery, we analyzed the neurological function by walking pattern (footprints analysis and computerized treadmill), electrophysiological evaluation and histological analysis of regenerated nerve (autologous nerve graft or tissue cables between the nerve stumps), and anterior tibial and gastrocnemius muscles. RESULTS: All functional and morphological analysis showed that the rats transplanted with latex conduit had a better neurological recovery than those operated with autologous nerve: quality of footprints, performance on treadmill (p<0.01), electrophysiological response (p<0.05), and quality of histological aspects on neural regeneration. CONCLUSION: The data reported showed behavioral and functional recovery in rats implanted with latex conduit for sciatic nerve repair, supporting a complete morphological and physiological regeneration of the nerve.(AU)

OBJETIVO: Avaliar a capacidade de uma membrana de látex natural em acelerar e melhorar a qualidade da regeneração do nervo ciático seccionado de ratos. MÉTODOS: Foram utilizados 40 ratos machos adultos da linhagem Wistar, anestesiados e operados com autoenxerto ou com interposição de um tubo confeccionado com uma membrana derivada do latex natural (Havea brasiliensis). Quatro ou oito semanas após a cirurgia, para investigar a recuperação motora do nervo, foram analisadas a função neurológica através do padrão da marcha (análise das pegadas e esteira computadorizada), avaliação eletrofisiológica e análise histológica do nervo regenerado (enxerto de nervo autólogo ou formação de nervo novo entre os cotos nervosos) e músculos gastrocnêmio e tibial anterior. RESULTADOS: Todas as análises morfológicas e funcionais demonstraram que os ratos transplantados com o conduto de látex tiveram recuperação melhor do que aqueles operados com nervo autólogo: qualidade das pegadas impressas, desempenho em esteira (p<0,01), resposta eletrofisiológica (p<0,05), e qualidade histológica da regeneração nervosa. CONCLUSÃO: Os dados apresentados demonstraram recuperação comportamental e funcional nos ratos implantados com o conduto de látex para a reparação do nervo ciático por meio de uma completa regeneração morfológica e fisiológica do nervo.(AU)

Muscle reinnervation in one or two stages?: experimental study in rats with end-to-side nerve graft / Reinervação muscular em um ou dois estágios?: estudo experimental em ratos com enxerto de nervo término-lateral

PURPOSE: To compare muscle reinnervation in one and two surgical stages using end-to-side neurorrhaphy (ESN) without donor nerve injury. METHODS: The experiment was performed on four groups of 20 rats. Group 1 (G1), one stage, received the graft which was sutured to the tibial nerve, with ESN, and its free stump was sutured end-to-end to the distal stump of the sectioned peroneal nerve (PN), all in the same operation. In Group 2 (G2), two stages, the nerve graft was sutured to the tibial nerve, with ESN. Two months later the PN was sectioned and its distal stump connected to the distal stump of the graft as in G1. Normal control group (Gn) received the graft only sutured to the tibial nerve, with ESN. Denervated control group (Gd), as well received the graft and had the PN sectioned and its two stumps buried in adjacent musculature, with the aim of denervating the cranial tibial muscle (CTM), the target of this study. The parameters used to evaluate CTM reinnervation were muscle mass, muscle fiber's minimum diameter and area. RESULTS: The mean CTM mass, the average of the muscular fibers areas and the average of the muscular fiber minimum diameters was higher (all p<0.0001) in G2 than in G1. Comparing the four groups, these parameters had their maximum expression in Gn and the minimum in Gd, as expected. CONCLUSION: The two stages showed better muscle reinnervation than one stage.(AU)

OBJETIVO: Comparar a reinervação muscular com enxerto de nervo em um e dois tempos operatórios, utilizando a neurorrafia término-lateral (NTL) sem lesão do nervo doador. MÉTODOS: Vinte ratos foram distribuídos em quatro grupos. O grupo 1 (G1), um estágio, recebeu o enxerto que foi suturado ao nervo tibial (NT), por meio de NTL, e seu coto livre foi suturado por NTL ao coto distal do nervo peroneal (NP), seccionado a um centímetro do NT, na mesma cirurgia. O grupo 2 (G2), dois estágios, recebeu o enxerto de nervo na primeira cirurgia, como já descrito. Dois meses depois, na segunda cirurgia, o NP foi seccionado e seu coto distal ligado ao coto distal do enxerto como em G1. O grupo controle de normalidade (Gn) recebeu o enxerto da mesma forma, apenas. E o grupo controle de denervação (Gd), além de receber o enxerto, teve o NP seccionado e seus cotos sepultados na musculatura adjacente, com a finalidade de denervar o músculo tibial cranial (MTC), alvo deste estudo. Os parâmetros utilizados para avaliar a reinervação do MTC foram massa muscular, diâmetro mínimo da fibra muscular e área. RESULTADOS: O grupo G2 apresentou superioridade (p<0,0001) em relação ao G1 na massa do MTC, no diâmetro mínimo e na área das fibras musculares. Na comparação entre os quatro grupos, estes mesmos parâmetros tiveram sua expressão máxima em Gn e mínima em Gd, como era esperado. CONCLUSÃO: A reinervação muscular em dois estágios apresenta melhor resultado quando comparada à técnica em um tempo.(AU)

Histological analysis of low-intensity laser therapy effects in peripheral nerve regeneration in Wistar rats / Avaliacao histologica dos efeitos da laserterapia de baixa potencia sobre os processos de regeneracao nervosa periferica em ratos Wistar

Purpose: Analyze the influence of low-intensity laser therapy in the sciatic nerve regeneration of rats submitted to controlled crush through histological analysis. Methods: Were used 20 Wistar rats, to analyze the influence of low-intensity laser therapy in the sciatic nerve regeneration, where the injury of the type axonotmesis was induced by a haemostatic clamp Crile (2nd level of the rack). The animals were randomly distributed in 2 groups. Control group (CG n = 10) and Laser group (LG n = 10). These were subdivided in 2 subgroups each, according to the euthanasia period: (CG14 _ n = 5 and CG21 _ n = 5) and (LG14 _ n = 5 and LG21 _ n = 5). At the end of treatment, the samples were removed and prepared for histological analysis, where were analyzed and quantified the following findings: Schwann cells, myelinic axons with large diameter and neurons. Results: In the groups submitted to low-intensity laser therapy, were observed an increase in the number of all analyzed aspects with significance level. Conclusion: The irradiation with low intensity laser (904nm) influenced positively the regeneration of the sciatic nerve in Wistar rats after being injured by crush (axonotmesis), becoming the nerve recovery more rapid and efficient.(AU)

Objetivo: Verificar a influencia da terapia com laser de baixa potencia na regeneracao histologica do nervo ciatico de ratos submetidos a neuropraxia controlada. Metodos: Foi utilizada a amostra de 20 ratos da linhagem Wistar, para verificar a influencia da terapia com laser de baixa intensidade na regeneracao nervosa periferica, onde a lesao do tipo axoniotmese foi induzida por meio de preensao com pinca hemostatica de Crile. Os animais foram distribuidos randomicamente dois grupos. Grupo controle (CG n = 10), e Grupo laser (LG n = 10). Cada um destes grupos foi subdividido em dois subgrupos dependendo do periodo da eutanasia: (CG14 - n = 5 e CG21 - n = 5) e (LG14 - n = 5 e LG21 - n = 5). Ao final do tratamento, amostras do nervo foram retiradas e analisadas histologicamente, nas quais foi adotado na pesquisa a analise do numero de neuronios, de celulas de Schwann (CS) e de axonios mielinicos de grande diametro. Resultados: Nos grupos submetidos a terapia com laser de baixa potencia foi observado aumento do numero de todos os aspectos analisados com diferenca estatisticamente significante. Conclusao: A irradiacao com o laser de baixa intensidade (904nm) influenciou positivamente na regeneracao do nervo ciatico de ratos da linhagem Wistar pos neuropraxia controlada (axonotmese), tornando a recuperacao nervosa mais rapida e eficiente.(AU)

EFEITO DO TRANSPLANTE DE CÉLULAS-TRONCO MESENQUIMAIS MULTIPOTENTES NA REGENERAÇÃO DO NERVO PERIFÉRICO EM RATOS

As lesões de nervos periféricos por neurotmese apresentam resultados paradoxais na recuperação pela ausência na regeneração. Assim, manter o ambiente permissivo de crescimento no coto distal após a lesão é essencial, sendo as células de Schwann chaves neste processo. A terapia celular apresenta potencial para a regeneração nervosa, baseado na substituição celular e promoção do crescimento axonal. As células tronco mesenquimais multipotentes de tecido adiposo (CTMM-TA) são uma fonte promissora pela fácil obtenção, expansão in vitro e por apresentarem propriedades imunomoduladoras e antinflamatórias. Neste sentido, o objetivo deste estudo foi comparar os efeitos do transplante de CTMM caninas e murinas em combinação com a técnica de tubulação com veia descelularizada, na regerenaração do nervo ciático em modelo experimental de neurotmese em ratos. Ratos Wistar submetidos a neurotmese do nervo ciático foram divididos em 5 grupos: Grupo controle (GC), Grupo denervado (GD), Grupo Transplante de Veia descelularizada (GV), Grupo Veia + células tronco mesenquimais multipotentes caninas (GCTMMc), Grupo Veia + células tronco mesenquimais multipotentes murinas (GCTMMm). Após a marcação com nanocristais fluorescentes e viabilidade celular, 1 x 106 CTMM caninas e murinas foram injetadas depois da realização da lesão experimental por neurotmese com 10mm por tubulação com veia descelularizada nos grupos GCTMMc e GCTMMm, e solução tampão salina de Hank's (HBSS) no grupo veia (GV). Durante o período de 35 dias, o índice de funcionalidade do nervo ciático (IFNC) e a eletroneuromiografia (ENMG) foram realizadas para avaliar a recuperação funcional. Análises histológicas e imunohistoquímicas foram efetuadas para revelar a mielinização, a produção de fatores neurtróficos e a persistencia das CTMM. Observaram-se resultados positivos funcionais nos dias 27 e 35 no grupo tratado com GCTMMm. Os resultados eletrofisiológicos de latência (m/s) e amplitude (mV) no nervo ciático foram superiores nos grupos GCTMMc e GCTMMm. Na avaliação do número e a densidade de fibras nervosas, os grupos GCTMMm e GCTMMc, mostraram melhores resultados. Foi observado uma expressão significativamente alta de BDNF no grupo GCTMMc, associado com o incremento na expressão da proteína S-100 nos grupos GCTMMc e GCTMMm, comparado com o GD. Demonstrou-se, também, que as CTMM derivadas do tecido adiposo canino e murino apresentaram efeitos positivos na regeneração do nervo ciático após neurotmese em ratos.

The peripheral nerves injury by neurotmesis presents confusing results in the recovery by the lack of regeneration. Thus, it is essential to maintain a growth permissive microenvironment in the distal stump following injury for Schwann cells. The cell therapy has therapeutic potential for nerve regenertion, based on cell replacement and promotion of axonal growth. Adipose-derived multipotent mesenchymal stem cells (AdMSC) are a promising source for easy retrieval and expansion in vitro and have immunomodulatory and anti-inflammatory properties. The objective of this study was to compare the effects of canine and murine MSC transplantation in combination with the tubulization of decellularized vein in sciatic nerve regeneration. Wistar rats were divided into 5 groups: control group (CG), denervated group (DG), decellularized vein transplantation group (VG), vein + canine MSC group (cMSC) and vein + murine MSC group (mMSC). After labeling with fluorescent nanocrystals and cell viability, 1 x 106 canine and murine MSC were injected after experimental injury for neurotmesis with 10mm and tubulization with decellularized vein in the cMSC and mMSC groups. During a period of 35 days the sciatic nerve functional index (SFI) and electroneuromyography (EMG) were performed to access functional recovery. Histological analysis and immunohistochemistry were performed to evaluate myelination, neurotrophic factor production and persistence of MSC. It was observed functional postive results at 27th and 35th days in the group treated with mMSC. The electrophysiologycal results of latency (m/s) and amplitude (mV) in the sciatic nerve, they were higher in groups cMSC and mMSC. In assessing the number and density of nerve fibers, mMSC and cMSC groups showed better results. It was observed a significantly higher BDNF expression than the cMSC group, associated with increased expression of S-100 protein in the cMSC and mMSC groups compared to the GD. Also, it has been shown that MSC canine and murine derived of adipose tissue (AdMSC) showed positive effects on the sciatic nerve regeneration in the rat model neurotmesis.

End-to-side nerve repair using fibrin glue in rats / Anastomose nervosa término-lateral usando cola de fibrina em ratos

Purpose: To evaluate axonal regeneration after end-to-side nerve repair with fibrin glue in rats. Methods: Forty-five Wistar rats were divided into three groups: group A (n=15), were not submitted to surgery (control group); group B (n=15) were submitted to fibular transection without repair; and group C (n=15), were submitted to fibular transection with end-to-side nerve anastomosis using fibrin glue, in the lateral surface of an intact tibial nerve. The three groups were submitted to walking track (30 and 90 days) and posterior morphometrical analysis (90 days). Results: The functional tests demonstrated that there was no difference in the walking track during the study in group A (p>0.05). The group B had walking pattern impairment in the two tests (p>0.05). The group C had walking pattern impairment in the first test, with important recovery in the second test (p<0.05). The morphometrical assessment revealed significantly higher number of regenerated mielinates axons in group C, compared to group B (p<0.05). Conclusion: The end-to-side nerve repair with fibrin glue shows axonal recovery, demonstrated through functional and morphometrical ways in rats.(AU)

Objetivo: Avaliar a regeneração axonal após anastomose nervosa término-lateral (ATL) usando cola de fibrina em ratos. Métodos: Quarenta e cinco ratos Wistar distribuídos em três grupos: os animais do grupo A (n=15) não foram submetidos à secção nervosa (grupo controle); os animais do grupo B (n=15) foram submetidos apenas à secção do nervo fibular, sem posterior anastomose; e os animais do grupo C (n=15) foram submetidos à secção do nervo fibular e à ATL com cola de fibrina no nervo tibial. Posteriormente, os animais foram submetidos a dois testes de marcha (30 e 90 dias) e à análise morfométrica (90 dias). Resultados: A análise estatística dos testes de marcha demonstrou que o grupo A não apresentou alteração no padrão de caminhada durante o estudo (p>0,05). O grupo B apresentou prejuízo motor no primeiro e no segundo teste (p>0,05). O grupo C apresentou um padrão de atrofia no primeiro teste, com recuperação da marcha no segundo teste (p<0,05). Na análise morfométrica, o grupo C apresentou regeneração axonal significativamente superior ao grupo B (p<0,05). Conclusão: A ATL realizada com cola de fibrina resultou em regeneração axonal no rato, demonstrada tanto histologicamente quanto funcionalmente.(AU)

Muscle graft as a substitute for peripheral nerve graft in rats / Enxerto de músculo como substituto de nervo periférico em ratos

PURPOSE: To evaluate the applicability of the use of autogenous muscle treated in various ways, as a substitute of the nerve grafts. METHODS: Rats were divided into seven groups that received, as a treatment for a standard nerve injury, the following types of grafts: fresh muscle, muscle fixed with 10 percent formaldehyde, muscle frozen in a freezer, muscle frozen in refrigerator, nerveless muscle, peripheral nerve and a group was without any treatment. It assessed the histological appearance of the nerve fibers in the segment repaired. RESULTS: The evaluation of the segment nervous repaired showed nerve fibers through the graft in almost all groups, but the methodology employed has not adequately characterized the differences between the groups. CONCLUSION: This study showed the migration of nerves fibers through all grafts used.(AU)

OBJETIVO: Avaliar a aplicabilidade do uso de músculo autógeno, tratado de diversas maneiras, em substituição aos enxertos de nervo. MÉTODOS: Os ratos foram separados em sete grupos que receberam, como tratamento a uma lesão nervosa padronizada, os seguintes tipos de enxertos: músculo fresco, músculo fixado com formol 10 por cento, músculo congelado em freezer, músculo congelado em refrigerador, músculo denervado, nervo periférico e um grupo ficou sem qualquer tratamento. Foi avaliado o aspecto histológico das fibras nervosas no segmento reparado. RESULTADOS: A avaliação do segmento nervoso reparado mostrou que existiam axônios em quase todos os grupos, mas a metodologia empregada não possibilitou caracterizar adequadamente as diferenças entre os grupos. CONCLUSÃO: Este estudo mostrou a migração de axônios por meio de todos os enxertos utilizados.(AU)

Histopathological analysis of gangliosides use in peripheral nerve regeneration after axonotmesis in rats / Análise histopatológica da regeneração nervosa periférica com uso de gangliosídeos após axonotmese em ratos

PURPOSE: To analyze the action of gangliosides in peripheral nerve regeneration in the sciatic nerve of the rat. METHODS: The sample was composed of 96 male Wistar rats. The animals were anaesthetized and, after identification of the anaesthesic plane, an incision was made in the posterior region of the thigh, followed by skin and muscle divulsion. The right sciatic nerve was isolated and compressed for 2 minutes. Continuous suture of the skin was performed. The animals were randomly divided into two groups: the experimental group (EG), which received subcutaneous injection of gangliosides, and the control group (CG), which received saline solution (0.9 percent) to mimic the effects of drug administration. RESULTS: No differences were observed between the experimental and control groups evaluated on the eighth day of observation. At 15 and 30 days the EG showed an decrease in Schwann cell activity and an apparent improvement in fibre organization; at 60 days, there was a slight presence of Schwann cells in the endoneural space and the fibres were organized, indicating nerve regeneration. At 15 and 30 days, the level of cell reaction in the CG had diminished, but there were many cells with cytoplasm in activity and in mitosis; at 60 days, hyperplastic Schwann cells and mitotic activity were again observed, as well as nerve regeneration, but to a lesser extent than in the EG. CONCLUSION: The administration of exogenous gangliosides seems to improve nerve regeneration.(AU)

OBJETIVO: Avaliar os efeitos de gangliosídeos na regeneração nervosa periférica em nervo isquiático de ratos após axonotmese. MÉTODOS: Foram utilizados 96 ratos machos albinos (Wistar). Os animais foram anestesiados e após constatação do plano anestésico, foi realizada incisão na face posterior da coxa direita do animal. Em seguida, foi realizada a dissecção cirúrgica da pele e do músculo e divulsão dos músculos. O nervo isquiático direito foi isolado e sofreu compressão por 2 minutos. Efetuou-se a sutura contínua da pele. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em 2 grupos: experimental (GE) que receberam gangliosídeos pela via sub-cutânea e controle (GC) que receberam soro fisiológico 0,9 por cento com a finalidade de mimetizar os efeitos de administração da droga de estudo. A análise histopatológica foi realizada em 8, 15, 30 e 60 dias. RESULTADOS: Não se evidenciaram diferenças significantes entre os grupos controle e experimental avaliados com 8 dias. Nos grupos experimentais de 15 e 30 dias observou-se uma diminuição da atividade das células de Schwann e aparente melhora na organização das fibras nervosas; com 60 dias havia discreta presença células de Schwann no espaço endoneural e as fibras nervosas estavam organizadas sinalizando a regeneração nervosa. Nos grupos controles de 15 e 30 dias o padrão de reação celular diminuiu, entretanto havia muitas células com citoplasmas em atividade e mistose; com 60 dias observou-se ainda a presença de hiperplasia de células de Schwann, atividade mitótica ainda presente e regeneração nervosa presente, porém em menor grau comparando-se com aquele visto no grupo experimental. CONCLUSÃO: A administração de gangliosídeos exógenos parece incrementar a regeneração nervosa.(AU)

Utilização de células-tronco autólogas de medula óssea na regeneração do nervo tibial de coelhos mediante técnica de tubulização com prótese de silicone

This study presents an experimental model of an acute deffect in a peripheral nerve to evaluate neural regeneration using a tubulization technique associated with the inoculation of autologous stem cells from bone marrow. A total of 12 New Zealand white rabbits underwent a bilateral dissection of the tibial nerve followed by repair with silicone tubulization. On the left tibial nerve of all animals, the tube was filled with autologous bone marrow-derived stem cells collected from the humerus. For control, using the same repair technique, the tubes were filled with a NaCl solution in the right tibial nerve. After 30 days of observation, the animals were euthanized and a histological evaluation of the collected nerve segments was performed by staining with hematoxylin-eosin, luxol fast blue, and toluidine blue. From the results it is possible to conclude that the transplanted autologous stem cells associated with the tubulization technique present an advantage in the peripheral nerve regeneration process.

Neste estudo é apresentado um modelo experimental de defeito agudo em nervo periférico para avaliação da regeneração nervosa mediante técnica de tubulização associada à inoculação de células-tronco autólogas de medula óssea. Foram utilizados 12 coelhos Nova Zelândia albinos, submetidos à secção bilateral e ao afastamento de 5mm do nervo tibial e posterior reparo mediante utilização de câmara de silicone. Internamente à prótese de tubulização do nervo tibial esquerdo em todos os animais, foram inoculadas células-tronco autólogas de medula óssea, coletadas a partir do úmero. Como grupo controle (nervo tibial direito), mediante aplicação da mesma técnica de reparo, solução de NaCl 0,9% foi administrada internamente à prótese. Após 30 dias de observação, os animais foram eutanasiados e foi realizada a avaliação histológica dos segmentos nervosos por meio das colorações de hematoxilina-eosina, luxol fast blue e azul de toluidina. Com os resultados, foi possível concluir que o transplante de células-tronco autólogas associado à técnica de tubulização apresenta vantagens no processo de regeneração nervosa periférica.

Utilização de células-tronco autólogas de medula óssea na regeneração do nervo tibial de coelhos mediante técnica de tubulização com prótese de silicone

This study presents an experimental model of an acute deffect in a peripheral nerve to evaluate neural regeneration using a tubulization technique associated with the inoculation of autologous stem cells from bone marrow. A total of 12 New Zealand white rabbits underwent a bilateral dissection of the tibial nerve followed by repair with silicone tubulization. On the left tibial nerve of all animals, the tube was filled with autologous bone marrow-derived stem cells collected from the humerus. For control, using the same repair technique, the tubes were filled with a NaCl solution in the right tibial nerve. After 30 days of observation, the animals were euthanized and a histological evaluation of the collected nerve segments was performed by staining with hematoxylin-eosin, luxol fast blue, and toluidine blue. From the results it is possible to conclude that the transplanted autologous stem cells associated with the tubulization technique present an advantage in the peripheral nerve regeneration process.

Neste estudo é apresentado um modelo experimental de defeito agudo em nervo periférico para avaliação da regeneração nervosa mediante técnica de tubulização associada à inoculação de células-tronco autólogas de medula óssea. Foram utilizados 12 coelhos Nova Zelândia albinos, submetidos à secção bilateral e ao afastamento de 5mm do nervo tibial e posterior reparo mediante utilização de câmara de silicone. Internamente à prótese de tubulização do nervo tibial esquerdo em todos os animais, foram inoculadas células-tronco autólogas de medula óssea, coletadas a partir do úmero. Como grupo controle (nervo tibial direito), mediante aplicação da mesma técnica de reparo, solução de NaCl 0,9% foi administrada internamente à prótese. Após 30 dias de observação, os animais foram eutanasiados e foi realizada a avaliação histológica dos segmentos nervosos por meio das colorações de hematoxilina-eosina, luxol fast blue e azul de toluidina. Com os resultados, foi possível concluir que o transplante de células-tronco autólogas associado à técnica de tubulização apresenta vantagens no processo de regeneração nervosa periférica.

Células-tronco e sua utilização na regeneração de nervo periférico - revisão / Stem cells and their use in the regeneration of peripheral nerve- review

Stem cells are undifferentiated cells with properties of self renewal, differentiation and proliferation. These properties are the subject of studies for the treatment of different diseases and the regeneration of damaged tissues and organs, among them, the peripheral nerves. Despite existing evidences that cell therapy helps peripheral nerve regeneration when associated with surgical techniques, the mechanisms by which this differentiation into nerve cells occurs remain unknown. Therefore, this paper presents an overview of the types pf stem cells and their peculiarities as well as the current research involving cell therapy on regeneration of severed nerve stumps.(AU)

As células-tronco são células indiferenciadas com propriedades de auto-renovação, diferenciação e proliferação.Estas propriedades as tornaram alvo de estudos para o tratamento de diferentes doenças e naregeneração de órgãos e tecidos lesionados, dentre eles, os nervos periféricos. Porém, apesar de existiremfortes indícios de que a terapia celular auxilia a regeneração nervosa periférica, quando associada a técnicascirúrgicas consagradas, ainda permanecem desconhecidos os mecanismos pelos quais a remodelaçãodo tecido nervoso ocorre. Assim, este trabalho apresenta uma revisão sobre os tipos de células-troncoe suas particularidades, bem como as atuais pesquisas envolvendo a terapia celular na regeneração decotos nervosos seccionados.(AU)