Protocol for in vitro rooting of Pyrus comunnis rootstocks / Protocolo de enraizamento in vitro de porta-enxertos de Pyrus comunnis

Effective protocols for in vitro rooting for woody fruit trees are still a challenge for in vitro seedling production, especially when there is a need to insert new cultivars or rootstocks. These protocols are essential to accelerate studies in plant breeding programs and for seedling distribution. This study evaluated the use of 6-Benzylaminopurine (IBA) in in vitro rooting of Pyruscomunnis rootstocks, clones 'OHxF87' and Pyrodwarf. Explant exposure times (0, 24, 48, 72, and 96 hours) to 20 mg L-1 IBA were tested for in vitro rooting. The exposure to IBA resulted in rooting rates above 80%, surpassing some results reported in the literature. The 24-hour treatment provided 81,81% survival, leading to an average growth of five roots with 19 mm length, for 'OHxF87' rootstock. The same exposure time resulted in the highest survival rate (75%) and the highest mean root number, seven roots per plant with 10 mm length, for 'PDW' rootstock. Root formation did not occur in the absence of synthetic auxin. Therefore, it can be concluded that a 24-hour exposure at 20 mg L-1 IBA was sufficient to promote in vitro rooting in 'OHxF87' and Pyrodwarf rootstocks'.

Protocolos eficazes de enraizamento in vitro de frutíferas lenhosas ainda são um desafio para produção de mudas in vitro, especialmente quando há necessidade de inserção de novas cultivares ou porta-enxerto. Esses protocolos são essenciais para acelerar estudos nos programas de melhoramento genético e também para distribuição posterior das mudas. Nesse sentido, o objetivo deste estudo foi avaliar a utilização da 6-Benzilaminopurina no enraizamento in vitro de porta-enxerto Pirus comunnis, clones 'OHxF87' e Pyrodwarf. Para o enraizamento, foi testado o tempo de exposição dos explantes ao AIB. Para tanto, foram utilizados 20 mg L-1 do fitohormônio nas horas 0, 24, 48, 72 e 96 horas. A exposição ao AIB resultou em taxas de enraizamento acima de 80%, superando alguns resultados encontrados na literatura. Para o porta-enxerto 'OHxF87', o tratamento de 24 horas proporcionou 81,81% de sobrevivência, promovendo em média cinco raízes com comprimento de 19 mm. O mesmo tratamento para o porta-enxerto 'PDW' resultou na maior taxa de sobrevivência (75%), bem como no maior número médio de raízes, sete raízes por planta, com comprimento de 10 mm. Na ausência de auxina sintética, a formação de raízes não ocorreu. Assim sendo, podemos concluir que o tempo de exposição de 24 horas a 20 mg L-1 de IBA foi suficiente para promover o enraizamento de porta-enxertos Pyrus communis de 'OHxF87' e 'PDW'.

In vitro germination of Abricó-de-Macaco (Couroupita guianensis aubl.)zygotic embryos in different culture media and light spectra / Germinação in vitro de embriões zigóticos de Abricó-de-Macaco (Couroupita guianensis aubl.) em diferentes meios de cultivo e espectros de luz

ABSTRACT: Couroupita guianensis Aubl. is an Amazonian forest species with important medicinal and ornamental value. This study evaluated the effect of different culture media and light spectra on the in vitro germination and development of the zygotic embryos of C. guianensis. The culture media, MS and WPM, were evaluated without the addition of plant growth regulators and were associated with four LED light spectra: white (CW), 70% red + 30% blue (R2B), 100% red (R), and 100% blue (B). One hundred percent of the seeds successfully underwent in vitro germination, and the culture media did not interfere with embryo development. In addition to this, the different light spectra induced in vitro morphogenesis and R2B treatment significantly promoted the production of secondary roots. This effect may aid in the rooting and acclimatization of seedlings of this species.

RESUMO: Couropita guianensis Aubl. é uma espécie florestal de origem amazônica, de importância no uso medicinal e ornamental. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito de diferentes meios de cultivo e espectros de luz na germinação e desenvolvimento in vitro de embriões zigóticos de Couropita guianensis. Os meios de cultura avaliados foram o MS e o WPM, sem adição de reguladores de crescimento, associados a quatro espectros de luz de LED branca (CW), 70% vermelha + 30% azul (R2B), 100% vermelha (R) e 100% azul (B). Ocorreu 100% de germinação in vitro e os meios de cultivo não interferiram no desenvolvimento dos embriões. Os diferentes espectros de luz induziram a morfogênese in vitro e o tratamento R2B promoveu a produção de raízes secundárias em número significativo. Este efeito poderá auxiliar no processo de enraizamento e aclimatização de mudas dessa espécie.

In vitro germination of Abricó-de-Macaco (Couroupita guianensis aubl)zygotic embryos in different culture media and light spectra / Germinação in vitro de embriões zigóticos de Abricó-de-Macaco (Couroupita guianensis aubl) em diferentes meios de cultivo e espectros de luz

Couroupita guianensis Aubl. is an Amazonian forest species with important medicinal and ornamental value. This study evaluated the effect of different culture media and light spectra on the in vitro germination and development of the zygotic embryos of C. guianensis. The culture media, MS and WPM, were evaluated without the addition of plant growth regulators and were associated with four LED light spectra: white (CW), 70% red + 30% blue (R2B), 100% red (R), and 100% blue (B). One hundred percent of the seeds successfully underwent in vitro germination, and the culture media did not interfere with embryo development. In addition to this, the different light spectra induced in vitro morphogenesis and R2B treatment significantly promoted the production of secondary roots. This effect may aid in the rooting and acclimatization of seedlings of this species.

Couropita guianensis Aubl. é uma espécie florestal de origem amazônica, de importância no uso medicinal e ornamental. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito de diferentes meios de cultivo e espectros de luz na germinação e desenvolvimento in vitro de embriões zigóticos de Couropita guianensis. Os meios de cultura avaliados foram o MS e o WPM, sem adição de reguladores de crescimento, associados a quatro espectros de luz de LED branca (CW), 70% vermelha + 30% azul (R2B), 100% vermelha (R) e 100% azul (B). Ocorreu 100% de germinação in vitro e os meios de cultivo não interferiram no desenvolvimento dos embriões. Os diferentes espectros de luz induziram a morfogênese in vitro e o tratamento R2B promoveu a produção de raízes secundárias em número significativo. Este efeito poderá auxiliar no processo de enraizamento e aclimatização de mudas dessa espécie.

In vitro germination of Abricó-de-Macaco (Couroupita guianensis aubl)zygotic embryos in different culture media and light spectra / Germinação in vitro de embriões zigóticos de Abricó-de-Macaco (Couroupita guianensis aubl) em diferentes meios de cultivo e espectros de luz

Couroupita guianensis Aubl. is an Amazonian forest species with important medicinal and ornamental value. This study evaluated the effect of different culture media and light spectra on the in vitro germination and development of the zygotic embryos of C. guianensis. The culture media, MS and WPM, were evaluated without the addition of plant growth regulators and were associated with four LED light spectra: white (CW), 70% red + 30% blue (R2B), 100% red (R), and 100% blue (B). One hundred percent of the seeds successfully underwent in vitro germination, and the culture media did not interfere with embryo development. In addition to this, the different light spectra induced in vitro morphogenesis and R2B treatment significantly promoted the production of secondary roots. This effect may aid in the rooting and acclimatization of seedlings of this species.(AU)

Couropita guianensis Aubl. é uma espécie florestal de origem amazônica, de importância no uso medicinal e ornamental. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito de diferentes meios de cultivo e espectros de luz na germinação e desenvolvimento in vitro de embriões zigóticos de Couropita guianensis. Os meios de cultura avaliados foram o MS e o WPM, sem adição de reguladores de crescimento, associados a quatro espectros de luz de LED branca (CW), 70% vermelha + 30% azul (R2B), 100% vermelha (R) e 100% azul (B). Ocorreu 100% de germinação in vitro e os meios de cultivo não interferiram no desenvolvimento dos embriões. Os diferentes espectros de luz induziram a morfogênese in vitro e o tratamento R2B promoveu a produção de raízes secundárias em número significativo. Este efeito poderá auxiliar no processo de enraizamento e aclimatização de mudas dessa espécie.(AU)

In vitro propagation and conservation of Cattleya tigrina A Rich / Propagação e conservação in vitro de Cattleya tigrina A Rich

Cattleya tigrina A. Rich has been suffering heavy losses in its natural habitat and it is now included in the list of plants that are vulnerable to extinction. The development of in vitro propagation and conservation methodologies, as well as acclimatization, are considered important for species at the risk of extinction, as they promote the multiplication and conservation of the species, hence avoiding the loss of their genetic variability. The present study established the protocol of micropropagation and the in vitro conservation of C. tigrina. For the in vitro propagation, the study tested two volumes of the MS medium and two medium consistencies (stationary liquid and semi-solid). For acclimatization, the substrate mixtures containing pine bark, charcoal, vermiculite, and coconut coir were analyzed. For the in vitro conservation, different concentrations of the salts were tested in the MS medium, together with the osmotic regulators (sucrose, mannitol, and sorbitol), and at two temperatures (18 and 25 °C). The results obtained inferred that the semi-solid medium was superior to the stationary liquid medium in the variables of survival and the presence of roots, while the liquid medium was superior to the semi-solid medium in the number of shoots. For acclimatization, pine bark was the substrate where the plants developed an improved height, with sprouting, and rooting. The conservation was satisfactory and the plants remained viable for a period of 730 days, with the MS medium with 25% of the salts, and at temperatures of 18 ºC or 25 ºC. The plants were propagated in the stationary liquid MS medium (10 mL) and the semi-solid medium (25 mL), while they were acclimatized in pine bark and preserved in the MS medium with 25% of the salts (18 ºC or 25 ºC).

A Cattleya tigrina A. Rich vem sofrendo grandes perdas no seu habitat natural, sendo assim foi inclusa na lista de vulneráveis a extinção. O desenvolvimento de metodologias de propagação e conservação in vitro, bem como de aclimatização, são consideradas importantes para espécies em risco de extinção, por promover a multiplicação e conservação da espécie, evitando a perda do seu material genético. Desta forma, o presente trabalho visou estabelecer protocolo de micropropagação e conservação in vitro de C. tigrina. Para propagação in vitro testou volumes de meio de cultura e duas consistências do meio MS (líquido estacionário e semissólido). Para aclimatização, analisou misturas de substratos contendo casca de pinus, carvão vegetal, vermiculita e pó de coco. Para conservação in vitro, foram testados diferentes concentrações de sais no meio MS, reguladores osmóticos (sacarose, manitol e sorbitol), e duas temperaturas (18 e 25 °C). Os resultados obtidos inferem que, o meio de cultura semissólido foi superior ao líquido nas variáveis sobrevivência e presença de raízes, enquanto que o meio líquido foi superior ao meio semissólido em números de brotos. Na aclimatização a casca de pinus foi o substrato em que as plantas se desenvolveram melhor em altura, brotação e enraizamento. A conservação foi satisfatória e as plantas permaneceram viáveis por um período de 730 dias, usando 25% dos sais MS e temperatura de 18 ºC ou 25 ºC. As plantas podem ser propagadas em meio MS líquido estacionário (10 mL) ou semissólido (25 mL), aclimatizadas em casca de pinus e conservadas em 25% dos sais MS (18 ºC ou 25 ºC).

Costreductionin the micropropagation of Solanum lycopersicumL. var.cerasiforme / Redução de custos na micropropagação de Solanum lycopersicumL. var. cerasiforme

The aimof this study was to establish a low-cost alternative protocol for micropropagation ofSolanum lycopersicumL. var.cerasiforme,popularly known as cherry tomato. In the in vitroestablishment, culture mediacontaining Laboratory Reagent-grade (LR)and commercialsucrose and varied concentrations of corn starch and agarwere tested. The replacement of thermal sterilization, usingautoclave,withchemicalsterilization,adding sodium hypochlorite (2%) in the medium, was also evaluated. In the multiplication stage,the mediumwas supplemented with agar and/or corn starch and commercial sucrose.Forrooting, agrowth regulator-free medium withcommercialsucrose supplemented with agar and/or starch was used. Themicroplants were thentransplanted into plasticcontainerscontainingonlygarden substrateandsubsequentlyacclimatized in a greenhouse.The results make it possibleto conclude that the reduction of costs in the micropropagation of cherry tomatocan beobtained by replacing LRsucrose with commercial sucrose,and by the use of chemical sterilization of the culture medium withsodium hypochlorite. The replacement of agar withcorn starch can be done partially, in the stages of establishment and multiplication,and totally, during rooting.

O objetivo deste estudo foi estabelecer um protocolo alternativo de baixo custo para micropropagação de Solanum lycopersicumL. var. cerasiforme, conhecida popularmente como tomate cereja. Noestabelecimento in vitro foram testados meios de cultura contendo sacarose P.A. e comercial e concentrações variadas de amido de milho e ágar. Também avaliou-se a substituição da esterilização física pela esterilização química. Na etapa de multiplicação o meio foi suplementado com ágar e/ou amido de milho e sacarose comercial. Para o enraizamento utilizou-se meio isento de regulador com sacarose comercial suplementado com ágar e/ou amido. As microplantas foramtransplantadas para terra vegetal e aclimatizadas em casa de vegetação. Os resultados permitem concluir que a redução de custos na micropropagação do tomate cereja é obtida pela substituição de sacarose P.A. pela sacarose comercial, substituição parcial (estabelecimento e multiplicação) e total (enraizamento) de ágar por amido de milho e pela utilização de esterilização química do meio.

Costreductionin the micropropagation of Solanum lycopersicumL. var.cerasiforme / Redução de custos na micropropagação de Solanum lycopersicumL. var. cerasiforme

The aimof this study was to establish a low-cost alternative protocol for micropropagation ofSolanum lycopersicumL. var.cerasiforme,popularly known as cherry tomato. In the in vitroestablishment, culture mediacontaining Laboratory Reagent-grade (LR)and commercialsucrose and varied concentrations of corn starch and agarwere tested. The replacement of thermal sterilization, usingautoclave,withchemicalsterilization,adding sodium hypochlorite (2%) in the medium, was also evaluated. In the multiplication stage,the mediumwas supplemented with agar and/or corn starch and commercial sucrose.Forrooting, agrowth regulator-free medium withcommercialsucrose supplemented with agar and/or starch was used. Themicroplants were thentransplanted into plasticcontainerscontainingonlygarden substrateandsubsequentlyacclimatized in a greenhouse.The results make it possibleto conclude that the reduction of costs in the micropropagation of cherry tomatocan beobtained by replacing LRsucrose with commercial sucrose,and by the use of chemical sterilization of the culture medium withsodium hypochlorite. The replacement of agar withcorn starch can be done partially, in the stages of establishment and multiplication,and totally, during rooting.(AU)

O objetivo deste estudo foi estabelecer um protocolo alternativo de baixo custo para micropropagação de Solanum lycopersicumL. var. cerasiforme, conhecida popularmente como tomate cereja. Noestabelecimento in vitro foram testados meios de cultura contendo sacarose P.A. e comercial e concentrações variadas de amido de milho e ágar. Também avaliou-se a substituição da esterilização física pela esterilização química. Na etapa de multiplicação o meio foi suplementado com ágar e/ou amido de milho e sacarose comercial. Para o enraizamento utilizou-se meio isento de regulador com sacarose comercial suplementado com ágar e/ou amido. As microplantas foramtransplantadas para terra vegetal e aclimatizadas em casa de vegetação. Os resultados permitem concluir que a redução de custos na micropropagação do tomate cereja é obtida pela substituição de sacarose P.A. pela sacarose comercial, substituição parcial (estabelecimento e multiplicação) e total (enraizamento) de ágar por amido de milho e pela utilização de esterilização química do meio.(AU)

Vernonia condensata Baker: an alternative for large-scale seedling production / Uma alternativa para a produção de mudas de Vernonia condensata Baker em larga escala

The increasing use of Vernonia condensata Baker highlights the importance of developing strategies to reduce the impact of exploitation on nature reserves. The aim of this study was to establish a micropropagation protocol to produce homogenous plants with high phytosanitary quality. Apical, nodal, and internodal segments of plants grown in the field were used for in vitro growth. The segments were disinfected in sodium hypochlorite solution (1.0 and 2.0%) for 15 and 30 minutes and then transferred to Petri dishes containing MS culture medium for 30 days. A completely randomized factorial experiment (3 x 2 x 2) with five replicates was designed. After this period, a completely randomized in vitro multiplication experiment was carried out with six treatments (BAP - 0.0; 0.5; 1.0; 1.5; 2.0; 2.5 mg L-1) and six replicates. The shoots obtained in the best treatment were transferred to flasks with rooting medium (MS, MS/2 or MS/4). The experiment was completely randomized with 12 replicates. Microplants were acclimatized in polyethylene terephthalate (PET) bottles filled with autoclaved topsoil. Our results showed that 40.0% of the nodal segments (immersed in 1.0% sodium hypochlorite for 30 minutes) were adequately disinfected and survived. In the in vitro multiplication experiment, the 0.5 mg L-1 concentration of BAP yielded the highest number of shoots and the best vegetative growth. With regard to the assessed characteristics, MS/4 was the best rooting medium, with 100% survival during acclimatization. This study showed that V. condensata in vitro culture might produce 32,000 seedlings in 7 months.(AU)

A crescente utilização de Vernonia condensata Baker evidencia a importância de desenvolver estratégias que reduzam o extrativismo nos ambientes naturais. O estudo objetivou estabelecer protocolo de micropropagação produzindo plantas homogêneas e de alta qualidade fitossanitária. Foram utilizados, na etapa de estabelecimento in vitro, segmentos apicais, intermodais e nodais de plantas cultivadas no campo. Desinfestados em solução de hipoclorito de sódio (1,0 e 2,0%) no tempo de 15 e 30 minutos e em seguida introduzidos em placa de Petri, com meio de cultura MS, durante 30 dias. Foi utilizado o delineamento inteiramente casualizado no esquema fatorial (3 x 2 x 2), com cinco repetições. Após este período, foi montado o experimento de multiplicação in vitro, em delineamento inteiramente casualizado com seis tratamentos (BAP - 0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 mg L-1) e seis repetições. As brotações obtidas no melhor tratamento foram transferidas para frascos com meio de cultura de enraizamento (MS, MS/2 e MS/4). Esse experimento foi conduzido no delineamento inteiramente casualizado, com 12 repetições. A aclimatização foi realizada introduzindo as microplantas em garrafas do tipo PET contendo terra vegetal autoclavada. Os resultados mostraram que 40,0% dos segmentos nodais (imersos em 1,0% de hipoclorito de sódio, durante 30 minutos) foram desinfestados e sobreviveram. No experimento de multiplicação in vitro obteve-se a melhor resposta no número de brotos e no desenvolvimento vegetativo, na concentração de 0,5 mg L-1 de BAP. O meio de cultura de enraizamento que possibilitou a melhor resposta, nas características avaliadas, foi o MS/4. Durante a aclimatização obteve-se 100% de plantas sobreviventes, oriundas do meio MS/4. A realização desse trabalho permite estimar a obtenção de 32.000 mudas de V. condensata, após sete meses de cultivo in vitro.(AU)

Micropropagation of Chapada Diamantina ornamental bromeliad / Micropropagação de bromélia ornamental da Chapada Diamantina

Sincoraea mucugensis (Wand. & A.A. Conc.) LOUZADA & WAND, an endangered bromeliad, is confined to the central region of the Chapada Diamantina, in the municipality of Mucugê, Brazil. From various researches, it is evident that for the propagation of this species, the in vitro technique is a feasible option. However, due to the low multiplication rates reported in various papers, this study aimed to establish a micropropagation protocol of direct organogenesis for S. mucugensis. First, the inoculation of the stem explants was done in MS ½ culture medium which contained different levels of BAP (0.00; 6.66; 8.88; 11.10; 13.20 µM) and NAA (0.00; 2.60; 5.20 µM). These shoots were then subjected to a couple of distinct rooting periods (of 30- and 60-day duration) using activated charcoal; finally, these microplants were transferred to a greenhouse for acclimatization, and covered with transparent plastic cups, as a water loss prevention test method. All the data were submitted to the analysis of variance (ANOVA), and the means were subjected to regression analysis or compared using the Tukey test. The findings revealed that the S. mucugensis stem explants raised in the NAA-rich medium (6.42 to 7.43 shoots/explants) showed high multiplication rates; the shoot rooting was done for 30 days using activated charcoal with the medium. Acclimatization, which was performed by directly exposing the microplants to the ex vitro environment, showed 95% survival rate.(AU)

Sincoraea mucugensis (Wand. & A.A. Conc.) LOUZADA & WAND é uma bromélia vulnerável de ocorrência restrita ao município de Mucugê, Chapada Diamantina. Estudos indicam que a cultura de tecidos é uma alternativa viável para a propagação in vitro desta espécie. Contudo, em função das baixas taxas de multiplicação obtidas em estudos anteriores, objetivou-se estabelecer um protocolo de micropropagação via organogênese direta para S. mucugensis. Explantes caulinares foram inoculados em meio de cultura MS ½ contendo diferentes concentrações de BAP (0,00; 6,66; 8,88; 11,10; 13,20 µM) e ANA (0,00; 2,60; 5,20 µM). Os brotos obtidos foram submetidos a diferentes períodos de enraizamento (30 e 60 dias) com carvão ativado; posteriormente as microplantas foram aclimatizadas em casa de vegetação, testando-se o efeito da cobertura com copos plásticos transparentes como estratégias contra perda de água. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e as médias analisadas por regressão ou comparadas pelo Teste de Tukey. Os resultados demonstram que altas taxas de multiplicação de S. mucugensis são geradas a partir de explantes caulinares cultivados em meio contendo ANA (6,42 a 7,43 brotos/explantes); o enraizamento dos brotos é realizado por 30 dias em meio com carvão ativado e a aclimatização é feita com exposição direta das microplantas ao ambiente ex vitro com 95% de sobrevivência.(AU)

Micropropagation of Stevia rebaudiana plants / Micropropagação de plantas de Stevia rebaudiana

The aim of the study was to develop optimum composition of plant growth regulators in media for the propagation and rooting of shoots of stevia (Stevia rebaudiana Bertoni) in in vitro cultures. Single-node shoot fragments obtained from plants propagated on MS medium were placed onto media supplemented with: BAP, 2iP and KIN at concentrations: 0.5, 1, 2 and 5 mg∙dm-3, whereas at the rooting stage with addition of: IAA, IBA and NAA at concentrations 1, 2, 4 and 8 mg∙dm-3. The highest number of shoots and leaves was reported for plants propagated on MS medium enriched with 0.5 mg∙dm-3 BAP. The greatest number of the longest roots was developed by stevia on the MS medium enriched with 1 mg∙dm-3 IAA.(AU)

O objetivo do estudo foi desenvolver uma composição ótima de reguladores de crescimento em meios para a propagação e enraizamento de brotos de estévia (Stevia rebaudiana Bertoni) em culturas in vitro. Fragmentos de parte aérea obtidos de plantas propagadas em meio MS foram colocados em meio suplementado com: BAP, 2iP e KIN nas concentrações: 0.5, 1, 2 e 5 mg∙dm-3, enquanto no estádio de enraizamento com adição de: IAA, IBA e ANA nas concentrações 1, 2, 4 e 8 mg∙dm-3.O maior número de brotações e folhas foi encontrado para plantas propagadas em meio MS enriquecido com 0.5 mg∙dm-3 de BAP. O maior número de raízes mais longas foi desenvolvido por estévia no meio MS enriquecido com 1 mg∙dm-3 de IAA.(AU)

Agar and activated charcoal influence the in vitro development of shoot and root sequoia / Ágar e carvão ativado influenciam no desenvolvimento in vitro da parte aérea e radicular de sequoia

Experimental seedlings with Sequoia sempervirens (Lamb), a species known worldwide for its large size, longevity and quality of timber, are beginning in Brazil, making the availability of quality seedlings necessary. Thus, the technique of tissue culture, via micropropagation, becomes a great ally for the guarantee of genetic superiority, large-scale production and reduced propagation time. Currently there are numerous protocols for several species, however, it is necessary to verify all influential agents in the success of in vitro development. The objective of this work was to determine the influence of activated charcoal and agar concentrations on aerial and root development of S. sempervirens. The treatments involved the presence / absence of activated carbon (1 g L-1), combined with concentrations of agar (4, 5 and 6 g L-1) in 50% MS medium. For the number and length of shoots and roots, only activated carbon was significant, and the presence benefited the development of the explants. For the percentage of callus, there was interaction of the factors, and higher concentrations of agar (5 and 6 g L-1) in the presence of medium were harmful, since they presented higher callosity, which minimizes the rooting rates. It is indicated the addition of activated charcoal (1 g L-1) and lower concentration of agar (4 g L-1) in 50% MS culture medium for a better in vitro development o

Plantios experimentais com Sequoia sempervirens (Lamb), espécie conhecida mundialmente pelo grande porte, longevidade e qualidade madeireira, estão iniciando no Brasil, tornando necessário a disponibilidade de mudas de qualidade. Assim, a técnica de cultura de tecidos, via micropropagação, se torna uma grande aliada pela garantia de superioridade genética, produção em grande escala e tempo reduzido de propagação. Atualmente há inúmeros protocolos para diversas espécies, porém, é necessário verificar todos os agentes influentes no sucesso do desenvolvimento in vitro. O objetivo deste trabalho foi determinar a influência do carvão ativado e de concentrações de ágar no desenvolvimento in vitro aéreo e de raízes de S. sempervirens. Os tratamentos realizados envolveram a presença/ausência do carvão ativado (1 g L-1), combinados com concentrações de ágar (4, 5 e 6 g L-1) em meio MS 50%. Para o número e comprimento de brotos e de raízes, apenas o carvão ativado foi significativo, sendo que a presença beneficiou o desenvolvimento dos explantes. Para porcentagem de calo, houve interação dos fatores, sendo que maiores concentrações de ágar (5 e 6 g L-1) na presença do carvão foram prejudiciais, pois apresentaram maior calosidade, o que minimiza as taxas de enraizamento. Indica-se a adição de carvão ativado (1 g L-1) e de menor concentração de ágar (4 g L-1) em meio de cultura MS 50% para

Ágar e carvão ativado influenciam no desenvolvimento in vitro da parte aérea e radicular de sequoia / Agar and activated charcoal influence the in vitro development of shoot and root sequoia

Plantios experimentais com Sequoia sempervirens (Lamb), espécie conhecida mundialmente pelo grande porte, longevidade e qualidade madeireira, estão iniciando no Brasil, tornando necessário a disponibilidade de mudas de qualidade. Assim, a técnica de cultura de tecidos, via micropropagação, se torna uma grande aliada pela garantia de superioridade genética, produção em grande escala e tempo reduzido de propagação. Atualmente há inúmeros protocolos para diversas espécies, porém, é necessário verificar todos os agentes influentes no sucesso do desenvolvimento in vitro. O objetivo deste trabalho foi determinar a influência do carvão ativado e de concentrações de ágar no desenvolvimento in vitro aéreo e de raízes de S. sempervirens. Os tratamentos realizados envolveram a presença/ausência do carvão ativado (1 g L-1), combinados com concentrações de ágar (4, 5 e 6 g L-1) em meio MS 50%. Para o número e comprimento de brotos e de raízes, apenas o carvão ativado foi significativo, sendo que a presença beneficiou o desenvolvimento dos explantes. Para porcentagem de calo, houve interação dos fatores, sendo que maiores concentrações de ágar (5 e 6 g L-1) na presença do carvão foram prejudiciais, pois apresentaram maior calosidade, o que minimiza as taxas de enraizamento. Indica-se a adição de carvão ativado (1 g L-1) e de menor concentração de ágar (4 g L-1) em meio de cultura MS 50% para...

Experimental seedlings with Sequoia sempervirens (Lamb), a species known worldwide for its large size, longevity and quality of timber, are beginning in Brazil, making the availability of quality seedlings necessary. Thus, the technique of tissue culture, via micropropagation, becomes a great ally for the guarantee of genetic superiority, large-scale production and reduced propagation time. Currently there are numerous protocols for several species, however, it is necessary to verify all influential agents in the success of in vitro development. The objective of this work was to determine the influence of activated charcoal and agar concentrations on aerial and root development of S. sempervirens. The treatments involved the presence / absence of activated carbon (1 g L-1), combined with concentrations of agar (4, 5 and 6 g L-1) in 50% MS medium. For the number and length of shoots and roots, only activated carbon was significant, and the presence benefited the development of the explants. For the percentage of callus, there was interaction of the factors, and higher concentrations of agar (5 and 6 g L-1) in the presence of medium were harmful, since they presented higher callosity, which minimizes the rooting rates. It is indicated the addition of activated charcoal (1 g L-1) and lower concentration of agar (4 g L-1) in 50% MS culture medium for a better in vitro development...

Ágar e carvão ativado influenciam no desenvolvimento in vitro da parte aérea e radicular de sequoia / Agar and activated charcoal influence the in vitro development of shoot and root sequoia

Plantios experimentais com Sequoia sempervirens (Lamb), espécie conhecida mundialmente pelo grande porte, longevidade e qualidade madeireira, estão iniciando no Brasil, tornando necessário a disponibilidade de mudas de qualidade. Assim, a técnica de cultura de tecidos, via micropropagação, se torna uma grande aliada pela garantia de superioridade genética, produção em grande escala e tempo reduzido de propagação. Atualmente há inúmeros protocolos para diversas espécies, porém, é necessário verificar todos os agentes influentes no sucesso do desenvolvimento in vitro. O objetivo deste trabalho foi determinar a influência do carvão ativado e de concentrações de ágar no desenvolvimento in vitro aéreo e de raízes de S. sempervirens. Os tratamentos realizados envolveram a presença/ausência do carvão ativado (1 g L-1), combinados com concentrações de ágar (4, 5 e 6 g L-1) em meio MS 50%. Para o número e comprimento de brotos e de raízes, apenas o carvão ativado foi significativo, sendo que a presença beneficiou o desenvolvimento dos explantes. Para porcentagem de calo, houve interação dos fatores, sendo que maiores concentrações de ágar (5 e 6 g L-1) na presença do carvão foram prejudiciais, pois apresentaram maior calosidade, o que minimiza as taxas de enraizamento. Indica-se a adição de carvão ativado (1 g L-1) e de menor concentração de ágar (4 g L-1) em meio de cultura MS 50% para...(AU)

Experimental seedlings with Sequoia sempervirens (Lamb), a species known worldwide for its large size, longevity and quality of timber, are beginning in Brazil, making the availability of quality seedlings necessary. Thus, the technique of tissue culture, via micropropagation, becomes a great ally for the guarantee of genetic superiority, large-scale production and reduced propagation time. Currently there are numerous protocols for several species, however, it is necessary to verify all influential agents in the success of in vitro development. The objective of this work was to determine the influence of activated charcoal and agar concentrations on aerial and root development of S. sempervirens. The treatments involved the presence / absence of activated carbon (1 g L-1), combined with concentrations of agar (4, 5 and 6 g L-1) in 50% MS medium. For the number and length of shoots and roots, only activated carbon was significant, and the presence benefited the development of the explants. For the percentage of callus, there was interaction of the factors, and higher concentrations of agar (5 and 6 g L-1) in the presence of medium were harmful, since they presented higher callosity, which minimizes the rooting rates. It is indicated the addition of activated charcoal (1 g L-1) and lower concentration of agar (4 g L-1) in 50% MS culture medium for a better in vitro development...(AU)

Micropropagation of the new apple rootstock G. 814 / Micropropagação do novo porta-enxerto de macieira G. 814

nternational breeding programs launched new genetic material of apple rootstocks that in addition to precocity and great yield are resistant to major diseases and soil pests encountered in the largest apple producing regions in Brazil. Given this, there is a necessity for vegetative propagation of these materials for study and possible replacement of existing rootstocks. The objective was to adapt a micropropagation protocol for new apple rootstock G. 814. In the multiplication phase were evaluated BAP concentrations: 0; 0.5; 1; 2 and 4mg L-1 and in the rooting phase were evaluated IBA concentrations: 0; 0.25; 0.50; 1; 1.5 and 2.5mg L-1. These new results demonstrated that this new rootstock selection can be propagated with this tissue culture adapted protocol. For the successful in vitro propagation of apple rootstock G. 814 it is indicated the use of 1mg L-1 BAP at multiplication phase and 1.5mg L-1 IBA at rooting phase.

Programas de melhoramento internacional lançaram novos materiais genéticos de porta-enxertos de macieira que além de precoces e produtivos são resistentes as principais doenças e pragas de solo das maiores regiões produtoras de maçã no Brasil. Diante disto, existe a necessidade de propagação vegetativa destes materiais para estudos e possível substituição dos atuais porta-enxertos. O objetivo foi adaptar um protocolo de micropropagação para o novo porta-enxerto de macieira G. 814. Na fase de multiplicação dos explantes foram avaliadas concentrações de BAP: 0; 0.5; 1; 2 e 4mg L-1 e na de enraizamento concentrações de AIB: 0; 0.25; 0.50; 1; 1.5 e 2.5mg L-1. Esta seleção de porta-enxerto pode ser micropropagada com este protocolo adaptado. Para o sucesso na propagação in vitro do porta-enxerto de macieira G. 814 é indicado o uso de 1mg L-1 de BAP na fase de multiplicação e de 1.5mg L-1 de AIB na fase de enraizamento.

Micropropagation of the new apple rootstock G. 814 / Micropropagação do novo porta-enxerto de macieira G. 814

nternational breeding programs launched new genetic material of apple rootstocks that in addition to precocity and great yield are resistant to major diseases and soil pests encountered in the largest apple producing regions in Brazil. Given this, there is a necessity for vegetative propagation of these materials for study and possible replacement of existing rootstocks. The objective was to adapt a micropropagation protocol for new apple rootstock G. 814. In the multiplication phase were evaluated BAP concentrations: 0; 0.5; 1; 2 and 4mg L-1 and in the rooting phase were evaluated IBA concentrations: 0; 0.25; 0.50; 1; 1.5 and 2.5mg L-1. These new results demonstrated that this new rootstock selection can be propagated with this tissue culture adapted protocol. For the successful in vitro propagation of apple rootstock G. 814 it is indicated the use of 1mg L-1 BAP at multiplication phase and 1.5mg L-1 IBA at rooting phase.(AU)

Programas de melhoramento internacional lançaram novos materiais genéticos de porta-enxertos de macieira que além de precoces e produtivos são resistentes as principais doenças e pragas de solo das maiores regiões produtoras de maçã no Brasil. Diante disto, existe a necessidade de propagação vegetativa destes materiais para estudos e possível substituição dos atuais porta-enxertos. O objetivo foi adaptar um protocolo de micropropagação para o novo porta-enxerto de macieira G. 814. Na fase de multiplicação dos explantes foram avaliadas concentrações de BAP: 0; 0.5; 1; 2 e 4mg L-1 e na de enraizamento concentrações de AIB: 0; 0.25; 0.50; 1; 1.5 e 2.5mg L-1. Esta seleção de porta-enxerto pode ser micropropagada com este protocolo adaptado. Para o sucesso na propagação in vitro do porta-enxerto de macieira G. 814 é indicado o uso de 1mg L-1 de BAP na fase de multiplicação e de 1.5mg L-1 de AIB na fase de enraizamento.(AU)

Vegetative rescue and ex vitro system production of Tibouchina sellowiana clonal plants by cutting and mini-cutting / Resgate vegetativo e sistema ex vitro de produção de mudas de Tibouchina sellowiana por estaquia e miniestaquia

We aimed to evaluate the rooting potential of Tibouchina sellowiana through the experiments: I - Cuttings from current-year shoots and epicormic shoots were submitted to IBA concentrations: 0, 500, 1000, 1500 and 2000mg L-1, in a factorial arrangement 2 x 5 (two types of cuttings x five IBA concentrations), with four replicates and 20 cuttings each; II - mini-stumps of Tibouchina sellowiana were submitted to successive shoots collecting during the four seasons, in a split-plot design, with five replications of ten mini-stumps per experimental unit. From the shoots of mini-stumps, mini-cuttings were produced, which were initially kept in greenhouse and later transferred to full sun, in a 4 x 5 factorial arrangement (four seasons x five collections per season), with four replicates of 12 mini-cuttings. Superiority of epicormic shoots cuttings was reported when compared to the current-year shoots, which showed the highest rooting and leaves maintenance (42.50% and 55.00%, respectively), eliminating the use of IBA. High survival of mini-stumps (over 80%) and the mini-cuttings production (170mini-cuttings m-2 month-1) in clonal mini-garden and the mini-cuttings survival (above 80%) in the greenhouse demonstrated the technical feasibility, with summer as the most appropriate time to collect mini-cuttings.(AU)

Objetivou-se avaliar o potencial de enraizamento de Tibouchina sellowiana por meio dos experimentos: I - Estacas provenientes de brotações do ano e epicórmicas foram submetidas às concentrações de IBA: 0, 500, 1000, 1500 e 2000mg L-1, em arranjo fatorial 2 x 5 (dois tipos de estacas x cinco concentrações de IBA), com quatro repetições de 20 estacas cada; II - Minicepas de Tibouchina sellowiana foram submetidas à coletas sucessivas de suas brotações durante as quatro estações do ano, em modelo de parcelas subdivididas no tempo, com cinco repetições de dez minicepas por unidade experimental. A partir das brotações das minicepas foram produzidas miniestacas, as quais foram inicialmente mantidas em casa de vegetação e posteriormente transferidas para pleno sol, em arranjo fatorial 4 x 5 (quatro estações do ano x cinco coletas por estação), com quatro repetições de 12 miniestacas. Verificou-se superioridade das estacas de brotações epicórmicas em comparação às brotações do ano, as quais apresentaram o maior enraizamento e retenção foliar (42,50% e 55,00%, respectivamente), dispensando o uso de IBA. A elevada sobrevivência das minicepas (superior a 80%) e produção de miniestacas (170 miniestacas m-2 mês-1) em minijardim clonal e sobrevivência (acima de 80%) de miniestacas em casa de vegetação demonstram a viabilidade da técnica, sendo o verão a época mais adequada para coleta de miniestacas.(AU)

Protocol for micropropagation of quince BA29 in semisolid media / Protocolo para micropropagação de marmeleiro BA29 em meio semissólido

Micropropagation is a technique widely known for its ability to produce large numbers of plants in a short period of time. It is essential for breeding programs and to establish micropropagation protocols for economically important species. The aim of this study was to establish a micropropagation protocol for quince BA29, aiming at mass production of plantlets. The explants of quince BA29 were cultured on MS and WPM media (original and 1/2) in combination with BAP (0, 0.5, 1, 2 and 4 mg L-1) for the in vitro multiplication and cultured in MS medium with sucrose (15 and 30 mg.L-1) combined with IBA (0, 0.12, 0.25, 0.50, 1.0 and 2.0 mg L-1) for in vitro rooting. After 45 days, the culture media which provided the best results for growth and multiplication of BA29 explants was the MS original with 2.68 mg L-1 of BAP and the culture media which provided the best results for rooting of BA29 explants was MS with 15 g L-1 of sucrose and 1.25 mg L-1 of IBA.(AU)

A micropropagação é uma técnica amplamente conhecida pela sua capacidade de produzir um grande número de plantas em um espaço curto de tempo. É essencial para programas de melhoramento, sendo fundamental o estabelecimento de protocolos de micropropagação para espécies economicamente importantes. O objetivo do presente estudo foi estabelecer um protocolo de micropropagação para o marmeleiro BA29, visando à produção massal de mudas. Explantes de marmeleiro BA29 foram cultivados nos meios de cultura MS e WPM (original e 1/2) combinados com BAP (0; 0,5; 1; 2 e 4 mg L-1) para a multiplicação in vitro, e cultivados em meio MS com sacarose (15 e 30 mg L-1) combinados com AIB (0; 0,12; 0,25; 0,50; 1,0 e 2,0 mg L-1) para o enraizamento in vitro. Após 45 dias, o meio de cultura que proporcionou os melhores resultados para crescimento e multiplicação de explantes de BA29 foi o MS original com 2,68 mg L-1 de BAP e o meio de cultura que proporcionou os melhores resultados para o enraizamento de explantes de BA29 foi MS com 15 g L-1 de sacarose e 1,25 mg L-1 de AIB.(AU)

Protocol for micropropagation of quince BA29 in semisolid media / Protocolo para micropropagação de marmeleiro BA29 em meio semissólido

Micropropagation is a technique widely known for its ability to produce large numbers of plants in a short period of time. It is essential for breeding programs and to establish micropropagation protocols for economically important species. The aim of this study was to establish a micropropagation protocol for quince BA29, aiming at mass production of plantlets. The explants of quince BA29 were cultured on MS and WPM media (original and 1/2) in combination with BAP (0, 0.5, 1, 2 and 4 mg L-1) for the in vitro multiplication and cultured in MS medium with sucrose (15 and 30 mg.L-1) combined with IBA (0, 0.12, 0.25, 0.50, 1.0 and 2.0 mg L-1) for in vitro rooting. After 45 days, the culture media which provided the best results for growth and multiplication of BA29 explants was the MS original with 2.68 mg L-1 of BAP and the culture media which provided the best results for rooting of BA29 explants was MS with 15 g L-1 of sucrose and 1.25 mg L-1 of IBA.

A micropropagação é uma técnica amplamente conhecida pela sua capacidade de produzir um grande número de plantas em um espaço curto de tempo. É essencial para programas de melhoramento, sendo fundamental o estabelecimento de protocolos de micropropagação para espécies economicamente importantes. O objetivo do presente estudo foi estabelecer um protocolo de micropropagação para o marmeleiro BA29, visando à produção massal de mudas. Explantes de marmeleiro BA29 foram cultivados nos meios de cultura MS e WPM (original e 1/2) combinados com BAP (0; 0,5; 1; 2 e 4 mg L-1) para a multiplicação in vitro, e cultivados em meio MS com sacarose (15 e 30 mg L-1) combinados com AIB (0; 0,12; 0,25; 0,50; 1,0 e 2,0 mg L-1) para o enraizamento in vitro. Após 45 dias, o meio de cultura que proporcionou os melhores resultados para crescimento e multiplicação de explantes de BA29 foi o MS original com 2,68 mg L-1 de BAP e o meio de cultura que proporcionou os melhores resultados para o enraizamento de explantes de BA29 foi MS com 15 g L-1 de sacarose e 1,25 mg L-1 de AIB.

Growth regulators and substrates for Oncidium baueri Lindl. micropropagation / Reguladores de crescimento e substratos para a micropropagação de Oncidium baueri Lindl

An adequate concentration of growth regulators as well as the replacement of agar by an alternative medium may be promising from practical and financial points of view to produce orchid plants by micropropagation. The objective of this work was to evaluate different concentrations of growth regulator and alternative substrates for agar replacement in culture medium for in vitro multiplication and rooting of Oncidium baueri. In the explant multiplication phase, two experimental factors were evaluated- various concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP) (0.0, 1.0, 2.0, and 3.0 mg L-1) and substrates (agar, vermiculite, and coconut fiber) added to MS medium. In the rooting phase, different concentrations of indole butyric acid (IBA) (0.0, 0.5, 1.0, and 1.5 mg L-1) were added to culture medium containing the same substrate. Six months after the experiments were initiated, the survival percentage, number of leaves, shoots, and roots and length of the aerial part and the major root were evaluated. The results suggested that addition of 1.0 mg L-1 BAP is necessary for the O. baueri in vitro multiplication phase, but IBA is not necessary in the rooting phase. For the substrate, vermiculite is not indicated as an agar replacement. In contrast, coconut fiber can be used in both multiplication and rooting phases of Oncidium baueri in vitro culture.

Na micropropagação de orquídeas, a concentração adequada de reguladores de crescimento, bem como a substituição do ágar por substratos alternativos no meio de cultura podem ser promissoras do ponto de vista da praticidade e da economia financeira para a obtenção de mudas. Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar diferentes concentrações de reguladores de crescimento e substratos alternativos em substituição ao ágar no meio de cultura para a multiplicação e o enraizamento in vitro de Oncidium baueri. Na fase de multiplicação dos explantes, foram avaliados dois fatores: concentração de benzilaminopurina (BAP) (0,0; 1,0; 2,0 e 3,0 mg L-1) e substrato (ágar, vermiculita e fibra de coco) no meio de cultura MS e, no período de enraizamento, foram testadas concentrações de ácido indolbutírico (AIB) (0,0; 0,5; 1,0 e 1,5 mg L-1) nos mesmos substratos e meio de cultura. Após seis meses da instalação dos experimentos, foram avaliadas as variáveis: porcentagem de sobrevivência; número médio de folhas, brotações e raízes; comprimento da parte aérea e da maior raiz. Para a fase de multiplicação in vitro é necessário a utilização de BAP na concentração de 1,0 mg L-1; porém, para a fase de enraizamento a utilização do regulador de crescimento AIB é dispensável. Quanto aos substratos, a vermiculita não é indicada para substituir o ágar; entretanto, a fibra de coco pode ser usada, tanto na fase de multiplicação, quanto no enraizamento in vitro de Oncidium baueri.

Growth regulators and substrates for Oncidium baueri Lindl. micropropagation / Reguladores de crescimento e substratos para a micropropagação de Oncidium baueri Lindl

An adequate concentration of growth regulators as well as the replacement of agar by an alternative medium may be promising from practical and financial points of view to produce orchid plants by micropropagation. The objective of this work was to evaluate different concentrations of growth regulator and alternative substrates for agar replacement in culture medium for in vitro multiplication and rooting of Oncidium baueri. In the explant multiplication phase, two experimental factors were evaluated- various concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP) (0.0, 1.0, 2.0, and 3.0 mg L-1) and substrates (agar, vermiculite, and coconut fiber) added to MS medium. In the rooting phase, different concentrations of indole butyric acid (IBA) (0.0, 0.5, 1.0, and 1.5 mg L-1) were added to culture medium containing the same substrate. Six months after the experiments were initiated, the survival percentage, number of leaves, shoots, and roots and length of the aerial part and the major root were evaluated. The results suggested that addition of 1.0 mg L-1 BAP is necessary for the O. baueri in vitro multiplication phase, but IBA is not necessary in the rooting phase. For the substrate, vermiculite is not indicated as an agar replacement. In contrast, coconut fiber can be used in both multiplication and rooting phases of Oncidium baueri in vitro culture.(AU)

Na micropropagação de orquídeas, a concentração adequada de reguladores de crescimento, bem como a substituição do ágar por substratos alternativos no meio de cultura podem ser promissoras do ponto de vista da praticidade e da economia financeira para a obtenção de mudas. Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar diferentes concentrações de reguladores de crescimento e substratos alternativos em substituição ao ágar no meio de cultura para a multiplicação e o enraizamento in vitro de Oncidium baueri. Na fase de multiplicação dos explantes, foram avaliados dois fatores: concentração de benzilaminopurina (BAP) (0,0; 1,0; 2,0 e 3,0 mg L-1) e substrato (ágar, vermiculita e fibra de coco) no meio de cultura MS e, no período de enraizamento, foram testadas concentrações de ácido indolbutírico (AIB) (0,0; 0,5; 1,0 e 1,5 mg L-1) nos mesmos substratos e meio de cultura. Após seis meses da instalação dos experimentos, foram avaliadas as variáveis: porcentagem de sobrevivência; número médio de folhas, brotações e raízes; comprimento da parte aérea e da maior raiz. Para a fase de multiplicação in vitro é necessário a utilização de BAP na concentração de 1,0 mg L-1; porém, para a fase de enraizamento a utilização do regulador de crescimento AIB é dispensável. Quanto aos substratos, a vermiculita não é indicada para substituir o ágar; entretanto, a fibra de coco pode ser usada, tanto na fase de multiplicação, quanto no enraizamento in vitro de Oncidium baueri.(AU)