Dynamics of ammonia volatilization from NBPT-treated urea in tropical acid soils

The urease inhibitor N-(n-butyl) thiophosphoric triamide (NBPT) reduces NH3 losses from urea (UR) surface-applied to soils, but its efficacy may be lower in acidic soils. The period when urease inhibition occurs efficaciously may change with soil pH. This needs to be clarified in tropical soils which are commonly acidic. This study evaluated the effectiveness of NBPT-treated urea to delay and reduce ammonia volatilization in two soils at three pH levels. Two experiments were conducted under laboratory conditions in soils with different textures (sandy-clay and clay). The treatments consisted of three soil pH levels and two N sources (UR and UR + NBPT), with five replicates. The soil pH values were adjusted and reached values of 4.5, 5.6, and 6.4 in the sandy-clay, and 4.5, 5.4, and 6.1 in the clay soil. Ammonia volatilization was measured using glass chambers (1.5 L). In the sandy-clay soil, NH3 losses were 40-47 % of the UR-N. In the clay soil, losses were 26-32 %. The addition of NBPT to UR reduced the NH3 volatilization by 18-53 %; the inhibitor decreased the N losses under all soil pH conditions but was significantly less efficient in acidic soils (pH 4.5). The lower efficiency of the inhibitor under acidic conditions was more evident in the first few days: 50 % of the total NH3 losses occurred in less than four days in soils with pH 4.5, but in 8-11 days in soils with pH above 5.4. The rapid loss in efficiency in more acidic soils is a drawback. Using NBPT in severely acidic soils showed a relatively small advantage over untreated UR as the inhibitor did not provide extra time for fertilizer incorporation and further reduction of NH3 losses.(AU)

Effects of Supplementation of Zinc, Manganese, or Copper and Different Phytase Levels in Serum and Bone Acid and Alkaline Phosphatases of Broiler Chicks

The knowledge of biological trace minerals and phytase requirements for modern broiler genotypes is not established and the pressure to reduce their usage in animal feeding due to environmental issues is increasing. Here, the alkaline phosphatase (ALP) and tartarate-resistant acid phosphatase (TRAP) of the tibia and serum of broilers fed with diets containing various levels of phytase and reduced levels of zinc, manganese, and copper was evaluated. The experiment was performed using 1,200 male Cobb broilers raised according to standard commercial husbandry techniques. Data were analyzed as a 4×3 factorial arrangement with four concentrations of zinc (0.34, 0.49, 0.64, and 0.79 ppm), manganese (0.18, 0.43, 0.68, and 0.93 ppm), or copper (0.09, 0.12, 0.15, and 0.18 ppm) and three concentrations of phytase (0, 500, and 1,000 FTU/kg) for age periods of 1-21 and 36-42 days. While the dietary supplementation with copper did not induce a significant effect in bone tissue biochemical markers, serum TRAP activity of 42-day old broilers increased with higher copper levels. Increasing dietary zinc levels linearly increased ALP activity in tibia growth, suggesting that zinc is essential for longitudinal bone growth. Phytase significantly promoted the increase of TRAP and ALP activities, suggesting that manganese increased growth plate activity, accelerated calcification, and remodeled the newly formed tissue into trabecular bone. Although not every enzymatic activity was affected by the treatments, the phytase use, along with trace minerals, improved the animal response to the rapid growth required nowadays and provided the nutrients for adequate bone metabolism.(AU)

Optimization of oxalic acid production by fungi for biotechnological solubilization of rock phosphate

This study describes a biotechnological strategy for producing and applying oxalic acid to solubilize phosphorus (P) from rock phosphate (RP). We evaluated six fungal species (Aspergillus niger FS1, Penicillium islandicum FS41, Pleurotus ostreatus PO1, Rhizoctonia solani Rhiz555, Sclerotium rolfsii Sr25, and Sclerotinia sclerotiorum Scl134) and three culture media (potato dextrose broth, Tsao and Strasser media) to maximize oxalic acid production. Among the fungal isolates tested and culture media, S. rolfsii Sr25 and Tsao medium showed efficient oxalic acid production. Tsao medium was optimized following a response surface methodology after initial screening of factors affecting RP solubilization. The optimized concentrations were 1 g L-1 NaNO3, 100 g L-1 glucose, 2 g L-1 KH2PO4, 4.5 g L-1 yeast extract, and 25 mg L-1 MgSO4·7H2O used for 20 days of incubation. Under these conditions, 71 mmol L-1 oxalic acid was obtained, representing a three-fold increase over production under non-optimized conditions (20 mmol L-1). Under optimized conditions, oxalic acid produced by S. rolfsii Sr25 reacted with low-solubility RP and solubilized 100 % of the P contained in ore. Thus, using S. rolfsii Sr25 to produce oxalic acid seems a promising biotechnological alternative for P solubilization from RP.(AU)

Dietary Inclusion of Pancreatin Enzyme on the Ileal and Fecal Digestibility of Nutrients in Layer-Type Cockerels

The current experiment aimed to evaluate the effects of Pancreatin supplementation at different levels on ileal and fecal digestibility in layer-type cockerels. A total of 480-day-old silver brown Hy-Line male chicks were randomly allocated into 5 treatments, 6 replicates (16 birds per pen) arranged in a completely randomized design. Pancreatin enzyme was supplemented on a basal corn-soybean meal-based diet at 0, 250, 500, 750, and 1000 mg/kg and was fed in two growth phases (starter and grower). The results indicated that at the end of the starter stage, except for 1000 mg/kg, dietary Pancreatin supplementation levels increased (p<0.05) the ileal crude protein (CP). Similarly, addition of Pancreatin increased (p< 0.05) apparent ileal amino acids (AA) digestibility (AIAAD) total means of AA (MTAA), means of indispensable AA (MIAA) and dispensable AA (MDAA) with the optimum performance on 250 mg/kg and 500 mg/kg. However, except for histidine and alanine which were negatively affected (p<0.05), and MIAA, MDAA, MTAA which were also positively affected, the addition level at 1000 mg/kg did not affect most of the AIAAD compared to the non-supplemented. Further, Pancreatin supplementation had no effect (p>0.05) on nitrogen digestibility (ND), nitrogen retention (NR), digestible energy (DE), apparent metabolizable energy (AME), dry matter digestibility (DMD), dry matter retention (DMR), and apparent metabolizable energy corrected for nitrogen (AME-n) on fed starter diet. On the other hand, at the end of the grower stage, dietary Pancreatin enzyme supplementation reduced (p<0.05) the ileal CP, MIAA, MDAA, MTAA, AIAAD, AME, AME-n, ND, NR, DE, DMD, and DMR in a dose-dependent manner. The rate of reduction was more marked on Pancreatin addition level 1000 mg/kg. In conclusion, Pancreatin supplementation at 250 mg/kg, 500 mg/kg, and 750 mg/kg improved AIAAD and ileal CP, especially at the young age. The rate of pancreatin enzyme effect was dependent on enzyme supplement level to the ileal CP and individual amino acid.(AU)

Cone snail species off the Brazilian coast and their venoms: a review and update

The genus Conus includes over 900 species of marine invertebrates known as cone snails, whose venoms are among the most powerful described so far. This potency is mainly due to the concerted action of hundreds of small bioactive peptides named conopeptides, which target different ion channels and membrane receptors and thus interfere with crucial physiological processes. By swiftly harpooning and injecting their prey and predators with such deadly cocktails, the slow-moving cone snails guarantee their survival in the harsh, competitive marine environment. Each cone snail species produces a unique venom, as the mature sequences of conopeptides from the venoms of different species share very little identity. This biochemical diversity, added to the numerous species and conopeptides contained in their venoms, results in an immense biotechnological and therapeutic potential, still largely unexplored. That is especially true regarding the bioprospection of the venoms of cone snail species found off the Brazilian coast - a region widely known for its biodiversity. Of the 31 species described in this region so far, only four - Conus cancellatus, Conus regius, Conus villepinii, and Conus ermineus - have had their venoms partially characterized, and, although many bioactive molecules have been identified, only a few have been actually isolated and studied. In addition to providing an overview on all the cone snail species found off the Brazilian coast to date, this review compiles the information on the structural and pharmacological features of conopeptides and other molecules identified in the venoms of the four aforementioned species, paving the way for future studies.(AU)

Evaluation of the acid-neutralizing and cytotoxicity properties of novel plant mucilage used as an alternative treatment for peptic ulcers and as antacids in Namibia

Hypersecretion of gastric acid damages the stomach lining, causing the formation of peptic ulcers. Mucilage from medicinal plants offers a relaxing and soothing effect to the endodermal lining of the gut and has antacid properties, which can protect the mucosal lining from gastric acidity. This is the first report aimed to evaluate the physicochemical characteristics, acid-neutralizing, and cytotoxicity properties of traditionally used aqueous mucilage from Asparagus exuvialis and Sesamum capense. The physicochemical properties were determined by biochemical methods. Acid neutralizing and buffering capacities were determined by titration methods. Normal mouse embryonic fibroblast cells were used for cytotoxicity evaluation by MTT assay. The physicochemical characterization confirmed the presence of carbohydrates, alkaloids, saponins, proteins, tannins, flavonoids, and glycosides. Sesamum capense mucilage exhibited the most potent artificial gastric juice neutralizing capacity pH of 4.62±0.01, 8.0±0.00 acid neutralization capacity per gram of acid, and 30 minutes duration of acid neutralization. The aqueous mucilage from S. capense did not cause any significant cytotoxicity to 3T3 cell lines showing an IC50 value of 91.5 ± 0.06 µg mL-1, confirming the safe nature of the mucilage. These findings revealed that S. capense has the potential to neutralize gastric acid responsible for ulceration and can be safely consumed.(AU)

Production of mycelial biomass, proteases and protease inhibitors by Ganoderma lucidum under different submerged fermentation conditions / Produção de biomassa micelial, proteases e inibidores de proteases por Ganoderma lucidum cultivado sob diferentes condições de fermentação submersa

Ganoderma lucidum is a medicinal mushroom widely recognized as a source of biomolecules with pharmacological properties, however, little is known about the factors that influence the synthesis of bioactive proteins by this fungus when cultivated under submerged fermentation. The objective of this work was to evaluate the production of mycelial biomass and intracellular proteases and protease inhibitors by G. lucidum cultivated under different submerged fermentation conditions. The cultivation was carried out in a medium composed of glucose (10 or 20 g.L-1), soy peptone (2.5 or 5 g.L-1) and yeast extract (5 g.L-1), with incubation under agitation (120 rpm) and non-agitation, totaling 8 experimental conditions. Biomass production was determined from the dry weight, while glucose consumption was estimated by quantification of reducing sugars. The proteins were extracted in NaCl (0.15 M), and the protein extracts were submitted to protein quantification by the Bradford method, total proteolytic activity using azocasein, caseinolytic and fibrinolytic activity in Petri dishes, activity of serine (trypsin and chymotrypsin) and cysteine (papain) protease inhibitors. Cultivation in agitated condition showed higher biomass production with a maximum value of 7 g.L-1, in addition to higher activities of trypsin, chymotrypsin and papain inhibitors, with 154 IU.mg-1, 153 IU.mg-1 e 343 IU.mg-1 of protein, respectively. The non-agitated condition showed a greater potential for obtaining proteins, total proteases, caseinolytic and fibrinolytic enzymes, with maximum values of 433 mg.g-1 of extract, 71 U.mL-1 of extract, 63.62 mm2 and 50.27 mm2, respectively. Thus, a medium composed of soy peptone, yest extract and glucose in a 1:2:4 proportion is recommended, under agitation to produce protease inhibitors, and the non-agitated condition when the target is, mainly caseinolytic and fibrinolytic enzymes.

Ganoderma lucidum é um cogumelo medicinal amplamente reconhecido como fonte de biomoléculas com propriedades farmacológicas, entretanto, pouco se conhece acerca dos fatores que influenciam a síntese de proteínas bioativas por esse fungo, quando cultivado sob fermentação submersa. O objetivo deste trabalho foi avaliar a produção de biomassa micelial e de proteases e inibidores de proteases intracelulares por G. lucidum cultivado em diferentes condições de fermentação submersa. O cultivo foi realizado em meio contendo glicose (10 ou 20 g.L-1), peptona de soja (2,5 ou 5 g.L-1) e extrato de levedura (5 g.L-1), com incubação sob agitação (120 rpm) ou não-agitado, totalizando 8 condições experimentais. A produção de biomassa foi determinada a partir do peso seco e o consumo de glicose a partir da quantificação de açúcares redutores. As proteínas foram extraídas em NaCl (0,15 M) e os extratos proteicos foram submetidos à quantificação de proteínas pelo método de Bradford, atividade proteolítica total usando azocaseína, atividade caseinolítica e fibrinolítica em placa de Petri, atividade de inibidores de serino-proteases (tripsina e quimotripsina) e cisteíno-protease (papaína). O cultivo em condição agitada apresentou maior produção de biomassa com valor máximo de 7g.L-1, além de maiores atividades de inibidores de tripsina, quimotripsina e papaína, com 154 UI.mg-1, 153 UI.mg-1 e 343 UI.mg-1 de proteína, respectivamente. A condição não-agitada demonstrou maior potencial para a obtenção de proteínas, proteases totais, enzimas caseinolíticas e fibrinolíticas, com valores máximos de 433 mg.g-1 de extrato, 71 U.mL-1 de extrato, 63,62 mm2 e 50,27 mm2, respectivamente. Assim, recomenda-se o meio composto de peptona de soja, extrato de levedura e glicose na proporção 1:2:4, em condição agitada para a produção de inibidores de proteases, e a condição não-agitada para a síntese de proteases, principalmente enzimas caseinolíticas e fibrinolíticas.

Evaluation of secretory activity in carp pancreatocytes (Cyprinus carpio L.) when using lactobacillus-based chelate and probiotic supplemental feed complexes

Abstract The experimental research was carried out on the juvenile carp (Cyprinus carpio L.). The impact from supplemental feeds consisting of variable concentrations of chelate compounds, biogenic trace elements and probiotic lactobacillus-based product Bacillus subtilis VKPM B-2335 was evaluated. Optical and qualitative parameters of the lactobacillus base were studied in order to identify the major group of substances potentially able to influence the end result. The purpose of this research was to identify changes in the structure of the zymogen granules and their dimensions at which supplemental feeds produce a stimulating effect on the synthesis of zymogens in exogenous cells of the secretory part of pancreas. At the outcome of the study, for the first time, it was possible to prove that the integrated action of chelates and lactobacillus-based probiotics complemented each other. Metal chelate compounds contributed to enlargement of the zymogen granules, if compared to the control values. The bacterial products accelerated production of the zymogen granules in acinar cells diffusely located in carp hepatopancreas.

Resumo A pesquisa experimental foi realizada em carpas juvenis (Cyprinus carpio L.). O impacto de suplementos alimentares consistindo em concentrações variáveis de compostos quelatos, oligoelementos biogênicos e produto probiótico baseado em lactobacilos Bacillus subtilis VKPM B-2335 foi avaliado. Parâmetros ópticos e qualitativos da base de lactobacilos foram estudados a fim de identificar o maior grupo de substâncias potencialmente capazes de influenciar o resultado final. O objetivo dessa pesquisa foi identificar mudanças na estrutura dos grânulos de zimogênio e suas dimensões nas quais alimentos suplementares produzem um efeito estimulante na síntese de zimogênios em células exógenas da parte secretora do pâncreas. No resultado do estudo, pela primeira vez, foi possível comprovar que a ação integrada dos quelatos e dos probióticos à base de lactobacilos se complementava. Compostos quelatos metálicos contribuíram para o aumento dos grânulos de zimogênio, se comparados aos valores de controle. Os produtos bacterianos aceleraram a produção dos grânulos de zimogênio nas células acinares localizadas difusamente no hepatopâncreas da carpa.

Productivity and nutrient export in a maize and forage grasses intercropping under semiarid conditions / Produtividade e exportação de nutrientes em um consórcio de milho e gramíneas forrageiras nas condições do semiárido

The aim was to evaluate the productive performance and nutrient export of maize intercropped with drought-tolerant forage grasses. The experimental design was a randomized blocks in a 2x2x2+1 factorial scheme (two forage grasses species ­ Massai and Buffel; two forage sowing methods - in the furrow and broadcast; and two forage sowing times - anticipated and simultaneous; and monoculture maize as an additional control), with three replicates. The maize+forage intercropping promoted greater competition for resources, especially water, limiting N uptake, chlorophyll synthesis, and biomass production by maize under semiarid conditions. Early sowing gave forage plants a competitive advantage, favoring forage establishment before or immediately after the sowing of maize. Thus, the simultaneous sowing of forage grasses in a semiarid environment is a more appropriate option considering the importance of high levels of chlorophyll to ensure high photosynthetic activity in maize plants and greater capacity of biomass synthesis. Massai intercropped with maize exhibits a greaterpotential for biomass production than Buffel under semiarid conditions. Maize+Buffel result in highest macronutrient export by maize, while maize+Massai result in highest macronutrient exports by total forage biomass under a semiarid environment. The choice of the forage species and its sowing time in relation to maize are the main determinants of successful intercropping systems under semiarid conditions.(AU)

O objetivo foi avaliar o desempenho produtivo e a exportação de nutrientes do consórcio de milho com gramíneas forrageiras tolerantes ao estresse hídrico. O experimento foi delineado em blocos casualizados em esquema fatorial 2x2x2+1 (duas espécies de gramíneas forrageiras ­ Massai e Buffel; dois métodos de semeadura ­ no sulco e a lanço; e duas épocas de semeadura ­ antecipada e simultânea; e monocultivo de milho como um controle adicional), com três repetições. O consórcio milho+forragem promoveu maior competição por recursos, principalmente água, limitando a absorção de N, síntese de clorofila e produção de biomassa pelo milho para condições semiáridas. A semeadura precoce deu vantagem competitiva às plantas forrageiras, favorecendo seu estabelecimento antes ou imediatamente após a semeadura do milho. Assim, a semeadura simultânea de gramíneas forrageiras em ambiente semiárido é uma opção mais adequada, considerando a importância de garantir altos teores de clorofila e, consequentemente, alta atividade fotossintética nas plantas de milho para garantir a capacidade de síntese de biomassa.Massai consorciado com milho apresenta maior potencial para produção de biomassa do que Buffel em condições semiáridas.Milho+Buffel resulta em maior exportação de macronutrientes pelo milho, enquanto milho+Massai resulta em maior exportação de macronutrientes pela biomassa forrageira total em ambiente semiárido.A escolha da espécie forrageira e sua época de semeadura em relação ao milho são os principais determinantes do sucesso do consórcio no semiárido.(AU)

Novel Pathogenic Mutation Mapping of ASPM Gene in Consanguineous Pakistani Families with Primary Microcephaly

Abstract Autosomal recessive primary microcephaly (MCPH) is a neurodevelopmental disorder characterized by a congenitally reduced head circumference (-3 to -5 SD) and non-progressive intellectual disability. The objective of the study was to evaluate pathogenic mutations in the ASPM gene to understand etiology and molecular mechanism of primary microcephaly. Blood samples were collected from various families across different remote areas of Pakistan from February 2017 to May 2019 who were identified to be affected with primary microcephaly. DNA extraction was performed using the salting-out method; the quality and quantity of DNA were evaluated using spectrophotometry and 1% agarose gel electrophoresis, respectively in University of the Punjab. Mutation analysis was performed by whole exome sequencing from the Cologne Center for Genomics, University of Cologne. Sanger sequencing was done in University of the Punjab to confirm the pathogenic nature of mutation. A novel 4-bp deletion mutation c.3877_3880delGAGA was detected in exon 17 of the ASPM gene in two primary microcephaly affected families (A and B), which resulted in a frame shift mutation in the gene followed by truncated protein synthesis (p.Glu1293Lysfs*10), as well as the loss of the calmodulin-binding IQ domain and the Armadillo-like domain in the ASPM protein. Using the in-silico tools Mutation Taster, PROVEAN, and PolyPhen, the pathogenic effect of this novel mutation was tested; it was predicted to be disease causing, with high pathogenicity scores. One previously reported mutation in exon 24 (c.9730C>T) of the ASPM gene resulting in protein truncation (p.Arg3244*) was also observed in family C. Mutations in the ASPM gene are the most common cause of MCPH in most cases. Therefore, enrolling additional affected families from remote areas of Pakistan would help in identifying or mapping novel mutations in the ASPM gene of primary microcephaly.

Resumo Microcefalia primária autossômica recessiva (MCPH) é um distúrbio do neurodesenvolvimento caracterizado por uma redução congênita do perímetro cefálico (-3 a -5 DP) e deficiência intelectual não progressiva. O objetivo do estudo foi avaliar mutações patogênicas no gene ASPM a fim de compreender a etiologia e o mecanismo molecular da microcefalia primária. Amostras de sangue foram coletadas de várias famílias em diferentes áreas remotas do Paquistão de fevereiro de 2017 a maio de 2019, que foram identificadas como afetadas com microcefalia primária. A extração do DNA foi realizada pelo método salting-out; a qualidade e a quantidade de DNA foram avaliadas por espectrofotometria e eletroforese em gel de agarose a 1%, respectivamente, na Universidade de Punjab. A análise de mutação foi realizada por sequenciamento completo do exoma do Cologne Center for Genomics, University of Cologne. O sequenciamento de Sanger foi feito na Universidade do Punjab para confirmar a natureza patogênica da mutação. Uma nova mutação de deleção de 4 bp c.3877_3880delGAGA foi detectada no exon 17 do gene ASPM em duas famílias afetadas por microcefalia primária (A e B), que resultou em uma mutação de frame shift no gene seguida por síntese de proteína truncada (pGlu1293Lysfs * 10), bem como a perda do domínio IQ de ligação à calmodulina e o domínio do tipo Armadillo na proteína ASPM. Usando as ferramentas in-silico Mutation Taster, PROVEAN e PolyPhen, o efeito patogênico dessa nova mutação foi testado; foi previsto ser causador de doenças, com altos escores de patogenicidade. Uma mutação relatada anteriormente no exon 24 (c.9730C > T) do gene ASPM, resultando em truncamento de proteína (p.Arg3244 *) também foi observada na família C. Mutações no gene ASPM são a causa mais comum de MCPH na maioria dos casos . Portanto, a inscrição de famílias afetadas adicionais de áreas remotas do Paquistão ajudaria a identificar ou mapear novas mutações no gene ASPM da microcefalia primária.

Detection of microorganisms with antibacterial activities from different industrial wastes and GC-MS analysis of crude microbial extract / Detecção de microrganismos com atividades antibacterianas de diferentes resíduos industriais e análise por GC-MS do extrato microbiano bruto

Many soil microorganisms' i.e., bacteria and fungi produce secondary metabolites called antibiotics. These are used for the treatment of some of the bacterial, fungal and protozoal diseases of humans. There is a need for isolation of a broad spectrum of antibiotics from microorganisms due to the emergence of antibiotic resistance. In the present study two antibiotic producing bacteria Klebsiella pneumoniae and Bacillus cereus were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry of Hattar, Haripur Pakistan. Total 10 waste samples were collected from different industries (Marble, Ghee, Soap, Mineral, Steel, Poultry Feed, Pharmaceutical, Qarshi, Cosmetic and Glass). Thirty-three bacterial strains were isolated from industrial wastes of these ten different industries. Fourteen out of thirty-three bacterial strains exhibited antimicrobial activities against at least one of the test microbes considered in this study including Escherchia coli, Staphylococcus aureus and Salmonella typhi. The bacteria were isolated by standard serial dilution spread plate technique. Morphological characterization of the isolates was done by Gram staining. Nine bacterial isolates out of fourteen were initially identified as B. cereus and five as K. pneumoniae through biochemical characterization. The antibacterial activities were tested by well diffusion method. Maximum number of antibiotic producing bacteria were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry based on the results of primary screening, the most potential isolates S9, S19, S20, S22 and S23 were selected for secondary screening. The maximum activity against E. coli and S. aureus was recorded by bacterial isolate S19 i.e zones of inhibition of 6.5mm and 9mm while S20 showed 7.5mm and 6mm zones respectively. Molecular identification was carried out on the basis of 16S rRNA sequence [...].

Muitos microrganismos do solo, ou seja, bactérias e fungos produzem metabólitos secundários chamados antibióticos. Eles são usados para tratamento de algumas doenças bacterianas, fúngicas e protozoárias em humanos. Há necessidade de isolamento de um amplo espectro de antibióticos de microrganismos devido ao surgimento de resistência aos antibióticos. No presente estudo, duas bactérias produtoras de antibióticos, Klebsiella pneumoniae e Bacillus cereus, foram isoladas da indústria farmacêutica e de ração avícola de Hattar, Haripur, Paquistão. Um total de 10 amostras de resíduos foi coletado de diferentes indústrias (mármore, ghee, sabão, mineral, aço, ração para aves, farmacêutica, Qarshi, cosmética e vidro). Trinta e três cepas bacterianas foram isoladas de resíduos industriais dessas dez diferentes indústrias. Quatorze das 33 cepas bacterianas exibiram atividades antimicrobianas contra pelo menos um dos micróbios de teste considerados neste estudo, incluindo Escherchia coli, Staphylococcus aureus e Salmonella typhi. As bactérias foram isoladas pela técnica de placa de diluição em série padrão. A caracterização morfológica dos isolados foi feita por coloração de gram. Nove isolados bacterianos de 14 foram inicialmente identificados como B. cereus e cinco como K. pneumoniae por meio de caracterização bioquímica. As atividades antibacterianas foram testadas pelo método de difusão em poço. O número máximo de bactérias produtoras de antibióticos foi isolado da indústria farmacêutica e de ração avícola com base nos resultados da triagem primária, os isolados mais potenciais S9, S19, S20, S22 e S23 foram selecionados para a triagem secundária. A atividade máxima contra E. coli e S. aureus foi registrada pelo isolado bacteriano S19, ou seja, zonas de inibição de 6,5 mm e 9 mm, enquanto S20 mostrou zonas de 7,5 mm e 6 mm, respectivamente. A identificação molecular foi realizada com base na análise da sequência 16S [...].

Detection of microorganisms with antibacterial activities from different industrial wastes and GC-MS analysis of crude microbial extract / Detecção de microrganismos com atividades antibacterianas de diferentes resíduos industriais e análise por GC-MS do extrato microbiano bruto

Many soil microorganisms' i.e., bacteria and fungi produce secondary metabolites called antibiotics. These are used for the treatment of some of the bacterial, fungal and protozoal diseases of humans. There is a need for isolation of a broad spectrum of antibiotics from microorganisms due to the emergence of antibiotic resistance. In the present study two antibiotic producing bacteria Klebsiella pneumoniae and Bacillus cereus were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry of Hattar, Haripur Pakistan. Total 10 waste samples were collected from different industries (Marble, Ghee, Soap, Mineral, Steel, Poultry Feed, Pharmaceutical, Qarshi, Cosmetic and Glass). Thirty-three bacterial strains were isolated from industrial wastes of these ten different industries. Fourteen out of thirty-three bacterial strains exhibited antimicrobial activities against at least one of the test microbes considered in this study including Escherchia coli, Staphylococcus aureus and Salmonella typhi. The bacteria were isolated by standard serial dilution spread plate technique. Morphological characterization of the isolates was done by Gram staining. Nine bacterial isolates out of fourteen were initially identified as B. cereus and five as K. pneumoniae through biochemical characterization. The antibacterial activities were tested by well diffusion method. Maximum number of antibiotic producing bacteria were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry based on the results of primary screening, the most potential isolates S9, S19, S20, S22 and S23 were selected for secondary screening. The maximum activity against E. coli and S. aureus was recorded by bacterial isolate S19 i.e zones of inhibition of 6.5mm and 9mm while S20 showed 7.5mm and 6mm zones respectively. Molecular identification was carried out on the basis of 16S rRNA sequence [...].(AU)

Muitos microrganismos do solo, ou seja, bactérias e fungos produzem metabólitos secundários chamados antibióticos. Eles são usados para tratamento de algumas doenças bacterianas, fúngicas e protozoárias em humanos. Há necessidade de isolamento de um amplo espectro de antibióticos de microrganismos devido ao surgimento de resistência aos antibióticos. No presente estudo, duas bactérias produtoras de antibióticos, Klebsiella pneumoniae e Bacillus cereus, foram isoladas da indústria farmacêutica e de ração avícola de Hattar, Haripur, Paquistão. Um total de 10 amostras de resíduos foi coletado de diferentes indústrias (mármore, ghee, sabão, mineral, aço, ração para aves, farmacêutica, Qarshi, cosmética e vidro). Trinta e três cepas bacterianas foram isoladas de resíduos industriais dessas dez diferentes indústrias. Quatorze das 33 cepas bacterianas exibiram atividades antimicrobianas contra pelo menos um dos micróbios de teste considerados neste estudo, incluindo Escherchia coli, Staphylococcus aureus e Salmonella typhi. As bactérias foram isoladas pela técnica de placa de diluição em série padrão. A caracterização morfológica dos isolados foi feita por coloração de gram. Nove isolados bacterianos de 14 foram inicialmente identificados como B. cereus e cinco como K. pneumoniae por meio de caracterização bioquímica. As atividades antibacterianas foram testadas pelo método de difusão em poço. O número máximo de bactérias produtoras de antibióticos foi isolado da indústria farmacêutica e de ração avícola com base nos resultados da triagem primária, os isolados mais potenciais S9, S19, S20, S22 e S23 foram selecionados para a triagem secundária. A atividade máxima contra E. coli e S. aureus foi registrada pelo isolado bacteriano S19, ou seja, zonas de inibição de 6,5 mm e 9 mm, enquanto S20 mostrou zonas de 7,5 mm e 6 mm, respectivamente. A identificação molecular foi realizada com base na análise da sequência 16S [...].(AU)

Effect of zeolite-chlorella top dressing on scar metabolism and conversion of dairy cows' feed / Efeito de aperitivos de zeólita-chlorella no metabolismo cicatricial e na conversão de ração para vacas leiteiras

In scientific and economic experience, the effect of zeolite-chlorella top dressing (CCP) from 28-29% zeolite, 1.5-2% Chlorella vulgaris powder and 75-76% cake on the productive effect of feed and digestion metabolism of dairy cows has been studied. Tetra-edric frame-hollow zeolite crystals have selectively adsorbing and ion-filtering properties, and chlorella enriches with amino acids and vitamins. The introduction of CCP into the diet of cows of the experimental group increased the mineral-vitamin balance and positively affected the metabolism of cicatricial digestion. The pH shift from 6.14 to 6.17 activated the ecosystem of the rumen microflora, increased the synthesis of LVH 0.79 mmol/100ml, due to an increase in the volume of acetates from 54.1±3.0 to 57.2±2.2 mmol/100ml, increased the number of infusoria by 41.1 thousand/ml more than the control group. An increase in the amylolytic activity of the rumen chyme by 2.8 mg/starch, and cellulolytic activity by 2.8% increased scar digestion. This increased the consumption of the dry matter of the diet by cows of the experimental group by 0.48 ± 0.06 kg/head. /day. and daily milk yields by 1.06 ± 0.03 kg against the control. An increase in protein and fat in milk with a decrease in somatic cells, and in the blood of erythrocytes and hemoglobin increased biosynthesis, which increased the conversion rate of feed from 0.68 to 0.72, and protein from 17.0% to 18.9%.

A experiência científica e econômica estudou o efeito produtivo da alimentação e o metabolismo da digestão de vacas leiteiras, de Zeolite-Chlorella (CHP), de 28-29% de zeólita, 1,5-2% de pó de Chlorella vulgaris e 75-76% de bagaço. Os cristais ocos de estrutura tetraedrítica do zeólito possuem propriedades seletivas de adsorção e ionofiltração, e a Chlorella enriquece com aminoácidos e vitaminas. A introdução na dieta de vacas de um grupo experiente de CHP aumentou o equilíbrio mineral-vitamínico e afetou significativamente o metabolismo da digestão cicatricial. A mudança de pH de 6,14 para 6,17 ativou o ecossistema da microflora cicatricial, aumentou a síntese de LLA 0,79 mmol/ 100ml, devido à uveistivanie do volume de acetatos de 54,1±3,0 para 57,2±2,2 mmol/100ml, aumentou o número de infusórios em 41,1 mil/ml mais do que o grupo controle. O aumento da atividade amilolítica do quimo da cicatriz em 2,8 mg / amido e da atividade celulosolítica em 2,8% aumentou a digestão cicatricial. Isso aumentou a ingestão de matéria seca das vacas do grupo experimental em 0,48±0,06 kg/gol./dia e a produção diária de leite em 1,06±0,03 kg contra o controle. O aumento da proteína e da gordura no leite, com a diminuição das células somáticas, e no sangue de glóbulos vermelhos e hemoglobina aumentou a biossíntese, o que aumentou a taxa de conversão alimentar de 0,68 para 0,72 e proteína de 17,0% para 18,9%.

Pharmacological studies of the genus rice (Oryza L): a literature review / Estudos farmacológicos do gênero arroz (Oryza L): uma revisão de literatura

Rice (Oryza L.) is an essential food for more than 50 percent of the world's population and is the world's second-largest grain crop. Pigmented rice comes in various colors, such as black, red, brown, and green. Anthocyanins, like cyanidin-3-O-glucoside and peonidin-3-O-glucoside, are the primary color pigments in colored rice, whereas proanthocyanidins and flavan-3-ol oligosaccharides, with catechins as the central synthesis unit, are found in brown rice. This review article's aim is to give information and a summary of rice activities, research methods, also mechanisms of action (Oryza L.). Intake of pigmented rice was already associated with a number of health benefits, including antioxidant activity, anticancer, antitumor, antidiabetic activity, and a reduced risk of cardiovascular disease. Rice contains several bioactive compounds, such as γ-oryzanol, phenolic acid, anthocyanins, proanthocyanidins, flavonoids, carotenoids, and phytosterols, which have been widely studied and shown to have several pharmacological activities. The use of current herbal compounds is rapidly increasing, including the practice of pharmacological disease prevention and treatment. Herbal remedies have entered the international market as a result of research into plant biopharmaceuticals and nutraceuticals. Through a variety of pharmacological activities, it is clear that Oryza L. is a popular herb. As a result, additional research on Oryza L. can be conducted to investigate more recent and comprehensive pharmacological effectiveness, to provide information and an overview of Rice (Oryza L.) activities, research methods, and mechanisms of action. Several natural substances are characterized by low water solubility, low stability, and sensitivity to light and oxygen, and the potential for poor absorption of the active substances requires modification of the formulation. To improve the effectiveness of pharmacologically active substances originating from natural ingredients, drug delivery systems that use lipid-based formulations can be considered innovations.

O arroz (Oryza L.) é um alimento essencial para mais de 50% da população mundial e é a segunda maior safra de grãos do mundo. O arroz pigmentado possui cores variadas, como preto, vermelho, marrom e verde. As antocianinas, como a cianidina-3-O-glicosídeo e a peonidina-3-O-glicosídeo, são os pigmentos de cor primária no arroz colorido, enquanto as proantocianidinas e os oligossacarídeos flavan-3-ol, com catequinas como unidade central de síntese, são encontrados no arroz marrom. O objetivo deste estudo de revisão é fornecer informações e um resumo das atividades do arroz, métodos de pesquisa e mecanismos de ação. A ingestão de arroz pigmentado já foi associada a vários benefícios à saúde, incluindo atividade antioxidante, anticancerígena, antitumoral, antidiabética e redução do risco de doenças cardiovasculares. O arroz contém vários compostos bioativos, como γ-orizanol, ácido fenólico, antocianinas, proantocianidinas, flavonoides, carotenóides e fitoesteróis, que têm sido amplamente estudados e têm mostrado diversas atividades farmacológicas. O uso de compostos fitoterápicos atuais está aumentando rapidamente, incluindo a prática de prevenção e tratamento farmacológico de doenças. Os remédios fitoterápicos entraram no mercado internacional como resultado da pesquisa de biofármacos e nutracêuticos vegetais. Através de uma variedade de atividades farmacológicas, fica claro que Oryza L. é uma erva popular. Como resultado, pesquisas adicionais sobre Oryza L. podem ser conduzidas para investigar a eficácia farmacológica mais recente e abrangente, fornecer informações e uma visão geral das atividades, métodos de pesquisa e mecanismos de ação do arroz (Oryza L.). Várias substâncias naturais são caracterizadas por baixa solubilidade em água, baixa estabilidade e sensibilidade à luz e ao oxigênio, e o potencial de má absorção das substâncias ativas requer modificação da formulação. Nesse sentido, alguns aspectos como a melhorara na eficácia de substâncias farmacologicamente ativas provenientes de ingredientes naturais e nos sistemas de liberação de fármacos que utilizam formulações à base de lipídios podem ser considerados como inovações.

Significant production of vanillin and in vitro amplification of ech gene in local bacterial isolates

Abstract Vanillin is the major component which is responsible for flavor and aroma of vanilla extract and is produced by 3 ways: natural extraction from vanilla plant, chemical synthesis and from microbial transformation. Current research was aimed to study bacterial production of vanillin from native natural sources including sewage and soil from industrial areas. The main objective was vanillin bio-production by isolating bacteria from these native sources. Also to adapt methodologies to improve vanillin production by optimized fermentation media and growth conditions. 47 soil and 13 sewage samples were collected from different industrial regions of Lahore, Gujranwala, Faisalabad and Kasur. 67.7% bacterial isolates produced vanillin and 32.3% were non-producers. From these 279 producers, 4 bacterial isolates selected as significant producers were; A3, A4, A7 and A10. These isolates were identified by ribotyping as A3 Pseudomonas fluorescence (KF408302), A4 Enterococcus faecium (KT356807), A7 Alcaligenes faecalis (MW422815) and A10 Bacillus subtilis (KT962919). Vanillin producers were further tested for improved production of vanillin and were grown in different fermentation media under optimized growth conditions for enhanced production of vanillin. The fermentation media (FM) were; clove oil based, rice bran waste (residues oil) based, wheat bran based and modified isoeugenol based. In FM5, FM21, FM22, FM23, FM24, FM30, FM31, FM32, FM34, FM35, FM36, and FM37, the selected 4 bacterial strains produced significant amounts of vanillin. A10 B. subtilis produced maximum amount of vanillin. This strain produced 17.3 g/L vanillin in FM36. Cost of this fermentation medium 36 was 131.5 rupees/L. This fermentation medium was modified isoeugenol based medium with 1% of isoeugenol and 2.5 g/L soybean meal. ech gene was amplified in A3 P. fluorescence using ech specific primers. As vanillin use as flavor has increased tremendously, the bioproduction of vanillin must be focused.

Resumo A vanilina é o principal componente responsável pelo sabor e aroma do extrato de baunilha e é produzida de três formas: extração natural da planta da baunilha, síntese química e transformação microbiana. A pesquisa atual teve como objetivo estudar a produção bacteriana de vanilina a partir de fontes naturais nativas, incluindo esgoto e solo de áreas industriais. O objetivo principal era a bioprodução de vanilina por meio do isolamento de bactérias dessas fontes nativas. Também para adaptar metodologias para melhorar a produção de vanilina por meio de fermentação otimizada e condições de crescimento. Foram coletadas 47 amostras de solo e 13 de esgoto de diferentes regiões industriais de Lahore, Gujranwala, Faisalabad e Kasur; 67,7% dos isolados bacterianos produziram vanilina e 32,3% eram não produtores. Desses 279 produtores, 4 isolados bacterianos selecionados como produtores significativos foram: A3, A4, A7 e A10. Esses isolados foram identificados por ribotipagem como fluorescência A3 Pseudomonas (KF408302), A4 Enterococcus faecium (KT356807), A7 Alcaligenes faecalis (MW422815) e A10 Bacillus subtilis (KT962919). Os produtores de vanilina foram posteriormente testados para produção aprimorada de vanilina e foram cultivados em diferentes meios de fermentação sob condições de crescimento otimizadas para produção aprimorada de vanilina. Os meios de fermentação (FM) foram: à base de óleo de cravo, à base de resíduos de farelo de arroz (resíduos de óleo), à base de farelo de trigo e à base de isoeugenol modificado. Em FM5, FM21, FM22, FM23, FM24, FM30, FM31, FM32, FM34, FM35, FM36 e FM37, as 4 cepas bacterianas selecionadas produziram quantidades significativas de vanilina. A10 B. subtilis produziu quantidade máxima de vanilina. Essa cepa produziu 17,3 g / L de vanilina em FM36. O custo desse meio de fermentação 36 foi de 131,5 rúpias / L. Esse meio de fermentação foi um meio à base de isoeugenol modificado com 1% de isoeugenol e 2,5 g / L de farelo de soja. O gene ech foi amplificado em A3 P. fluorescence usando primers específicos para ech. Como o uso da vanilina como sabor aumentou tremendamente, a bioprodução da vanilina deve ser focada.

Evaluation of secretory activity in carp pancreatocytes (Cyprinus carpio L. ) when using lactobacillus-based chelate and probiotic supplemental feed complexes / Avaliação da atividade secretora em pancreatócitos de carpa (Cyprinus carpio L. ) ao usar quelato à base de lactobacilos e complexos suplementares de alimentação probiótica

The experimental research was carried out on the juvenile carp (Cyprinus carpio L.). The impact from supplemental feeds consisting of variable concentrations of chelate compounds, biogenic trace elements and probiotic lactobacillus-based product Bacillus subtilis VKPM B-2335 was evaluated. Optical and qualitative parameters of the lactobacillus base were studied in order to identify the major group of substances potentially able to influence the end result. The purpose of this research was to identify changes in the structure of the zymogen granules and their dimensions at which supplemental feeds produce a stimulating effect on the synthesis of zymogens in exogenous cells of the secretory part of pancreas. At the outcome of the study, for the first time, it was possible to prove that the integrated action of chelates and lactobacillus-based probiotics complemented each other. Metal chelate compounds contributed to enlargement of the zymogen granules, if compared to the control values. The bacterial products accelerated production of the zymogen granules in acinar cells diffusely located in carp hepatopancreas.

A pesquisa experimental foi realizada em carpas juvenis (Cyprinus carpio L.). O impacto de suplementos alimentares consistindo em concentrações variáveis de compostos quelatos, oligoelementos biogênicos e produto probiótico baseado em lactobacilos Bacillus subtilis VKPM B-2335 foi avaliado. Parâmetros ópticos e qualitativos da base de lactobacilos foram estudados a fim de identificar o maior grupo de substâncias potencialmente capazes de influenciar o resultado final. O objetivo dessa pesquisa foi identificar mudanças na estrutura dos grânulos de zimogênio e suas dimensões nas quais alimentos suplementares produzem um efeito estimulante na síntese de zimogênios em células exógenas da parte secretora do pâncreas. No resultado do estudo, pela primeira vez, foi possível comprovar que a ação integrada dos quelatos e dos probióticos à base de lactobacilos se complementava. Compostos quelatos metálicos contribuíram para o aumento dos grânulos de zimogênio, se comparados aos valores de controle. Os produtos bacterianos aceleraram a produção dos grânulos de zimogênio nas células acinares localizadas difusamente no hepatopâncreas da carpa.

Novel Pathogenic Mutation Mapping of ASPM Gene in Consanguineous Pakistani Families with Primary Microcephaly / Novo mapeamento de mutações patogênicas do gene ASPM em famílias consanguíneas com microcefalia primária do Paquistão

Abstract Autosomal recessive primary microcephaly (MCPH) is a neurodevelopmental disorder characterized by a congenitally reduced head circumference (-3 to -5 SD) and non-progressive intellectual disability. The objective of the study was to evaluate pathogenic mutations in the ASPM gene to understand etiology and molecular mechanism of primary microcephaly. Blood samples were collected from various families across different remote areas of Pakistan from February 2017 to May 2019 who were identified to be affected with primary microcephaly. DNA extraction was performed using the salting-out method; the quality and quantity of DNA were evaluated using spectrophotometry and 1% agarose gel electrophoresis, respectively in University of the Punjab. Mutation analysis was performed by whole exome sequencing from the Cologne Center for Genomics, University of Cologne. Sanger sequencing was done in University of the Punjab to confirm the pathogenic nature of mutation. A novel 4-bp deletion mutation c.3877_3880delGAGA was detected in exon 17 of the ASPM gene in two primary microcephaly affected families (A and B), which resulted in a frame shift mutation in the gene followed by truncated protein synthesis (p.Glu1293Lysfs*10), as well as the loss of the calmodulin-binding IQ domain and the Armadillo-like domain in the ASPM protein. Using the in-silico tools Mutation Taster, PROVEAN, and PolyPhen, the pathogenic effect of this novel mutation was tested; it was predicted to be "disease causing," with high pathogenicity scores. One previously reported mutation in exon 24 (c.9730C>T) of the ASPM gene resulting in protein truncation (p.Arg3244*) was also observed in family C. Mutations in the ASPM gene are the most common cause of MCPH in most cases. Therefore, enrolling additional affected families from remote areas of Pakistan would help in identifying or mapping novel mutations in the ASPM gene of primary microcephaly.

Resumo Microcefalia primária autossômica recessiva (MCPH) é um distúrbio do neurodesenvolvimento caracterizado por uma redução congênita do perímetro cefálico (-3 a -5 DP) e deficiência intelectual não progressiva. O objetivo do estudo foi avaliar mutações patogênicas no gene ASPM a fim de compreender a etiologia e o mecanismo molecular da microcefalia primária. Amostras de sangue foram coletadas de várias famílias em diferentes áreas remotas do Paquistão de fevereiro de 2017 a maio de 2019, que foram identificadas como afetadas com microcefalia primária. A extração do DNA foi realizada pelo método salting-out; a qualidade e a quantidade de DNA foram avaliadas por espectrofotometria e eletroforese em gel de agarose a 1%, respectivamente, na Universidade de Punjab. A análise de mutação foi realizada por sequenciamento completo do exoma do Cologne Center for Genomics, University of Cologne. O sequenciamento de Sanger foi feito na Universidade do Punjab para confirmar a natureza patogênica da mutação. Uma nova mutação de deleção de 4 bp c.3877_3880delGAGA foi detectada no exon 17 do gene ASPM em duas famílias afetadas por microcefalia primária (A e B), que resultou em uma mutação de frame shift no gene seguida por síntese de proteína truncada (pGlu1293Lysfs * 10), bem como a perda do domínio IQ de ligação à calmodulina e o domínio do tipo Armadillo na proteína ASPM. Usando as ferramentas in-silico Mutation Taster, PROVEAN e PolyPhen, o efeito patogênico dessa nova mutação foi testado; foi previsto ser "causador de doenças", com altos escores de patogenicidade. Uma mutação relatada anteriormente no exon 24 (c.9730C > T) do gene ASPM, resultando em truncamento de proteína (p.Arg3244 *) também foi observada na família C. Mutações no gene ASPM são a causa mais comum de MCPH na maioria dos casos . Portanto, a inscrição de famílias afetadas adicionais de áreas remotas do Paquistão ajudaria a identificar ou mapear novas mutações no gene ASPM da microcefalia primária.

Evaluation of secretory activity in carp pancreatocytes (Cyprinus carpio L. ) when using lactobacillus-based chelate and probiotic supplemental feed complexes / Avaliação da atividade secretora em pancreatócitos de carpa (Cyprinus carpio L. ) ao usar quelato à base de lactobacilos e complexos suplementares de alimentação probiótica

The experimental research was carried out on the juvenile carp (Cyprinus carpio L.). The impact from supplemental feeds consisting of variable concentrations of chelate compounds, biogenic trace elements and probiotic lactobacillus-based product Bacillus subtilis VKPM B-2335 was evaluated. Optical and qualitative parameters of the lactobacillus base were studied in order to identify the major group of substances potentially able to influence the end result. The purpose of this research was to identify changes in the structure of the zymogen granules and their dimensions at which supplemental feeds produce a stimulating effect on the synthesis of zymogens in exogenous cells of the secretory part of pancreas. At the outcome of the study, for the first time, it was possible to prove that the integrated action of chelates and lactobacillus-based probiotics complemented each other. Metal chelate compounds contributed to enlargement of the zymogen granules, if compared to the control values. The bacterial products accelerated production of the zymogen granules in acinar cells diffusely located in carp hepatopancreas.(AU)

A pesquisa experimental foi realizada em carpas juvenis (Cyprinus carpio L.). O impacto de suplementos alimentares consistindo em concentrações variáveis de compostos quelatos, oligoelementos biogênicos e produto probiótico baseado em lactobacilos Bacillus subtilis VKPM B-2335 foi avaliado. Parâmetros ópticos e qualitativos da base de lactobacilos foram estudados a fim de identificar o maior grupo de substâncias potencialmente capazes de influenciar o resultado final. O objetivo dessa pesquisa foi identificar mudanças na estrutura dos grânulos de zimogênio e suas dimensões nas quais alimentos suplementares produzem um efeito estimulante na síntese de zimogênios em células exógenas da parte secretora do pâncreas. No resultado do estudo, pela primeira vez, foi possível comprovar que a ação integrada dos quelatos e dos probióticos à base de lactobacilos se complementava. Compostos quelatos metálicos contribuíram para o aumento dos grânulos de zimogênio, se comparados aos valores de controle. Os produtos bacterianos aceleraram a produção dos grânulos de zimogênio nas células acinares localizadas difusamente no hepatopâncreas da carpa.(AU)

Physiology and production components of cotton plants under salt stress and salicylic acid application / Fisiologia e componentes de produção do algodoeiro sob estresse salino e aplicação de ácido salicílico

The use of saline waters in irrigated agriculture has become a reality in several regions of the world. However, this practice may cause limitations to growth and development, depending on the tolerance level of the crop. Applying strategies that minimize salt stress in crops is therefore essential, and, in this respect, salicylic acid can act as an antioxidant and enhance the plant's tolerance to salt stress. The objective of this study was to examine the effects of foliar application of salicylic acid on the physiology and production components of naturally colored cotton cv. BRS Jade grown under salt stress. The plants were cultivated on lysimeters in outdoor conditions at the Agro-Food Science and Technology Center, Federal University of Campina Grande, located in Pombal - PB, Brazil. The experiment was laid out in a randomized block design with a 5 × 5 factorial arrangement consisting of five irrigation-water electrical conductivity levels (ECw: 0.3, 1.8, 3.3, 4.8, and 6.3 dS m-1) and five concentrations of salicylic acid (SA: 0, 1.5, 3.0, 4.5, and 6.0 mM), with three replicates. Irrigation with water with salinity levels from 0.3 dS m-1 reduced gas exchange, the synthesis of photosynthetic pigments, and the number of bolls in cotton cv. BRS Jade. Salinity levels from 0.3 dS m-1induced stomatal closure and reduced transpiration, CO2 assimilation rate, the levels of photosynthetic pigments, and production components of cotton cv. BRS Jade. The salicylic acid concentrations of 2.6 and 2.7 mM increased CO2 assimilation rate and stomatal conductance, respectively, in the cotton plants. Foliar application of salicylic acid did not mitigate the effects of salt stress on gas exchange, the synthesis of photosynthetic pigments, or production components of cotton.

O uso de águas salinas na agricultura irrigada vem se tornando uma realidade em diversas regiões do mundo, entretanto, dependendo do nível de tolerância da cultura ocorrem limitações no crescimento e desenvolvimento. Dessa forma, o uso das estratégias que minimizem o estresse salino nas culturas é fundamental, nesta perspectiva, o ácido salicílico pode atuar como antioxidante e contribuir na tolerância das plantas ao estresse salino. Neste sentido, objetivou-se avaliar os efeitos da aplicação foliar de ácido salicílico na fisiologia e nos componentes de produção do algodoeiro naturalmente colorido cv. BRS Jade cultivado sob estresse salino. As plantas foram conduzidas em lisímetros sob condições de céu aberto, no Centro de Ciências e Tecnologia Agroalimentar pertencente à Universidade Federal de Campina Grande, Pombal-PB. O delineamento utilizado foi em blocos casualizados, em esquema fatorial 5 × 5, sendo cinco níveis de condutividade elétrica da água de irrigação - CEa (0,3; 1,8; 3,3; 4,8 e 6,3 dS m-1) e cinco concentrações de ácido salicílico - AS (0; 1,5; 3,0, 4,5 e 6,0 mM) com três repetições. A irrigação com água a partir de 0,3 dS m-1 reduziu as trocas gasosas, a síntese de pigmentos fotossintéticos e o número de capulhos do algodoeiro cv. BRS Jade. A irrigação com água a partir de 0,3 dS m-1 induziu o fechamento estomático e diminuiu a transpiração, a taxa de assimilação de CO2, os teores de pigmentos fotossintéticos e os componentes de produção do algodoeiro cv. BRS Jade. As concentrações de ácido salicílico de 2,6 e 2,7 mM proporcionaram aumento na taxa de assimilação de CO2 e condutância estomática, respectivamente, das plantas de algodão. A aplicação foliar de ácido salicílico não amenizou os efeitos do estresse salino sobre as trocas gasosas, a síntese de pigmentos fotossintéticos e os componentes de produção do algodoeiro.

Novel Pathogenic Mutation Mapping of ASPM Gene in Consanguineous Pakistani Families with Primary Microcephaly / Novo mapeamento de mutações patogênicas do gene ASPM em famílias consanguíneas com microcefalia primária do Paquistão

Autosomal recessive primary microcephaly (MCPH) is a neurodevelopmental disorder characterized by a congenitally reduced head circumference (-3 to -5 SD) and non-progressive intellectual disability. The objective of the study was to evaluate pathogenic mutations in the ASPM gene to understand etiology and molecular mechanism of primary microcephaly. Blood samples were collected from various families across different remote areas of Pakistan from February 2017 to May 2019 who were identified to be affected with primary microcephaly. DNA extraction was performed using the salting-out method; the quality and quantity of DNA were evaluated using spectrophotometry and 1% agarose gel electrophoresis, respectively in University of the Punjab. Mutation analysis was performed by whole exome sequencing from the Cologne Center for Genomics, University of Cologne. Sanger sequencing was done in University of the Punjab to confirm the pathogenic nature of mutation. A novel 4-bp deletion mutation c.3877_3880delGAGA was detected in exon 17 of the ASPM gene in two primary microcephaly affected families (A and B), which resulted in a frame shift mutation in the gene followed by truncated protein synthesis (p.Glu1293Lysfs*10), as well as the loss of the calmodulin-binding IQ domain and the Armadillo-like domain in the ASPM protein. Using the in-silico tools Mutation Taster, PROVEAN, and PolyPhen, the pathogenic effect of this novel mutation was tested; it was predicted to be "disease causing", with high pathogenicity scores. One previously reported mutation in exon 24 (c.9730C>T) of the ASPM gene resulting in protein truncation (p.Arg3244*) was also observed in family C. Mutations in the ASPM gene are the most common cause of MCPH in most cases. Therefore, enrolling additional affected families from remote areas of Pakistan would help in identifying or mapping novel mutations in the ASPM gene of primary microcephaly.

Microcefalia primária autossômica recessiva (MCPH) é um distúrbio do neurodesenvolvimento caracterizado por uma redução congênita do perímetro cefálico (-3 a -5 DP) e deficiência intelectual não progressiva. O objetivo do estudo foi avaliar mutações patogênicas no gene ASPM a fim de compreender a etiologia e o mecanismo molecular da microcefalia primária. Amostras de sangue foram coletadas de várias famílias em diferentes áreas remotas do Paquistão de fevereiro de 2017 a maio de 2019, que foram identificadas como afetadas com microcefalia primária. A extração do DNA foi realizada pelo método salting-out; a qualidade e a quantidade de DNA foram avaliadas por espectrofotometria e eletroforese em gel de agarose a 1%, respectivamente, na Universidade de Punjab. A análise de mutação foi realizada por sequenciamento completo do exoma do Cologne Center for Genomics, University of Cologne. O sequenciamento de Sanger foi feito na Universidade do Punjab para confirmar a natureza patogênica da mutação. Uma nova mutação de deleção de 4 bp c.3877_3880delGAGA foi detectada no exon 17 do gene ASPM em duas famílias afetadas por microcefalia primária (A e B), que resultou em uma mutação de frame shift no gene seguida por síntese de proteína truncada (pGlu1293Lysfs * 10), bem como a perda do domínio IQ de ligação à calmodulina e o domínio do tipo Armadillo na proteína ASPM. Usando as ferramentas in-silico Mutation Taster, PROVEAN e PolyPhen, o efeito patogênico dessa nova mutação foi testado; foi previsto ser "causador de doenças", com altos escores de patogenicidade. Uma mutação relatada anteriormente no exon 24 (c.9730C > T) do gene ASPM, resultando em truncamento de proteína (p.Arg3244 *) também foi observada na família C. Mutações no gene ASPM são a causa mais comum de MCPH na maioria dos casos . Portanto, a inscrição de famílias afetadas adicionais de áreas remotas do Paquistão ajudaria a identificar ou mapear novas mutações no gene ASPM da microcefalia primária.