Reactivity against Sarcocystis neurona and Sarcocystis falcatula-like in horses from Southeastern and Midwestern Brazil / Reatividade contra Sarcocystis neurona e Sarcocystis falcatula-like em equinos das regiões Sudeste e Centro-Oeste do Brasil

Equine protozoal myeloencephalitis (EPM) is a neurological disease caused by Sarcocystis neurona. Immunofluorescence antibody tests (IFATs) have been widely used to identify exposure of horses to S. neurona in Brazil. Here we used IFAT to search for IgG antibodies against Sarcocystis falcatula-like (Dal-CG23) and S. neurona (SN138) in sera from 342 horses sampled in Campo Grande, Mato Grosso do Sul state (Midwestern), and São Paulo, São Paulo state (Southeastern), Brazil. The 1:25 cutoff value was chosen to maximize sensitivity of the test. IgG antibodies against S. neurona were detected in 239 horses (69.88%), whereas IgG antibodies against S. falcatula-like were detected in 177 horses (51.75%). Sera from 132 horses (38.59%) reacted against both isolates. Absence of reactivity was evidenced in 58/342 horses (16.95%). The lower cutoff used, and the presence of opossums infected with S. falcatula-like and Sarcocystis spp. in the regions where the horses were sampled, might justify the high seroprevalence observed here. Owing to the similarity among antigens targeted in immunoassays, reports on S. neurona-seropositive horses in Brazil may also derive from the exposure of horses to other Sarcocystis species. The role of other Sarcocystis species in causing neurological diseases in horses in Brazil remains unclear.(AU)

Mieloencefalite protozoária equina (MPE) é uma doença neurológica causada por Sarcocystis neurona. Reação de imunofluorescência indireta (RIFI) tem sido utilizada para identificar a exposição de equinos à S. neurona no Brasil. Neste estudo, a RIFI foi utilizada para avaliar a presença de anticorpos IgG anti-Sarcocystis falcatula-like (Dal-CG23) e anti-S. neurona (SN138) no soro de 342 equinos de Campo Grande, Mato Grosso do Sul (Centro-oeste) e São Paulo, São Paulo (Sudeste), Brasil. O ponto de corte de 1:25 foi escolhido para maximizar a sensibilidade. Anticorpos IgG anti-S. neurona foram detectados em 239 cavalos (69,88%), enquanto anticorpos IgG anti-S. falcatula-like foram detectados em 177 cavalos (51,75%). O soro de 132 animais (38,59%) reagiu contra ambos os isolados. A ausência de reatividade foi evidenciada em 58/342 animais (16,95%). O baixo ponto de corte e a presença de gambás infectados com S. falcatula-like e Sarcocystis spp., nas regiões onde os equinos foram amostrados podem justificar a alta soroprevalência aqui observada. Devido à similaridade entre antígenos de superfície detectados nos imunoensaios, relatos de soropositividade contra S. neurona no Brasil podem resultar da exposição dos equinos a outras espécies de Sarcocystis. O papel de outras espécies de Sarcocystis como causa de doença neurológica em equinos no Brasil permanece incerto.(AU)

Molecular diversity of Sarcocystis spp. in opossums (Didelphis spp.) from Southeastern and Midwestern Brazil / Diversidade molecular de Sarcocystis spp. em gambás (Didelphis spp.) do Sudeste e Centro-oeste do Brasil

South American opossums (Didelphis spp.) are definitive hosts of Sarcocystis neurona, Sarcocystis speeri, Sarcocystis lindsayi and Sarcocystis falcatula. In Brazil, diverse studies have demonstrated a high frequency of Sarcocystis falcatula-like in sporocysts derived from opossums, and high genetic diversity has been observed in surface antigen-encoding genes (SAGs). In this study, genetic diversity of Sarcocystis spp. derived from Didelphis albiventris and Didelphis aurita from the cities of Campo Grande and São Paulo, was accessed by sequencing SAG2, SAG3, SAG4, the first internal transcribed spacer (ITS-1) and cytochrome c oxidase subunit I (cox1). Molecular identification was performed for 16 DNA samples obtained from sporocyst or culture-derived merozoites. The ITS-1, cox1, and SAG3 fragments were cloned, whereas SAG2 and SAG4 were sequenced directly from PCR products. Four alleles variants were found for SAG2, 13 for SAG3 and seven for SAG4, from which four, 13 and four, respectively, were novel. Twenty-seven allele variants were found for ITS-1, all phylogenetically related to S. falcatula-like previously described in Brazil. Sarcocystis sp. phylogenetically related to Sarcocystis rileyi was evidenced by cox1 in three opossums. Further studies are needed to clarify the role of Didelphis spp. as definitive hosts of Sarcocystis spp. other than that previous described.(AU)

Gambás sul-americanos (Didelphis spp.) são hospedeiros definitivos de Sarcocystis neurona, Sarcocystis speeri, Sarcocystis lindsayi e Sarcocystis falcatula. No Brasil, diversos estudos têm demonstrado alta frequência de Sarcocystis falcatula-like em esporocistos derivados de gambás, com grande diversidade nos genes que codificam antígenos de superfície (SAGs). Neste estudo, a diversidade genética de Sarcocystis spp., oriundos de Didelphis albiventris e Didelphis aurita, dos municípios de Campo Grande e São Paulo, foi acessada por meio do sequenciamento de SAG2, SAG3 e SAG4, da primeira região espaçadora interna transcrita (ITS-1) e citocromo c oxidase subunidade I (cox1). Identificação molecular foi realizada em 16 amostras de DNA, obtidas de esporocistos ou merozoítos derivados de cultivo. Os fragmentos de ITS-1, cox1 e SAG3 foram clonados, enquanto SAG2 e SAG4 foram sequenciados diretamente dos produtos de PCR. Quatro alelos foram observados em SAG2, 13 em SAG3 e sete em SAG4, sendo novos quatro, 13 e quatro, respectivamente. Em ITS-1, 27 alelos foram observados, todos filogeneticamente relacionados à S. falcatula-like, previamente detectados no Brasil. Sarcocystis sp. filogeneticamente relacionado à Sarcocystis rileyi foi evidenciado por cox1 em três gambás. Mais estudos são necessários para entender o papel de Didelphis spp. como hospedeiro definitivo de Sarcocystis spp. diferentes daqueles previamente descritos.(AU)

Pituitary pars intermedia dysfunction in horses associated to pituitary adenoma / Disfunção da pars intermedia da hipófise em equinos associado a adenoma pituitário

The clinical syndrome of the pituitary pars intermedia dysfunction (PPID) is the most common endocrinopathy of older horses. This syndrome is characterized by several clinical and pathological changes, which are usually associated with adenomas of the pars intermedia (PI) of the pituitary gland. The aim of this work is to describe five cases of pituitary adenoma of the PI associated with PPID in horses, addressing its clinical and pathological aspects. The horses had a mean of 22 years of age. The main clinical signs were hirsutism and paresis of hind limbs, and at post mortem examination all horses had hirsutism, and a nodule in the pituitary gland, which was histologically characterized as an adenoma of PI (5/5). Furthermore, two horses had gross lesions suggestive of chronic laminitis. Moreover, there was intense parasitism of Sarcocystis neurona (2/5), Strongylus vulgaris (1/5), Parascaris equorum (1/5), Draschia megastoma (1/5), and Klossiella equi (1/5).

A síndrome clínica da disfunção da pars intermedia da hipófise (PPID) é a endocrinopatia mais comum em cavalos idosos. Essa síndrome é caracterizada por várias alterações clínicas e patológicas, geralmente associadas a adenomas da pars intermedia (PI) da hipófise. O objetivo deste trabalho é descrever cinco casos de adenoma hipofisário de PI associado a PPID em equinos, abordando seus aspectos clínicos e patológicos. Os cavalos apresentaram média de 22 anos de idade. Os principais sinais clínicos incluíam hirsutismo e paresia dos membros pélvicos, e no exame post mortem todos os equinos apresentavam hirsutismo e um nódulo na glândula pituitária, que foi histologicamente caracterizada como um adenoma de PI (5/5). Além disso, dois cavalos tinham lesões macroscópicas sugestivas de laminite crônica. Ainda, havia intenso parasitismo de Sarcocystis neurona (2/5), Strongylus vulgaris (1/5), Parascaris equorum (1/5), Draschia megastoma (1/5) e Klossiella equi (1/5).

Sarcocystis neurona and related Sarcocystis spp. shed by opossums (Didelphis spp.) in South America / Sarcocystis neurona e Sarcocystis spp. relacionados, excretados por gambás (Didelphis spp.) na América do Sul

Protozoan parasites of the genus Sarcocystis are obligatory heteroxenous cyst-forming coccidia that infect a wide variety of animals and encompass approximately 200 described species. At least four Sarcocystis spp. (S. falcatula, S. neurona, S. lindsayi and S. speeri) use opossums (Didelphis spp.) as definitive hosts, and two of them, S. neurona and S. falcatula, are known to cause disease in horses and birds, respectively. Opossums are restricted to the Americas, but their distribution in the Americas is heterogeneous. Five Didelphis spp. are distributed in South America (D. aurita, D. albiventris, D. marsupialis, D. imperfecta and D. pernigra) whereas just one opossum species (D. virginiana) is found in North America. Studies conducted in the last decades show that Sarcocystis spp., derived from South American Didelphis spp., have biological and genetic differences in relation to Sarcocystis spp. shed by the North American opossum D. virginiana. The aim of this review was to address the peculiar scenario of Sarcocystis species shed by South American opossums, with a special focus on diagnosis, epidemiology, and animal infections, as well as the genetic characteristics of these parasites.(AU)

Parasitos protozoários do gênero Sarcocystis são coccídios heteroxenos formadores de cistos, que infectam variadas espécies animais e compreendem cerca de 200 espécies descritas. Pelo menos quatro Sarcocystis spp. (S. falcatula, S. neurona, S. lindsayi e S. speeri) utilizam gambás (Didelphis spp.) como hospedeiros definitivos; e duas delas, S. neurona and S. falcatula são conhecidas por causarem doença em equinos e aves, respectivamente. Gambás didelfídeos são restritos ao continente americano, contudo são distribuídos de forma heterogênea nas Américas. Cinco Didelphis spp. são distribuídos na América do Sul (D. aurita, D. albiventris, D. marsupialis, D. imperfecta e D. pernigra), enquanto somente uma espécie (D. virginiana) é encontrada na América do Norte. Trabalhos conduzidos, nas últimas décadas, mostram que Sarcocystis spp. derivados de Didelphis spp. sul-americanos possuem diferenças biológicas e genéticas, quando comparados a Sarcocystis spp. excretados pelo gambá norte-americano D. virginiana. O objetivo desta revisão é discutir a situação peculiar das espécies de Sarcocystis na América do Sul com um foco especial em diagnóstico, epidemiologia e infecções animais, assim como nas características genéticas desses parasitos.(AU)

Sarcocystis neurona and related Sarcocystis spp. shed by opossums (Didelphis spp.) in South America / Sarcocystis neurona e Sarcocystis spp. relacionados, excretados por gambás (Didelphis spp.) na América do Sul

Abstract Protozoan parasites of the genus Sarcocystis are obligatory heteroxenous cyst-forming coccidia that infect a wide variety of animals and encompass approximately 200 described species. At least four Sarcocystis spp. (S. falcatula, S. neurona, S. lindsayi and S. speeri) use opossums (Didelphis spp.) as definitive hosts, and two of them, S. neurona and S. falcatula, are known to cause disease in horses and birds, respectively. Opossums are restricted to the Americas, but their distribution in the Americas is heterogeneous. Five Didelphis spp. are distributed in South America (D. aurita, D. albiventris, D. marsupialis, D. imperfecta and D. pernigra) whereas just one opossum species (D. virginiana) is found in North America. Studies conducted in the last decades show that Sarcocystis spp., derived from South American Didelphis spp., have biological and genetic differences in relation to Sarcocystis spp. shed by the North American opossum D. virginiana. The aim of this review was to address the peculiar scenario of Sarcocystis species shed by South American opossums, with a special focus on diagnosis, epidemiology, and animal infections, as well as the genetic characteristics of these parasites.

Resumo Parasitos protozoários do gênero Sarcocystis são coccídios heteroxenos formadores de cistos, que infectam variadas espécies animais e compreendem cerca de 200 espécies descritas. Pelo menos quatro Sarcocystis spp. (S. falcatula, S. neurona, S. lindsayi e S. speeri) utilizam gambás (Didelphis spp.) como hospedeiros definitivos; e duas delas, S. neurona and S. falcatula são conhecidas por causarem doença em equinos e aves, respectivamente. Gambás didelfídeos são restritos ao continente americano, contudo são distribuídos de forma heterogênea nas Américas. Cinco Didelphis spp. são distribuídos na América do Sul (D. aurita, D. albiventris, D. marsupialis, D. imperfecta e D. pernigra), enquanto somente uma espécie (D. virginiana) é encontrada na América do Norte. Trabalhos conduzidos, nas últimas décadas, mostram que Sarcocystis spp. derivados de Didelphis spp. sul-americanos possuem diferenças biológicas e genéticas, quando comparados a Sarcocystis spp. excretados pelo gambá norte-americano D. virginiana. O objetivo desta revisão é discutir a situação peculiar das espécies de Sarcocystis na América do Sul com um foco especial em diagnóstico, epidemiologia e infecções animais, assim como nas características genéticas desses parasitos.

Mieloencefalite protozoária equina: relato de caso / Equine protozoal myeloencephalitis: case report

A Mieloencefalite Protozoária Equina (EPM) é uma doença infecciosa que possui como principal agente o protozoário Sarcocystis neurona. O parasita acomete o sistema nervoso central de equinos podendo causar alterações neurológicas como ataxia, paresia, atrofia muscular e alterações de estado mental. Com ampla distribuição no território nacional, é importante que esta afecção faça parte do diagnóstico diferencial em animais da espécie equina, uma vez que equinos portadores desta afecção podem apresentar desde sinais discretos, como ligeira queda no desempenho, a graves sinais neurológicos. Para isso, o médico veterinário deve compreender suas características e os métodos diagnósticos eficazes para sua identificação. Uma égua da raça Brasileiro de Hipismo, de cinco anos de idade, foi atendida na cidade de Belo Horizonte, em Minas Gerais, com histórico de atrofia na região lombar e garupa. Ainda, foi relatada a presença de gambás na fazenda em que vivia o animal. No exame neurológico foi detectada incoordenação motora de grau 2. O teste SAG ELISA foi realizado, e obtido resultado positivo. Todos os achados e o resultado positivo no teste corroboram o diagnóstico da EPM, o que levou ao tratamento preconizado, e a visível melhora clínica. O objetivo desse trabalho é relatar um caso clínico de EPM em uma égua no município de Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil, levando em consideração a importância do conhecimento dos aspectos epidemiológicos, clínicos, diagnósticos e terapêuticos da doença.

Equine Protozoal Myeloencephalitis (EPM) is an infectious disease whose main agent is the protozoan Sarcocystis neurona. The parasite affects the central nervous system of horses and can cause neurological alterations like ataxia, paresis, muscle atrophy and changes in mental status. With wide distribution in the national territory, it is important that this disease is part of the differential diagnosis in animals of equine species, since equines with this disease can present from discrete signs, such as a slight decrease in performance, to serious neurological signs. That is why the veterinarian must understand its characteristics and effective diagnostic methods for its identification. A five-year-old Brazilian Sport Horse mare was attended in the city of Belo Horizonte, Minas Gerais, with a history of atrophy in the lumbar region and rump. Also, the presence of opossums on the farm where the animal lived was reported. In neurological examination, grade 2 motor incoordination was detected. The SAG ELISA test was performed, and a positive result was obtained. All findings and the positive test result corroborate the diagnosis of EPM, which led to the recommended treatment, and visible clinical improvement. The aim of this paper is to report a clinical case of EPM in a mare in the city of Belo Horizonte, Minas Gerais, Brazil, taking into account the importance of knowledge of the epidemiological, clinical, diagnostic and therapeutic aspects of disease.

Mieloencefalite protozoária equina: relato de caso / Equine protozoal myeloencephalitis: case report

A Mieloencefalite Protozoária Equina (EPM) é uma doença infecciosa que possui como principal agente o protozoário Sarcocystis neurona. O parasita acomete o sistema nervoso central de equinos podendo causar alterações neurológicas como ataxia, paresia, atrofia muscular e alterações de estado mental. Com ampla distribuição no território nacional, é importante que esta afecção faça parte do diagnóstico diferencial em animais da espécie equina, uma vez que equinos portadores desta afecção podem apresentar desde sinais discretos, como ligeira queda no desempenho, a graves sinais neurológicos. Para isso, o médico veterinário deve compreender suas características e os métodos diagnósticos eficazes para sua identificação. Uma égua da raça Brasileiro de Hipismo, de cinco anos de idade, foi atendida na cidade de Belo Horizonte, em Minas Gerais, com histórico de atrofia na região lombar e garupa. Ainda, foi relatada a presença de gambás na fazenda em que vivia o animal. No exame neurológico foi detectada incoordenação motora de grau 2. O teste SAG ELISA foi realizado, e obtido resultado positivo. Todos os achados e o resultado positivo no teste corroboram o diagnóstico da EPM, o que levou ao tratamento preconizado, e a visível melhora clínica. O objetivo desse trabalho é relatar um caso clínico de EPM em uma égua no município de Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil, levando em consideração a importância do conhecimento dos aspectos epidemiológicos, clínicos, diagnósticos e terapêuticos da doença.(AU)

Equine Protozoal Myeloencephalitis (EPM) is an infectious disease whose main agent is the protozoan Sarcocystis neurona. The parasite affects the central nervous system of horses and can cause neurological alterations like ataxia, paresis, muscle atrophy and changes in mental status. With wide distribution in the national territory, it is important that this disease is part of the differential diagnosis in animals of equine species, since equines with this disease can present from discrete signs, such as a slight decrease in performance, to serious neurological signs. That is why the veterinarian must understand its characteristics and effective diagnostic methods for its identification. A five-year-old Brazilian Sport Horse mare was attended in the city of Belo Horizonte, Minas Gerais, with a history of atrophy in the lumbar region and rump. Also, the presence of opossums on the farm where the animal lived was reported. In neurological examination, grade 2 motor incoordination was detected. The SAG ELISA test was performed, and a positive result was obtained. All findings and the positive test result corroborate the diagnosis of EPM, which led to the recommended treatment, and visible clinical improvement. The aim of this paper is to report a clinical case of EPM in a mare in the city of Belo Horizonte, Minas Gerais, Brazil, taking into account the importance of knowledge of the epidemiological, clinical, diagnostic and therapeutic aspects of disease.(AU)

Sarcocystis neurona, seroprevalence of antibodies in equines and research of oocystis in opossum in Ilhéus - Itabuna microregion, Bahia, Brazil / Sarcocystis neurona, seroprevalência de anticorpos em equinos e pesquisa de oocistos em gambás na microrregião de Ilhéus - Itabuna, Bahia, Brasil

Abstract The aims of this study were to determine the seroprevalence of Sarcocystis neurona antibodies in equines in the Ilhéus-Itabuna microregion (BA), and identify possible factors associated with infection. The presence of sporocysts/oocysts of Sarcocystis spp. was also verified in Didelphis spp. A total of 669 serum samples were collected from equines in 56 properties located in 12 municipalities in the region. Indirect fluorescent antibody test was performed with slides containing merozoites of the S. neurona, using a cut-off titer of 1:80. Occurrence of 7.92% of anti-S. neurona antibodies was observed in the sampled equines. The purposes trade and work were significantly associated with the presence of antibodies (p<0.05), and being used for the purpose of work (21.6%) was considered a risk factor, while being used for the purpose of trade (3.6%) was a protective factor. A total of 25 Didelphis spp. was captured for research on sporocysts/oocysts in stool samples and intestinal scrapings, being all negative. Didelphis spp. were all negative for the presence of Sarcocystis spp. and this circumstance does not change the fact that seroprevalence of S. neurona has been observed in horses raised in the southern Bahia.

Resumo O presente estudo foi realizado na microrregião de Ilhéus-Itabuna, Bahia. Os objetivos deste estudo foram determinar a soroprevalência de anticorpos contra Sarcocystis neurona em equinos da microrregião Ilhéus-Itabuna (BA) e identificar possíveis fatores associados à infecção. A presença de esporocistos/oocistos de Sarcocystis spp. também foi pesquisada em Didelphis spp. Foram coletadas 669 amostras de soro de equinos em 56 propriedades localizadas em 12 municípios da região. Foi utilizada a reação de imunofluorescência indireta (RIFI), utilizando-se lâminas confeccionadas com merozoítos de Sarcocystis neurona (cepa SN138) e ponto de corte na diluição de 1:80. A ocorrência de anticorpos anti- S. neurona, nos equinos amostrados, foi de 7,92%. As finalidades dos animais - comércio e trabalho - apresentaram-se significativas (p<0.05), sendo que a finalidade trabalho (21,6%) foi considerada fator de risco, enquanto a finalidade comércio (3,6%) foi considerada fator de proteção. Foram capturados 25 Didelphis spp., para pesquisa de esporocistos/oocistos em amostras de fezes e raspado de mucosa intestinal. Todos os Didelphis spp. foram negativos para a presença de Sarcocystis spp., mesmo assim essa circunstância não alterou o fato da ocorrência de S. neurona ter sido observada em cavalos criados na mesorregião do sul da Bahia.

Molecular detection of Apicomplexa protozoa in tissues from Alouatta guariba clamitans

ABSTRACT: The brown howler monkey (Alouatta guariba clamitans) is a primate species widely distributed in South America. Infections by protozoa are common in primates. However, studies on protozoa in primates in Brazil are scarce, so the goal of this study was to investigate DNA from the apicomplexan protozoa Neospora caninum, Sarcocystis spp. and Toxoplasma gondii in tissues of A. guariba clamitans. DNA extraction was performed on tissue samples from the heart, brain, liver, spleen, lung and intestine of six A. guariba clamitans from Santa Maria, Central Region of Rio Grande do Sul, Brazil. Conventional PCR was performed using 18S rRNA gene general primers for Apicomplexa and also specific primers to amplify Neosporaspp. and Toxoplasma gondii DNA. All animals were positive in the 18S PCR and the genetic sequencing confirmed the presence of Sarcocystis spp. DNA in the tissues of four animals belonging to at least two species (S. neurona and S. gigantea) and T. gondii DNA in the other two animals. One positive sample for T. gondii was genotypically characterized as atypical by the restriction fragment length polymorphism technique. N. caninum DNA was not detected in the tested samples. The presence of Apicomplexa protozoan DNA in the tissues of the six animals tested in this study highlights the importance of howler monkeys as maintainers of these pathogens in nature.

RESUMO: O bugio ruivo (Alouatta guariba clamitans) é uma espécie de primata amplamente distribuída na América do Sul. As infecções por protozoários são comuns em primatas. Entretanto, estudos sobre protozoários em primatas no Brasil são escassos, portanto o objetivo deste estudo foi pesquisar DNA dos protozoários Apicomplexa Neospora caninum, Sarcocystisspp. e Toxoplasma gondii em tecidos de A. guariba clamitans. A extração de DNA foi realizada em amostras de tecido do coração, cérebro, fígado, baço, pulmão e intestino de seis A. guariba clamitans oriundos de Santa Maria, Região Central do Rio Grande do Sul, Brasil. Foi realizada PCR convencional utilizando primers geral do gene 18S rRNA para Apicomplexa e também primers específicos para amplificação de DNA de Neospora spp.e Toxoplasma gondii. Todos os animais foram positivos no PCR geral para Apicomplexa e no sequenciamento genético confirmou-se a presença de DNA de Sarcocystis nos tecidos de quatro animais pertencentes a pelo menos duas espécies (S. neurona e S. gigantea), e DNA de T. gondii foi detectado nos outros dois animais. Uma amostra positiva para T. gondii foi caracterizada genotipicamente como atípico pela técnica de polimorfismo do comprimento do fragmento de restrição. Não foi detectado DNA de N. caninum nas amostras testadas. A presença de DNA de protozoários apicomplexa nos tecidos dos seis animais testados neste estudo destaca a importância dos bugios ruivos como mantenedores desses patógenos na natureza.

Molecular detection of Apicomplexa protozoa in tissues from Alouatta guariba clamitans / Detecção molecular de protozoários Apicomplexa em tecidos de Alouatta guariba clamitans

The brown howler monkey (Alouatta guariba clamitans) is a primate species widely distributed in South America. Infections by protozoa are common in primates. However, studies on protozoa in primates in Brazil are scarce, so the goal of this study was to investigate DNA from the apicomplexan protozoa Neospora caninum, Sarcocystis spp. and Toxoplasma gondii in tissues of A. guariba clamitans. DNA extraction was performed on tissue samples from the heart, brain, liver, spleen, lung and intestine of six A. guariba clamitans from Santa Maria, Central Region of Rio Grande do Sul, Brazil. Conventional PCR was performed using 18S rRNA gene general primers for Apicomplexa and also specific primers to amplify Neosporaspp. and Toxoplasma gondii DNA. All animals were positive in the 18S PCR and the genetic sequencing confirmed the presence of Sarcocystis spp. DNA in the tissues of four animals belonging to at least two species (S. neurona and S. gigantea) and T. gondii DNA in the other two animals. One positive sample for T. gondii was genotypically characterized as atypical by the restriction fragment length polymorphism technique. N. caninum DNA was not detected in the tested samples. The presence of Apicomplexa protozoan DNA in the tissues of the six animals tested in this study highlights the importance of howler monkeys as maintainers of these pathogens in nature.(AU)

O bugio ruivo (Alouatta guariba clamitans) é uma espécie de primata amplamente distribuída na América do Sul. As infecções por protozoários são comuns em primatas. Entretanto, estudos sobre protozoários em primatas no Brasil são escassos, portanto o objetivo deste estudo foi pesquisar DNA dos protozoários Apicomplexa Neospora caninum, Sarcocystisspp. e Toxoplasma gondii em tecidos de A. guariba clamitans. A extração de DNA foi realizada em amostras de tecido do coração, cérebro, fígado, baço, pulmão e intestino de seis A. guariba clamitans oriundos de Santa Maria, Região Central do Rio Grande do Sul, Brasil. Foi realizada PCR convencional utilizando primers geral do gene 18S rRNA para Apicomplexa e também primers específicos para amplificação de DNA de Neospora spp.e Toxoplasma gondii. Todos os animais foram positivos no PCR geral para Apicomplexa e no sequenciamento genético confirmou-se a presença de DNA de Sarcocystis nos tecidos de quatro animais pertencentes a pelo menos duas espécies (S. neurona e S. gigantea), e DNA de T. gondii foi detectado nos outros dois animais. Uma amostra positiva para T. gondii foi caracterizada genotipicamente como atípico pela técnica de polimorfismo do comprimento do fragmento de restrição. Não foi detectado DNA de N. caninum nas amostras testadas. A presença de DNA de protozoários apicomplexa nos tecidos dos seis animais testados neste estudo destaca a importância dos bugios ruivos como mantenedores desses patógenos na natureza.(AU)

Molecular detection of Apicomplexa protozoa in tissues from Alouatta guariba clamitans / Detecção molecular de protozoários Apicomplexa em tecidos de Alouatta guariba clamitans

The brown howler monkey (Alouatta guariba clamitans) is a primate species widely distributed in South America. Infections by protozoa are common in primates. However, studies on protozoa in primates in Brazil are scarce, so the goal of this study was to investigate DNA from the apicomplexan protozoa Neospora caninum, Sarcocystis spp. and Toxoplasma gondii in tissues of A. guariba clamitans. DNA extraction was performed on tissue samples from the heart, brain, liver, spleen, lung and intestine of six A. guariba clamitans from Santa Maria, Central Region of Rio Grande do Sul, Brazil. Conventional PCR was performed using 18S rRNA gene general primers for Apicomplexa and also specific primers to amplify Neosporaspp. and Toxoplasma gondii DNA. All animals were positive in the 18S PCR and the genetic sequencing confirmed the presence of Sarcocystis spp. DNA in the tissues of four animals belonging to at least two species (S. neurona and S. gigantea) and T. gondii DNA in the other two animals. One positive sample for T. gondii was genotypically characterized as atypical by the restriction fragment length polymorphism technique. N. caninum DNA was not detected in the tested samples. The presence of Apicomplexa protozoan DNA in the tissues of the six animals tested in this study highlights the importance of howler monkeys as maintainers of these pathogens in nature.(AU)

O bugio ruivo (Alouatta guariba clamitans) é uma espécie de primata amplamente distribuída na América do Sul. As infecções por protozoários são comuns em primatas. Entretanto, estudos sobre protozoários em primatas no Brasil são escassos, portanto o objetivo deste estudo foi pesquisar DNA dos protozoários Apicomplexa Neospora caninum, Sarcocystisspp. e Toxoplasma gondii em tecidos de A. guariba clamitans. A extração de DNA foi realizada em amostras de tecido do coração, cérebro, fígado, baço, pulmão e intestino de seis A. guariba clamitans oriundos de Santa Maria, Região Central do Rio Grande do Sul, Brasil. Foi realizada PCR convencional utilizando primers geral do gene 18S rRNA para Apicomplexa e também primers específicos para amplificação de DNA de Neospora spp.e Toxoplasma gondii. Todos os animais foram positivos no PCR geral para Apicomplexa e no sequenciamento genético confirmou-se a presença de DNA de Sarcocystis nos tecidos de quatro animais pertencentes a pelo menos duas espécies (S. neurona e S. gigantea), e DNA de T. gondii foi detectado nos outros dois animais. Uma amostra positiva para T. gondii foi caracterizada genotipicamente como atípico pela técnica de polimorfismo do comprimento do fragmento de restrição. Não foi detectado DNA de N. caninum nas amostras testadas. A presença de DNA de protozoários apicomplexa nos tecidos dos seis animais testados neste estudo destaca a importância dos bugios ruivos como mantenedores desses patógenos na natureza.(AU)

Survey of Toxoplasma gondii, Neospora caninum and Sarcocystis neurona antibodies in wild red-tailed Amazon parrots (Amazona brasiliensis) / Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii, anti-Neospora caninum e anti-Sarcocystis neurona em papagaios-de-cara-roxa (Amazona brasiliensis) de vida livre

Toxoplasma gondii, Neospora caninum and Sarcocystis neurona are obligate intracellular parasites within the phylum Apicomplexa. The red-tailed Amazon parrot (Amazona brasiliensis) is a near-threatened species of psittacine that is endemic to the Atlantic Forest of Brazil and has been designated as a bioindicator because of its sensitivity to environmental qualitative status and changes. The aim of this study was to evaluate the presence of antibodies against T. gondii, N. caninum and S. neurona in wild red-tailed Amazon parrot nestlings on Rasa Island, Brazil. Blood samples were collected from 51 parrots and plasma samples were stored at 20 °C until immunofluorescence antibody tests (IFAT) were performed. Antigen slides were prepared using tachyzoites of T. gondii (RH strain) and, N. caninum (NC-1 strain) and using merozoites of S. neurona (SNR37 strain). Plasma samples were tested at initial dilutions of 1:16 for T. gondii, 1:50 for N. caninum and 1:5 for S. neurona. An anti-chicken antibody conjugated with FITC was used as a secondary antibody at 1:50 dilution. No antibodies for any of these three protozoa were found, thus suggesting that these wild red-tailed Amazon parrot nestlings had not been exposed to these parasites.(AU)

Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Sarcocystis neurona são protozoários intracelulares do filo Apicomplexa. O papagaio-de-cara-roxa (Amazona brasiliensis) é um psitacídeo endêmico da floresta atlântica, considerado uma espécie quase ameaçada de extinção e bioindicadora por sua sensibilidade às mudanças no ambiente. O objetivo do presente estudo foi detectar a presença de anticorpos contra T. gondii, N. caninum e S. neurona em filhotes de papagaios-de-cara-roxa (Amazona brasiliensis) de vida livre na Ilha Rasa, Brasil. Amostras de sangue foram coletadas de 51 papagaios e armazenadas a - 20ºC até a realização da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). As lâminas de RIFI com os antígenos, foram preparadas com taquizoítos de T. gondii (cepa RH) e N. caninum (cepa NC-1) e com merozoítos de S. neurona (cepa SNR37). Os plasmas foram diluídos em PBS (Ph 7,2) nas diluições 1:16 para T. gondii, 1:50 para N. caninum e 1:5 para S. neurona. O conjugado anti-IgG de galinhas marcado com fluoresceína (FITC) foi utilizado na diluição de 1:50. Não foram detectados anticorpos para os três protozoários nas amostras sugerindo que os filhotes de papagaios-de-cara-roxa não foram expostos aos protozoários.(AU)

Low prevalence of infection by Sarcocystis neurona in horses from the State of Alagoas, Brazil / Baixa prevalência da infecção por Sarcocystis neurona em cavalos do estado de Alagoas, Brasil

The aim of this study was to determine the prevalence of infection by Sarcocystis neurona in horses and identify potential risk factors. Were analyzed 427 samples from 36 farms in 21 municipalities in the Alagoas State, Brazil. Presence of anti-S. neurona antibodies was diagnosed by indirect immunofluorescence antibody test (IFAT) and was confirmed using the immunoblot test. Risk factors were assessed through investigative questionnaires on animal management on the farms. The prevalence of anti-S.neurona antibodies was 2.8% (confidence interval, CI: 1.5-4.9%) from IFAT and 1.6% (CI:0.8-3.34%) from immunoblot, and there were positive horses on 16.6% of the studied farms. None of the variables studied presented associations with serological status for S. neurona. This is the first report on infection by S. neurona in horses reared in Alagoas, Brazil showing a low exposure to S. neurona in this region, but with significant numbers of foci.(AU)

Objetivou-se neste estudo determinar a prevalência e os fatores de risco associados à infecção por Sarcocystis neurona em equinos. Foram analisadas 427 amostras de 36 propriedades localizadas em 21 municípios do estado de Alagoas. O diagnóstico de anticorpos anti-S. neurona foi realizado pela técnica de Imunofluorescência Indireta (IFI) e confirmada por immunoblot. O estudo dos fatores de risco foi realizado a partir de questionários investigativos sobre o manejo dos animais nas propriedades. A prevalência de anticorpos anti-S. neurona foi de 2,8% (I.C. 1,5-4,9%) na IFI e de 1,6% (I.C. 0,8-3,34%) no immunoblot com equinos positivos em 16,6% das propriedades estudadas. Nenhuma variável estudada apresentou associação com o status sorológico para S. neurona. Este é o primeiro relato da infecção por S. neurona em equinos criados no Estado de Alagoas, Brasil, confirmando que os animais desta região têm baixa exposição a S. neurona, mas com significativo número de focos.(AU)

Detection of antibodies against Sarcocystis neurona, Neospora caninum and Toxoplasma gondii in horses, dogs and cat / Detecção de anticorpos contra Sarcocystis neurona, Neospora caninum e Toxoplasma gondii em cavalos, cães e gatos do estado do Paraná, Brasil

The occurrence and distribution of antibodies against Sarcocystis neurona, Neospora caninum and Toxoplasma gondii was investigated in horses, dogs and cats from Curitiba, Paraná state, Brazil. Serum samples were selected from 100 horses, 100 dogs and 100 cats from the routine of the Veterinary Clinical Pathology Laboratory in the Veterinary Hospital of the University of Paraná (UFPR). The 100 dog samples were divided into two groups: 35 samples from dogs with neurological sign (convulsion) and 65 samples from dogs without neurological signs. The animals were adults of different breeds, males and females. Samples were analyzed by indirect fluorescent antibody test (IFAT) for protozoa S. neurona, N. caninum andT. gondii at the following cut-off dilutions: horses: 1:50, 1:50 and 1:16; dogs: 1:50, 1:50 and 1:16; cats: 1:50, 1:50 and 1:50, respectively. The obtained results were 42% of horses, 7% of dogs and 5% of cats seropositive for S. neurona; 58% of horses, 68% of dogs and 42% of cats seropositive to N. caninum, and 36% of horses, 20% of dogs and 21% of cats seropositive for T. gondii. Among the dogs with neurological signs, 8.6%, 68.6% and 25.7% were seropositive for S. neurona, N. caninum and T. gondii, respectively. Among the dogs without neurological signs, 6.2% 67.7% and 16.9% were seropositiv

O presente trabalho investigou a ocorrência e distribuição de anticorpos contra Sarcocystis neurona, Neospora caninum e Toxoplasma gondii em cavalos, cães e gatos de Curitiba, estado do Paraná, Brasil. Amostras de soro de 100 cavalos, 100 cães e 100 gatos da rotina do Laboratório de Patologia Clínica Veterinária do Hospital Veterinário da Universidade Federal do Paraná (UFPR) foram selecionadas. As 100 amostras de cães foram divididas em dois grupos: 35 amostras de animais com sinal neurológico (convulsão) e 65 sem sinais neurológicos. Os animais eram adultos de diferentes raças, machos e fêmeas. As amostras foram analisadas pelo teste de reação de imunofluorescência indireta (RIFI) para os protozoários S. neurona, N. caninum e T. gondii nas seguintes diluições de corte: cavalos: 1:50, 1:50 e 1:16; cães: 1:50, 1:50 e 1:16; gatos: 1:50, 1:50 e 1:50, respectivamente. Os resultados obtidos foram 42% dos cavalos, 7% dos cães e 5% dosgatos soropositivos para S. neurona; 58% dos cavalos, 68% dos cães e 42% dos gatos soropositivos para N. caninum; e 36% dos cavalos, 20% dos cães e 21% dos gatos soropositivos para T. gondii. Entre os cães com sinal neurológico, 8.6%, 68.6% e 25.7% deles foram soropositivos para S. neurona, N. caninum e T. gondii, respectivamente. Entre os cães sem sinais neurológi

Detecção de anticorpos contra Sarcocystis neurona, Neospora caninum e Toxoplasma gondii em cavalos, cães e gatos do estado do Paraná, Brasil / Detection of antibodies against Sarcocystis neurona, Neospora caninum and Toxoplasma gondii in horses, dogs and cats from Paraná state, Brazil

The occurrence and distribution of antibodies against Sarcocystis neurona, Neospora caninum and Toxoplasma gondii was investigated in horses, dogs and cats from Curitiba, Paraná state, Brazil. Serum samples were selected from 100 horses, 100 dogs and 100 cats from the routine of the Veterinary Clinical Pathology Laboratory in the Veterinary Hospital of the University of Paraná (UFPR). The 100 dog samples were divided into two groups: 35 samples from dogs with neurological sign (convulsion) and 65 samples from dogs without neurological signs. The animals were adults of different breeds, males and females. Samples were analyzed by indirect fluorescent antibody test (IFAT) for protozoa S. neurona, N. caninum andT. gondii at the following cut-off dilutions: horses: 1:50, 1:50 and 1:16; dogs: 1:50, 1:50 and 1:16; cats: 1:50, 1:50 and 1:50, respectively. The obtained results were 42% of horses, 7% of dogs and 5% of cats seropositive for S. neurona; 58% of horses, 68% of dogs and 42% of cats seropositive to N. caninum, and 36% of horses, 20% of dogs and 21% of cats seropositive for T. gondii. Among the dogs with neurological signs, 8.6%, 68.6% and 25.7% were seropositive for S. neurona, N. caninum and T. gondii, respectively. Among the dogs without neurological signs, 6.2% 67.7% and 16.9% were seropositiv

O presente trabalho investigou a ocorrência e distribuição de anticorpos contra Sarcocystis neurona, Neospora caninum e Toxoplasma gondii em cavalos, cães e gatos de Curitiba, estado do Paraná, Brasil. Amostras de soro de 100 cavalos, 100 cães e 100 gatos da rotina do Laboratório de Patologia Clínica Veterinária do Hospital Veterinário da Universidade Federal do Paraná (UFPR) foram selecionadas. As 100 amostras de cães foram divididas em dois grupos: 35 amostras de animais com sinal neurológico (convulsão) e 65 sem sinais neurológicos. Os animais eram adultos de diferentes raças, machos e fêmeas. As amostras foram analisadas pelo teste de reação de imunofluorescência indireta (RIFI) para os protozoários S. neurona, N. caninum e T. gondii nas seguintes diluições de corte: cavalos: 1:50, 1:50 e 1:16; cães: 1:50, 1:50 e 1:16; gatos: 1:50, 1:50 e 1:50, respectivamente. Os resultados obtidos foram 42% dos cavalos, 7% dos cães e 5% dosgatos soropositivos para S. neurona; 58% dos cavalos, 68% dos cães e 42% dos gatos soropositivos para N. caninum; e 36% dos cavalos, 20% dos cães e 21% dos gatos soropositivos para T. gondii. Entre os cães com sinal neurológico, 8.6%, 68.6% e 25.7% deles foram soropositivos para S. neurona, N. caninum e T. gondii, respectivamente. Entre os cães sem sinais neurológi

Mieloencefalite protozoária equina

A mieloencefalite protozoária eqüina é uma doença que acomete o sistema nervoso central (SNC) causando uma infecção. O principal agente etiológico é o Sarcocystis neurona e tem como hospedeiro definitivo o Didelphis albiventris (gambá). Há predominância em alguns sinais clínicos como ataxia e paresia. A rápida avaliação do animal e o rápido diagnóstico podem diminuir algumas complicações e diminuir os sinais clínicos presentes nele.(AU)

Equine protozoal myeloencephalitis is a disease that affects the central nervous system (CNS) causing an infection. The main etiological agent is Sarcocystis neuronal and has its definitive host Didelphis albiventris (opossum). There is a predominance of some clinical signs such as ataxia and paresis. Rapid assessment of the animal and rapid diagnosis may decrease some complications and decrease the clinical signs present in it.(AU)

Mieloencefalite equina por protozoario (MEP): revisão de literatura / Equine protozoal myeloencephalitis (EPM): literature review

A mieloencefalite protozoária equina (MEP) é uma doença infecciosa causada principalmente pelo protozoário Sarcocystis neurona que produz disfunção neurológica no cérebro e na medula, porém pode ser causada também pelo Neospora caninum e Neospora huguesi. O equino é o hospedeiro acidental e o vetor do protozoário é o gambá (hospedeiros definitivos). Um exame é o teste imunológico do líquor, que proporciona um diagnóstico preciso. No tratamento é utilizado coccidioestatico, antiinflamatório, vitaminas e analgésicos, e evitar que o hospedeiro definitivo tenha acesso aos alimentos dos equinos. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver uma revisão de literatura sobre mieloencefalite protozoária equina.(AU)

Equine protozoal myeloencephalitis (EPM) is an infectious disease caused mainly by the protozoan Sarcocystis neuron that produces neurological dysfunction in the brain and marrow, but can also be caused by Neospora caninum and Neospora huguesi. The equine is the accidental host and the vector of the protozoan is the opossum (definitive hosts). An examination is the CSF test, which provides an accurate diagnosis. In the treatment coccidiostatic, anti-inflammatory, vitamins and analgesics are used, and to avoid that the definitive host has access to the food of the horses. The objective of the present work was to develop a literature review on equine protozoal myeloencephalitis.(AU)

Mieloencefalite equina por protozoario (MEP): revisão de literatura / Equine protozoal myeloencephalitis (EPM): literature review

A mieloencefalite protozoária equina (MEP) é uma doença infecciosa causada principalmente pelo protozoário Sarcocystis neurona que produz disfunção neurológica no cérebro e na medula, porém pode ser causada também pelo Neospora caninum e Neospora huguesi. O equino é o hospedeiro acidental e o vetor do protozoário é o gambá (hospedeiros definitivos). Um exame é o teste imunológico do líquor, que proporciona um diagnóstico preciso. No tratamento é utilizado coccidioestatico, antiinflamatório, vitaminas e analgésicos, e evitar que o hospedeiro definitivo tenha acesso aos alimentos dos equinos. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver uma revisão de literatura sobre mieloencefalite protozoária equina.

Equine protozoal myeloencephalitis (EPM) is an infectious disease caused mainly by the protozoan Sarcocystis neuron that produces neurological dysfunction in the brain and marrow, but can also be caused by Neospora caninum and Neospora huguesi. The equine is the accidental host and the vector of the protozoan is the opossum (definitive hosts). An examination is the CSF test, which provides an accurate diagnosis. In the treatment coccidiostatic, anti-inflammatory, vitamins and analgesics are used, and to avoid that the definitive host has access to the food of the horses. The objective of the present work was to develop a literature review on equine protozoal myeloencephalitis.

Mieloencefalite protozoária equina

A mieloencefalite protozoária eqüina é uma doença que acomete o sistema nervoso central (SNC) causando uma infecção. O principal agente etiológico é o Sarcocystis neurona e tem como hospedeiro definitivo o Didelphis albiventris (gambá). Há predominância em alguns sinais clínicos como ataxia e paresia. A rápida avaliação do animal e o rápido diagnóstico podem diminuir algumas complicações e diminuir os sinais clínicos presentes nele.

Equine protozoal myeloencephalitis is a disease that affects the central nervous system (CNS) causing an infection. The main etiological agent is Sarcocystis neuronal and has its definitive host Didelphis albiventris (opossum). There is a predominance of some clinical signs such as ataxia and paresis. Rapid assessment of the animal and rapid diagnosis may decrease some complications and decrease the clinical signs present in it.

Fatores de risco associados à prevalência de anticorpos anti-Sarcocystis neurona, Neospora spp. e Toxoplasma gondii em equinos de Roraima, Amazônia

ABSTRACT: Samples of 303 horses from 56 ranches of Rorainópolis municipality, state of Roraima, were evaluated by means of the Indirect Immunofluorescence Test (IFAT) to detect antibodies against Sarcocystis spp., Toxoplasma gondii and Neospora spp. A subset of positive sample (n=15) against Sarcocystis spp. was evaluated by Western Blotting (WB) with crude antigen of S. neurona. From the serological result, possible risk factors were evaluated against individual or farming variables. The prevalence of anti-Sarcocystis spp. antibodies was estimated to be 43.2% (37.6-49.0%), anti-Neospora sp. was 26.7% (21.9-32.2%), and anti-T. gondii was 18.5% (14.3-23.4%). Fourteen samples (14/15) evaluated by WB were positive for S. neurona antigens. From the ranches, 76.8% (43/56) presented at least one positive horse for Sarcocystis spp., 69.6% (39/56) for Neospora spp., and 55.4% (31/56) for T. gondii. Thirteen (14.3%) horses had antibodies against all agents, 50 (16.5%) had antibodies against Sarcocystis spp. and Neospora spp., 10 (3.3%) for Neospora spp. and T. gondii, and eight (2.6%) for Sarcocystis spp. and T. gondii. Associated variables (P0.05) for antibodies against Neospora spp. were not found in horses fed on rented pastures, not in horses without veterinary assistance and stables, and not in herds up to 5 horses; while they were associated for T. gondii by contact with cats, in the Lavradeiro breed with use of stables, in horses raise with cattle, and in herds up to 5 horses. There were no variables associated with the presence of antibodies against S. neurona. Antibodies against S. neurona, Neospora spp. and T. gondii were reported in horses from the state of Roraima, Northern Brazilian Amazon, highlighting to the elevate prevalence on ranches.

RESUMO: Amostras de sangue de 303 equinos provenientes de 56 propriedades do município de Rorainópolis, Roraima, foram avaliadas por Reação de Imunofluorescência Indireta (RIF) para pesquisa de anticorpos contra Sarcocystis neurona, Toxoplasma gondii e Neospora spp. Algumas amostras de soros positivos para Sarcocystis spp. foram avaliadas pelo Western Blotting (WB) utilizando antígenos crus de S. neurona. A partir dos resultados sorológicos, possíveis fatores de risco foram avaliados frente a variáveis individuais e de propriedade. A prevalência de anticorpos anti-Sarcocystis spp. foi estimada em 43,2% (37,6-49,0%), anti-Neospora sp. em 26,7% (21,9-32,2%) e anti-T. gondii de 18,5% (14,3-23,4%). Quatorze amostras (14/15) testadas por WB resultaram positivas para antígenos de S. neurona. Das propriedades, 76,8% (43/56) apresentaram pelo menos um equino positivo para Sarcocystis spp.; 69,6% (39/56) para Neospora spp. e 55,4% (31/56) para T. gondii. Dos equinos, 13 (4,3%) apresentarem anticorpos para os três agentes, 50 (16,5%) para Sarcocystis spp. e Neospora spp., 10 (3,3%) para Neospora spp. e T. gondii, e oito (2,6%) para Sarcocystis spp. e T. gondii. As variáveis associadas (P0,05) à presença de anticorpos foram: para Neospora spp. não pastejar em áreas alugadas, ausência de assistência veterinária na propriedade, sexo masculino, não estabular animais e plantel equino acima de 5 animais; enquanto para T. gondii foram o contato com felinos, animais da raça lavradeiro, animal estabulado, criação de bovinos na propriedade e plantel equino acima de 5 animais. Não houveram variáveis associadas a presença de anticorpos contra S. neurona. Relata-se no presente estudo a primeira detecção de anticorpos anti-S. neurona, Neospora spp. e T. gondii em equinos do estado de Roraima, localizado na Amazônia Setentrional Brasileira, ressaltando para a elevada frequência de fazendas com equinos soropositivos.