Sarcocystis spp. detection in cattle using different diagnostic methods / Detecção de Sarcocystis spp. em bovinos usando diferentes métodos de diagnóstico

Cattle are considered intermediate hosts of Sarcocystis, which can cause clinical signs and lower performance in the acute phase of infection. Sarcocystis spp. are usually not visible to the naked eye during the post mortem inspection. Moreover, fresh microscopic examination and transmission electron microscopy techniques are difficult to apply to large samples. Therefore, extensive studies on Sarcocystis infection in cattle using molecular and serological methods are required. Here, we investigated Sarcocystis spp. infection in cattle using fresh microscopic examination and polymerase chain reaction of myocardium samples and compared the results with the presence of antibodies against Sarcocystis spp. in corresponding serum samples detected using indirect fluorescent antibody test. Microscopic Sarcocystis were observed in 100% of the myocardial samples, and Sarcocystis DNA was present in 86% (43/50) of these samples. Antibodies against Sarcocystis spp. were detected in 96% (48/50) and 80% (40/50) of the serum samples at 1:25 and 1:200 dilutions, respectively. The three associated methods (fresh microscopic examination, PCR and serology) showed good sensitivity and detection for Sarcocystis spp. compared with fresh microscopic examination (only), and they may facilitate diagnosis in live animals on a large scale as well as monitoring of the herd status.

Os bovinos são considerados hospedeiros intermediários de Sarcocystis, podendo causar sinais clínicos e menor desempenho na fase aguda da infecção. Sarcocystis spp. geralmente não são visíveis a olho nu durante a inspeção post mortem. Além disso, o exame microscópico a fresco e as técnicas de microscopia eletrônica de transmissão são difíceis de aplicar a uma amostras de grande tamanho. Portanto, são necessários extensos estudos sobre a infecção por Sarcocystis em bovinos usando métodos moleculares e sorológicos. Aqui, investigamos a infecção de Sarcocystis spp. em bovinos por meio de exame microscópico a fresco e reação em cadeia da polimerase de amostras de miocárdio e comparado os resultados com a presença de anticorpos contra Sarcocystis spp. em amostras de soro correspondentes detectadas usando o teste de anticorpos fluorescentes indiretos. Sarcocistos microscópicos foram observados em 100% das amostras de miocárdio, e o DNA de Sarcocystis estava presente em 86% (43/50) dessas amostras. Anticorpos contra Sarcocystis spp. foram detectados em 96% (48/50) e 80% (40/50) das amostras de soro nas diluições 1:25 e 1:200, respectivamente. Os três métodos associados (exame microscópico a fresco, PCR e sorologia) mostraram boa sensibilidade e detecção para Sarcocystis spp. em comparação com o exame microscópico fresco (apenas) e podem facilitar o diagnóstico em animais vivos em larga escala, bem como o monitoramento do status do rebanho.

Reactivity against Sarcocystis neurona and Sarcocystis falcatula-like in horses from Southeastern and Midwestern Brazil / Reatividade contra Sarcocystis neurona e Sarcocystis falcatula-like em equinos das regiões Sudeste e Centro-Oeste do Brasil

Equine protozoal myeloencephalitis (EPM) is a neurological disease caused by Sarcocystis neurona. Immunofluorescence antibody tests (IFATs) have been widely used to identify exposure of horses to S. neurona in Brazil. Here we used IFAT to search for IgG antibodies against Sarcocystis falcatula-like (Dal-CG23) and S. neurona (SN138) in sera from 342 horses sampled in Campo Grande, Mato Grosso do Sul state (Midwestern), and São Paulo, São Paulo state (Southeastern), Brazil. The 1:25 cutoff value was chosen to maximize sensitivity of the test. IgG antibodies against S. neurona were detected in 239 horses (69.88%), whereas IgG antibodies against S. falcatula-like were detected in 177 horses (51.75%). Sera from 132 horses (38.59%) reacted against both isolates. Absence of reactivity was evidenced in 58/342 horses (16.95%). The lower cutoff used, and the presence of opossums infected with S. falcatula-like and Sarcocystis spp. in the regions where the horses were sampled, might justify the high seroprevalence observed here. Owing to the similarity among antigens targeted in immunoassays, reports on S. neurona-seropositive horses in Brazil may also derive from the exposure of horses to other Sarcocystis species. The role of other Sarcocystis species in causing neurological diseases in horses in Brazil remains unclear.(AU)

Mieloencefalite protozoária equina (MPE) é uma doença neurológica causada por Sarcocystis neurona. Reação de imunofluorescência indireta (RIFI) tem sido utilizada para identificar a exposição de equinos à S. neurona no Brasil. Neste estudo, a RIFI foi utilizada para avaliar a presença de anticorpos IgG anti-Sarcocystis falcatula-like (Dal-CG23) e anti-S. neurona (SN138) no soro de 342 equinos de Campo Grande, Mato Grosso do Sul (Centro-oeste) e São Paulo, São Paulo (Sudeste), Brasil. O ponto de corte de 1:25 foi escolhido para maximizar a sensibilidade. Anticorpos IgG anti-S. neurona foram detectados em 239 cavalos (69,88%), enquanto anticorpos IgG anti-S. falcatula-like foram detectados em 177 cavalos (51,75%). O soro de 132 animais (38,59%) reagiu contra ambos os isolados. A ausência de reatividade foi evidenciada em 58/342 animais (16,95%). O baixo ponto de corte e a presença de gambás infectados com S. falcatula-like e Sarcocystis spp., nas regiões onde os equinos foram amostrados podem justificar a alta soroprevalência aqui observada. Devido à similaridade entre antígenos de superfície detectados nos imunoensaios, relatos de soropositividade contra S. neurona no Brasil podem resultar da exposição dos equinos a outras espécies de Sarcocystis. O papel de outras espécies de Sarcocystis como causa de doença neurológica em equinos no Brasil permanece incerto.(AU)

Molecular diversity of Sarcocystis spp. in opossums (Didelphis spp.) from Southeastern and Midwestern Brazil / Diversidade molecular de Sarcocystis spp. em gambás (Didelphis spp.) do Sudeste e Centro-oeste do Brasil

South American opossums (Didelphis spp.) are definitive hosts of Sarcocystis neurona, Sarcocystis speeri, Sarcocystis lindsayi and Sarcocystis falcatula. In Brazil, diverse studies have demonstrated a high frequency of Sarcocystis falcatula-like in sporocysts derived from opossums, and high genetic diversity has been observed in surface antigen-encoding genes (SAGs). In this study, genetic diversity of Sarcocystis spp. derived from Didelphis albiventris and Didelphis aurita from the cities of Campo Grande and São Paulo, was accessed by sequencing SAG2, SAG3, SAG4, the first internal transcribed spacer (ITS-1) and cytochrome c oxidase subunit I (cox1). Molecular identification was performed for 16 DNA samples obtained from sporocyst or culture-derived merozoites. The ITS-1, cox1, and SAG3 fragments were cloned, whereas SAG2 and SAG4 were sequenced directly from PCR products. Four alleles variants were found for SAG2, 13 for SAG3 and seven for SAG4, from which four, 13 and four, respectively, were novel. Twenty-seven allele variants were found for ITS-1, all phylogenetically related to S. falcatula-like previously described in Brazil. Sarcocystis sp. phylogenetically related to Sarcocystis rileyi was evidenced by cox1 in three opossums. Further studies are needed to clarify the role of Didelphis spp. as definitive hosts of Sarcocystis spp. other than that previous described.(AU)

Gambás sul-americanos (Didelphis spp.) são hospedeiros definitivos de Sarcocystis neurona, Sarcocystis speeri, Sarcocystis lindsayi e Sarcocystis falcatula. No Brasil, diversos estudos têm demonstrado alta frequência de Sarcocystis falcatula-like em esporocistos derivados de gambás, com grande diversidade nos genes que codificam antígenos de superfície (SAGs). Neste estudo, a diversidade genética de Sarcocystis spp., oriundos de Didelphis albiventris e Didelphis aurita, dos municípios de Campo Grande e São Paulo, foi acessada por meio do sequenciamento de SAG2, SAG3 e SAG4, da primeira região espaçadora interna transcrita (ITS-1) e citocromo c oxidase subunidade I (cox1). Identificação molecular foi realizada em 16 amostras de DNA, obtidas de esporocistos ou merozoítos derivados de cultivo. Os fragmentos de ITS-1, cox1 e SAG3 foram clonados, enquanto SAG2 e SAG4 foram sequenciados diretamente dos produtos de PCR. Quatro alelos foram observados em SAG2, 13 em SAG3 e sete em SAG4, sendo novos quatro, 13 e quatro, respectivamente. Em ITS-1, 27 alelos foram observados, todos filogeneticamente relacionados à S. falcatula-like, previamente detectados no Brasil. Sarcocystis sp. filogeneticamente relacionado à Sarcocystis rileyi foi evidenciado por cox1 em três gambás. Mais estudos são necessários para entender o papel de Didelphis spp. como hospedeiro definitivo de Sarcocystis spp. diferentes daqueles previamente descritos.(AU)

Detection of Sarcocystis spp. and Toxoplasma gondii in swine and detection of DNA of these protozoa in tissues and sausages / Soroprevalência de Sarcocystis spp. e Toxoplasma gondii em suínos e detecção do DNA desses protozoários em tecidos e embutidos

Abstract The seroprevalence of Sarcocystis spp. and Toxoplasma gondii was researched in swine raised in Santa Maria, RS, Brazil. Serum samples from 84 pigs from 31 farms were tested using indirect immunofluorescence assay (IFA) for both agents. Additionally, 53 samples of pork sausages and tissues destined for human consumption, including: salami, sausage, black pudding, heart, tongue, brain, and rib muscle, were submitted to PCR to detect DNA for each agent. The frequency of anti-Sarcocystis spp. antibodies was 36.9% (31/84), with titers ranging from 32 to 1024, and 25% (21/84) for anti-T. gondii antibodies, with titers ranging from 64 to 2048. Sarcocystis spp. and T. gondii DNA were detected in 67.9% (36/53) and 13.2% (7/53) of samples, respectively. The presence of antibodies and the detection of DNA from Sarcocystis spp., and T. gondii suggests that the pigs were infected and may serve as an important reservoir for both parasites. The infection by these protozoa in the swine population is relevant to public health due to their zoonotic potential.

Resumo A soroprevalência de Sarcocystis spp. e Toxoplasma gondii foi pesquisada em suínos criados em Santa Maria, RS, Brasil. Amostras de soro de 84 suínos de 31 fazendas foram testadas pela reação deimunofluorescência indireta (IFA) para ambos os agentes. Adicionalmente, 53 amostras de embutidos suínos e tecidos cárneos destinados ao consumo humano, incluindo: salame, linguiça, morcela, coração, língua, cérebro e músculo da costela foram submetidas à PCR para detecção de DNA para cada agente. A frequência de anticorpos anti-Sarcocystis spp. foi de 36,9% (31/84), com títulos variando de 32 a 1.024; e 25% (21/84) para anticorpos anti-T. gondii, com títulos variando de 64 a 2048. A presença de DNA de Sarcocystis spp. e T. gondii foi detectada em 67,9% (36/53) e 13,2% (7/53) das amostras avaliadas, respectivamente. A detecção de anticorpos e DNA de Sarcocystis spp. e T. gondii sugere que os suínos foram infectados e podem servir como um importante reservatório de ambos os parasitas. A circulação desses agentes na população suína é relevante para a saúde pública devido ao seu potencial zoonótico.

Epidemiological aspects of the occurrence of anti-Sarcocystis spp. andanti-Toxoplasma gondii antibodies in dogs in the Northern region of Brazil / Aspectos epidemiológicos da ocorrência de anticorpos anti-Sarcocystisspp. e anti-Toxoplasma gondii em cães da região norte do Brasil

We conducted aseroepidemiological study on the occurrence of anti-Sarcocystisspp. and anti-Toxoplasma gondii antibodies in dogs from family farming properties in the municipality of Ji-Paraná, Rondônia.Blood samples were collected from apparently healthy dogs between September 2012 and November 2013. In total, 181 blood serum samples were analyzed using an indirect immunofluorescence assay, among which 57 (31.49%) and 20 (11.04%) were positive for anti-T. gondii and anti-Sarcocystis spp., respectively. Statistical analyses showed that the type of food fed to the dogs was associated with the occurrence of anti-Sarcocystisspp. antibodies. In contrast, age and access to bovine carcasses were the risk factors for anti-T. gondii.The high occurrence of seropositive dogs for Sarcocystis spp. and T. gondii evidences the wide distribution of these agents in the studied area, possibly due to human and animal exposure to these protozoan species. In addition, anti-T. gondii antibodies were directly proportional to dog age. The increase in the number of positive animals with age was statistically significant. Furthermore, high antibody titers (up to 800) against Sarcocystis spp. in dogs suggest the possibility of recent exposure, in addition to environmental contamination by oocysts/sporocysts eliminated by the feces of these animals.

Conduzimos um estudo soroepidemiológico sobre a ocorrência de anticorpos anti- Sarcocystis spp. e anti-Toxoplasma gondiiem cães de propriedades de agricultura familiar no município de Ji-Paraná, Rondônia. Amostras de sangue foram coletadas de cães aparentemente saudáveis, entre setembro de 2012 e novembro de 2013. Ao todo, foram analisados 181 soros sanguíneos por meio do ensaio de imunofluorescência indireta, sendo positivas 57 (31,49%) e 20 (11,04%) amostras para anticorpos anti-T. gondii e anti-Sarcocystis spp., respectivamente. As análises estatísticas demonstraram que o tipo de alimentação fornecida aos cães esteve associado à ocorrência de anticorpos anti-Sarcocystis spp. Em contraste a idade e o acesso à carcaça bovina foram fatores de risco para a presença de anticorpos anti-T. gondii. A alta ocorrência de cães soropositivos para Sarcocystis spp. e T. gondii evidencia a ampla distribuição desses agentes na área estudada, possivelmente devido à exposição humana e animal a essas espécies de protozoários. Além disso, o resultado dos anticorpos anti-T. gondii relacionados a idade do cão mostraram diferença estatística, com aumento significativo no número de animais positivos com a idade. Além disso, altos títulos de anticorpos (até 800) contra Sarcocystis spp. em cães sugerem a possibilidade de exposição recente, além da contaminação ambiental por oocistos/esporocistos eliminados pelas fezes desses animais.

Sarcocystis neurona and related Sarcocystis spp. shed by opossums (Didelphis spp.) in South America / Sarcocystis neurona e Sarcocystis spp. relacionados, excretados por gambás (Didelphis spp.) na América do Sul

Abstract Protozoan parasites of the genus Sarcocystis are obligatory heteroxenous cyst-forming coccidia that infect a wide variety of animals and encompass approximately 200 described species. At least four Sarcocystis spp. (S. falcatula, S. neurona, S. lindsayi and S. speeri) use opossums (Didelphis spp.) as definitive hosts, and two of them, S. neurona and S. falcatula, are known to cause disease in horses and birds, respectively. Opossums are restricted to the Americas, but their distribution in the Americas is heterogeneous. Five Didelphis spp. are distributed in South America (D. aurita, D. albiventris, D. marsupialis, D. imperfecta and D. pernigra) whereas just one opossum species (D. virginiana) is found in North America. Studies conducted in the last decades show that Sarcocystis spp., derived from South American Didelphis spp., have biological and genetic differences in relation to Sarcocystis spp. shed by the North American opossum D. virginiana. The aim of this review was to address the peculiar scenario of Sarcocystis species shed by South American opossums, with a special focus on diagnosis, epidemiology, and animal infections, as well as the genetic characteristics of these parasites.

Resumo Parasitos protozoários do gênero Sarcocystis são coccídios heteroxenos formadores de cistos, que infectam variadas espécies animais e compreendem cerca de 200 espécies descritas. Pelo menos quatro Sarcocystis spp. (S. falcatula, S. neurona, S. lindsayi e S. speeri) utilizam gambás (Didelphis spp.) como hospedeiros definitivos; e duas delas, S. neurona and S. falcatula são conhecidas por causarem doença em equinos e aves, respectivamente. Gambás didelfídeos são restritos ao continente americano, contudo são distribuídos de forma heterogênea nas Américas. Cinco Didelphis spp. são distribuídos na América do Sul (D. aurita, D. albiventris, D. marsupialis, D. imperfecta e D. pernigra), enquanto somente uma espécie (D. virginiana) é encontrada na América do Norte. Trabalhos conduzidos, nas últimas décadas, mostram que Sarcocystis spp. derivados de Didelphis spp. sul-americanos possuem diferenças biológicas e genéticas, quando comparados a Sarcocystis spp. excretados pelo gambá norte-americano D. virginiana. O objetivo desta revisão é discutir a situação peculiar das espécies de Sarcocystis na América do Sul com um foco especial em diagnóstico, epidemiologia e infecções animais, assim como nas características genéticas desses parasitos.

Sarcocystis neurona, seroprevalence of antibodies in equines and research of oocystis in opossum in Ilhéus - Itabuna microregion, Bahia, Brazil / Sarcocystis neurona, seroprevalência de anticorpos em equinos e pesquisa de oocistos em gambás na microrregião de Ilhéus - Itabuna, Bahia, Brasil

Abstract The aims of this study were to determine the seroprevalence of Sarcocystis neurona antibodies in equines in the Ilhéus-Itabuna microregion (BA), and identify possible factors associated with infection. The presence of sporocysts/oocysts of Sarcocystis spp. was also verified in Didelphis spp. A total of 669 serum samples were collected from equines in 56 properties located in 12 municipalities in the region. Indirect fluorescent antibody test was performed with slides containing merozoites of the S. neurona, using a cut-off titer of 1:80. Occurrence of 7.92% of anti-S. neurona antibodies was observed in the sampled equines. The purposes trade and work were significantly associated with the presence of antibodies (p<0.05), and being used for the purpose of work (21.6%) was considered a risk factor, while being used for the purpose of trade (3.6%) was a protective factor. A total of 25 Didelphis spp. was captured for research on sporocysts/oocysts in stool samples and intestinal scrapings, being all negative. Didelphis spp. were all negative for the presence of Sarcocystis spp. and this circumstance does not change the fact that seroprevalence of S. neurona has been observed in horses raised in the southern Bahia.

Resumo O presente estudo foi realizado na microrregião de Ilhéus-Itabuna, Bahia. Os objetivos deste estudo foram determinar a soroprevalência de anticorpos contra Sarcocystis neurona em equinos da microrregião Ilhéus-Itabuna (BA) e identificar possíveis fatores associados à infecção. A presença de esporocistos/oocistos de Sarcocystis spp. também foi pesquisada em Didelphis spp. Foram coletadas 669 amostras de soro de equinos em 56 propriedades localizadas em 12 municípios da região. Foi utilizada a reação de imunofluorescência indireta (RIFI), utilizando-se lâminas confeccionadas com merozoítos de Sarcocystis neurona (cepa SN138) e ponto de corte na diluição de 1:80. A ocorrência de anticorpos anti- S. neurona, nos equinos amostrados, foi de 7,92%. As finalidades dos animais - comércio e trabalho - apresentaram-se significativas (p<0.05), sendo que a finalidade trabalho (21,6%) foi considerada fator de risco, enquanto a finalidade comércio (3,6%) foi considerada fator de proteção. Foram capturados 25 Didelphis spp., para pesquisa de esporocistos/oocistos em amostras de fezes e raspado de mucosa intestinal. Todos os Didelphis spp. foram negativos para a presença de Sarcocystis spp., mesmo assim essa circunstância não alterou o fato da ocorrência de S. neurona ter sido observada em cavalos criados na mesorregião do sul da Bahia.

Macroscopic, histological, and molecular aspects of Sarcocystis spp. infection in tissues of cattle and sheep / Aspecto Macroscópico, histológico e molecular de Sarcocystis spp. em tecidos de bovinos e ovinos

Abstract The macroscopic, histological, and molecular aspects of Sarcocystis spp. were examined in the tissues of two cattle and four sheep, 16 and eight fragments analyzed respectively, condemned in the slaughterhouse. All 24 samples were collected and analyzed for detecting macrocysts and macroscopic lesions. Subsequently, subdivided for direct examination, polymerase chain reaction and histopathological examination. All sheep tissues samples had grossly white round to oval tissue cysts, ranging from 0.3 to 1 cm in diameter. In contrast, cattle tissues did not present grossly visible cysts but had randomly distributed white-yellow foci with irregular contours. All samples from cattle and sheep had microscopic cysts. In the histological examination of sheep tissues, circular to elongated, encapsulated, basophilic structures ranging from 30 to 3,000 µm in length and 20 to 1,000 µm in width were observed within the skeletal muscle fibers. In cattle tissues, all cardiac muscle four fragments analyzed contained circular to elongated basophilic structures inside cardiomyocytes and in some Purkinje fibers. PCR were performed using the primers: 2L and 3H. In conclusion, all 24 tissues were infected with Sarcocystis spp., and S. gigantea (in sheep) and S. cruzi (in cattle). were the identified species by sequencing.

Resumo Os aspectos macroscópicos, histológicos e moleculares de Sarcocystis spp. foram examinados nos tecidos de dois bovinos e quatro ovinos, 16 e oito fragmentos analisados, respectivamente, condenados no matadouro. Todas as 24 amostras foram coletadas e analisadas para detecção de macrocistos e lesões macroscópicas. Posteriormente, subdivididas para exame direto, reação em cadeia da polimerase e exame histopatológico. Todas as amostras de tecidos de ovelha apresentavam cistos grosseiramente visíveis, caracterizados como brancos, de redondos a ovais e estruturas variando de 0,3 a 1 cm de diâmetro. Em contraste, os tecidos de bovinos não apresentavam cistos grosseiramente visíveis, mas tinham focos branco-amarelos com contornos irregulares, distribuídos aleatoriamente. Todas as amostras de bovinos e ovinos apresentavam cistos microscópicos. No exame histológico de tecidos ovinos foram observadas estruturas basofílicas circulares a alongadas, encapsuladas, variando de 30 a 3.000 µm de comprimento e 20 a 1.000 µm de largura dentro das fibras do músculo esquelético. Nos tecidos de bovinos, todos os quatro fragmentos de músculo cardíaco analisados continham estruturas basofílicas circulares a alongadas, dentro dos cardiomiócitos e em algumas fibras de Purkinje. PCRs foram realizadas utilizando-se os "primers" 2L e 3H. Em conclusão, todos os 24 tecidos estavam infectados com Sarcocystis spp., sendo S. gigantea (em ovinos) e S. cruzi (em bovinos) as espécies identificadas por sequenciamento.

Performance of the Dot-blot test method for detecting antibodies to Sarcocystis spp. in cattle / Desempenho do teste Dot-blot para detecção de anticorpos para Sarcocystis spp. em bovinos

Serological techniques can detect antibodies against Sarcocystis spp., Neospora caninum and Toxoplasma gondii antigens in single or mixed infections. Immunofluorescent antibody tests (IFAT) is considered the gold standard technique for Sarcocystosis diagnostic in cattle serum and a positive IFAT result reflects Sarcocystis spp. infection. Therefore, the aims of the present study were to compare IFAT and Dot-blot for sarcocystosis diagnostic in experimentally infected mice and to investigate serological cross-reactions with N. caninum and T. gondii in these methods. Mice (Mus musculus) were inoculated intraperitoneally with bradizoites of Sarcocystis spp. or tachyzoites of N. caninum or T. gondii. Serum samples were obtained and analyzed by IFAT and Dot-blot for the three protozoa. Serum from N. caninum and T. gondii experimentally infected mice were tested by IFAT and reacted only to N. caninum or T. gondii antigens, respectively. Specific antibodies against Sarcocystis spp. were present in all animals experimentally infected with this protozoan, with IFAT titers from 10 to 800. Serum samples from mice experimentally infected with Sarcocystis spp., N. caninum and T. gondii and tested by Dot-blot demonstrated no cross reaction between protozoa. A Dot-blot using Sarcocystis spp. antigen appears to be a good alternative to IFAT in the serological diagnosis of Sarcocystosis.(AU)

As técnicas sorológicas podem detectar anticorpos contra os antígenos de Sarcocystis spp., Neospora caninum e Toxoplasma gondii em infecções únicas ou mistas. O teste de anticorpos imunofluorescentes (IFAT) é considerado a técnica padrão-ouro para o diagnóstico de sarcocistose no soro de bovinos e um resultado positivo de IFAT reflete Sarcocystis spp. infecção. Portanto, os objetivos do presente estudo foram comparar IFAT e Dot-blot para diagnóstico de sarcocistose em camundongos infectados experimentalmente e investigar reações cruzadas sorológicas com N. caninum e T. gondii nesses métodos. Os camundongos (Mus musculus) foram inoculados intraperitonealmente com bradizoítos de Sarcocystis spp. ou taquizoítos de N. caninum ou T. gondii. As amostras de soro foram obtidas e analisadas por IFAT e Dot-blot para os três protozoários. O soro de N. caninum e T. gondii infectados experimentalmente foram testados por IFAT e reagiram apenas aos antígenos de N. caninum ou T. gondii, respectivamente. Anticorpos específicos contra Sarcocystis spp. estavam presentes em todos os animais experimentalmente infectados com este protozoário, com títulos de IFAT de 10 a 800. Amostras de soro de camundongos infectados experimentalmente com Sarcocystis spp., N. caninum e T. gondii e testadas por Dot-blot não demonstraram reação cruzada entre protozoários. Um Dot-blot usando Sarcocystis spp. O antígeno parece ser uma boa alternativa ao IFAT no diagnóstico sorológico da sarcocistose.(AU)

Performance of the Dot-blot test method for detecting antibodies to Sarcocystis spp. in cattle / Desempenho do teste Dot-blot para detecção de anticorpos para Sarcocystis spp. em bovinos

Serological techniques can detect antibodies against Sarcocystis spp., Neospora caninum and Toxoplasma gondii antigens in single or mixed infections. Immunofluorescent antibody tests (IFAT) is considered the gold standard technique for Sarcocystosis diagnostic in cattle serum and a positive IFAT result reflects Sarcocystis spp. infection. Therefore, the aims of the present study were to compare IFAT and Dot-blot for sarcocystosis diagnostic in experimentally infected mice and to investigate serological cross-reactions with N. caninum and T. gondii in these methods. Mice (Mus musculus) were inoculated intraperitoneally with bradizoites of Sarcocystis spp. or tachyzoites of N. caninum or T. gondii. Serum samples were obtained and analyzed by IFAT and Dot-blot for the three protozoa. Serum from N. caninum and T. gondii experimentally infected mice were tested by IFAT and reacted only to N. caninum or T. gondii antigens, respectively. Specific antibodies against Sarcocystis spp. were present in all animals experimentally infected with this protozoan, with IFAT titers from 10 to 800. Serum samples from mice experimentally infected with Sarcocystis spp., N. caninum and T. gondii and tested by Dot-blot demonstrated no cross reaction between protozoa. A Dot-blot using Sarcocystis spp. antigen appears to be a good alternative to IFAT in the serological diagnosis of Sarcocystosis.(AU)

As técnicas sorológicas podem detectar anticorpos contra os antígenos de Sarcocystis spp., Neospora caninum e Toxoplasma gondii em infecções únicas ou mistas. O teste de anticorpos imunofluorescentes (IFAT) é considerado a técnica padrão-ouro para o diagnóstico de sarcocistose no soro de bovinos e um resultado positivo de IFAT reflete Sarcocystis spp. infecção. Portanto, os objetivos do presente estudo foram comparar IFAT e Dot-blot para diagnóstico de sarcocistose em camundongos infectados experimentalmente e investigar reações cruzadas sorológicas com N. caninum e T. gondii nesses métodos. Os camundongos (Mus musculus) foram inoculados intraperitonealmente com bradizoítos de Sarcocystis spp. ou taquizoítos de N. caninum ou T. gondii. As amostras de soro foram obtidas e analisadas por IFAT e Dot-blot para os três protozoários. O soro de N. caninum e T. gondii infectados experimentalmente foram testados por IFAT e reagiram apenas aos antígenos de N. caninum ou T. gondii, respectivamente. Anticorpos específicos contra Sarcocystis spp. estavam presentes em todos os animais experimentalmente infectados com este protozoário, com títulos de IFAT de 10 a 800. Amostras de soro de camundongos infectados experimentalmente com Sarcocystis spp., N. caninum e T. gondii e testadas por Dot-blot não demonstraram reação cruzada entre protozoários. Um Dot-blot usando Sarcocystis spp. O antígeno parece ser uma boa alternativa ao IFAT no diagnóstico sorológico da sarcocistose.(AU)

Sarcocystis spp. in red deer (Cervus elaphus), fallow deer (Dama dama), and pudu (Pudu pudu) in southern Chile / Sarcocystis spp. em veado (Cervus elaphus), Gamo (Dama dama) e Pudu (Pudu pudu) no sul do Chile

Worldwinde, cervids are considered an important source of infection and dissemination of a wide variety of pathogens, both for farm animals and humans. Among this diseases is sarcosporidiosis, which is a parasitic disease caused by Sarcocystis spp. (Protozoa: Apicomplexa). Most frequent clinical signs are hemolytic anemia, weakness, weight loss and decrease of growth and some species of Sarcocystis might cause abortions. The clinical disease in ruminants is fairly rare but the infection is very frequent. Infections are accumulative and the parasite does not generate immunity in any of the hosts. Ovine sarcosporidiosis is a serious issue in the some regions of Chile due to the macrocysts located in the muscle which means condemnation of the whole carcass. Sarcocystis spp. has been widely reported in red deer and other cervid species but in Chile the situation remains unknown. Nowadays there is little to no evidence of Sarcocystis in foreign deer in Chile and there is only one report of the parasite on pudu. The main goal of this study is to demonstrate the presence of Sarcocystis spp. in myocardium of red deer and fallow deer in Chile, and confirm the presence of Sarcocystis spp. in pudu. All cervid cases from 1994 to 2013 of the Institute of Animal Pathology of the Universidad Austral de Chile were reviewed. The animals selected were those in which a myocardium sample was taken. From the histopathological samples observed, it was found that 5 of the 9 red deer, 1 of the 4 fallow deer and in 11 of the 23 pudu there were Sarcocystis cysts in the myocardium. This study represents the first record for Chile of Sarcocystis spp. in myocardium of red deer and fallow deer. Stablishing the red deer, fallow deer and pudu as hosts of Sarcocystis aids to have a better understanding of the parasite epidemiology in Chile and the role of wild and captive cervids in the maintenance and spread of these parasites.(AU)

No mundo, os cervos são considerados uma fonte de infecção e propagação de uma grande variedade de patógenos para animais de criação e para os seres humanos. Entre estas doenças está a sarcosporidiosis, que é uma doença parasitária causada por Sarcocystis spp. (Protozoa: Apicomplexa). Os sinais clínicos mais comuns são anemia hemolítica, fraqueza, perda de peso e diminuição do crescimento e em algumas espécies de Sarcocystis podem causar abortos. A doença clínica em ruminantes é bastante rara, mas a infecção é muito comum. As infecções são cumulativos e o parasita não gera imunidade em nenhum dos seus hospedeiros. A Sarcosporidiosis ovina é um problema grave em algumas regiões do Chile devido a microcistos localizados no músculo provocando a reprovação total da carcaça. Sarcocystis spp. tem sido amplamente relatado em cervos vermelhos e outras espécies de cervídeos, mas no Chile a sua situação permanece desconhecida. Atualmente há pouca ou nenhuma evidência de Sarcocystis em cervos introduzidos no Chile e há apenas um relatório do parasita em pudú. O principal objetivo deste estudo é demonstrar a presença de Sarcocystis spp. no miocárdio no veado vermelho e cervo gamo no Chile e confirmar a presença de Sarcocystis spp. em pudus. Revisaram-se todos os casos de cervos desde 1994-2013 do Instituto de Patologia Animal da Universidad Austral de Chile. Os animais selecionados para o estudo foram aqueles em que se tomou amostra de miocárdio. Das amostras histopatológicas observadas, verificou-se que em cinco dos nove cervos vermelhos, em um dos quatro veados gamo e 11 dos 23 pudus tinham cistos de Sarcocystis no miocárdio. Este estudo representa o primeiro relatório para o Chile de Sarcocystis spp. no miocárdio de veados vermelhos e cervo gamo. Definir o veado vermelho, o cervo gamo e os pudú como anfitriões de Sarcocystis ajuda a uma melhor compreensão da epidemiologia deste parasita no Chile e o papel de cervos selvagens e em cativeiro para a manutenção e divulgação deste parasita.(AU)

Sarcocystis spp. in red deer (Cervus elaphus), fallow deer (Dama dama), and pudu (Pudu pudu) in southern Chile / Sarcocystis spp. em veado (Cervus elaphus), Gamo (Dama dama) e Pudu (Pudu pudu) no sul do Chile

Worldwinde, cervids are considered an important source of infection and dissemination of a wide variety of pathogens, both for farm animals and humans. Among this diseases is sarcosporidiosis, which is a parasitic disease caused by Sarcocystis spp. (Protozoa: Apicomplexa). Most frequent clinical signs are hemolytic anemia, weakness, weight loss and decrease of growth and some species of Sarcocystis might cause abortions. The clinical disease in ruminants is fairly rare but the infection is very frequent. Infections are accumulative and the parasite does not generate immunity in any of the hosts. Ovine sarcosporidiosis is a serious issue in the some regions of Chile due to the macrocysts located in the muscle which means condemnation of the whole carcass. Sarcocystis spp. has been widely reported in red deer and other cervid species but in Chile the situation remains unknown. Nowadays there is little to no evidence of Sarcocystis in foreign deer in Chile and there is only one report of the parasite on pudu. The main goal of this study is to demonstrate the presence of Sarcocystis spp. in myocardium of red deer and fallow deer in Chile, and confirm the presence of Sarcocystis spp. in pudu. All cervid cases from 1994 to 2013 of the Institute of Animal Pathology of the Universidad Austral de Chile were reviewed. The animals selected were those in which a myocardium sample was taken. From the histopathological samples observed, it was found that 5 of the 9 red deer, 1 of the 4 fallow deer and in 11 of the 23 pudu there were Sarcocystis cysts in the myocardium. This study represents the first record for Chile of Sarcocystis spp. in myocardium of red deer and fallow deer. Stablishing the red deer, fallow deer and pudu as hosts of Sarcocystis aids to have a better understanding of the parasite epidemiology in Chile and the role of wild and captive cervids in the maintenance and spread of these parasites.(AU)

No mundo, os cervos são considerados uma fonte de infecção e propagação de uma grande variedade de patógenos para animais de criação e para os seres humanos. Entre estas doenças está a sarcosporidiosis, que é uma doença parasitária causada por Sarcocystis spp. (Protozoa: Apicomplexa). Os sinais clínicos mais comuns são anemia hemolítica, fraqueza, perda de peso e diminuição do crescimento e em algumas espécies de Sarcocystis podem causar abortos. A doença clínica em ruminantes é bastante rara, mas a infecção é muito comum. As infecções são cumulativos e o parasita não gera imunidade em nenhum dos seus hospedeiros. A Sarcosporidiosis ovina é um problema grave em algumas regiões do Chile devido a microcistos localizados no músculo provocando a reprovação total da carcaça. Sarcocystis spp. tem sido amplamente relatado em cervos vermelhos e outras espécies de cervídeos, mas no Chile a sua situação permanece desconhecida. Atualmente há pouca ou nenhuma evidência de Sarcocystis em cervos introduzidos no Chile e há apenas um relatório do parasita em pudú. O principal objetivo deste estudo é demonstrar a presença de Sarcocystis spp. no miocárdio no veado vermelho e cervo gamo no Chile e confirmar a presença de Sarcocystis spp. em pudus. Revisaram-se todos os casos de cervos desde 1994-2013 do Instituto de Patologia Animal da Universidad Austral de Chile. Os animais selecionados para o estudo foram aqueles em que se tomou amostra de miocárdio. Das amostras histopatológicas observadas, verificou-se que em cinco dos nove cervos vermelhos, em um dos quatro veados gamo e 11 dos 23 pudus tinham cistos de Sarcocystis no miocárdio. Este estudo representa o primeiro relatório para o Chile de Sarcocystis spp. no miocárdio de veados vermelhos e cervo gamo. Definir o veado vermelho, o cervo gamo e os pudú como anfitriões de Sarcocystis ajuda a uma melhor compreensão da epidemiologia deste parasita no Chile e o papel de cervos selvagens e em cativeiro para a manutenção e divulgação deste parasita.(AU)

Natural Sarcocystis gigantea infection in sheep from Southern Brazil / Infecção natural por Sarcocystis gigantea em ovinos no Rio Grande do Sul

Protozoal diseases caused by species of Sarcocystis can cause serious damage in sheep flocks, inducing decreased growth conversion rates and partial or complete loss of carcasses at the slaughterhouse. This article describes an outbreak of Sarcocystis gigantea infection in sheep slaughtered in a farm in Rio Grande do Sul State, Brazil. Between July and September 2013, three sheep showed multiple nodules in the esophagus that were microscopically characterized as encapsulated cysts filled with elongated, basophilic, nucleated structures morphologically consistent with S. gigantea bradyzoites. Diagnosis was made based on the epidemiological, macroscopic, and microscopic findings. This is the first report of this infection in sheep in Rio Grande do Sul and should be recognized by veterinarians, especially during meat inspection.(AU)

Doenças causadas por protozoários do gênero Sarcocystis podem causar sérios prejuízos em rebanhos de ovinos, por induzirem retardo no crescimento e condenação parcial ou total das carcaças em abatedouro. O presente trabalho descreve a infecção natural por Sarcocystis gigantea em ovinos abatidos em uma propriedade rural no Rio grande do Sul. Entre julho e setembro de 2013, três ovinos apresentaram múltiplos nódulos no esôfago, os quais, microscopicamente, corresponderam a cistos circundados por cápsula rugosa, repletos de estruturas alongadas, basofílicas e nucleadas, morfologicamente compatíveis com bradizoítos de S. gigantea. Os dados epidemiológicos unidos aos achados macroscópicos e microscópicos permitiram o diagnóstico conclusivo. Esse foi o primeiro relato dessa infecção no Rio Grande Sul e deve ser reconhecida por veterinários de campo e especialmente no momento da inspeção das carcaças no abatedouro.(AU)

Investigação de anticorpos contra Sarcocystis neurona e Sarcocystis cruzi em equinos / Investigation of antibodies against Sarcocystis neurona and Sarcocystis cruzi in equines

Sarcocystis neurona is the primary agent for Equine Protozoal Myeloencephalitis (EPM), important neurological disease characterized by behavior or muscular changes, that impairs animal performance and husbandry. Sarcocystis cruzi is a pathogen related to myositis in cattle. Although related the life cycles of the parasites are distinct. S. neurona has opossums (Didelphis spp.) and S. cruzi, dogs as definitive hosts. However, S. neurona and S. cruzi may undergo cross-reactivity in serological tests, interfering on results of EPM ante-mortem diagnostic tests. In the present study, serology of 189 mares was performed by indirect immunofluorescence antibody test, using antigens of S. neurona and S. cruzi in order to assess the exposure degree of animals to antigens. Analyzing the results, it was observed that most of the animals (84.13%) reacted with at least one protozoal species and the number of animals which showed antibodies against S. cruzi was greater than S. neurona (80.42% and 33.86%, respectively) and a third of seropositive animals reacted to antigens of both species.(AU)

Investigação de anticorpos contra Sarcocystis neurona e Sarcocystis cruzi em equinos / Investigation of antibodies against Sarcocystis neurona and Sarcocystis cruzi in equines

Sarcocystis neurona is the primary agent for Equine Protozoal Myeloencephalitis (EPM), important neurological disease characterized by behavior or muscular changes, that impairs animal performance and husbandry. Sarcocystis cruzi is a pathogen related to myositis in cattle. Although related the life cycles of the parasites are distinct. S. neurona has opossums (Didelphis spp.) and S. cruzi, dogs as definitive hosts. However, S. neurona and S. cruzi may undergo cross-reactivity in serological tests, interfering on results of EPM ante-mortem diagnostic tests. In the present study, serology of 189 mares was performed by indirect immunofluorescence antibody test, using antigens of S. neurona and S. cruzi in order to assess the exposure degree of animals to antigens. Analyzing the results, it was observed that most of the animals (84.13%) reacted with at least one protozoal species and the number of animals which showed antibodies against S. cruzi was greater than S. neurona (80.42% and 33.86%, respectively) and a third of seropositive animals reacted to antigens of both species.(AU)

Avaliação de dois métodos de estocagem de amostras teciduais para diagnóstico molecular de Sarcocystis spp

No Brasil existem três espécies de gambás, Didelphis aurita, Didelphis albiventris e Didelphis marsupialis. Entre os diversos agentes patológicos que estes hospedeiros albergam, estão os protozoários do gênero Sarcocystis de grande interesse na medicina veterinária por causar a Mieloencefalite Protozoária Equina (EPM). Com a evolução dos métodos de diagnóstico a biologia molecular possibilitou a identificação de espécies em hospedeiros diferentes. Com isso o presente trabalho tem por objetivo avaliar dois métodos de conservação tecidual com a finalidade de melhorar o diagnóstico molecular. Para tanto, foram utilizados cinco gambás D. aurita para a obtenção dos esporocistos contidos na lâmina própria do intestino delgado. Estes foram extraídos da mucosa após digestão da mesma com hipoclorito de sódio 10%. Após a contagem e morfometria dos esporocistos, cada amostra foi padronizada em inóculos contendo 60 e 120 esporocistos em 1 mL, que foram inoculados em periquitos australianos (Melopsittacus undulatus). Dois periquitos foram inoculados com solução de soro fisiológico, perfazendo um total de 12 periquitos. De todos os periquitos que morreram ou foram eutanasiados no período de quatro meses, foram coletadas amostras de tecidos e conservadas a temperatura de -20 ºC com e sem a imersão em álcool absoluto. Foi realizada a biologia molecular dos esporocistos com o primer ITS 18S 9L/1H. Utilizando este mesmo primer foi realizado o diagnóstico molecular dos seguintes tecidos: coração, língua, coxa, peito, fígado, pulmão e cérebro, com o intuito de comparar a eficiência dos métodos de conservação. Como resultado dos valores morfométricos em micrômetros dos esporocistos obtivemos o comprimento médio de 11,2 ± 0,9 (7-15,6) e largura média de 7,7 ± 0,6 (3,8-10,9). Todas as amostras de raspado de mucosa contendo os esporocistos foram positivas para a PCR utilizando o primer ITS. O método de conservação a -20°C sem e com imersão em álcool absoluto apresentaram eficiência na preservação do DNA dos tecidos, embora não foram encontradas diferenças estatísticas significativas entre os dois métodos avaliados. Nas infecções agudas foram observadas lesões histopatológicas em região hepática e pulmonar, com formação de merontes nos pulmões. Nas infecções crônicas foram encontrados 20 cistos maduros e imaturos nos tecidos do peito, coxa e da língua que mensurados tiveram valores em micrômetros de 25,4 ± 7,1 (12,7-34,8) de largura e 45,9 ± 24,6 (16,8-113,0) de comprimento. Com os resultados obtidos podemos inferir que os gambás D. aurita estão parasitados com espécies de Sarcosystis spp. que tem aves como hospedeiro intermediário.

In Brazil there are three species of possums, Didelphis aurita, Didelphis albiventris and Didelphis marsupialis. Among the various pathological agents that these hosts harbor, protozoa of the genus Sarcocystis is object of great interest in veterinary medicine for causing Equine Protozoan Myeloencephalitis (EPM). With the evolution of diagnostic methods, molecular biology has enabled to identify species in different hosts. Thus, the present work aims to evaluate two methods of tissue conservation in order to improve the molecular diagnosis. For this purpose, five D. aurita possums were used to obtain the sporocysts contained in the small intestine lamina propria. These were extracted from the mucosa after digestion with 10% sodium hypochlorite. After sporocyst counting and morphometry, each sample was standardized on inocula containing 60 and 120 sporocysts in 1 mL, which were inoculated into budgerigars (Melopsittacus undulatus). Two parakeets were inoculated with saline solution, making a total of 12 parakeets. From all the parakeets that died or were euthanized in the period of four months, tissue samples were collected and kept at -20 ºC with and without immersion in absolute alcohol. Molecular biology of the sporocysts was performed with the ITS 18S 9L / 1H primer. Using this same primer, the molecular diagnosis of the following tissues was performed: heart, language, thigh, chest, liver, lung and brain, in order to compare the efficiency of conservation methods. As a result of the morphometric values in micrometers of the sporocysts, we obtained an average length of 11.2 ± 0.9 (7-15.6) and an average width of 7.7 ± 0.6 (3.8-10.9). All mucosa scrape samples containing sporocysts were positive for PCR using the ITS primer. The method of conservation at -20 ° C without and with immersion in absolute alcohol showed efficiency in the preservation of DNA tissue, although no statistically significant differences were found between the two methods evaluated. In acute infections, histopathological lesions were observed in the hepatic and pulmonary regions, with formation of merons in the lungs. In chronic infections, 20 mature and immature cysts were found in the chest thigh and tongue tissues, which were measured with micrometers values of 25.4 ± 7.1 (12.7-34.8) in width and 45.9 ± 24.6 (16.8-113.0) in length. With the results obtained, its possible to infer that D. aurita possums are parasitized with Sarcosystis spp. species that have birds as an intermediate host.

Fatal sarcosporidiosis in a passerine of species Gnorimopsar chopi chopi / Sarcosporidiose fatal em pássaro-preto (Gnorimopsar chopi chopi)

Relata-se um caso fatal de sarcosporidiose em pássaro-preto (melro), Gnorimopsar chopi chopi, caracterizado por intensa prostração, respiração superficial e decúbito lateral. Embora nao tenham sido observadas alterações significativas no sistema respiratório, o quadro clínico confundia-se com doença nesse sistema, em decorrência do comprometimento dos músculos ligados à respiração.(AU)

Ocorrência de neoplasias em bovinos abatidos na região de Barra do Garças, MT / Occurrence of neoplasms in cattle slaughtered in the region of Barra do Garças, MT

Com o incremento da exportação de carne bovina, ocorrida no Brasil, nos útimos anos, tem aumentado o interesse da comunidade científica em conhecer o status sanitário do rebanho bovino brasileiro. Dentre as diversas patologias que acometem os bovinos, as neoplasias têm um lugar de destaque. O objetivo deste trabalho foi estudar a ocorrência de neoplasias em bovinos e, com isto, fornecer dados para os serviços de inspeção sanitária oficiais e entidades ligadas à produção animal, colaborando assim com a produção de produtos de origem animal de qualidade e garantindo ao Brasil a possibilidade de comercializar seus produtos em mercados consumidores exigentes e de acirrada concorrência. Foram colhidas amostras de 78 bovinos e as frequências em ordem crescente das lesões foram: tuberculose 24,3% (23,00% em linfonodos e 1,28% no pulmão); linfoma (leucose enzoótica) (Figura 1) 19,26% (16,70% nos linfonodos, 1,28% no miocárdio e 1,28% no pulmão); linfadenite crônica inespecífica 17,90%; granuloma brucélico 10,27%; mesotelioma 7,7% (Figura 1) (2,57% nos linfonodos,1,28% no fígado e 3,85% no peritônio), cisticercose 3,85%; sarcosporidiose 3,85% (2,57% no miocárdio e 1,28% no fígado); bursite inespecífica 2,57% e carcinoma 2,57%. Actinobacilose, broncopneumonia crônica, colangioma, peritonite parasitária crônica, reação vacinal e colangiohepatite crônica apresentaram apenas uma ocorrência (1,28% respectivamente). Com relação a erro de diagnóstico macroscópico tentativo, quando confrontados com os resultados histopatológicos, observamosque os erros ocorreram em proporção preocupante, principalmente quando tratava-se de diagnóstico de tuberculose. Baseado nos observações auferidas, conclui-se que a principal neoplasia identifica da nosbovinos abatidos na região de Barra do Garça é a leucose enzoótica dos bovinos, seguida do mesotelioma; as zoonoses identificadas foram tuberculose, brucelose, sarcosporidiose e cisticercose. (AU)

With the increment of the export of bovine meat, happened in Brazil, in the last years, it has been increasing the scientific community's interest in knowing the sanitary status of the Brazilian cattle. Among the several pathologiesthat attack the bovine ones, the tumors have a prominence roam. The objective of this work was to study the tumor occurrence in bovine and with this, to supply data for the sanitary inspection officials services and linked entities to the animal production, collaborating like this with the production of products of animal origin of quality and guaranteeing to Brazil the possibility to market their products in markets demanding and intransigent consumingcompetition. They were picked samples of 78 bovines and the frequencies in growing order of the lesions were:tuberculosis 24,3% (23,00% in linfonodes and 1,28% in the lung), lymphoma (enzootic leucosis), 19,26%(16,70% in the linfonodes, 1,28% in the cardiac muscle and 1,28% in the lung); inespecific chronic lymphadenitis 17,90%; brucelosis granuloma 10,27%; mesotelioma 7,7% (2,57% in the linfonodes, 1,28% in the liver and3,85% in the periioneum), cisticercosis 3,85%; sarcosporidiosis 3,85% (2,57% in the cardiac muscle and1,28% in the lioer); inespecific bursitis 2,57% and carcinoma 2,57%. Actinobacilosis, chronic bronchopneumonia,colangioma, chronic parasitic peritonitis, vaccine reaction and chronic liver and gall bladder inflamation justpresented an occurrence (1,28% respectively). Regarding mistake of tentative macroscopic diagnosis, when confronted with the histopathologics results, we observed that the mistakes happened in preoccupying proportion, mainly when it was treated of tuberculosis diagnosis Based on the gained observations, it is ended that the main identified tumor in the bovine ones abated in the area of Barra do Garças is the enzootic leucosis, following by the mesotelioma; [...] (AU)