Phylogenetic classification of feline immunodeficiency virus

Background: The feline immunodeficiency virus (FIV) is responsible for a retroviral disease that affects domestic and wild cats worldwide, causing Feline Acquired Immunodeficiency Syndrome (FAIDS). FIV is a lentivirus from the family Retroviridae and its genome has 3 main structural genes: gag, pol and env. Phylogenetic studies have classified FIV into 7 subtypes according to the diversity among strains from the World, mainly in the env gene. Epidemiological analyses have demonstrated the high predominance of FIV-A and FIV-B. This in silico study aimed to perform a phylogenetic analysis to study FIV diversity worldwide. Materials, Methods & Results: A total of 60 whole genome sequences (WGS) and 122 FIV env gene sequences were included in 2 datasets, which were aligned using MAFFT version 7. Recombination among genomes and/or env genes was analyzed with RDP5 software. Phylogenetic analyses with both datasets were performed, after removing the recombinant sequences, by the W-IQ-TREE and constructed and edited by the FigTree. A total of 12 recombination events involving 19 WGS were detected. In addition, 27 recombination events involving 49 sequences were observed in the env gene. A high rate of recombinants was observed inter-subtypes (A/B and B/D) and intra-subtypes (A/A). All recombinants were removed from the subsequent phylogenetic analyses. Phylogenies demonstrated 6 distinct main clades, 5 from domestic cats (A, B, C, E, U) and 1 from wild cat sequences (W) in the WGS, as well as in the specific env gene analyses. Most clustered with subtype B sequences. In the WGS analysis, clade B had a prevalence of 65.9% Brazilian sequences (27/41) and 2.4% Japanese sequences (1/41). In the env gene analyses, clade B showed a prevalence of 43.8% of Brazilian sequences (32/73) and 20.5% of USA sequences (15/73). The results of both analyses also confirm the FIV-wide geographical distribution around the world. In the phylogenetic analyses carried out with WGS, sequences from China (1/41; 2.4%), Colombia (1/41; 2.4%) and the USA (1/41; 2.4%) were identified in clade A; sequence from Canada in clade C (1/41; 2.4%); sequence from Botswana belonged to clade E (1/41; 2.4%); sequences from Brazil clustered into clade U (2/41; 5% - data not yet published); and sequences belonging to the clade W were from Canada (1/41; 2.4%) and the USA (5/41; 12.3%). Specific env gene phylogenetic analyses showed sequences from Colombia (1/73; 1.4%), France (2/73; 2.7%), the Netherlands (3/73; 4.1%), Switzerland (2/73; 2.7%), USA (6/73; 8.3%), belonging to clade A; sequence from Canada belonging to clade C (1/73; 1.4%); sequences from Brazil belonging to clade U (2/73; 5% - data not yet published); and sequences belonging to clade W from the USA (6/73; 8.3%). Discussion: The results presented here demonstrate that FIV has a rapid viral evolution due to recombination and mutation events, more specifically in the env gene, which is highly variable. Currently, this retrovirus is classified into 7 subtypes (A, B, C, D, E, F and U-NZenv) according to their high genomic diversity. It also highlighted the importance of in silico sequence and phylogeny studies to demonstrate evolutionary processes. This was the first study to address the WGS FIV diversity with a phylogenetic approach.

Natural infection and molecular detection of Cytauxzoon felis in a free-ranging Puma concolor in the state of Goiás, Brazil / Infecção natural e detecção molecular de Cytauxzoon felis em Puma concolor de vida livre no estado de Goiás, Brasil

The puma (Puma concolor Linnaeus, 1771), the most widely distributed felid species in the Americas, can be found in all Brazilian biomes. Nevertheless, few studies have focused on hemoparasites in this species. Cytauxzoon felis, a hemoparasite that can infect domestic cats, has also been described in wild felids in Brazil. To the best of our knowledge, this study is the first to diagnose the natural infection and molecular detection of C. felis in a P. concolor in the state of Goiás. This animal presented non-regenerative anemia and inclusion suggestive of piroplasmids within red blood cells. The amplified 551 bp fragment of partial Piroplasmida 18S rRNA gene sequence was 100% identical to corresponding sequences of C. felis available in GenBank. No specific treatment for cytauxzoonosis was administered, and after rehabilitation, the animal was reintroduced into the wild. This finding provides some evidence that P. concolor may act as a natural host of the parasite. The epidemiology, vector and pathogenicity of this hemoparasite in wild and domestic cats in Brazil deserves further investigation.

O puma (Puma concolor Linnaeus, 1771) tem a maior distribuição entre os felídeos das Américas e é encontrado em todos os biomas do Brasil. No entanto, poucos estudos têm se concentrado nos hemoparasitos nesta espécie. Cytauxzoon felis, um hemoparasito que pode infectar gatos domésticos, também foi descrito em felídeos selvagens no Brasil. A saber, este estudo é o primeiro diagnóstico de infecção natural e detecção molecular de C. felis em um P. concolor do estado de Goiás. Este animal apresentou anemia arregenerativa e inclusão de piroplasmídeos nos glóbulos vermelhos. A amplificação do fragmento de 551 pb da sequência parcial do gene Piroplasmorida 18S rRNA foi 100% idêntica a sequências correspondentes de C. felis disponíveis no GenBank. Nenhum tratamento específico para citauxzoonose foi administrado e, após a reabilitação, o animal foi reintroduzido na natureza. Essa descoberta fornece algumas evidências de que P. concolor pode atuar como um hospedeiro natural do parasito. A epidemiologia, vetor e patogenicidade deste hemoparasito em gatos selvagens e domésticos no Brasil merecem uma investigação mais aprofundada.

The outcomes of polyparasitism in stray cats from Brazilian Midwest assessed by epidemiological, hematological and pathological data / Poliparasitismo em gatos não domiciliados no Centro-Oeste brasileiro avaliado através dos aspectos epidemiológicos, hematológicos e patológicos

We evaluated the epidemiological, hematological, and pathological data of Leishmania spp., Toxoplasma gondii, Platynosomum illiciens, feline immunodeficiency virus (FIV), and feline leukemia virus (FeLV) infections and the coinfections in stray cats of an endemic area for leishmaniasis. The diagnosis was performed by serological tests and necropsy. We described gross lesions and histopathological findings. We used immunohistochemistry and chromogenic in situ hybridization for L. infantum detection. We found infection in 27 out of 50 sampled cats, among them, 14 presented coinfections. A strong correlation between splenomegaly and lymphadenomegaly with FeLV, and an association between hepatic lesions and cachexia with parasitism due to P. illiciens were observed. Moreover, we found a significant increase in the monocyte count in the FeLV-infected and a decrease in the red blood cell count in the FIV-infected animals. Amastigote forms of Leishmania spp. and tissue changes were detected in lymphoid organs of an animal coinfected with P. illiciens, T. gondii, and FIV. Polyparasitism recorded in stray cats of the Brazilian Midwest should be considered in effective control strategies for public health diseases. Moreover, stray cats of Campo Grande may be a source of infection of FIV, FeLV and P. illiciens for populations of domiciled cats.(AU)

Foi avaliada a epidemiologia, hematologia e patologia das infecções por Leishmania spp., Toxoplasma gondii, Platynosomum illiciens, vírus da imunodeficiência felina (FIV) e vírus da leucemia felina (FeLV) e das coinfecções em gatos não domiciliados em uma área endêmica para leishmaniose. O diagnóstico foi realizado por exames sorológicos e necropsia. Foram descritas lesões macroscópicas e achados histopatológicos. Usaram-se imuno-histoquímica e hibridização cromogênica in situ para detecção de L. infantum. Encontrou-se infecção em 27 dos 50 gatos amostrados, dentre eles, 14 apresentavam coinfecções. Foi observada forte correlação entre esplenomegalia e linfadenomegalia com FeLV, e associação entre lesões hepáticas e caquexia com parasitismo por P. illiciens. Além disso, foi encontrado um aumento significativo na contagem de monócitos nos animais infectados pelo FeLV e uma diminuição na contagem de hemácias nos animais infectados pelo FIV. Formas amastigotas de Leishmania spp. e alterações teciduais foram detectadas em órgãos linfoides de um animal coinfectado com P. illiciens, T. gondii e FIV. O poliparasitismo registrado em gatos errantes do Centro-Oeste brasileiro deve ser considerado nas estratégias de controle de zoonoses. Além disso, gatos errantes de Campo Grande podem ser fontes de infecção de FIV, FeLV e P. illiciens para populações de gatos domiciliados.(AU)

Effects of environmental enrichment on behavioral expression of pumas (Puma concolor) under human care / Efeitos do enriquecimento ambiental na expressão comportamentalde onças-pardas (Puma concolor) mantidas sob cuidados humanos

The maintenance of pumas under human care imposes different conditions from those found in the natural environment, which may result in stress and impaired welfare. The objective was to evaluate the effects of environmental enrichment on the welfare of four jaguar specimens (Puma concolor), kept under human care. The enrichment techniques addressed were food, sensory, and mixed (physical-cognitive) enrichment. The research was divided into three phases: Phase 1, pre-enrichment; Phase 2, application of enrichment; and Phase 3, post-enrichment. The observation of the activities was performed using the focal animal method, and the behaviors were recorded to compose an ethogram. The sampling effort totaled 96 hours, with a 24-hour observation time for each specimen. During phases 2 and 3, the animals showed increased expression of natural behaviors, increased exploration and interaction with the enclosure, as well as, with other individuals. In addition, the applied activities provided cognitive challenges and reduced the animals' idle time. Although puma 4 showed stereotyped behavior, during the three phases of this study, this individual was healthy and active. Thus, the results demonstrate the beneficial effects of environmental enrichment on the well-being of pumas held in captivity.(AU)

A manutenção de onças-pardas mantidas sob cuidados humanos impõe condições diferentes daquelas encon-tradas no ambiente natural, o que pode resultar em estresse e prejuízo ao bem-estar. Objetivou-se avaliar os efeitos do enriquecimento ambiental no bem-estar de quatro espécimes de Onça-parda (Puma concolor), mantidos sob cuidados humanos. As técnicas de enriquecimento abordadas foram o enriquecimento alimentar, sensorial e misto (físico-cogni-tivo). A pesquisa foi dividida em três fases: Fase 1; Pré-enriquecimento, Fase 2; Aplicação dos enriquecimentos e Fase 3; Pós-enriquecimento. A observação das atividades foi realizada através do método animal focal, sendo registrados os comportamentos para composição de um etograma. O esforço amostral totalizou 96 horas, com o tempo de observação de 24 horas para cada espécime. Durante as fases 2 e 3, os animais apresentaram aumento da expressão de comporta-mentos naturais, aumento da exploração e interação com o recinto, assim como, com os outros indivíduos. Além disso, as atividades aplicadas proporcionaram desafios cognitivos e reduziram o tempo ocioso dos animais. Embora a Onça-parda 4 tenha apresentado comportamento estereotipado, durante as três fases deste estudo, este indivíduo mostrou-se saudável e ativo. Dessa forma, os resultados demonstram os efeitos benéficos do enriquecimento ambiental no bem-estar de onças-pardas mantidas em cativeiro.(AU)

Detecção do vírus da imunodeficiência felina em gatos domésticos (Felis catus) pela técnica de reação em cadeia da polimerase / Detection of feline immunodeficiency virus in domestic cats (Felis catus) by polymerase chain reaction technique

O objetivo deste trabalho foi detectar a presença de DNA do Vírus da Imunodeficiência Felina (FIV) em gatos domesticos (Feliz catus) assintomáticos. Foi realizada a tecnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) em 50 animais. Para tal, foram coletadas amostras de sangue, por venopunção da jugular, de forma asséptica para armazenamento de 1-2 mL de sangue total. Os animais que participaram do estudo fizeram parte do projeto de castração "Vida digna" da Universidade Federal Rural da Amazônia. E a escolha dos animais foi realizada de maneira aleatória, sem distinção por sexo ou idade, resultando em 29 foram fêmeas e 21 machos. Para o diagnóstico, foi realizada a extração do DNA, em seguida as amostras foram testadas em duas reações de PCR utilizando- se dois conjuntos de primers do Gene gag de FIV. Achou-se uma prevalência de 2% (1/50), confirmando assim a presença do vírus na cidade de Belém. Assim, evidenciando a importância de testar os felinos mesmo sendo assintomáticos. Desta forma, faz-se necessário a realização de trabalhos futuros que amplie o número amostral dos animais testados para assim elucidar o perfil epidemiológico da doença na região de Belém do Pará, considerando a relevância clínica desta infecção e a correta conduta médica veterinária para evitar novas infecções.

The objective of this work was to detect the presence of Feline Immunodeficiency Virus (FIV) proviral DNA in asymptomatic domestic cats (Feliz catus). The polymerase chain reaction technique was performed from 50 animals. For this, blood samples were collected by jugular venipuncture, aseptically for storage of 1-2 mL of whole blood. The animals that participated in the study were part of the castration project "Vida digna" at the Universidade Federal Rural da Amazônia. And the choice of animals was performed randomly, without distinction by sex or age, resulting in 29 females and 21 males. For diagnosis, DNA extraction was performed, then the samples were tested in two PCR reactions using two sets of FIV gag gene primers. A prevalence of 2% (1/50) was observed, thus confirming the presence of the virus in the city of Belém. Thus, highlighting the importance of testing the felines even if they are asymptomatic. Therefore, it is necessary to carry out future work that expands the sample number of animals tested in order to elucidate the epidemiological profile of the disease in the region of Belém do Pará, considering the clinical relevance of this infection and the correct veterinary medical conduct to avoid new infections.

Serological survey of Neospora caninum and Toxoplasma gondii in shelter-housed cats infected with feline immunodeficiency virus, Brazil / Inquérito sorológico para Neospora caninum e Toxoplasma gondii em um abrigo de gatos infectados com o vírus da imunodeficiência felina, Brasil

Felines play a leading role in the epidemiology of Toxoplasma gondii infection, but there is scarce information about the epidemiology of Neospora caninum, particularly in feline immunodeficiency virus (FIV)-infected cats. Cats seropositive to T. gondii do not usually show symptoms unless they are immunosuppressed, such as FIV-infected cats. The same relationship remains poorly known for N. caninum, although it has been associated with neurological disorders in HIV-infected people. Since FIV-infected cats are prone to develop encephalitis of unknown etiology, this study aimed to evaluate the presence of specific antibodies to T. gondii and N. caninum in a shelter for stray cats naturally infected with FIV. A total of 104 serum samples from cats living in a shelter, located in São Paulo city (Brazil), was assessed for T. gondii and N. caninum specific antibody by indirect fluorescent-antibody test (IFAT). Of the 104 cats, 25 (24%) were infected with FIV and, aside from these, 8 (32%) had antibodies against T. gondii (titers from 16 to 128). Only 1 (4%) of the FIV-infected cats had antibodies against N. caninum, which was the first record of coinfection. Among the FIV-naïve cats, 11 (14%) were positive for T. gondii(titers from 16 to 256) and only 1 (1.2%) had antibodies against N. caninum. Serologically positive reactions to T. gondii and N. caninum were not correlated with age or sex (p>0.05), and there was no correlation between FIV and the occurrence of anti-T. gondii or anti-N. caninum antibodies (p>0.05). Further studies encompassing larger cat populations from different origins and locations are essential to clarify the prevalence of T. gondii and N. caninum antibodies in FIV-positive cats.(AU)

Os felinos têm um papel importante na epidemiologia da infecção por Toxoplasma gondii, mas pouco se sabe sobre a epidemiologia da infecção por Neospora caninum em gatos, particularmente em gatos infectados com o vírus da imunodeficiência felina (FIV). Gatos soropositivos para Toxoplasma gondii geralmente não apresentam sintomas a não ser que estejam imunossuprimidos, como gatos infectados com FIV. A mesma relação ainda é pouco conhecida para N. caninum, embora tenha sido associada a distúrbios neurológicos em pessoas infectadas pelo HIV. Considerando que gatos infectados com FIV são propensos a desenvolver encefalite de etiologia desconhecida, o presente estudo teve como objetivo avaliar a presença de anticorpos específicos para T. gondii e N. caninum em gatos infectados com FIV. Um total de 104 amostras de soro de gatos residentes em um abrigo na cidade de São Paulo, Brasil, foram avaliadas para a presença de anticorpos contra T. gondii e N. caninum pelo teste de imunofluorescência indireta (RIFI). Dos 104 gatos, 25 (24%) estavam infectados com FIV e destes 8, (32%) tinham anticorpos contra T. gondii (titulação entre 16 e 128). Apenas 1 (4%) dos gatos infectados com FIV apresentava anticorpos contra N. caninum, sendo este o primeiro registro dessa coinfecção. Entre os gatos não infectados com FIV, 11 (14%) foram positivos para T. gondii (titulação entre 16 e 256) e apenas 1 (1,2%) tinha anticorpos contra N. caninum. A reação sorologicamente positiva para T. gondii e N. caninum não foi correlacionada com a idade ou sexo (p> 0,05), nem houve correlação entre FIV e ocorrência de anticorpos para T. gondii ou N. caninum(p> 0,05). Estudos subsequentes abrangendo populações maiores de gatos de diferentes origens e locais são essenciais para esclarecer a prevalência de anticorpos contra T. gondii e N. caninum em animais acometidos por FIV.(AU)

CD4+ and CD8+ T lymphocyte counts and ratio in cats with chronic gingivostomatitis and naturally infected with feline immunodeficiency virus: a preliminary study / Razão e contagem de linfócitos T CD4+ e linfócitos T CD8+ em gatos com gengivoestomatite crônica e infectados naturalmente pelo vírus da imunodeficiência felina: estudo preliminar

This study aimed to evaluate the CD4+ and CD8+ T lymphocytes counts and CD4+: CD8+ ratio in a colony of cats with chronic gingivostomatitis (CGS). We used forty domestic short-haired cats inhabiting the same colony. Ten cats with CGS were immunodeficiency virus-positive (group IV), and ten with CGS were immunodeficiency virus-negative (group III). As a control, twenty cats without CGS were used: ten cats were immunodeficiency virus-positive (group II) and ten cats were immunodeficiency virus-negative (group I). We employed flow cytometry to count CD4+ and CD8+ T lymphocytes. In cats infected with the immunodeficiency virus, the presence of CD4+ lymphocytes were lower both for animals with and without CGS. Conversely, not immunodeficiency virus-infected cats with CGS had a higher amount of CD4+ when compared to seronegative animals without CGS. The counts of CD8+ T lymphocytes showed no significant difference among cats with CGS, whether infected with immunodeficiency virus or not. The CD4+: CD8+ ratio was only different for group III, which was higher than any other group. No difference was observed for total lymphocyte number and CD8+ among groups. By contrast, mean CD4+ levels were different, with cats from groups III and IV showing higher levels than those from groups I and II. The flow cytometry could be a useful tool for the diagnosis and prognosis of cats with CGS infected by the immunodeficiency virus.

Este estudo teve como objetivo avaliar a contagem e a razão de linfócitos T CD4+ e CD8+ em uma colônia de gatos com gengivoestomatite crônica (CGS). Foram analisados quarenta gatos domésticos que habitavam a mesma colônia. Dez gatos com CGS foram positivos para o vírus da imunodeficiência (grupo IV), e dez com CGS foram negativos para o vírus da imunodeficiência (grupo III). Como controle, vinte gatos sem CGS foram usados: dez gatos foram positivos para o vírus da imunodeficiência (grupo II) e dez gatos foram negativos para o vírus da imunodeficiência (grupo I). Empregou-se a citometria de fluxo para contagem de linfócitos T CD4+ e CD8+. Nos gatos infectados pelo vírus da imunodeficiência, a presença de linfócitos CD4+ foi menor tanto para os animais com e sem CGS. Por outro lado, gatos não infectados e com CGS apresentaram maior quantidade de linfócitos CD4+ quando comparados a animais soronegativos sem CGS. A contagem de linfócito T CD8+ não mostrou diferença significativa entre gatos com CGS, infectados ou não com o vírus da imunodeficiência. A razão CD4+:CD8+ foi diferente apenas para o grupo III, que foi maior do que qualquer outro grupo. Não foi observada diferença para o número total de linfócitos e CD8+ entre os grupos. Em contraste, os níveis médios de CD4+ foram diferentes, com os gatos dos grupos III e IV apresentando níveis mais elevados do que os dos grupos I e II. A citometria de fluxo pode ser uma ferramenta útil para o diagnóstico e prognóstico de gatos com CGS infectados pelo vírus da imunodeficiência.

Protocolo para diagnóstico molecular de imunodeficiência e leucemia em gatos domésticos / Protocol for molecular diagnosis of immunodeficiency and leukemia, in domestic cats

Diversas afecções que acometem os felinos domésticos, como as retroviroses, não possuem tratamento efetivo. Tal fato torna relevante o estudo dessas doenças, em virtude da baixa eficácia de cura e caráter majoritariamente vitalício. Entre as retroviroses que mais acometem os felinos estão a imunodeficiência felina (FIV) e a leucemia felina (FeLV). O diagnóstico é obtido pela associação do exame clínico, geralmente inconclusivo, com exames laboratoriais complementares. Testes moleculares, como a reação em cadeia da polimerase (PCR), são eficientes para a detecção do DNA proviral e podem ser utilizados na rotina diagnóstica. Diante disso, o objetivo deste estudo foi comprovar a eficiência do protocolo molecular Nested PCR para diagnosticar FIV e FeLV. Para tal, amostras de sangue e/ou medula de 41 gatos domésticos foram coletadas por meio de punção venosa ou de medula e encaminhadas ao laboratório Oncells Biotecnologia. Os seguintes pares de primers foram adotados para o Nested PCR: FF1 e FF2 para o primeiro ciclo, com um amplicon de 1325pb para FIV e 490pb para a FeLV. Para o segundo foi utilizada a combinação F14, F15, FE4 e FE7, com um amplicon de 1138pb para FIV e 306pb para FeLV. As bandas correspondentes às esperadas para FeLV foram detectadas pela observação dos géis, porém, além de outras bandas inespecíficas, não foram observadas bandas correspondentes à FIV. Os resultados confirmam a capacidade de detecção do patógeno da FeLV pela técnica empregada. No entanto, novos ajustes do protocolo são necessários.

Several affections that affect domestic cats, such as retroviruses, do not have effective treatment. This fact makes the study of these diseases relevant, due to the low healing efficacy and mostly lifelong character. Among the retroviruses that most affect felines are feline immunodeficiency (FIV) and feline leukemia (FeLV). The diagnosis is obtained by associating the clinical examination, which is generally inconclusive, with complementary laboratory tests. Molecular tests, such as the polymerase chain reaction (PCR), are efficient for proviral DNA detection and can be used in the diagnostic routine. Therefore, this study aimed to prove the efficiency of the molecular protocol Nested PCR to diagnose FIV and FeLV. For this purpose, blood and/ or bone marrow samples from 41 domestic cats were collected through venipuncture or bone marrow and sent to the Oncells Biotechnology laboratory. The following primer pairs were adopted for the Nested PCR: FF1 and FF2 for the first cycle, with an amplicon of 1325bp for FIV and 490bp for FeLV. For the second, the combination F14, F15, FE4, and FE7 was used, with an amplicon of 1138bp for FIV and 306bp for FeLV. The bands corresponding to those expected for FeLV were detected by observing the gels; however, in addition to other non-specific bands, bands corresponding to FIV were not observed. The results confirm the ability to detect the FeLV pathogen by the technique employed. Nevertheless new protocol adjustments are required.

Helminthfauna of road-killed cougars (Puma concolor) from the Northeastern Region of São Paulo State, Brazil

As the second-largest Neotropical carnivore, cougars (Puma concolor) are especially important for maintenance of the biodiversity and ecosystem health. Five wild adult cougars (Puma concolor), found roadkilled in highways in the Northeastern region of São Paulo, were evaluated in search for parasites. Ten species representing nine families were identified. The most prevalent helminths were Uncinaria bidens, Lagochilascaris major, Spirometra sp., and Oncicola canis, followed by Cylicospirura subaequalis, Toxascaris leonina, Taenia omissa, Echinococcus sp., Filaroides sp. and Oncicola oncicola. It is important to note that some helminths found in this study, such as L. major, Spirometra sp., O. oncicola, O. canis, Echinococcus sp., T. leonina, C. subaequalis, and Filaroides sp. are known to affect domestic carnivores, which may indicate interaction between wild and domestic hosts. This study represents a new host record for four of the species found in cougars, U. bidens, L. major, O. canis, and Filaroides sp., and new locality records for U. bidens, T. leonina, C. subaequalis, and Filaroides sp(AU)

Como o segundo maior carnívoro neotropical, as onças-pardas são muito importantes para a manutenção da biodiversidade e a saúde do ecossistema. Cinco pumas adultos de vida livre (Puma concolor), mortos em rodovias na região Nordeste de São Paulo, foram avaliados quanto a presença de parasitas. Dez espécies, representando nove famílias foram identificadas. Os helmintos mais prevalentes foram Uncinaria bidens, Lagochilascaris major, Spirometra sp., e Oncicola canis, seguidos por Cylicospirura subaequalis, Toxascaris leonina, Taenia omissa, Echinococcus sp., Filaroides sp. e Oncicola oncicola. É importante salientar que alguns dos helmintos encontrados neste estudo, tais como Lagochilascaris major, Spirometra sp., O. oncicola, Oncicola canis, Echinococcus sp., Toxascaris leonina, Cylicospirura subaequalis, e Filaroides sp., afetam sabidamente carnívoros domésticos, o que pode indicar a interação entre hospedeiros selvagens e domésticos. Este estudo representa novos registros de hospedeiro para quatro espécies de helmintos, sendo elas U. bidens, L. major, O. canis, and Filaroides sp., além de novo registro de localidade para U. bidens, T. leonina, C. subaequalis, e Filaroides sp(AU)

Parasites in road-killed wild felines from North of Paraná state, Brazil / Parasitas em felinos selvagens mortos em estradas do norte do estado do Paraná, Brasil

This study aimed to identify the intestinal parasites of road-killed wild felines in the North Central and North, Paraná state, southern Brazil. The animals were monitored by sampling previously established transects. The places where the felines were run over were mapped, the animals were identified, and the gastrointestinal tract was evaluated. The feces were submitted to coproparasitological techniques of spontaneous sedimentation, floating in hypersaturated NaCl solution and centrifugal floating in zinc sulfate. All the parasitic structures detected were photomicrographed. In the coproparasitological analyses were identified oocysts of Cystoisospora spp., eggs of Ancylostomatidae, and Capillaria spp.; eggs of Aelurostrongylus spp., Toxocara spp., Physaloptera spp., Taenia spp., and Spirometra spp.; Aelurostrongylus abstrusus larvae; and eggs and adults of Ancylostoma cati and Taenia spp. One of the cats was parasitized by a flea of Ctenocephalides felis felis. Based on these results, the animals analyzed in this study supplied important samples for the evaluation of parasitic diversity of North of Paraná and suggested that this region may have conditions that allow the maintenance of these parasites life cycles in the environment and among wildlife.(AU)

O objetivo deste trabalho foi identificar os parasitas intestinais de felinos silvestres mortos em estradas nas regiões Norte Central e Norte, Paraná, sul do Brasil. Os animais foram monitorados por amostragem de transectos previamente estabelecidos. Os locais de atropelamento foram mapeados, os animais foram identificados e enviados para autópsias, durante as quais amostras de fezes foram coletadas e submetidas a técnicas coproparasitológicas de sedimentação espontânea, flutuação em solução hipersaturada de NaCl e flutuação por centrífugação em sulfato de zinco e fotografadas, quando estruturas parasitárias estavam presentes. Nas análises coproparasitológicas, foram identificados oocistos de Cystoisospora spp., ovos de Ancylostomatidae e Capillaria spp, Aelurostrongylus spp., Toxocara spp., Physaloptera spp., Taenia spp. e Spirometra spp.; larvas de Aelurostrongylus abstrusus; e ovos e adultos de Ancylostoma cati e Taenia spp. Um dos felídeos estava parasitado por Ctenocephalides felis felis. Com base nesses resultados, os animais analisados neste estudo forneceram amostras importantes para a avaliação da diversidade parasitária do Norte do Paraná e sugeriram que esta região pode apresentar condições que possibilitem a manutenção dos ciclos de vida desses parasitas no ambiente e entre a vida silvestre.(AU)

Avanços na andrologia de grandes felinos neotropicais / Advances in neotropical big cats andrology

O desenvolvimento de tecnologias reprodutivas e conhecimentos sobre a andrologia de grandes felinos caminham a pequenos passos, com avanços na última década. Estudos sobre o comportamento de onças-pintadas (Panthera onca) revelam as sequências de comportamentos sócio-sexuais e levantam a possibilidade de a ovulação poder ocorrer por estímulos sensoriais, e não somente pela estimulação mecânica durante a cópula. Um grande avanço na andrologia dos felinos foi o desenvolvimento da colheita farmacológica com α2-agonistas, que já se mostrou eficiente também nos grandes felinos neotropicais. Este foi um verdadeiro divisor de águas para a criopreservação de sêmen, especialmente em animais de vida livre. Pouco se avançou, no entanto, no meio de criopreservação, ainda hoje os meios indicados são à base de TRIS-gema-glicerol, porém a gema não é estável suficiente para uso em animais de vida livre, sendo necessária avaliação de substitutivos como as lipoproteínas de baixa densidade e lecitina de soja. O aprimoramento de reprodução assistida nos felinos neotropicais é pungente, em especial a onça-pintada visto que em alguns biomas a espécie está criticamente em perigo.

The development of reproductive technologies and knowledge about the andrology of big cats are taking small steps, with advances in the last decade. Studies on the sexual behavior of jaguars (Panthera onca) reveal the sequences of sexual behaviors and raise the possibility that ovulation may occur through sensory stimuli and not only through mechanical stimulation during copulation. A significant advance in feline andrology was the development of pharmacological semen collection with α2-agonists, which has proved efficient in neotropical big cats. It was disruptive for semen cryopreservation, especially in free-living animals. Little progress has been made; however, in the cryopreservation environment, even today, the indicated means are based on TRIS-yolk-glycerol. However, the yolk is not stable enough for use in free-living animals, requiring the evaluation of substitutes such as low-density lipoproteins and soy lecithin. The improvement of assisted reproduction in neotropical felines is poignant, especially the jaguar, since in some biomes, the species is critically endangered.

Desafios para a reprodução assistida em animais de vida livre / Challenges for assisted reproduction in free-living animals

A reprodução assistida se faz necessária em programas de conservação de espécies ameaçadas de extinção, sendo um facilitador de transporte e troca de material genético. Neste contexto, o acesso ao material de animais de vida livre é essencial para incrementar o banco genético da espécie em questão, no entanto adaptar os métodos possíveis à realidade do campo torna essa área de pesquisa desafiadora. Ainda hoje os espermatozoides são os gametas mais acessados em animais de vida livre, porém com pouco uso efetivo para criopreservação e produção de filhotes. É pungente a necessidade de mais pesquisas nesta área, uma vez que há centenas de espécies brasileiras ameaçadas, com especificidades fisiológicas e que habitam habitats variados, o que demanda adaptações espécie-específicas e hábitat específicas.

Assisted reproduction is necessary for conservation programs for endangered species, facilitating transport and exchange of genetic material. In this context, access to material from free-living animals is essential to increase the genetic bank of the species in question. However, adapting the possible methods to the reality of the fieldwork makes this area of research a challenge. Even today, sperm are the most accessed gametes in free-living animals, but with little effective use for cryopreservation and production of offspring. The need for more research in this area is acute, as there are hundreds of Brazilian species under threat, with physiological specificities, and that inhabit varied habitats, which demand species-specific adaptations and specific habitats.

Trichinella spiralis in a cougar (Puma concolor) hunted by poachers in Chile / Trichinella spiralis em um puma (Puma concolor) caçado por caçadores furtivos no Chile

Trichinellosis is a zoonosis caused by nematodes of the Trichinella genus, of which 10 species have been described. Species identification when larvae is found is only possible using molecular tools. Meat from pigs and game animals not subjected to veterinary inspection are the main sources of human infections. The hunting of native carnivores is prohibited in Chile due to conservation issues and the fact that those animals favor pest control. The illegal hunting of a cougar (Puma concolor) occurred in September 2020. Herein, the molecular identification of Trichinella larvae, by analyzing nuclear (expansion segment V) and mitochondrial (cytochrome C oxidase subunit I) sequences are described. Both the amplification of the expansion segment V region and the phylogenetic analysis of a segment of a fragment of the cytochrome c-oxidase subunit I sequence confirmed that the larvae belonged to T. spiralis. The case described herein represents the first evidence of illegal hunting of a protected mammal infected with Trichinella in Chile, highlighting the ‘One Health perspective to face this disease in the rural-sylvatic interphase.(AU)

A triquinelose é uma doença causada por nematoides do gênero Trichinella. Dez espécies foram descritas. A identificação das espécies a partir das larvas só foi possível com ferramentas moleculares. O abate doméstico de suínos e o consumo de animais de caça, sem inspeção veterinária, são as principais fontes de infecção humana. A caça de carnívoros nativos é proibida no Chile por questões de conservação e pelo fato de que esses animais favorecem o controle de pragas. A caça ilegal de um puma (Puma concolor) aconteceu em setembro de 2020. No Chile, a identificação molecular de larvas de Trichinella, obtida pelo exame de sequências nucleares (segmento de expansão V) e mitocondriais (citocromo C oxidase subunidade I) são descritas. Tanto a amplificação da região do segmento de expansão V quanto a análise filogenética de um segmento de um fragmento da sequência da subunidade I da Citocromo c-oxidase, confirmaram que as larvas pertenciam a T. spiralis. O caso aqui descrito representa a primeira evidência de caça ilegal de um mamífero protegido infectado com Trichinella no Chile, destacando a perspectiva de “Saúde Única” para enfrentar esta doença na interfase rural-silvestre.(AU)

Nodular and sclerosing gastritis caused by Cylicospirura felineus in a puma (Puma concolor) / Gastrite nodular esclerosante causada por Cylicospirura felineus em onça parda (Puma concolor)

An adult male puma (Puma concolor), hit by a car in an urban area, died three days later despite the therapeutic support provided. At necropsy, multiple firm nodules were identified in the gastric mucosa. The nodules were coated by an intact mucosa with a central opening from which reddish and cylindrical nematodes protruded into the lumen. Twenty-seven nematodes were retrieved for morphological and morphometric evaluations. During histopathological examination of the gastric tissue, the adult nematodes appear in longitudinal and transverse sections, surrounded by thick bands of collagen, interspersed with mixed inflammatory infiltrates. The nematodes had an eosinophilic cuticle with caudal serrated projections (bulbar type), coelomyarian musculature, pseudocoelom, and females with uterus containing numerous larvated eggs, characteristics consistent with the Cylicospirura genus. Morphologically, female nematodes had six large tricuspid teeth in the oral cavity and the vulva had an opening anterior to the esophagus–intestinal junction. Male nematodes had five pairs of small papillae near the tip of the tail. These findings were consistent with Cylicospirura felineus. This parasite should be included in the differential diagnosis of nodular gastric wall lesions in wild felids.(AU)

Uma onça parda (Puma concolor) foi encontrada em uma área urbana após atropelamento e, apesar do suporte terapêutico fornecido, o animal morreu três dias depois. No exame post-mortem, múltiplos nódulos firmes foram identificados na mucosa gástrica. Os nódulos eram revestidos por mucosa intacta com um orifício central, do qual se insinuavam nematódeos cilíndricos e avermelhados. Vinte e sete nematódeos foram recuperados para avaliação morfológica e morfométrica. Na avaliação histopatológica do tecido gástrico, os nematódeos adultos apareceram em cortes longitudinais e transversais, circundados por bandas espessas de colágeno, intercaladas por infiltrado inflamatório misto. Os nematódeos eram constituídos por cutícula eosinofílica, com projeções serrilhadas voltadas caudalmente (do tipo bulbar), musculatura celomiariana, pseudoceloma e, nas fêmeas, útero com numerosos ovos larvados cujos achados foram sugestivos do gênero Cylicospirura. Morfologicamente, a cavidade bucal continha seis grandes dentes trífidos, na fêmea, a abertura da vulva era anterior à junção esôfago intestinal; e os machos tinham cinco pares de pequenas papilas próximas à ponta da cauda. Esses achados foram consistentes com Cylicospirura felineus. Este parasita deve ser incluído no diagnóstico diferencial de lesões nodulares da parede gástrica em felinos selvagens.(AU)

Characterization of mesenchymal stem cells derived from adipose tissue of a cougar (Puma concolor)

Adipose derived mesenchymal stem cells (AMSCs) have been isolated from domestic and wild cats. For wild cats, the isolation of AMSCs has been reported in the black-footed cats (Felis nigripes) and guigna (Leopardus guigna). Stromal vascular fraction (SVF) isolated from cougar adipose tissue have been used to restore elbow functionality in the cougar (Puma concolor) but multipotent characteristics of these cells have not been described. The present study describes for the first time the isolation and characterization of mesenchymal stem cells derived from adipose tissue of cougar. AMSCs and fibroblasts from six months female cougar were isolated and cultured in DMEM/F12, supplemented with FBS 10% + 1% Antibiotic/Antifungal + 2.4 mM L-Glutamine + 2.4 mM pyruvate up to passage 5. Expression of pluripotent and surface marker genes was evaluated at mRNA level. Mesodermal differentiation (adipogenic, osteogenic and chondrogenic) was described. AMSCs expressed mRNA of pluripotent genes Oct4, Nanog, Sox2 and Klf4 and surface markers Cd44, Cd90, Cd105 and MHCII. Fibroblasts showed similar mRNA expression with the exception of Sox2. AMSCs obtained from cougar exhibit multipotency features similar to domestic cats MSC, nevertheless, other analyses are required. AMSCs from cougar could be a source of interest for treatment of individuals that remain in captivity or arrive to wildlife rehabilitation centers.

Characterization of mesenchymal stem cells derived from adipose tissue of a cougar (Puma concolor)

Adipose derived mesenchymal stem cells (AMSCs) have been isolated from domestic and wild cats. For wild cats, the isolation of AMSCs has been reported in the black-footed cats (Felis nigripes) and guigna (Leopardus guigna). Stromal vascular fraction (SVF) isolated from cougar adipose tissue have been used to restore elbow functionality in the cougar (Puma concolor) but multipotent characteristics of these cells have not been described. The present study describes for the first time the isolation and characterization of mesenchymal stem cells derived from adipose tissue of cougar. AMSCs and fibroblasts from six months female cougar were isolated and cultured in DMEM/F12, supplemented with FBS 10% + 1% Antibiotic/Antifungal + 2.4 mM L-Glutamine + 2.4 mM pyruvate up to passage 5. Expression of pluripotent and surface marker genes was evaluated at mRNA level. Mesodermal differentiation (adipogenic, osteogenic and chondrogenic) was described. AMSCs expressed mRNA of pluripotent genes Oct4, Nanog, Sox2 and Klf4 and surface markers Cd44, Cd90, Cd105 and MHCII. Fibroblasts showed similar mRNA expression with the exception of Sox2. AMSCs obtained from cougar exhibit multipotency features similar to domestic cats MSC, nevertheless, other analyses are required. AMSCs from cougar could be a source of interest for treatment of individuals that remain in captivity or arrive to wildlife rehabilitation centers.(AU)

Alterações laboratoriais e post-mortem de um felino com doença renal crônica positivo para o vírus da imunodeficiência felina / Laboratory changes and post-death of a feline with positive chronic kidney disease for the feline immunodeficiency virus

A Imunodeficiência Viral Felina (FIV) é uma patologia infecciosa, na qual o vírus está presente na saliva de gatos infectados, o que mostra transmissão direta por ferimentos causados por mordidas, além disso, pode ocorrer transmissão vertical. A doença renal crônica (DRC)é uma das patologias mais comumente observadas em gatos infectados com FIV. O objetivo do trabalho foi descrever um relato de caso clínico de um felino com DRC portador do FIV, enfatizando suas alterações laboratoriais e post-mortem. Foi atendido no Hospital Veterinário Adrisse, Fortaleza-CE, um felino, sem raça definida, de aproximadamente sete anos. Segundo a tutora, o felino havia fugido de casa, e quando retornou, apresentava vômitos esporádicos, diarreia e anorexia há quatro dias. No exame físico, apresentava quadro de ataxia, apatia, grau de desidratação em torno de 8%, dor abdominal, mioclonias, êmese, hipotermia, nistagmo bilateral, mucosas levemente ictéricas, desnutrição, urina concentrada, úlceras na boca e hálito urêmico. Foram solicitados como exames complementares: hemograma e dosagens bioquímicas (alanina aminotransferase, creatinina, aspartatoaminotransferase), sódio, potássio, fósforo, fosfatase alcalina, cálcio, ureia, sumário de urina, ultrassonografia abdominal e snap® teste FIV/FeLV. O diagnóstico foi conclusivo através do snap FIV/FelV e a DRC se confirmou pela ultrassonografia abdominal e necropsia, através de alterações compatíveis com os sintomas e achados laboratoriais. Pode-se concluir que em felinos acometidos por FIV, são imprescindíveis a avaliação clínica e o diagnóstico de complicações renais, visto que há uma ação viral no desencadeamento de lesões renais, os quais podem ser identificados por meio de exames laboratoriais, ultrassonográficos e necroscópicos.

Feline Viral Immunodeficiency (FIV) is an infectious pathology, in which the virus is present in the saliva of infected cats, which shows direct transmission through injuries caused by bites, in addition, vertical transmission can occur. Chronic kidney disease (CKD) is one of the pathologies most commonly seen in cats infected with IVF. The objective of the study was to describe a clinical case report of a feline with CKD with IVF, emphasizing his laboratory and post-mortem changes. At the Veterinary Hospital Adrisse, Fortaleza-CE, a feline, of mixed breed, of approximately seven years was attended. According to the tutor, the cat had run away from home, and when he returned, he had sporadic vomiting, diarrhea and anorexia for four days. On physical examination, he presented ataxia, apathy, degree of dehydration around 8%, abdominal pain, myoclonus, emesis, hypothermia, bilateral nystagmus, slightly jaundiced mucous membranes, malnutrition, concentrated urine, mouth ulcers and uremic breath. Complementary tests were requested: blood count and biochemical measurements (alanine aminotransferase, creatinine, aspartate aminotransferase), sodium, potassium, phosphorus, alkaline phosphatase, calcium, urea, urine summary, abdominal ultrasound and snap® FIV/FeLV test. The diagnosis was conclusive through the FIV/FelV snap and CKD was confirmed by abdominal ultrasound and necropsy, through alterations compatible with the symptoms and laboratory findings. It can be concluded that in cats affected by FIV, clinical evaluation and diagnosis of kidney complications are essential, since there is a viral action in the triggering of kidney injuries, which can be identified through laboratory, ultrasound and necroscopic exams.

Anatomical characteristics of the major salivary glands of puma (Puma concolor Linnaeus, 1771) / Características anatômicas das glândulas salivares maiores da onça parda (Puma concolor Linnaeus, 1771)

The morphological knowledge of the salivary glands in wild species is fundamental, since these studiescan be used as conservation strategies, clinical treatments and the preservation of species threatened with extinction. Thus, the aim of the study was to anatomically describe the larger salivary glands: parotid, mandibular, sublingual and molar of the jaguar. For this, two specimens of puma (Puma concolor) were used, after death by road traffic accident, donated by the Clinical Surgical Service Department of the Veterinary Hospital Dr. Halim Atique (UNIRP). The animals were fixed with 10% aqueous formaldehyde solution, dissected, descriptively analyzed and photographed. Morphologically, the parotid gland is grayish-yellow in color, distinctly lobulated, and has a semilunar shape. This gland is located in the posterolateral region of the face and at its ventral end we observe the parotid duct. The mandibular gland presents a slightly rounded outline, a grayish color and its surface is covered by a capsule of connective tissue. This gland is located in the posterolateral region of the face and we find the mandibular duct at its ventral end. The monostomatic sublingual gland is located on the rostral border of the mandibular gland and it is covered by the mandibular lymph nodes. The molar gland is a yellowish-gray membranous protuberance, elongated, with rectangular shape and it lies dorsally to the labial commissure. Based on the dissections, we conclude that the morphological and topographic characteristics of salivary glands of puma follow the same structural pattern described for other species of carnivorous mammals (domestic and wild).

O conhecimento morfológico das glândulas salivares em espécies silvestres é fundamental, pois podem ser utilizadas como estratégias de conservação, tratamentos clínicos e preservação de espécies ameaçadas de extinção. Dessa forma, o objetivo do estudo foi descrever anatomicamente as glândulas salivares maiores: parótida, mandibular, sublingual e molar da onça-parda. Para isso, foram utilizados dois espécimes de onça-parda (Puma concolor), após morte por atropelamento, doados pelo Setor de Atendimento Clínico Cirúrgico de Animais Selvagens (SACCAS) do Hospital Veterinário Dr. HalimAtique (UNIRP). Os animais foram fixados com solução aquosa de formol a 10%, dissecados, analisados descritivamente e fotografados. Morfologicamente, a glândula parótida possui uma coloração cinza amarelada, é distintamente lobulada e apresenta um formato semilunar. Essa glândula localiza-se na região póstero-dorsal da face, e na sua extremidade ventral observamos o ducto parotídeo. A glândula mandibular apresenta um contorno levemente arredondado, coloração acinzentada e sua superfície é revestida por uma cápsula de tecido conjuntivo. Essa glândula situa-se na região póstero-ventral da face e na sua extremidade ventral encontramos o ducto mandibular. A glândula sublingual monostomática está localizada na borda rostral da glândula mandibular e apresenta-se coberta pelos linfonodos mandibulares. A glândula molar é uma protuberância membranosa de coloração cinza amarelada, formato retangular alongado que fica situada ventralmente a comissura labial. Fundamentado nas dissecações, concluímos que as características morfológicas e topográficas das glândulas salivares da onça-parda seguem o mesmo padrão estrutural descrito para outras espécies de mamíferos carnívoros (domésticos e silvestres).

Food habits of the Cougar Puma concolor (Carnivora: Felidae) in the Central Andes of the Colombian Coffee Region

The feeding habits of the cougar have been scarcely studied in Colombia, despite its importance in the ecosystems it inhabits. In this study, we analysed the diet of the cougar using 53 feces samples collected from several sites in the Central Andes of Colombia’s Coffee Growing Region. To identify prey species, we examined and compared bone fragments and hairs found in each sample with descriptions published in relevant literature and with specimens from the Natural History Museum of the Universidad de Caldas, Colombia. We found that rabbits (Sylvilagus sp.) provided half of the relative biomass consumed by the cougar (50%). Other preys identified belong to representatives of medium and large mammals such as marsupials (Didelphis: 10%), sloths (Choloepus: 9%), rodents (Coendou: 10%, Cuniculus: 9%), and deer (Mazama: 9%). Of the preys, Coendou rufescens has not, to our knowledge, been previously included in cougar diet literature. The curve of accumulation of species indicated that the number of samples obtained in this work fully describe the diet of this feline. Neither domestic species were recorded in this work, nor were there any relationships between the dry or rainy seasons and the consumption of prey species. The comparison of the information reported in this study and others carried out in the Andes may indicate the general nature of this feline’s diet and its adaptability to the prey species found in each area, since these vary in each one of them. It is probable that the obtained trophic niche value (0.33) is due to the abundance of rabbits present in the study area. It is also probable that the cougar has not consumed domestic species since, although it is close to cattle ranches, it has enough of wild prey in the area to supply its needs. The results of this study may help to improve our understanding of the feeding habits of this predator and...

Esporotricose felina: um relato de caso de disseminação cutânea e sistêmica em gato negativo para FIV e FeLV / Feline sporotrichosis: a case report of cutaneous and systemic dissemination in cat negative for FIV and FeLV

A esporotricose é uma zoonose causada por fungos do gênero Sporothrix. Os gatos doentes têm importante potencial zoonótico e frequentemente revelam uma apresentação disseminada da doença. O objetivo deste relato de caso é descrever as características clínicas e anatomopatológicas de um caso de esporotricose felina refratária ao tratamento com apresentação clínica cutânea disseminada e sistêmica. Um felino macho de 3 anos de idade foi tratado para esporotricose com itraconazol e obteve resolução completa das lesões cutâneas. Porém, um ano após alta clínica, o animal apresentou aumento e ulceração da região nasal. Após cultura fúngica positiva para Sporothrix spp foi instituído tratamento com itraconazol 100mg associado ao iodeto de potássio 20mg por via oral diariamente e transcorrido 3 meses de tratamento, foi observada piora progressiva do sinais clínicos com disseminação de lesões para outras regiões do corpo. O animal foi submetido à eutanásia e encaminhado para necrópsia no Serviço de Anatomia Patológica da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal Fluminense. Amostras da língua, pulmão, fígado, baço, rim, cérebro, linfonodo e pele foram coletadas para evidência de disseminação do agente fúngico e avaliação de alterações microscópicas. A coloração de metenamina de prata de Grocott foi utilizada para facilitar a visualização de leveduras sugestivas de Sporothrix spp nos cortes histológicos. Leveduras foram visualizadas em amostras de pele, língua, linfonodo, rim, fígado, baço e cérebro. No presente relato a disseminação do Sporothrixspp para diversos órgãos sinaliza a necessidade de uma minuciosa investigação dos casos graves de esporotricose felina para o tratamento adequado.

Sporotrichosis is a zoonosis caused by fungi of the genus Sporothrix. Sick cats have an significant zoonotic potential and often show a widespread presentation of the disease. The purpose of this case report is to describe the clinical and anatomopathological characteristics of a case of feline sporotrichosis refractory to treatment with disseminated and systemic cutaneous clinical presentation. A 3-year-old male feline was treated for sporotrichosis with itraconazole and achieved complete resolution of the skin lesions. However, one year after clinical discharge, the animal presented an increase and ulceration of the nasal region. After a positive fungal culture for Sporothrix spp, treatment with itraconazole 100mg associated with potassium iodide 20mg was instituted orally daily and after 3 months of treatment, a progressive worsening of the symptoms was observed with the spread of lesions to other regions of the body. The animal was euthanized and sent for necropsy at the Pathological Anatomy Service of the Veterinary Faculty of Universidade Federal Fluminense. Samples of the tongue, lung, liver, spleen, kidney, brain, lymph node, and skin were collected for evidence of spread of the fungal agent and evaluation of microscopic changes. Grocott silver methenamine staining was used to facilitate the visualization of yeasts suggestive of Sporothrix spp in histological sections. Yeasts were visualized in samples of skin, tongue, lymph node, kidney, liver, spleen, and brain. In the present report, the spread of Sporothrix spp to different organs signals the need for a thorough investigation of severe cases of feline sporotrichosis for the proper treatment.