Estudos para o incremento da produção de embriões in vivo e in vitro em vacas de corte taurinas e sintéticas / Studies to improve in vivo and in vitro embryo production in beef cows from taurine and synthetic breeds

O Brasil destaca-se por ser um dos líderes mundiais na produção in vitro de embriões, o que é decorrente do rebanho nacional ser predominantemente composto por raças zebuínas, que possuem maior número de folículos antrais aspiráveis. Por outro lado, vacas taurinas apresentam menor população folicular antral, o que limita o número de ovócitos obtidos por seção de aspiração folicular (ovum pick-up; OPU). Portanto, na região Sul do Brasil há demanda para produção tanto in vivo como in vitro de embriões de doadoras de raças taurinas e sintéticas. Este texto discute estudos recentes que buscam estratégias para aperfeiçoar as etapas envolvidas na produção de embriões bovinos, bem como para aumentar o aproveitamento de receptoras utilizadas nos programas de transferência de embriões (TE), com foco em vacas taurinas e sintéticas.(AU)

Brazil stands among the leaders on in vitro embryo production, as the Brazilian herd is predominantly composed by Zebu breeds, which have a greater number of antral follicles available to ovum pick-up (OPU). On the other hand, taurine cows have a lower antral follicle population, which limits the number of oocytes obtained by each OPU section. Therefore, in the Brazilian Southern region there is a demand for both in vivo and in vitro production of embryos from donors of taurine and synthetic breeds. This text discusses recent studies that seek strategies to improve the steps involved in the production of bovine embryos, as well as to increase the use of recipients in embryo transfer (ET) programs, focusing on taurine and synthetic cows.(AU)

Prostaglandin F2α treatment concurrent with artificial insemination does not affect bovine embryo production / Administração de prostaglandina F2 alfa no momento da inseminação artificial não afeta a produção de embriões bovinos

ABSTRACT: Treatment with prostaglandin F2α (PGF) induces ovulation and increases conception rates in cows, while improving embryo production in buffalos. However, its effect on superovulated cows is unknown. This study verified whether single PGF administration concurrent with artificial insemination (AI) improves fertilization and embryo production rates in superovulated cows. In each replicate, embryo donor cows were equally allocated to two groups: the untreated control and PGF groups. The latter of which received 482 µg of cloprostenol concurrent with the first AI. Each cow (n = 35) was subjected to two superovulations (SOV) in a crossover design (total = 70 embryo collections). In the control and PGF groups, respectively, the observed responses were [median (95% CI)]: 12 (10-18) and 15 (12-18) total structures, 9 (7-11) and 7 (6-10) viable embryos, 1 (0-1) and 1 (1-3) degenerated embryos, and 1 (0-3) and 2 (0-5) oocytes (P > 0.05). In conclusion, single PGF treatment concurrent with the first AI did not affect embryo production in superovulated cows.

RESUMO: A prostaglandina F2α (PGF) pode induzir a ovulação e melhorar tanto a concepção em vacas, como a produção de embriões em búfalas, mas o efeito em vacas superovuladas é desconhecido. Esse estudo teve como objetivo verificar se a administração de uma dose de PGF na inseminação artificial (IA) após a superovulação (SOV) melhora as taxas de fecundação e produção embrionária em vacas. Em cada replicação, vacas doadoras de embriões foram equilibradamente alocadas em dois grupos: controle, não tratado, ou PGF, que recebeu 482 µg de cloprostenol no momento da primeira IA. Cada doadora (n = 35) foi submetida a duas SOV em um delineamento crossover (total = 70 coletas de embriões). Nos grupos controle e PGF, respectivamente, foram observados [medianas (IC 95%)]: 12 (10-18) e 15 (12-18) estruturas totais; 9 (7-11) e 7 (6-10) embriões viáveis; 1 (0-1) e 1 (1-3) embriões degenerados; e 1 (0-3) e 2 (0-5) ovócitos (P > 0,05). Conclui-se que uma única administração de PGF no momento da primeira IA não afeta a produção embrionária de vacas superovuladas.

Desafios e perspectivas na produção comercial de embriões in vivo e in vitro de raças taurinas e sintéticas / Current challenges and perspectives of in vivo and in vitro commercial embryo production of taurine and synthetic breeds

As biotécnicas de produção in vivo e in vitro de embriões bovinos permitem aumentar significativamente o número de descendentes de fêmeas genética e/ou zootecnicamente importantes. Porém, antes de se optar por um dos métodos, deve-se avaliar suas peculiaridades. A produção in vivo pode ser empregada de forma satisfatória tanto em zebuínos quanto em raças sintéticas e taurinas, permitindo a obtenção de, em média, seis a sete embriões viáveis por coleta, com boa tolerância à criopreservação. Já a produção in vitro é mais eficiente em raças zebuínas e sintéticas, visto que possuem maior número de folículos antrais aspiráveis. Além disso, esta técnica permite a produção de embriões sem estímulos hormonais exógenos, porém com menor criotolerância. Desse modo, a presente revisão discute os desafios atuais e perspectivas futuras na produção de embriões in vivo e in vitro com base nos dados da rotina de uma central de doadoras e laboratório de produção de embriões que desenvolve simultaneamente ambas as técnicas de produção de embriões na região Sul do Brasil.(AU)

Biotechniques for in vivo and in vitro production of bovine embryos allow to significantly increase the number of descendants from cows genetically and/or zootechnically superior. However, before opting for one of the methods, one should evaluate its peculiarities. In vivo production can be used satisfactorily both in zebu cattle and in synthetic and taurine breeds, allowing to obtain, on average, six to seven viable embryos per procedure, with good tolerance to cryopreservation. In vitro production is more efficient in Zebu and synthetic breeds, since they have a greater number of aspirable antral follicles. In addition, this technique allows the production of embryos without exogenous hormonal stimuli, but with lower cryotolerance. This review discusses current challenges and future perspectives in in vivo and in vitro embryo production based on routine data from an embryo production center and a laboratory that develop, simultaneously, the two embryo production techniques in southern Brazil.(AU)

Prostaglandin F2α treatment concurrent with artificial insemination does not affect bovine embryo production / Administração de prostaglandina F2 alfa no momento da inseminação artificial não afeta a produção de embriões bovinos

Treatment with prostaglandin F2α (PGF) induces ovulation and increases conception rates in cows, while improving embryo production in buffalos. However, its effect on superovulated cows is unknown. This study verified whether single PGF administration concurrent with artificial insemination (AI) improves fertilization and embryo production rates in superovulated cows. In each replicate, embryo donor cows were equally allocated to two groups: the untreated control and PGF groups. The latter of which received 482 µg of cloprostenol concurrent with the first AI. Each cow (n = 35) was subjected to two superovulations (SOV) in a crossover design (total = 70 embryo collections). In the control and PGF groups, respectively, the observed responses were [median (95% CI)]: 12 (10-18) and 15 (12-18) total structures, 9 (7-11) and 7 (6-10) viable embryos, 1 (0-1) and 1 (1-3) degenerated embryos, and 1 (0-3) and 2 (0-5) oocytes (P > 0.05). In conclusion, single PGF treatment concurrent with the first AI did not affect embryo production in superovulated cows.

A prostaglandina F2α (PGF) pode induzir a ovulação e melhorar tanto a concepção em vacas, como a produção de embriões em búfalas, mas o efeito em vacas superovuladas é desconhecido. Esse estudo teve como objetivo verificar se a administração de uma dose de PGF na inseminação artificial (IA) após a superovulação (SOV) melhora as taxas de fecundação e produção embrionária em vacas. Em cada replicação, vacas doadoras de embriões foram equilibradamente alocadas em dois grupos: controle, não tratado, ou PGF, que recebeu 482 µg de cloprostenol no momento da primeira IA. Cada doadora (n = 35) foi submetida a duas SOV em um delineamento crossover (total = 70 coletas de embriões). Nos grupos controle e PGF, respectivamente, foram observados [medianas (IC 95%)]: 12 (10-18) e 15 (12-18) estruturas totais; 9 (7-11) e 7 (6-10) embriões viáveis; 1 (0-1) e 1 (1-3) embriões degenerados; e 1 (0-3) e 2 (0-5) ovócitos (P > 0,05). Conclui-se que uma única administração de PGF no momento da primeira IA não afeta a produção embrionária de vacas superovuladas.

Three superovulation protocols for in vivo embryo production in Santa Inês sheep / Três protocolos para produção in vivo de embriões em ovelhas Santa Inês

There is still no consensus regarding the best protocol for in vivo embryo production in sheep despite increasing studies in this area. Moreover, there is variability in the response of ewes to superovulation (SOV). An approach to mitigate this inconsistency is to initiate gonadotropin administration under favorable ovarian conditions. The present study compared three treatments in a crossover design: a traditional SOV protocol (TRAD) and "Day 0" D0 SOV protocol with (D0+GnRH), or without Lecilerin (D0-GnRH). Fifteen Santa Inês ewes received 200 mg of FSH at six decreasing doses and PGF2α with the fifth dose of FSH. They were naturally mated with fertile rams and subjected to surgical embryo collection. The number of viable embryos was similar among the different treatments (TRAD = 6.0 ± 4.7; D0-GnRH = 3.8 ± 6.4; D0+GnRH = 7.5 ± 6.5). Regardless of the treatment method, ewes with follicles ≤ 4 mm, at the first FSH dose, produced more viable embryos (9.6 ± 6.0, P < 0.05) compared to ewes that had follicles > 4 mm at the beginning of the SOV (2.9 ± 3.1, viable embryos). Both the TRAD and D0+GnRH groups had fewer animals with large follicles (> 4 mm) at the first FSH dose than the D0-GnRH group (P < 0.05). In conclusion, both the TRAD and D0+GnRH treatments induced a more favorable ovarian condition (follicles ≤ 4 mm) for adequate SOV; although, all three treatments exhibited similar efficacies in Santa Inês sheep.

Ainda não há consenso sobre qual é o protocolo mais apropriado para a produção in vivo de embriões em ovinos, apesar do crescente conhecimento. Uma abordagem para mitigar a variabilidade de resposta de ovelhas à superovulação (SOV) é iniciar a aplicação de gonadotrofinas em uma condição ovariana favorável. O presente estudo comparou três tratamentos em delineamento do tipo crossover: protocolo de SOV tradicional (TRAD) e "Dia 0" D0 SOV sem (D0-GnRH) ou com GnRH (D0+GnRH). Quinze ovelhas Santa Inês foram superovuladas com 200 mg de FSH em seis doses decrescentes e receberam PGF2α na quinta dose de FSH. As ovelhas foram submetidas a monta natural com carneiros férteis e os embriões colhidos por via cirúrgica. O número de embriões viáveis não diferiu entre os tratamentos (TRAD = 6,0 ± 4,7; D0-GnRH = 3,8 ± 6,4; D0+GnRH = 7,5 ± 6,5). Independentemente do tratamento, ovelhas com folículos ≤ 4 mm na primeira dose de FSH produziram mais embriões viáveis (9,6 ± 6,0; P < 0.05) quando comparadas aos animais que apresentavam folículos > 4 mm no início da SOV (2,9 ± 3,1 embriões viáveis). Os grupos TRAD e D0+GnRH apresentaram menor número de animais com folículos grandes (> 4 mm), no momento da primeira dose de FSH, quando comparados ao grupo D0-GnRH (P < 0,05). Em conclusão, os protocolos TRAD e D0+GnRH induziram uma condição ovariana mais favorável (folículos ≤ 4 mm) para a SOV. No entanto, os três tratamentos apresentaram eficiência semelhante em ovelhas Santa Inês.

New approaches to superovulation in goats and sheep / Novos enfoques sobre superovulação em caprinos e ovinos

A superovulação é a principal tecnologia reprodutiva utilizada para a produção de embriões em ovinos e caprinos, mas a imprevisibilidade dos resultados continua sendo sua maior desvantagem. Vários fatores intrínsecos e extrínsecos são responsáveis por respostas superovulatórias variáveis em pequenos ruminantes e, portanto, esta questão é o foco principal de muitos estudos que visam melhorar a produção de embriões in vivo. A raça da doadora de embriões é uma fonte importante de variação nos resultados superovulatórios, e essa variabilidade pode ser observada não apenas entre genótipos prolíficos e não prolíficos. A suplementação com progesterona usada em conjunto com protocolos superovulatórios tem efeitos benéficos no desenvolvimento folicular e na produção de embriões; no entanto, a duração ideal da exposição à progesterona também parece variar entre as raças. Alguns estudos recentes dos tratamentos superovulatórios com hormônio folículo-estimulante (FSH) abordaram o tempo para iniciar um regime, a dose total do hormônio exógeno e o número de administrações. Além disso, embora a atividade ovariana seja fortemente afetada pela estação do ano, as flutuações anuais nas respostas superovulatórias ainda são controversas e mal compreendidas. Por último, vários estudos demonstraram que a eficácia dos tratamentos superovulatórios recorrentes pode diminuir, permanecer constante ou mesmo aumentar. Esta revisão tem como objetivo discutir os principais achados em torno da superovulação em pequenos ruminantes publicados nos últimos cinco anos.

Superovulation is the main reproductive technology used for embryo production in sheep and goats, but the unpredictability of results remains its greatest disadvantage. Several intrinsic and extrinsic factors are responsible for variable superovulatory responses in small ruminants and so this issue is the primary focus of many studies aimed to ameliorate in vivo embryo production. The breed of the embryo donor is an important source of variation in superovulatory outcomes, and such a variability can be seen not only between prolific and non-prolific genotypes. Progesterone priming used in conjunction with superovulatory protocols has beneficial effects on follicular development and embryo production; however, the optimal duration of progesterone exposure also seems to vary between breeds. Some recent studies of the superovulatory treatments using follicle-stimulating hormone (FSH) have addressed the time to start a regimen, total dose of the exogenous hormone, and the number of injections. Moreover, even though the ovarian activity is strongly affected by the season, annual fluctuations in superovulatory responses are still controversial and incompletely understood. Lastly, several studies have shown that the efficacy of recurrent superovulatory treatments can either decline, remain constant or even increase. This review aims to discuss the main findings surrounding superovulation in small ruminants and published in recent five years.

Relationship between superovulation and embryo production with ovarian follicular population before superovulatory treatment in Brazilian Bergamasca sheep / [Relação da resposta superovulatória e produção embrionária com a população folicular ovariana antes do tratamento superovulatório de ovelhas da raça Bergamácia Brasileira]

The objective of this study was to quantify the superovulatory response and embryo production of Brazilian Bergamasca sheep and to evaluate the link to the follicular condition before superovulatory treatment, as a reference for selection of donors with potential for superovulation. Follicular population of twenty-three sheep was evaluated by ultrasound during metestrus phase of the estrous cycle and divided into groups of low, medium and high follicular population. Subsequently, they were synchronized, superovulated with 133mg of pFSH, mated and subjected to embryo collection. The superovulatory response (9.0±3.3 vs 10.7±6.2 vs 13.8±7.1) and embryo production (4.0±3.8 vs 2.6±2.0 vs 1,8±4.0) were similar between groups (P>0.05). There was a positive correlation between the number of follicles during the metestrus phase and the number of corpus luteum with premature regression (PLR) (0.52) and a negative correlation between the recovery rate and PLR (-0.44) (P<0.05). The sheep that presented PLR had more follicles during metestrus (16.9±7.8 vs 12.7±3.2) and lower embryo recovery rate (38.8±29.3 vs 72.2±29.9) than those with functional CLs (P<0.05). Follicular quantification during metestrus phases was unable to identify donors with high embryo production. Animals with PLR had a larger follicular population during metestrus and lower embryo recovery rate.(AU)

O objetivo deste trabalho foi quantificar a resposta superovulatória e a produção embrionária de ovelhas Bergamácia Brasileira e relacioná-las com a condição folicular antes do tratamento superovulatório, como referência para seleção de doadoras com potencial para superovulação. Vinte e três ovelhas foram avaliadas quanto à população folicular por ultrassonografia na fase de metaestro do ciclo estral e divididas em grupos com baixa, média e alta população folicular. Posteriormente foram sincronizadas, superovuladas com 133mg de pFSH, acasaladas e submetidas à coleta de embriões. A resposta superovulatória (9,0±3,3 vs. 10,7±6,2 vs. 13,8±7,1) e a produção embrionária (4,0±3,8 vs. 2,6±2,0 vs. 1,8±4,0) foram semelhantes entre os grupos (P>0,05). Houve correlação positiva entre o número de folículos no metaestro e o número de corpos lúteos com regressão prematura (RPCL) (0,52) e correlação negativa entre a taxa de recuperação e RPCL (-0,44) (P <0,05). As ovelhas que apresentaram RPCL tiveram mais folículos no metaestro (16,9±7,8 vs. 12,7±3,2) e menor taxa de recuperação embrionária (38,8±29,3 vs. 72,2±29,9) do que as que apresentaram CLs funcionais (P<0,05). A quantificação folicular nas fases de metaestro não foi capaz de identificar doadoras com alto potencial de produção embrionária. Animais com RPCL tiveram maior população folicular no metaestro e menor recuperação de embriões.(AU)

Comparison of cattle embryo collection between Ringer's lactate solution and Dulbecco's phosphatebuffered saline

The objective of this study was to determine the efficiency of Ringer's lactate solution (RL) and RL + 1% fetal bovine serum (FBS) and compare them with the efficiency of Dulbecco's phosphate-buffered saline (D-PBS). Twenty-two Wagyu female cattle were subjected to superovulation and were randomly distributed to form three groups: group 1 ­ uterine flushing with RL (n = 8), group 2 ­ uterine flushing with RL + 1% FBS (n = 7), and group 3 ­ uterine flushing with D-PBS (n = 7, control group). Cows received a CIDR® device containing 1.9 g of progesterone at random stages of the estrous cycle (day 0). Progesterone withdrawal occurred on day 8 in the morning. For heifers, 160 mg of porcine follicle-stimulating hormone (FSH-P) was used and for cows, 200 mg. Prostaglandin F2α was also injected on the eighth day of FSH-P administration. On day 9, in the morning, hCG was administered. Females were superovulated and inseminated twice in a fixed time for embryo transfer. On the 16th day, females were subjected to uterine flushing for embryo collection. We collected 76 embryos from 22 females subjected to superovulation, of which 52 were transferable and 24 had degenerated. The total of embryos collected was 23, 16, and 23 for groups 1, 2, and 3, respectively. The embryo recovery rates per group were 13.86±4.23, 15.39±4.61 and 27.16±13.33%, in groups 1, 2, and 3, respectively. The means for the total structures collected per female were 2.88±0.85, 3.00±1.23, and 4.57±1.72 in groups flushed with RL, RL + 1% FBS, and D-PBS, respectively. We conclude that Ringer's lactate solution and Ringer's lactate solution + 1% of FBS and Dulbecco's phosphate-buffered saline showed no significant differences in terms of embryo quality or quantity, suggesting that Ringer's lactate solution is an alternative for collecting embryos in cattle.

Synchronization of follicular wave emergence does not improve embryonic yield in superovulated ewes

The present study aimed to investigate the effects of a combination of progesterone with different doses of E-17β on following end points: (1) ovarian follicular dynamics and emergence of a new follicular wave, and (2) superovulatory response and embryo yield. In Experiment 1, 28 ewes were randomly divided into four groups (n = 7) to receive either 2.0 mg, 1.0 mg, 0.5 mg or none E-17β one day after insertion of a progesterone device. The different doses of estradiol similarly delayed the moment of follicular emergence (overall mean = 3.1 ± 1.0 days vs. control group = 0.86 ± 1.0 days; P < 0.01), but the emergence of the new wave showed greater synchronization with the 0.5 mg dosage of E-17β. In Experiment 2, sixty-two donor ewes received an internal progesterone release device (day -1) for 7 d and 1 d after the insertion of this device (day 0) were allocated randomly to receive 0.5 mg of E-17β or only the vehicle (control group). Superstimulation was initiated on day 3 with the administration of 133 mg of pFSH in eight decreasing doses. Contrary to expectations, the protocol with the administration of 0.5 mg E-17β did not improve the percentage of donors with > 2 CL, the number of CL and the production of embryos (P > 0.05). It was concluded that the combination of progesterone and 0.5 mg E-17β was more efficient in synchronizing the emergence of the new follicular wave, however this approach seems to be unnecessary in ewes superovulation programs.(AU)

Avaliação da eficiência de reutilização do CIDR® em protocolos de superovulação de ovelhas / Evaluation of efficiency of the reuse of CIDR® in sheep superovulation protocols

Sheep farming is an area of veterinary medicine of great importance at regional and national level, among the easily found breeds of economic relevance in northeastern Brazil are Morada Nova and Santa Inês. In addition, ultrasonography has been used systematically in animals superovulatory response to the sheep supervoulation protocols. In order to assess, based on the number of yellow bodies and number of viable embryos produced, the efficiency of the reuse of CIDR® in superovulation protocols in sheep using ultrasonography in color Doppler mode, a superovulatory protocol was performed in a total 40 sheep, with G-USED when 10 Morada Nova ewes and 10 Santa Inês ewes received reused CIDR® and G-NOVO when 10 Morada Nova ewes and 10 Santa Inês ewes received new CIDR®. The mean and standard error of yellow bodies was 10.35±1.33 for G-USED and 9.25±1.65 for G-NOVO, while the number of viable embryos was 6.50±2, 54 for G-USED and 8.25±1.49 for G-NEW. Thus, the reuse of CIDR® demonstrated efficiency in superovulation and did not interfere with the development of corpus luteum and the production of quality transferable embryos in sheep.

Avaliação da eficiência de reutilização do CIDR® em protocolos de superovulação de ovelhas / Evaluation of efficiency of the reuse of CIDR® in sheep superovulation protocols

Sheep farming is an area of veterinary medicine of great importance at regional and national level, among the easily found breeds of economic relevance in northeastern Brazil are Morada Nova and Santa Inês. In addition, ultrasonography has been used systematically in animals superovulatory response to the sheep supervoulation protocols. In order to assess, based on the number of yellow bodies and number of viable embryos produced, the efficiency of the reuse of CIDR® in superovulation protocols in sheep using ultrasonography in color Doppler mode, a superovulatory protocol was performed in a total 40 sheep, with G-USED when 10 Morada Nova ewes and 10 Santa Inês ewes received reused CIDR® and G-NOVO when 10 Morada Nova ewes and 10 Santa Inês ewes received new CIDR®. The mean and standard error of yellow bodies was 10.35±1.33 for G-USED and 9.25±1.65 for G-NOVO, while the number of viable embryos was 6.50±2, 54 for G-USED and 8.25±1.49 for G-NEW. Thus, the reuse of CIDR® demonstrated efficiency in superovulation and did not interfere with the development of corpus luteum and the production of quality transferable embryos in sheep.(AU)

Avaliação do uso do CIDR novo e reutilizado no início e duração do estro em ovinos / Evaluation of the use of new and reused CIDR at the beginning and duration of estrus in sheep

Study evaluated the use of new and re-utilized CIDR® to increase the reproductive breeding efficiency of the Santa Inês (SI) and Morada Nova (MN). In the synchronization protocol, 40 sheep was divided into four groups: MN with re-utilized CIDR®; MN with new CIDR®; SI with re-utilized CIDR® and SI with new CIDR®. The protocollasted for 15 days. At D0, females received CIDR®. Between D7 and D9, ovarian superstimulation was inducedby two doses application with a 12-hour break of p-FSH. Estrus confirmation was evaluated with ruffians, and the duration determined with the first and last mounts. The ovulation was determined by B-mode ultrasound and color Doppler. All animals of the experiment showed signs of estrus after removal of the device and there was no difference between treatments (p>0.05). In Treatment 1 (T1, CIDR® used), the beginning of estrus was 22.3±1.53h and in Treatment 2 (T2, new CIDR®) was 22.9±1.64h. In estrus duration, T1 and T2 was similar (21.6±1.81 and 22.2±0.63, respectively). Conclusion: the treatments are efficient to induce and synchronize estrus, with satisfactory results in their duration.

Avaliação do uso do CIDR novo e reutilizado no início e duração do estro em ovinos / Evaluation of the use of new and reused CIDR at the beginning and duration of estrus in sheep

Study evaluated the use of new and re-utilized CIDR® to increase the reproductive breeding efficiency of the Santa Inês (SI) and Morada Nova (MN). In the synchronization protocol, 40 sheep was divided into four groups: MN with re-utilized CIDR®; MN with new CIDR®; SI with re-utilized CIDR® and SI with new CIDR®. The protocollasted for 15 days. At D0, females received CIDR®. Between D7 and D9, ovarian superstimulation was inducedby two doses application with a 12-hour break of p-FSH. Estrus confirmation was evaluated with ruffians, and the duration determined with the first and last mounts. The ovulation was determined by B-mode ultrasound and color Doppler. All animals of the experiment showed signs of estrus after removal of the device and there was no difference between treatments (p>0.05). In Treatment 1 (T1, CIDR® used), the beginning of estrus was 22.3±1.53h and in Treatment 2 (T2, new CIDR®) was 22.9±1.64h. In estrus duration, T1 and T2 was similar (21.6±1.81 and 22.2±0.63, respectively). Conclusion: the treatments are efficient to induce and synchronize estrus, with satisfactory results in their duration.(AU)

Desafios e perspectivas na produção in vivo de embriões de pequenos ruminantes no Nordeste do Brasil / Challenges and perspectives in the in vivo production of small ruminant embryos in northeast of Brazil

Em decorrência da necessidade de aproveitamento de matrizes e reprodutores de alto mérito genético biotecnologias reprodutivas como a Multipla Ovulação e Transferência de Embriões (MOTE) vêm sendo cada vez mais utilizada, garantindo assim a produtividade mesmo diante de obstáculos. Nos últimos anos essa atividade vem apresentando um acentuado desenvolvimento e aprimoramento, principalmente em caprinos e ovinos que se constituem espécies de extrema importância para a Região Nordeste do Brasil, por serem uma das culturas mais vantajosas quando comparado com as demais culturas como a pecuária e por se tratar de uma atividade sustentável do ponto de vista ambiental, sociocultural e econômico. Dentre os principais fatores que ainda afetam o desempenho e sucesso dos programas de Transferência de Embriões (TE) em pequenos ruminantes podemos destacar a seleção de fêmeas doadoras e receptoras, variabilidade de resposta aos protocolos de superovulação, regressão prematura de corpo lúteo (CL), necessidade de etapas cirúrgicas como a laparotomia e laparoscopia e baixa disponibilidade de mão de obra especializada. Nesse sentido, este artigo aborda as principais etapas da produção in vivo de embriões em pequenos ruminantes bem como os desafios e as perspectivas de cada etapa a serem enfrentadas na Região Nordeste do Brasil.

As a result of the need to use matrices and breeders with high genetic merit, reproductive biotechnologies such as Multiple Ovulation and Embryo Transfer (MOTE) have been increasingly used, thus guaranteeing productivity even in the face of obstacles. In recent years, this activity has shown a marked development and improvement, especially in goats and sheep, which are extremely important species for the Northeast Region of Brazil, as they are one of the most advantageous crops for this region when compared to other crops such as livestock and because it is a sustainable activity from an environmental, socio-cultural and economic point of view. Among the main factors that still affect the performance and success of Embryo Transfer (ET) programs in small ruminants we can highlight the selection of donor and recipient females, variability in response to superovulation protocols, premature corpus luteum (CL) regression, need for surgical steps such as laparotomy and laparoscopy and low availability of specialized labor. In this sense, this article addresses the main stages of invivo embryo production in small ruminants as well as the challenges and perspectives of each stage to be faced in the Northeast Region of Brazil.

Desafios e perspectivas na produção in vivo de embriões de pequenos ruminantes no Nordeste do Brasil / Challenges and perspectives in the in vivo production of small ruminant embryos in northeast of Brazil

Em decorrência da necessidade de aproveitamento de matrizes e reprodutores de alto mérito genético biotecnologias reprodutivas como a Multipla Ovulação e Transferência de Embriões (MOTE) vêm sendo cada vez mais utilizada, garantindo assim a produtividade mesmo diante de obstáculos. Nos últimos anos essa atividade vem apresentando um acentuado desenvolvimento e aprimoramento, principalmente em caprinos e ovinos que se constituem espécies de extrema importância para a Região Nordeste do Brasil, por serem uma das culturas mais vantajosas quando comparado com as demais culturas como a pecuária e por se tratar de uma atividade sustentável do ponto de vista ambiental, sociocultural e econômico. Dentre os principais fatores que ainda afetam o desempenho e sucesso dos programas de Transferência de Embriões (TE) em pequenos ruminantes podemos destacar a seleção de fêmeas doadoras e receptoras, variabilidade de resposta aos protocolos de superovulação, regressão prematura de corpo lúteo (CL), necessidade de etapas cirúrgicas como a laparotomia e laparoscopia e baixa disponibilidade de mão de obra especializada. Nesse sentido, este artigo aborda as principais etapas da produção in vivo de embriões em pequenos ruminantes bem como os desafios e as perspectivas de cada etapa a serem enfrentadas na Região Nordeste do Brasil.(AU)

As a result of the need to use matrices and breeders with high genetic merit, reproductive biotechnologies such as Multiple Ovulation and Embryo Transfer (MOTE) have been increasingly used, thus guaranteeing productivity even in the face of obstacles. In recent years, this activity has shown a marked development and improvement, especially in goats and sheep, which are extremely important species for the Northeast Region of Brazil, as they are one of the most advantageous crops for this region when compared to other crops such as livestock and because it is a sustainable activity from an environmental, socio-cultural and economic point of view. Among the main factors that still affect the performance and success of Embryo Transfer (ET) programs in small ruminants we can highlight the selection of donor and recipient females, variability in response to superovulation protocols, premature corpus luteum (CL) regression, need for surgical steps such as laparotomy and laparoscopy and low availability of specialized labor. In this sense, this article addresses the main stages of invivo embryo production in small ruminants as well as the challenges and perspectives of each stage to be faced in the Northeast Region of Brazil.(AU)

Ultrassonografia Dopper em ovelhas / Doppler ultrasonography in sheep

O uso da técnica de ultrassonografia em modo B, como uma ferramenta pouco invasiva na reprodução animal, passou por uma evolução significativa na pesquisa e na prática. Na exploração comercial de animais de produção seu uso é, praticamente, concentrado ao manejo reprodutivo. Embora a ultrassonografia convencional em Modo B tenha passado por avanços tecnológicos esta não possibilita o acesso às informações da função do órgão, demonstradas pela perfusão vascular. Em ovelhas, o estudo da hemodinâmica e funcionalidade do útero, ovário e suas estruturas podem ser úteis para avaliar a viabilidade de programas reprodutivos e, por conseguinte, exibirem impacto econômico diante do uso da modalidade colorida ou pulsada (ou espectral) da ultrassonografia doppler. A ultrassonografia doppler é baseada no efeito Doppler na qual as frequências dos feixes de ultrassom refletidos pelos eritrócitos em movimento variam conforme as células se movem com diferentes velocidades. No tocante a reprodução de ovelhas, uma série de estratégias tem sido apresentadas para uso desta tecnologia, dada a necessidade e intempéries apresentadas a campo. Suas principais aplicações baseiam-se na avaliação da gestação, hemodinâmica uterina, funcionalidade luteal e respostas à superovulação, dentre outras. O presente trabalho teve como objetivo apresentar os aspectos relacionados ao uso e aplicações da ultrassonografia doppler espectral e colorida na reprodução de ovelhas.

The use of B-mode ultrasound technique, as a little invasive tool in animal reproduction, has undergone a significant evolution in research and practice. In farm animals, its use is practically concentrated on reproductive management. Although conventional B-mode ultrasonography has undergone technological advances, it does not allow access to organ function information, as demonstrated by vascular perfusion. In sheep, the study of the hemodynamics and functionality of the uterus, ovary and its structures can be useful to assess reproductive programs viability and, therefore, exhibit economic impact when using the color or pulsed (or spectral) modalityof doppler ultrasound. Doppler ultrasonography is based on the Doppler effect in which the frequencies of the ultrasound beams reflected by the erythrocytes in motion vary as the cells move at different speeds. A lot of strategies have been presented using this technology, related to reproduction of sheep animals, in farm conditions. Applications are based on the evaluation of pregnancy, uterine hemodynamics, luteal functionality and responses to superovulation, among others. This work aimed to present aspects regarding to applications of spectral and color doppler ultrasound in sheep reproduction.

Ultrassonografia Dopper em ovelhas / Doppler ultrasonography in sheep

O uso da técnica de ultrassonografia em modo B, como uma ferramenta pouco invasiva na reprodução animal, passou por uma evolução significativa na pesquisa e na prática. Na exploração comercial de animais de produção seu uso é, praticamente, concentrado ao manejo reprodutivo. Embora a ultrassonografia convencional em Modo B tenha passado por avanços tecnológicos esta não possibilita o acesso às informações da função do órgão, demonstradas pela perfusão vascular. Em ovelhas, o estudo da hemodinâmica e funcionalidade do útero, ovário e suas estruturas podem ser úteis para avaliar a viabilidade de programas reprodutivos e, por conseguinte, exibirem impacto econômico diante do uso da modalidade colorida ou pulsada (ou espectral) da ultrassonografia doppler. A ultrassonografia doppler é baseada no efeito Doppler na qual as frequências dos feixes de ultrassom refletidos pelos eritrócitos em movimento variam conforme as células se movem com diferentes velocidades. No tocante a reprodução de ovelhas, uma série de estratégias tem sido apresentadas para uso desta tecnologia, dada a necessidade e intempéries apresentadas a campo. Suas principais aplicações baseiam-se na avaliação da gestação, hemodinâmica uterina, funcionalidade luteal e respostas à superovulação, dentre outras. O presente trabalho teve como objetivo apresentar os aspectos relacionados ao uso e aplicações da ultrassonografia doppler espectral e colorida na reprodução de ovelhas.(AU)

The use of B-mode ultrasound technique, as a little invasive tool in animal reproduction, has undergone a significant evolution in research and practice. In farm animals, its use is practically concentrated on reproductive management. Although conventional B-mode ultrasonography has undergone technological advances, it does not allow access to organ function information, as demonstrated by vascular perfusion. In sheep, the study of the hemodynamics and functionality of the uterus, ovary and its structures can be useful to assess reproductive programs viability and, therefore, exhibit economic impact when using the color or pulsed (or spectral) modalityof doppler ultrasound. Doppler ultrasonography is based on the Doppler effect in which the frequencies of the ultrasound beams reflected by the erythrocytes in motion vary as the cells move at different speeds. A lot of strategies have been presented using this technology, related to reproduction of sheep animals, in farm conditions. Applications are based on the evaluation of pregnancy, uterine hemodynamics, luteal functionality and responses to superovulation, among others. This work aimed to present aspects regarding to applications of spectral and color doppler ultrasound in sheep reproduction.(AU)

Superovulação em éguas da raça Crioula e Quarto de Milha com extrato de pituitária equina (EPE) / Superovulatory protocol with equine pituitary extract (EPE) in mares Crioula and the Quarter Horse

Este trabalho compara a resposta superovulatória de éguas doadoras de embriões das raças Quarto de Milha (QM) e Crioula, utilizando um protocolo com baixa dose de extrato de pituitária equina (EPE). Oito éguas QM e seis éguas Crioulas foram acompanhadas durante 3 ciclos estrais consecutivos, sendo que cada ciclo corresponde a um grupo. Grupo Controle – monitoramento do crescimento folicular até a ovulação; Grupo EPE – monitoramento ultrassonográfico até que os folículos atingissem cerca de 20 mm de diâmetro e, posteriormente, administração de 7 mg de EPE, duas vezes ao dia, até a indução da ovulação com 2500UI de hCG; Grupo Pós-EPE – idem ao grupo controle. Os dados foram submetidos à análise de variância, utilizando o procedimento GLM do pacote estatístico SAS, sendo previamente testadas para normalidade dos resíduos, e as médias comparadas pelo teste de Tukey ao nível de 5%. Nas éguas Crioulas tratadas com EPE houve um aumento no número de ovulações (p=0,0534), com média de 3,33±2,06 quando comparadas aos grupos controle e pós-EPE e às éguas da raça QM (2,00±0,53). O tratamento com EPE na dose preconizada permitiu uma melhor resposta superovulatória e produção embrionária nas éguas Crioulas, quando comparadas com as éguas Quarto de Milha.

This study compared the superovulatory response of embryos donor mares of Quarter Horse (QH) and Crioula using a protocol with low dose of equine pituitary extract (EPE). Eight QH mares and six Crioula mares were monitored during 3 consecutive estrous cycles, with each cycle corresponds to a group. Control Group - monitoring of follicle growth up to the ovulation; EPE group - when the follicles reached 20 mm in diameter were administered 7 mg EPE twice daily. When the follicles achieved a diameter 35 mm, the ovulation was induced with 2500UI hCG; Post-EPE Group - idem to the control group. Data were analyzed using GLM procedure of the SAS statistical package. The variables were submitted to the Tukey’s test and least square means adjusted for multiple comparisons using the Tukey-Kramer’s test, with significance level of 5%. Values are presented as mean ± SD. In the Crioula mares treated with EPE, there was an increase in the number of ovulations (p =0.0534) with a mean of 3.33 ± 2.06 ovulations when compared to the control and post-EPE groups, and mares QM. (2.00±0.53). Treatment with EPE in the recommended dose allowed better superovulatory response and rate of embryo recovery in Crioula mares when compared to the QM mares.

Superovulação em éguas da raça Crioula e Quarto de Milha com extrato de pituitária equina (EPE) / Superovulatory protocol with equine pituitary extract (EPE) in mares Crioula and the Quarter Horse

Este trabalho compara a resposta superovulatória de éguas doadoras de embriões das raças Quarto de Milha (QM) e Crioula, utilizando um protocolo com baixa dose de extrato de pituitária equina (EPE). Oito éguas QM e seis éguas Crioulas foram acompanhadas durante 3 ciclos estrais consecutivos, sendo que cada ciclo corresponde a um grupo. Grupo Controle monitoramento do crescimento folicular até a ovulação; Grupo EPE monitoramento ultrassonográfico até que os folículos atingissem cerca de 20 mm de diâmetro e, posteriormente, administração de 7 mg de EPE, duas vezes ao dia, até a indução da ovulação com 2500UI de hCG; Grupo Pós-EPE idem ao grupo controle. Os dados foram submetidos à análise de variância, utilizando o procedimento GLM do pacote estatístico SAS, sendo previamente testadas para normalidade dos resíduos, e as médias comparadas pelo teste de Tukey ao nível de 5%. Nas éguas Crioulas tratadas com EPE houve um aumento no número de ovulações (p=0,0534), com média de 3,33±2,06 quando comparadas aos grupos controle e pós-EPE e às éguas da raça QM (2,00±0,53). O tratamento com EPE na dose preconizada permitiu uma melhor resposta superovulatória e produção embrionária nas éguas Crioulas, quando comparadas com as éguas Quarto de Milha.(AU)

This study compared the superovulatory response of embryos donor mares of Quarter Horse (QH) and Crioula using a protocol with low dose of equine pituitary extract (EPE). Eight QH mares and six Crioula mares were monitored during 3 consecutive estrous cycles, with each cycle corresponds to a group. Control Group - monitoring of follicle growth up to the ovulation; EPE group - when the follicles reached 20 mm in diameter were administered 7 mg EPE twice daily. When the follicles achieved a diameter 35 mm, the ovulation was induced with 2500UI hCG; Post-EPE Group - idem to the control group. Data were analyzed using GLM procedure of the SAS statistical package. The variables were submitted to the Tukeys test and least square means adjusted for multiple comparisons using the Tukey-Kramers test, with significance level of 5%. Values are presented as mean ± SD. In the Crioula mares treated with EPE, there was an increase in the number of ovulations (p =0.0534) with a mean of 3.33 ± 2.06 ovulations when compared to the control and post-EPE groups, and mares QM. (2.00±0.53). Treatment with EPE in the recommended dose allowed better superovulatory response and rate of embryo recovery in Crioula mares when compared to the QM mares.(AU)

Recent advances in superovulation in sheep / Recentes avanços na superovulação de ovelhas

Nearly three years ago our research team published a review of intrinsic determinants and predictors of superovulatory responses in ewes (18th International Congress on Animal Reproduction, Tours, France; 26-30 June 2016; Theriogenology 2016;86:130-143). Heres a summary of major advances in superovulatory treatments of ewes reported over the last three years and of some most anticipated future directions. The rate of genetic improvement within a synthetic population of animals is significantly enhanced by an application of superovulation and embryo transfer. However, the sheep industry has progressed rather slowly in terms of implementing these technologies in comparison to other species although sheep have been used in many studies that paved the way to the development of modern assisted reproductive technologies (ARTs). Recently, several improvements in determining ovarian responses and non-invasively collecting/transferring embryos have been reported but some most frustrating problems associated with hormonal ovarian superstimulation (e.g., unpredictable and highly variable individual responses) remain unresolved. This warrants continued studies of both the physiological basis of and novel approaches to superovulatory treatments in sheep.(AU)