Use of the cryostat to prepare slides for trichological analysis / [Uso do aparelho criostato para preparação de lâminas para a análise tricológica]

A análise dos padrões morfológicos e morfométricos das microestruturas capilares é uma técnica não invasiva que pode ser utilizada para identificar espécies de mamíferos. Esta técnica pode ser aplicada em diversas áreas da ciência animal, tais como controle de qualidade de alimentos e análises forenses. Dada a dificuldade de obter seções transversais de pelos de guarda para expor o córtex, a maioria dos estudos analisou apenas os componentes medulares e cuticulares do pelo. A inclusão do córtex capilar de guarda em uma análise tricológica pode proporcionar uma descrição mais precisa das raças ou espécies de mamíferos. O presente estudo propõe um novo método para a execução de cortes transversais que expõem o córtex do pelo guarda de mamíferos utilizando um criostato.(AU)

Gastrointestinal parasites among felids inhabiting the Serra dos Órgãos National Park, Rio de Janeiro, Brazil / Parasitos gastrintestinais em felídeos que habitam o Parque Nacional da Serra dos Órgãos, Rio de Janeiro, Brasil

This study aimed to investigate the species of felids that inhabit the Serra dos Órgãos National Park (Parnaso) and gastrointestinal parasites at various stages of their life cycles in the feces of these animals. Between 2013 and 2015, felid feces were collected from trails in Parnaso. The sampling points were georeferenced. A total of 82 fecal samples were processed, of which 79 were collected on the ground, two from captured felids and one from a necropsied animal. All samples underwent coproparasitological techniques. Samples collected from the environment underwent additional trichological analysis. Fur patterns corresponding to Leopardus guttulus, Leopardus pardalis, Leopardus wiedii and Puma yagouaroundi were observed in 32 of the samples collected on the soil. High frequency of potentially parasitic evolving forms (88.6%) was observed in felid feces, particularly eggs of the family Diphyllobothriidae (68.6%). Besides, were also detected, eggs of superfamily Ascaridoidea (42.9%), nematode larvae (28.6%), eggs of order Strongylida (28.6%), Capillaria sp. (8.6%), Trichuris sp. (8.6%), eggs of order Spirurida (2.9%), unsporulated coccidian oocysts (8.6%) and Eimeria sp. (2.9%). Felid feces presented higher frequency of polyparasitism (60%) than monoparasitism (28.6%).(AU)

Este estudo teve como objetivo pesquisar as espécies de felídeos que circulam no Parque Nacional da Serra dos Órgãos (Parnaso), bem como as formas evolutivas de parasitos gastrintestinais nas fezes desses animais. Entre 2013 e 2015, fezes de felídeos foram coletadas nas trilhas do Parnaso, sendo os pontos de coleta georeferenciados. Foram coletadas 82 amostras fecais, sendo 79 do ambiente, duas de felídeos capturados e uma de um animal necropsiado. Todas as amostras foram submetidas a técnicas coproparasitológicas, sendo as coletadas do ambiente também analisadas pela tricologia. Em 32 amostras coletadas do solo foram identificados padrões de pelos de Leopardus guttulus , Leopardus pardalis, Leopardus wiedii e Puma yagouaroundi. Elevada frequência de formas evolutivas potencialmente parasitárias (88,6%) foi evidenciada nas fezes dos felídeos, destacando os ovos da Família Diphyllobotrhiidae (68,6%). Além destes, também foram detectados, ovos da superfamília Ascaridoidea (42,9%), larvas de nematoides (28,6%), ovos da ordem Strongylida (28,6%), Capillaria sp. (8,6%), Trichuris sp. (8,6%), ovos da família Spirurida (2,9%), oocistos de coccídios não esporulados (8,6%) e Eimeria sp. (2,9%). As fezes dos felídeos apresentaram maior frequência de poliparasitismo (60%) que de monoparasitismo (28,6%).(AU)

Análise tricológica em morcegos do Brasil revela diferenciação ao nível de família (Mammalia: Chiroptera)

O estudo da microestrutura dos pelos pode ser aplicado em diversas áreas, como: zoologia, ecologia, ciências forenses, arqueologia, epidemiologia e paleontologia, além de ser uma ferramenta útil e importante na identificação das espécies de mamíferos. O objetivo do presente estudo foi analisar os padrões da microestrutura cuticular dos pelos de 68 espécies de morcegos ocorrentes no Brasil. Foram coletados pelos do dorso de espécimes depositados em coleção científica (via úmida). Posteriormente esses pelos foram prensados em lâminas para microscopia junto a uma fina camada de esmalte incolor, com o objetivo de marcar a impressão cuticular, que foi observada em microscópio óptico e comparada com literatura específica. As impressões cuticulares foram classificadas em oito padrões morfológicos: (1) folidáceo estreito, (2) conoidal liso, (3) conoidal contínuo liso, (4) conoidal ornamentado largo, (5) conoidal ornamentado descontínuo, (6) conoidal ornamentado dentado, (7) conoidal liso com bráctea e (8) ondeado oblíquo. Foi possível a diferenciação em nível de Família ou Subfamília. A partir da morfologia cuticular dos pelos foi construída uma chave para identificação de pelos de morcegos até o nível de família ou Subfamília (no caso de Phyllostomidae).

The study of the microstructure of hair can be applied in several areas, such as: zoology, ecology, forensic sciences, archaeology, epidemiology and paleonthology, asides from being and useful and important tool on identifying mammal species. The objective of the present study was to analyze the patterns of cuticular microstructure of the hair of 67 bat species occurring in Brazil. The hairs were collected from the back of specimens deposited in a scientific collection (wet method). Later, these hairs were pressed in a glass slide for microscopy with a fine layer of uncolored nail polish for marking the cuticular impression, which was observed in optical microscope and compared to specific literature. The cuticular impressions were classified in eight morphological patterns: (1) narrow leaf shaped, (2) straight conoidal, (3) continuous straight conoidal, (4) ornamented wide conoidal, (5) uncontinuous ornamented conoidal, (6) cogged ornamented conoidal, (7) straight conoidal with bracts and (8) obliquous waved. The diferentiation was possible to the level of Family or Subfamily. By the cuticular morphology of hair, an identification key was made for bat’s hairs to the level of Family or Subfamily (in the case of Phyllostomidae).

Análise tricológica em morcegos do Brasil revela diferenciação ao nível de família (Mammalia: Chiroptera)

O estudo da microestrutura dos pelos pode ser aplicado em diversas áreas, como: zoologia, ecologia, ciências forenses, arqueologia, epidemiologia e paleontologia, além de ser uma ferramenta útil e importante na identificação das espécies de mamíferos. O objetivo do presente estudo foi analisar os padrões da microestrutura cuticular dos pelos de 68 espécies de morcegos ocorrentes no Brasil. Foram coletados pelos do dorso de espécimes depositados em coleção científica (via úmida). Posteriormente esses pelos foram prensados em lâminas para microscopia junto a uma fina camada de esmalte incolor, com o objetivo de marcar a impressão cuticular, que foi observada em microscópio óptico e comparada com literatura específica. As impressões cuticulares foram classificadas em oito padrões morfológicos: (1) folidáceo estreito, (2) conoidal liso, (3) conoidal contínuo liso, (4) conoidal ornamentado largo, (5) conoidal ornamentado descontínuo, (6) conoidal ornamentado dentado, (7) conoidal liso com bráctea e (8) ondeado oblíquo. Foi possível a diferenciação em nível de Família ou Subfamília. A partir da morfologia cuticular dos pelos foi construída uma chave para identificação de pelos de morcegos até o nível de família ou Subfamília (no caso de Phyllostomidae).(AU)

The study of the microstructure of hair can be applied in several areas, such as: zoology, ecology, forensic sciences, archaeology, epidemiology and paleonthology, asides from being and useful and important tool on identifying mammal species. The objective of the present study was to analyze the patterns of cuticular microstructure of the hair of 67 bat species occurring in Brazil. The hairs were collected from the back of specimens deposited in a scientific collection (wet method). Later, these hairs were pressed in a glass slide for microscopy with a fine layer of uncolored nail polish for marking the cuticular impression, which was observed in optical microscope and compared to specific literature. The cuticular impressions were classified in eight morphological patterns: (1) narrow leaf shaped, (2) straight conoidal, (3) continuous straight conoidal, (4) ornamented wide conoidal, (5) uncontinuous ornamented conoidal, (6) cogged ornamented conoidal, (7) straight conoidal with bracts and (8) obliquous waved. The diferentiation was possible to the level of Family or Subfamily. By the cuticular morphology of hair, an identification key was made for bats hairs to the level of Family or Subfamily (in the case of Phyllostomidae).(AU)

IDENTIFICAÇÃO CRIMINAL DE ESPÉCIES DA FAUNA SILVESTRE POR DNA MITOCONDRIAL

O tráfico, contrabando e comércio ilegal de animais é a quarta atividade ilícita mais comum no mundo, colocando em risco a extinção de diversas espécies. Além disso, o comércio ilegal de animais silvestres pode ser meio de veiculação de enfermidades, principalmente de caráter zoonótico, ao serem transportadas por animais. O trabalho tem por objetivo identificar espécies de animais da fauna silvestre através do DNA mitocondrial (mtDNA), tricologia e determinar a prevalência de Trypanosoma cruzi agente etiológico da enfermidade de Chagas, uma Enfermidade Tropical Negligenciada (NTD), segundo a Organização Mundial da Saúde (OMS). Foram coletadas amostras de tecido muscular, pele, sangue e pelos em animais oriundos de apreensões no território brasileiro. Para a identificação genética, foi sequenciada uma região conservada do mtDNA de aproximadamente 600 pares de bases e comparados com o banco de dados genético Barcode of Life Database (BOLD). A identificação por pelos foi realizada através de análise comparada e o diagnóstico T. cruzi através da técnica Loop-mediated Isothermal Amplification (LAMP), uma técnica rápida, barata e sensível. Foram identificados animais das espécies Dasypus sp., Mazama gouazoubira, Pantera onca, Cerdocyon thous, Tamandua tetradactyla, Didelphis aurita, Puma concolor, Myoprocta sp., Cavia sp., Galictis cuja; através do sequenciamento genético do mtDNA e as espécies Alouatta sp., Ozotoceros bezoarticus, Sylvilagus brasiliensis, Didelphis albiventris, Panthera onca, Puma concolor, Myrmecophaga tridactyla, Leopardus tigrinus, Dasyprocta sp.; por meio da morfologia dos pelos, verificou-se que a associação das técnicas é uma potencial ferramenta para a identificação de espécies. Com relação ao diagnóstico por meio de LAMP,verificou-se positividade de 50% (25/50) das amostras, sendo potenciais reservatórios do parasita T. cruzi.

Animal trafficking, smuggling and illegal trade is the fourth most common illegal activity in the world, increases the risk of extinction of several endangered species. An important point concerning illegal animal trade and the increasing globalization is that represents a possible vehicle for illness spreading, including zoonosis, creating a health public issue. The aim of this research is to identify species from the wildlife by mitochondrial DNA (mtDNA), hair and determines the prevalence of the zoonotic agent Trypanosoma cruzi, etiological agent of Chagas disease, a Neglected Tropical Disease (NTD) according to World Health Organization (WHO). Samples were collected from blood, muscle and skin from trafficking animals in Brazilian territory. A preserved region from mtDNA (600 base pair) was sequenced and compared to the Barcode of Life Database (BOLD) in order to do the genetic identification. Hair identification was complete by compared analysis. The diagnosis of T. cruzi ware made using the Loop-mediated Isotehrmal Amplification (LAMP) assay, a rapid, cheap and sensible technique. Have been identified the following species: Dasypus sp., Mazama gouazoubira, Pantera onca, Cerdocyon thous, Tamandua tetradactyla, Didelphis aurita, Puma concolor, Myoprocta sp., Cavia sp., Galictis cuja; using mtDNA sequencing and these species: Alouatta sp., Ozotoceros bezoarticus, Sylvilagus brasiliensis, Didelphis albiventris, Panthera onca, Puma concolor, Myrmecophaga tridactyla, Leopardus tigrinus, Dasyprocta sp.; by hair morphology analysis. The identification could be effective because of its association between forensic genetic and trichology techniques. In our research 50% (25/50) of animals were positive in LAMP assay to T. cruzi. This analysis could be important to identify reservoirs and the risk of animal trafficking to human health.

IDENTIFICAÇÃO DE RAÇAS BOVINAS BRASILEIRAS POR MEIO DE ANÁLISE TRICOLÓGICA

A tricologia é um método que permite analisar os padrões microestruturais de arranjos de escamas cuticulares e células medulares encontradas em pelos guarda de mamíferos. O presente estudo foi conduzido com o objetivo de identificar as raças bovinas Caracu, Curraleiro Pé-Duro, Pantaneiro e Nelore por meio da morfologia e morfometria tricológica, bem como validar a técnica comparando com resultados da caracterização genética. Esse estudo foi apresentado em forma de capítulos, com uma revisão de literatura sobre a aplicação da tricologia na identificação de espécies de mamíferos e de raças de interesse zootécnico, onde foram disponibilizadas informações sobre os conceitos básicos necessários ao entendimento da análise tricológica e suas aplicações. O capítulo seguinte foi composto pela caracterização de pelos guarda das raças bovinas Caracu, Curraleiro Pé-Duro e Pantaneiro (Bos taurus taurus) e da raça Nelore (Bos taurus indicus), por meio de análise tricológica, a fim de avaliar a possibilidade de uso desta técnica como marcador racial. Realizaram-se descrições morfológicas e morfométricas dos pelos de 160 bovinos (40 animais/raça). De cada bovino foram feitas subamostras de pelos até serem obtidas lâminas de qualidade. A morfologia foi determinada por meio de chave dicotômica e as medidas foram realizadas na escama cuticular e na medula e os resultados dessa metodologia foram comparados à caracterização genética dos animais amostrados. Os resultados indicaram que a tricologia e a avaliação genética foram similares no ponto de vista de classificação dos indivíduos dentro dos grupos raciais. Portanto, a técnica pode ser considerada útil como marcador racial para raças bovinas.

Trichology is a method to analyze micro-structural patterns of scarf-skin scales arrangements and medullary cells found in mammals guard hair. The present study was conducted to identify Caracu, Curraleiro Pé-Duro, Pantaneiro and Nellore bovine breeds by trichological morphology and morphometry, as well as validate the technique compared with genetic characterization. This study was presented in chapters. First, a review on trichology application on mammal species and breeds identification with basic concepts necessary for understanding trichology analysis and its applications. The second chapter was composed by characterization of guard hair of Caracu, Curraleiro Pé-Duro and Pantaneiro (Bos taurus taurus) and of Nellore (Bos taurus indicus), Brazilian bovine breeds, through trichology analysis, to assess the possibility of using this technique as a racial marker. Morphological and morphometric descriptions were held by 160 cattle (40 animals/breeds). Sub-samples of each bovine were made until quality slides were obtained. Morphology was determined through dichotomous keys and measures were carried out in the cuticle scale and in the hair shield matrix. Results indicated that trichology and genetic evaluation were similar in the point of view of classification of individuals within racial groups. Therefore, the technique can be considered useful as a marker for bovine breeds.