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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-204345

Resumo

O objetivo do presente estudo foi investigar a influência da concentração de insulina sobre o efeito da adição do Fator de Crescimento e Diferenciação 9 (GDF9) e a Proteína Morfogenética Óssea 15 (BMP15) isoladamente ou em associação sobre o cultivo in vitro de folículos pré-antrais caprinos inclusos em tecido ovariano. Fragmentos oriundos de um mesmo par ovariano foram distribuídos aletoriamente para o grupo controle não cultivado ou cultivados in vitro por 7 dias em meios de cultivo contendo baixas (10 ng/mL) ou altas (10 g/mL) concentrações de insulina na ausência de GDF9 e BMP15 isoladamente ou em associação. O tratamento com insulina baixa mostrou uma porcentagem significativamente maior de folículos normais do que o tratamento com insulina alta. A adição de BMP15 sozinho ou em associação com GDF9 ao meio contendo insulina baixa reduziu a percentagem de folículos normais (P <0,05). Contudo, a adição de BMP15 e GDF9 isoladamente ou em associação a um meio de cultivo contendo de insulina alta aumentou significativamente a percentagem de folículos normais. O meio contendo somente insulina baixa ou insulina alta suplementada com BMP15 e BMP15 + GDF9 após sete dias de cultivo mostrou uma maior percentagem de folículos secundários do que o controle não cultivado. Em conclusão, na presença de concentração fisiológica de insulina (10 ng/mL), a suplementação do meio com GDF9 e BMP15 isoladamente ou em combinação não mostrou qualquer vantagem. Entretanto, para a manutenção de um padrão de desenvolvimento folicular (diâmetro nas diferentes categorias) semelhante ao in vivo, a concentração de 10 g/mL de insulina é indicada.

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The aim of the present study was to investigate the influence of medium with different insulin levels on the in vitro effect of GDF9 and BMP15 related to the survival and development of caprine preantral follicles enclosed in ovarian tissue. Fragments from the same ovarian pair were randomly assigned to non-cultured control treatment or in vitro cultured for 7 days in -MEM containing 10 ng/mL (Low) or 10 g/mL (High) insulin concentrations in the absence or presence of BMP15 and/or GDF9. Low insulin treatment showed a significant higher percentage of normal follicles than High insulin treatment. The addition of BMP15 alone or in association with GDF9 to the medium containing low insulin reduced (P<0.05) the percentage of normal follicles. However, the addition of BMP15 and GDF9 alone or in association to high insulin medium significantly enhanced the percentage of normal follicles. The medium containing Low insulin alone or High insulin supplemented with BMP15 and BMP15+GDF9 treatments after seven days of culture showed a higher percentage of secondary follicles than noncultured control. In conclusion, in the presence of physiological concentration of insulin (10 ng/mL), the medium supplementation with GDF9 and BMP15 alone or in combination did not showed any advantage. However, for a follicular development close to in vivo scenario, a concentration of 10 g/mL insulin is indicated.

Biblioteca responsável: BR68.1