Analysis of different platelet-rich fibrin processing / Análise de diferentes processamentos da fibrina rica em plaquetas

Introduction: Platelet-rich fibrin (PRF) is formed by an autologous blood concentrate, with properties that promote cell proliferation and regenerationof bone, gingival and epithelial tissue. Objective: To compare four different procedures for processing as well as obtaining PRF, and analyzing their formation through laboratory techniques. The purpose of the study is to validate a method that produces higher quality PRF for oral surgery use in different branches of dentistry. Material and method: The experiment consisted of collecting blood from 12 volunteers, and processing each patient's sample in 4 different ways. In the following two-stage process analysis, the first, quantitative, step was to analyze the samples' platelet-poor plasma (PPP),with a Neubauer Hemocytometer to count blood components. In the second, qualitative step, the sample's PRF were analyzed under microscopy using histological slides. Result: The statistical analysis of the leukocyte, red blood cell and platelet count did not show any significant distinction when comparing different processes. Histological analysis of the PRF showed fibrin network with platelet aggregation, several leukocytes and presence of red blood cells, with double centrifuged samples presenting more white blood cells than the others. Conclusion: Among the analyzed procedures, the sample centrifuged once at 3000 RPM (1900 G) for 10 min showed the best quality PRF.

Introdução: A fibrina rica em plaquetas (FRP) é formada por um concentrado sanguíneo autólogo, com propriedades de promover a proliferação celular, regeneração de tecido, dentre eles tecido ósseo, gengival e epitelial. Objetivo: Comparar quatro tipos diferentes de processamento e obtenção de FRP, analisando a sua formação através de técnicas laboratoriais. A finalidade do estudo é validar um método que obtenha maior qualidade para o uso em cirurgias nas diversas áreas da odontologia. Material e método: O experimento foi constituído de uma coleta de sangue de 12 voluntários, onde a amostra de cada paciente foi processada de 4 formas. A análise dos processamentos se deu em duas etapas, onde na primeira, quantitativa, foi analisado o plasma pobre em plaquetas (PPP), através de contagem de constituintes sanguíneos em câmara de Neubauer. Na segunda etapa, qualitativa, foram analisadas as FRP em microscopia através de lâminas histológicas. Resultado: A análise estatística da contagem de leucócitos, hemácias e plaquetas não mostraram diferença significativa entre os distintos processamentos. As análises histológicas do FRP mostraram redes de fibrina com agregação plaquetária, inúmeros leucócitos e presença de hemácias, sendo que as amostras de dupla centrifugação apresentaram mais leucócitos que nas demais. Conclusão: Dos procedimentos analisados, a amostra centrifugada a 1 única vez a 3000 RPM (1900 G) por 10 min mostrou-se a melhor qualidade de FRP.

DNA damage in buccal cells in oral PMDs and malignant disorders by comet assay: a comparison with blood leukocytes

Aim: DNA damage associated with Oral Squamous Cell Carcinoma (OSCC) and potentially malignant disorders (PMDs) is produced due to carcinogenic agents or increased oxidative stress. Comet assay can assist in early detection and evaluation of the amount of DNA damage; lymphocytesare the most commonly used cells for performing comet assay. Utilisation of buccal epithelial cells in comet assay can be a minimally invasive and rapid method. The present study compared the efficacy of comet assay in assessing DNA damage in buccal cells over peripheral blood leucocytes (PBLs) in oral potentially malignant and malignant disorders. Methods: The study included fifty five patients each of Leukoplakia, Oral Submucous Fibrosis (OSMF) and OSCC along with fifty five healthy individuals as control. Buccal epithelial cells were collected from all the selected subjects. DNA damage was evaluated bymeasuring the mean tail length (µm). Results: A significantly increased mean tail length (µm) and higher DNA damage were found in OSCC (26.1096 + 1.84355) and there was a progressive stepwise increase in mean tail length from control(8.4982 + 0.93307) to PMD [leukoplakia (14.6105 + 0.71857); OSMF (12.5009 + 1.12694)] to OSCC.The mean tail length in different habit groups was greater than controls, though no significant difference was noted between habit groups. The mean tail length of buccal cells was significantly greater than the mean tail length of PBLs in all study groups and controls. Conclusion: Hence, use of comet assay on buccal epithelial cells can prove to be beneficiary for evaluation of DNA damage

Influência da extensão da doença periodontal no perfil sanguíneo de ratos Wistar / Influence of the periodontal disease extension on blood profile of Wistar rats

O objetivo deste trabalho foi investigar a influência da extensão da doença periodontal no perfil sanguíneo de ratos Wistar. Foram utilizados 30 ratos divididos em 3 grupos de 10 animais: C- ratos controle; DP1- ratos com doença periodontal em 3 molares superiores; DP2 ­ ratos com doença periodontal em 3 molares superiores e 3 inferiores. A doença periodontal foi induzida por meio da confecção de ligadura em torno do colo dentário dos molares selecionados de acordo com cada grupo. Após 30 dias, os animais foram anestesiados e, por meio de uma punção cardíaca, foi coletado 5ml de sangue para as análises dos parâmetros do hemograma, creatinina, triglicérides e colesterol. Em seguida, os animais foram sacrificados e as maxilas removidas e processadas para análise histopatológica em coloração de H.E. para caracterizar o perfil da doença periodontal em cada animal. Os resultados obtidos a partir do tecido hematológico foram analisados estaticamente por meio dos testes de ANOVA e Tukey, com nível de significância de 5%. Pode-se observar nos grupos DP1 e DP2 presença de infiltrado inflamatório crônico, perda de inserção conjuntiva, perda de estrutura óssea cortical e alveolar, presença de reabsorções dentárias, presença de biofilme e sequestro ósseo. Quanto ao perfil sanguíneo, pode-se observar diferença estatisticamente significante entre o grupo controle e os grupos DP1 e DP2 em relação à quantidade de leucócitos e linfócitos (p<0,05). Ainda, o grupo DP2 apresentou maior quantidade de leucócitos e neutrófilos em relação ao grupo DP1 e controle (p<0,05). Pode-se concluir que a presença da doença periodontal eleva a quantidade de leucócitos, neutrófilo e linfócitos no sangue de ratos Wistar, e que, a extensão da doença periodontal influencia na quantidade de leucócitos e neutrófilos(AU)

The aim of this study was to evaluate the influence of the periodontal disease extension on the blood profile of Wistar rats. Thirty rats were divided into 3 groups of 10 animals each: C control rats; DP1- rats with periodontal disease in 3 upper molars; DP2 - rats with periodontal disease in 3 upper and 3 lower molars. Periodontal disease was induced by ligature around the tooth according to each group. After 30 days, the animals were killed and 5ml of blood was collected for analyzes of blood count parameters, creatinine, triglycerides and cholesterol. Then the animals were sacrificed and the jaws removed and processed for histopathological analysis to characterize, in H.E. staining, the profile of periodontal disease in each animal. The results from the hematologic tissue were analyzed statistically by ANOVA and Tukey test, with 5% significance level. It can be observed in groups DP1 and DP2 presence of chronic inflammatory infiltrates, connective tissue attachment loss and alveolar bone cortical structure loss, presence of resorptions, presence of biofilm and bone sequestration. As for the blood profile, it is can observe a statistically significant difference between the control group and the groups DP1 and DP2 to the amount of leukocytes and ymphocytes (p <0.05). Further, DP2 group had a higher amount of leukocytes and neutrophils compared to DP1 and control group (p <0.05). It can be concluded that the presence of periodontal disease increases the amount of leukocytes, neutrophils, and lymphocytes in the blood of Wistar rats, and the extent of periodontal disease affects the quantification of leukocytes and neutrophils(AU)

A influência do tratamento periodontal não cirúrgico sobre as células brancas e vermelhas do sangue de pacientes portadores de periodontite crônica generalizada / The influence of non-surgical periodontal treatment on white and red blood cells of patients with chronic periodontitis

A periodontite crônica é capaz de gerar uma resposta inflamatória sistêmica subclínica e decorrentes alterações hematológicas vêm sendo estudadas nos últimos anos. O objetivo do nosso estudo foi desenvolver um plano piloto para uma futura investigação sobre a influência do tratamento periodontal não cirúrgico sobre as contagens totais de células brancas e vermelhas do sangue de pacientes portadores de periodontite crônica generalizada (PCG). Os pacientes foram encaminhados pela Clínica de Diagnóstico Bucal, tendo sido examinados e tratados periodontalmente na Clínica de Especialização em Periodontia da Faculdade de Odontologia da Universidade Estadual do Rio de Janeiro (UERJ). Participaram desse estudo 8 pacientes com PCG, fumantes e/ou não fumantes, 5 mulheres e 3 homens, com média de idade de 49,5 anos (±9,0) e de qualquer raça. Foram realizados exames periodontais clínicos antes e 30 dias após o tratamento periodontal não cirúrgico, nestes mesmos períodos foram realizadas as coletas de sangue periférico para avaliação no Laboratório de Análises Clínicas do Hospital Universitário Pedro Ernesto. Os resultados não demonstraram diferença significativa entre as contagens de células brancas e vermelhas, embora os parâmetros clínicos tenham apresentado melhora significativa (P <0,05), os níveis de hemoglobina e hematócrito tiveram uma tendência à redução (P= 0,09 e P= 0,07, respectivamente). Pode-se concluir que, nesse estudo piloto o tratamento periodontal não cirúrgico não exerceu influência sobre as células brancas e vermelhas do sangue nos pacientes portadores de PCG. No entanto, outros estudos são importantes para verificar essa questão.

Chronic Periodontitis is capable of generating an inflammator y response and necessitated subclinical hematological have been studied in recent years. The aim of our study was to develop a master plan for future research on the influence of non-surgical periodontal treatment onthe total counts of white and red blood cells of patients with generalized chronic periodontitis (GCP). The patients were referred by the Oral Diagnosis Clinic and was examined in periodontally and treated Clinical Specialist in Periodontics, Faculty of Dentistry, State University of Rio de Janeiro (UERJ). 8 pacients with PCG participated in this study, smokers/ nonsmokers, 5 women and 3 men, mean age of 49.5 years (±9.0) and indifferent to race. Clinical periodontal examinations were performed before and 30 days after non-surgical periodontal treatment, these same periods were performed peripheral blood samples for evaluation in the Clinical Laboratory of University Hospital Pedro Ernesto. The results showed no significant difference between the white and red cell, al though the clinical parameters have shown significant improvement (P<0,05), levels of hemoglobin and hematocrit had a tendency to decrease (P=0,09 and P=0,07, respectively). It can be concluded that in this pilot study, the non-surgical periodontal treatment did not influence white blood cells and red blood in patients with PCG. However, further study is necessary to verify this issue.

A influência do tratamento periodontal não cirúrgico sobre células sangüíneas, perfil lipídico e glicemia de pacientes portadores de periodontite crônica / The influence of non-surgical periodontal treatment over the elements of the blood, lipidic profile and glycemia of patients suffering from chronic periodontitis

O objetivo do presente estudo foi verificar se o tratamento periodontal não cirúrgico exercia influência sobre os elementos celulares do sangue, perfil lipídico e glicose de pacientes com periodontite crônica. Dez pacientes (49,7 ± 8,8 anos) foram submetidos, previamente ao tratamento periodontal e, trinta dias após o mesmo, à coleta de 10ml de sangue periférico, através dos quais foram avaliados elementos celulares das séries branca e vermelha, número de plaquetas, VHS, lipidograma e glicose. Os parâmetros clínicos utilizados foram: Índice de Placa (IP) de Silness e L÷e (1964), Índice Gengival (IG) de Loe (1967), Sangramento à Sondagem (SS), Profundidade de Bolsa à Sondagem (PBS) e Nível de Inserção à Sondagem (NI). Trinta dias após a conclusão do tratamento periodontal não cirúrgico, foi realizada reavaliação e constatada melhora significativa (P<0,001) de todos os parâmetros clínicos supracitados. A hemoglobina (P=0,03) e a glicose (P=0,02) sofreram redução significativa, enquanto o número de hemácias (P=0,06) e o hematócrito (P=0,08), apesar de reduzidos, não sofreram mudanças estatisticamente significativas. O colesterol total e o LDL apresentaram aumento, porém não significativo, após o tratamento (P=0,09 e P=0,06, respectivamente), enquanto os demais parâmetros não sofreram alterações significativas (P>0,1). Através destes resultados, concluiu-se que o tratamento periodontal não cirúrgico foi bem sucedido no controle da periodontite crônica, e que, após o mesmo, a hemoglobina e a glicose sofreram redução estatisticamente significativa, as hemßcias e o hematócrito apresentaram uma tendência à redução e o colesterol total e o LDL, uma tendência ao aumento.

Reatividade vascular e celular da polpa dental de ratos frente a estímulos inflamatórios / Vascular and cellular responses to pro-inflammatory stimuli in rat dental pulp

The dental pulp is a soft, vascularized, and innervates tissue located in the core of a mineralised dental structure (enamel, dentin, and cement). This peculiar characteristic of being a tissue restrained inside a low compliance environment prompted us to study its vascular and cellular reactivity. Pro-inflammatory stimuli such as Substance P (SP), calcitonin-gene related peptide (CGRP), and prostaglandin E2 (PGE2) were applied to the exposed pulp of anaesthetised animals and the plasma extravasation measured by the Evans blue content. Leukocyte recruitment was evaluated morphometrically by counting the cell number present in serial sections of 1:3 4 µm-pulp tissue 6h after bacterial endotoxin (LPS; 0.06 - 1.2 µg/site) administration. Increase in pulp vascular permeability and cellular recruitment due to the injection of mentioned mediators in teh skin or LPS in the peritoneal cavity were used as positive controls. The local pulp application of SP, CGRP, and PGE2 significantly increased the vascular permeability, although in a minor dose range of that observed in the skin. In both tissues CGRP was the most potent mediator suggesting the presence of CGRP receptors, which was confirmed at least in the pulp, by the PCR method. In relation to cell recruitment it was necessary a higher dose (about 4-fold) of LPS to induce a similar pattern in the pulp as that observed in the rat peritoneal cavity suggesting a deficiency in adhesion molecules in blood vessels in the rat dental pulp. In addition, steroidal and non-steroidal anti-inflammatory drugs were able to reduce the cell recruitment showing the sensitivity of this method to study the effects of these two classes of drugs

Estudo morfológico, morfométrico e imunohistoquímico da população leucocitária da gengiva humana, em uma região tropical / The morphologic, morphometric and immunohistochemical study of the leukocytic population of human gingiva in an tropical region

A doença periodontal, que se refere ao espectro completo de doenças inflamatórias do periodonto, é a outra grande doença oral que, junto com a cárie dentária, representa a principal ameaça à saúde bucal. Como a maioria das variedades da doença periodontal é atribuída aos distúrbios hiperérgicos associados à placa bacteriana, vimos a importância de se estabelecer o padrão leucocitário residente bem como as variações sofridas nos processos inflamatórios (gengivites e periodontites) da nossa região. Analisamos, comparativamente, a freqüência e a distribuição dos diversos tipos leucocitários e as alterações epiteliais, em pacientes com sulco gengival variando entre 2 a 4 mm de profundidade. Utilizando-se colorações rotineiras e técnicas de imunohistoquímica, estudamos "in situ" as alterações morfológicas, populações macrofágica e linfocitária T, bem como subpopulações T(CD4/CD8), células efetoras B (plasmócitos) de resposta imune e a cascata do Sistema Complemento. Em todos os grupos, o epitélio oral apresentou alterações morfológicas adaptativas manifestadas por paraceratose e hiperplasia. Uma população leucocitária variada, incluindo macrófagos, linfócitos T auxiliares e supressores/ citotóxicos esteve sempre presente, constituindo, provavelmente, uma população residente, independente da profundidade do sulco gengival. Houve, ainda, um nítido predomínio de plasmócitos produtores de IgG seguido daqueles sintetizadores de IgA. Assim, parece que o caráter imuno-hiperérgico da doença periodontal envolve todos os componentes da resposta imune "in situ" e já transparece mesmo nos casos com menos de 2mm de profundidade do sulco gengival, entre nós

Estudo das propriedades antiinflamatória e antimitótica das drogas indometacina, butazona, clinoril, naprosin, beneflogin e inflaril: análise comparativa em ratos / Anti-inflammatory and antimototic properties study of drugs: indomethacin, phenyl-butazone, sulindac, naproxen, bensydamine and niflumic acid: comparative analysis in rats

A inflamaçäo é uma reaçäo do organismo caracterizada por reaçöes vasculares e teciduais, cuja magnitude depende da intensidade do agente agressor. Inevitavelmente os agentes flogógenos provocam agressöes que conduzem às alteraçöes periódicas da permeabilidade vascular desenvolvidas nas áreas da lesäo inflamatória, À expressividade dessas reaçöes estäo ligadas a maior atuaçäo do agente flogógeno no local. Tomam parte desse episódio tanto os capilares como as vênulas, que aumentam a permeabilidade vascular, surgindo no local extravasamento de proteína plasmática liberada ao nível tecidual configurando o edema. É sabido que através de modelos experimentais com a carregenina obtém-se o aumento da permeabilidade vascular em torno de uma hora (imediata) e o edema atinge uma configuraçäo máxima na 4ª hora. Conclui-se que a reaçäo inflamatória aguda (exsudativa) manifesta-se em duas fases distintas. Com a finalidade de observar os efeitos das drogas antiinflamatórias näo-esteróides nas fases imediata (1 hora) e tardia (3 horas) da inflamaçäo aguda, utilizou-se como agentes flogógenos (placa bacteriana dental) de estímulos fracos (0,07 mg) e médios (0,7 mg). Os estímulos fortes foram descartados para evitar uma rotura maciça dos vasos locais afetados...