Investigação do vírus Epstein-Barr em pacientes com Periodontite Crônica / Investigation of the Epstein-Barr virus in patients with chronic periodontitis

Introdução: Nos últimos anos, um número crescente de estudos sugere a participação dos herpesvírus na doença periodontal. Objetivo: Este trabalho investiga a relação entre a presença do herpesvírus Epstein-Barr (EBV) e a infecção periodontal em pacientes com periodontite crônica. Metodologia: Foram coletadas amostras de biofilme subgengival de sítios com profundidades de sondagem de 4 a 6 mm e > 7 mm, de 28 pacientes com periodontite crônica. Como controles, foram incluídos 16 indivíduos, sistemicamente saudáveis e sem doença periodontal. Adicionalmente, parâmetros clínicos de profundidade de sondagem (PS), nível clínico de inserção (NCI) e índice de sangramento à sondagem (SS) foram registrados. Resultado: Os resultados demonstraram médias de 2,7 mm PS, 1,7 mm NCI e 0,3% dos sítios apresentaram SS. A investigação do EBV no biofilme subgengival dos grupos foi realizada por meio da reação em cadeia da polimerase com primer espécie-específico. Os resultados da análise viral indicaram ausência de EBV em todas as amostras subgengivais analisadas. Conclusão: A partir destes resultados, não foi encontrada relação entre a presença do herpesvírus Epstein-Barr e a periodontite crônica.

Introduction: In recent years, a growing number of studies have suggested the participation of the herpes virus in periodontal disease. Objective: this study investigates the relationship between the presence of the Epstein-Barr herpes virus and periodontal infection in patients with chronic periodontitis. Methodology: subgingival biofilm samples were collected of subgingival sites with probing depths of 4 mm to 6 mm, and > 7 of 28 patients with chronic periodontitis. The control group consisted of 16 healthy subjects without clinical evidence of chronic periodontitis. Additionally, clinical parameters of probing depth, attachment level and Bleeding index were recorded. Result: the results showed averages of 2 mm probing depth, 1, 7 mm attachment level and 0.3 % bleeding on probing. Investigation of the herpes virus in the subgingival biofilm of the groups was performed using polymerase chain reaction with species-specific primer. Results of viral analysis indicated the absence of EBV in all subgingival samples analyzed. Conclusion: these results found no relationship between the presence of the Epstein-Barr herpes virus and chronic periodontitis.

Prevalência da Síndrome de Sjögren em infectados pelo HTLV em São Paulo / Prevalence of Sjögren's Syndrome among HTLV-infected individuals in São Paulo

O HTLV-1 (human T-cell lymphotropic virus type 1) foi o primeiro retrovírus humano a ser identificado. É comprovadamente o agente etiológico da leucemia/linfoma de células T no adulto (ATLL) e da paraparesia espástica tropical ou mielopatia associada ao HTLV (HAM/TSP). Porém se evidencia que o vírus possa estar relacionado a várias outras manifestações sistêmicas. A Síndrome de Sjögren (SS) é uma das desordens que têm sido associada ao HTLV-1. Embora a infecção pelo HTLV seja reconhecidamente endêmica no Brasil, não há informações sobre essa associação na população brasileira. Este trabalho propõe-se a investigar a prevalência de SS em pacientes infectados pelo HTLV e a prevalência de HTLV em pacientes diagnosticados com SS. Exames sorológicos para investigação do HTLV foram realizados em 50 pacientes da Irmandade da Santa Casa de Misericórdia de São Paulo (ISCMSP) que apresentavam queixas compatíveis com a SS (grupo 1). No Instituto de Infectologia Emílio Ribas foram avaliados 129 pacientes HTLV+ que passaram pelo processo diagnóstico para a SS (grupo 2). Nenhum dos pacientes do grupo 1 apresentou soropositividade para o HTLV. No grupo 2, 46 (35,7%) apresentaram algum grau de xerostomia, 18 (13,95%) apresentaram xeroftalmia, 8 (6,2%) apresentaram hipossalivação, 2 (1,55%) apresentaram fluxo lacrimal alterado e 1 paciente (0,77%) apresentou autoanticorpos reagentes (anti-SSB). Foram executadas biópsias incisionais de glândulas salivares menores em 5 pacientes do grupo 2. Apenas 2 pacientes (1,55%) HTLV+ completaram os critérios para o diagnóstico de SS. A SS mostrou ser três vezes mais prevalente em pacientes HTLV+ do IIER do que nos pacientes que buscaram atendimento no serviço de Otorrinolaringologia da ISCMSP.

HTLV-1 (human T-cell lymphotropic virus type 1) was the first human retrovirus identified. It is proven to be the etiological agent of adult T-cell leukemia/lymphoma (ATLL) and of a neurological disease known as HTLV-1 associated myelopathy or tropical spastic paraparesis (HAM/TSP). However, there is the evidence that the virus could be related to several other systemic manifestations. Sjögren's Syndrome (SS) is one of the disorders that have been associated with HTLV-1. Although HTLV infection is known to be endemic in Brazil, there is no information about this association in Brazilian population. This study proposes to investigate the prevalence of SS among patients infected with HTLV and the prevalence of HTLV among patients diagnosed with SS. Serological tests for HTLV were performed in 50 patients from Irmandade da Santa Casa de Misericórdia de São Paulo (ISCMSP) with complaints compatible with the SS (group 1). At Institute of Infectious Diseases Emilio Ribas (IIER), 129 HTLV+ patients were evaluated and the diagnostic process for SS was performed (group 2). None of the patients in group 1 was positive for HTLV. In group 2, 46 (35.7%) reported any degree of xerostomia, 18 (13.95%) had xerophtalmia, hyposalivation was present in 8 (6.2%) patients and decrease in tear secretion, in only one patient (0.77%) the auto-antibodies was positive ( Anti-SSB). Incisional biopsies of labial minor salivary glands were executed in 5 patients in group 2. Only 2 HTLV+ patients (1.55%) have fulfilled the classification criteria for SS. SS proved to be three times more prevalent in HTLV patients from IIER than in patients who sought care in the service of Otorhinolaryngology at ISCMSP.

Desenvolvimento de biossensor para detecção do vírus Espetein Barr (EBV) em saliva de pacientes HIV positivos / Biosensor development to detection of Epstein Barr virus (EBV) from positive HIV patients

O vírus Epstein Barr (EBV) é oncogênico e relacionado com a etiologia de inúmeras neoplasias malignas, como linfomas de Burkitt, Hodgkin(LH), não-Hodgkin (LNH), nasal de células NK, além de carcinoma nasofaríngeo, desordens linfoproliferativas, bem como outras lesões não malignas. A incidência de LNH em pacientes HIV positivos é maior em relação a indivíduos saudáveis, sendo 75% desses linfomas, EBV positivos, com alta taxa de DNA e expressão de genes virais. Além disso, aumento da carga viral em pacientes transplantados é preditivo de uma neoplasia maligna associada ao EBV. EBV é facilmente transmitido pela saliva e estudos apontam uma maior quantidade do DNA-EBV em saliva em relação ao sangue. Os métodos clássicos de diagnóstico - Imunoabsorbância (ELlSA); Imunoistoquímica; Reação de Polimerase em Cadeia (PCR); e Hibridização in situ - são realizados em laboratórios bem equipados e por profissionais qualificados, com reagentes específicos e onerosos, e tempo de análise com variação de horas ou até mesmo dias. O desenvolvimento de métodos analíticos rápidos, seguros e de baixo custo para diagnóstico e controle de doenças em humanos tem despertado grande interesse científico através dos biossensores. Simplicidade de utilização e grande sensibilidade nos resultados, diagnóstico em tempo reduzido, uso de pequenas quantidades de amostras e baixo custo, despontam como grandes vantagens para investimento em pesquisa no desenvolvimento dos biossesores, com potencial substituinte de técnicas analíticas tradicionais. Nesse trabalho foi desenvolvido um biossensor para diagnóstico do EBV, isto é, presença ou ausência, em saliva de pacientes HIV positivos. Este sistema foi formado pela imobilização de sequências oligonucleotideos modificados com grupo tiol, complementares ao gene alvo do EBV (EBV-DNA), em nanopartículas de ouro (AuNp) baseado no princípio de detecção colori métrica visual direta. O resultado positivo apresenta mudança de cor da solução do conjugado (AuNp/EBV-DNA) em contato com saliva, e o negativo não mostra mudança de cor sob as mesmas condições. Foi padronizado a partir de amostras de saliva previamente analisadas pela técnica de quantificação absoluta por PCR em Tempo Real. Apresentou linearidade de resposta entre 495.000 e 495 cópias de vírus/uL (R2=0,982), detecção limite de 0,29 cópia/uL e a sensibilidade foi de 0,022 cópias/uL em testes com saliva. Portanto, desenvolvemos um biossensor para diagnóstico do EBV em saliva, de baixo custo, sensível e específico, para ser utilizado em laboratórios, consultórios e/ou ambulatórios, sem a necessidade de equipamento e capacitação profissional para interpretação de resultados.

Epstein Barr (EBV) is an oncogenic vírus that is related to several diferent malignant neoplasms, such as, Burkitl, Hodgkin (HL) and non-Hodgkin (NHL) Iymphomas, nasal NK-cell Iymphoma, besides nasopharyngeal carcinoma, Iymphoproliferative disorders, and other non-neoplastic disorders. NHL is more incident in HIV patients than in healthy individuais, and 75% of these Iymphomas are EBV positive. Also, an increase in the viral load of transplanted patients is considered predictive of an EBV related neoplasm. EBV may be transmitled by the saliva of and infected person, and the literatures shows a higher DNA amount in this fluid than in blood. The classical diagnostic methods: immunoassay (ELlSA); immunohistochemistry; polymerase chain reaction (PCR); and "in situ" hybridization, are performed in well-equipped laboratories, by trained professionals, with specific and expensive reagents. Usually it takes hours or even days to analyze the results. The development of safe, quick and low-cost innovative methods for diagnosis and control of human diseases has challenged scientists, and biosensors are receiving a great deal of focus. Usability, sensitivity, short-term results, low sample amount and low-cost made biosensors a potential substitute for traditional analytical methods. In this work we developed a biosensor for EBV diagnosis, that is, its presence or absence, in HIV patients. The biosensor is based on the immobilization of EBV specific oligonucleotides sequences in gold nanoparticles by a thiol group. The system is based on a colorimetric detection by direct visualization. A positive result shows a change in color when the conjugate (AuNp/EBV-DNA) is in contact with an EBV infected saliva. EBV DNA copies in saliva were analyzed by absolute quantification with real time PCR. Results present linearity between 495000 and 495 copies/ul (R2=0.982), the detection limit was 0.29 copies/uL, and the sensitivity was 0.022 copies/uL. Therefore, a low-cost, sensitive and specific biosensor for salivary EBV diagnosis was developed. The system is possible to be used in laboratories, clinics, medical and dental offices, with no need of special equipment or training to understand the results.

Alterações comportamentais, psicológicas, de higiene bucal e presença de microrganismos superinfectantes e viruses da família Herpesviridae em pacientes mantidas em programa de desintoxicação para dependentes químicos / Behavioral changes, psychological, oral hygiene and presence of superinfecting microorganisms and viruses in the family herpesviridae patients kept in a detoxification program for drug

A dependência de drogas traz sérias conseqüências sistêmicas, econômicas e sociais. Assim, o presente estudo objetivou avaliar a ocorrência de enfermidades em pacientes do gênero feminino com dependência química e a possibilidade da cavidade bucal dessas pacientes se converter em reservatório de microrganismos oportunistas.. Para tanto, foram obtidos dados referentes às condições de saúde sistêmicas, socioeconômicas, consumo de medicamentos, uso de drogas lícitas ou ilícitas de 50 pacientes com dependência química mantidas internadas em clínica de desintoxicação, o mesmo ocorrendo com igual número de pacientes não dependentes. A seguir, foram realizados exames clínicos intra e extrabucais. Amostras de biofilme supra e subgengivais, saliva e das mucosas foram transferidas para água ultrapura. A ocorrência da família Enterobacteriaceae, Enterococcus sp., E. faecalis, E. faecium, Pseudomonas sp., P. aeruginosa e Candida spp., Helicobacter e H. pylori, bem como os viruses HSV-1, CMV e EBV-1 foi avaliada por PCR ou nested PCR. Verificou-se que 94% das pacientes do grupo teste eram usuárias de mais do que uma única droga, sendo o tabaco (92%), bebidas alcoólicas (68%), crack (66%) e cocaína (52%) as mais consumidas, quase sempre em múltiplas associações. Verificou-se maior freqüência de alterações comportamentais e/ou psicológicas no grupo teste, além de dores articulares, infecções oportunistas, cefaléia, fadiga, xerostomia, formigamento das extremidades, anemia, periodontite, perda de peso, retardo do processo de reparo, entre outras. Observou-se freqüência significavente mais elevada de Candida sp., C. albicans, família Enterobacteriaceae, Enterococcus sp., Helicobacter sp., H. pylori, vírus CMV e vírus EBV-1 na saliva das pacientes com dependência química, enquanto no biofilme supragengival verificou-se uma maior proporção de amostras positivas para Candida sp., C. albicans, família Enterobacteriaceae, Enterococcus sp., E. faecalis, Helicobacter sp...

Drug addiction frequently causes serious systemic, economic and social consequences. Thus, the present study aimed at evaluating the occurrence of illnesses in female chemically dependent patients as well as the possibility of their oral cavity becoming potential reservoir for opportunistic microorganisms. For this purpose, data regarding systemic health and socioeconomic status, medication consumption, legal or illegal drug use were obtained from 50 female chemically dependent patients undergoing inpatient detoxification treatment; while the same procedure was carried out with 50 non-addicted females. Subsequently, intra and extra-oral clinical tests were done. Samples from the supra- and subgingival biofilms, saliva and oral mucosa were transferred to ultrapure water. The occurrence of Enterobacteriaceae family, Enterococcus sp., E. faecalis, E. faecium, Pseudomonas sp., P. aeruginosa and Candida sp., Helicobacter and H. pylori, as well as viruses HSV-1, CMV and EBV-1 was evaluated by using PCR or nested PCR. It was verified that 94% of the patients from the chemically dependent group were multiple drug users, being tobacco (92%), alcohol (68%), crack (66%) and cocaine (52%) the most consumed ones. A higher frequency of behavioral and/or psychological alterations was verified in the chemically dependent group, besides articular pain, opportunistic infections, headaches, fatigue, xerostomy, tingling extremities, anemia, periodontitis, weight loss, delay in the repair process, among others. A higher frequency of Candida sp., C. albicans, Enterobacteriaceae family, Enterococcus sp., Helicobacter sp., H. pylori, CMV and EBV-1 viruses was observed in the saliva from the chemically dependent group; while in the supragingival biofilm a higher proportion of positive samples to Candida sp., C. albicans, Enterobacteriaceae family, Enterococcus sp., E. faecalis, Helicobacter sp., H. pylori, Pseudomonas sp., P. aeruginosa and EBV-1 virus was observed. In the...

Ocorrência de microrganismos periodontopatogênicos e viruses herpéticos na cavidade bucal de pacientes portadores de Síndrome de Down / Occurrence of microorganisms and viruses herpetic periodontal pathogens in the oral cavity of patients with Down's syndrome

O objetivo do presente estudo foi avaliar a ocorrência dos principais microrganismos periodontopatogênicos e dois viruses herpéticos na saliva e no biofilme microbiano supra e subgengival de 50 crianças e adolescentes com Síndrome de Down, através de métodos moleculares, comparando com um grupo de indivíduos de um grupo controle que não apresentam a síndrome. Espécimes clínicos foram coletados desses pacientes após avaliação das condições sócio-econômicas e comportamentais. A microbiota bucal dos pacientes foi caracterizada através da obtenção de amostras do biofilme subgengival, supragengival e saliva, as quais foram transportadas para o laboratório de Microbiologia e Imunologia da FOA-UNESP para detecção dos principais patógenos por PCR. As características de saúde periodontal foram avaliadas segundo índices específicos. A possibilidade de inter-relações entre os diferentes microrganismos foi determinada através dos testes de Qui-quadrado, teste exato de Fisher e Mann-Whitney. Verificou-se que as condições de saúde periodontal das crianças e adolescentes portadores de Síndrome de Down não diferia significativamente do grupo controle. A ocorrência das espécies microbianas anaeróbias e microaerófilas mais associadas ao ambiente periodontal foi semelhante nos dois grupos de crianças e adolescentes, independentemente da condição gengival, com modesto aumento na ocorrência de Prevotella intermedia e Enterobacteriaceae na saliva dos pacientes sindrômicos, o mesmo ocorrendo com Enterobacteriaceae, Campylobacter rectus, Prevotella nigrescens e gênero Pseudomonas no biofilme supragengival e P. intermedia no biofilme subgengival de pacientes sindrômicos sadios e pseudomonados naqueles com gengivite. A microbiota associada às diferentes condições periodontais nos dois grupos também evidenciou pequenas diferenças, mas confirma o papel dos anaeróbios obrigatórios nesse processo e citomegalovírus e vírus Epstein-Barr, enquanto que nos pacientes sindrômicos, além desses...

This study aimed to evaluate the occurrence of the major periodontal pathogens and two herpetic viruses in saliva and dental biofilm from 50 children and adolescents with Down’s syndrome through molecular tools, comparing with those of individuals of a control group who did not present this syndrome. Clinical samples were collected from patients soon after evaluation of socioeconomic and behavioral conditions. The oral microflora was characterized by mean of samples of supragingival and subgingival biofilm and saliva, which were transferred to Microbiology and Immunology Laboratory at FOA-UNESP for detection of the major pathogens by PCR. Periodontal conditions were evaluated through specific indexes. The possibility of relationship between different microorganisms and clinical conditions were determined through Chi-Square test, Fisher’s exact test and Mann-Whitney test. It was verified that periodontal conditions of children and adolescents with Down’s syndrome did not differ significantly from the control group conditions. The occurrence of anaerobes and microaerophiles associated with periodontal environment was similar in both groups of children and adolescents, regardless of the gingival condition, with modest increase in the occurrence of Prevotella intermedia and Enterobacteriaceae in the saliva of patients syndromic patients, the same occurred with Enterobacteriaceae, Campylobacter rectus, Prevotella nigrescens and genus Pseudomonas in the supragingival biofilm and P. intermedia in subgingival biofilm of periodontally healthy patients and pseudomonads in syndromic patients with gingivitis. The microbiota associated with different periodontal conditions in both groups showed minor differences, but confirms the role of strict anaerobes in this process as well as the role of and cytomegalovirus and Epstein-Barr virus, while in syndromic patients, besides these infectious agents enteric bacteria may be of relevant in gingivitis and periodontitis

O papel dos vírus na etiologia da doença periodontal / The virus role on the etiology of periodontal disease

No presente estudo, avaliou-se e discutiu-se, através da literatura, o papel de determinados vírus no início e progressão da doença periodontal. A associação de diversas bactérias na etiologia da doença periodontal tem sido bastante abordada nos últimos 25 anos. No entanto, o envolvimento do vírus é um assunto bem recente. Os principais vírus envolvidos na etiologia dos diferentes tipos de doenças periodontais fazem parte da família dos herpesvírus e juntamente com as bactérias periodontopatogênicas participam da destruição tecidual através de mecanismos diretos e indiretos. Estudos mostram uma forte associação entre o citomegalovírus Humano (HCMV) e a periodontite agressiva. O Epstein-Barr tipo 1 (EBV-1) e o Herpes Vírus Simples tipo 1 (HSV-1) também são frequentemente associados às diferentes doenças periodontais. Alguns tipos de vírus, como o Herpes Vírus Humano (HHV), podem ser encontrados em biópsias gengivais, mostrando que o tecido gengival pode servir como uma reserva de vírus. Mais estudos são necessários para esclarecer a relação bactérias-vírus na etiologia da doença periodontal e assim estabelecer medidas profiláticas e terapêuticas específicas no futuro

Aspectos morfológicos que sugerem a presença do papilomavírus humano (HPV) em lesões do epitélio de revestimento da mucosa oral / Suggestive morphological aspects of human papillomavirus (HPV) infection in epithelium oral mucosa lesions

O HPV é um vírus epiteliotrópico, cujo material genético é o DNA, e possivelmente associado a lesões benignas e malignas do epitélio de revestimento da mucosa oral. Os aspectos histomorfológicos encontrados na literatura relacionados a esse vírus são: coilocitose, disceratose, papilomatose, hiperceratose, acantose e grânulos de cerato-hialina proeminentes. Esses efeitos citopáticos quando encontrados em conjunto funcionam como um forte indicador de infecção por HPV. Dentre eles, a coilocitose se destaca por ser descrita freqüentemente como um sinal patognomônico de infecção por esse vírus. Este trabalho se propõe a revisar a literatura especializada sobre tais aspectos morfológicos na iniciativa de torná-los de uso rotineiro nos serviços de patologia oral como potentes indicadores de infecção por HPV

Epstein-barr vírus e coxsackie vírus: manifestaçöes clínicas na cavidade bucal / Epstein-barr virus and coxsackieviruses: clinical manifestations in the oral cavity

As viroses estäo, universalmente, entre as doenças mais prevalentes no ser humano. Näo obstante, muitas delas passam desapercebidas, ou näo säo diagnosticada corretamente. No presente trabalho, os autores discutem o papel dos vírus Epstein-Barr e Coxsackie nas manifestaçöes patológicas mais comuns da cavidade bucal. Enfocam a necessidade de conhecimento básico, pelo cirurgiäo-dentista generalista, näo somente de suas características, mas, também, das lesöes qua acometem a boca, de um modo geral, contribuindo, assim, para o diagnóstico e tratamento corretos dessas afecçöes