Imunoexpressão da proteína ING3 em Queilites Actínicas e carcinomas de células escamosas de lábio inferior / Immunoexpression of ING3 protein in actinic cheilitis and squamous cell carcinomas of the lower lip

A família de inibidores de crescimento (inhibitor of growth - ING) corresponde a um grupo de genes supressores tumorais cuja expressão se apresenta alterada ou ausente em diversos tipos de câncer. Os produtos destes genes estão relacionados, principalmente, a processos celulares indispensáveis na carcinogênese, como remodelação da cromatina, proliferação celular, replicação e reparo do DNA. Este estudo avaliou a expressão imuno-histoquímica da proteína ING3 em 45 espécimes de queilite actínica (QA) e 48 espécimes de carcinoma de células escamosas de lábio inferior (CCELI). A expressão da proteína foi comparada entre os dois grupos de amostras, bem como com os parâmetros clínico-patológicos das lesões estudadas, através dos testes estatísticos Exato de Fisher, Kruskal-Wallis (KW), Mann-Whitney (U) e teste de correlação de Spearman. Um nível de significância de 5% foi adotado para todos os testes, sendo considerados significativos os valores de p ≤ 0,05. Não foram encontradas associações estatisticamente significativas entre as variáveis morfológicas de CCELI e tamanho do tumor, envolvimento linfonodal, estadiamento clínico, recorrência local e metástase linfonodal após tratamento (p>0,05). Óbitos foram significativamente mais frequentes em tumores de alto escore de risco histopatológico (p<0,05). Nas QAs, diferenças significativas na expressão de ING3 núcleo-citoplasmática, e restrita ao citoplasma, com a gradação de Kujan et al. (2006) foram encontradas (p<0,05). Nos CCELIs, não houve diferença estatisticamente significativa ao comparar as expressões de ING3 (núcleo-citoplasmática e restrita ao citoplasma) com os parâmetros clínicos e morfológicos (p>0,05). A expressão de ING3 núcleo-citoplasmática foi significativamente menor em CCELI quando comparada aos casos de QA (p<0,05) e a expressão restrita ao citoplasma foi significativamente maior nos CCELIs (p<0,05). Nossos resultados sugerem que há notável diminuição da expressão nuclear de ING3 conforme a progressão maligna, indicando função supressora tumoral prejudicada desta proteína em QAs e CCELIs. Entretanto, acredita-se que, na carcinogênese labial, ING3 caracteriza-se melhor como um marcador preditor de transformação maligna, do que um biomarcador de comportamento biológico tumoral (AU).

The family of inhibitors of growth (ING) corresponds to a group of tumor suppressor genes whose expression is altered or absent in several types of cancer. The products of these genes are mainly related to cellular processes indispensable in carcinogenesis, including cell proliferation, DNA replication and repair. This study evaluated the immunohistochemical expression of ING3 protein in 45 actinic cheilitis (AC) and 48 lower lip squamous cell carcinoma (CCELI) specimens. Protein expression was compared between the two groups of samples, as well as with the clinicopathological parameters of studied lesions, using Fisher's exact tests, Kruskal-Wallis (KW), Mann-Whitney (U) and correlation test of Spearman. A significance level of 5% was adopted for all tests, with values of p ≤ 0.05 being considered significant. No statistically significant associations were found between morphological variables of CCELI and tumor size, lymph node involvement, clinical staging, local recurrence and lymph node metastasis after treatment (p>0.05). Deaths were significantly more frequent in tumors with a high histopathological risk score (p<0.05). In ACs, significant differences in nuclear-cytoplasmic and restricted to the cytoplasm expression of ING3, with gradation of Kujan et al. (2006) were found (p<0.05). In CCELIs, there was no statistically significant difference when comparing ING3 expressions (nucleocytoplasmic and cytoplasmic restricted) with clinical and morphological parameters (p>0.05). Nucleocytoplasmic ING3 expression was significantly lower in CCELI when compared to AC cases (p<0.05) and cytoplasm-restricted expression was significantly higher in CCELIs (p<0.05). Our results suggest that there is a remarkable decrease in ING3 nuclear expression according to malignant progression, indicating an impaired tumor suppressor function of this protein in AC and CCELI. However, it is believed that, in lip carcinogenesis, ING3 is better characterized as predictive marker of malignant transformation, rather than a biomarker of tumor biological behavior (AU).

Imunoexpressão das proteínas E-caderina, α-SMA, TGF-ß e Snail em queilites actínicas e carcinoma epidermoide de lábio inferior / Immunoexpression of E-cadherin, α-SMA, TGF-ß and Snail proteins in actinic cheilitis and squamous cell carcinoma of the lower lip

A transição epitélio-mesenquimal (TEM) é um processo biológico que vem sendo amplamente estudado em carcinoma epidermoide oral (CEO), porém, ainda raramente avaliado na carcinogênese labial. O objetivo deste estudo foi de investigar a imunoexpressão das proteínas E-caderina, α-SMA, TGF-ß e Snail em queilites actínicas (QA) diagnosticadas histopatologicamente como displasias epiteliais, e em carcinomas epidermoides de lábio inferior (CELI). A imunoexpressão de E-caderina, α-SMA, TGF-ß e Snail foi analisada de forma semiquantitativa em 54 casos de QAs e em 49 CELIs. Visando a associação dos achados imunoistoquímicos com as variáveis clinicopatológicas e taxas de sobrevida global (SG) e livre de doença (SLD), os casos foram classificados nas categorias baixa expressão e alta expressão. Não foram observadas associações estatisticamente significativas com nenhuma das proteínas analisadas com o grau de severidade das displasias epiteliais em QAs (p > 0,05). A análise imunoistoquímica em CELIs revelou que uma baixa expressão membranar da E-caderina no front tumoral estava significativamente associada a CELIs com ≥5 buds (p = 0,005) e alto escore tanto para o modelo BD (p = 0,009), quando para o proposto por Dourado et al. (2020) (p = 0,038), entretanto, não foram observadas associações significativas entre a imunoexpressão desta proteína com parâmetros clínicos (p > 0,05). Constatou-se ainda associações significativas entre baixa expressão de α-SMA com CELIs em estágios clínicos TNM I/II (p = 0,05), baixa profundidade de invasão (p = 0,006), < 5 buds (p = 0,027) e escore de risco baixo/intermediário, ao passo que a alta expressão desta proteína foi associada com o desfecho óbito (p = 0,009). Também foram encontradas associações significativas entre o padrão de imunomarcação em rede/em fuso de α-SMA com CELIs em estágios TNM III/IV (p = 0,031), com alta profundidade de invasão (p = 0,002), ≥5 buds (p = 0,027), alto escore de risco BD (p = 0,001) e desfecho óbito (p = 0,015). Em relação à proteína TGF-ß, percebeu-se associações estatisticamente significativas entre sua baixa expressão em buds tumorais com ausências de metástase linfonodal (p = 0,047) e de recidiva locorregional (p = 0,042), contudo, não foram observadas significâncias com nenhum dos parâmetros morfológicos (p > 0,05). A análise imunoistoquímica da proteína Snail não revelou nenhuma associação significativa com os parâmetros clinicopatológicos (p > 0,05). A análise de associação das imunoexpressões das proteínas entre as lesões estudadas revelou resultados significativos para uma alta expressão citoplasmática da E-caderina e CELIs (p = 0,001), alta expressão de α-SMA e CELIs (p < 0,001), baixa expressão de TGF-ß e CELIs (p < 0,001) e alta expressão de Snail e QAs (p = 0,006). A análise de sobrevida revelou que uma alta expressão de α-SMA no estroma do front tumoral (p = 0,013), padrão de imunomarcação em rede desta proteína (p = 0,046) e alta expressão de TGF-ß em buds tumorais (p = 0,043) estavam significativamente associadas à pior SG, além de que CELIs com alta expressão de α-SMA também apresentavam maior risco de óbito (HR = 5,90, p = 0,030). Uma alta expressão citoplasmática de TGF-ß em buds tumorais estava significativamente associada tanto à pior SLD (p = 0,007), quanto a maiores riscos de desfechos negativos para a SLD (HR = 4,44; p = 0,014). Os resultados do presente estudo sugerem que apesar da imunoexpressão das proteínas avaliadas não indicarem diferenças no grau de severidade histopatológica em QAs, desregulações dessas proteínas foram identificadas entre as lesões estudadas. Ademais, foi constatado que CELI com comportamento mais agressivo estava associado a baixa expressão da E-caderina membranar, alta expressão de αSMA e seu padrão em rede e baixa expressão de TGF-ß em buds tumorais (AU).

Epithelial-mesenchymal transition (EMT) is a biological process that has been widely studied in oral squamous cell carcinoma (SCC), however, it is still rarely evaluated in lip carcinogenesis. The aim of this study was to investigate the immunoexpression of E-cadherin, α-SMA, TGF-ß and Snail proteins in actinic cheilitis (AC) histopathologically diagnosed as epithelial dysplasia, and in lower lip squamous cell carcinoma (LLSCC). The immunoexpression of E-cadherin, α-SMA, TGF-ß and Snail was semiquantitatively analyzed in 54 cases of ACs and 49 LLSCCs. Aiming at association of immunohistochemical findings with clinicopathological variables and overall (OS) and disease-free (DFS) survival rates, cases were classified into low expression and high expression categories. There were no statistically significant associations with any of the proteins analyzed with the degree of severity of epithelial dysplasia in ACs (p > 0.05). Immunohistochemical analysis in LLSCCs revealed that low membrane expression of E-cadherin in tumor front was significantly associated with LLSCCs with ≥5 buds (p = 0.005) and high score for both BD model (p = 0.009) and the proposed model by Dourado et al. (2020) (p = 0.038), however, no significant associations were observed between immunoexpression of this protein and clinical parameters (p > 0.05). Significant associations were also found between low expression of α-SMA with LLSCCs in clinical stages TNM I/II (p = 0.05), low depth of invasion (p = 0.006), < 5 buds (p = 0.027) and score of low/intermediate risk, while high expression of this protein was associated with the outcome of death (p = 0.009). Significant associations were also found between α-SMA network/spindle immunostaining pattern with LLSCCs in TNM stages III/IV (p = 0.031), with high depth of invasion (p = 0.002), ≥5 buds (p = 0.027), high BD risk score (p = 0.001) and death outcome (p = 0.015). Regarding the TGF-ß protein, statistically significant associations were noticed between its low expression in tumor buds with absence of lymph node metastasis (p = 0.047) and locoregional recurrence (p = 0.042), however, no significance was observed with any of morphological parameters (p > 0.05). Immunohistochemical analysis of Snail protein did not reveal any significant association with clinicopathological parameters (p > 0.05). The association analysis of protein immunoexpression between the lesions studied revealed significant results for a high cytoplasmic expression of E-cadherin and LLSCCs (p = 0.001), high expression of α-SMA and LLSCCs (p < 0.001), low expression of TGF -ß and LLSCCs (p < 0.001) and high expression of Snail and ACs (p = 0.006). Survival analysis revealed a high expression of α-SMA in tumor front stroma (p = 0.013), a network immunostaining pattern of this protein (p = 0.046) and high expression of TGF-ß in tumor buds (p = 0.043) were significantly associated with worse OS, and LLSCCs with high expression of α-SMA also had a higher risk of death (HR = 5.90, p = 0.030). High cytoplasmic expression of TGF-ß in tumor buds was significantly associated with both worse DFS (p = 0.007) and higher risks of negative outcomes for DFS (HR = 4.44; p = 0.014). The results of present study suggest that although the immunoexpression of evaluated proteins does not indicate differences in degree of histopathological severity in ACs, dysregulations of these proteins were identified among the lesions studied. Furthermore, it was found that LLSCC with more aggressive behavior was associated with low expression of membrane E-cadherin, high expression of α-SMA and its network pattern, and low expression of TGF-ß in tumor buds (AU).

Abordagens terapêuticas não-cirúrgicas para a queilite actínica / Non-surgical therapeutics approaches for actinic cheilitis

A queilite actínica (QA) é uma desordem potencialmente maligna que se desenvolve principalmente no lábio inferior, decorrente da exposição crônica a luz solar. O objetivo desse estudo é elucidar, a partir de uma revisão da literatura, as abordagens não cirúrgicas mais atuais para o tratamento da QA. Foi realizada uma busca nas bases de dados PubMed, Scielo e Cochrane, sendo obtidos 280 artigos e após aplicação dos critérios de elegibilidade, foram utilizados no presente traba lho 16 estudos. Várias abordagens, como, diclofenaco sódico, mebutato de ingenol, imiquimode, 5-fluorouracil, fludroxicortida e terapia fotodinâmica, são apontadas e estudadas como forma de tratamento para a QA. Entretanto, faltam trabalhos para que se estabeleça um consenso sobre a terapêutica não-cirúrgica mais adequada... (AU)

Actinic cheilitis (AC) is a potentially malignant disorder that develops mainly on the lower lip, result ing from a chronic exposure to sunlight. The objective of this study is to elucidate, from a literature review, the most current non-surgical approaches for the treatment of AC. A search was performed in the PubMed, Scielo and Cochrane databases, obtaining 280 papers and after applying the eligibility cri teria, 16 studies were used in the present study. Various approaches, such as diclofenac sodium, ingenol mebutate, imiquimod, 5-fluorouracil, fludroxycortide and photodynamic therapy are pointed out and studied as a form of treatment for AC. However, there is a lack of work to establish a consensus on the most appropriate non-surgical therapy... (AU)

Avaliação do conhecimento de acadêmicos da área da saúde sobre queilite actínica, como lesão precursora do câncer bucal / Evaluation of health academics' knowledge of actinic cheilitis as a precursor oral cancer injury

Dentre as doenças mais letais em todo o Brasil, o câncer encontra-se como um dos principais, podendo se desenvolver em diversas áreas. Com relação ao câncer bucal, ele é considerado um dos mais prevalentes. Podendo ser justificado em decorrência do estilo de vida adotado por muitos, como tabagismo, alcoolismo, má alimentação e exposição excessiva ao sol. Produzindo um aumento no número de casos de forma progressiva. Em grande parte dos casos de câncer bucal, há o aparecimento de lesões potencialmente malignas, destacando-se a leucoplasia, eritroplasia e queilite actínica. A queilite actínica, decorrente do excesso de radiação ultravioleta, é uma lesão potencialmente maligna, altamente prevalente em pessoas que estão propensas a esta exposição sendo frequente em áreas cuja atividade econômica está pautada na agricultura, que requer exposição à radiação solar, como o noroeste do Paraná. Portanto, é essencial que todos os profissionais de saúde saibam reconhecer este como sendo um fator causador do câncer bucal e fiquem atentos às mudanças que ocorrem previamente à malignização, principalmente, lesões em lábios, onde a queilite manifesta-se. Logo, é importante que os profissionais saibam reconhecê-la precocemente, devendo ser vislumbrado já durante a universidade. Sendo assim, o objetivo do presente trabalho é avaliar o conhecimento de acadêmicos de diferentes áreas da saúde, sobre sinais e sintomas da queilite actínica, que é uma das lesões cancerizáveis mais importantes e prevalentes... (AU)

Among the most lethal diseases in Brazil, cancer is one of the main and can develop in several areas. Re garding oral cancer, it is considered one of the most prevalent. It can be justified due to the lifestyle adopt ed by many, such as smoking, alcoholism, poor diet and excessive sun exposure. Producing an increase in the number of cases in a progressive way. In most cases of oral cancer, there is the appearance of poten tially malignant lesions, highlighting the leukoplakia and actinic cheilitis. Actinic cheilitis, resulting from excess ultraviolet radiation, is a potentially malignant lesion, highly prevalent in people who are prone to this exposure being frequent in areas whose economic activity is based on agriculture, which requires exposure to solar radiation, such as the northwest Paraná. Therefore, it is essential that all health professionals know how to recognize this as a factor causing oral cancer and be aware of the changes that occur prior to malignancy, especially lip lesions, where cheilitis manifests. Therefore, it is important that profes sionals know how to recognize it early, and should be glimpsed already during the university. Therefore, the objective of this work is to evaluate the knowledge of scholars from different health areas about signs and symptoms of actinic cheilitis which is one of the most important and prevalent cancerizable lesions... (AU)

Correlation Between Clinical and Histopathologic Diagnosis of Oral Potentially Malignant Disorder and Oral Squamous Cell Carcinoma

ABSTRACT Objective: To determine the frequency of oral potentially malignant disorders and Oral Squamous Cell Carcinoma (OSCC) and evaluate the consistency between their clinical and pathological features. Material and Methods: This retrospective study was conducted on records with a diagnosis of oral leukoplakia, oral erythroplakia, erythroleukoplakia, actinic cheilitis, lichen planus, and OSCC in the Pathology Department of Kerman dental school from September 1997 to September 2017. Data were analyzed in SPSS 21 at the significance level of ≤5%. Results: There were 378 cases of oral potentially malignant disorders and 70 cases of OSCC with a mean age of 46.82 ± 15.24 years. Buccal mucosa was the most frequent site, and lichen planus the most common lesion. Females were significantly older than males in leukoplakia and carcinoma in situ lesions. Clinical diagnosis and histopathology were consistent in 69.03% of cases. Conclusion: Clinical and histopathological diagnoses were consistent in 69.03% of records. The highest degree of clinical compliance with histopathology was observed in OSCC. Dentists should pay attention to oral potentially malignant disorders for early diagnosis to prevent their transformation to malignancy.

Associação entre a expressão imuno-histoquímica de 8-OHdG e parâmetros clínico-patológicos em uma série de casos de queilites actínicas / Association between immunohistochemical expression of 8-OHdG and clinicopathological parameters in a series of actinic cheilitis cases

A queilite actínica (QA) é uma desordem potencialmente maligna que pode evoluir para o carcinoma de células escamosas de lábio inferior (CCELI). Os fatores associados à sua probabilidade de transformação maligna ainda não estão bem estabelecidos, no entanto, a exposição à radiação ultravioleta (RUV) representa o principal fator de risco tanto para ocorrência da QA como do CCELI. A RUV causa danos oxidativos ao DNA, que levam à formação de 8-hidroxi-2'desoxiguanosina (8-OHdG). Esta pesquisa objetivou avaliar a associação entre a expressão da 8-OHdG e parâmetros clínico-patológicos, em uma série de casos de QA. A amostra foi constituída de 57 casos de QA, analisadas morfologicamente e classificadas de acordo com a gradação histopatológica de displasia epitelial (OMS). Foram observados casos sem displasia (7), com displasia epitelial leve (22), displasia epitelial moderada (17) e displasia epitelial severa (11). A expressão da 8- OHdG foi analisada de forma semiquantitativa por dois examinadores calibrados (Kappa=0,79), atribuindo um escore de imunoreatividade (EIR) que variava de 0 a 6 para os casos analisados. Os dados foram analisados através dos testes não paramétricos de Mann-Withney e de Kruskall-Wallis, com nível de significância de 5% (p<0,05). Observou-se que a maioria dos casos mostrou imunorreatividade forte (64,9%). Não foram constatadas diferenças estatisticamente significativas entre a expressão de 8-OHdG e as características clínicas da QA, nem entre a expressão de 8-OHdG e a gradação da displasia epitelial (p=0,350). A forte imunoexpressão de 8-OHdG na maioria dos casos de QA, independente das alterações morfológicas presentes, sugere que o dano oxidativo ao DNA está envolvido na patogênese desta desordem (AU).

Actinic cheilitis (AC) is a potentially malignant disorder that can progress to lower lip squamous cell carcinoma (LLSCC). It is not yet well-established which factors may be associated with the probability of malignant transformation of this condition, but the exposure to ultraviolet radiation (UVR) represents the main risk factor for both AC and LLSCC. RUV causes oxidative damage to DNA, which leads to the formation of 8-hydroxy-2'deoxyguanosine (8-OHdG), This research aimed to evaluate the expression of 8-OHdG, in a series of cases of AC and to associate its expression with clinical-pathological parameters. The sample consisted of 57 cases of AC, analyzed morphologically and classified according to the histopathological gradation of epithelial dysplasia (WHO). Cases without dysplasia (7), with mild epithelial dysplasia (22), moderate epithelial dysplasia (17) and severe epithelial dysplasia (11) were observed. The analysis of the expression of 8-OHdG was performed in a semi-quantitative way by two calibrated examiners (Kappa = 0.79), assigning an immunoreactivity score for each evaluated case, which could vary from 0 to 6. The data were analyzed using Mann-Withney and KruskallWallis non-parametric tests, with a significance level of 5% (p <0.05). It was observed that most cases showed strong immunoreactivity (64.9%). There were no statistically significant differences between the expression of 8-OHdG and the clinical characteristics of QA, neither between the expression of 8-OHdG and the gradation of epithelial dysplasia present in the evaluated cases (p = 0.350). The strong immunoexpression of 8-OHdG in most cases of QA, regardless of the morphological changes present, suggests that oxidative damage to DNA is involved in the pathogenesis of this disorder (AU).

Polymorphism of Serotonin Transporter SLC6A4 (5-HTTLPR) Gene in Cheilitis Angularis Patients

Abstract Objective: To determine the relationship between the Serotonin transporter SLC6A4 (5-HTTLPR) gene polymorphism in cheilitis angularis patients. Material and Methods: We conducted a descriptive analysis of 100 DNA samples extracted from the blood serum of 50 patients with cheilitis angularis and 50 patients without cheilitis angularis. Analysis of the Serotonin transporter SLC6A4 (5-HTTLPR) gene polymorphism was observed by carrying out PCR method followed by electrophoresis for the analysis, without the usage of restriction enzyme. The Chi-square test was used for statistical analysis Results: In the cheilitis angularis group there were 24 samples with SS genotype, 23 samples with LS genotype, and 3 samples with LL genotype. Whereas in the non-cheilitis angularis group, there were 5 samples with SS genotype, 18 samples with LS genotype, and 27 samples with LL genotype. In the cheilitis angularis group found 71 S alleles and 29 L alleles, and in the non-cheilitis angularis group 28 S alleles and 72 L alleles were found. A statistically significant difference was found between the groups (p<0.001) Conclusion: There were significant differences in the distribution of the Serotonin transporter SLC6A4 (5-HTTLPR) gene polymorphism between patients with and without cheilitis angularis.

Clinical and histopathological study of actinic cheilitis / Estudo clínico e histopatológico das queilites actínicas

Abstract Introduction Actinic cheilitis is a inflammatory condition affecting mainly the lower lip and it is caused by chronic and excessive exposure of the lips to the ultraviolet radiation in sunlight. Objective Identifying clinical and histopathologic characteristics in 40 cases histopathologically diagnosed as actinic cheilitis. In addition, to investigate possible associations between these aspects. Method Defined as an observational, transversal, retrospective and descriptive study, it registered data regarding age, gender, occupation, symptomatology, records of sun exposure, frequency of sunblock use, tabagism, skin color, clinical aspect and histopathological classification. The data was submitted to the chi square test of Pearson (p<0.05). Result There was a predominance of male gender, leucodermia, and ages ranging between 50 and 60 years. The most common occupation was farming. From our sample, 85% had history of chronic sun exposure, in which 50% reported the use of some type of sunblock and only 25% were smokers. The main clinical condition was non-ulcerated leukoplakia and in the histopathological study, the hyperkeratosis were more common. A correlation between the degree of tissue alteration verified in the histopathological diagnosis and the studied clinical variables was not established (p=0.112). Conclusion The clinical aspect of the wound can conceal tissue alterations in different stages, emphasizing the importance of a premature diagnosis.

Resumo Introdução A queilite actínica e uma condição de natureza inflamatória que acomete o lábio inferior, e é causada pela exposição prolongada e crônica dos lábios à radiação ultravioleta proveniente dos raios solares. Objetivo Identificar as características clínicas e histopatológicas em uma série de 40 casos diagnosticados histopatologicamente como queilite actínica. Além disso, investigar possíveis associações entre estes aspectos. Método Caracterizado como um estudo observacional, transversal, retrospectivo e descritivo. Foram registrados dados a respeito da idade, gênero, ocupação, sintomatologia, histórico de exposição ao sol, uso de proteção solar, tabagismo, cor da pele, aspecto clínico e classificação histopatológica. Os dados foram submetidos ao teste de Qui-Quadrado de Pearson (p<0,05). Resultado Houve uma prevalência do gênero masculino, leucodermas, com faixa etária entre 50 e 60 anos e a ocupação mais presente foi a de agricultor. Da amostra, 85% apresentou histórico de exposição crônica ao sol, onde 50% relatou uso de algum tipo de proteção solar e apenas 25% era tabagista. A principal apresentação clínica foi leucoplasia não ulcerada, e no estudo histopatológico as hiperceratoses foram as mais presentes. Não foi possível correlacionar o grau de alteração tecidual verificada no diagnóstico histopatológico com as variáveis clínicas estudadas (p=0,112). Conclusão Não foi possível correlacionar o grau de alteração tecidual verificada no diagnóstico histopatológico com os aspectos clínicos observados. O aspecto clínico da lesão pode mascarar alterações teciduais em diversos estágios, o que enaltece a importância do diagnóstico precoce.

Estudo da imunoexpressão do reg-gamma e da beta catenina em queilites actínicas e carcinomas de células escamosas de lábio inferior / Study of immunoexpression of reg-gamma and beta-catenin in actinic cheilitis and lower lip squamous cell carcinoma

A queilite actínica (QA) é uma lesão potencialmente maligna que ocorre principalmente em homens leucodermas com histórico de exposição crônica ao sol. Atualmente, não é possível predizer quais os casos de QA progredirão para o Carcinoma de células escamosas (CCE), portanto alguns marcadores biomoleculares têm sido alvo de pesquisas. A ß-catenina é uma proteína multifuncional que está envolvida nos processos de adesão célula-célula. A alteração do complexo caderina-catenina tem sido demonstrada no CCE e correlacionada com a invasão tumoral, metástase e com pior prognóstico dos pacientes. O REGγ é um ativador de proteassoma que pode promover a degradação de múltiplas proteínas incluindo p53 e MDM2. Estudos mostram que o REGγ está superexpresso em numerosos tipos de câncer, sugerindo que a superexpressão do REGγ está envolvida na progressão do câncer. O objetivo deste estudo foi analisar a expressão imuno- histoquímica da ß-catenina e do REGγ em casos de QA e Carcinoma de células escamosas de lábio inferior (CCELI), comparando os achados imunohistoquímicos com os dados clínicopatológicos, afim de averiguar se há uma correlação com a progressão tumoral e se as mesmas atuam de forma sinérgica nesse processo. A imunoexpressão de ß-catenina e REGγ foi analisada semi-quantativamente em 30 casos de QA e 30 casos de CCELI de acordo com os escores: 0 (sem marcação); 1 (1-25% de células positivas); 2 (26-50% de células positivas); 3 (51-75% de células positivas); 4 (> 75% células positivas). Para a análise estatística, foram realizados os testes de Mann-Whitney e de Spearman (p < 0,05). Tantos as QAs quanto os CCELIs expressaram a proteína ß-catenina, sendo evidenciado um aumento da expressão citoplasmática e nuclear nos casos de Displasias moderadas e severas. Nos CCELIs a imunoexpressão de ß-catenina membranar foi maior nos casos de baixo grau de malignidade. Tantos as QAs quanto os CCELIs expressaram a proteína REG-γ porém não verificamos significância estatística entre a sua expressão e o grau displasia epitelial, bem como, entre a imunoexpressão do REG-γ e os parâmetros clinicopatológicos analisados nos CCELIs. Os resultados do presente estudo sugerem que a superexpressão de REG-γ e a redução na expressão membranar de ß-catenina podem ser eventos importantes na carcinogênese labial. No entanto, acreditamos que esta proteína esteja envolvida no processo da carcinogênese oral. Nesse processo, correlacionando a expressão imuno-histoquímica da ß-catenina com a expressão do REG-γ, não resultados estatisticamente significativos, sugerimos então que a expressão de ßcatenina pode não ser influenciada diretamente pelos níveis de expressão de REGγ (AU).

Actinic cheilitis (QA) is a potentially malignant lesion that occurs mainly in men with light skin and a history of chronic sun exposure. Currently, it is not possible to predict which cases of QA will progress to Squamous Cell Carcinoma (SCC), so some biomolecular markers have been researched. Β-catenin is a multifunctional protein that is involved in cell-cell adhesion processes. The alteration of the cadherin-catenin complex has been demonstrated in SCC and correlated with tumor invasion, metastasis and worse prognosis of patients. REGγ is a proteasome activator that can promote the degradation of multiple proteins including p53 and MDM2. Studies show that REGγ is overexpressed in numerous cancers, suggesting that REGγ overexpression is involved in cancer progression. The aim of this study was to analyze the immunohistochemical expression of ß-catenin and REGγ in cases of QA and lower lip squamous cell carcinoma (CCELI), comparing the immunohistochemical findings with the clinical and pathological data, in order to verify if there is any a correlation with tumor progression and whether they act synergistically in this process. Β-catenin and REGγ immunoexpression was analyzed semi-quantitatively in 30 cases of QA and 30 cases of CCELI according to the scores: 0 (no labeling); 1 (1-25% positive cells); 2 (26-50% positive cells); 3 (51-75% positive cells); 4 (> 75% positive cells). For statistical analysis, Mann-Whitney and Spearman tests were performed (p <0.05). Both QAs and CCELIs expressed the ß-catenin protein, showing an increase in cytoplasmic and nuclear expression in cases of moderate and severe dysplasias. In CCELIs, membrane ß-catenin immunoexpression was higher in cases of low grade malignancy. Both QAs and CCELIs expressed the REG-γ protein but no statistical significance between its expression and the degree of epithelial dysplasia was found, as well as between the immunoexpression of REG-γ and the clinicopathological parameters analyzed in the CCELIs. The results of the present study suggest that REG-γ overexpression and reduction in membrane expression of ß-catenin may be important events in lip carcinogenesis. However, we believe that this protein is involved in the process of oral carcinogenesis. In this process, correlating the immunohistochemical expression of ß-catenin with the expression of REG-γ, as we did not obtain statistically significant results, we suggest that ß-catenin expression may not be directly influenced by the levels of REGγ expression (AU).

Queilite actínica e carcinoma de células escamosas de lábio: um estudo multicêntrico / Actinic cheilitis and Lip squamous cell carcinoma: multicenter study

Este estudo investigou a frequência da queilite actínica (QA) e do carcinoma de células escamosas de lábio (CCEL) em diferentes regiões geográficas do Brasil realizando uma análise temporal dos casos por década. Também se estabeleceu o perfil dos pacientes e analisou os aspectos clínicos e histopatológicos. Em uma análise retrospectiva (1953-2018), arquivos de biópsias de 10 centros de Patologia Oral e Maxilofacial localizados em diferentes estados do Brasil: Pará, Rio Grande do Norte, Paraíba, Pernambuco, Rio Grande do Sul, Minas Gerais, Rio de Janeiro, São Paulo e Goiás foram analisados. O perfil da amostra, características clínicas e histopatológicas foram avaliados descritivamente e estatisticamente através dos testes qui-quadrado, ANOVA e t-Student utilizando o programa SPSS versão 23.0. Os laudos histopatológicos de QA e CCEL foram examinados de acordo com a classificação da Organização Mundial de Saúde (OMS) (2017). As análises estatísticas foram feitas utilizando o programa Dos 198.709 espécimes de biópsias, 2.017 casos de QA e 850 casos de CCEL foram avaliados, representando 1,0 e 0,4% das lesões orais, respectivamente. Em geral, indivíduos do sexo masculino (nQA=1.439, 71,4%; nCCEL=673, 79,3%), brancos (nQA=1.640, 87,3%; nCCEL=726, 91,3%), na sétima década de vida (nQA=570, 29,8%; nCCEL=222, 27,4%) com acometimento do lábio inferior (nQA=1.990, 98,7%; nCCEL=827, 97,3%) foram os mais afetados. Indivíduos fumantes e consumidores de álcool tiveram um maior grau de invasão nos casos de CCEL (p=0,004 e p=0,020) bem como indivíduos com história prévia de QA (p=0,018). A QA e o CCEL em estágios iniciais ainda são lesões subnotificadas no Brasil e negligenciadas por parte da população acometida. Novos dados sobre as características sociodemográficas e clinicopatológicas de 2.017 casos de QA e 850 casos de CCEL foram adicionados à literatura. Essa caracterização em um país tão grande e com tantas diferenças regionais como o Brasil fortalece evidências para clínicos, dermatologistas, estomatologistas e oncologistas e para o desenvolvimento de políticas públicas na prevenção dessas lesões na população brasileira.

This study investigated the frequency of actinic cheilitis (AC) and lip squamous cell carcinoma (LSCC) in different geographic regions of Brazil, making a temporal analysis of the cases per decade. It also established the profile of the patients with this lesion and analyzed the clinical and histopathological aspects. In a retrospective analysis (1953-2018), biopsy files of 10 Oral and Maxillofacial Pathology centers located in different states of Brazil: Pará, Rio Grande do Norte, Paraíba, Pernambuco, Rio Grande do Sul, Minas Gerais, Rio de Janeiro , São Paulo and Goiás were analyzed. The sample profile, clinical and histopathological characteristics were descriptively and statistically evaluated by chi-square, ANOVA and t-Student tests using the SPSS program version 23.0. Histopathological data of AC and LSCC were examined according to the World Health Organization (WHO) classification (2017). Of 198,709 specimens of biopsies analyzed, 2,017 cases of AC and 850 cases of LSCC were surveyed, representing 1.0 and 0.4% of the oral lesions, respectively. Overall, male patients (nAC=1,439, 71.4%; nLSCC=673, 79.3%), white (nAC=1,640, 87.3%; nLSCC=726, 91.3%), in their seventh decade of life (nAC = 570, 29.8%, nLSCC = 222, 27.4%) with involvement of the lower lip (nAC = 1.990, 98.7%, nLSCC = 827, 97.3%) were the most affected. Individuals smokers and alcohol users had a higher invasion grade in cases of LSCC (p=0.004 and p=0.020) as well as individuals with previous history of AC (p=0.018). The AC and the LSCC in early stage are still very underreported lesions in Brazil and neglected by the affected population. Novel data on the sociodemographic and clinicopathological features of 2,017 cases of AC and 850 cases of LSCC have been added to the literature. This characterization in such a large country and with so many regional differences as Brazil strengthens evidence for clinicians, dermatologists, stomatologists and oncologists and for the development of public policies for the prevention of these lesions in the Brazilian population.

Queilitis actínica: Reporte de tres casos y revisión de literatura / Actinic Cheilitis: Report of Three Cases and Review of Literature

RESUMEN La queilitis actínica (QA) es un desorden potencialmente maligno del labio inducido por la exposición crónica a la luz ultravioleta, que afecta principalmente al bermellón del labio inferior de personas adultas y de piel clara. Si no es tratada en forma oportuna puede transformarse en un carcinoma de células escamosas del labio. Histológicamente la QA presenta una serie de alteraciones a nivel epitelial que van desde hiperplasia a displasia; en el tejido conectivo se presentan distintos grados de elastosis actínica acompañada por infiltrado inflamatorio. El objetivo de este trabajo es presentar tres casos de pacientes con QA y analizar sus características clínicas e histopatológicas.

ABSTRACT Actinic cheilitis (AC) is a potentially malignant lip disorder induced by chronic exposure to ultraviolet light, which mainly affects the vermilion of the lower lip of adults and fair skin. If it is not treated in a timely manner it can become a squamous cell carcinoma of the lip. Histologically, AC presents a series of alterations at the epithelial level ranging from hyperplasia to dysplasia; Connective tissue presents different degrees of actinic elastosis accompanied by inflammatory infiltrate. The objective of this work is to present three cases of patients with AC and analyze their clinical and histopathological characteristics.

Elastosis en la queilitis actínica. Revisión de literatura / Elastosis in Actinic Cheilitis. Literature Review

Resumen La matriz extracelular (MEC) juega un papel importante en la regulación de los eventos biológicos, tales como, el desarrollo de la migración celular, proliferación y diferenciación. La exposición crónica a la luz ultravioleta (UV) provoca elastosis (en distintos grados), que corresponde a una degeneración basófila de la MEC. La queilitis actínica (QA) es una lesión potencialmente maligna del labio inducida por la exposición regular y prolongada a la luz UV, que afecta principalmente al bermellón del labio inferior. Las lesiones de QA tienen un estroma complejo, se observa siempre la presencia de elastosis, infiltrado inflamatorio crónico de distinta intensidad y la aparición de vasos sanguíneos telangiectásicos. Dentro de este infiltrado inflamatorio se ha descrito un aumento significativo de mastocitos (MCs), localizados especialmente alrededor de las zonas de elastosis y en la zona subepitelial. Se ha propuesto que la elastosis actínica se produce tanto por procesos degenerativos como de síntesis anormal de fibras elásticas por parte de fibroblastos con daño solar, lo que va acompañado de cambios morfológicos del colágeno. A pesar de que el fibroblasto tendría un rol preponderante en la formación de la elastosis actínica, diversos estudios sugieren que otros tipos celulares como el MC también contribuirían en forma significativa al daño actínico de la MEC. El propósito de esta revisión es analizar las características de la elastosis en la QA.

Abstract The extracellular matrix (ECM) plays an important role in the regulation of biological events, such as cell migration, proliferation and differentiation. Chronic exposure to ultraviolet (UV) light causes elastosis (to varying degrees), which corresponds to a basophilic degeneration of the ECM. Actinic cheilitis (AC) is a potentially malignant lip lesion induced by regular and prolonged exposure to UV light, which mainly affects the vermilion. AC lesions have a complex stroma characterized by the presence of elastosis, chronic inflammatory infiltrate of different intensity and the appearance of telangiectatic blood vessels. Within this inflammatory infiltrate a significant increase of mast cells (MCs) has been described, located especially around areas of elastosis and at the subepithelial zone. It has been proposed that actinic elastosis is produced both, by degenerative processes and by abnormal synthesis of elastic fibers by photodamaged fibroblasts, which is accompanied by morphological changes in collagen. Although the fibroblast would play a major role in actinic elastosis formation, several studies suggest that other cell types such as MCs also contribute significantly to actinic ECM damage. The purpose of this review is to discuss the characteristics of elastosis in AC.

Desordens orais potencialmente malignas: um estudo de prevalência / Potentially malignant oral disorders: a prevalence study

Este estudo realizou a prevalência das desordens orais com potencial de transformação maligna diagnosticadas nos pacientes atendidos pela Clínica-Escola de Odontologia da Universídade Federal de Campina Grande. A pesquisa foi realizada nos prontuários arquivados dos pacientes atendidos na clínica-escola. Os pacientes diagnosticados com lesão foram convidadas a comparecerem novamente à clínica-escola para a realização do controle clínico. De um total de 2.706 prontuários, foram encontrados 131 pacientes com desordens orais, revelando uma prevalência de 4,84%. A queilite actínica foi a mais frequente com 68 (50,4%) casos, seguida da leucoplasia com 61 (45,2%). Homens corresponderam a 85 (64,9%) casos; o tipo de pele mais comum foi o feoderma com 64 (48,8%), e a média de idade dos pacientes foi de 45,11 anos. Também foi observado que 89 (68%) pacientes não realizaram o tratamento preconizado para a lesão e que o resultado histopatológico mais comum foi a hiperceratose com 11 (18%) casos, seguida da displasia epitelial leve com 5 (8,2%) ocorrências. Com relação ao controle clínico, apenas 33 (25,2%) pacientes retornaram, sendo 22 livres da doença. Diante do exposto, conclui-se que a prevalência das desordens encontradas foi semelhante à prevalência mundial e que existe uma grande evasão por parte dos pacientes no tratamento e no controle clínico... (AU)

This study evaluated the prevalence of oral disorders with potential malignant transformation diagnosed in the patients attended by the Clinical School of Dentistry of the Federal University of Campina Grande. The research was carried out from medical files of patients attended at the school-clinic. Patients diagnosed with an injury were called to attend the school clinic again for clinical control. From a total of 2,706 medical records, 131 patients with oral disorders were found, showing a prevalence of 4.84%. Actinic cheilitis was the most frequent with 68 (50.4%) cases, followed by leukoplakia with 61 (45.2%). Men corresponded to 85 (64.9%) cases, the most common skin type was feoderma with 64 (48.8%), and the mean age of the patients was 45.11 years. It was also observed that 89 (68%) patients did not perform the recommended treatment for the lesion, and that the most common histopathological result was hyperkeratosis with 11 (18%) cases, followed by mild epithelial dysplasia with 5 (8.2%) occurrences. Regarding the clinical control, only 33 (25.2%) patients returned, being 22 free of the disease. In view of the above, it is concluded that the prevalence of the disorders found was similar to the worldwide prevalence and that there is a great deal of evasion by the patients to the treatment and in the clinical control... (AU)

Queilite actínica: expressão imuno-histoquímica da cox-2 e avaliação do diclofenaco sódico gel como uma terapia alternativa / Actinic cheilitis: Immunohistochemical expression of cox-2 and evaluation of diclofenac sodium gel as an alternative therapy

A queilite actínica (QA) é uma lesão potencialmente maligna que acomete o vermelhão do lábio e resulta da exposição crônica aos raios solares. Atualmente, não é possível predizer quais os casos de QA progredirão para o carcinoma de células escamosas e, portanto, alguns marcadores biomoleculares têm sido estudados. A ciclo-oxigenase 2 (COX-2) é uma enzima associada com a resposta inflamatória e superexpressa no câncer oral; no entanto, pouco se sabe sobre o papel desta proteína em queilites actínicas. Além disso, as modalidades terapêuticas atualmente disponíveis para QA podem ocasionar efeitos deletérios e citotóxicos aos pacientes. Portanto, o objetivo desse trabalho foi avaliar a expressão imuno-histoquímica da COX-2 em QAs de diferentes riscos de transformação maligna e analisar, através de acompanhamento clínico, a eficácia do gel de diclofenaco sódico a 3% no tratamento dessa lesão. A imunoexpressão da COX-2 foi analisada semi-quantitativamente em 90 casos de QAs graduadas em baixo risco (n = 55) e alto risco (n = 35) de transformação maligna. O teste Qui-quadrado de Pearson foi realizado para verificar possíveis associações entre a imunoexpressão da COX-2 e a gradação histológica das queilites actínicas. O coeficiente ponderado de Kappa denotou uma boa concordância interobservador (0.677). Para o estudo clínico, dezenove pacientes diagnosticados com QA foram orientados a realizar aplicação tópica do gel de diclofenaco, três vezes por dia, durante 90 dias. A cada visita, os casos foram documentados através de fotografia digital e, ao final do tratamento, dois pesquisadores analisaram todas as imagens para avaliar o aspecto clínico do lábio. Também foi avaliada a tolerabilidade ao fármaco e satisfação do paciente ao final do tratamento. A COX-2 esteve superexpressa em 74.4% dos casos de queilites actínicas.

Ambos os grupos, de baixo e alto risco, revelaram predominância do escore 3 (elevada imunoexpressão), seguida dos escores 2 e 1 (baixa expressão e ausência de expressão, respectivamente). Não foi observada associação significativa (p = 0.283) entre a expressão de COX-2 e a gradação histológica das QAs analisadas. Dos indivíduos que participaram do estudo clínico, dez apresentaram remissão total das características clínicas da lesão (escore 1), e em três pacientes, a melhora foi considerada parcial (escore 2). Um participante apresentou piora do quadro clínico (escore 4). Em cinco casos, o tratamento foi descontinuado devido ao desenvolvimento de leves efeitos adversos no local de aplicação do gel. Quanto à análise de satisfação e tolerabilidade ao fármaco, a maioria dos pacientes mostrou-se plenamente satisfeita com a terapia (n = 11) e relatou que o fármaco não era irritante para os lábios (n = 9). Os resultados desse estudo demonstram que a elevada imunoexpressão da COX-2 é frequente em QAs; no entanto, essa proteína não esteve associada ao risco de transformação maligna nos casos analisados. A aplicação tópica do gel de diclofenaco sódico a 3% forneceu uma abordagem conveniente, não invasiva e bem tolerada na maioria dos casos, podendo constituir uma alternativa promissora no tratamento da queilite actínica. (AU)

Actinic cheilitis (AC) is a potentially malignant disorder which affects the lip vermilion and results from chronic exposure to sunlight. Currently, it is not possible to predict which cases of AC may progress to squamous cell carcinoma, and therefore, some biomolecular markers have been researched. Cyclooxygenase 2 (COX-2) is an enzyme associated with inflammatory response which is overexpressed in oral cancer; however, little is known about the role of this protein in actinic cheilitis. About the treatment of this lesion, currently available therapeutic modalities to AC may cause cytotoxic effects and deleterious results to patients. Therefore, the aim of this study was to evaluate the immunoexpression of COX-2 in AC of different risks of malignant transformation and analyse, through clinical follow-up, the efficacy of diclofenac sodium 3% gel in the treatment of this condition. Epithelial immunoexpression of COX-2 was analysed semi-quantitatively in 90 cases of AC classified as low risk (n = 55) and high risk (n = 35) of malignant transformation, in which the scores were assigned: (0) 0 to 5% of positive cells - Negative; (1) 6 to 30% of positive cells - Low expression; (2) 31 to 100% of positive cells - High expression. The chi-square test of Pearson was conducted to verify possible associations between immunoexpression of COX-2 and histologic grade of actinic cheilitis. The weighted kappa coefficient denoted a good interobserver agreement (0.677). Nineteen patients diagnosed with AC were instructed to perform topical application of the gel three times a day for a period of 90 days. In each biweekly visit, a follow-up record was accomplished through digital photographs and after treatment was completed, two researchers analysed all the images to assess clinical aspects of the lip. Furthermore, tolerability to the drug and patient satisfaction after treatment were evaluated. COX-2 was overexpressed in 74.4% of AC cases. Both low and high-risk groups revealed predominance of score 3, followed by scores 2 and 1. There was no significant association (p = 0.315) between COX-2 expression and histological grading. Among the total number of participants of this clinical study, ten showed total remission of all clinical features of the lesion and three had partial improvement of these characteristics. One participant presented worsening of the clinical condition. In five cases, the treatment was discontinued due to development of mild adverse effects at the site of gel application. Regarding analysis of satisfaction and tolerability to the drug, most patients were fully satisfied with the therapy (n = 11) and reported that the drug was not irritating to the lips (n = 9). Our study demonstrates that high expression of COX-2 is common in AC; however, this protein was not associated with malignant transformation risk of the analysed cases. Topical application of diclofenac sodium 3% gel provided a convenient and well tolerated approach in most cases, and may be a promising alternative for the treatment of actinic cheilitis. (AU)

Immunoexpression of cleaved caspase-3 shows lower apoptotic area indices in lip carcinomas than in intraoral cancer

ABSTRACT Objective This study aimed to evaluate apoptosis by assessing cleaved caspase-3 immunoexpression in hyperplastic, potentially malignant disorder (PMD), and malignant tumors in intraoral and lower lip sites. Material and Methods A retrospective study using paraffin blocks with tissues from patients with inflammatory fibrous hyperplasia (IFH), actinic cheilitis, oral leukoplakia, lower lip and intraoral squamous cell carcinoma (SCC) was performed. The tissues were evaluated by immunohistochemical analysis with anti-cleaved caspase-3 antibody. Apoptotic area index was then correlated with lesion type. Results From 120 lesions assessed, 55 (46%) were cleaved caspase-3-positive. The SCC samples (n=40) had the highest apoptotic area indices (n=35; 87.5%). Significant differences were detected between SCCs and PMDs (p=0.0003), as well as SCCs and IFHs (p=0.001), regarding caspase-3 immunopositivity. Carcinomas of the lower lip had lower apoptotic area indices than intraoral cancer (p=0.0015). Conclusions Cleaved caspase-3 immunoexpression showed differences in oral SCCs and PMDs and demonstrated a distinct role of apoptosis in carcinogenesis of intraoral and lower lip cancer. In future, the expression of cleaved caspase-3 with other target molecules in oral cancer may be helpful in delineating the prognosis and treatment of these tumors.

Estudo da expressão de CLIC4 e proteínas associadas em queilites actínicas e carcinomas de células escamosas de lábio inferior / Study of the expression of CLIC4 and associated proteins in actinic cheilitis and lower lip squamous cell carcinomas

A proteína do canal de cloro intracelular 4 (CLIC4) regula a passagens dos íons de cloro e relaciona-se com a proteína p53, fator de necrose tumoral α (TNF-α), fator de crescimento transformante-ß (TGF-ß) e com a diferenciação de fibroblastos em miofibroblastos (-SMA) em alguns cânceres humanos. O objetivo desse estudo foi analisar a expressão imuno-histoquímicade CLIC4 e proteínas associadas em queilitesactínicas (QA) e carcinomas de células escamosas de lábio inferior (CCELI), bem como verificar a relação destas entre si e com as características clínicas e morfológicas das lesões.A amostra foi composta de 50casos de QAs e 50de CCELIs com dados clínicos, que inicialmente foram submetidos ao estudo morfológico para sua gradação do risco de transformação maligna (sistema binário) e do grau histológico de malignidade (Bryne, 1992), respectivamente.Todos os casos foram submetidos ao método da imunoperoxidase usando os anticorpos paraCLIC4, p53, TGF-, TNF- e - SMA, os quais foram submetidos à análise semiquantitativa, com exceção de p53, que inicialmente foi analisado de forma quantitativa e em sequência categorizada como as demais. Para a análise da expressão de CLIC4 foi considerada sua localização celular.Comparações das imunomarcações com os parâmetros clínicos e morfológicos das lesões foram realizadas pelo teste U de Mann-Whitney e o coeficiente de Spearmanfoi calculado para avaliar correlações entre as proteínas. A expressão nuclear da CLIC4 e TGF-ß estava aumentadaem QAs de baixo risco, quando comparada ao grupo de alto risco (p<0.0001), enquantoCLIC4 citoplasmática,p53 e TNF-α exibiram maior expressão em QAs de alto risco (p<0.05). No que diz respeito às características clínicas e morfológicas dos CCELIs, a expressão de CLIC4 citoplásmatica foi maior nos casos apresentando metástase linfonodal, casos com estágios clínicos mais avançados ou com alto grau de malignidade (p = 0,005; p = 0,029; p<0,0001). A expressão de p53 foi maior em CCELIs de alto grau de malignidade (p= 0,001) e a TGF-ß diminuiu significativamente conforme o avanço do estágio clínico e do grau histológico dos tumores (p< 0,05).As QAs exibiram uma expressão aumentada de CLIC4 (no núcleo, ou núcleo e citoplasma) e TGF-ß, comparadas aos CCELIs (p < 0,0001). Em contraste, houve aumento na marcação de CLIC4 citoplasmática e α-SMA nos casos de CCELI, quando comparados às QAs (p < 0,0001).Nas QAs observou-se correlação negativa entre a expressão de CLIC4 nuclear ea CLIC4 citoplasmática (r = -0,554; p = <0,0001), e entre a marcação de TGF-ß e α-SMA (r = -0,309; p = 0,029). Nos carcinomas, a expressão de p53 exibiu correlação positiva com TNF-α (r = 0,528; p = 0,0001) e αSMA (r = 0,435; p = 0,002).Os nossos resultados sugeremque uma mudança no padrão de expressão nuclear para citoplasmática de CLIC4 está envolvida no processo decarcinogênese labial, acompanhada de alterações na expressão de p53, TGF-ß, TNF-α e α-SMA, e se relacionamcom alguns dos aspectos morfológicos e clínicos das QAs e CCELIs (AU).

The intracellular chloride channel protein 4 (CLIC4) regulates chloride ions and is related to p53, tumor necrosis factor α (TNF-α), transforming growth factor-ß (TGFß), and with the differentiation of fibroblasts in myofibroblasts (-SMA) in some human cancers. The objective of this study was to analyze the immunohistochemical expression of CLIC4 and associated proteins in actinic cheilites (AC) and squamous cell carcinomas of the lower lip (SCCLL), as well as to verific their relationship with each other and with the clinical and morphological characteristics of the lesions . The sample consisted of 50 cases of AC and 50 of SCCLL with clinical data, which were initially submitted to the morphological study for their gradation of malignant transformation risk (binary system) and histological grade of malignancy (Bryne, 1992). All cases were submitted to the immunoperoxidase method using CLIC4, p53, TGF-ß, TNF- and - SMA antibodies, which were submitted to semiquantitative analysis, except for p53, which was initially analyzed quantitatively and a categorized sequence like the others. For the analysis of CLIC4 expression, its cellular location was considered. Comparisons of the immunoblots with the clinical and morphological parameters of the lesions were performed by the Mann-Whitney U test and the Spearman coefficient was calculated to evaluate correlations between the proteins. Nucleic expression of CLIC4 and TGF-ß was increased in low-risk AC compared to high-risk group (p <0.0001), whereas cytoplasmic CLIC4, p53 and TNF-α showed higher expression in high-risk AC (p < 0.05). As regards the clinical and morphological characteristics of SCCLL, the expression of cytoplasmic CLIC4 was higher in cases presenting lymph node metastasis, cases with more advanced clinical stages or with a high degree of malignancy (p = 0.005, p = 0.029, p <0, 0001). Expression of p53 was higher in highgrade malignant SCCLL (p = 0.001) and TGF-ß decreased significantly as the clinical stage progressed and tumor grade histologically (p <0.05). Increased CLIC4 (in the nucleus, or nucleus and cytoplasm) and TGF-ß, compared to SCCLL (p <0.0001). In contrast, there was an increase in the labeling of cytoplasmic CLIC4 and α-SMA in SCCLL cases, when compared to AC (p <0.0001). In the AC, a negative correlation was observed between nuclear CLIC4 expression and cytoplasmic CLIC4 (r = -0.554, p = <0.0001), and between TGF-ß and α-SMA (r = -0,309; = 0.029). In carcinomas, p53 expression exhibited a positive correlation with TNF-α (r = 0.528, p = 0.0001) and αSMA (r = 0.435, p = 0.002). Our results suggest that a change in CLIC4 cytoplasmic nuclear expression pattern is involved in the process of lip carcinogenesis, accompanied by changes in the expression of p53, TGF-ß, TNF-α and α-SMA, and are related to some of the morphological aspects and clinicians of AC and SCCLL (AU).

Avaliação da expressão de ß-catenina e ciclina D1 como biomarcadores preditivos para o câncer de lábio / Evaluation of ß-catenin and cyclin D1 expression as predictive biomarkers for lip cancer

Um dos objetivos da pesquisa científica, atualmente, é encontrar biomarcadores que possam auxiliar na definição da probabilidade de progressão das lesões orais displásicas, e ainda sejam capazes de identificar os principais agentes moleculares envolvidos na carcinogênese de um determinado tipo de tumor. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar a expressão de ß-catenina, ciclina D1 e Ki-67 em 15 espécimes de epitélio oral normal, 45 queilites actínicas displásicas e em 30 carcinomas espinocelulares de lábio. Essa amostra foi constituída por pacientes tratados na Faculdade de Medicina de Botucatu (Brasil) e no Hospital Clínico San Cecílio de Granada (Espanha). O grau de displasia epitelial e de diferenciação tumoral foi classificado com base nos critérios definidos pela Organização Mundial da Saúde. A avaliação dos biomarcadores foi realizada por meio da técnica imunohistoquímica, dividindo a espessura do epitélio em quatro compartimentos (basal, suprabasal, terço médio e terço superior) para o grupo controle e para as queilites actínicas e em três compartimentos (basal, suprabasal e região interna) para o grupo dos carcinomas espinocelulares de lábio. Para a comparação da média de expressão de cada marcador, nas diferentes localizações do epitélio foi utilizado o teste estatístico de Kruskal-Wallis. Para a correlação da expressão dos três marcadores entre os grupos foi utilizada a correlação de Spearman, com nível de significância de 5%. Os resultados demonstraram uma perda discreta da expressão membranosa de ß-catenina na camada basal das queilites actínicas com displasia epitelial intensa (Cis) e nos carcinomas espinocelulares de lábio, assim como uma expressão citoplasmática e nuclear, discreta e diretamente proporcional à desorganização epitelial nas camadas basal e suprabasal das queilites actínicas e carcinomas espinocelulares de lábio. Notou-se também um aumento da expressão de ciclina D1 e Ki-67 na camada basal à medida que aumentava a desorganização epitelial. Houve uma associação estatisticamente significativa da expressão de ciclina D1 e Ki-67 na camada suprabasal do grupo controle (p=0,030) e das queilites actínicas (p=0,001) e ainda na região interna dos carcinomas espinocelulares de lábio (p=0,000). Não houve correlação significativa entre as expressões nucleares de ß-catenina e de ciclina D1. Nossos resultados reforçam que a ß-catenina, a ciclina D1 e o Ki-67, podem ser utilizados como biomarcadores preditivos para o câncer de lábio. Além disso, sugerem que a ß-catenina e a ciclina D1 participam da carcinogênese labial, em eventos independentes da via de sinalização/Wnt.(AU)

One of the goals of scientific research today is to find predictive biomarkers that can help define the probability of progression of dysplastic oral lesions, and are still able to identify key molecular agents involved in the carcinogenesis of a particular type of tumor. The objective of this study was to investigate ß-catenin, cyclin D1 and Ki-67 expression in 15 specimens of normal oral epithelium, 45 dysplastic actinic cheilitis and 30 squamous cell carcinoma of the lip. This sample consisted of patients treated at the Botucatu Medicine School (Brazil) and the Clinical Hospital San Cecilio of Granada (Spain). The degree of epithelial dysplasia and tumor differentiation was classified based on the criteria defined by the World Health Organization. The evaluation of biomarkers was performed by immunohistochemical technique, dividing the thickness of the epithelium into four compartments (basal, suprabasal, middle third and upper third) for the control group and actinic cheilitis and three compartments (basal, suprabasal and inner region) to the group of squamous cell carcinoma of the lip. For comparing the average expression of each marker in different locations of the epithelium we used the statistical test of Kruskal-Wallis. For the correlation of the three markers expression between the groups was used Spearman, with 5% significance level. The results showed a slight loss of membranous expression of ß-catenin in the basal layer of actinic cheilitis with severe epithelial dysplasia (Cis) and squamous cell carcinoma of the lip, and a cytoplasmic and nuclear expression, slight and directly proportional to the epithelial disorganization in layers basal and suprabasal of actinic cheilitis and squamous cell carcinoma of the lip. It was also noted an increase in expression of cyclin D1 and Ki-67 in the basal layer as increased epithelial disorganization. There was a statistically significant association of cyclin expression D1 and Ki-67 in the suprabasal layer of the control group (p=0.030) and actinic cheilitis (p=0.001) and also in the inner region of squamous cell carcinoma of the lip (p=0.000). There was no significant correlation between the nuclear expression of ß-catenin and cyclin D1. Our results emphasize that ß-catenin, cyclin D1 and Ki-67 can be used as predictive biomarkers for lip cancer. Moreover, they suggest that ß-catenin and cyclin D1 acts on the lip carcinogenesis, in independent events signaling pathway/Wnt.(AU)

Perfil sociodemográfico e condição bucal de usuários de drogas em dois municípios do Estado do Paraná, Brasil / Sociodemographic profile and oral condition of drug users in two municipalities of the State of Paraná, Brazil

Introdução: A pesquisa das condições bucais de usuários de drogas é importante para ser conhecida esta população, cujo crescimento é ascendente no Brasil, a fim de que metas preventivas e atendimento adequado sejam traçados. Objetivo: Identificar o perfil sociodemográfico e a condição bucal desta população, em dois municípios paranaenses. Material e método: Foram coletados, por meio de questionário e de exame físico, dados de 100 indivíduos. Foram obtidos os seguintes valores: índice CPOD, profundidade de sondagem (PS), nível de inserção clínica (NIC), índice gengival (IG), índice de placa (IP) e sangramento à sondagem (SS). Após análise descritiva inicial, empregaram-se os testes t de Student e ANOVA one way. Resultado: A média da idade foi 29,12 anos. As maiores frequências foram: gênero masculino (95,5%), solteiros (69,0%), baixa escolaridade (41%) e maior consumo de drogas lícitas - tabaco (90,9%) e álcool (84,5%) - seguidas de crack (80,9%) e maconha (77,3%). A média do CPOD foi 15,21 (DP=5,84) e quanto maior o tempo de dependência, maior este índice (p<0,05). A média da PS foi 3,55 e do NIC, 3,59. O SS ocorreu em 82,7% dos casos e a inflamação moderada, em 79,5%. Placa detectável e moderado acúmulo de placa foram identificados em 39,5% e 35,3%, respectivamente. Conclusão: Predominaram indivíduos do gênero masculino, jovens, solteiros, com baixa escolaridade e consumidores de drogas lícitas e ilícitas, com condição bucal ruim. Sugere-se mais atenção dos profissionais da área odontológica e dos elaboradores de políticas públicas, com vistas a esta população.

Introduction: Epidemiological survey of the oral conditions of drug users is an important strategy to know this population, whose growth is increasing in Brazil, so that preventive goals and adequate treatment can be proposed. Aim: The aim of this study was to identify the sociodemographic profile and oral health condition of drug users in rehab of two municipalities of the State of Paraná. Material and method: One hundred individuals participated in the study, which data were collected by questionnaire and physical exam. The following values were obtained: DMFT index (decay-missing-filled index), probing depth (PD), clinical attachment level (CAL), gingival index (GI), plaque index (PI), and bleeding on probing (BOP). Data analyses were performed by Student t test and one-way ANOVA. Result: The mean age of participants was 29.12 years. The major frequencies were: male (95.5%), single (69.0%), lower schooling (41%) and higher consumption of licit drugs tobacco (90.9%) and alcohol (84.5%), followed by crack (80.9%), and marijuana (77.3%). The mean DMFT index was 15.21 (SD=5.84), and the longer the dependence time, the greater this index (p<0.05). Mean PD was 3.55 and mean CAL was 3.59. BOP occurred in 82.7% and 79.5% showed moderate inflammation. Detectable plaque and moderate plaque accumulation were observed in 39.5% and 35.3%, respectively. Conclusion: Prevalence was observed in young and single males with low schooling, and with consumption of licit and illicit drugs. Poor oral health condition was identified, which deserves more attention from health professional and policymakers for this population.

Correlação entre aspectos clínicos e marcadores biológicos no processo de fotocarcinogênese de lábio / Relationship between clinical aspects and biological markers during lip photocarcinogenesis process

A queilite actínica (QA) é uma lesão potencialmente maligna importante para identificar indícios precoces de transformação maligna para o carcinoma epidermoide de lábio (CEL), possibilitando a implementação de um tratamento eficiente e menos invasivo, que promova um melhor prognóstico para os pacientes. Pesquisas recentes indicam que os métodos histopatológicos geralmente são falhos em traçar o risco de malignização de casos de QA, pois além de não demonstrar as alterações genéticas presentes nos queratinócitos, não foram realizados estudos de acompanhamento clínico para avaliar se o grau de displaia epitelial da QA está relacionado ao risco de malignização para CE. Assim, a presente pesquisa teve como objetivo caracterizar, a partir dos casos atendidos no Serviço de Patologia Cirúrgica da FOUSP, qual a diferença de perfil clínico-patológico de pacientes de QA com evolução para CEL, pacientes de QA sem informações e sinais presentes de malignização e pacientes apenas diagnosticados com CEL, e também visou analisar a expressão de Ki67 e pRb nesses três grupos. Para isso, os dados dos pacientes como idade, sexo, cor da pele, aspecto clínico da lesão fundamental, coloração, tamanho e tempo de duração das lesões foram resgatados de 998 casos e distribuídos nessas três categorias. Os resultados da análise clínico-epidemiológica revelaram que o único aspecto clínico estatisticamente significante para diferenciar pacientes apenas diagnosticados com CEL dos demais

grupos foi o tempo de duração das lesões. A análise do grau de displasia epitelial nos casos de QA na amostra presente revelou que todos os pacientes de QA posteriormente diagnosticados com CEL foram classificados como lesões de alto risco, e ainda exibiram em maior frequência as atipias: aumento do número de figuras de mitose, variação anormal do tamanho do núcleo, variação anormal do tamanho da célula e alteração da relação núcleo/citoplasma, figuras de mitose anormais e aumento do número e tamanho de nucléolos. Tanto a expressão da proteína Ki-67 como da proteína pRb não demonstraram significância estatística na comparação entre os grupos do estudo. Assim, a avaliação de uma ampla série de casos revelou diferença significante no tempo de duração do CEL com relação à QA. Além disso, algumas alterações morfológicas foram observadas com maior frequência em casos de QA com evolução para CEL. No entanto, outros marcadores biológicos devem ser testados em conjunto, para tentar diagnosticar alterações precoces que levem ao desenvolvimento de CEL.

Actinic cheilitis (AC) is a potentially malignant lesion important to identify early signs of malignant transformation into lip squamous cell carcinoma (LSCC), enabling the implementation of an efficient and less invasive treatment to patients. Recent researches pointed that histopatological methods often fail to trace malignization risk in AC cases, because they are unable to identify genetic damage in keratinocytes and do not exist a clinical follow-up studie to assess if the grading of epithelial dysplasia in AC is related with the malignancy risk to LSCC development. Thus, this research aims to characterize, from cases of Surgical Pathology Service of Universidade de São Paulo, the differences in clinical and pathological profile among AC patients which had evolution to LSCC, AC patients without signs and information about malignization and patients diagnosed only with LSCC. This study also analyzed the expression of Ki-67 and pRb proteins in these three groups. To conduct this study, data as age, gender, race, fundamental lesion aspect, color, size and duration time of the lesion were collected from 998 patients. The clinical-epidemiological analysis revealed that duration time of the lesion was the statistically significant clinical feature to differentiate patients diagnosed only with LSCC from other groups. The grading of epithelial dysplasia analysis showed that all AC patients with

a posterior diagnosis of LSCC were classified as high risk lesions and these cases also exhibited most frequently atypia figures as: increased number of mitotic features, abnormal variation in nuclear size, abnormal variation in cellular size, increased nuclear/cytoplasmic ratio, abnormal mitotic features and increased number and size of nucleoli. The immunohistochemical expression of both Ki-67 and pRb protein demonstrated lack of significant statistical difference among the groups. We concluded that the evaluation of a large serie of cases revealed differences in duration time of lesion in patiens only diagnoses with LSCC and some morphological criteria were most frequent in AC cases with a posterior diagnosis of LSCC. However, other biological markers must be tested together, to try to identify early steps of LSCC development.

Correlação entre aspectos clínicos e marcadores biológicos no processo de fotocarcinogênese de lábio / Relationship between clinical aspects and biological markers during lip photocarcinogenesis process

A queilite actínica (QA) é uma lesão potencialmente maligna importante para identificar indícios precoces de transformação maligna para o carcinoma epidermoide de lábio (CEL), possibilitando a implementação de um tratamento eficiente e menos invasivo, que promova um melhor prognóstico para os pacientes. Pesquisas recentes indicam que os métodos histopatológicos geralmente são falhos em traçar o risco de malignização de casos de QA, pois além de não demonstrar as alterações genéticas presentes nos queratinócitos, não foram realizados estudos de acompanhamento clínico para avaliar se o grau de displaia epitelial da QA está relacionado ao risco de malignização para CE. Assim, a presente pesquisa teve como objetivo caracterizar, a partir dos casos atendidos no Serviço de Patologia Cirúrgica da FOUSP, qual a diferença de perfil clínico-patológico de pacientes de QA com evolução para CEL, pacientes de QA sem informações e sinais presentes de malignização e pacientes apenas diagnosticados com CEL, e também visou analisar a expressão de Ki67 e pRb nesses três grupos. Para isso, os dados dos pacientes como idade, sexo, cor da pele, aspecto clínico da lesão fundamental, coloração, tamanho e tempo de duração das lesões foram resgatados de 998 casos e distribuídos nessas três categorias. Os resultados da análise clínico-epidemiológica revelaram que o único aspecto clínico estatisticamente significante para diferenciar pacientes apenas diagnosticados com CEL dos demais grupos foi o tempo de duração das lesões. A análise do grau de displasia epitelial nos casos de QA na amostra presente revelou que todos os pacientes de QA posteriormente diagnosticados com CEL foram classificados como lesões de alto risco, e ainda exibiram em maior frequência as atipias: aumento do número de figuras de mitose, variação anormal do tamanho do núcleo, variação anormal do tamanho da célula e alteração da relação núcleo/citoplasma, figuras de mitose anormais e aumento do número e tamanho de nucléolos. Tanto a expressão da proteína Ki-67 como da proteína pRb não demonstraram significância estatística na comparação entre os grupos do estudo. Assim, a avaliação de uma ampla série de casos revelou diferença significante no tempo de duração do CEL com relação à QA. Além disso, algumas alterações morfológicas foram observadas com maior frequência em casos de QA com evolução para CEL. No entanto, outros marcadores biológicos devem ser testados em conjunto, para tentar diagnosticar alterações precoces que levem ao desenvolvimento de CEL.

Actinic cheilitis (AC) is a potentially malignant lesion important to identify early signs of malignant transformation into lip squamous cell carcinoma (LSCC), enabling the implementation of an efficient and less invasive treatment to patients. Recent researches pointed that histopatological methods often fail to trace malignization risk in AC cases, because they are unable to identify genetic damage in keratinocytes and do not exist a clinical follow-up studie to assess if the grading of epithelial dysplasia in AC is related with the malignancy risk to LSCC development. Thus, this research aims to characterize, from cases of Surgical Pathology Service of Universidade de São Paulo, the differences in clinical and pathological profile among AC patients which had evolution to LSCC, AC patients without signs and information about malignization and patients diagnosed only with LSCC. This study also analyzed the expression of Ki-67 and pRb proteins in these three groups. To conduct this study, data as age, gender, race, fundamental lesion aspect, color, size and duration time of the lesion were collected from 998 patients. The clinical-epidemiological analysis revealed that duration time of the lesion was the statistically significant clinical feature to differentiate patients diagnosed only with LSCC from other groups. The grading of epithelial dysplasia analysis showed that all AC patients with a posterior diagnosis of LSCC were classified as high risk lesions and these cases also exhibited most frequently atypia figures as: increased number of mitotic features, abnormal variation in nuclear size, abnormal variation in cellular size, increased nuclear/cytoplasmic ratio, abnormal mitotic features and increased number and size of nucleoli. The immunohistochemical expression of both Ki-67 and pRb protein demonstrated lack of significant statistical difference among the groups. We concluded that the evaluation of a large serie of cases revealed differences in duration time of lesion in patiens only diagnoses with LSCC and some morphological criteria were most frequent in AC cases with a posterior diagnosis of LSCC. However, other biological markers must be tested together, to try to identify early steps of LSCC development.