Antimicrobial activity of Er, Cr: YSGG and Ultrasonic on E. faecalisbiofilm in the mesial root canal systems of lower molars / Atividade antimicrobiana de Er, Cr: YSGG e Ultrassônico no biofilme de E. faecalis nos sistemas de canais radiculares mesiais de molares inferiores

The internal topography of the root canal is complex, especially for the permanent molar's mesial root. In response to such issues, improved irrigation techniques have been created, which use laser pulses to agitate fluids and improve microbial deposit removal. Objective: To assess the effectiveness of the Er,Cr:YSGG laser with a wavelength of 2,780 nm via photon-induced photoacoustic streaming (PIPS) protocol which agitated of 2% chlorohexidine (CHX) in removing mature Enterococcus faecalis (E. faecalis) biofilm in root canal systems of lower molars. Material and Methods: The mesial roots of lower first and second molars were separated and inoculated with E. faecalis bacterial suspension for 30 days. The roots were irrigated with CHX, some of them were agitated with a passive ultrasonic device (PUI), while the other roots were agitated by an Er,Cr:YSGG laser in PIPS at 60 µs/pulse, 5 Hz, (0.25, 0.5, 0.75, and 1) W. An atomic force microscope (AFM) was used as a new method to get the results in the isthmus area; the obtained results from each group were compared with each other. Results: Based on the AFM and SEM analyses, laser and ultrasonic activation groups showed higher antimicrobial efficacy than the conventional syringe irrigation group (P<0.05). Conclusion: Based on the investigation's findings, the activation of 2% CHX solution by Er,Cr:YSGG laser in PIPS and PUI offers better mature bacterial biofilm removal in the mesial root of lower human molars than the same irrigant with the SI technique (AU)

A topografia interna do canal radicular é complexa, especialmente para a raiz mesial do molar permanente. Em resposta a esses problemas, foram criadas técnicas aprimoradas de irrigação, que utilizam pulsos de laser para agitar fluidos e melhorar a remoção de depósitos microbianos. Objetivo: Avaliar a eficácia do laser Er,Cr:YSGG com comprimento de onda de 2.780 nm via protocolo de streaming fotoacústico induzido por fótons (PIPS) que agitou clorohexidina a 2% (CHX) na remoção de Enterococcus faecalis maduro (E. faecalis) biofilme em sistemas de canais radiculares de molares inferiores. Material e Métodos: As raízes mesiais de 28 primeiros e segundos molares inferiores foram separadas e inoculadas com suspensão bacteriana de E. faecalis por 30 dias. As raízes foram irrigadas com CHX, sendo algumas delas agitadas com aparelho ultrassônico passivo (PUI), enquanto as demais raízes foram agitadas com laser Er,Cr:YSGG em PIPS a 60 µs/pulso, 5 Hz (0,25, 0,5, 0,75 e 1) W. Um microscópio de força atômica (AFM) foi utilizado como um novo método para obter os resultados na área do istmo; os resultados obtidos de cada grupo foram comparados entre si. Resultados: Com base nas análises de AFM e SEM, os grupos de ativação por laser e ultrassom apresentaram maior eficácia antimicrobiana do que o grupo de irrigação com seringa convencional (P<0.05). Conclusão: Com base nos achados da investigação, a ativação da solução de CHX a 2% pelo laser Er,Cr:YSGG em PIPS a (60 µs/pulso, 5 Hz, 0,75 W) oferece melhor remoção de biofilme (AU)

Avaliação antimicrobiana de uma resina Bulk Fill Fluida com inserção do xilitol / Antimicrobial evaluation of a Fluid Bulk Fill resin with xylitol insertion

Introdução: As resinas Bulk Fill apresentam uma boa procura pelos profissionais, pois o seu uso diminui o tempo clínico, como também a melhora qualidade das restaurações, porém não possuem atividade antibacteriana, sendo um dos fatores que ainda causam impacto negativo na vida das pessoas. A biomodificação com o xilitol tem o sentido de produzir ação microbiana e com isso aperfeiçoar as suas características clínicas. Objetivo: Avaliar a ação antimicrobiana de uma resina Bulk Fill flow após a inserção do xilitol. Metodologia: A resina Tetric® N-Flow Bulk Fill foi misturada às concentrações de xilitol (0% [Controle], 2,5% e 5% p/p). Amostras cilíndricas (n=5 do grupo controle e n=3 dos demais grupos experimentais) foram confeccionadas em moldes acrílicos de diâmetro de 2mm espessura, fotoativadas por 10s e armazenadas a 37ºC por 24h. Os espécimes foram esterilizados por luz ultravioleta por 20 minutos antes de serem acomodadas em uma placa de 48 poços estéril, sendo adicionado em cada poço 0,5mL de caldo Mueller Hinton. Então, adicionou-se 50µL do inóculo de S. mutans nos poços correspondentes. A placa foi incubada a 37 ± 1 ˚C durante 48 horas. Após o período de incubação, os espécimes foram gentilmente removidos e o crescimento microbiano foi indicado pela adição de 100µL da solução aquosa de resazurina (SigmaAldrich) a 0,01% com a posterior incubação a 37 ± 1 ˚C por duas horas. Micro-organismos viáveis reduzem o corante mudando sua coloração azul para rosa e a CIM foi definida como a menor concentração da substância que inibiu a mudança de coloração da resazurina. Em um poço contendo o grupo controle foi acrescentado clorexidina a 0,12% com o intuito de comparar o resultado gerado dos grupos testes. Resultado: Não houve inibição do crescimento bacteriano nos poços com inóculos que continham S. mutans e corpo de prova de resina acrescida de xilitol. Conclusão: Esse estudo mostrou que o acréscimo de 2,5% e 5% de Xilitol à resina Tetric® N-Flow Bulk Fill não apresentou inibição do crescimento bacteriano (AU).

Introduction: Bulk Fill resins are in good demand among professionals, as their use reduces clinical time and improves the quality of restorations, but they do not have antibacterial activity, which is one of the factors that still hurt people's lives. Biomodification with xylitol aims to improve its clinical characteristics. Objective: To evaluate the antimicrobial action of a Bulk Fill flow resin after inserting xylitol. Methodology: Tetric® N-Flow Bulk Fill resin was mixed with xylitol concentrations (0% [Control], 2.5% and 5% w/w). Cylindrical samples (n=5 from the control group and n=3 from the other groups) were made in acrylic molds with a diameter of 2 mm thick, light-cured for 10 s and stored at 37ºC for 24h. The specimens were sterilized by ultraviolet light for 20 minutes before being placed in a sterile 48-well plate, with 0.5 mL of Mueller Hinton broth added to each well. The plate was incubated at 37 ± 1 ˚C for 48 hours. After the incubation period, the specimens were gently removed, and microbial growth was indicated by adding 100 µL of 0.01% resazurin aqueous solution with subsequent incubation at 37 ± 1 ˚C for two hours. Viable microorganisms reduce the dye, changing its color from blue to pink. The MIC was defined as the lowest concentration of the substance that inhibited the color change of resazurin. In 0.12%, chlorhexidine was added to a well containing the control group to compare the results generated from the test groups. Result: There was no inhibition of bacterial growth in the wells with inocula containing S. mutans and the resin specimen with xylitol added. Conclusion: This study showed that adding 2.5% and 5% Xylitol to the Tetric® N-Flow Bulk Fill resin did not inhibit bacterial growth (AU).

Periimplantite e a importância do especialista em periodontia na manutenção dos tecidos / Periimplantitis and the importance of the periodontic specialist in tissue maintenance

Introdução: A peri-implantite é uma condição patológica associada a placa que ocorre nos tecidos de suporte ao redor de implantes dentários. Se caracteriza pela presença de sinais clínicos proveniente de inflamação na mucosa periimplantar conhecido como mucosite e subsequente perda progressiva do osso de suporte denominado como periimplatite. Objetivo: Classificar os principais sinais e sintomas clínicos da doença periimplantar a fim de estabelecer um diagnóstico, apresentar quais fatores devem ser avaliados durante o planejamento e manutenções de implantes dentários, os fatores de risco locais e sistêmicos, o tratamento e a importância do implantodontista com o periodontista realizar planejamento correto visando um prognostico favorável. Metodologia: Revisão de literatura foi realizada no PubMed, buscando artigos dos anos de 2010 a 2021. Resultado: Os estudos mostraram que o acúmulo de placa bacteriana nos implantes resultará no desenvolvimento de mucosite e podendo posteriormente se estabelecer a peri-implantite. Uma história de doença periodontal, tabagismo e falta de terapia de suporte devem ser considerados como indicadores de risco para o desenvolvimento de peri-implantite. Conclusão: É de suma importância o trabalho simultâneo do implantodontista com o periodontista com o intuito de se obter um bom planejamento e consequentemente reduzir danos a curto e longo prazo nos tecidos periimplantares. O sucesso do tratamento de doenças periimplantares está na prevenção, envolvendo reforço de higiene oral e manutenções periódicas(AU)

Introduction: A peri-implantitis is a plaqueassociated pathological condition that occurs in the supporting tissues around dental implants. If indifferent to the presence of proven clinical signs of inflammation in the peri-implant mucosa known as mucosite and subsequent progressive loss of supporting bone termed as peri-implatite. Objective: To classify the main signs and clinical signs of peri-implant disease an objective to establish a diagnosis, present the factors to be adopted during the planning and maintenance of dental implants, the local and systemic risk factors, the treatment and the importance of the implantodontist with the periodontist carrying out correct planning, a favorable prognosis. Methodology: A literature review was performed in PubMed, looking for articles from 2010 to 2021. Results: Advanced studies show that the accumulation of bacterial plaque in implants will result in the development of mucositis and may subsequently establish peri-implantitis. A history of periodontal disease, smoking and lack of supportive therapy should be considered as risk indicators for the development of peri-implantitis. Conclusion: The simultaneous work of the implantodontist with the periodontist is of paramount importance in order to obtain a good planning and consequently reduce short and long-term damage to the peri-implant tissues. The successful treatment of peri-implant diseases lies in prevention, involving reinforcement of oral hygiene and periodic maintenance(AU)

Periodontal disease and quality of life in patients with circulatory diseases / Doença periodontal e qualidade de vida em pacientes com doenças circulatórias

Introduction: Circulatory system diseases are one of the leading causes of death. Periodontal health is a component of oral and general health that contributes to quality of life. Objective: To analyze periodontal conditions and quality of life in patients with circulatory diseases. Material and method: Cross-sectional study, with patients with circulatory diseases (n=125). The clinical periodontal examination was performed considering: biofilm, bleeding on probing, suppuration, probing depth, gingival recession, and clinical attachment level. Quality of life was assessed with the Medical Outcomes Study 36 - Item Short-Form Health Survey (SF-36) and Oral Health Impact Profile - short form (OHIP-14). Data were analyzed with parametric and nonparametric tests (α=5%). Result: Elderly and men had a greater severity of periodontal disease. The Elderly had lower values in the domains of "Functional capacity" and "Physical aspects" (SF-36). The domain "Pain" had lower values in subjects with health/gingivitis. OHIP-14 did not show differences in the comparisons. There was no correlation between quality of life and the severity of periodontal disease. Conclusion: Among patients with circulatory diseases, the elderly and men had greater severity of periodontal disease. The elderly had a poorer quality of life (functional capacity and physical aspects). There was no correlation between the severity of periodontal disease and quality of life.

Introdução: As doenças do aparelho circulatório representam uma das principais causas de mortes. A saúde periodontal é um componente da saúde bucal e saúde geral que contribui para a qualidade de vida. Objetivo: Analisar as condições periodontais e a qualidade de vida em pacientes com doenças circulatórias. Material e método: Estudo transversal, com pacientes com doenças circulatórias (n=125). O exame clínico periodontal foi realizado considerando: biofilme, sangramento à sondagem, supuração, profundidade de sondagem, recessão gengival e nível de inserção clínica. A qualidade de vida foi avaliada com o Medical Outcomes Study 36 - Item Short-Form Health Survey (SF-36) e Oral Health Impact Profile - short form (OHIP-14). Os dados foram analisados com testes paramétricos e não paramétricos (α=5%). Resultado Idosos e os homens tiveram maior severidade da doença periodontal. Idosos apresentaram menores valores nos domínios "Capacidade funcional" e "Aspectos físicos" (SF-36). O domínio "Dor" teve menor valor nos indivíduos com saúde/gengivite. OHIP-14 não apresentou diferenças nas comparações. Não houve correlação entre qualidade de vida a severidade da doença periodontal. Conclusão Entre os pacientes com doenças circulatórias, os idosos e os homens tiveram maior severidade da doença periodontal. Idosos tiveram pior qualidade de vida (capacidade funcional e aspectos físicos). Não houve correlação entre a severidade da doença periodontal e a qualidade de vida.

Extratos hidroetanólicos de canela (Cinnamomum verum) e romã (Punica granatum L) promovem ação antibacteriana frente cepas resistentes a antibióticos de Acinetobacter baumannii e Pseudomonas aeruginosa / Cinnamon (Cinnamomum verum) and pomegranate (Punica granatum L) hydroethanolic extracts promote antibacterial action against antibiotic-resistant strains of Acinetobacter baumannii and Pseudomonas aeruginosa

A resistência bacteriana tem aumentado progressivamente no mundo, assim, há necessidade de novas opções de tratamentos. A fitoterapia tem ganhado notoriedade para combater infecções, principalmente as causadas por bactérias resistentes aos antibacterianos disponíveis. Diante do exposto, o presente estudo teve como objetivo preparar e analisar a composição fitoquímica e a ação antibacteriana dos extratos hidroetanólicos de canela (EHC) e romã (EHR) isolados e associados frente culturas planctônicas e biofilmes de cepas padrão e clínicas de Acinetobacter baumannii e Pseudomonas aeruginosa, além disso, analisar a ação citotóxica dos extratos em queratinócitos humanos (HaCat). Para isso, os EHC e EHR foram preparados e quantificado o teor de sólidos solúveis. Posteriormente, foi quantificado o teor de flavonoides e fenóis totais, análise antioxidante por meio da redução do radical 2,2'-difenil-1-picrilhidrazila (DPPH), e a fitoquímica por cromatografia líquida (HPLC). Em relação a ação antibacteriana dos extratos, foi aplicado o teste de microdiluição em caldo (CLSI ­ M7-A9) e a ação sinérgica realizada por meio do ensaio de checkerboard. As concentrações mais efetivas foram analisadas sobre biofilmes em formação (prevenção) e biofilmes formados (tratamento de 24 h), e quantificada a viabilidade por meio do teste colorimétrico MTT. Para avaliar a citotoxidade, os tratamentos foram aplicados sobre cultura celular de HaCat por 24 h e analisados por meio do teste colorimétrico MTT. A análise estatística foi realizada com 5% de significância (p<0.05), analisados pelo método ANOVA complementado pelo Teste de Tukey. Os resultados demonstraram que os EHC e EHR possuem ação antioxidante e presença de fitocompostos. Os extratos apresentaram ação antibacteriana para todas as cepas avaliadas, quando os mesmos foram associados, obteve-se concentrações sinérgicas para as cepas clínicas de A. baumannii. Em relação a ação antibiofilme, o EHC inibiu a formação em 95% e EHR em 96% do biofilme de #Ab 1, enquanto a cepa #Pa 2 teve 92% e 93% de inibição quando em contato com EHC e EHR, respectivamente. Após tratamento de 24 h em biofilmes formados, as reduções da viabilidade foram de 72% para as cepas #Ab 2 e #Ab 3 quando em contato com o EHC, já EHR inibiu em 83% a viabilidade da cepa #Ab ATCC. Para P. aeruginosa (#Pa 2), as reduções da viabilidade foram de 84% e 88,5% quando tratados com EHC e EHR, respectivamente. A avaliação da citotoxicidade em HaCat demonstrou que após tratamentos com diferentes concentrações dos extratos a viabilidade celular se manteve acima de 70% em todos os grupos. Diante disso, conclui-se que os EHC e EHR apresentam importante ação antioxidante e antibacteriana, tanto em culturas planctônicas quanto em biofilmes, e não apresentaram efeitos citotóxicos na faixa de concentração testada. (AU)

Bacterial resistance has progressively increased in the world, thus, there is a need for new treatment options. Phytotherapy has gained notoriety for fighting infections, mainly those caused by bacteria resistant to available antibacterials. In view of the above, the present study aimed to prepare and analyze the phytochemical composition and antimicrobial action of hydroethanolic extracts of cinnamon (EHC) and pomegranate (EHR) isolated and associated against planktonic cultures and biofilms of standard and clinical strains of Acinetobacter baumannii and Pseudomonas aeruginosa, in addition, analyze the cytotoxic action of the extracts on human keratinocytes (HaCat). For this, the EHC and EHR were prepared and the soluble solids content was quantified. Subsequently, the content of flavonoids and total phenols, antioxidant analysis through the reduction of the radical 2,2'-diphenyl1-picrylhydrazyl (DPPH), and phytochemistry by liquid chromatography (HPLC) were quantified. Regarding the antimicrobial action of the extracts, the broth microdilution test (CLSI ­ M7-A9) was applied and the synergistic action was performed through the checkerboard test. The most effective concentrations were analyzed on forming biofilms (prevention) and formed biofilms (24 h treatment), and viability was quantified using the MTT colorimetric test. To evaluate the cytotoxicity, the treatments were applied on HaCat cell culture for 24 h and analyzed using the MTT colorimetric test. Statistical analysis was performed with 5% significance (p<0.05), analyzed by the ANOVA method complemented by the Tukey test. The results showed that the EHC and EHR have antioxidant action and presence of phytocompounds. The extracts showed antibacterial action for all evaluated strains, when they were associated, synergistic concentrations were obtained for the clinical strains of A. baumannii. Regarding the antibiofilm action, EHC inhibited formation by 95% and EHR by 96% of the #Ab 1 biofilm, while the #Pa 2 strain had 92% and 93% inhibition when in contact with EHC and EHR, respectively. After 24 h treatment in formed biofilms, viability reductions were 72% for strains #Ab 2 and #Ab 3 when in contact with EHC, whereas EHR inhibited the viability of strain #Ab ATCC by 83%. For P. aeruginosa (#Pa 2), viability reductions were 84% and 88.5% when treated with EHC and EHR, respectively. The evaluation of cytotoxicity in HaCat showed that after treatments with different concentrations of extracts, cell viability remained above 70% in all groups. Therefore, it is concluded that EHC and EHR have important antioxidant and antibacterial action, both in planktonic cultures and in biofilms, and did not show cytotoxic effects in the tested concentration range. (AU)

Antimicrobial efficacy of S-PRG containing toothpastes on S. mutans biofilm development / Eficácia antimicrobiana de dentifrícios contendo S-PRG sobre o desenvolvimento de biofilme de S. mutans

Objective: to investigate the antimicrobial effects of toothpastes containing bioactive surface pre-reacted glass particles (S-PRG) on S. mutans biofilms adherence, initial colonization and maturation. Material and Methods: a reference UA 159 and a clinical S. mutans (SM6) strain were used. Bovine enamel specimens were randomly allocated into the groups (n=5): toothpastes containing 0%; 1%; 5%; 20%; 30% S-PRG; positive control dentifrice (NaF+triclosan); and negative control (distilled water). For biofilm development, samples were placed in a 24-well plate containing artificial saliva (4h), followed by adding 1mL of artificial saliva, BHI broth and 225µL of S. mutans suspension. Treatments with toothpastes were applied previously or after 4h and 24h of biofilm formation. Samples were incubated for 48h at 37°C in 5%CO2 and biofilm was detached and seeded in Petri dishes for determining the number of viable cells. Data were analyzed by ANOVA and Tukey test (5%). Results: significantly lower microorganisms' adherence (p<0.05) was obtained for all S-PRG toothpastes, with similar results to NaF+triclosan for SM6 and 20 and 30%S-PRG groups exhibiting higher inhibition effect than the NaF+Triclosan for UA159. Antibacterial effect on the early-stage biofilm was also observed for the S-PRG groups, but was not superior to the NaF+Triclosan toothpaste. For the mature biofilm, the effective antimicrobial potential of S-PRG toothpastes was observed only for the SM6 clinical strain, but was not higher than the positive control. Conclusion: experimental S-PRG toothpastes were effective to inhibit S. mutans biofilm growth by exhibiting antimicrobial activity, being promising agents to prevent cariogenic biofilm development (AU)

Objetivo: investigar o efeito de dentifrícios contendo S-PRG sobre a colonização inicial e maturação de biofilmes de S. mutans. Material e Métodos: uma cepa de referência (UA 159) e uma cepa clínica de S. mutans (SM6) foram utilizadas. Espécimes de esmalte bovino foram alocados nos grupos (n=5): dentifrícios contendo 0%; 1%; 5%; 20% e 30%S-PRG; controle positivo (NaF+triclosan); e controle negativo (água destilada). Os espécimes foram inseridos em uma placa de 24 poços contendo saliva artificial (4h), seguido por adição de 1mL de saliva artificial, BHI, 225µL de suspensão de S. mutans e foram tratados com suspensões de dentifrícios antes ou depois de 4 e 24h da formação do biofilme. Os espécimes foram incubados por 48h e o biofilme foi removido dos espécimes e semeado em placas de Petri para contagem de UFC/mL. Os dados foram analisados por ANOVA e teste de Tukey (5%). Resultados: houve diminuição na adesão de microrganismos para os grupos tratados com S-PRG (p<0.05). Para SM6, os dentifrícios contendo S-PRG apresentaram resultados semelhantes ao NaF+triclosan e para a cepa UA159 o dentifrício com 30%S-PRG apresentou efeito superior. Efeito antimicrobiano no biofilme recém-formado (4h) foi observado para os grupos contendo S-PRG, mas não foi observado efeito superior ao NaF+Triclosan. Para o biofilme maduro, efeito antimicrobiano do S-PRG foi observado apenas para a cepa clínica, mas não superior ao efeito do NaF+Triclosan. Conclusão: dentifrícios contendo S-PRG foram eficazes na inibição do desenvolvimento de biofilmes de S. mutans, sendo promissores agentes para prevenir o desenvolvimento de biofilme cariogênico. (AU)

Quality of life assessment in patients with temporomandibular disorder with stabilization splints and home therapeutic exercises: a randomized clinical trial / Avaliação da qualidade de vida em pacientes com desordem temporomandibular com uso da placa estabilizadora e exercícios terapêuticos caseiros: um ensaio clínico randomizado

Objective: The present study aimed to evaluate the quality of life in TMD patients with the use of Stabilization Splints (SSs) and Home Therapeutic Exercises (HTEs) guidance. Material and Methods: The study was a clinical, randomized, controlled, prospective, and interventional trial. The screening included dentate patients of both genders, diagnosed with TMD through the RDC/TMD questionnaire with no TMJ osteoarthritis and/or osteoarthrosis. To assess the quality of life, the Short-Form Health Survey (SF-36) questionnaire was applied to all patients (n=70), randomized into a test group with SS and a control group with HTE. The evaluations of both questionnaires were performed before and after the intervention of 12 weeks. Results: The comparisons between pre- and post-intervention intragroups were performed by the non-parametric Wilcoxon test with a 5% significance level. There was a frequency distribution of the responses to the 36 items of the SF-36 questionnaire and comparisons between times. In the test group, 49 patients received a SS and did HTEs. In the control group, 21 patients performed HTEs. In the statistical analysis, among the eight domains, three were identified with significant scores: pain, mental health, and vitality. Conclusion: It was found that there was an improvement in pain and quality of life after the treatment of TMD with a SS and HTE (AU)

Objetivo: O presente estudo teve como objetivo avaliar a qualidade de vida em pacientes com DTM com o uso de placas de estabilização (SSs) e orientação de exercícios terapêuticos domiciliares (HTEs). Material e Métodos: O estudo foi um ensaio clínico, randomizado, controlado, prospectivo e intervencionista. A triagem incluiu pacientes dentados de ambos os sexos, diagnosticados com DTM através do questionário RDC/TMD sem osteoartrite e/ou osteoartrose da ATM. Para avaliar a qualidade de vida, o questionário Short-Form Health Survey (SF-36) foi aplicado a todos os pacientes (n=70), randomizados em grupo teste com SS e grupo controle com HTE. As avaliações de ambos os questionários foram realizadas antes e após a intervenção de 12 semanas. Resultados:As comparações intragrupos pré e pós-intervenção foram realizadas pelo teste não paramétrico de Wilcoxon com nível de significância de 5%. Houve distribuição de frequência das respostas aos 36 itens do questionário SF-36 e comparações entre os tempos. No grupo controle, 21 pacientes realizaram HTEs. Na análise estatística, dentre os oito domínios, três foram identificados com escores significativos: dor, saúde mental e vitalidade. Conclusão: Verificou-se que houve melhora da dor e da qualidade de vida após o tratamento da DTM com SS e HTE.(AU)

Reposicionamento de fármacos para cryptococose: avaliação experimental do cloridrato de duloxetina em Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii / Repositioning of drugs for cryptococcosis: experimental evaluation of duloxetine hydrochloride in Cryptococcus neoformans and Cryptococcus gatti

Infecções fúngicas como as causadas por Cryptococcus spp. são de alta mortalidade e morbidade. O reposicionamento de fármaco, ou seja, a utilização de compostos para finalidade diferente da qual esse foi desenvolvido, pode ser uma alternativa para identificar fármacos mais eficazes. Assim, este estudo tem como propósito avaliar a atividade antifúngica, in vitro e in vivo, do fármaco cloridrato de duloxetina (CD), antidepressivo pertencente a classe dos Inibidores Seletivos da Recaptação da Serotonina e Norepinefrina frente a cepas padrões e clínicas de Cryptococcus neoformans e C. gattii. Foi utilizada a técnica de microdiluição de acordo com o European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) para determinar a Concentração Inibitória Mínima (MIC), e a técnica do "tabuleiro de xadrez" para avaliar o efeito sinérgico de anfotericina B (AmB) em associação com CD. Além disso, foi avaliado o efeito de CD na quantidade do ergosterol. O efeito do CD também foi avaliado em biofilmes de C. neoformans e C. gattii, analisando a biomassa por cristal violeta, a viabilidade celular por XTT e morfologia através das imagens de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). In vivo, a eficácia de CD foi avaliada por curvas de sobrevivência no modelo invertebrado Galleria mellonella. CD foi ativo frente a todas as cepas clínicas e padrões de C. neoformans e C. gattii, apresentando valores de CIM e CFM na faixa de 15,62 ­ 62,5 µg/mL. A combinação de CD com AmB apresentou uma combinação sinérgica, reduzindo o valor da CIM em 4 vezes tanto para CD quanto para AmB. CD não produziu redução na quantidade de ergosterol presente na membrana de C. gattii ATCC e C. neoformans ATCC. Em biofilmes, foi observada a redução da biomassa do biofilme em até 82,16% e redução de 99,6% na viabilidade celular de C. gattii. Em biofilmes de C. neoformans a redução foi de 81,13% e 99,5% respectivamente para a análise de biomassa e viabilidade. As imagens de MEV corroboraram com os achados dos ensaios realizados para análise do efeito de CD em biofilmes. Em G. mellonella aumentou a sobrevivência da larva quando utilizado na concentração de 3,125 mg/larva. Assim, os ensaios validaram a hipótese de que o cloridrato de duloxetina tem ação antifúngica e antibiofilme in vitro frente a cepas clínicas e cepas padrões de C. neoformans e C. gattii. (AU)

Fungal infections such as those caused by Cryptococcus spp. are of high mortality and morbidity. Drug repositioning, that is, the use of compounds for a purpose different from the one for which it was developed, can be an alternative to identify more effective drugs. Thus, this study aims to evaluate the antifungal activity, in vitro and in vivo, of the drug duloxetine hydrochloride (CD), an antidepressant belonging to the class of Selective Serotonin and Norepinephrine Reuptake Inhibitors against standard and clinical strains of Cryptococcus neoformans and C. gattii. The microdilution technique according to the European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) was used to determine the Minimum Inhibitory Concentration (MIC), and the "chessboard" technique was used to evaluate the synergistic effect of amphotericin B (AmB) on association with CD. In addition, the effect of CD on the amount of ergosterol was evaluated. The effect of CD was also evaluated in C. neoformans and C. gattii biofilms, analyzing the biomass by crystal violet, cell viability by XTT and morphology through Scanning Electron Microscopy (SEM) images. In vivo, the effectiveness of CD was evaluated by survival curves in the Galleria mellonella invertebrate model. CD was active against all clinical strains and patterns of C. neoformans and C. gattii, with MIC and CFM values in the range of 15.62 ­ 62.5 µg/mL. The combination of CD with AmB showed a synergistic combination, reducing the MIC value by 4 times for both CD and AmB. CD did not produce a reduction in the amount of ergosterol present in the membrane of C. gattii ATCC and C. neoformans ATCC. In biofilms, a reduction in biofilm biomass of up to 82.16% and a 99.6% reduction in cell viability of C. gattii were observed. In C. neoformans biofilms the reduction was 81.13% and 99.5% respectively for biomass and viability analysis. The SEM images corroborated the findings of the tests carried out to analyze the effect of CD on biofilms. In G. mellonella, larval survival increased when used at a concentration of 3.125 mg/larvae. Thus, the tests validated the hypothesis that duloxetine hydrochloride has antifungal and antibiofilm action in vitro against clinical strains and standard strains of C. neoformans and C. gattii.(AU)

Avaliação dos efeitos antifúngicos de fármacos inibidores seletivos da recaptação de serotonina em Cryptococcus gattii / Evaluation of the antifungal effects of selective serotonin reuptake inhibitors in Cryptococcus gattii

A criptococose é uma infecção fúngica que acomete tanto indivíduos imunocomprometidos como imunocompetentes. O arsenal antifúngico é limitado, existem relatos de desenvolvimento de resistência fúngica a esses compostos e também alta toxicidade ao paciente. O reposicionamento de fármacos dos inibidores seletivos da recaptação de serotonina (ISRS) tem mostrado ação contra espécies fúngicas, tornando estes compostos alternativas a serem estudadas para o tratamento das infecções criptocócicas. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos antifúngicos em cápsula, biofilme e células planctônicas de Cryptococcus gattii (cepa ATCC 56990 e isolado clínico 5) dos fármacos ISRS, cloridrato de fluoxetina (CF) e cloridrato de paroxetina (CP). Para isso, foi utilizada a técnica de microdiluição em caldo de acordo com European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) para determinar a Concentração Inibitória Mínima (CIM), sendo a CIM de 31,25 µg/mL determinada para os fármacos CF e CP e ambos os fármacos demonstraram ação fungicida (CIM/CFM = 1). Em seguida foi verificado atividade sinérgica dos fármacos CF e CP combinados com anfotericina B (AmB), como resultado encontramos três concentrações sinérgicas, para CF reduzindo 8 e 4x em relação ao valor de CIM, para CP reduzindo 4x em relação ao valor de CIM e para AmB houve redução de 4x em relação ao valor de CIM. Posteriormente, o efeito dos fármacos mencionados foi avaliado na redução da biomassa do biofilme, por meio da técnica de cristal violeta. Nas concentrações 10x (312,5 µg/mL) e 20x (625 µg/mL) CIM de observou-se a redução da biomassa do biofilme de C. gattii em 57,72% a 76,66% para CF e redução entre 42,69 a 68,03% para CP. Além disso, em concentrações sub- inibitórias, ambos fármacos reduziram o tamanho da cápsula da levedura em até 62,46% para CF e 58,94% para CP. Também foi analisada a viabilidade do biofilme pela contagem de unidades formadoras de colônia/mL, após tratamento com CF e CP 20x valor de CIM e foi observada redução entre 1,21 a 1,446 log na viabilidade do biofilme (p< 0,0001). Ainda, o efeito dos fármacos em biofilme foi avaliado quanto ao efeito na atividade metabólica pelo ensaio XTT nas concentrações 10x e 20x CIM de ambos os fármacos foi possível observar redução entre 39,05% a 84,62% para CF e redução entre 56,99% a 67,64% para CP. Assim, os fármacos avaliados apresentaram potencial antifúngico frente C. gattii em todos os ensaios in vitro, podendo ser considerados novas alternativas para o tratamento deste patógeno (AU)

Cryptococcosis is a fungal infection that affects both immunocompromised and immunocompetent individuals. The antifungal arsenal is limited, there are reports of the development of fungal resistance to these compounds and also high toxicity to the patient. The drug repositioning of selective serotonin reuptake inhibitors (SSRIs) has shown action against fungal species, making these compounds alternatives to be studied for the treatment of cryptococcal infections. Thus, the aim of this study was to evaluate the antifungal effects on capsule, biofilm and planktonic cells of Cryptococcus gattii (ATCC strain 56990 and clinical isolate 5) of the SSRI drugs, fluoxetine hydrochloride (FLH) and paroxetine hydrochloride (PAH). For this, the broth microdilution technique was used according to European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) to determine the Minimum Inhibitory Concentration (MIC), and the MIC of 31.25 µg/mL was determined for the drugs (FLH) and PAH and both drugs demonstrated fungicidal action (MIC/CFM = 1).Then it was verified synergistic activity of the drugs FLH and PAH combined with amphotericin B (AmB), as a result we found three synergistic concentrations, for FLH reducing 8 and 4x compared to the MIC value, for PAH reducing 4x compared to the MIC value and for AmB there was 4x reduction compared to the MIC value. Subsequently, the effect of the mentioned drugs was evaluated in the reduction of biofilm biomass by means of the crystal violet technique. At 10x (312.5 µg/mL) and 20x (625 µg/mL) MIC concentrations of it was observed the reduction of C. gattii biofilm biomass by 57.72% to 76.66% for FLH and reduction between 42.69 to 68.03% for PAH. Furthermore, at sub-inhibitory concentrations, both drugs reduced the yeast capsule size by up to 62.46% for FLH and 58.94% for PAH. The biofilm viability was also analyzed by counting colony forming units/mL, after treatment with FC and CP 20x the MIC value and a reduction between 1.21 to 1.446 log in biofilm viability was observed (p< 0.0001). Also, the effect of the drugs in biofilm was evaluated as the effect on the metabolic activity by the XTT assay in concentrations 10x and 20x MIC of both drugs was possible to observe reduction between 39.05% to 84.62% for FC and reduction between 56.99% to 67.64% for CP. Thus, the drugs evaluated showed antifungal potential against C. gattii in all in vitro assays, and may be considered new alternatives for the treatment of this pathogen.(AU)

Efeito antimicrobiano e propriedades mecânicas da zircônia translúcida revestida por vidros experimentais / Antimicrobial effect and mechanical properties of translucent zirconia coated with experimental glasses

Objetivos: Avaliar as propriedades mecânicas, atividade antimicrobiana e citocompatibilidade da zircônia translúcida 5Y-PSZ revestida por vidros experimentais contendo boro e prata. Métodos: Discos 5Y-PSZ (KATANA UTML™, Kuraray Noritake) foram processados e divididos em quatro grupos: polido, sem nenhum revestimento (Controle), aplicação de glaze comercial (Glaze) e vidros experimentais contendo prata (AgCoat) e boro (BCoat). As amostras foram submetidas aos testes de dureza Vickers, testes de flexão biaxial, análise fractográfica e rugosidade através de perfilometria óptica. O potencial antimicrobiano foi caracterizado usando biofilmes de espécie única de Streptococcus mutans e Candida albicans. Foi realizada a quantificação de unidades viáveis formadoras de colônias (UFC), atividade metabólica (CV), ensaios de matriz polissacarídica extracelular (EPS) e biovolume. Biofilmes foram visualizados por microscópio eletrônico de varredura (MEV) e microscopia confocal de varredura a laser (CLSM). A citocompatibilidade foi determinada usando os testes WST-1 e LIVE&DEAD usando células-tronco do ligamento periodontal (PDLSCs) por 24 h. Todas as caracterizações biológicas foram realizadas em triplicatas técnicas e biológicas usando amostras independentes. As análises estatísticas foram realizadas por ANOVA de uma via, teste de Tukey, análise de Weibull e análise de correlação de Pearson. Resultados: BCoat, AgCoat e Glaze alcançaram dureza semelhante, que foi menor que o Controle. BCoat teve a maior resistência à flexão e parâmetros de Weibull (m = 11,5, sF 625 MPa, s0 620) seguido por AgCoat (m = 5,3; sF 464 MPa, s0 478 MPa). BCoat diminuiu significativamente a formação de biofilmes, conforme mostrado pela menor UFC (5,94 log-UFC/mm2) e atividade metabólica (0,17 a.u.) em comparação com os outros grupos (AgCoat: 6,44 log-UFC/mm2, 0,89 a.u.; Glaze: 6,81 log UFC/mm2, 1,21 a.u.; Controle: 6,82 logUFC/mm2, 1,25 a.u.). BCoat e AgCoat apresentaram os menores valores de EPS (0,11 a.u.), seguidos por Glaze e Controle (0,13 a.u.; 0,14 a.u., respectivamente). MEV e CLSM revelaram que os biofilmes no BCoat eram finos, esparsos, com menor biovolume, enquanto os outros grupos produziram biofilmes robustos com maior biovolume. Os ensaios de viabilidade celular não mostraram toxicidade para PDLSCs para todos os grupos. Conclusão: 5Y-PSZ revestida por vidro experimental contendo boro surge como uma estratégia potencial para melhorar as propriedades mecânicas e antimicrobianas do material (AU).

Objectives: To evaluate the mechanical and antimicrobial properties of boroncontaining coating on translucent zirconia (5Y-PSZ). Methods: 5Y-PSZ discs (Control) were coated with a glaze (Glaze), silver- (AgCoat), or boron-containing (BCoat) glasses. The coatings' antimicrobial potential was characterized using S. mutans and C. albicans biofilms through viable colony-forming units (CFU), metabolic activity (CV), and the extracellular polysaccharide matrix (EPS). Biofilm architectures were imaged under scanning electron and confocal laser scanning microscopies (SEM and CLSM). Cytocompatibility was determined at 24 h via WST-1 and LIVE&DEAD assays using periodontal ligament stem cells (PDLSCs). The coatings' effects on mechanical properties were characterized by Vickers hardness, biaxial bending tests, and fractography analysis. Statistical analyses were performed via one-way ANOVA, Tukey's tests, Weibull analysis, and Pearson's correlation analysis. Results: BCoat significantly decreased biofilm formation, having the lowest CFU and metabolic activity compared with the other groups. BCoat and AgCoat presented the lowest EPS, followed by Glaze and Control. SEM and CLSM images revealed that the biofilms on BCoat were thin and sparse, with lower biovolume. In contrast, the other groups all yielded similarly robust biofilms with higher biovolume without compromising PDLSC viability. BCoat, AgCoat, and Glaze also presented similar hardness significantly lower than Control. BCoat had the highest flexural strength, characteristic strength and Weibull parameters (sF : 625 MPa; s0: 620 MPa; m = 11.5), followed by AgCoat (sF : 464 MPa; s0: 478 MPa; m = 5.3). Significance: BCoat is a cytocompatible glass with promising antimicrobial properties that can improve the mechanisms and reliability of 5Y-PSZ (AU).

Tecnologia digital em próteses totais: propriedades dos materiais CAD-CAM e desenvolvimento de uma patente de inovação para simplificação do fluxo de trabalho / Digital technology in complete dentures: properties of CAD-CAM materials and development of an innovation patent to simplify the workflow

Recursos digitais, como a manufatura subtrativa (fresagem CAD-CAM) e a manufatura aditiva (impressão 3D) podem promover significativos avanços, reduzindo o tempo e o custo de produção de próteses totais (PTs). Assim, este estudo objetiva investigar as características superficiais (rugosidade e ângulo de contato), propriedades mecânicas (resistência mini-flexural) e a adesão de biofilme sobre polímeros de PMMA pré-polimerizado para fresagem CAD-CAM e sobre resinas para impressão 3D utilizados na fabricação de bases de PTs, bem como propor um fluxo de trabalho inovador para abreviar e simplificar as etapas de confecção de PTs. Para a análise in vitro, foram fabricados um total de 60 discos e 40 barras distribuídas igualmente em quatro grupos: fresagem CAD-CAM (GF), impressão 3D (GI) e PMMA convencional termopolimerizado por ciclo longo (GCL) ou por energia de micro-ondas (GCM). A rugosidade foi determinada pelo valor de Ra; o ângulo de contato foi medido pelo método da gota séssil; o teste de resistência à mini-flexão foi obtido por teste de flexão de três pontos, enquanto o comportamento frente à formação de biofilme foi analisado através da adesão de biofilme de C. albicans. Os dados foram analisados por meio de estatística descritiva e analítica (α = 0,05). Os resultados mostraram que o GI apresentou a maior rugosidade superficial (Ra: 0,317 ± 0,151µm) e os menores valores de resistência à miniflexão (57,23 ± 9,07MPa) e o GF apresentou a menor adesão de biofilme de C. albicans (log UFC/mL: 3,74 ± 0,57) e maior média de resistência à mini-flexão (114,96 ± 16,23 MPa). Não houve diferença estatística entre o GF e os grupos convencionais para rugosidade, ângulo de contato e resistência à mini-flexão. A patente de inovação desenvolvida estabeleceu um novo fluxo de trabalho para confecção de próteses totais através de um protocolo de três consultas em que foram feitas as moldagens anatômicas na 1ª sessão, juntamente com o registro do suporte labial, plano oclusal e linhas de referência para subsidiar a montagem dos dentes superiores. Uma prótese-teste foi confeccionada por meio de procedimentos convencionais ou CAD-CAM e avaliada na 2ª consulta, permitindo observar o resultado estético, executar a moldagem funcional e realizar o registro da relação maxilo-mandibular, fornecendo referências precisas para a confecção da prótese inferior. Com base nos resultados da fase in vitro deste estudo, os corpos-de-prova obtidos a partir de disco para fresagem CAD-CAM apresentaram resistência flexural e propriedades superficiais semelhantes às resinas convencionais e mostraram um comportamento inibidor da adesão de C. albicans, enquanto os espécimes produzidos por impressão 3D exibiram a menor resistência à flexão e a maior rugosidade da superfície. O dispositivo inovador apresentado para a execução das etapas clínicas relacionadas à fabricação de PTs mostrou-se efetivo para abreviar e simplificar as técnicas disponíveis, apresentando confiabilidade e previsibilidade para produção de PTs em número de sessões reduzido (AU).

Digital features like subtractive and additive manufacturing can promote breakthroughs by reducing the time and cost of making complete dentures (CDs). Thus, this study aims to investigate surface characteristics (roughness and contact angle), mechanical properties (mini-flexural strength), and biofilm adhesion on computer-aided design/computer-aided manufacturing (CAD-CAM) PMMA polymer, and threedimensional (3D) printed resin for denture´s base fabrication as well as to propose an innovative workflow. For in vitro analysis, a total of 60 discs and 40 rectangular specimens were fabricated from one CAD-CAM pre-polymerized PMMA disc (GF), one 3D-printed (GI), and two conventional heat-polymerized (GCL and GCM) materials for denture base fabrication. Roughness was determined by the Ra value; the contact angle was measured by the sessile drop method; the mini-flexural strength test was a three-point bending test while the biofilm formation inhibition behavior was analyzed through C. albicans adhesion. The data were analyzed using descriptive and analytical statistics (α = 0.05). Results showed that GI specimens presented the highest surface roughness (Ra: 0.317 ± 0.151 µm) and lowest mini-flexural strength values (57.23 ± 9.07 MPa) and the GF showed the lowest C. albicans adhesion (log CFU/mL: 3.74 ± 0.57) and highest mini-flexural strength mean (114.96 ± 16.23 MPa). There was no statistical difference between GF and conventional groups for roughness, contact angle, and mini-flexural strength. In turn, the presented novel workflow for complete dentures fabrication reached a three appointments protocol in which preliminary impressions were made in the 1st session, all together to maxillary registration of lip support, occlusal plane, and reference lines for teeth arrangement. A trial denture was manufactured and evaluated by the 2nd appointment through conventional or CAD-CAM procedures, allowing esthetics evaluation, final impression, and maxillomandibular relationship record and providing precise references for final dentures fabrication. Based on the findings of this in vitro study, GF presented surface and mechanical properties similar to conventional resins and show improved behavior preventing C. albicans adhesion, while GI specimens exhibited the lowest flexural strength, and highest surface roughness. The proposed device for CD´s fabrication clinical procedures reached feasibility and by simplifying available techniques, this protocol could achieve reliability and predictability to produce complete dentures with reduced working time (AU).

Abordagem conservadora de lesões cariosas profundas: uma revisão de literatura / Conservative approach to deep carious lesions: a literature review

O presente trabalho tem como objetivo realizar uma revisão de literatura e discutir os mais atuais conceitos sobre abordagem conservadora de lesões cariosas profundas, facilitando o manejo clínico. Para que essa abordagem conservadora seja implementada, é imprescindível que se conheça a composição estrutural e funcional do biofilme para, assim, entender a evolução da doença cárie que acomete a estrutura dentária. No entanto, quando se trata de um dente com lesão de cárie ativa com grande comprometimento de esmalte e dentina, procedimentos operatórios mais invasivos e restauradores podem ser necessários, mesmo que fundamentados na maior preservação possível de estrutura dentária. As evidências mais atuais encontradas na literatura recomendam a remoção seletiva do tecido cariado que consiste na dentina infectada, ou seja, clinicamente amolecida, e restauração definitiva na mesma sessão. Portanto, desde que o dente apresente vitalidade pulpar clinicamente confirmada, acredita-se que a preservação estratégica da dentina, poderá aumentar as chances de sucesso no tratamento, evitando possível exposição da polpa dentária. Adicionalmente, ao optar por práticas conservadoras no contexto da Odontologia de mínima intervenção, resultará em um significativo aumento na longevidade das restaurações sempre associando promoção de saúde ao paciente(AU)

This paper aims to conduct a literature review and discuss the most current concepts on conservative approach to deep carious lesions in permanent posterior teeth, facilitating clinical management. For this conservative approach to be implemented, it is essential to know the structural and functional composition of the biofilm in order to understand the evolution of the caries disease that affects the dental structure. However, when it comes to a tooth with an active caries lesion with major enamel and dentin compromise, more invasive and restorative surgical procedures may be necessary, even if based on the greatest possible preservation of the dental structure. The most current findings in the literature recommend the selective removal of carious tissue consisting of infected dentin, that is, clinically softened, and definitive restoration in the same session. Therefore, as long as the tooth has clinically confirmed pulp vitality, it is believed that the strategic preservation of dentin may increase the chances of successful treatment, avoiding possible exposure of the dental pulp. Additionally, when opting for conservative practices in the context of Minimally Invasive Dentistry, it will result in a significant increase in the longevity of restorations, always associating health promotion to the patient(AU)

Aplicação do plasma de baixa temperatura sob pressão atmosférica no controle de biofilmes cariogênicos / Application of low temperature plasma under atmospheric pressure in the control cariogenic biofilms

O objetivo geral do presente estudo foi avaliar a aplicação dos jatos de plasma de baixa temperatura sob pressão atmosférica (PBTPA) produzidos por gás de argônio e hélio como gases de trabalho, no controle de biofilmes cariogênicos. Para tanto, foram estabelecidos os parâmetros físicos dos PBTPA gerados com argônio e hélio que se mostraram efetivos frente a biofilmes mono, dual e polimicrobianos compostos por combinações das espécies Streptococcus mutans, Streptococcus gordonii, Streptococcus sanguinis, Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus, Candida albicans e Actinomyces naeslundii. Os biofilmes mono, dual e multi-espécies foram submetidos ao tratamento com PBTPA produzidos por dois dispositivos diferentes, um obtido comercialmente (kINPen09®) que usou argônio como gás de trabalho, e outro protótipo desenvolvido pela FEG-UNESP (Faculdade de Engenharia de Guaratinguetá) que usou hélio. Análises quantitativas e microscópicas (confocal, microscopia eletrônica de varredura) foram realizadas. Foi incluído controle negativo (sem tratamento), positivo (clorexidina 0,12%) e controle de gás, utilizando apenas fluxo de gás, sem produzir plasma. Além disso, os efeitos celulares do PBTPAargônio e hélio sobre biofilme dual e multi-espécies também foram analisados em microscopia eletrônica de varredura e microscopia de varredura a laser confocal. Todos os ensaios foram realizados em triplicata em três experimentos independentes. Os resultados foram tabulados e analisados quanto à distribuição. A seguir, os testes estatísticos mais adequados foram selecionados. O nível de significância foi de 5%. Os resultados obtidos para os tratamentos dos biofilmes mono, dual ou multi-espécies com PBTPA-argônio e hélio foram todos significativos em comparação ao controle negativo em todos os tempos analisados. Para PBTPA-argônio, não houve recuperação de S. gordonii e S. sanguinis em todos tempos analisados. Para PBTPA-hélio, os melhores resultados foram obtidos em 5 e 7 minutos de exposição dos biofilmes ao PBTPA. Finalmente, tanto o dispositivo gerador de PBTPA que trabalhou com gás argônio quanto o dispositivo que trabalhou com gás hélio, demonstraram resultados promissores e poderão contribuir para o desenvolvimento de novos protocolos de Odontologia de Intervenção Mínima. (AU) The general objective of this study was to evaluate the application of lowtemperature plasma under atmospheric pressure (PBTPA) of argon and helium flow, in the control of cariogenic biofilms. For this, the effective physical parameters of PBTPA-argon and helium in mono, dual and polymicrobial biofilms composed of combinations of the species Streptococcus mutans, Streptococcus gordonii, Streptococcus sanguinis, Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus, Candida albicans and Actinomyces naeslundii were established. The multi-species biofilms were treated by different PBTPA generating devices, one obtained commercially (kINPen09®) that used argon as working gas, and another prototype developed by FEG-UNESP (Faculdade de Engenharia de Guaratinguetá) that used helium as working gas. Quantitative and microscopic analyzes (confocal, scanning electron microscopy) were performed. Negative control (no treatment), positive control (chlorhexidine 2%) and gas control (argon) were included. Besides that, cellular effects of PBTPA-argon and helium on dual and multi-species biofilms were analyzed by scanning electron microscopy (SEM) and confocal laser scanning microscopy. The results obtained for the treatments of mono, dual or multispecies biofilms with both PBTPA-argon and helium were all significant when compared to the negative control at all times analyzed. For PBTPA-argon, there was no recovery of S. gordonii and S. sanguinis at all analyzed times. For PBTPA-helium, the best results were obtained at 5 and 7 min of exposure of biofilms to PBTPA. All the tests were carried out in triplicate in three independent experiments. The results are tabulated and analyzed in terms of distribution. Next, the most suitable statistical tests were selected. The level of significance was 5%. The results obtained for the treatments of mono, dual or multi-species biofilms with PBTPA-argon and helium were all significant compared to the negative control at all analyzed times. Finally, both PBTPA generating could contribute to the development of new protocols for Minimal Intervention Dentistry (AU)

O objetivo geral do presente estudo foi avaliar a aplicação dos jatos de plasma de baixa temperatura sob pressão atmosférica (PBTPA) produzidos por gás de argônio e hélio como gases de trabalho, no controle de biofilmes cariogênicos. Para tanto, foram estabelecidos os parâmetros físicos dos PBTPA gerados com argônio e hélio que se mostraram efetivos frente a biofilmes mono, dual e polimicrobianos compostos por combinações das espécies Streptococcus mutans, Streptococcus gordonii, Streptococcus sanguinis, Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus, Candida albicans e Actinomyces naeslundii. Os biofilmes mono, dual e multi-espécies foram submetidos ao tratamento com PBTPA produzidos por dois dispositivos diferentes, um obtido comercialmente (kINPen09®) que usou argônio como gás de trabalho, e outro protótipo desenvolvido pela FEG-UNESP (Faculdade de Engenharia de Guaratinguetá) que usou hélio. Análises quantitativas e microscópicas (confocal, microscopia eletrônica de varredura) foram realizadas. Foi incluído controle negativo (sem tratamento), positivo (clorexidina 0,12%) e controle de gás, utilizando apenas fluxo de gás, sem produzir plasma. Além disso, os efeitos celulares do PBTPAargônio e hélio sobre biofilme dual e multi-espécies também foram analisados em microscopia eletrônica de varredura e microscopia de varredura a laser confocal. Todos os ensaios foram realizados em triplicata em três experimentos independentes. Os resultados foram tabulados e analisados quanto à distribuição. A seguir, os testes estatísticos mais adequados foram selecionados. O nível de significância foi de 5%. Os resultados obtidos para os tratamentos dos biofilmes mono, dual ou multi-espécies com PBTPA-argônio e hélio foram todos significativos em comparação ao controle negativo em todos os tempos analisados. Para PBTPA-argônio, não houve recuperação de S. gordonii e S. sanguinis em todos tempos analisados. Para PBTPA-hélio, os melhores resultados foram obtidos em 5 e 7 minutos de exposição dos biofilmes ao PBTPA. Finalmente, tanto o dispositivo gerador de PBTPA que trabalhou com gás argônio quanto o dispositivo que trabalhou com gás hélio, demonstraram resultados promissores e poderão contribuir para o desenvolvimento de novos protocolos de Odontologia de Intervenção Mínima. (AU)

Novas estratégias terapêuticas para o controle de biofilmes orais: terapia fotodinâmica e sistema carreador de antimicrobianos / New therapeutic strategics for the control of oral biofilms: photodynamic therapy and drug delivery system

Os biofilmes orais possuem grande relevância clínica por estarem associados com o desenvolvimento de cárie dentária e candidose bucal, que são doenças infecciosas frequentemente encontradas na população. O presente trabalho foi dividido em dois estudos: Estudo 1 que teve como objetivo analisar os efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDa), mediada por Fotoenticine (FTC) e Azul de Metileno (AM), sobre biofilmes microcosmos de cárie dentária; e Estudo 2 cujo objetivo foi avaliar o gellan gum como biomaterial para carreador do antifúngico Ester fenetil do ácido caféico (CAPE) contra Candida albicans. No estudo 1, amostras de dentina cariada foram coletadas de diferentes pacientes para formar biofilmes microcosmos in vitro. Os biofilmes foram tratados com FTC ou AM associado à irradiação LED a 660 nm (28,5 J/cm²). Os dados foram analisados pela contagem de Unidades Formadoras de Colônias (UFC/mL). Além disso, a biomassa, estrutura do biofilme e produção de ácidos pelos microrganismos foram determinadas por análises microscópicas ou espectrofotométricas. Os biofilmes de diferentes pacientes apresentaram variações na composição microbiana, sendo formados por estreptococos, lactobacilos e leveduras. No geral, a TFDa diminuiu 3,7 Log10 do total de microrganismos, 2,8 Log10 de estreptococos, 3,2 Log10 de lactobacilos e 3,2 Log10 de leveduras, e atingiu a erradicação de estreptococos do grupo mutans. A TFDa também foi capaz de reduzir a biomassa, desagregar os biofilmes e diminuir a concentração de ácidos em 1,1 a 1,9 mmol de lactato/L. Em relação ao estudo 2, inicialmente, foram preparadas formulações do CAPE em diferentes concentrações de gellan gum (0,6 a 1%). As formulações foram avaliadas em relação ao sistema de liberação e ação antifúngica contra C. albicans. Verificou-se que concentrações mais altas de gellan (0,9 e 1%) levaram a uma liberação mais prolongada do CAPE em relação as concentrações mais baixas. Os valores de concentração inibitória mínima do CAPE sobre C. albicans foram aumentados quando esse composto foi incorporado no gellan. As formulações de CAPE em gellan apresentaram atividade antifúngica tanto em culturas planctônicas como em biofilmes de C. albicans, sendo esses efeitos dependentes do tempo de tratamento. O CAPE e suas formulações em gellan também levaram a uma diminuição da atividade proteolítica de C. albicans. Concluiu-se que a TFDa mediada por Fotoenticine e o sistema carreador de gellan gum podem ser estratégias terapêuticas promissoras para o controle dos biofilmes na cavidade bucal, podendo ser usadas respectivamente no tratamento da cárie e candidose. (AU)

Dental caries and oral candidiasis are infectious diseases frequently found in the population. The present work is divided into two studies, study 1 time as objective: To analyze the effects of antimicrobial photodynamic therapy (aPDT), mediated by Fotoenticine (FTC) and Methylene Blue (MB), on dental caries microcosm biofilms. In study 2, the objective was to evaluate gellan gum as a biomaterial to carry the antifungal caffeic acid phenethyl ester (CAPE) on Candida albicans. To conduct study 1, carious dentin samples were collected from different patients to form in vitro microcosm biofilms. The biofilms were treated with FTC or MB associated with 660 nm red LED irradiation, with energy dose of 28.5 J/cm² and power dose of 40 mW/cm². The data were analyzed by the count of Colony Forming Units (CFU/mL). In addition, the biomass, biofilm structure and acid production of the microorganisms were determined by microscopic or spectrophotometric analysis. The biofilms from different patients showed variations in microbial composition, being formed by streptococci, lactobacilli, and yeasts. Overall, aPDT decreased 3.7 Log10 of total microorganisms, 2.8 Log10 of streptococci, 3.2 Log10 of lactobacilli and 3.2 Log10 of yeasts, and achieved eradication of mutans group streptococci. PDTa was also able to reduce biomass, disaggregate biofilms, and decrease acid concentration by 1.1 to 1.9 mmol lactate/L. For study 2 of this, first the standards of CAPE were determined, such as minimum inhibitory concentration, and absorption peak, then CAPE was incorporated into gellan gum, and then the standard curve test and analysis of CAPE release was performed, finally the formulations were tested on planktonic culture and biofilm of different strains of C. albicans, it was also analyzed the action of this drug on the production of Sap. The MIC found varied from 32 to 64 µg/mL, the release tests showed a gradual release in the higher formulations, finally in the CFU/mL count both in planktonic culture and biofilm the formulations were able to inhibit the fungus. With this it is concluded that both aPDT for oral microcosm and gellan gum as caregiver of CAPE for Candida albicans inhibition are promising. (AU)

Efficacy of Resin Infiltration and Fluoride Casein Phosphopeptide Amorphous Calcium Phosphate Varnish on Non-cavitated Active White Spot Lesions in Children: A Randomized Clinical Trial

Abstract Objective: To compare the efficacy of resin infiltration and fluoride casein phosphopeptide amorphous calcium phosphate varnish on non-cavitated active white spot lesions in 5-8 years old children. Material and Methods: 60 non-cavitated active white spot lesions in 60 patients with ICDAS II score 2 from both genders in the age range of 5 to 8 years were taken. Thirty lesions were treated by resin infiltration (Group 1) and 30 by Fluoride CPP-ACP varnish (Group 2). Resin infiltration was performed on the same day, while Fluoride CPP-ACP varnish was applied once a week for 4 weeks. The follow-up was done at 3, 6 months, and 12 months. Results: At 3, 6, and 12 months change in mean ICDAS II Score in group 1 was 1.5±0.5,1.13±0.73 and 0.9±0.88, respectively, while in group 2, it was observed to be 0.30±0.59, 0.4±0.89 and 0.06±0.82, respectively (p<0.001). Conclusion: Resin infiltration was more successful than Fluoride CCP-ACP varnish in active non-cavitated white spot lesions (AU).

Placas oclusais termoplásticas para o tratamento da dor muscular mastigatória: um ensaio clínico / Thermoformed occlusal splints for the treatment of masticatory muscle pain: a clinical trial

Objective: Compare the clinical effectiveness of custom thermoformed occlusal splints (OS) alongside behavioral and self-care therapy (BST) in the management of myalgia of the masticatory muscles. Material and methods:A controlled clinical trial was conducted with a total of 46 subjects with a diagnosis of myalgia according to the Diagnostic Criteria for Temporomandibular Disorders (DC/TMD). All subjects were treated with BST at the beginning of the study and were then randomized into four groups: behavioral and self-care control group; Thermoformed Tough-elastic splint group; Thermoformed Soft-elastic splint group, and non-occlusive splint group. Follow-ups were carried out at 2, 6, and 10 weeks, where it was evaluated: pain in the masticatory muscles, mandibular range of motion, mandibular functional limitation, and occlusal discomfort. Data were analyzed with Doornik and Hansen, Shapiro­Wilk, and ANOVA at p=0.05. Results: All the variables showed significant improvement (p<0.05) from the first follow-up and were maintained later. BST control group, as well as groups with BST associated with OS, were able to reduce pain and increase the mandibular range of motion without significant differences between them (p>0.05), while the Thermoformed Tough-elastic splint was the most efficient in terms of the mandibular functional limitation. The occlusal discomfort decreased over time, but without statistically significant differences in terms of time and design of OS. Conclusion: The addition of thermoformed OS to behavioral and self-care therapy does not have a significant impact on myalgia of the masticatory muscles. (AU)

Objetivo: Comparar a eficácia clínica das Placas Oclusais (PO) termoplásticas personalizadas associadas à Terapia Cognitiva Comportamental (TCC) na condução da mialgia dos músculos mastigatórios. Material e Métodos: Foi realizado um ensaio clínico controlado randomizado com um total de 46 participantes com um diagnóstico de mialgia de acordo com os Critérios de Diagnóstico das Desordens Temporomandibulares (DC/TMD). Todos os participantes foram tratados com a TCC, no início do estudo, e foram, depois, randomizados em quatro grupos: grupo controle Terapia Congnitivo Comportamental; grupo de placa termoplástica dura-soft, grupo de placa termoplástica soft, e grupo de placa sem cobertura oclusal. Foram realizados controles com 2, 6, e 10 semanas, onde foi avaliado: dor nos músculos mastigatórios, amplitude de movimento mandibular, limitação funcional mandibular, e desconforto oclusal. Os dados foram analisados com Doornik e Hansen, Shapiro-Wilk, e ANOVA a p=0,05. Resultados: Todas as variáveis mostraram melhora significativa (p<0,05) desde o primeiro controle e se mantiveram posteriormente. O grupo de controlo da TCC, bem como os grupos com TCC associada a PO, foram capazes de reduzir a dor e aumentar a amplitude de movimento mandibular sem diferenças significativas entre eles (p>0,05), enquanto que, a placa termoplástica dura-soft, foi a mais eficiente em termos da limitação mandibular funcional. O desconforto oclusal diminuiu ao longo do tempo, mas, sem diferenças estatisticamente significativas em termos de tempo e design da PO. Conclusão: A inclusão da Terapia Cognitivo Comportamental à PO termoplástica não tem um impacto significativo na mialgia dos músculos mastigatórios.(AU)

Desenvolvimento de formulações probióticas de isolados clínicos de Lactobacillus spp. para controle de Candida albicans / Development of probiotic formulations of clinical isolates of Lactobacillus spp. for the control of Candida albicans

O uso de probióticos tem sido considerado uma alternativa para o controle das candidoses bucais, como a estomatite protética. Recentemente, nosso grupo de pesquisa isolou cepas clínicas bucais de Lactobacillus rhamnosus (5.2) e Lactobacillus fermentum (20.4) com atividade antifúngica contra Candida albicans. Entretanto, é necessário o desenvolvimento de formulações para uso clínico dessas cepas probióticas na cavidade bucal. Assim, o objetivo desse projeto foi desenvolver formulações probióticas em hidrogel gellan gum com atividade antifúngica que possam ser usadas no controle da estomatite protética. Para o preparo das formulações probióticas, as cepas L. rhamnosus 5.2 ou L. fermentum 20.4 foram incorporadas em formulações com diferentes concentrações de gellan gum (0,6 a 1%). A viabilidade das células de Lactobacillus nas formulações e o sistema de liberação foram testados em diferentes condições de armazenamento, incluindo tempo e temperaturas de estocagem. A seguir, os efeitos das formulações probióticas foram avaliados sobre C. albicans pelo método de difusão em ágar e sobre biofilmes microcosmos por contagem de células viáveis e análise de microscopia eletrônica de varredura. Os resultados demonstraram que todas as concentrações do gellan foram capazes de manter a viabilidade das células de L. rhamnosus e L. fermentum em torno de 5 a 7 log, durante 14 semanas, independentemente da temperatura de armazenamento (4°C ou temperatura ambiente). No teste de difusão em ágar, verificou-se que as formulações probióticas levaram à inibição de cepas padrão e clínicas de C. albicans, demonstrando que as cepas de Lactobacillus incorporadas no gellan mantiveram sua atividade antifúngica. As formulações probióticas também conseguiram inibir os biofilmes microcosmos provenientes de pacientes com estomatite protética, reduzindo o número de células viáveis de Candida e desestruturando a arquitetura dos biofilmes. Concluiu-se que o gellan gum mostrou ser um biomaterial promissor como carreador das cepas probióticas de L. rhamnosus 5.2 e L. fermentum 20.4. Além disso, as formulações probióticas desenvolvidas apresentaram ação antifúngica sobre células de C. albicans e biofilmes de estomatite protética, podendo desta forma atuar na prevenção da candidose bucal. (AU)

The use of probiotics has been considered an alternative for the control of oral candidiasis such as denture stomatitis. Recently, our research group isolated oral clinical strains of Lactobacillus rhamnosus (5.2) and Lactobacillus fermentum (20.4) with antifungal activity against Candida albicans. However, it is necessary to develop formulations for clinical use of these probiotic strains in the oral cavity. Thus, the purpose of this project was to develop probiotic formulations in gellan gum hydrogel with antifungal activity that could be used in the control of denture stomatitis. For the preparation of probiotic formulations, the strains L. rhamnosus 5.2 or L. fermentum 20.4 were incorporated into formulations with different concentrations of gellan gum (0.6 to 1%). The viability of Lactobacillus cells in the formulations and the delivery system were tested under different storage conditions, including storage time and temperatures. Next, the effects of the probiotic formulations were evaluated on C. albicans by the agar diffusion method and on microcosm biofilms by viable cell count and scanning electron microscopy analysis. The results showed that all concentrations of gellan were able to maintain the viability of L. rhamnosus and L. fermentum cells around 5 to 7 log for 14 weeks, regardless of storage temperature (4°C or room temperature). In the agar diffusion test, it was found that the probiotic formulations led to the inhibition of standard and clinical strains of C. albicans, demonstrating that the Lactobacillus strains incorporated into gellan maintained their antifungal activity. Probiotic formulations were also able to inhibit microcosm biofilms from patients with denture stomatitis, reducing the number of viable Candida cells and disrupting the architecture of biofilms. As a conclusion, the gellan gum proved to be a promising biomaterial as a carrier of the probiotic strains of L. rhamnosus 5.2 and L. fermentum 20.4. In addition, the probiotic formulations developed showed antifungal action on C. albicans cells and denture stomatitis biofilms, thus being able to act in the prevention of oral candidiasis. (AU)

Impact of parental care on oral health of children with Intellectual Disabilities from zero to six years of age / Impacto dos cuidados parentais na saúde bucal de crianças com Deficiência Intelectual de zero a seis anos de idade

Introduction: the birth of a child with an intellectual disability requires the definition of the parents' roles in relation to the care of the child. Objective: evaluate how much parental care practices, sociodemographic and behavioral characteristics and family knowledge can have an impact on the oral health of children with intellectual disabilities in the age group from zero to six years of age. Material and method: the level of help given to the child in the practice of oral hygiene was evaluated according to the adapted functional independence scale. The Parental Beliefs and Care Practices Scale assessed primary care and stimulation offered to the child. The presence of dental plaque and the decay-missing-filled teeth (DMFT) index were analyzed. The significance level was 5%. Result: the relative percentage of dental plaque was 11.4%. The DMFT was 2. The prevalence of teeth with indicated extraction is higher in children who receive full assistance for cleaning, when compared to those who receive maximum, moderate help or supervision. Higher levels of dental plaque and decayed teeth were found in children whose parents rated their dental health as poor, hygiene as deficient, and when they believed their children might feel discomfort due to their oral health. Low stimulation frequency resulted in a higher plaque index and number of decayed teeth. Conclusion: the frequency of parental care stimulation influenced the percentage of plaque index and the number of decayed teeth in children with intellectual disabilities.

Introdução: o nascimento de uma criança com deficiência intelectual exige dos pais a definição de suas funções em relação aos cuidados com a criança. Objetivo: investigar o quanto as práticas de cuidados parentais, características sociodemográficas, comportamentais e o conhecimento familiar podem ter impacto na saúde bucal de crianças com deficiência intelectual na faixa etária de zero a seis anos de idade. Material e método: foi avaliado o nível de ajuda cedida à criança na prática de higiene bucal de acordo com a escala de independência funcional adaptada. A Escala de Crenças Parentais e Práticas de Cuidado avaliou os cuidados primários e a estimulação oferecida à criança. Foram analisados a presença de placa dentária e o índice ceo-d. O nível de significância foi de 5%. Resultado: a porcentagem relativa de placa dentária foi de 11,4%. O índice ceo-d foi de 2. A prevalência de dentes com extração indicada é maior em crianças que recebem ajuda total para higienização, quando comparadas as que recebem ajuda máxima, moderada ou supervisão. Níveis mais elevados de placa dentária e dentes cariados foram encontrados nas crianças cujos pais avaliaram a saúde dental como ruim, a higiene como deficiente e quando acreditavam que os filhos podem sentir desconforto em razão de seu estado de saúde bucal. Baixa frequência de estimulação resultou em maior índice de placa e número de dentes cariados. Conclusão: a frequência de estimulação dos cuidados parentais influenciou na porcentagem do índice de placa e no número de dentes cariados nas crianças com deficiência intelectual.

Coronectomia em terceiro molar superior: relato de caso / Maxillary third upper molar coronectomy: case report

Introdução: A extração de terceiros molares é um dos procedimentos mais realizados em cirurgias orais. As indicações para esse procedimento estão ligadas à doença cárie, doença periodontal, pericoronite, entre outras. Objetivo: O objetivo deste artigo é apresentar um relato de caso e discussão com a técnica aplicada a um terceiro molar superior com risco de comunicação oroantral, demonstrando os benefícios deste procedimento. Relato de Caso: Paciente sexo masculino, 49 anos, ausência de comorbidades, encaminhado para remoção de terceiro molar superior por dificuldade de higienização e acúmulo de placa bacteriana, ao exame tomográfico, apresentou proximidades das raízes com o seio maxilar, onde foi optado pela contra indicação de extração devido a grande chance de comunicação oroantral e sugerido coronectomia para resolução do caso. Conclusão: A coronectomia é uma técnica bastante difundida nos casos em que o terceiro molar está intimamente relacionado ao nervo alveolar inferior, com chances de parestesia. Não há relatos na literatura dessa técnica aplicada ao terceiro molar superior... (AU)

Introduction: Extraction of third molars is one of the most commonly performed procedures in oral surgeries. The indications for this procedure are linked to caries disease, periodontal disease, pericoronitis, among others. Case Report: Male patient, 49 years old, absent from comorbidities, referred for removal of the upper third molar due to difficulty in cleaning and bacterial plaque accumulation, on tomographic examination, proximity of the roots to the maxillary sinus, where it was opted for the contraindication of extraction due to great chance of oroantral communication and suggested coronectomy to resolve the case. Objective: The purpose of this article is to present a case report and discussion with the technique applied to a maxillary third molar at risk of oroantral communication, demonstrating the benefits of this procedure. Conclusion: Coronectomy is a widespread technique in cases where the third molar is closely related to the lower alveolar nerve, with chances of paresthesia. There are no reports in the literature of this technique applied to the upper third molar... (AU)

Condição de saúde bucal de pacientes oncológicos / Oral health condition for oncological patients

Este estudo teve como objetivo avaliar a condição de saúde bucal de pacientes em terapia oncológica. Trata-se de um estudo observacional transversal realizado no Centro OncoHematologico de Pernambuco (CEONHPE), vinculado ao Hospital Universitário Oswaldo Cruz (HUOC), da Universidade de Pernambuco (UPE). Foram incluídos no estudo pacientes com idade entre 1 e 19 anos, de ambos os sexos, totalizando uma amostra de 177 pacientes, dentre os quais 25 realizaram o índice de placa, 111 submeteram-se ao índice de Dentes Cariados, Perdidos e Obturados (CPOD) e 129 ao índice de Dentes Decíduos Cariados, Com Extração Indicada e Obturados (ceo-d). Foi realizada coleta de dados secundários obtidos nas fichas clínicas dos pacientes que estiveram em atendimento no ano de 2018. Através da análise estatística descritiva foram consideradas as variáveis: condição de saúde bucal, idade, gênero, diagnóstico oncológico e fase atual do tratamento. Com relação às condições de saúde bucal foram avaliadas: condições de higiene oral (índice de placa de O´Leary); cárie (CPO-D e ceo-d). Verificou-se que houve predominância do índice CPO-D e ceo-d em zero e o índice de placa foi considerado insatisfatório na maioria dos pacientes. Portanto, apesar de baixo índice de cárie, foi constatado elevado índice de placa bacteriana...(AU)

This study aimed to assess the oral health condition of patients undergoing cancer therapy. This is a cross-sectional observational study carried out at the Centro OncoHematologico de Pernambuco (CEON-HPE), linked to the Hospital Universitário Oswaldo Cruz (HUOC), of the University of Pernambuco (UPE). The study included patients aged between 1 and 19 years old, of both sexes, totaling a sample of 177 patients, among whom 25 underwent the plaque index, 111 underwent the Decayed, Lost and Filled Teeth Index (CPOD) and 129 to the Decayed Deciduous Teeth Index, with Extraction Indicated and Filled (ceo-d). Secondary data were collected from the clinical records of patients who were in care in 2018. Through the descriptive statistical analysis, the variables were considered: oral health condition, age, gender, cancer diagnosis and current treatment stage. Regarding oral health conditions, the following were evaluated: oral hygiene conditions (O´Leary plaque index); caries (CPOD e ceo-d). It was found that there was a pre dominance of the CPOD index and ceo-d at zero and the plaque index was considered unsatisfactory in most patients. Therefore, despite a low rate of caries, a high rate of plaque was found... (AU)