Plasma catecholamines levels in oral and oropharyngeal cancer patients and their associations with clinicopathological variables and anxiety symptoms / Níveis plasmáticos de catecolaminas em pacientes com câncer de boca e orofaringe e sua correlação com as variáveis clinicopatológicas e sintomas de ansiedade

Objetivos: As catecolaminas podem regular diversos efeitos biológicos resultantes do estresse crônico. Estudos demonstram que as catecolaminas podem influenciar a progressão do câncer. No entanto, pouco se sabe sobre o perfil de secreção das catecolaminas em pacientes com câncer de cabeça e pescoço (CCP) e sua associação com as variáveis clinicopatológicas e psicológicas. O presente estudo investigou os níveis plasmáticos pré-tratamento das catecolaminas norepinefrina (NE) e epinefrina (E) em pacientes com câncer de boca e orofaringe e em pacientes com leucoplasia bucal, bem como sua associação com as variáveis clinicopatológicas, biocomportamentais e os sintomas de ansiedade. Pacientes e métodos: Um total de 71 pacientes com carcinoma espinocelular (CEC) de boca, 22 pacientes com CEC de orofaringe e 32 portadores de leucoplasia bucal foram submetidos à coleta de amostras de sangue. Os níveis plasmáticos das catecolaminas NE e E foram mensurados por meio de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência com detecção eletroquímica (CLAE-ED) e os níveis psicológicos de ansiedade foram mensurados pelo Inventário de Ansiedade de Beck (IAB). As diferenças nos níveis hormonais entre os grupos foram avaliadas pelo teste ANOVA e análises univariadas e regressões múltiplas foram realizadas para avaliar as associações dos níveis hormonais com as variáveis clinicopatológicas, biocomportamentais e psicológicas. Resultados: As concentrações plasmáticas de NE e E foram significativamente maiores nos pacientes com câncer de boca e orofaringe em relação aos pacientes com leucoplasia bucal (p<0,05). Pacientes com CEC de boca mostraram níveis de NE (462.03±47.53 pg/mL) cerca de 6 vezes mais elevados do que os pacientes com CEC de orofaringe (74.46±12.52 pg/mL) e 9 vezes maior em relação aos pacientes com leucoplasia (51.69±6.28 pg/mL). Os níveis plasmáticos de NE e E foram correlacionados positivamente nos pacientes com CEC de boca (p=0,0011), mas não nos outros dois. A análise de regressão múltipla mostrou que no grupo de pacientes com CEC de boca e no grupo composto por pacientes com CEC de boca e orofaringe juntos (grupo câncer de cabeça e pescoço - CPP), o histórico de maior consumo de álcool foi preditivo para níveis reduzidos de NE plasmática (CCP: ß=-171,7, p=0,0002; CEC de boca: ß=-119,2, p=0,0296). Os níveis globais de ansiedade medidos pelo IAB não foram significativamente correlacionados com os níveis de catecolaminas nos pacientes com câncer (p>0,05). Entretanto, os sintomas de ansiedade "tremor das mãos" (ß=157,5; p=0,0377) e "coração acelerado" (ß=15,88; p=0,0441), foram significativamente associados com níveis elevados de E no grupo de CCP e no grupo de CEC de orofaringe, respectivamente. A privação de sono e a má qualidade do sono na noite anterior à coleta de sangue foram variáveis preditivas para níveis elevados de NE em pacientes com leucoplasia bucal. O consumo excessivo de cigarro (ß=1,54; p=0,0051) e níveis elevados de ansiedade (ß=7,16; p=0,0003) foram preditores independentes para maiores níveis plasmáticos de E nos pacientes com leucoplasia bucal. Conclusão: Os pacientes com câncer de boca e orofaringe apresentam uma modulação na secreção plasmática de NE e E. Além disso, os níveis de catecolaminas nos pacientes com câncer de cabeça e pescoço e nos pacientes com leucoplasia podem ser influenciados por fatores biocomportamentais e psicológicos(AU)

Background: Catecholamines may regulate several biological effects resulting from chronic stress. Studies have shown that stress-related catecholamines may affect cancer progression. However, little is known about catecholamines secretion profile in head and neck cancer squamous cell carcinoma (HNSCC) patients and its association with clinicopathological and psychological variables. The present study investigated the pre-treatment plasma levels of catecholamines norepinephrine (NE) and epinephrine (E) in patients with oral and oropharyngeal SCC and patients with oral leukoplakia, as well as their associations with clinicopathological and biobehavior variables and anxiety symptoms. Patients and methods: A total of 71 patients with oral SCC, 22 patients with oropharyngeal SCC and 32 patients with oral leukoplakia were submitted to blood samples. Plasma levels of NE and E were measured by High Performance Liquid Chromatography with electrochemical detection (HPLC-ED) and psychological anxiety levels were measured by the Beck Anxiety Inventory (BAI). Differences in hormone levels among the groups were analyzed by ANOVA test. Univariate and multiple regression analyzes were performed to evaluate the associations of hormonal levels with clinicopathological, biobehavior and psychological variables. Results: Plasma NE and E concentrations were significantly higher in patients with oral and oropharyngeal cancer than oral leukoplakia patients (p<0.05). Oral SCC patients showed NE levels (462.03±47.53 pg/mL) about six times and nine times higher than patients with oropharyngeal SCC (74.46±12.52 pg/mL) and oral leukoplakia (51.69±6.28 pg/mL), respectively. Plasma NE and E levels were positively correlated in patients with oral SCC (p=0.0011), but not in the oropharyngeal SCC and oral leukoplakia groups. Multiple regression analyses showed that in oral SCC group single and joined with oropharyngeal SCC patients (HNSCC group), the history of high alcohol consumption was predictive for reduced plasma NE levels (oral SCC: ß=-119.2, p=0.0296; HNSCC: ß=-171.7, p=0.0002). In the cancer groups, the overall anxiety score measured by BAI was not significantly correlated to catecholamines levels (p>0.05). However, anxiety symptoms measures with BAI such as "hands trembling" (ß=157.5, p=0.0377) and "heart pouding/rancing" (ß=15.88, p=0.0441) were significantly associated with higher plasma E levels in HNSCC and oropharyngeal SCC groups, respectively. Sleep deprivation and worse sleep quality in the previous night of blood collection were predictive variables for elevated NE levels in oral leukoplakia. In this patient group, severe tobacco consumption (ß=1.54, p=0.0051) and higher anxiety levels (ß=7.16, p=0.0003) were independent predictors for higher plasma E levels. Conclusion: Oral and oropharyngeal cancer patients display a modulation of plasma NE and E secretion. Furthermore, systemic catecholamines levels in patients with head and neck cancer and potentially malignant disorders may be influenced by biobehavior and psychological factors(AU)

Níveis dos hormônios do estresse no microambiente: influência sobre a ocorrência do tumor e modulação durante a carcinogênese quimicamente induzida em ratos / Stress hormones levels in the microenvironment: influence on tumor occurrence and modulation during chemically induced carcinogenesis in mice

Evidências mostram que os hormônios relacionados ao estresse podem influenciar a progressão do câncer, mas o papel destes mediadores sobre o processo de carcinogênese no microambiente tecidual, em condições naturais, é pouco compreendido. Neste estudo, nós utilizamos um modelo de carcinogênese bucal em ratos para testar a hipótese de que os níveis de hormônios relacionados ao estresse no microambiente tecidual em condições naturais (sem estresse) pré-indução carcinogênica influenciam a ocorrência e progressão do carcinoma espinocelular (CEC) de língua. Quarenta e oito ratos machos Wistar foram submetidos a uma biópsia de tecido lingual normal previamente à indução carcinogênica e os níveis teciduais de norepinefrina, corticosterona, ACTH e BDNF foram mensurados. Três semanas depois os animais foram tratados com o carcinógeno químico 4-nitroquinolina-1-óxido (4NQO) por 20 semanas e a ocorrência de CEC ou Leucoplasia (lesão precursora do CEC) na língua foi analisada microscopicamente. Níveis basais aumentados pré-carcinogênese de norepinefrina e BDNF e níveis reduzidos de corticosterona foram preditivos para ocorrência de CEC. Níveis basais elevados de norepinefrina foram associados à uma expressão reduzida de RNAm para CDKN2a-p16 nos CECs. Níveis teciduais de corticosterona e BDNF nas leucoplasias e corticosterona no CEC foram significativamente mais elevados em relação a mucosa normal pré-carcinogênese. Níveis elevados de norepinefrina no microambiente dos CECs foram associados a um maior volume e espessura do tumor. Da mesma forma, níveis elevados de norepinefrina, ACTH e BDNF no CEC foram associados a uma menor intensidade do infiltrado linfoplasmocitário subjacente ao tumor. Além disso, maior expressão de RNAm para IL6 no CEC foi correlacionada à níveis elevados de corticosterona pós-carcinogênese. Este estudo mostra as primeiras evidências in vivo de que os níveis basais de hormônios do estresse no microambiente do tecido normal podem ser preditivos para a incidência do câncer quimicamente induzido. Além disso, a ação do carcinógeno pode modular os níveis hormonais no microambiente tecidual e estes podem estar associados à progressão do tumor. Em suma, estes dados sugerem que a susceptibilidade ao início e progressão do carcinoma quimicamente induzido pode ser diretamente influenciada por diferenças individuais endócrinas no microambiente pré-carcinogênese(AU)

Evidence show that stress-related hormones may influence cancer progression, but their role in tissue microenvironment on the carcinogenesis is poorly understood. In this study, we have used an oral carcinogenesis model in rats to test the hypothesis that stressrelated hormones levels in the tissue microenvironment in natural conditions precarcinogenic induction could influence the oral squamous cell carcinoma (OSCC) occurrence and progression. Forty-eight male Wistar rats were underwent to a normal tongue tissue biopsy before carcinogenic induction and tissue levels of norepinephrine, corticosterone, ACTH and BDNF were measured. Three weeks later the animals were treated with chemical carcinogen 4-nitroquinoline-1-oxide (4NQO) for 20 weeks and the OSCC or oral leukoplakia (non-cancerous lesions) occurrence into tongue was evaluated. Increased concentrations of norepinephrine and BDNF, and reduced corticosterone levels in the pre-carcinogen microenvironment were predictive for OSCC occurrence. Increased pre-carcinogen norepinephrine concentrations were associated to a CDKN2a-p16 mRNA lower expression in OSCCs. Tissue levels of corticosterone and BDNF in oral leukoplakia and corticosterone in OSCC were significantly higher than pre-carcinogenesis normal mucosa. Increased norepinephrine concentrations in OSCC microenvironment were associated to a higher tumor volume and thickness. Likewise, increased levels of norepinephrine, ACTH and BDNF in OSCC were associated to a lesser intensity of the lymphoplasmocytic infiltrate underlying to tumor. Furthermore, IL6 mRNA enhanced expression was correlated to increased corticosterone levels postcarcinogenesis. This study shows the first in vivo evidence that pre-carcinogen stress hormones levels in the microenvironment of the normal tissue may be predictive for chemically induced cancer occurrence. Moreover, the carcinogen action can modulate hormonal levels in the tissue microenvironment, which can be associated to tumor progression. In short, these data suggest that the susceptibility to onset and progression of chemically induced carcinomas may be directly influenced by endocrine individual differences in pre-carcinogenesis microenvironment(AU)

Atividade dos neurônios do núcleo anterovental periventricular e sua participação no envelhecimento reprodutivo de ratas / Activity of anteroventral periventricular nucleus neurons in reproductive aging of female rats

Alterações do eixo hipotálamo-hipófise-gônadas em fêmeas determinam a transição de ciclos reprodutivos regulares para irregulares, com perda da fertilidade. Interação dos neurônios GnRH e esteróides gonadais está interligado pelas alças de retroalimentação e alterações nesse mecanismo estão relacionados com a senescência reprodutiva. Estímulos da noradrenalina (NA) e neurônios da área pré-óptica (APO) são essenciais para liberação das gonadotrofinas, pois neurônios GnRH expressam receptores para estrógeno β e progesterona. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade das células neuronais da APO no período de transição para a estropausa em ratas Wistar. Ratas Wistar cíclicas (4-5 meses) no dia do estro e acíclicas (17-18 meses) em constante estro (CE) foram perfundidas ou decapitadas às 10, 14 e 18 horas. Encéfalos perfundidos foram processados por imunohistoquímica para avaliação da imunorreatividade para antígenos relacionados ao Fos da APO. Após a decapitação, o encéfalo foi retirado e realizado microdissecção da APO e determinação do conteúdo de NA e seu metabolito; o plasma foi utilizado para dosagens de LH, FSH, E2 e P4. Os resultados obtidos evidenciaram secreção plasmática maior de LH e menor de FSH e E2 no grupo de ratas acíclicas. O número de neurônios FRA-IR foi maior em ratas acíclicas, nos horários das 10 (p<0,001) e das 18 (p<0,05) em relação ao grupo de animais com ciclo regular. Nas ratas acíclicas, o conteúdo armazenado de NA foi menor às 14h e 18h (p<0,001) e o metabólito foi constante e maior às 18h, comparada com o mesmo horário das ratas do grupo cíclica (p<0,05). Conclui-se que alterações neurais e ovarianas que ocorrem no CE determinam o declínio para a ocorrência da ciclicidade dos ciclos e caracterizam o período de periestropausa

Changes of the hypothalamic-pituitary-gonadal axis in females determine the transition from regular to irregular reproductive cycles, with a loss of fertility. Interaction of GnRH neurons and gonadal steroid is connected by feedback and changes in this mechanism are related to reproductive senescence. Noradrenaline (NE) stimulation and preoptic area (POA) neurons are essential for release of gonadotropins, as GnRH neurons express receptors for estrogen β and progesterone. The objective of this study was to evaluate the activity of neurons in POA nuclei, in transition period for estropause in Wistar rats. Cyclic Wistar rats (4-5 months) on the day of estrus and acyclic (17-18 months) in estrus constant (CE) were decapitated or perfused at 10, 14 and 18 hours. Perfused brains were processed for immunohistochemistry to evaluate the immunoreactivity to antigens related to the Fos in POA. After decapitation, the brain was removed and carried microdissection of POA and determining the content of NE and its metabolite; Plasma was used for measurements of LH, FSH, E2 and P4. The results showed higher plasma secretion of LH, FSH and E2 lower in the group of acyclic rats. The number of FRA-IR neurons was higher in acyclic rats in the 10 hours (p <0.001) and 18 (p <0.05) compared to the group of animals with regular cycle. In rats acyclic, the stored contents of NE was lower at 14h and 18h (p <0.001), and the metabolite was constant and greater at 18h compared to the same time of the rats of the cyclic group (p <0.05). It follows that neural and ovarian changes that occur in the CE decline to determine the occurrence of cyclicity of cycles and featuring periestropausa period

Migração e invasão do câncer de boca via ativação de receptor beta 2 adrenérgico por mediador do estresse / Cell migration and invasion of oral cancer via activation of beta 2 adrenergic receptor by stress mediator

A ativação do receptor beta 2 adrenérgico (β2-AR), pelos mediadores químicos do estresse, pode induzir efeitos estimuladores ou inibidores na migração e invasão celular, dependendo do tipo de tumor maligno. A importância deste receptor na evolução do câncer de boca não está totalmente esclarecida. O objetivo deste estudo foi verificar a expressão do β2-AR em linhagens de carcinomas espinocelular de boca (SCC-9 e SCC-25), e investigar o papel da ativação deste receptor pela norepinefrina e de seu bloqueio por um antagonista na migração e invasão destas células neoplásicas. As células SCC-9 e SCC-25 foram investigadas quanto à expressão gênica e proteica do β2-AR, respectivamente, pelo RT-qPCR e pelo Western blot. A migração e a invasão celular foram analisadas pelo ensaio de cicatrização de feridas e pelo sistema de câmeras de invasão Transwell, respectivamente. Diferentes concentrações (0,1; 1 e 10μM) de norepinefrina foram utilizadas para estimular e 1μM de propranolol foi empregado para bloquear os receptores beta adrenérgicos nas células neoplásicas. As diferenças das médias obtidas nos experimentos de invasão e migração de SCC-9 e SCC-25 e da expressão proteica do β2-AR, foram comparadas pelo teste t de Student com nível de significância de 5%. Os resultados mostraram que a expressão gênica e proteica do β2-AR foi verificada em ambas as linhagens de câncer de boca. A concentração de 10μM de norepinefrina inibiu, significativamente (p≤0,05), a migração e invasão celular de SCC-9 e SCC-25, sendo este efeito mais acentuado nas células SCC-25. Além disso, houve uma redução significativa (p≤0,05) do efeito da norepinefrina na migração celular quando os β2-AR foram inibidos pelo propranolol. Adicionalmente, o bloqueio dos β-ARs pelo propranolol reverteu parcialmente o efeito da norepinefrina na capacidade invasiva de SCC-9 e SCC-25. Estes resultados comprovam que a norepinefrina, via ativação do β2-AR, reduziu a migração e a invasão das...

The activation of beta 2 adrenergic receptor (β2-AR), by chemical mediators of stress, can induce stimulatory or inhibitory effects on cell migration and invasion, depending on the type of malignancy. The importance of this receptor in the oral cancer outcome is not fully understood. The aim of this study was to verify β2- AR expression in oral squamous cell carcinoma cell lines (SCC-9 and SCC-25), and to investigate the role of activation of this receptor by norepinephrine and its blockade by an antagonist in migration and invasion of these neoplastic cells. SCC-9 and SCC-25 cells were investigated for gene and protein expression of β2-AR, respectively, by RT-qPCR and Western blot. The cell migration and invasion were analyzed by wound healing assay and Transwell invasion camera system, respectively. Different concentrations (0.1, 1 and 10μM) of norepinephrine were used to stimulate and 1μM propranolol was used to block the beta adrenergic receptors on cancer cells. Differences in mean values of the invasion and migration assays of SCC-9 and SCC-25 and β2-AR protein expression were compared by the Student t test with 5% significance level. The results showed that β2-AR gene and protein expression was verified in both oral cancer cell lines. The concentration of 10μM of norepinephrine inhibited significantly (p≤0.05), cell migration and invasion of SCC-9 and SCC-25, being the most pronounced effect in SCC-25 cells. Furthermore, there was a significant reduction (p≤0.05) of norepinephrine effect on cell migration when the β2-AR was inhibited by propranolol. In addition, blockade of β-ARs by propranolol partially reversed the effect of norepinephrine on the invasiveness of SCC-9 and SCC-25. These results show that norepinephrine via β2-AR activation, reduced the migration and invasion of oral squamous cell carcinoma cells and, therefore, the use of beta-adrenergic receptors agonists could become an adjuvant therapeutic target in the treatment of this malignancy.

Atividade dos neurônios do núcleo anterovental periventricular e sua participação no envelhecimento reprodutivo de ratas / Activity of anteroventral periventricular nucleus neurons in reproductive aging of female rats

Alterações do eixo hipotálamo-hipófise-gônadas em fêmeas determinam a transição de ciclos reprodutivos regulares para irregulares, com perda da fertilidade. Interação dos neurônios GnRH e esteróides gonadais está interligado pelas alças de retroalimentação e alterações nesse mecanismo estão relacionados com a senescência reprodutiva. Estímulos da noradrenalina (NA) e neurônios da área pré-óptica (APO) são essenciais para liberação das gonadotrofinas, pois neurônios GnRH expressam receptores para estrógeno β e progesterona. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade das células neuronais da APO no período de transição para a estropausa em ratas Wistar. Ratas Wistar cíclicas (4-5 meses) no dia do estro e acíclicas (17-18 meses) em constante estro (CE) foram perfundidas ou decapitadas às 10, 14 e 18 horas. Encéfalos perfundidos foram processados por imunohistoquímica para avaliação da imunorreatividade para antígenos relacionados ao Fos da APO. Após a decapitação, o encéfalo foi retirado e realizado microdissecção da APO e determinação do conteúdo de NA e seu metabolito; o plasma foi utilizado para dosagens de LH, FSH, E2 e P4. Os resultados obtidos evidenciaram secreção plasmática maior de LH e menor de FSH e E2 no grupo de ratas acíclicas. O número de neurônios FRA-IR foi maior em ratas acíclicas, nos horários das 10 (p<0,001) e das 18 (p<0,05) em relação ao grupo de animais com ciclo regular. Nas ratas acíclicas, o conteúdo armazenado de NA foi menor às 14h e 18h (p<0,001) e o metabólito foi constante e maior às 18h, comparada com o mesmo horário das ratas do grupo cíclica (p<0,05). Conclui-se que alterações neurais e ovarianas que ocorrem no CE determinam o declínio para a ocorrência da ciclicidade dos ciclos e caracterizam o período de periestropausa.

Changes of the hypothalamic-pituitary-gonadal axis in females determine the transition from regular to irregular reproductive cycles, with a loss of fertility. Interaction of GnRH neurons and gonadal steroid is connected by feedback and changes in this mechanism are related to reproductive senescence. Noradrenaline (NE) stimulation and preoptic area (POA) neurons are essential for release of gonadotropins, as GnRH neurons express receptors for estrogen β and progesterone. The objective of this study was to evaluate the activity of neurons in POA nuclei, in transition period for estropause in Wistar rats. Cyclic Wistar rats (4-5 months) on the day of estrus and acyclic (17-18 months) in estrus constant (CE) were decapitated or perfused at 10, 14 and 18 hours. Perfused brains were processed for immunohistochemistry to evaluate the immunoreactivity to antigens related to the Fos in POA. After decapitation, the brain was removed and carried microdissection of POA and determining the content of NE and its metabolite; Plasma was used for measurements of LH, FSH, E2 and P4. The results showed higher plasma secretion of LH, FSH and E2 lower in the group of acyclic rats. The number of FRA-IR neurons was higher in acyclic rats in the 10 hours (p <0.001) and 18 (p <0.05) compared to the group of animals with regular cycle. In rats acyclic, the stored contents of NE was lower at 14h and 18h (p <0.001), and the metabolite was constant and greater at 18h compared to the same time of the rats of the cyclic group (p <0.05). It follows that neural and ovarian changes that occur in the CE decline to determine the occurrence of cyclicity of cycles and featuring periestropausa period.

Atividade dos neurônios noradrenérgicos do Locus coeruleus e o conteúdo de GnRH em ratas wistar acíclicas / Activity of the Locus Coeruleus noradrenergic neurons and the GnRH content in female acyclic rats

As alterações nos componentes reprodutivos do eixo hipotálamo-hipófise-gônadas em muitas fêmeas de mamíferos determinam a transição gradual de ciclos reprodutivos regulares para ciclos irregulares, com perda de fertilidade. A interação dos neurônios do hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH) e esteróides gonadais representa função chave na neurobiologia do envelhecimento, pois a sobreposição temporal da senescência endócrina e neural está mecanicamente interligada pelas alças de retroalimentação. Estímulos do locus coeruleus (LC) para a área pré-óptica (APO) e eminência mediana são essenciais para a liberação das gonadotrofinas e seus neurônios apresentam receptores para estrógeno e progesterona, sugerindo controle dos esteróides ovarianos. Neste estudo foi avaliado a atividade de células neuronais localizadas em áreas e núcleos envolvidos com o controle de ação dos neurônios GnRH de ratas Wistar no período de transição para a aciclicidade. Para este trabalho foram utilizadas fêmeas Wistar cíclicas (4 meses) e acíclicas (18-20 meses) submetidas à decapitação ou perfusão às 10, 14 e 18 h na fase do diestro. Após serem retirados, os cérebros dos animais decapitados foram congelados e armazenados para posterior determinação do conteúdo de GnRH hipotalâmico e do conteúdo de noradrenalina e dopamina na APO. Os cérebros perfundidos foram cortados seriadamente em secções coronais de 30 μm para a APO e o LC e posteriormente submetidos à marcação imunohistoquimica para Fos (FRA) e FRA/TH, respectivamente. Para análise quantitativa da APO foram considerados os plates que contêm o AVPe sendo a contagem dos neurônios FRA-ir realizada a partir da inserção de caixa com diâmetro variando em função da altura do 3º ventrículo e para o LC foram considerados somente os neurônios duplamente marcados para FRA/TH. Em todas as análises foram considerados os plates comuns a todos os animais. O plasma dos animais experimentais foi utilizado para as dosagens de LH, FSH, PRL...

Changes in reproductive components of the hypothalamic-pituitary-gonadal axis in many female mammals determine the gradual transition from regular reproductive cycles to irregular cycles, with loss of fertility. The interaction of neurons of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) and gonadal steroids represents key role in the neurobiology of aging, because the temporal overlap of endocrine and neural senescence is mechanically interconnected by feedback loops. Stimulation of the locus coeruleus (LC) for the preoptic area (POA) and median eminence are essential for the release of gonadotropins and their neurons have receptors for estrogen and progesterone, suggesting control of ovarian steroids. Therefore, in this study we evaluated the activity of neuronal cells located in areas and nuclei involved in the control of action of GnRH neurons of female rats during the transition to acyclicity. For this study, we used cyclic female (4 months) and acyclic (18-20 months) rats underwent perfusion or decapitation at 10, 14 and 18 h of diestrus day. The brains from decapitated animals, after removed, were frozen and stored for subsequent determination of the hypothalamic GnRH content and the noradrenaline and dopamine content in the POA. The perfused brains were serially cut into coronal sections of 30 μm to POA and LC and subsequently submitted to immunohistochemical labeling for Fos (FRA) and FRA / TH, respectively. For quantitative analysis of the POA were considered plates containing AVPe being the counting of neurons FRA-ir performed from the insertion of the box with a diameter varying depending on the height of the 3rd ventricle and the LC were considered only neurons doubly labeled for FRA / TH. In all analyzes were considered plates common to all animals. The plasma of the experimental animals was used for the assay of LH, FSH, PRL and gonadal steroids. The GnRH content and LH concentrations of the acyclic rats were smaller and constant at the time intervals...

Modulação da expressão de VEGF-C por mediador relacionado ao estresse em culturas de carcinomas espinocelulares de boca / Modulation of VEGF-C expression by stress related mediator in oral squamous cell carcinoma cell lines

Os mediadores do estresse, epinefrina e norepinefrina, participam da modulação de diversos processos celulares como a proliferação, a migração celular e a apoptose durante a tumorigênese, influenciando assim, o crescimento e a progressão tumoral. A presença de receptores beta-adrenérgicos e sua expressiva resposta ao estímulo do neurohormônio norepinefrina foram identificadas em várias linhagens de células tumorais, incluindo o carcinoma espinocelular de boca. O objetivo deste estudo foi investigar a influência da norepinefrina na expressão do fator de crescimento endotelial vascular do tipo C (VEGF-C) em cultura de células de carcinoma espinocelular de boca que continham receptores beta adrenérgicos. As linhagens celulares (SCC-9 e SCC-25) foram estimuladas com norepinefrina em diferentes concentrações (0,1; 1 e 10 M) e com 1M de propranolol, sendo analisadas após 1, 6 e 24 horas. A expressão gênica e proteica de VEGF-C foram avaliadas, respectivamente, por RT-PCR em tempo real e por ELISA. A produção de RNAm para VEGF-C teve um comportamento irregular, com tendências a variações da expressão gênica (aumento e inibição). A dosagem proteica nos sobrenadantes das culturas de células malignas não refletiu a expressão gênica de VEGF-C. Somente na linhagem SCC-25 ocorreu uma inibição significativa da produção de VEGF-C (p<0,001) pelas células neoplásicas no ensaio de 24 horas após o estímulo com 10M de norepinefrina. Estes resultados sugerem que a expressão de VEGF-C nas linhagens de carcinomas espinocelulares humanos de boca, parece não ser mediado pela norepinefrina, via receptores beta-adrenérgicos.

The mediators of stress, epinephrine and norepinephrine, are involved in modulation of many cellular processes such as proliferation, migration and apoptosis influencing the tumor growth and progression. The presence of beta-adrenergic receptors and their significant response to stimulation of neurohormone norepinephrine has been identified in various tumor cell lines, including oral squamous cell carcinoma. The aim of this study was to investigate the influence of norepinephrine on the expression of vascular endothelial growth factor type C (VEGF-C) in oral squamous carcinomas cell lines that contained beta-adrenergic receptors. Cell lines (SCC-9 and SCC-25) were stimulated with different concentrations of norepinephrine (0.1, 1 and 10 mM) and 1 M of propranolol, and analyzed after 1, 6 and 24 hours. Gene and protein expressions of VEGF-C were evaluated, respectively, by real time PCR and by ELISA. The results showed an irregular behavior of the oral squamous carcinoma cell lines, with trends to increase or to inhibit the VEGF-C gene expression. Dosage protein in supernatant cultures of malignant cells did not reflect the gene expression of VEGF-C. Only in the SCC-25 cell line was detected a significant inhibition of VEGF-C production by neoplastic cells, twenty-four hours after stimulation with 10M norepinephrine (p<0,001). These results suggest that VEGF-C expression in oral squamous carcinomas cell lines seems not to be mediated by norepinephrine through the beta adrenergic receptor pathway.

Influência da solução anestésica na percepção de dor após cirurgia periodontal: um estudo piloto / Infuence of anesthetic solution on pain perception after periodontal surgery: a pilot study

As características farmacológicas de agentes anestésicos locais estão entre os diversos fatores que podem infuenciar a percepção de dor pós-operatória. O objetivo deste estudo piloto foi avaliar a infuência de dois agentes anestésicos na percepção de dor pós-operatória após cirurgia a retalho para raspagem e alisamento radicular (RAR). Neste ensaio clínico randomizado, paralelo, duplo-cego, foram realizadas 12 cirurgias para RAR em pacientes com doença periodontal que apresentassem sinais clínicos de infamação após terapia periodontal básica em pelo menos um sextante. Os pacientes foram aleatoriamente alocados em um dos seguintes grupos: G1- mepivacaína 2% com norepinefrina 1:100.000; G2- lidocaína 2% com epinefrina 1:100.000. A intensidade da dor foi avaliada por meio de escala visual analógica (EVA) e escala numérica de 101 pontos (NRS-101), durante oito horas após a cirurgia. Os resultados demonstraram que a intensidade de dor pós-operatória foi estatisticamente inferior no grupo G2 em determinados períodos após a cirurgia, conforme indicam as respectivas medianas (Md). No período de uma hora: Md G1: 2,5; G2:18; p = 0,01; de duas horas: Md G1:2; G2:28,5; p = 0,009; de três horas: Md G1:6; G2:28; p = 0,01. Desta forma, os dados deste estudo piloto indicam que a utilização de mepivacaína 2% com norepinefrina 1:100.000 promove maior controle da dor no período pós-operatório imediato que a lidocaína 2% com epinefrina 1:100.000, após cirurgia de RAR a retalho.

Pharmacologic characteristics of local anesthetics agents are among several features that may infuence postoperative pain intensity. The aim of this study was to evaluate the infuence of two anesthetic agents on postoperative pain perception after open fap debridement surgeries. For this parallel-group, double-masked, placebo-controlled randomized clinical trial, 12 surgeries for open fap debridement were performed on patients who presented periodontal disease with clinical signs of infammation after nonsurgical treatment on at least one sextant. Patients were allocated in one of the following groups: G1- 2% mepivacaine with 1:100.000 norepinephrine; G2- 2% lidocaine with 1:100.000 epinephrine. Pain intensity was assessed using visual analog scale (VAS) and 101-point numerical rate scale (NRS-101) during the frst 8 hours after surgery. The results demonstrated that postoperative pain intensity was statistically lower in G2 at 1 (Median (Md) G1:2.5; G2:18; p = 0.01), 2 (Md G1:2; G2:28.5; p = 0.009) and 3 (Md G1:6; G2:28; p = 0.01) hours-period after surgery. Therefore, data from this pilot study indicate that 2% mepivacaine with 1:100.000 norepinephrine might promote more pain control at immediate postoperative period than does 2% lidocaine with 1:100.000 epinephrine after open fap debridement surgery.

Evidências da associação entre hormônios do estresse e câncer de boca / Evidence of an association between stress hormones and oral cancer

Introdução: Estudos têm mostrado que o estresse pode influenciar o desenvolvimento e a progressão do câncer. Entretanto, pouco se sabe sobre a interferência de fatores neurohormonais relacionados ao estresse, como o cortisol e a catecolamina norepinefrina (NE), sobre o carcinoma espinocelular (CEC) de boca. Proposição: Neste estudo, nós investigamos se pacientes portadores de CEC de boca apresentam alterações nos níveis matinais de cortisol plasmático e salivar, da quimiocina CXCL12 plasmática e de óxido nítrico (NO) salivar. Além disso, investigamos os efeitos da NE, isoproterenol (um agonista ß-adrenérgico) e cortisol sobre linhagens celulares derivadas de CEC de boca. Pacientes e métodos: Foram avaliados 34 pacientes com CEC de boca, 17 pacientes com CEC de orofaringe, 17 portadores de leucoplasia bucal, 27 indivíduos expostos ao tabagismo e/ou alcoolismo e 25 voluntários saudáveis. Os níveis salivares e plasmáticos de cortisol e os níveis plasmáticos de CXCL12 foram analisados por ELISA. A dosagem de NO salivar foi feita pelo método de Griess. A associação com variáveis clínicas como idade, sexo, consumo de cigarro e álcool, estádio clínico e ciência do diagnóstico foi investigada. Os efeitos da NE, do isoproterenol e do cortisol sobre a expressão de Interleucina-6 (IL-6) e NO foram investigados nas células derivadas de CEC de boca SCC9 e SCC25. A expressão de IL-6 pelas linhagens celulares foi analisada por PCR em tempo real e a produção da proteína no sobrenadante celular por ELISA. A dosagem de NO no sobrenadante foi feita pelo método de Griess. Os efeitos dos hormônios do estresse sobre a proliferação celular das células SCC9 foram avaliados por MTT. A expressão de receptores adrenérgicos ß1 e ß2 foi analisada nas linhagens SCC9 e SCC25 e em amostras humanas de CEC de boca, leucoplasia e mucosa bucal normal por PCR em tempo real. Resultados: Os níveis sanguíneos e salivares de cortisol foram significativamente mais altos nos pacientes portadores de...

Background: Investigations had showed that stress can influence the development and progression of cancer. However little is known about the interference of stressrelated neurohormones factors on the oral squamous cell carcinoma (OSCC). Purpose: In this study we investigated whether patients with OSCC show changes in levels of morning salivary and serum cortisol, serum CXCL12 and salivary nitric oxide (NO). Moreover we evaluated the effects of stress hormones on cell lines derived from OSCC. Patients and methods: The serum levels of cortisol and CXCL12 and the levels of salivary cortisol and NO (form of NO2) were studied in thirty-four patients with OSCC, and compared with seventeen patients with oropharynx SCC, seventeen patients with oral leukoplakia, twenty-seven individuals exposed to cigarette smoke and / or alcohol and twenty-five healthy volunteers. The association with clinical data such as age, sex, consumption of cigarettes and alcohol, clinical stage and the consciousness of diagnosis was investigated. The effects of stress-related mediators including norepinefrine (NE), isoproterenol and cortisol on the production of Interleukine-6 (IL-6) and nitric oxide were studied in the cells derived from OSCC SCC9 and SCC25. The IL-6 expression was evaluated by real time PCR and the protein concentration in supernatants using ELISA. The concentration of NO in culture supernatants was measured with Griess reagent. The effects of hormones on cell proliferation of SCC9 cells was evaluated by MTT. The expression of ßadrenergic receptors was evaluated by real time PCR in SCC9 and SCC25 cells and in 20 samples of OSCC, 17 of leukoplakia and 15 of normal oral mucosa samples. Results: The serum and salivary levels of cortisol were significantly higher in patients with OSCC compared with patients with leukoplakia, smokers and / or drinkers and healthy volunteers. Patients with oropharynx SCC had slightly lower levels of serum and salivary cortisol than patients with...

Latência e duração pulpar de quatro diferentes anestésicos locais na infiltração maxilar / Onset and duration of four different local anesthetics upon maxillary infiltration

Compararam-se os períodos de latência e duração pulpar da lidocaína a 2 por cento sem vasoconstritor (SV), lidocaína a 2 por cento com noradrenalina 1:50.000, lidocaína a 3 por cento com noradrenalina 1:50.000 e prilocaína a 3 por cento com felipressina 0,03 UI/ml na infiltração maxilar. Vinte pacientes receberam, aleatoriamente, 1,8 ml de cada um dos 4 anestésicos em 4 dentes superiores posteriores. A latência e a duração foram determinadas por um estimulador pulpar elétrico. Houve diferença estatisticamente significante na latência, com maior período para a lidocaína SV, e, também, na duração entre todos os anestésicos quando comparados dois a dois. A lidocaína SV apresenta latência significativamente maior que a dos demais anestésicos. Ocorre uma ordem crescente de tempos de duração entre lidocaína SV, lidocaína a 2 por cento, lidocaína a 3 por cento e prilocaína, com diferença significante entre elas

Verificação da variação da pressão arterial pelo uso de anestésicos locais com vasoconstritor / Verification of arterial blood pressure wich local anesthetics associated or not to vasoconstrictors

Os autores realizaram estudos com 100 pacientes divididos em 4 grupos, os quais foram anestesiados com lidocaína, variando apenas no uso ou não de vasoconstritor e no tipo de vasoconstritor associado (adrenalina ou noradrenalina 1:50.000). Os pacientes foram submetidos a exodontia, com aferição da pressão arterial antes do início do procedimento anestésico e após exodontia. Nos pacientes que receberam anestésico com vasoconstritor, normotensos ou hipertensos, não houve aumento significativo da pressão arterial; no grupo onde o sal anestésico não continha vasoconstritor, houve aumento estatisticamente significativo da pressão arterial

Efeitos cardiovasculares decorrentes da infiltração maxilar de quatro anestésicos locais / Cardiovascular effects of four local anesthetics on maxillary infiltration

Introdução - Os efeitos cardiovasculares, após a infiltração maxilar da lidocaína 2% sem vaso constritor (SV), lidocaína 2% com noradrenalina 1:50.000, lidocaína 3% com noradrenalina 1:50.000 e prilocaína 3% com felipressina 0,03 Ul/ml, foram avaliados durante procedimentos odontológicos de baixa complexidade. Métodos - Vinte pacientes normorreativos receberam 1 tubete (1,8 ml)dos anestésicos locais. Foram registrados os valores da pressão arterial e da frequência cardíaca por meio de um monitor automático não invasivo modelo Schollar II (Criticare S. Inc., EUA), diferentes etapas do tratamento. Resultados - A variação dos efeitos cardiovasculares, nas diferentes etapas comparadas duas a duas acusou diferenças estatisticamente significantes entre os valores da pressão arterial média nos pacientes anestesiados com lidocaína SV e lidocaína 3% associada à noradrenalina, e entre os valores da pressão arterial diastólica nos pacientes anestesiados com lidocaína 2% associada à noradrenalina e a prilocaína 3% associada à felipressina. Poucas diferenças estatisticamente significantes, dos parâmetros avaliados, foram evidenciadas nas diferentes etapas clínicas. Conclusão - Apesar das diferenças estatisticamente significantes, todas as soluções anestésicas locais utilizadas mostram-se seguras para uso rotineiro em Odontologia e o estresse parece ser o principal causador das alterações cardiovasculares

Efeitos cardiovasculares produzidos pela administraçäo intravascular de soluçäo de lidocaína a 2 por cento contendo noradrenalina 1:50.000 em cäes: papel terapêutico do diazepam / Cardiovascular effects induced by intravascular administration of 2 percent lidocaine associated with 1:50.000 norepinephrine in dogs: therapeutic role played by diazepam

Neste trabalho foram investigadas as alteraçöes da pressäo arterial (PA) e da freqüência cardíaca (FC) provocadas pela administraçäo intravascular da lidocaína a 2 por cento (0,51 mg/kg) associada a noradrenalina 1:50.000 (0,51 µg/kg), precedida ou näo pela administraçäo IV de diazepam (0,071 mg/kg) em 10 cäes (Canis familiaris) sob efeito de anestesia geral (33 mg/kg de pentobarbital sódico). Os valores de pressäo arterial sistólica (PS), diastólica (PD) e média (PM) e da freqüência cardíaca foram obtidos continuamente (segundo a segundo durante 105 minutos), por meio de método invasivo e registro eletrocardiográfico. Foram estabelecidos como valores controle aqueles imediatamente anteriores à primeira e à segunda administraçäo da soluçäo de lidocaína contendo noradrenalina. O intervalo entre as administraçöes foi de 70 minutos. A administraçäo IV de diazepam ocorreu 60 minutos após a primeira administraçäo da soluçäo de lidocaína contendo noradrenalina. Os valores foram submetidos à análise estatística utilizando-se o teste t de Student (Ó = 0,01). A soluçäo de lidocaína a 2 por cento contendo noradrenalina 1:50.000 provocou aumentos significantes da PS (21,69 por cento), PD (14,92 por cento) e PM (16,49 por cento) quando näo foi precedida pela administraçäo de diazepam. Causou também aumentos significantes da PS (24,92 por cento), PD (20,94 por cento) e PM (21,72 por cento) quando foi precedida pela administraçäo de diazepam. Ocorreram diminuiçöes da FC de 13,47 por cento e de 12,43 por cento para as respectivas situaçöes. Concluiu-se que, se benéfico, o uso de benzodiazepínicos como coadjuvante nos esquemas posológicos para o combate das alteraçöes cardiovasculares está intimamente relacionado com a sua açäo no sistema nervoso central, e näo com açäo direta sobre o sistema cardiovascular

Efeito de vasoconstritor usado em anestesia local sobre pressäo arterial sistêmica e freqüência cardíaca durante o atendimento odontológico / Effect of vasoconstrictor in local anesthesia on blood pressure and heart rate during dental management

O efeito da associaçäo de lidocaína a 2 por cento e norepinefrina 1:50.000 sobre a pressäo arterial sistêmica e a freqüência cardíaca de 68 indivíduos adultos atendidos em ambulatórios odontológicos foi avaliado por meio de um estudo de corte. Os parâmetros cardiovasculares foram medidos no início do atendimento (medida basal), dois minutos após a anestesia e ao final da consulta, sob condiçöes padronizadas. Pressäo arterial sistêmica e freqüência cardíaca näo variaram significativamente em indivíduos com níveis pressóricos pré-anestesia elevados ou anormais, quando foram utlizados um ou dois tubetes anestésicos e mediante diferentes procedimentos odontológicos. No decorrer do tempo, a freqüência cardíaca variou mais do que a pressäo arterial, porém todos os valores médios aferidos ficaram dentro de limites da normalidade. Nas condiçöes do presente estudo, a administraçäo dessa associaçäo anestésica näo determinou alteraçöes nos parâmetros cardiovasculares investigados

Uso dos anestésicos locais em Odontologia / The anesthetics local in dentistry

A preocupaçäo do cirurgiäo-dentista em promover a analgesia fez com que houvesse uma evoluçäo dos anestésicos locais. Com isso, muitas dúvidas surgiram como toxicidade, efeito dos vasoconstritores e dosagem que os anestésicos locais podem gerar no paciente. Seräo discutidos os conceitos e a utilizaçäo dos anestésicos locais (AL), visando melhor eficiência e segurança para o paciente

Alteraçöes da pressäo arterial e da freqüência cardíaca provocadas pela administraçäo intravascular de cloridrato de lidocaína a 2 por cento associado ao cloridrato de noradrenalina 1:50.000 (xylocaína), antes e após admistraçäo intravascular de diazepam, em cäes / Blood pressure and heart rate changes by intravascular administration of 2 por cento lidocaine hydrochrloride associated to 1:50.000 norepinephrine hydrochrloride (xylocaine), before and after intravascular administration of diazepam in dogs

O objetivo deste estudo foi avaliar as alteraçöes das pressöes arteriais sistólica, diastólica e média e da freqüência cardíaca, provocadas pela administraçäo intravascular de cloridrato de lidocaína a 2 por cento associado ao cloridrato de noradrenalina 1:50.000 (Xylocaína), nas doses proporcionais a 1 e 3 cartuchos, antes e após administraçäo intravascular de diazepam (Diazepam), em cäes (Canis familares) sob efeito de anestesia geral. Foram avaliados também os tempos em que elas ocorreram em sua máxima intensidade. Para a dose proporcional a 1 cartucho anestésico de 1,8ml, ou seja, 0,51mg/Kg de cloridrato de lidocaína e 0,51µg/Kg de cloridrato de noradrenalina, foram utilizados 10 cäes. Para a dose proporcional a 3 cartuchos anestésicos (5,4ml), ou seja, 1,53mg/Kg de cloridrato de lidocaína e 1,53µg/Kg de cloridrato de noradrenalina, foram utilizados 7 cäes. A dose utilizada para o Diazepam foi proporcional a 5mg, ou seja, 0,071mg/Kg. As mensuraçöes foram obtidas continuadamente por meio de método invasivo e registro eletrocardiográfico (eletrofisiógrafo Beckman - Dynograph). Foram estabelecidos como valores controle aqueles imediatamente anteriores à 1ª e à 2ª administraçäo intravascular da Xylocaína. Os valores registrados foram submetidos à análise estatística utilizando-se testes "T" de Student. As pressöes arteriais sistólica, diastólica e média apresentaram alteraçöes clinicamente importantes e estatisticamente significantes provocadas pela administraçäo intravascular da Xylocaína, antes e após administraçäo intravascular de diazepam, em ambas as doses utilizadas. As alteraçöes máximas das variáveis cardiovasculares estudadas ocorreram, praticamente, durante o primeiro minuto após o ínicio da administraçäo do anestégico local

Medida da dor produzida por diferentes técnicas anestésicas / The pain intensity produced by the differents anesthetic technique

Um estudo clínico foi feito para comparar a intensidade de dor produzida pelas seguintes técnicas anestésicas: infiltraçäo maxilar no primeiro molar, bloqueio do nervo palatino maior, bloqueio do nervo nasopalatino, bloqueio do nervo alveolar inferior, bloqueio do nervo incisivo e intraligamentar no primeiro molar inferior. Uma escala visual analóga foi utilizada para avaliar a intensidade de dor. Os bloqueios dos nervos palatinos maior, nasopalatino e alveolar inferior foram os que produziram mais dor. Somente para os bloqueios dos nervos palatino maior e nasopalatino e para a técnica intraligamentar foi encontrada uma correlaçäo positiva entre dor e velocidade de injeçäo