Impacto da orquiectomia e terapia de reposição hormonal com cipionato de testosterona no estresse oxidativo e função secretora das glândulas salivares de ratos Wistar / Impact of orchiectomy and cypionate testosterone replacement on stress oxidative and salivary gland function in Wistar rats

Apesar da comprovada capacidade da testosterona (T) em modular o estresse oxidativo de forma tecido-específica, pouco se sabe se as glândulas salivares estão sujeitas a essa modulação. O objetivo foi investigar os efeitos da orquiectomia (OQX) e da terapiadereposiçãohormonal(TRH) comTnoestresse oxidativoefunçãosecretora das glândulas salivares. Ratos Wistar (3 meses de idade) foram randomizados em 3 grupos (n = 15 ratos/grupo): simulação de cirurgia (SHAM); OQX; e OQX tratado com cipionato de testosterona (CT). A TRH com T foi realizada por via intramuscular, semanalmente, com 10 mg/kg de massa corpórea de CT por 4 semanas, iniciando 4 semanas após a OQX. Após o tratamento, o fluxo salivar (FS) induzido por pilocarpina foi coletada e as glândulas parótidas (PA) e submandibulares (SM) foram armazenadas a -80 ºC e submetidas a posteriores análises bioquímicas e histomorformétricas. O FS e as concentrações de cálcio, fosfato e cloreto aumentaram no grupo OQX. Após a OQX diminuíram a proteína total (PT) e a atividade da amilase (AMI), enquanto não houve nenhuma alteração na capacidade tamponante, pH, sódio e potássio na saliva. A concentração de PT e atividade de AMI aumentaram no grupo CT, enquanto que as concentraçoes de fosfato e cálcio reduziram na saliva em comparação com o grupo OQX. Proteína carbonilada, substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico, capacidade antioxidante total, ácido úrico e glutationa total aumentaram no grupo OQX em ambas as glândulas salivares. Superóxido dismutase, catalase e glutationa peroxidase aumentaram após a OQX na glândula SM, porém nenhuma alteração nas enzimas antioxidantes foi observada na glândula PA. A área ductal e acinar diminuiram e a área de tecido conjuntivo aumentou na glândula PA após a OQX. A área ductal diminuiu e a área acinar aumentou na SM, entretanto, não houve alteração na área de tecido conjuntivo após a OQX. A TRH com CT restaurou todos os parâmetros para níveis próximos ao grupo SHAM. Conclui-se que a OQX modula o estresse oxidativo nas glândulas salivares, e pode afetar a secreção e composição da saliva(AU)

Despite the proven ability of testosterone (T) to modulate oxidative stress in a tissuespecific manner, little is known whether the salivary glands are subject to this modulation. The objective was to investigate the effects of orchiectomy (ORX) and hormone replacement therapy (HRT) with T on oxidative stress and secretory function of the salivary glands. Wistar rats (3 months old) were randomized into 3 groups (n = 15 rats / group): surgery simulation (SHAM); ORX; and ORX treated with testosterone cypionate (TC). HRT with T was performed intramuscularly (I.M.), weekly, with 10 mg/kg body weight of TC for 4 weeks, starting 4 weeks after ORX. After treatment, the salivary flow (FS) induced by pilocarpine was collected and the parotid (PA) and submandibular (SM) glands were stored at -80 °C and subjected to subsequent biochemical and histomorformetric analyzes. FS and calcium, phosphate and chloride concentrations increased in the ORX group. After ORX, total protein (TP) and amylase activity (AMY) decreased, while there was no change in buffering capacity, pH, sodium and potassium in saliva. The TP concentration and AMY activity increased in the TC group, while the phosphate and calcium concentrations decreased in saliva compared to the ORX group. Carbonylated protein, thiobarbituric acid reactive substances, total antioxidant capacity, uric acid and total glutathione increased in the ORX group in both salivary glands. Superoxide dismutase, catalase and glutathione peroxidase increased after ORX in the SM gland, but no changes in antioxidant enzymes were observed in the PA gland. The ductal and acinar area decreased and the area of connective tissue increased in the PA gland after ORX. The ductal area decreased and the acinar area increased in SM, however, there was no change in the connective tissue area after ORX. HRT with TC restored all parameters to levels close to the SHAM group. It is concluded that ORX modulates oxidative stress in the salivary glands, and can affect the secretion and composition of saliva(AU)

Evidências da associação entre testosterona e doença periodontal no sexo masculino / Evidence of the association between testosterone and periodontal disease in males

A hipótese deste trabalho é que hormônios sexuais participam da etiopatogenia da doença periodontal (DP). Diferentes níveis de evidência científica testaram esta hipótese, avaliando: i. associação entre hormônios sexuais e DP em homens; ii. a influência de níveis sub- e suprafisiológicos de testosterona (T) sobre a DP em ratos; iii. se este mecanismo de ação envolve respostas de osteoblastos e osteoclastos in vitro. Dados do III NHANES relacionados com diagnóstico de DP e mensuração hormonal em homens com 30+ anos foram analisados para correlacionar estas duas variáveis. Em ratos, níveis subfisiológicos foram alcançados através da orquiectomia e níveis suprafisiológicos pelo tratamento com T. Metade dos animais em cada grupo foi submetida à DP utilizando–se modelo de ligadura. In vitro, células RAW264.7 foram diferenciadas em osteoclastos na presença de T (1nM-1μM) e identificados por TRAP. Cultura primária de osteoblastos murinos foi utilizada para avaliar a expressão de osteocalcina, RANKL e OPG na presença de T. Em homens, altos níveis de T biodisponível e baixa razão estradiol:T se correlacionaram significativamente com DP. Em idosos, baixos níveis de AAG, metabólito da dihidrotestosterona, também apresentaram correlação significativa. Em ratos, níveis sub- e suprafisiológicos de T aumentaram significativamente a perda óssea e modularam a expressão de citocinas inflamatórias. In vitro, doses fisiológicas de testosterona preveniram a osteoclastogênese e diminuíram a expressão de osteocalcina, RANKL e razão RANKL:OPG por osteoblastos. Concluiu-se que a T modula a resposta do hospedeiro à DP no sexo masculino, regulando a diferenciação de osteoclastos direta e indiretamente (via osteoblastos).

The hypothesis of this work is that sex hormones participate in the etiopathogenesis of periodontal disease (PD). Different levels of scientific evidence tested that hypothesis, evaluating: i. The association between sex hormones and PD in men; ii. The influence of sub- and supraphysiologic testosterone (T) levels on PD in rats; iii. If that mechanism of action involves osteoblast and osteoclast responses in vitro. Data from NHANES III related to diagnosis of PD and hormones measurement in 30+- year-old men were assessed to correlate those two variables. In rats, subphysiologic levels were obtained by orchiectomy and supraphysiolgic levels by T treatment. Half of the animals in each group received PD using a ligature model. In vitro, RAW264.7 cells were differentiated into osteoclastos in the presence of T (1nM-1µM) and identified by TRAP-staining. Murine osteoblast primary culture was used to evaluate the expression of osteocalcin, RANKL and OPG in the presence of T. In men, high levels of bioavailable T and low estradiol:T ratio significantly correlated with PD. In older men, low levels of AAG, a metabolite of dihydrotestosterone, also presented a significant correlation. In rats, low and high T levels significantly increased bone loss and modulated the expression of inflammatory cytokines. In vitro, physiologic T doses prevented osteoclastogenesis and decreased the expression of osteocalcin, RANKL and RANKL:OPG ratio produced by osteoblasts. We concluded that T modulates host response to PD in males, regulating osteoclast differentiation direct and indirectly (through osteoblasts)