Efeito do alendronato, da dexametasona e da associação de ambos sobre a osteoclastogênese: um estudo in vitro / Effect of alendronate, dexamethasone and the association of both on osteoclastogenesis: an in vitro study

Os osteoclastos são células multinucleadas com a função de degradar e reabsorver o tecido ósseo. Medicamentos como o alendronato (um tipo de bisfosfonato nitrogenado) e a dexametasona (glicocorticoide), podem interferir na fisiologia das células clásticas. Enquanto o alendronato (ALN) inativa o osteoclasto, agindo primordialmente sobre o citoesqueleto desta célula, a dexametasona (DEX) pode promover aumento na atividade dessa célula. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do ALN, da DEX e da combinação de ambos sobre a osteoclastogênese e ativação desta célula. Primeiramente foi estabelecido protocolo de remoção de smear layer para os discos de osso bovino e na sequência, foi realizada análise em espectrofotômetro para avaliar a concentração de ALN absorvida pelo osso. O substrato ósseo foi capaz de absorver completamente o ALN da solução nas concentrações de 10 e 100 M. O cultivo de osteoclastos foi feito a partir das células da medula óssea de camundongos e estimulados com 1,25 dihidroxivitamina D3 e através de osteoclastos obtidos a partir de células Raw 264.7 estimulados com RANKL. As células foram cultivadas sobre substrato ósseo previamente tratado com ALN e tratadas com DEX a 1 M. Conclui-se que o tratamento com ALN a 10 M não foi capaz de inibir completamente a reabsorção óssea, seja administrado sozinho ou com a DEX. A DEX promoveu aumento na expressão gênica RANKL e redução de OPG, mesmo quando administrada conjuntamente com ALN. Quando utilizado na concentração de 100 M, o ALN reduziu a quantidade de anéis de actina dos osteoclastos e promoveu significativa diminuição na liberação de EVs nestas células.

Efeito do alendronato, da dexametasona e da associação de ambos sobre a osteoclastogênese: um estudo in vitro / Effect of alendronate, dexamethasone and the association of both on osteoclastogenesis: an in vitro study

O carcinoma secretório em glândula salivar é uma neoplasia recentemente descrita que tem os mesmos aspectos morfológicos, imuno-histoquímicos e genéticos do carcinoma secretório de origem mamária. O carcinoma secretório tem características celulares reminiscentes de uma célula secretora lactacional, isto é, um citoplasma vacuolado repleto de gotas lipídicas e um material secretado, por vezes de forma apócrina, que pode lembrar o leite. Mais recentemente, algum nível de diferenciação lactacional foi sugerida no carcinoma secretório de origem salivar. O objetivo do estudo foi verificar se existe uma diferenciação do tipo lactacional em carcinomas secretórios de origem salivar, comparando a outros tipos de carcinomas salivares mais comuns. Foram realizadas reações imuno-histoquímicas para as seguintes proteínas: receptores hormonais (receptor de prolactina e receptor do hormônio do crescimento), proteínas associadas ao produto de secreção da glândula mamária lactacional (mucina-1 (MUC-1), MUC4, globulina de gordura 1 do leite humano, lactoferrina) e proteínas associadas à via Akt-mTOR (PTEN, p-Akt, p-mTOR, p4EBP1, eIF4E, pS6). A maioria dos casos de carcinoma secretório foi negativa para receptor de prolactina e de hormônio do crescimento. Lactoferrina foi positiva em todos os grupos tumorais, porém somente em carcinoma secretório observou-se um padrão de marcação intensa, difuso tanto em célula como em secreção. Todos os casos de carcinoma secretório foram positivos para globulina de gordura do tipo 1, porém o mesmo padrão de marcação foi observado em outros tumores. A maioria dos casos de carcinoma secretório foram positivos para MUC1 e MUC4. Nenhum caso de carcinoma secretório foi positivo para Akt, mas PTEN foi difusamente expresso em 57,1% dos casos. mTOR foi expresso em mais da metade dos casos de carcinoma secretório e dos outros tumores salivares. Entre as proteínas à jusante de mTOR, somente eIF4E demonstrou alta expressão no grupo de estudo. A expressão de marcadores lactacionais não é exclusiva do carcinoma secretório, porém a expressão de lactoferrina é distinta neste grupo de tumores quando comparado aos demais tumores salivares estudados.

Sex, pain, alcoholism and anxiety symptoms are predictive for systemic cortisol levels in oral cancer patients / Sexo, dor, etilismo e sintomas de ansiedade são preditivos para níveis sistêmicos de cortisol em paciente com câncer de boca

Pacientes com câncer podem apresentar uma desregulação do eixo hipotálamohipófise-adrenal (HPA) e secreção aumentada do hormônio cortisol. Níveis elevados de cortisol têm sido associados a pior prognóstico de diferentes tipos de câncer. Embora alterações psicológicas como ansiedade e depressão possam deflagrar uma secreção anormal de cortisol, pouco se sabe sobre a influência destas desordens emocionais na desregulação do eixo HPA em pacientes com câncer quando avaliadas em conjunto com variáveis demográficas, clinicopatológicas e biocomportamentais. Este estudo transversal avaliou os níveis plasmáticos de cortisol em 133 pacientes com carcinoma espinocelular (CEC) de boca e sua associação com variáveis demográficas, clínicopatológicas, biocomportamentais e psicológicas. Os níveis plasmáticos de cortisol foram mensurados por eletroquimioluminescência, e os níveis de ansiedade e depressão foram avaliados pelo Inventário de Ansiedade (BAI) e de Depressão (BDI) de Beck, respectivamente. Os dados demográficos, clinicopatológicos e biocomportamentais foram coletados dos prontuários dos pacientes. Os resultados da análise multivariada mostraram que homens com CEC de boca apresentaram 4,5 vezes mais chances de terem níveis elevados de cortisol plasmático do que as mulheres com a doença (OR=4,472; p=0,018). A presença de dor relacionada ao tumor primário também foi preditivo para maiores níveis de cortisol (OR=5,388; p=0,003). A ausência de histórico de consumo crônico de álcool foi um fator protetor para concentrações muito elevadas do hormônio nos pacientes com CEC de boca (OR=0,104; p= 0,004). Sintomas de ansiedade mensurados pelo BAI como "mãos trêmulas" (OR=0,192; p= 0,016) e estar "nervoso" (OR=0,207; p= 0,0004) foram associados a menores níveis de cortisol. Por outro lado, o sentimento de "medo de perder o controle" foi um fator de risco para níveis muito elevados de cortisol plasmático (OR=6,508; p= 0,0004). O score global e os sintomas específicos de depressão mensurados pelo BDI não foram preditivos para os níveis plasmáticos hormonais (p< 0,05). Juntos, os resultados mostram que sexo, dor, consumo de álcool e sintomas de ansiedade são variáveis independentes para os níveis sistêmicos de cortisol nos pacientes com câncer de boca. Portanto, intervenção psicológica, bem como o controle da dor e do alcoolismo devem ser considerados para a prevenção dos efeitos negativos da desregulação da secreção de cortisol nos pacientes diagnosticados com câncer de boca(AU)

Cancer patients may have a dysregulation of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis and abnormal secretion of cortisol. Increased cortisol levels have been associated with worse prognosis in different types of cancer. Although anxiety and depression can trigger an abnormal cortisol secretion, little is known regarding the influence of these emotional disorders on HPA axis dysregulation in cancer patients when evaluating together with demographic, clinicopathological and biobehavioral variables. This crosssectional study analyzed the plasma cortisol levels of 133 patients with oral squamous cell carcinoma (OSCC) and its association with demographic, clinicopathological, biobehavioral and psychological variables. Plasma cortisol levels were measured by electrochemiluminescence, and anxiety and depression symptoms were assessed using Beck Anxiety Inventory (BAI) and Depression (BDI), respectively. Demographic, clinicopathological and biobehavioral data were collected from patients' medicalrecords. Results from multivariate analysis showed that men with OSCC were 4.5 times more likely to have higher plasma cortisol levels than women (OR = 4.472, p = 0.018). The presence of cancer-induced pain was predictive for higher cortisol levels (OR = 5.388, p = 0.003). The absence of chronic alcohol consumption history was a protective factor for highest hormonal concentrations in oral cancer patients (OR = 0.104, p = 0.004). Anxiety symptoms measured by BAI as "hands trembling" (OR = 0.192, p = 0.016) and being "nervous" (OR = 0.207, p = 0.0004) were associated with lower cortisol levels. In contrast, the feeling of "fear of losing control" was a risk factor for highest systemic levels cortisol (OR = 6.508, p = 0.0004). The global score and specific symptoms of depression measured by the BDI were not predictive for plasma hormone levels (p < 0.05). Together, our results show that sex, pain, alcohol consumption and anxiety symptoms are independent variables for systemic cortisol levels in patients with oral cancer. Therefore, psychological intervention, as well as control of pain and alcohol consumption, should be considered to prevent the negative effects of cortisol secretion dysregulation in patients with oral câncer(AU)

The anti-osteoporotic effect of Moringa oleifera leaves extract on glucocorticoids-induced jawbone osteoporosis in Albino rats / Efeito anti-osteoporótico dos extratos de folhas de Moringa oleifera em osteoporose maxilar induzida por glicocorticóides em ratos albinos

Objective: Glucocorticoids induced osteoporosis and its related fragility fractures represent a costly human and socioeconomic load worldwide. All the current pharmacological therapies possess multiple adverse effects and high cost. Thus, the pesent study aimed to evaluate the bone healing ability of Moringa oleifera (MO) on glucocorticoids induced osteoporosis in the jawbone of Albino rats. Material and Methods: Osteoporosis was prompted by a daily intraperitoneal injection of 200 µg/ 100 g dexamethasone for 30 days. Next,the animals were randomly divided into 2 groups; osteoporotic and MO treated group. The treated group receivd a daily oral dose of 200mg/kg of MO. Rats from the MO group were sacrificed after 4 weeks from the beginning of treatment, and the same sacrifice date was used for the osteoporotic group. Bone regeneration was evaluated by dual energy x-ray absorptiometry (DEXA), real time polymerase chain reaction (RT-PCR), histopathological and histomorphometric examination. Results: After the sacrifice, the DEXA analysis revealed a significant upregulation in the BMD in the MO treated group (p <0.001). The RT-PCR test showed a significant decline in RANKL gene expression and a significant rise in OPG gene expression in the MO group (p < 0.001, p = 0.002, respectively). The histopathological examination of the MO group displayed a marked healing of the jawbone micro-anatomy. The histomorphometric analysis also showed that the bone area percentage increased significantly in the MO group (p <0.05). Conclusion: A cheap, easy to get, yet a powerful plant like MO leaves, can be cosidered an effective treatment for osteoporosis (AU).

Objetivos: A osteoporose induzida por glicocorticóides e suas fraturas por fragilidade relacionadas representam um custo humano caro e carga socioeconômica em todo o mundo. Todas as terapias farmacológicas atuais possuem múltiplos efeitos adversos e alto custo. Assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar a capacidade de cicatrização óssea de Moringa oleifera (MO) em osteoporose induzida na mandíbula de ratos albinos. Material e Métodos: A osteoporose foi induzida por uma injeção intraperitoneal diária de 200 µg / 100 g de dexametasona por 30 dias. A seguir, os animais foram divididos aleatoriamente em 2 grupos; grupo tratado com osteoporose e MO. O grupo tratado recebeu uma diária dose oral de 200 mg / kg de MO. Os ratos do grupo MO foram eutanasiados após 4 semanas do início do tratamento, e a mesma data de eutanásia foi usada para o grupo osteoporótico. A regeneração óssea foi avaliada por espectrometria de raio-x de energia dupla (DEXA), reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR), análise histopatológica e histomorfométrica. Resultados: Após a eutanásia, a análise DEXA revelou uma regulação positiva significativa na DMO no grupo tratado com MO (p <0,001). O teste RT-PCR mostrou um declínio significativo na expressão do gene RANKL e um aumento significativo na expressão do gene OPG no grupo MO (p <0,001, p = 0,002, respectivamente). O exame histopatológico do grupo MO revelou uma cicatrização acentuada da microanatomia do maxilar. A análise histomorfométrica também mostrou aumento significativo na porcentagem de área óssea no grupo MO (p <0,05). Conclusão: A MO é uma planta barata, de fácil obtenção, e suas folhas ainda podem ser consideradas poderosas como tratamento eficaz para a osteoporose. (AU)

Stress hormones promote DNA damage in human oral keratinocytes / Hormônios do estresse promovem dano no DNA de queratinócitos humanos de boca

O estresse crônico aumenta os níveis sistêmicos dos hormônios do estresse norepinefrina e cortisol. Assim como o carcinógeno específico do tabaco NNK (4- (metilnitrosamina)-1-(3-piridil)-1-butanona), estes hormônios podem induzir danos expressivos no DNA, o que contribui para o desenvolvimento do câncer. No entanto, é desconhecido se os hormônios do estresse possuem efeitos genotóxicos em queratinócitos de boca. Este estudo investigou os efeitos dos hormônios do estresse sobre o dano no DNA de uma linhagem celular de queratinócitos humanos de boca (NOK-SI). Células NOK-SI estimuladas com norepinefrina ou cortisol apresentaram maior dano no DNA que as células não tratadas. O dano induzido pela norepinefrina foi revertido pelo pré-tratamento das células com um beta-bloqueador. Células tratadas com NNK combinado à norepinefrina apresentaram níveis reduzidos das caspases 3 e 7. O cortisol também reduziu a atividade das enzimas pro-apoptóticas em relação às células não estimuladas. O dano no DNA promovido pelo NNK e cortisol e pela combinação de ambos levou ao acúmulo de γH2AX intracelular. Os efeitos causados pelo NNK e cortisol foram bloqueados com propranolol e com o antagonista do receptor de glicorcorticoide RU486, respectivamente. As quebras no DNA induzidas pela norepinefrina, na presença ou ausência de NNK, resultaram em maiores níveis celulares de 8OHdG. Este efeito também foi induzido via receptores beta-adrenérgicos. Os hormônios do estresse induzem danos no DNA de queratinócitos de boca e poderiam contribuir para a carcinogênese bucal(AU)

Chronic stress increases the systemic levels of stress hormones norepinephrine and cortisol. As well tobacco-specific carcinogen NNK (4-(methylnitrosamine)-1-(3- pyridyl)-1-butanone), they can induce expressive DNA damage contributing to the cancer development. However, it is unknown whether stress hormones have genotoxic effects in oral keratinocytes. This study investigated the effects of stress hormones on DNA damage in a human oral keratinocyte cell line (NOK-SI). NOK-SI cells stimulated with norepinephrine or cortisol showed higher DNA damage than untreated cells. Norepinephrine-induced DNA damage was reversed by pretreatment with beta-adrenergic blocker propranolol. Cells treated with NNK combined to norepinephrine displayed reduced levels of caspases 3 and 7. Cortisol also reduced the activity of pro-apoptotic enzymes. DNA damage promoted by NNK or cortisol and carcinogen combined to the hormone led to intracellular γH2AX accumulation. The effects caused by NNK and cortisol were abolished by propranolol and glucocorticoid receptor antagonist RU486, respectively. DNA breaks induced by norepinephrine in the presence or absence of NNK resulted in higher 8OHdG cellular levels. This effect was also induced through beta-adrenergic receptors. Stress hormones induce DNA damage of oral keratinocytes and could contribute to oral carcinogenesis(AU)

Effects of continual intermittent administration of parathyroid hormone on implant stability in the presence of osteoporosis: an in vivo study using resonance frequency analysis in a rabbit model

Abstract Objective: This study aimed to evaluate the effects of continual intermittent administration of parathyroid hormone (PTH) on implant stability in the presence of osteoporosis, using rabbit models. Material and Methods: Fifteen female New Zealand white rabbits underwent ovariectomy and were administered glucocorticoids to induce osteoporosis, following which they were divided into three groups. The first group received intermittent subcutaneous PTH for 4 weeks until implant placement (PTH1), while the second and third groups received PTH (PTH2) and saline (control), respectively, for 4 weeks before and after implant placement. After intermittent administration of PTH or saline, titanium implants were inserted into the left femoral epiphyses of all animals, and the implant stability quotient (ISQ) was measured immediately after placement to assess the primary stability and at 2 and 4 weeks after implant placement to assess osseointegration. At 4 weeks after implant placement, histological and histomorphometric evaluations were conducted and the bone area around the implant socket was measured as a ratio of the total bone area to the total tissue area. Results: Regarding primary stability, the ISQ values for the PTH1 and PTH2 groups were significantly higher than those for the control group (p<0.05). Concerning osseointegration, the ISQ values at 2 and 4 weeks were significantly higher for the PTH2 group than for the PTH1 and control (p<0.05) groups. Histological assessments showed a thicker and more trabecular bone around the implant sockets in the PTH2 specimens than in the PTH1 and control specimens. The bone area around the implant socket was significantly greater in the PTH2 group than in the PTH1 and control groups (p<0.05). Conclusions: Our results suggest that continual intermittent PTH administration before and after dental implant placement is effective for the achievement of favorable stability and osseointegration in the presence of osteoporosis.

Efeitos do tratamento quimioterápico em pacientes ortodônticos / Effects of chemotherapy treatment in orthodontic patients literature review

O número de pacientes com câncer, diagnosticados e curados, em remissão da doença, tem aumentado drasticamente nas últimas décadas. Muitos indivíduos com histórico de câncer levam uma vida normal após o tratamento, e vários que tiveram câncer na infância chegam saudáveis à vida adulta. A quimioterapia, atualmente, é o principal tratamento antineoplásico. As drogas utilizadas e seus efeitos colaterais têm influência no tratamento ortodôntico. Os ortodontistas devem estar bem informados sobre os aspectos dos quimioterápicos ao receber estes pacientes em seus consultórios, tanto para orientá-los quanto para saber como conduzir o tratamento quando um deles é diagnosticado com a doença. Informações importantes muitas vezes são desconhecidas pelos ortodontistas. Certos medicamentos usados na quimioterapia prejudicam a reabsorção/neoformação óssea, além de alterações dentárias e radiculares provocadas por drogas antineoplásicas. Efeitos colaterais, como xerostomia e mucosite, também influenciam no tratamento ortodôntico. Este trabalho é uma análise criteriosa da literatura a respeito dos aspectos relevantes da quimioterapia que podem interferir no tratamento ortodôntico.

The number of diagnosed cancer cases and cancer survivors has increased dramatically in the last decades. Many individuals with a history of cancer have a normal life after treatment and many who have had childhood cancer become healthy adults. Chemotherapy is currently the leading cancer treatment modality. The drugs used and their side effects have influence on orthodontic treatment. The orthodontist should be aware about aspects of chemotherapy drugs when conducting treatment in a patient diagnosed with cancer. Important informations are often unknown by orthodontists. Certain drugs used in chemotherapy affect either resorption and bone formation. Dental and root morphologic changes may be caused by anticancer drugs. Side effects such as xerostomia and mucositis also play influence on orthodontic treatment. This paper provides a careful review of the literature regarding relevant aspects of chemotherapy that might interfere with orthodontic patients.

Avaliação radiográfica e histomorfométrica da mandíbula de ratas medicadas com glicocorticóide e bifosfonato / Mandible´s radiographic and histomorphometric assessment in female rats medicated with glucocorticoid and biphosphonate

Glicocorticóides e bifosfonatos são medicamentos que interferem na estrutura óssea. Para avaliar se estas mudanças se manifestam radiográfica e histologicamente na mandíbula, foram utilizadas 36 ratas Wistar, divididas em três grupos de 12 animais. O grupo 1 (controle) recebeu injeções subcutâneas (2 ml/kg) de solução salina, os grupos 2 e 3 receberam acetato de metilprednisolona (1 mg/kg), sendo que o grupo 3 recebeu adicionalmente risedronato (3mg/kg). Os animais foram mortos, a hemi-mandíbula esquerda foi dissecada, radiografada e submetida a processamento histológico. Um observador, cego para o grupo a que pertencia a imagem, obteve a média de densidade óptica e a proporção de trabéculas ósseas por campo. A ANOVA, complementada pelo Teste de Tukey (α=5%) evidenciou médias menores de densidade óptica no grupo 2 (glicocorticóide, 165,54±8,95), diferindo significativamente do grupo 1 (controle, 182,96±4,53) e do grupo 3 (risedronato, 180,99±6,21). Os grupos 1 e 3 não diferiram entre si. Os mesmos testes estatísticos evidenciaram diferenças significativas na proporção trabecular entre os três grupos. O grupo 2 (glicocorticóide, 53,94±12,53) apresentou a menor média e o grupo 3 (risedronato, 81,14±7,20), a maior. Ambos diferiram significativamente do grupo 1 (controle, 72,00±5,95). Em conclusão, a administração de glicocorticóides e bifosfonatos altera a proporção de trabéculas ósseas na mandíbula de ratas e estas mudanças podem ser evidenciadas radiograficamente.

Glucocorticoids and biphosphonates are drugs that interfere in bone structure. In order to assess if these changes are evident at radiographies and histological slides, 36 wistar female rats were allocated to 3 groups of 12 animals. Group 1 received saline solution (subcutaneous injections - 2 ml/kg), groups 2 and 3 received metilprednisolone acetate (1 mg/kg). Group 3 received also risedronate (3mg/kg). The animals were killed, the left hemi-mandíble was dissected, radiographed and histologically prepared. One observer blind to the group composition measured the optical density and trabecular proportion means. The ANOVA, complemented by Tukey´s test (α=5%) showed significantly smaller mean in the group 2 (glucocorticoid, 165.54±8.95) than in groups 1 (control, 182.96±4.53) and 3 (180.99±6.21). The groups 1 and 3 do not differ between themselves. The same statistical tests showed significant histological differences among groups. Group 2 (glucocorticoid, 53.94±12.53) had the smallest mean proportion of bone trabeculae per field, and group 3 (risedronate, 81.14±7.20) the largest. Both differ significantly from group 1 (control, 72.00±5.95) (F=37.56;p<0.01). In conclusion, glucocorticoid and biphosphonate administration interferes with rats mandibular trabecular proportion and these changes are radiographically detectable.

Indicaçöes clínicas do uso de corticosteróides em Odontologia: estado atual da questäo / Clinical indications of corticosteroids use in Dentistry

Os autores discutem os efeitos farmacológicos e adversos dos corticosteróides e as suas indicaçöes em Odontologia, bem como os cuidados durante a sua prescriçäo