O impacto do lúpus eritematoso sistêmico juvenil na inflamação gengival: achados clínicos, imunológicos e microbiológicos / The impact of juvenile systemic lupus erythematosus on gingival inflammation: clinical, immunological and microbiological findings

Os objetivos desse estudo foram avaliar a expressão de citocinas no soro e fluido gengival, a produção de arginina-peptidil-deiminase (anti-PPAD) e o perfil microbiológico de pacientes com lúpus eritematoso sistêmico juvenil (LESj) e comparar com indivíduos saudáveis sistemicamente. Como objetivo secundário, avaliamos o impacto do tratamento da inflamação gengival sobre a expressão das citocinas e dos níveis de anti-PPAD. Participaram do estudo 30 pacientes com LESj (idade média: 16,2 ± 1,5 anos) e 29 sem doença sistêmica (idade média 15,5 ± 2,3 anos), ambos com gengivite. Foram coletados dados reumatológicos, periodontais, sangue, fluido gengival e biofilme intrassulcular. As citocinas foram analisadas pelo multiensaio multiplex; anti-PPAD pelo ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) e níveis bacterianos pelo checkerboard DNA-DNA hybridization. Para avaliar variáveis categóricas foi utilizado o teste Qui-quadrado de Pearson; para as numéricas, o teste U de Mann-Whitney e para as correlações a estatística tau-b de Kendall. No estudo longitudinal, foi utilizado o teste de McNemar para dados qualitativos, e o de Wilcoxon para dados numéricos. No estudo transversal, o grupo teste apresentou maiores níveis de profundidade de bolsa à sondagem (PBS), nível de inserção clínica (NIC), % de placa e sangramento do que o controle. Na análise do soro, G-CSF foi significativamente maior e TNF-α significativamente menor no grupo teste. Na análise do fluido gengival, IL-1ß, IL-7, IL-8, IL-13, G-CSF, IFN-γ e MCP-1 foram significativamente maiores e IL-4, IL-12(p70) e GM-CSF significativamente menores no grupo teste. Não houve diferença significativa nos níveis de anti-PPAD entre os grupos. S. constellatus, A. actinomycetencomytans, E. saburreum, V. parvula, S. intermedius, C. showae e F. nucleatum foram significantemente mais numerosas no grupo teste e A. gerencseriae e T. denticola no grupo controle. Após o tratamento da inflamação gengival, o SLEDAI, %NIC 1-2 e NIC reduziram significantemente. Já os valores de PBS e %NIC 0 aumentaram. No soro, houve diminuição significativa da IL-4 e IL-5 e aumento significativo dos níveis de anti-PPAD após o tratamento. Já no fluido gengival, houve diminuição significativa da IL-1ß, IL-10 e MCP-1 e aumento significativo da IL-4, IL-12(p70), IL-17, GM-CSF e INF-α. Sendo assim, podemos concluir que pacientes com LESj apresentaram piores condições periodontais, PBS, NIC, % de placa e sangramento do que pacientes saudáveis sistemicamente. A análise de citocinas mostrou um aumento do G-CSF e TNF-α no soro e de IL-1ß, IL-7, IL-8, IL-13, G-CSF, IFN-γ e MCP-1 no fluido gengival dos pacientes com LESj. Foram identificados anticorpos anti-PPAD nos pacientes com LESj, o que pode servir como gatilho para a quebra da tolerância imunológica. O estudo longitudinal intervencionista demonstrou que o tratamento da inflamação gengival melhorou significantemente os parâmetros %NIC 1-2 e NIC. Houve uma pequena, porém significante, piora na PBS, a qual acreditamos não ter relevância clínica. Observamos também uma melhora significante no SLEDAI e dos níveis de IL-4 e IL-5 no soro e um aumento das citocinas IL-12, IL-17 e GM-CSF no fluido gengival. Já em relação ao anticorpo anti-PPAD, observamos um aumento significativo após o tratamento da inflamação gengival.

The objectives of this study were to evaluate the expression of cytokines in serum and gingival fluid, the production of arginine-peptidyl-deiminase (anti-PPAD) and the microbiological profile of patients with juvenile systemic lupus erythematosus (jSLE) and compare with systemically healthy individuals. As a secondary objective, we evaluated the impact of treatment of gingival inflammation on cytokine expression and anti-PPAD levels. Thirty patients with jSLE (mean age: 16.2 ± 1.5 years) and 29 without systemic disease (mean age 15.5 ± 2.3 years), both with gingivitis, participated in the study. Rheumatological and periodontal data, blood, gingival fluid and intrassulcular biofilm were collected. Cytokines were analyzed by multiplex multi-assay; anti-PPAD by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and bacterial levels by checkerboard DNA-DNA hybridization. Pearson's Chi-square test was used to evaluate categorical variables; Mann-Whitney U test for numerical variables and Kendall's tau-b statistic for correlations. In longitudinal study, McNemar test was used for qualitative data, and Wilcoxon test for numerical data. In cross-sectional study, test group presented higher levels of probing depth (PD), clinical attachment level (CAL), % of plaque and bleeding than control group. In serum analysis, G-CSF were significantly higher and TNF-α significantly lower in test group. In analysis of gingival fluid, IL-1ß, IL-7, IL-8, IL-13, G-CSF, IFN-γ and MCP-1 were significantly higher and IL-4, IL-12(p70) and GM-CSF were significantly lower in test group. There was no significant difference in anti-PPAD levels between groups. S. constellatus, A. actinomycetencomytans, E. saburreum, V. parvula, S. intermedius, C. showae and F. nucleatum were significantly more numerous in test group and A. gerencseriae and T. denticola in control group. After treatment of gingival inflammation, SLEDAI, % CAL 1-2 and CAL decreased significantly. Already the values of PD and % CAL 0 increased. In serum, there was a significant decrease in IL-4 and IL-5 and a significant increase in anti-PPAD levels after treatment. In gingival fluid, there was a significant decrease in IL-1ß, IL-10 and MCP-1 and significant increase in IL-4, IL-12 (p70), IL-17, GM-CSF and INF-α. Thus, we can conclude that patients with jSLE presented worse periodontal conditions, PBS, NIC, % plaque and bleeding than systemically healthy patients. Cytokine analysis showed an increase in serum G-CSF and TNF-α and IL-1ß, IL-7, IL-8, IL-13, G-CSF, IFN-γ and MCP-1 in gingival fluid of patients with jSLE. Anti-PPAD antibodies have been identified in patients with jSLE, which may serve as a trigger for impaired immune tolerance. Longitudinal interventional study demonstrated that treatment of gingival inflammation significantly improved % CAL 1-2 and CAL parameters. There was a small, but significant worsening in PBS, which we believe has no clinical relevance. We also observed a significant improvement in SLEDAI and levels of IL-4 and IL-5 in serum and an increase in cytokines IL-12, IL-17 and GM-CSF in gingival fluid. Regarding the anti-PPAD antibody, we observed a significant increase after the treatment of gingival inflammation.

Detecção de anticorpos séricos anti-Porphyromonas gingivalis-peptidilarginina-deiminase em pacientes com lúpus eritematoso sistêmico juvenil / Detection of serum anti-Porphyromonas gingivalis-peptidylarginine-deiminase antibodies in patients with juvenile systemic lupus erythematosus

A Porphyromonas gingivalis-peptidilarginina-deiminase (PPAD) gera peptídeos citrulinados que podem levar à produção de autoanticorpos, e assim, induz a iniciação de uma resposta autoimune. O objetivo deste estudo foi detectar a presença de anticorpos anti-PPAD no soro de pacientes com lúpus eritematoso sistêmico juvenil (LESJ) e comparar com pacientes saudáveis. Foram avaliados 25 pacientes (24 mulheres e 1 homem) com LESJ (média de idade de 16,1 ± 1,6 anos), e 25 controles (22 mulheres e 3 homens) sem LESJ (média de idade de 15,2 ± 2,3 anos). Todos os pacientes estavam em tratamento ou acompanhamento médico no Núcleo de Estudos da Saúde do Adolescente (NESA). No grupo teste, 20 pacientes (80%) estavam em atividade moderada e grave do LESJ, medida através do Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index 2000 (SLEDAI-2K), 8 (32%) com sequelas decorrentes da doença, medida pelo Systemic Lupus International Collaborating Clinics/American College of Rheumatology - Damage Index (SLICC/ACR-DI), e 15 (60%) com acometimento articular, considerado a partir da ocorrência de pelo menos 3 sinais inflamatórios na articulação. Dados clínicos periodontais como profundidade de bolsa à sondagem (PBS), nível de inserção clínica (NIC), índice gengival (IG) e índice de placa (IP) foram obtidos de todos os adolescentes. Nenhum paciente foi considerado fumante em ambos os grupos. Níveis séricos de anticorpos anti-PPAD foram avaliados através do método ELISA. O estudo foi capaz de detectar anticorpos séricos anti-PPAD em pacientes com LESJ e em pacientes saudáveis, não encontrando, porém, diferença significativa entre os grupos (p = 0,9). As medidas clínicas de PBS, NIC, IP e IG foram maiores no grupo teste (p = 0,006, p < 0,001, p < 0,001, p = 0,190, respectivamente). Não foi possível demonstrar correlação significativa entre os níveis de anti-PPAD e os parâmetros clínico-periodontais em ambos os grupos. Concluímos que os anticorpos anti-PPAD podem ser detectados no soro de pacientes com LESJ. A comprovação de que esses anticorpos são produzidos por pacientes com LESJ, reforça a ideia de que a infecção periodontal por Porphyromonas gingivalis poderia induzir uma resposta autoimune

Porphyromonas gingivalis-peptidylarginine-deiminase (PPAD) generates citrullinated peptides that can lead to production of autoantibodies inducing the initiation of an autoimmune response.The aim of this study was to evaluate the presence of anti-PPAD antibodies in serum samples from patients with juvenile systemic lupus erythematosus (JSLE) and to compare it with healthy patients. Twenty-five patients (24 women and 1 man) with JSLE (mean age 16.1 ± 1.6 years) and 25 controls (22 women and 3 men) without JSLE (mean age 15.2 ± 2.3 years). All patients were undergoing treatment or medical follow-up at the Adolescent Health Study Center (NESA). In the test group, 20 patients (80%) were in moderate and severe JSLE activity, as measured by Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index 2000 (SLEDAI-2K), 8 (32%) with sequelae due to the disease, as measured by Systemic Lupus International Collaborating Clinics / American College of Rheumatology - Damage Index (SLICC / ACR-DI), and 15 (60%) with joint involvement, considered from the occurrence of at least 3 inflammatory signs in the joint. Periodontal data such as probing depth (PD), clinical attachment level (CAL), gingival index (GI) and plaque index (PI) were obtained from all adolescents. No patient was considered smoker in both groups. Serum levels of anti-PPAD antibodies were assessed from a blood sample by the ELISA method. The study was able to detect anti-PPAD antibodies in patients with JSLE and in healthy patients, but did not find a significant difference between the groups (p = 0.9). The clinical parameters of PD, CAL, PI and GI were higher in the test group (p = 0.006, p <0.001, p <0.001, p = 0.190, respectively). It was not possible to demonstrate a significant correlation between anti-PPAD levels and clinical-periodontal parameters in both groups. We conclude that anti-PPAD antibody levels can be detected in the serum of patients with JSLE. The evidence that these antibodies are produced by JSLE patients reinforces the idea that periodontal infection by Porphyromonas gingivalis could induce an autoimmune response

Detecção de anticorpos séricos produzidos contra as proteínas do bacteriófago 17 do Aggregatibacter actinomycetemcomitans / Serum antibody detection against Aggregatibacter actinomycetemcomitan's bacteriophage 17 proteins

Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) é uma bactéria associada à Periodontite Agressiva (PA). Ela invade tecidos moles, com ocorrência de lisogenia e bacteriófagos presentes em até 69% das subespécies. Estudos in vitro sugerem que a indução do bacteriófago (Aa17) ocorre numa co-cultura de Aa lisogênico com fibroblastos humanos. Se esta interação ocorre in vivo, com liberação do vírus, uma reação imunológica contra o Aa17 aconteceria. O objetivo deste estudo é constatar se anticorpos (AC) contra proteínas do Aa17 existem e estão associados à doença periodontal. Um objetivo adicional foi testar a resposta de AC contra os sorotipos do Aa. 52 indivíduos participaram: 31 com PA, 5 com Periodontite Crônica (PC) e 16 com Periodonto Saudável (PS). Soro foi coletado após a classificação clínica. As proteínas do Aa17 foram obtidas de preparações purificadas. As subespécies do Aa utilizadas para amostras de proteínas através de sonicação foram: 43717(American Tissue Culture Collection - ATCC) – sorotipo A, 43718 (ATCC) – sorotipo B, 33384 (ATCC) – sorotipo C, IDH781 – sorotipo D, NJ9500 – sorotipo E and CU1000 – sorotipo F. As proteínas foram separadas em géis de poliacrilamida e transferidas para membranas de nitrocelulose. As reações de Western-blotting ocorreram com o AC primário sendo o soro de cada indivíduo. Todas as membranas foram lidas pelo sistema Odyssey que captura sinais no AC secundário (antihumano). A resposta de AC contra ao menos uma proteína do Aa17, assim como pelo menos um sorotipo do Aa foi observado em todos, com exceção de dois indivíduos (com PS), participantes. Um indivíduo do grupo PC e três do PA tiveram resposta de AC contra alguns, mas não todos os sorotipos do Aa. A resposta de AC contra todos os sorotipos foi o achado mais comum nos grupos PA (28/31), PS (14/16) e PC (4/5). A resposta de AC contra o complexo de proteínas do Aa17 foi observado em 7 indivíduos ...

Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) is a bacteria associated with Aggressive Periodontitis (AP). It invades soft tissues, with occurrence of lysogeny and bacteriophage presence up to 69% of Aa subspecies. In vitro studies suggested that bacteriophage (Aa17) induction occurs upon co-culture of Aa lysogens subspecies with human fibroblasts. If such an in vivo interaction resulted in Aa17 induction and release of virions, an immunologic reaction to Aa17 proteins could ensue. The purpose of this investigation was to learn whether serum antibodies (AB) to Aa17 proteins are found in human sera, and whether they are associated with periodontal disease. An additional purpose was to test the AB response against known Aa serotypes.52 individuals took part: 31 with AP, 5 with Chronic Periodontitis (CP) and 16 with a Healthy Periodontium (HP). Serum was collected after clinical classification. Aa17 proteins were obtained from purified Aa17 preparations. The Aa strains used for protein sampling through sonication were: 43717(American Tissue Culture Collection - ATCC) – serotype A, 43718 (ATCC) – serotype B, 33384 (ATCC) – serotype C, IDH781 – serotype D, NJ9500 – serotype E and CU1000 – serotype F. Proteins were separated by SDS-PAGE gels and then transferred to nitrocellulose membranes. Western-blotting reactions were carried out with the primary AB being each subject’s serum. All membranes were read through the Odyssey system which captures signals from a dye in a secondary (antihuman) AB. AB response against at least one Aa17 protein, as well as a response to at least one Aa serotype, was observed in all but two individuals (with HP) who participated in the study. Serum from one individual from the CP group and three from the AP group had AB response to some, but not all Aa serotypes. AB response against all Aa serotypes was the most common finding in AP (28/31), HP (14/16) and CP (4/5) groups. AB response to the full complex ...

Characterization of an IgY polyclonal antibodies directed against the canine distemper virus

Canine distemper is a contagious, incurable, often fatal, multisystemic viral disease that affects the respiratory, gastrointestinal, and central nervous systems. Distemper is caused by the canine distemper virus (CDV). The development of antibodies to use in therapy and diagnosis is essential for the control of some diseases. Immunization of chickens with CDV results in the production of antibodies specific. However, there is relatively limited information available concerning immune response of CDV in this species. In the present study, immune responses were examined in serum and egg yolk from laying hens injected with CDV. The results demonstrated that the increase of antibody activity occurs first in the serum, and then in egg yolk with a lag in time of 1 to 3 week in the chickens. However, the time of elevated levels of antibody activity was much shorter in serum than the egg yolk.

Imunoglobulinas salivares e sua relação com Candida spp. em pacientes infectados pelo HIV / Salivary immunoglobulin and its relationship with Candida spp. in HIV-infected patients

O presente estudo teve como objetivo avaliar os níveis de imunoglobulinas salivares (IgA-S) e sua relação com a presença de Candida spp., imunossupressão e uso do HAART em pacientes infectados pelo HIV. Para isto, foi feito uma revisão sistemática da literatura para determinação dos níveis de IgA-S em pacientes infectados pelo HIV. Além disso, uma pesquisa com crianças infectadas pelo HIV e seus irmãos não infectados também foi realizada, na qual foram determinados os níveis totais de anticorpos IgA-S total e IgA-S específica anti-Candida spp. na saliva destas crianças. Correlacionou-se estes resultados com as análises microbiológicas, utilização de medicação anti-retroviral e classificação imunológica. No primeiro estudo, foram efetuadas buscas nas bases de dados eletrônicas PubMed, Web of Science, Google Scholar, Cochrane e EMBASE, com a finalidade de encontrar pesquisas clínicas que atendiam os seguintes critérios de elegibilidade: participantes adultos infectados pelo HIV e adultos não infectados; testes de diagnóstico para a infecção pelo HIV em ambos os grupos (caso e controle); a mesma metodologia (teste ELISA) para determinar os níveis de imunoglobulinas (IgA); o mesmo teste de diagnóstico IgA aplicado em uma população similar. Foram encontrados cento e quarenta e quatro estudos, todos em pacientes adultos, e seis atenderam aos critérios iniciais de inclusão. Em uma segunda avaliação, quatro estudos foram excluídos. Foi observado que os indivíduos adultos infectados pelo HIV apresentaram níveis de IgA-S específica maior que os não infectados. No segundo estudo, foram selecionadas 105 crianças, entre 2 e 14 anos, infectadas (65) e sem a infecção (40) pelo HIV. Foi coletada saliva estimulada de todas as crianças, seguido de exame clínico da cavidade bucal e coleta de dados do prontuário sobre história médica, exames laboratoriais e uso de medicação...

Production and use of egg-yolk antibody for detection of canine parvovirus in feces

Canine parvovirus (CPV), cause an intestinal disease characterized by bloody diarrhea, is often fatal in puppies. The virus is transmitted by contact with infected dogs or their feces. The virus is very stable in the environment and may survive for several months in contaminated areas. The CPV attacks the rapidly diving cells of the bone marrow and the small intestine. Several laboratory tests have been developed and are available for specific viral diagnosis. Where facilities are available, rapid diagnosis can be made by electron microscopy (EM) of fecal material from cases with typical signs of disease. The virus also can be isolated in several feline and canine cell lines such as canine and feline kidney cells, but isolation is seldom used in practice since cell cultures are required and at least 1 week for results is required. Fecal hemagglutination-hemagglutination (HA-HI) tests have provided a simple and rapid method for detecting virus in fecal and tissue samples and are employed by several diagnostic laboratories, however the HA test is less sensitive than EM or enzyme-linked immunoassays (ELISA). In this work, the laying chickens are immunized with the canine parvovirus strain Cornell 780916-80 and the egg yolk antibody (IgY) isolated and characterized by indirect ELISA to detect canine parvovirus in feces.

Antibody response to a chromatographic fraction of Porphyromonas gingivalis and its correlation with periodontal status

Porphyromonas gingivalis tem sido fortemente associado à gravidade das doenças periodontais e estimula respostas celulares e humorais no hospedeiro. Objetivo: Correlacionar os níveis de IgA, IgG e subclasses de IgG contra uma fração cromatogrßfica do extrato de Porphyromonas gingivalis ATCC33277 extract e descritores clínicos periodontais. Material e Métodos: Indivíduos com periodontite (29) e com saúde periodontal (26) foram avaliados de acordo com as medidas de profundidade de sondagem, sangramento à sondagem e nível de inserção clínica. O extrato de Porphyromonas gingivalis foi fracionado por cromatografia de troca iônica e a resposta humoral contra a fração IV foi avaliada por ôenzyme linked immunosorbent assayõ. Resultados e Conclusão: O percentual de sítios com sangramento à sondagem (critério 1) estava correlacionado significativamente com os níveis séricos de IgG2 (r = 0,385; p < 0,05). Os níveis de IgG total e IgG2 correlacionaram-se significativamente com o percentual de sítios com nível de inserção clínica (NIC) ≥ 3 mm (critério 2) (r = 0,428; p < 0,05 e r = 0,510; p < 0,01, respectivamente), NIC ≥ 5 mm (critérion 3) (r = 0,499 e r = 0,518, respectivamente; p < 0,01) e percentual de sítios com NIC ≥ 3 mm associado a profundidade de sondagem ≥ 4 mm e sangramento à sondagem no mesmo sítio (criterion 4) (r = 0,607; p < 0,001 e r = 0,487; p < 0,01, respectivamente). Foi observada uma correlação positiva estatisticamente significante entre os níveis de IgGA e IgG1 e o critério 4 (r = 0,339 e r = 0,345, respectivamente; p < 0,05), e entre os níveis de IgG3 e o critério 3 (p < 0,05; r = 0,370). Estes resultados indicam que quanto mais acurado for o critério de diagnóstico empregado para a determinação da doença periodontal, maiores os níveis séricos de imunoglobulinas.

Estudo imuno-histoquímico da desmoplasia em neoplasias de glândula salivar / Immunohistochemical study of desmoplasia in salivary gland neoplasms

Desmoplasia é a deposição proeminente de colágeno de permeio às células neoplásicas, tendo-se o miofibroblasto como a célula responsável por esse processo. Sua presença tem sido associada a um prognóstico mais favorável em algumas neoplasias e, diante disso, propusemo-nos a estudar sua presença em neoplasias de glândula salivar. A fim de verificar a presença do miofibroblasto no estroma tumoral dessas neoplasias, utilizamos a técnica imuno-histoquímica através do método EnVision-peroxidase com o anticorpo anti-actina-músculo-liso (AML) nos casos selecionados de: adenoma pleomórfico - AP (6), carcinoma mucoepidermóide - CME (21) carcinoma adenóide cístico - CAC (7), carcinoma epitelial-mioepitelial - CEM (2), adenocarcinoma polimorfo de baixo grau de malignidade - APBGM (11) e carcinoma de células acinares - CCA (2). Apenas os casos de CME, APBGM e CCA exibiram positividade para o anticorpo, confirmando a presença do miofibroblasto, em graus variáveis de acordo com cada variante tumoral. Apenas nos casos de CMEs pôde ser verificada a relação entre a presença da desmoplasia e a menor agressividade do tumor. Nos demais casos (AP, CAC, CEM e CCA), essa relação não existiu, o que nos levou à conclusão de que, nos tumores de glândula salivar, o comportamento e as reações diferem entre as entidades, ficando claro que, nesses tumores, deve-se individualizar o estudo do estroma

Detecçäo de anticorpo anticoraçäo em camundongos Balb/c imunizados com Streptococcus mutans / Detection of heart-reactive antibody in Balb/c mice immunized with Streptococcus mutans

Anticorpos para antígenos cardíacos foram analisados por ELISA em 14 soros de camundongos Balb/c hiperimunizados com Streptococcus mutans, inativado pelo formaldéido. Os níveis de anticorpos da classe IgG anticoraçäo e antimiosina elevaram-se significativamente nos animais imunizados quando comparados com os controles, especialmente no grupo A, imunizado e reestimulado com antígenos solúveis de S. mutans. Neste grupo, os resultados do "Western Blot" mostraram reatividade com miosina cardíaca e uma banda de 35 kDa. A análise histológica dos coraçöes dos animais do grupo B, imunizado e reestimulado com antígenos de superfície do microrganismo, demonstrou a presença de degeneraçäo celular, tipo hidrópica e hialina e focos inflamatórios constituídos de linfócitos e macrófagos no miocárdio e pericárdio. Os resultados deste trabalho reforçam a hipótese da existência de mimetismo antigênico entre tecido cardíaco e S. mutans e chamam a atençäo para o risco de desenvolvimento de anticorpos reativos com antígenos próprios induzidos por vacina anticárie com componentes estreptocócicos

Análise de anticorpos IgG e IgA anti-streptococcus mutans na gengivite em crianças / Anti-Streptococcus mutans IgG and IgA analysis in children with or without gingivitis

Streptococcus mutans tem sido fortemente implicado como um dos agentes causadores da cárie dentária, sendo freqüentemente isolado da placa dentária humana. Neste estudo, examinamos a reatividade dos anticorpos IgG e IgA anti-S.mutans em amostras de fluido gengival de crianças com e sem gengivite, a fim de medir a participaçäo deste microrganismo na reaçäo inflamatória envolvendo os tecidos gengivais. Nossos achados mostraram um nível aumentado de IgG anti-S.mutans no fluido gengival de crianças com gengivite

Anticorpos específicos anti-Streptococcus mutans na cárie dentária / Streptococcus mutans especific antibodies in dental carie

Neste trabalho, usando ELISA e DOT-BLOT os autores analisaram os níveis séricos e salivares de IgG e IgA para antígenos solúveis e de superfície de Streptococcus mutans. Três grupos de indivíduos foram analisados: a)Sem lesäo de cárie (n=10); b)Com lesäo de cárie (n=10) e c)Com cárie tratada (n=9). Indivíduos sem lesäo de cárie apresentavam títulos mais altos de IgA na saliva para antígenos solúveis de S.mutans. Anticorpos para antígenos de superfície foram detectados pelo DOT-BLOT na fraçäo IgG sérica e, seus níveis eram mais elevados nos indivíduos com lesäo de cárie

Fatores de prognóstico da queilite actínica analisados por imuno-histoquímica e citometria estática: estudo comparativo com leucoplasias associadas a displasias, e carcinomas espinocelulares / Prognostic parameters of actinic cheilitis analysed by immunohistochemical and estatic cytometry: comparative study with leukoplakia combined with dysplasia and squamous cell carcinoma

As lesöes cancerizáveis podem manter-se estáveis, regredir ou sofrer transformaçöes neoplásica. Nos fatores de prognóstico, classicamente estabelecidos, repousam dogmas e elevado grau de subjetividade. Para caracterizar a expressäo imuno-histoquímica de p53, CD31, TGFx e PCNA e avaliar o conteúdo de DNA nuclear pela citometria estática foram selecionados 13 casos de queilite actínicas. Nove casos de hiperplasias, 12 casos de leucoplasias e 13 casos de neoplasias, situados no lábio, foram submetidos aos mesmos exames. Os resultados indicaram as alteraçöes da proteína p53 como as mais significativas nas queilites actínicas. Em lesöes positivas para p53, 50 por cento apresentaram um conteúdo aneuplóide, indicando a precocidade destas alteraçöes e assimilando sua propensäo para malignidade. Nas queilites actínicas, a marcaçäo do TGFx exibiu um padräo intermediário entre lesöes hiperplásicas e neoplásicas. Os índices de proliferaçäo, obtidos pela expressäo de PCNA, foram crescentes a partir das lesöes hiperplásicas até os carcinomas. A densidade vascular, aferida pela contagem de vasos marcados com CD31, apresentou padräo similar. Na análise de citometria de imagem, todas as lesöes hiperplásicas mostraram conteúdo diplóide. As queilites actínicas e leucoplasias, em nove casos, apresentaram histogramas aneuplóides. Os carcinomas exibiram padräo aneuplóide em dez casos. A expressäo dos marcadores p53, CD31, PCNA e TGFx e a mensuraçäo da ploidia, foram caracterizadas em lesöes de queilites actínicas, podendo ser utilizadas como indicadores de prognóstico nas lesöes cancerizáveis

Detecçäo e caracterizaçäo das classes de anticorpos anti-Streptococcus mutans presentes na saliva de crianças em diferentes fases de instalaçäo da dentiçäo decídua / Detection and characterization of salivary antibodies against S. mutans in edentulous and dentate children

Um total de 52 crianças, pertecentes à faixa etária de 3 a 34 meses e em diferentes fases de dentiçäo, foram avaliadas quanto à presença de anticorpos salivares dirigidos contra antígenos protéicos de um extrato de Streptococcus mutans. Crianças edêntulas (G1), com dentes anteriores erupcionados (G2), ou com molares decíduos erupcionados (G3) foram selecionadas para o presente estudo. Extrato da bactéria (S. mutans ATCC 25175) foi obtido, e a detecçäo dos anticorpos salivares foi realizada através da técnica ELISA. Apenas 5 por cento das amostras dos G2 ou G3 apresentaram níveis baixos ou indetectáveis de IgA anti-S. mutans. Nas crianças edêntulas essa porcentagem também foi baixa, em torno de 8 por cento (1/12). Com relaçäo à IgG e IgM, respectivamente 83 por cento (10/12) e 67 por cento (8/12) amostras do G1 apresentou valores baixos ou indetectáveis de anticorpos. Nas amostras do G2, 70 por cento apresentaram títulos baixos de IgM e IgG, e nas amostras do G3, 57 por cento apresentaram valores baixos para IgG e 63 por cento para IgM, respectivamente. A separaçäo eletroforética do extrato revelou que a maioria das amostras apresentaram IgA, IgG e IgM dirigidos contra determinadas proteínas, tais como as de 150 kDa, 74 kDa e 39 kDa. Outras amostras apresentaram anticorpos que reconheceram apenas algumas das bandas reveladas por SDS-PAGE. Apenas 1 amostra do G1, reconheceu a banda de 185 kDa com conjugado anti-IgM e duas amostras do G3 apresentaram IgA anti-antígeno I/II. Nenhuma das amostras apresentou IgG anti-antígeno I/II. É possível que, a exposiçäo freqüente da bactéria seja necessária para haver resposta específica a adesina I/II

Estudo imuno-histoquímico do carcinoma adenóide cístico de glândula salivar menor / Immunohistochemical study of minor salivary gland's adenoid cystic carcinoma

A expressäo de um painel de anticorpos, constituídos pelas citoqueratinas 7, 8, 10, 13, 14, 18 e 19, vimentina e HHF-35, foi estudada em 21 casos de carcinomas adenóide císticos de glândula salivar menor, de diferentes sub-tipos histológicos, utilizando-se a técnica da imunohistoquímica, pelo método da estreptpavidina-biotina. Os resultados mostraram que nos tumores cribriformes, as células luminas das estruturas ductais foram positivas para as citoqueratinas 7, 8, 14, 18 e 19 e negativas para a vimentina e HHF-35, enquanto as células externas dos ductos, as células que revestiam os espaços pseudo-císticos e as células periféricas dos cilindros foram negativas para as citoqueratinas testadas e positivas para a vimentina e HHF-35. Nos tumores tubulares, enquanto as células internas dos ductos mostraram-se positivas para as citoqueratinas 7, 8, 14, 18 e 19 e negativas para vimentina e HHF-35, as células periféricas das estruturas ductais, apresentaram-se sempre positivas para a vimentina e HHF-35 e ocasionalmente positivas para a citoqueratina 14. Nas neoplasias do subtipo sólido, observou-se positividade esporádica das células, especialmente para as citoqueratinas 7 e 14, bem como para a vimentina. Os nossos achados mostraram que o carcinoma adenóide cístico, de um modo geral, mimetiza, em seu perfil imuno-histoquímico, o segmento de ducto intercalado da glândula salivar normal, apresentando variaçöes que sugerem diferentes graus de diferenciaçäo para os seus três subtipos histológicos. Os tumores tubulares representam a variante mais diferenciada, os tumores sólidos, o subtipo menos diferenciado, e os tumores cribiformes, neoplasias de um grau intermediário de diferenciaçäo entre aquele visto nas outras duas variantes histológicas

Presença de Candida Albicans e anticorpos anti-candida na saliva de crianças normais e respiradoras bucais / The presence of Candida Albicans and candida sp in the saliva of mouth breathing children

A presença de Candida Albicans e Candida sp foi verificada na saliva de 65 crianças de 3 a 14 anos de idade, das quais 34 eram respiradoras bucais. Foi também obtido um antígeno de C. Albicans de fácil preparaçäo e que serviu para detectar presença de imunoglobulinas salivares através da técnica de ELISA. Os resultados mostraram isolamento semelhante a do número de leveduras, porém os respiradores bucais apresentaram menor quantidade de C. Albicans. Anticorpos das classes IgG e IgM näo foram detectados nas salivas analisadas. Anticorpos da classe IgA foram encontrados em ambos os grupos, independente dos hábitos respiratórios

Mucocutaneous Leishmaniasis: a study of oral lesions by peroxidase-antiperoxidase technique / Leishmaniose muco-cutânea: estudo de lesões de boca pela técnica da peroxidase-antiperoxidase

A Leishmania Braziliensis, o agente etiológico da leishmaniose muco-cutânea, é um parasita de difícil visualização em cortes histológicos de rotina. Foram estudados oito casos de mucosa bucal pelo H.E. e técnica imuno-histoquímica. Observamos positividade de 5 dos 8 casos, para o anticorpo utilizado

Detecçäo de anticorpos IgG para o Bacteroides (Porphyromanas) gingivalis e Bacteroides Intermedius (Prevotella intermedia) em lesöes periapicais crônicas pela técnica de imunofluorescência indireta / The verify the presence of immunoglobulin G with anticorpic specificity to the Bacteroides intermedius and Bacteroides gingivalis by employing the immunofluorescence technique

Lesöes periapicais crônicas foram avaliadas pela técnica de imunofluorescência indireta com o propósito de estimar a presença de anticorpos IgG específicos para o Bacteroides gingivalise Bacteroides intermedius. Das 15 amostras examinadas, 7 (46,6 por cento) apresentaram reatividade anticórpica

Anticorpos naturais e infecção: anticorpos naturais na doença de chagas e na paracoccidioidomicose / Natural antibodies and infection: natural antibodies in chagas’disease and in paracoccidioidomycosis

Anticorpos naturais para antígenos próprios e exógenos foram analisados pela técnica de ELISA, em 80 soros de pacientes cronicamente infectados pelo T. cruzi e, em 40 soros de indivíduos sofrendo de uma micose profunda, frequentemente encontrada na América Latina (Paracoccidioimicose). Cerca de 80% dos indivíduos do primeiro grupo tinham níveis significativamente elevados de anticorpos antilaminina (M=4,75, DP±1,88) quando comparados com os controles saudáveis e, diferentes especificidades de anticorpos estavam associadas com antilaminina nos soros chagásicos. Foram observados anticorpos reativos com as proteínas do citoesqueleto, especialmente com a banda 3 e seus peptídeos, como o de 62 kDa. Por meio de cromatografia, em Proteina-A Sepharose, mostramos que uma parte significante do antiGal natural pode estar ligada por sua região Fab a outra molécula de imunoglobulina e/ou a sitios- alternativos de ligação na Proteina A. O achado de IgG antiGal nos imunocomplexos reforçam a primeira hipótese. Todavia, é posslvel que algumas IgG antlGal pertençam ao subgrupo....

Células de Langerhans na gengiva inflamada: identificaçäo por meio da proteína S-100 das células de Langerhans na gengiva inflamada / Langerhan's cells in gingivitis: identification through S-100 protein of Langerhan's cells in inflamed gingiva

O propósito do trabalho é avaliar a efetividade do anticorpo anti-Proteína S-100 na revelaçäo da célula de Langerhans em gengivas inflamadas. A nossa amostra constou de pacientes de ambos os sexos, portadores de gengivite graus 1, 2 e 3, bem como material do arquivo do Serviço de Patologia Cirúrgica da FOUSP, de casos diagnosticados como gengivite discreta, moderada e intensa. Os resultados, tanto das biópsias como do material de arquivo, revelou a presença das células de Langerhans distribuídas por toda a espessura do epitélio, variando de acordo com o grau de inflamaçäo, revelando a dependência da interaçäo hospedeiro-parasita na gengivite