Solitary fibrous tumor: Two cases report with a focus on the differential diagnosis / Tumor Fibroso Solitário: Relato de dois casos com foco no diagnóstico diferencial

Solitary fibrous tumor (SFT) is a neoplasm of fibroblastic/myofibroblastic origin with intermediate biological behavior. We report here two cases of SFT affecting an unusual anatomical site in 58-year-old and 40-year-old female patients and discuss the differential diagnosis of this lesion. In case 01, the lesion showed the clinical appearance of an asymptomatic "blister" with normal color, rubbery consistency, measuring 0.3 cm, and affected the lower lip; while in case 02, a symptomatic red nodular lesion with a soft consistency and measuring 0.5 cm affected the floor of the mouth. Excisional biopsies were performed. Microscopically, two well-delimited benign neoplasms were observed, exhibiting the proliferation of ovoid to spindle-shaped mesenchymal cells, vascular spaces with staghorn arrangement, and the absence of mitosis figures. Immunohistochemistry was performed in case 01 to assist in the diagnosis. Weak and diffuse immunostaining was observed for α-SMA and intense and diffuse immunopositivity for Bcl-2 and CD34. Based on histopathological and immunohistochemical features, a diagnosis of SFT was rendered in both cases. The low occurrence and nonspecific clinical features of oral SFT may make its clinical diagnosis difficult. Also, morphological and immunohistochemical are essential for differential diagnosis with other mesenchymal neoplasms.(AU)

O tumor fibroso solitário (TFS) é uma neoplasia de origem fibroblástica/miofibroblastica com comportamento biológico intermediário. Nesse artigo relatamos dois casos de TFS afetando sítios anatômicos incomuns em pacientes do sexo feminino de 58 anos e 40 anos e discutir os seus diagnósticos. No caso 01 clinicamente a lesão apresentou um aspecto de "bolha" assintomática, coloração normal da mucosa, consistência borrachoide medindo 0,3 cm, em região de lábio inferior, enquanto que no caso 02, como uma lesão sintomática, vermelha, nodular com consistência mole e medindo 0,5 cm afetando o assoalho bucal. As biópsias excecionais foram realizadas. Microscopicamente, observamos duas lesões neoplásicas bem delimitadas exibindo uma proliferação de células mesenquimais variando de ovoides a fusiformes, vasos sanguíneos em formato de "chifre de veado", com ausência de figuras de mitoses. No caso 01 foi realizado análise imuno-histoquímica para auxiliar no diagnóstico. Foi observado uma marcação fraca e difusa de α-SMA e uma intensa e difusa imunopositividade para o Bcl-2 e CD34.Baseado nos achados histopatológicos e imuno-histoquímicos o diagnóstico de TFS foi estabelecido em ambos os casos. A baixa ocorrência e os achados clínicos inespecíficos do TFS oral podem dificultar o diagnóstico clínico. Além disso, as análises morfológicas e imuno-histoquimicas são essenciais para realização do diagnóstico diferencial com outras neoplasias mesenquimais.(AU)_

Angioleiomioma oral mimetizando um granuloma piogênico: relato de caso raro / Oral Angioleiomyoma mimetizing a pyogenic granuloma: A rare case report

Angioleiomioma (AL) é um tumor benigno de origem perivascular que raramente é observado na cavidade oral, principalmente em localizações como a gengiva. Devido sua apresentação clínica inespecífica, os ALs podem mimetizar outras lesões orais, como tumores benignos de glândulas salivares e lesões reacionais, como o granuloma piogênico. O presente artigo objetiva relatar um caso raro de AL localizado em gengiva, em uma paciente de 19 anos. Clinicamente, a lesão apresentava-se como um tumor assintomático, oval, pedunculado, bem definido, com superfície lisa, consistência fibrosa e cor eritematosa, semelhante a um granuloma piogênico, Uma biópsia excisional foi realizada e o fragmento foi encaminhado para análise histopatológica, que revelou uma proliferação vascular de diversos calibres, contendo paredes musculares espessas e proliferação muscular adjacente, além de infiltrado inflamatório, predominantemente crônico, hemácias extravasadas e área de ulceração, consistente com o diagnóstico de AL inflamado. A histopatologia desempenha um papel importante no diagnóstico final de lesões raras e com características clínicas inespecíficas. A excisão cirúrgica da lesão é o tratamento de escolha mais eficaz para os ALs orais. (AU)

Angioleiomyoma (AL) is a benign tumor of smooth muscle of perivascular origin that is rarely seen in the oral cavity, mainly in locations like the gingiva. Due to their nonspecific clinical presentation, ALs can mimic other oral lesions, such as benign salivary gland tumors and reactional lesions, as a pyogenic granuloma. We reported a case of an AL located in the gingiva in a 19-year-old female patient. In clinical terms, the lesion was presented as an asymptomatic, oval, pedunculated, well-defined nodule with a smooth surface, fibrous consistency and erythematous color, similar to a pyogenic granuloma. An excisional biopsy was performed and the fragment was sent for histopathological analysis that revealed a vascular proliferation of different calibers, containing thick muscle walls and adjacent muscle proliferation, in addition to an inflammatory infiltrate, predominantly chronic, extravasated red blood cells and an area of ulceration, consistent with the diagnosis of inflamed AL. The histopathology plays an important role in the final diagnosis of rare lesions and with nonspecific clinical characteristics. The surgical excision of the lesion is the most effective treatment of choice for oral ALs. (AU)

Variability in the Epithelial Expression of Ki67 and Polarization Characteristics of Collagen in Odontogenic Cysts and Tumours

ABSTRACT Objective: To assess the proliferation of epithelium (using the Ki67 index) and the polarization pattern of collagen in selected odontogenic cysts and tumours. In addition, an exploratory analysis of the effect of inflammation on the proliferation rate was done. Material and Methods: Following immunohistochemical staining, the labelling/proliferation index of Ki67 was calculated. The thickness and corresponding polarization colour of 100 juxta-epithelial picrosirius red-stained collagen fibers were assessed using linear micrometry with an eyepiece reticule under × 1000 magnification. Inflammation was graded subjectively as mild, moderate, and severe. Results: Overall Ki-67 expression was higher in the radicular cyst, Odontogenic Keratocyst, Ameloblastoma, while suprabasal Ki-67 positivity was maximum in Odontogenic Keratocyst. The stromal collagen fibers in Ameloblastoma showed predominantly green birefringence, whereas Odontogenic Keratocyst had orange birefringence. There was no significant association of inflammation with Ki-67 expression or birefringence patterns. Conclusion: The highest Ki67 expression in the radicular cyst, followed by Odontogenic Keratocyst and Ameloblastoma. Differences in the collagen maturation pattern were noted innately in five lesions studied and were further influenced by inflammatory changes. Epithelial proliferation and concomitant expression of thickness and maturity of the stromal collagen are innate features of the lesion further influenced by inflammation in various odontogenic cysts and tumours and may, in turn, guide the clinical behavior.

Comparative Assessment of E-cadherin's Expression between the Metastatic and Non-metastatic Oral Squamous Cell Carcinoma: An Immunohistochemical Study

ABSTRACT Objective: To identify the clinicopathological correlation of E-cadherin expression in metastatic and non-metastatic oral squamous cell carcinoma (OSCC). Material and Methods: A total of 90 paraffin-embedded tissue sections of OSCC were retrieved from the registry. The total selected samples were 45 cases each from the primary lesions of metastatic and non-metastatic OSCC. One section was subjected to routine Hematoxylin and eosin stain and another to immunohistochemical analysis for E-cadherin expression. Results: A non-significant (p˃0.05) increased expression is seen in the non-metastatic group compared to the metastatic group, with predominantly membrane as the staining site in either group. However, the expression of E-cadherin did not reveal any statistically significant association with independent variables such as age, gender, and adverse habits of the patients (p>0.05). On the other hand, with respect to the histological differentiation of OSCC, a significant association (p<0.001) was observed with the well-differentiated type of metastatic OSCC. Conclusion: E-cadherin was useful to some extent in predicting regional metastasis. However, further studies using a panel of biomarkers with increased sample size may help us understand the process involved in metastasis.

Effect of Thymoquinone on skeletal muscle regeneration via assessment of Pax-7 and Myo-D expression in the DMBA-treated hamster pouch / Efeito da Timoquinona na regeneração muscular esquelética através da avaliação da expressão das proteínas Pax-7 e Myo-D em bolsa jugal de hamsters tratados com DMBA

Objective: Pax-7 and Myo-D regulate satellite cells' activation and differentiation, thus muscle regeneration following damage. This research aimed to investigate the effect of Thymoquinone (TQ) on skeletal muscle regeneration following 7,12-dimethylbenz-(a)-anthracene (DMBA)-induced injury in the hamster buccal pouch via immunohistochemical assessment of Pax-7 and Myo-D expression. Material and Methods: 65 male golden Syrian hamsters were divided into 3 groups: Group 1: (n=5) received no treatment. Group 2: (n=20) served as a positive control. The left buccal pouches were painted with the carcinogen 3/week/ 6weeks. Group 3: (n=40) were subdivided into two equal sub-groups as follows: Group 3a: (n=20) were given one i.p. TQ injection. Group 3b: (n=20) were given two i.p. TQ injections. Five animals from each group (2 and 3) were euthanized at 24, 48 hrs, one, and two weeks after the last injection. A blood sample (2 ml) was withdrawn for assessment of TNF-α levels in serum. Serial sections of the pouches were examined histologically (H&E), and immunohistochemically (IHC) for the detection of Pax-7 and Myo-D proteins. Results: double i.p injections of TQ resulted in a significant elevation in the level of TNF-α from the second-day post-injection with a progressive formation of the muscle fibers (MFs) and mononuclear cells (MNCs) around the deeper blood vessels. At 14 days, no statistically significant difference was found between this group and group '2', while the difference remained significant compared to groups '1' and '3a'. The muscle fibers were more mature and compact. IHC results showed positive expression of the perivascular mononuclear cells (MNCs) to both Pax-7 and Myo-D with positive reactivity of the peripheral nuclei of muscle fibers to Pax-7 compared to the negative reaction in the positive control group. Conclusion: early and two TQ injections had a promising effect on the induction of striated muscle regeneration, mainly by non-myogenic stem cells (AU)

Objetivo: Pax-7 e Myo-D regulam a ativação e diferenciação de células satélites durante a regeneração muscular pós-trauma. Assim, objetivamos investigar o efeito da timoquinona (TQ) na regeneração muscular esquelética após injúria causada por 7,12 dimetilbenzantraceno (DMBA) em bolsa jugal de hamsters, através da análise imuno-histoquímica de Pax-7 e Myo-D. Material e Métodos: 65 hamsters-sírios machos foram divididos em 3 grupos: Grupo 1: (n=5) controle negativo, sem tratamento. Grupo 2: (n=20) controle positivo. A bolsa jugal do lado esquerdo recebeu aplicação do DMBA por 3 e 6 semanas. Grupo 3: (n=40) receberam aplicação de DMBA e foram então subdivididos em: Grupo 3a: (n=20) que recebeu 1 injeção intraperitoneal (ip) de TQ e Grupo 3b: (n=20) que recebeu duas injeções ip de TQ. Cinco animais dos grupos 2 e 3 foram eutanasiados em 24 horas, 48 horas, 7 dias e 14 dias após a administração de DMBA e da última injeção de TQ. Amostras de sangue (2 ml) foram coletadas para avaliação dos níveis séricos de TNF-α. Cortes seriados da bolsa jugal dos animais foram analisados histologicamente (H&E), e através de imunohistoquimica (IHC) para avaliação das proteínas Pax-7 e Myo-D. Resultados: duas injeções ip de TQ aumentaram os níveis séricos TNF-α à partir do segundo dia pós-administração com formação progressiva de fibras musculares (MFs) e células mononucleares (MNCs) ao redor dos vasos sanguíneos. No dia 14, não houve diferença estatística entre o grupo 3b e o grupo 2, enquanto a diferença permaneceu entre o grupo 1 e 3a. As MFs apresentavam-se mais maduras e compactas. A IHC mostrou expressão de Pax-7 e Myo-D nas MNCs ao redor dos vasos, e houve expressão nuclear de Pax-7 nas MFs no grupo 2. Conclusão: ambos regimes de administração do TQ, 1 ou 2 aplicações ip, apresentaram efeito promissor na indução da regeneração muscular esquelética, principalmente nas células não-miogênicas.(AU)

Investigação da presença do bacilo Mycobacterium tuberculosis em amostras sugestivas de tuberculose oral / Investigation of the presence of Mycobacterium tuberculosis bacillus in samples suggestive of oral tuberculosis

A Tuberculose (TB) é um considerável problema de saúde pública mundial. Em 2021, de acordo com a Organização Mundial de Saúde (OMS) estimou-se que, no mundo, cerca de 10,6 milhões de pessoas desenvolveram TB e 1,4 milhão morreu devido à doença. Com isso, tornou-se a principal causa de morte por infecção em todo o mundo e uma das dez principais causas de morte em geral. A TB tem o pulmão como o principal sítio de acometimento, sendo denominada de TB Pulmonar (TBP). Porém pode ser diagnosticada em muitos órgãos do corpo de maneira Extrapulmonar (TBEP), sendo o linfonodo o local mais comum. Porém, o envolvimento pleural, neurológico, sinovial, pericárdico, abdominal, geniturinário e oral tem sido descrito, o que mostra a potencial capacidade de disseminação do Mycobacterium tuberculosis (MTB). A detecção do Bacilos Álcool-Ácido Resistentes (BAAR), geralmente ocorre pela observação das características microscópicas da morfologia dos tecidos, presença de granulomas com necrose caseosa, histiócitos epitelióides e células gigantes do tipo Langhans, associada à coloração para BAAR, pela técnica de Ziehl Neelsen (ZN). Ademais, investigação por imuno-histoquímica (IHQ), testes de amplificação de ácido nucleico pela Reação em Cadeia da Polimerase Hemianinhada (nested-PCR) e pelo sistema de detecção automatizado GeneXpert® MTB/RIF são métodos aplicados para o diagnóstico da infecção. Com isso, este estudo teve como objetivo investigar a presença do bacilo Mycobacterium tuberculosis em amostras orais em parafina que continham granulomas com necrose caseosa. Ao todo, como critério de inclusão, foram selecionadas biópsias que apresentaram granulomas com necrose caseosa, sugerindo o diagnóstico de TB. Foram excluídas aquelas que após a revisão das fichas e histológicas, não apresentavam os granulomas exibindo necrose caseosa e aquelas que foram de biópsias intraósseas. O M. tuberculosis foi procurado por meio da coloração de ZN, IHC, nested-PCR e ensaios GeneXpert® MTB/RIF. Foram então selecionadas nove amostras com granulomas com necrose caseosa. Houve predominância de indivíduos do sexo masculino (2,5:1), com idade média de 50 anos (±23,08; 19-89), sendo a língua o local anatômico mais afetado (n=4). O bacilo não foi identificado pela técnica de ZN em nenhuma amostra, e a coloração por IHC mostrou um padrão granular grosseiro, sugerindo M. tuberculosis, em três delas. Nested-PCR e os ensaios GeneXpert® MTB/RIF foram positivos em duas e três das amostras, respectivamente. Conclui-se que testes moleculares e IHC podem ser métodos auxiliares úteis para casos suspeitos de tuberculose.

Tuberculosis (TB) is a significant global public health issue. In 2021, according to the World Health Organization (WHO), it was estimated that approximately 10.6 million people developed TB worldwide, and 1.4 million died from the disease. Consequently, it became the leading cause of death due to infection worldwide and one of the top ten overall causes of death. TB primarily affects the lungs and is referred to as Pulmonary TB (PTB). However, it can be diagnosed in various organs of the body as Extrapulmonary TB (EPTB), with lymph nodes being the most common site of involvement. Moreover, pleural, neurological, synovial, pericardial, abdominal, genitourinary, and oral involvement have been described, demonstrating the potential for Mycobacterium tuberculosis (MTB) dissemination. The detection of Acid-Fast Bacilli (AFB) typically involves the observation of microscopic tissue characteristics, the presence of granulomas with caseous necrosis, epithelioid histiocytes, and Langhans giant cells, along with AFB staining using the Ziehl-Neelsen (ZN) technique. Furthermore, immunohistochemistry (IHC), nucleic acid amplification tests by Nested Polymerase Chain Reaction (nested-PCR), and the automated detection system GeneXpert® MTB/RIF are methods employed for diagnosing the infection. Therefore, the aim of this study was to investigate the presence of Mycobacterium tuberculosis in paraffin-embedded oral samples containing granulomas with caseous necrosis. Inclusion criteria were based on the selection of biopsies displaying granulomas with caseous necrosis, suggesting a diagnosis of TB. Biopsies without these features upon review of records and histological findings, as well as intraosseous biopsies, were excluded. M. tuberculosis was sought using ZN staining, IHC, nested-PCR, and GeneXpert® MTB/RIF assays. Nine samples with granulomas and caseous necrosis were selected. The majority of individuals were male (2.5:1 ratio), with an average age of 50 years (±23.08; range 19-89), and the tongue was the most affected anatomical site (n=4). AFB was not identified by the ZN technique in any of the samples, and IHC staining exhibited a coarse granular pattern, suggestive of M. tuberculosis, in three of them. Nested-PCR and GeneXpert® MTB/RIF assays yielded positive results in two and three of the samples, respectively. In conclusion, molecular tests and IHC can be valuable auxiliary methods for suspected cases of tuberculosis.

Recorrência do ameloblastoma: análise de fatores clínicoradiográficos e imunoexpressão de hMSH2, hMLH1 e KI-67 / Ameloblastoma recurrence: analysis of clinical-radiographic factors and immunoexpression of hMSH2, hMLH1 and KI-67

Introdução: O ameloblastoma é uma neoplasia odontogênica benigna, que apresenta altas taxas de recorrência pós-operatória. Diversos estudos mostram a relação entre as características clínico-patológicas e as modalidades de tratamento na recorrência do ameloblastoma. Os mecanismos moleculares envolvidos com a etiopatogenia deste tumor são pouco conhecidos, e apesar de alterações no Sistema Mismatch favorecerem o desenvolvimento de diferentes neoplasias humanas, a importância destes no desenvolvimento do ameloblastoma ainda permanece pouco compreendido. Objetivo: Identificar os fatores clínico-patológicos associados à recorrência do ameloblastoma, bem como investigar o papel da imunoexpressão das proteínas hMLH1, hMSH2 e Ki-67 na recidiva desses tumores odontogênicos. Metodologia: Tratou-se de um estudo descritivo, transversal e restrospectivo, com uma amostra constituída por 22 casos de ameloblastomas recidivantes e 22 casos não-recidivantes. A análise imunoistoquímica foi realizada de forma quantitativa, considerando a localização celular (nuclear) das proteínas estudadas. O teste de McNemar foi utilizado para comparar as variáveis entre lesões da 1ª biópsia e recorrentes de AMB. A sobrevida livre de recorrência foi analisada pelo método de Kaplan-Meier e as funções de sobrevida foram comparadas de acordo com as variáveis pelo teste log-rank. Resultados: O gênero mais acometido foi o feminino (n=24; 54,5%), com média de idade de acometimento de 39,1 ± 19,8 anos, sendo 45,5% (n=20) leucodermas. A região posterior de mandíbula foi a mais frequente no grupo recidivante (n=18, 81,8%) e também para os casos que não apresentaram recidivas (n=16, 72,8%). O tempo livre de recorrência foi de 50,0 (34,5 ­ 63,6) meses. Foram fatores significativamente associadas à recorrência dos ameloblastomas: presença de expansão da cortical (p=0,0089), ausência de reconstrução óssea (p=0,018), tratamento conservador (p=0,021), perda de imunoexpressão de hMSH2 (p=0,006) e hMLH1 (p=0,038) e forte imunoexpressão de Ki-67 (p=0,029). Conclusão: Baseado nos achados desta pesquisa, aspecto radiográfico, modalidade do tratamento e imunoexpressão de proteínas do Sistema Mismatch e Ki-67 podem ser utilizados como indicadores para a recorrência em ameloblastomas (AU).

Introduction: Ameloblastoma is a benign odontogenic neoplasm, which has high rates of postoperative recurrence. Several studies show the relationship between clinicopathological characteristics and treatment modalities in ameloblastoma recurrence. The molecular mechanisms involved in the etiopathogenesis of this tumor are little known, and although changes in the Mismatch System favor the development of different human neoplasms, their importance in the development of ameloblastoma still remains poorly understood. Objective: To identify clinical and pathological factors associated with ameloblastoma recurrence, as well as to investigate the role of immunoexpression of hMLH1, hMSH2 and Ki-67 proteins in the recurrence of these odontogenic tumors. Methodology: This was a descriptive, cross-sectional and retrospective study, with a sample consisting of 22 cases of recurrent ameloblastoma and 22 non-recurrent cases. Immunohistochemical analysis was performed quantitatively, considering the cellular (nuclear) location of the studied proteins. McNemar's test was used to compare variables between 1st biopsy and recurrent AMB lesions. Recurrence-free survival was analyzed using the Kaplan-Meier method and survival functions were compared according to variables using the log-rank test. Results: The most affected gender was female (n=24; 54.5%), with a mean age of involvement of 39.1 ± 19.8 years, 45.5% (n=20) being white. The posterior region of the mandible was the most frequent in the relapsed group (n=18, 81.8%) and also for the cases that did not present recurrences (n=16, 72.8%). Recurrence-free time was 50.0 (34.5 ­ 63.6) months. Factors significantly associated with recurrence of AMBs were: presence of cortical expansion (p=0.0089), absence of bone reconstruction (p=0.018), conservative treatment (p=0.021), loss of hMSH2 immunoexpression (p=0.006) and hMLH1 (p=0.038) and strong Ki-67 immunoexpression (p=0.029). Conclusion: Based on the findings of this research, radiographic appearance, treatment modality and immunoexpression of proteins from the Mismatch System and Ki-67 can be used as indicators for recurrence in ameloblastomas (AU).

PTEN e p53 no adenoma pleomórfico e no carcinoma ex-adenoma pleomórfico: expressão imuno-histoquímica / PTEN and p53 in pleomorphic adenoma and carcinoma ex-pleomorphic adenoma: immunohistochemical expression

As neoplasias de glândula salivar são um grupo extenso e complexo de entidades benignas e malignas que atingem tanto as glândulas salivares maiores quanto as menores. Essas patologias representam um desafio para os profissionais tanto pelos seus aspectos de diagnóstico quanto de tratamento, apresentando uma gama de comportamentos biológicos e aspectos histológicos semelhantes. Por este motivo, compreender melhor a biologia desses tumores é fundamental. O objetivo deste trabalho foi analisar, por meio da imuno-histoquímica, a presença e distribuição das proteínas PTEN e p53 de maneira qualitativa e quantitativa, em 20 casos de adenoma pleomórfico e 5 casos carcinoma ex-adenoma pleomórfico (CXAP), além de analisar a morfologia de cada caso, assim como os dados clínicos. A maioria dos pacientes foi de mulheres leucodermas, sendo que os pacientes de CXAP eram mais velhos que os de adenoma pleomórfico. A proteína PTEN foi observada em 80% dos casos do estudo, sendo que houve predominância de expressão citoplasmática sobre a nuclear. Não houve padrão de expressão para a proteína, sendo que células de todas as diferenciações e morfologias expressaram o marcador. A proteína p53 esteve presente em 45% dos casos de adenoma pleomórfico, mas todos os casos de CXAP do estudo foram positivos para o marcador, entretanto, em todos os casos positivos menos de 5% das células exibiram a marcação. Em conclusão, não houve um perfil de expressão para PTEN ou p53 nas neoplasias estudadas. Embora a p53 tenha sido mais expressa no CXAP, a quantidade de células com marcação nos casos positivos foi muito baixa.

Estudo da imunoexpressão das proteínas ING3 e ciclina D1 nas displasias epiteliais e carcinomas epidermoides de língua / Study of the immunoexpression of ING3 and cyclin D1 proteins in epithelial dysplasias and squamous cell carcinomas of the tongue

O carcinoma epidermoide oral (CEO) é uma neoplasia maligna de patogenia complexa, já a displasia epitelial oral (DEO) é uma entidade que, na dependência de sua evolução, exibe riscos de transformação maligna para o CEO. A expressão alterada de genes supressores tumorais e proteínas reguladoras do ciclo celular apresentam relação com a etiopatogênese de diferentes cânceres. Entre os genes supressores tumorais destaca-se a família de inibidores de crescimento (inhibitor of growth - ING), que impedem o crescimento celular descontrolado. Dentre as proteínas reguladoras do ciclo celular podemos citar a Ciclina D1, que atua na progressão da fase S para a fase G1, permitindo a proliferação celular. O objetivo do presente estudo foi analisar a imunoexpressão das proteínas ING3 e Ciclina D1 em 28 espécimes de DEO e 25 de CEO localizados em língua, bem como avaliar morfologicamente e reclassificar as lesões segundo os critérios estabelecidos pela Organização Mundial da Saúde (OMS), além de modelo binário (Kujan et al. 2006), para DEO, e modelo buds-depth of invansion (BD) (Almagunsh et al. 2015) para CEO. A imunoexpressão das proteínas foi analisada de forma quantitativa, considerando a localização celular (citoplasmática e/ou nuclear para ING3 e nuclear para Ciclina D1) presentes no componente epitelial. A expressão das proteínas foi comparada entre os dois grupos de lesões, bem como com os parâmetros clínico-patológicos das lesões estudadas, através dos testes estatísticos Mann-Whitney (U) e teste de correlação de Spearman adotando um nível de significância de 5% para todos os testes considerando o valor de p ≤ 0,05. Dos 28 casos de DEO analisados 53,6% apresentaram-se como lesões de alto risco segundo o modelo binário, assim como dos 25 casos de CEO analisados foram considerados escores de alto risco (48%) de acordo com o modelo BD. Não foram encontradas associações estatisticamente significativas entre as variáveis morfológicas das lesões estudadas e as características clínicas (p>0,05). Com relação a expressão de Ciclina D1, esta foi significativamente maior em DEO quando comparada aos casos de CEO (p<0,05). A expressão de ING3 núcleo-citoplasmática foi significativamente menor nos casos de CEO, quando comparada aos casos de DEO (p<0,05), já a expressão de ING3, restrita ao citoplasma, foi maior nos casos de DEO, quando comparadas aos casos de CEO (p<0,05). Os resultados do presente estudo sugerem que a expressão das proteínas não tem relação com as gradações das lesões, porém, há notável diminuição da expressão nuclear de ING3 conforme a progressão maligna, indicando função supressora tumoral alterada desta proteína em DEO e CEOs. Destacamos, ainda, o aumento da expressão de Ciclina D1 em DEOs, mostrando que as lesões detêm uma taxa de proliferação celular significativa (AU).

Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is a malignant neoplasm of complex pathogenesis. In turn, oral epithelial dysplasia (OED) is an entity that, depending on its evolution, exhibits varied risks of malignant transformation to OSCC. The altered expression of tumor suppressor genes and cell cycle regulatory proteins are related to the etiopathogenesis of different malignant tumors. Among the tumor suppressor genes, the family of inhibitors of growth (ING) stands out, which prevents uncontrolled cell formation. Amid the cell cycle regulatory proteins, Cyclin D1 acts in the progression from S to G1 phase, allowing cell proliferation. The aim of the present study was to analyze the immunoexpression of ING3 and Cyclin D1 proteins in 28 OED and 25 OSCC specimens, located on the tongue, as well as to morphologically evaluate and to reclassify the lesions following the criteria established by World Health Organization (WHO) and the model proposed by Kujan et al. (2006), for OED; for OSCC, the system proposed by Almagunsh et al. (2015) was used. Protein immunoexpression was quantitatively evaluated, considering the cellular location (cytoplasmic and/or nuclear for ING3 and nuclear for Cyclin D1), present in the epithelial component. Protein expression was compared between the two groups of samples, as well as with the clinical-pathological parameters of the lesions studied, through the Mann-Whitney (U) statistical tests and the Spearman correlation test, adopting a significance level of 5% for all tests considering the value of p≤ 0.05. Of the 28 cases of OED analyzed, 53.6% were high-risk lesions according to the binary model and of the 25 cases of OSCC analyzed, 48% were considered high-risk scores according to the BD model. No statistically significant associations were found between the morphological variables of the lesions studied and the clinical characteristics (p>0.05). A statistically significant difference was observed between the absence of ING3 expression and the grading of OEDs, according to the WHO (p<0.05). Regarding the expression of Cyclin D1, it was significantly higher in OED, when compared to OSCC cases (p<0.05). Nucleocytoplasmic ING3 expression was significantly lower in OSCC cases when compared to OED cases (p<0.05). Cytoplasm-restricted ING3 expression was higher in OED cases when compared to OSCC cases (p<0.05). The results of the present study suggest that, although there is no evidence of a significant relationship between the expression of proteins and the histopathological gradations of the lesions, there is a notable decrease in the nuclear expression of ING3, with an increase in the severity of the lesions, indicating an altered tumor suppressor function of this protein in OED and OSCCs. We also highlight the increased expression of Cyclin D1 in OEDs, showing that these lesions have a significant rate of cell proliferation (AU).

Biomarcadores da transição epitélio-mesenquimal em desordens potencialmente malignas e carcinoma de células escamosas de língua oral / Biomarkers of epithelial-mesenchymal transition in potentially malignant disorders and squamous cell carcinoma of the oral tongue

Durante a carcinogênese oral, as células malignas adquirem um fenótipo agressivo que resulta em aumento da motilidade individual e na capacidade para invadir tecidos circunvizinhos. Para tanto, as células epiteliais malignas desenvolvem um processo regulatório e programado denominado transição epitélio-mesenquimal (TEM), que é crucial para aquisição deste fenótipo maligno agressivo. O objetivo do presente estudo foi investigar o papel da expressão imunoistoquímica de proteínas sinalizadoras da TEM em displasias epiteliais orais e em carcinomas de células escamosas de língua oral (CCELO), avaliando suas respectivas associações com parâmetros clínico-patológicos e de prognóstico. Inicialmente, objetivando obter uma compreensão aprofundada sobre o tema proposto, foram desenvolvidas duas revisões sistemáticas de literatura avaliando o papel da TEM como possível marcador de prognóstico em casos diagnosticados como displasia epitelial oral e o papel dos fatores de transcrição nuclear associados ao processo de TEM na regulação da plasticidade celular e no compartamento biológico em linhagens celulares de carcinoma de células escamosas em região de cabeça e pescoço. Para o estudo imunoistoquímico, foram selecionados 47 casos de displasias epiteliais orais e 41 casos diagnosticados como CCELO, nos quais foram analisados a imunoexpressão das proteínas Twist1, Snail1, E-caderina e N-caderina. Foram investigadas possíveis associações entre o padrão de expressão destas proteínas com a gradação histopatológica das displasias epiteliais e com os aspectos clínico-patológicos, recidiva e sobrevida em CCELO. Foram observados diferentes padrões de marcação entre os grupos analisados, observando-se uma perda significativa da expressão da E-caderina membranar em casos de CCELO em comparação aos casos de displasias epiteliais orais (p = <0.0001). Foi observado uma pior sobrevida global em casos com baixa expressão da E-caderina membranar (HR = 0.27; p = 0.033) e alta expressão do Twist1 citoplasmático (HR = 3.19; p = 0.010). Ao analisar isoladamente o parâmetro intensidade de expressão, foi observada associação entre a alta intensidade da N-caderina citoplasmática com a sobrevida global (HR = 4.93; p = 0.006). Nossos achados sugerem que a perda da expressão da E-caderina e o aumento da expressão da N-caderina e dos fatores de transcrição nuclear Twist1 e Snail1 estão associados ao desenvolvimento e progressão da carcinogênese oral. Isoladamente, a perda da expressão membranar da E-caderina e o aumento da expressão citoplasmática do Twist1 e da N-caderina foram associados a uma pior sobrevida (AU).

During oral carcinogenesis, malignant cells acquire an aggressive phenotype that results in increased individual motility and the ability to invade surrounding tissues. Therefore, malignant epithelial cells develop a regulatory and programmed process called epithelial-mesenchymal transition (EMT), which is crucial for the acquisition of this aggressive malignant phenotype. The aim of the present study was to investigate the role of immunohistochemical expression of EMT signaling proteins in oral epithelial dysplasias and oral squamous cell carcinomas of the tongue (OTSCC), evaluating their respective associations with clinicopathological and prognostic parameters. Initially, aiming to obtain a deeper understanding of the proposed topic, two systematic literature reviews were developed evaluating the role of EMT as a possible prognostic marker in cases diagnosed as oral epithelial dysplasia and the role of nuclear transcription factors associated with the MET process in regulation of cellular plasticity and biological behavior in head and neck squamous cell carcinoma cell lines. For the immunohistochemical study, 47 cases of oral epithelial dysplasias and 41 cases diagnosed with OTSCC were selected, in which the immunoexpression of Twist1, Snail1, E-cadherin and Ncadherin proteins were analyzed. Possible associations between the expression pattern of these proteins and the histopathological grading of epithelial dysplasias and with the clinicopathological aspects, recurrence and survival in OTSCC were investigated. Different staining patterns were observed between the analyzed groups, with a significant loss of membrane E-cadherin expression in cases of OTSCC compared to cases of oral epithelial dysplasias (p = <0.0001). Worse overall survival was observed in cases with low membrane E-cadherin expression (HR = 0.27; p = 0.033) and high cytoplasmic Twist1 expression (HR = 3.19; p = 0.010). When analyzing the expression intensity parameter alone, an association was observed between high cytoplasmic N-cadherin intensity and overall survival (HR = 4.93; p = 0.006). Our findings suggest that loss of E-cadherin expression and increased expression of N-cadherin and nuclear transcription factors Twist1 and Snail1 are associated with the development and progression of oral carcinogenesis. Alone, loss of membrane expression of E-cadherin and increased cytoplasmic expression of Twist1 and N-cadherin were associated with worse survival (AU).

O papel de proteínas das vias WNT/ß-Catenina, TGF-ß/BMP4 e SHH na odontogênese e odontomas / The role of proteins from the WNT/ß-Catenin, TGF-ß/BMP4 and SHH pathways in odontogenesis and odontomas

O desenvolvimento do dente depende de uma série de interações sinalizadoras recíprocas entre o epitélio oral (EO) e o ectomesênquima derivado da crista neural, a via WNT com o TGF-ß e BMP4 tem sido implicada na tumorigênese. A via de sinalização tipo Wingless (Wnt) / ß-catenina é essencial para a ativação precoce da odontogênese e no desenvolvimento de tumores odontogênicos. O TGF-ß e as BMPs tem sido associadas aos processos de dentinogênese reacionária e reparadora. A sinalização de Shh pode regular a proliferação celular no ectomesênquima dentário, controlando assim a morfogênese dentária. O objetivo da pesquisa foi investigar a atuação de algumas proteínas das vias na odontogênese e na formação de odontomas e tumores odontogênicos mistos benignos, para isto, foi desenvolvido um estudo seccional restrospectivo e imuno-histoquímico contendo 23 odontomas compostos, 21 odontomas complexos, 17 germes dentários, 05 fibro-odontomas ameloblásticos e 01 fibroma ameloblástico. Os resultados encontrados demonstraram maiores imunoexpressões da via WNT/ß-catenina no epitélio dos germes dentários (p<0,001) e no fibroma ameloblástico, enquanto que, esteve no ectomesênquima dos odontomas (p<0,001) e fibro-odontomas ameloblásticos. A via WNT/ßcatenina correlacionou-se moderadamente e significativamente com a CK14 no epitélio (p = 0,007) dos odontomas. A BMP4 foi imunoexpressa, especialmente, no ectomesênquima dos odontomas complexos (mediana = 33,7; p<0,001). A via Shh foi mais imunoexpressa no epitélio dos germes dentários (p<0,001) e no ectomesênquima dos odontomas complexos (p=0,029). De forma similar, o TGFß apresentou maior imunoexpressão no epitélio dos germes dentários (p<0,001) e no ectomesênquima dos odontomas complexos (p = 0,002). O dente em desenvolvimento exibiu maiores concentrações para estas proteínas no epitélio odontogênico nas fases de botão e capuz e a expressão diferencial ocorreu, principalmente, no ectomesênquima dos tumores, o que indica que esse componente é de fato mais proliferativo (AU).

Tooth development depends on a series of reciprocal signaling interactions between oral epithelium (EO) and neural crest-derived ectomesenchyme, the WNT pathway with TGF-ß and BMP4 has been implicated in tumorigenesis. The Wingless (Wnt)/ß-catenin signaling pathway is essential for the early activation of odontogenesis and the development of odontogenic tumors. TGF-ß and BMPs have been associated with reactionary and reparative dentinogenesis processes. Shh signaling can regulate cell proliferation in dental ectomesenchyme, thus controlling dental morphogenesis. The objective of the research was to investigate the role of some proteins in the pathways in odontogenesis and in the formation of odontomas and benign mixed odontogenic tumors. tooth germs, 05 ameloblastic fibro-odontomas and 01 ameloblastic fibroma. The results found showed higher immunoexpressions of the WNT/ß-catenin pathway in the epithelium of tooth germs (p<0.001) and in ameloblastic fibroma, while it was in the ectomesenchyme of odontomas (p<0.001) and ameloblastic fibroodontomas. The WNT/ß-catenin pathway correlated moderately and significantly with CK14 in the epithelium (p = 0.007) of odontomas. BMP4 was immunoexpressed, especially in the ectomesenchyme of complex odontomas (median = 33.7; p<0.001). The Shh pathway was more immunoexpressed in the epithelium of tooth germs (p<0.001) and in the ectomesenchyme of complex odontomas (p=0.029). Similarly, TGF-ß showed higher immunoexpression in the epithelium of tooth germs (p<0.001) and in the ectomesenchyme of complex odontomas (p = 0.002). The developing tooth exhibited higher concentrations of these proteins in the odontogenic epithelium in the bud and cap phases and the differential expression occurred mainly in the ectomesenchyme of the tumors, which indicates that this component is in fact more proliferative (AU).

Avaliação da expressão da proteína EZH2 em carcinoma adenoide cístico e adenoma pleomórfico / EZH2 immunoexpression in adenoid cystic carcinoma and pleomorphic adenoma

As neoplasias de glândulas salivares apresentam comportamentos diferenciados, que não seguem os padrões clássicos das neoplasias benignas e malignas. A raridade de algumas destas lesões dificulta ainda mais o entendimento dos mecanismos envolvidos na etiopatogenia. Marcadores moleculares como a proteína EZH2 têm sido utilizados na investigação de alterações epigenéticas em diferentes neoplasias, auxiliando na definição do diagnóstico e prognóstico das lesões. O objetivo do presente trabalho é avaliar a expressão da proteína EZH2 e descrever as características clínicas e microscópicas de amostras de carcinoma adenoide cístico (CAC) e adenoma pleomórfico (AP) com ênfase na importância da definição da malignidade da lesão. A análise dos cortes microscópicos corados em Hematoxilina e Eosina dos casos de Adenoma pleomórfico mostraram células epiteliais e mioepiteliais glandulares dispostas em lençóis e estruturas ductiformes em meio a estroma variável. Os casos de Carcinoma adenoide cístico mostraram três padrões distintos de crescimento incluindo formações tubulares, cribriformes e sólidas. Todos os casos de AP e CAC foram positivos para reação imuno-histoquímica para EZH2. As amostras de CAC apresentaram expressão de EZH2 significativamente maior comparado ao AP. As covariáveis metástase em linfonodos, recorrência, padrão histológico, presença de áreas sólidas e invasão perineural foram descritas em relação à marcação de EZH2 em amostras de CAC. Dessa forma, os resultados do estudo melhoram o entendimento das características clínicas e histológicas do CAC, assim como sobre o comportamento das lesões. Além disso, a análise mostra que o EZH2 é um potencial marcador de malignidade e ressalta a importância da validação de marcadores moleculares de alterações epigenéticas.

Salivary gland neoplasms present different behaviors, which do not follow the classic patterns of benign and malignant neoplasms. The rarity of some of these lesions makes it even more difficult to understand the mechanisms involved in the etiopathogenesis. Molecular markers such as the EZH2 protein have been used to investigate epigenetic changes in different neoplasms, helping to define the diagnosis and prognosis of the lesions. The aim of the study was to evaluate the expression of the EZH2 protein and to describe the clinical and microscopic characteristics of adenoid cystic carcinoma (ACC) and pleomorphic adenoma (PA) which emphasizes the importance of defining the malignancy of the neoplasm. Histopathological analysis of PA cases showed myoepithelial and glandular epithelial cells arranged as duct-like structures and sheets intermingled in the variable stroma and ACC cases showed the three growth patterns, tubular, cribriform and solid forms. All ACC and PA cases were positive for EZH2, with diffuse nuclear staining in neoplastic cells. The ACC samples showed significantly higher EZH2 expression compared to the PA. The covariables nodal metastasis, recurrence, growth pattern, presence of solid areas and perineural invasion have been described in relation to EZH2 staining in ACC samples. The results of the study improve the understanding of the clinical and histological characteristics of ACC, as well as on the behavior of lesions. In addition, the analysis showed that EZH2 is a potential marker of malignancy and highlights the importance of validating molecular markers of epigenetic alterations.

Estudo comparativo da expressão de ALDH1 em líquen plano oral, lesão liquenoide e leucoplasia em epitélio e no infiltrado inflamatório liquenoide / Comparative study of ALDH1 expression in oral lichen plane, lichenoid lesion and leucoplasia in epithelial and lichenoid inflammatory infiltrate

O líquen plano oral é uma doença potencialmente maligna e compartilha muitas características clínicas e histopatológicas com outras lesões semelhantes. O ALDH1 é um biomarcador específico na identificação de células-tronco, porém seu papel nas células estromais do infiltrado inflamatório imune não foi explorado. O objetivo deste estudo foi investigar a imunoexpressão de ALDH1 em células epiteliais e estromais de Líquen Plano Oral e outras lesões liquenóides. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG) sob o parecer no 5.410.374, CAAE: 52763021.0.0000.5149. Foi realizada uma busca no arquivo do laboratório de Patologia Oral e Bucomaxilofacial da UFMG em um período de 10 anos (2011 ­ 2021) de casos diagnosticados como Líquen Plano oral, Lesão Liquenoide, Leucoplasia e Processo Inflamatório Inespecífico (controle). Foram selecionados 633 casos e após a utilização dos critérios de inclusão e exclusão, a expressão imuno-histoquímica do ALDH1 foi investigada em 64 casos, 16 de cada diagnóstico. O ALDH1 foi avaliado tanto no epitélio quanto nas células estromais do infiltrado inflamatório liquenóide. Um percentual de 5% de células ALDH1+ foi considerado positivo no epitélio. A avaliação das células estromais foi feita de forma semiquantitativa. Os campos foram classificados em escores, segundo os critérios: 1 (0 a 10%); 2 (11 a 50%) e 3 (mais de 51%). O valor médio da soma dos campos foi o escore final. Diferenças estatísticas entre os grupos foram investigadas e a significância foi estabelecida considerando p < 0,05. A análise estatística foi realizada utilizando o software: SPSS ­ Statistical Package for the Social Science® (versão 26.0, 2019, Chicago, IL, USA). A expressão de ALDH1 no epitélio foi baixa em todos os grupos sem diferença entre eles, embora a maioria dos casos tenha sido encontrada na amostra de inflamação crônica inespecífica. O escore de células ALDH1+ na lâmina própria foi maior para LPO (2,0), seguido por Leucoplasia (1,3), LLO (1,2) e processo inflamatório inespecífico (1,1) (p<0,05). A imunoexpressão do ALDH1 no epitélio de lesões com um infiltrado liquenóide não mostrou uma ferramenta contributiva, porém o ALDH1 em células estromais no infiltrado inflamatório do líquen plano merece atenção, pois pode estar envolvido no complexo processo de regulação imune associado à patogênese desta doença.

Oral lichen planus (OLP) is a potentially malignant lesion and shares clinical and histopathological features with similar lesions. ALDH1 is a specific biomarker in the identification of stem cells, but its role in the stromal cells of the immune inflammatory infiltrate has not been elucidated yet. The aim of this study was to investigate the ALDH1 immunoexpression in epithelial and stromal cells from OLP and other lichenoid lesions. The study was approved by the Research Ethics Committee of the Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG) under protocol no 5.410.374, CAAE: 52763021.0.0000.5149. An search of the biopsy records of the Oral and Maxillofacial Pathology Laboratory at UFMG in a period of 10 years (2011 - 2021) was performed including the diagnosis of Oral Lichen Planus (OLP), Oral Lichenoid Lesion (OLL), Oral Leukoplakia (OLK) and Unspecific Inflammatory Process (UIP) ­ as control. Initially were obtained 633 cases. After inclusion and exclusion criteria a total of 64 cases were investigated for the ALDH1 immunohistochemical expression, 16 cases of each diagnose. ALDH1 was evaluated both in the epithelium and in the stromal cells. A percentage of ≤5% of ALDH1+ cells was considered positive in the epithelium. The evaluation of stromal cells was performed semi-quantitatively. The fields were classified into scores, according to the following criteria: 1 (0 to 10%); 2 (11 to 50%) and 3 (more than 51%). The mean value of the sum of the fields represented the final score. Statistical differences between groups were investigated and significance was established considering p < 0.05. Statistical analysis was performed using the software: SPSS ­ Statistical Package for the Social Science® (version 26.0, 2019, Chicago, IL, USA). The expression of ALDH1 in the epithelium was low in all groups with no difference between them, although most cases were found in the UIP samples. ALDH1+ cells in the lamina propria was higher for OLP (2.0) than others followed by OLK (1.3), OLL (1.2) and UIP (1.1) (p<0.05). The ALDH1 immunoexpression in the epithelium of lichenoid diseases did not prove to be contributory to show a malignant potential, but ALDH1 in stromal cells from OLP infiltrate might be involved in the complex immune regulation process associated with the pathogenesis of this disease.

Imunoexpressão da proteína ING3 em Queilites Actínicas e carcinomas de células escamosas de lábio inferior / Immunoexpression of ING3 protein in actinic cheilitis and squamous cell carcinomas of the lower lip

A família de inibidores de crescimento (inhibitor of growth - ING) corresponde a um grupo de genes supressores tumorais cuja expressão se apresenta alterada ou ausente em diversos tipos de câncer. Os produtos destes genes estão relacionados, principalmente, a processos celulares indispensáveis na carcinogênese, como remodelação da cromatina, proliferação celular, replicação e reparo do DNA. Este estudo avaliou a expressão imuno-histoquímica da proteína ING3 em 45 espécimes de queilite actínica (QA) e 48 espécimes de carcinoma de células escamosas de lábio inferior (CCELI). A expressão da proteína foi comparada entre os dois grupos de amostras, bem como com os parâmetros clínico-patológicos das lesões estudadas, através dos testes estatísticos Exato de Fisher, Kruskal-Wallis (KW), Mann-Whitney (U) e teste de correlação de Spearman. Um nível de significância de 5% foi adotado para todos os testes, sendo considerados significativos os valores de p ≤ 0,05. Não foram encontradas associações estatisticamente significativas entre as variáveis morfológicas de CCELI e tamanho do tumor, envolvimento linfonodal, estadiamento clínico, recorrência local e metástase linfonodal após tratamento (p>0,05). Óbitos foram significativamente mais frequentes em tumores de alto escore de risco histopatológico (p<0,05). Nas QAs, diferenças significativas na expressão de ING3 núcleo-citoplasmática, e restrita ao citoplasma, com a gradação de Kujan et al. (2006) foram encontradas (p<0,05). Nos CCELIs, não houve diferença estatisticamente significativa ao comparar as expressões de ING3 (núcleo-citoplasmática e restrita ao citoplasma) com os parâmetros clínicos e morfológicos (p>0,05). A expressão de ING3 núcleo-citoplasmática foi significativamente menor em CCELI quando comparada aos casos de QA (p<0,05) e a expressão restrita ao citoplasma foi significativamente maior nos CCELIs (p<0,05). Nossos resultados sugerem que há notável diminuição da expressão nuclear de ING3 conforme a progressão maligna, indicando função supressora tumoral prejudicada desta proteína em QAs e CCELIs. Entretanto, acredita-se que, na carcinogênese labial, ING3 caracteriza-se melhor como um marcador preditor de transformação maligna, do que um biomarcador de comportamento biológico tumoral (AU).

The family of inhibitors of growth (ING) corresponds to a group of tumor suppressor genes whose expression is altered or absent in several types of cancer. The products of these genes are mainly related to cellular processes indispensable in carcinogenesis, including cell proliferation, DNA replication and repair. This study evaluated the immunohistochemical expression of ING3 protein in 45 actinic cheilitis (AC) and 48 lower lip squamous cell carcinoma (CCELI) specimens. Protein expression was compared between the two groups of samples, as well as with the clinicopathological parameters of studied lesions, using Fisher's exact tests, Kruskal-Wallis (KW), Mann-Whitney (U) and correlation test of Spearman. A significance level of 5% was adopted for all tests, with values of p ≤ 0.05 being considered significant. No statistically significant associations were found between morphological variables of CCELI and tumor size, lymph node involvement, clinical staging, local recurrence and lymph node metastasis after treatment (p>0.05). Deaths were significantly more frequent in tumors with a high histopathological risk score (p<0.05). In ACs, significant differences in nuclear-cytoplasmic and restricted to the cytoplasm expression of ING3, with gradation of Kujan et al. (2006) were found (p<0.05). In CCELIs, there was no statistically significant difference when comparing ING3 expressions (nucleocytoplasmic and cytoplasmic restricted) with clinical and morphological parameters (p>0.05). Nucleocytoplasmic ING3 expression was significantly lower in CCELI when compared to AC cases (p<0.05) and cytoplasm-restricted expression was significantly higher in CCELIs (p<0.05). Our results suggest that there is a remarkable decrease in ING3 nuclear expression according to malignant progression, indicating an impaired tumor suppressor function of this protein in AC and CCELI. However, it is believed that, in lip carcinogenesis, ING3 is better characterized as predictive marker of malignant transformation, rather than a biomarker of tumor biological behavior (AU).

Imunoexpressão da Yes-Associated Protein (YAP) em hiperceratoses e displasias epiteliais orais / Immunoexpression of Yes-Associated Protein (YAP) in hyperkeratosis and oral epithelial dysplasia

A busca por um biomarcador que auxilie na predição de risco de transformação maligna das desordens orais potencialmente malignas (DOPMs) representa um grande desafio, já que pode auxiliar no manejo precoce e adequado dos pacientes. Este estudo avaliou a imunoexpressão da Yes-Associated Protein (YAP) em lesões intraorais leucoplásicas, eritroplásicas ou leucoeritroplásicas, com diagnóstico histopatológico de hiperceratose ou displasia epitelial oral (DEO), correlacionando essa imunoexpressão com o grau de severidade morfológica dessas lesões. A amostra foi composta por 20 casos de hiperceratoses e 53 casos de DEOs, além de 10 casos de mucosa oral normal (grupo controle). Para a avaliação do grau de displasia, foram utilizadas as gradações da OMS (EL-NAGGAR et al., 2017) e o Sistema Binário (KUJAN et al., 2006), sendo o perfil imunoistoquímico da proteína YAP avaliado por meio de escores, que variaram entre 0 e 3, com base em sua localização intracelular (citoplasmática ou nuclear) e por sua distribuição no tecido epitelial. Para a análise entre os parâmetros estudados foram realizados os testes estatísticos Qui-quadrado de Pearson, Exato de Fisher, além de testes não paramétricos, (nível de significância de 95%). Displasias leves foram enquadradas (100%) no baixo risco de transformação maligna, enquanto as moderadas dividiram-se entre baixo (47%) e alto risco (53%), sendo as displasias severas, em sua maior parte (71%), classificadas como de alto risco (p < 0,001). O grupo controle exibiu imunomarcação de escore 0 (80%), as hiperceratoses e displasias leves (em 80% das vezes) exibiram escore 1, já nas displasias moderadas (63%) e severas (79%), foram predominantes os escores 2 e 3; com padrão de imunomarcação nuclear associado ao alto risco de transformação maligna sugerido pelo Sistema binário (p = 0,002). A imunoexpressão da YAP foi semelhante entre hiperceratoses e displasias leves, o que deve suscitar maior atenção dos profissionais frente aos casos de hiperceratose, além disto a expressão da YAP aparenta dicotomizar as DOPMs entre as lesões com baixo risco de transformação maligna e as lesões com alto risco, o que pode sugerir no futuro, sua utilização como potencial marcador preditivo de progressão destas lesões (AU).

The search for a biomarker that helps to predict the risk of malignant transformation of oral potentially malignant disorders (OPMDs) represents a great challenge, as it can help in the early and adequate management of patients. This study evaluated the immunoexpression of Yes-Associated Protein (YAP) in intraoral leukoplastic, erythroplastic or leukoerythroplastic lesions, with histopathological diagnosis of hyperkeratosis or oral epithelial dysplasia (OED), correlating this immunoexpression with the degree of morphological severity of these lesions. The sample consisted of 20 cases of hyperkeratosis and 53 cases of OED, in addition to 10 cases of normal oral mucosa (control group). To assess the degree of dysplasia, the WHO grading (EL-NAGGAR et al., 2017) and the Binary System (KUJAN et al., 2006) were used, and the immunohistochemical profile of the YAP protein was evaluated through scores, which ranged from 0 to 3, based on their intracellular location (cytoplasmic or nuclear) and their distribution in the epithelial tissue. For the analysis of the studied parameters, Pearson's Chi-square and Fisher's Exact statistical tests were performed, in addition to non-parametric tests (significance level of 95%). Mild dysplasias were classified (100%) in the low risk of malignant transformation, while the moderate ones were divided between low (47%) and high risk (53%), with severe dysplasias, for the most part (71%), classified as high risk (p < 0.001). The control group exhibited score 0 of immunostaining (80%), hyperkeratosis and mild dysplasias (80% of booth) exhibit score 1, whereas in moderate (63%) and severe dysplasia (79%), the predominant scores was 2 and 3; with a pattern of nuclear immunostaining associated with the high risk of malignant transformation suggested by the Binary System (p = 0.002). The immunoexpression of YAP was similar between hyperkeratosis and mild dysplasias, which should attract greater attention from professionals in cases of hyperkeratosis. Furthermore, the expression of YAP appears to dichotomize OPMDs between lesions with low risk of malignant transformation and lesions with high risk, which may suggest, in the future, its use as a potential predictive marker of the progression for these lesions (AU).

Fibroma ossificante trabecular juvenil: um relato de caso / Juvenile ossifying fibroma: a case report

Objetivo: o fibroma ossificante trabecular juvenil (FOJT) é uma lesão fibro-óssea incomum, benigna, porém de comportamento agressivo. Ocorre, frequentemente, em crianças e adolescentes, com maior acometimento em maxila e mandíbula. O presente relato aborda os aspectos clínicos, imaginológicos, histopatológicos, imuno-histoquímicos e o tratamento de um caso de FOTJ. Além de discutir suas similaridades com o osteossarcoma de baixo grau e as alternativas para o seu diagnóstico. Relato de caso: paciente do sexo masculino, com 12 anos de idade, apresentando aumento de volume em mandíbula no lado esquerdo, perda de função mastigatória e de fala, com tempo de evolução de seis meses. Radiograficamente, a lesão apresentava aspecto unilocular, com limites definidos e de padrão misto. O tratamento consistiu em cirurgia de enucleação total da lesão, seguida de curetagem sob anestesia geral. A histopatologia e a ausência de marcação para MDM2 e CDK4 na imuno-histoquímica confirmaram o diagnóstico de FOTJ e excluíram o de osteossarcoma de baixo grau. No controle pós-operatório de 20 dias, o paciente relatou melhora da parestesia, da função mastigatória e da fala e ausência de dor. Não se observou recidiva no acompanhamento de 1 ano após a cirurgia. Considerações finais: a similaridade dos aspectos clínico, imaginológico e microscópico entre FOJT e osteossarcoma de baixo grau pressupõe o estudo imuno-histoquímico com os arcadores MDM2 e CDK4, minimizando equívocos no diagnóstico e orientando de forma mais eficiente o plano de tratamento adotado.(AU)

Objective: juvenile Trabecular Ossifying Fibromas (JTOF) are uncommon benign fibro-osseous lesions with a local aggressive behavior. They frequently occur in children and adolescents involving the jaw bones. This report addresses the clinical, imaging, histopathological, and immunohistochemical aspects and the treatment of a case of JTOF. In addition, it discusses similarities between JTOF and low-grade osteosarcomas and alternatives for their diagnosis. Case report: male patient, 12 years old, with a tumor in his left mandible, loss of masticatory function and speech, with a 6-month time course. Radiographically, the lesion had an unilocular aspect, with defined borders and a mixed image pattern. Treatment consisted surgical enucleation, followed by bone curettage, under general anesthesia. Histopathology presented fibrous stroma interspaced with bone trabeculae without signs of cellular malignancy. MDM2 and CDK4 markers in immunohistochemistry, confirmed the diagnosis of JTOF and excluded low-grade osteosarcoma. At the 20-day postoperative follow-up, the patient reported improvement in paresthesia, masticatory function and speech, and the absence of pain. Evaluation 1 year after surgery showed no signs of local recurrence. Final considerations: the similarity of clinical, imaging, and microscopic aspects between JTOF and low-grade osteosarcoma prompts an immunohistochemical study including MDM2 and CDK4 markers in order to improve final diagnosis and guide the treatment plan more efficiently.(AU)

Análise clínico-patológica e qualitativa da expressão de mediadores inflamatórios teciduais no líquen plano oral / Clinicopathological and qualitative analysis of the expression of tissue inflammatory mediators in oral lichen planus

O líquen plano oral (LPO) é uma condição imuno-inflamatória mucocutânea crônica que ainda possui etiologia e patogênese desconhecidas. Estudos mostrando a participação de citocinas no LPO, em especial, interleucinas (IL)-6, IL-17 e IL-18, são escassos, assim como a correlação das características clínicas e histológicas das lesões de LPO com a presença destes mediadores inflamatórios. Todas as lesões de LPO e de lesões liquenoides orais (LLO) foram revisadas a partir do arquivo do laboratório de Patologia Bucal da Faculdade de Odontologia da Universidade do Estado do Rio de Janeiro e as características clínico-patológicas dos casos foram analisadas. Foram selecionados 40 casos de LPO para realização adicional de reações imuno-histoquímicas para IL-6, IL-17 e IL-18. A amostra total foi composta por 221 casos e mostrou que o LPO apresentou predileção por mulheres adultas, mais frequentemente acometidas pelo padrão reticular e com lesões localizadas predominantemente na mucosa jugal. Os 40 casos selecionados para a avaliação imuno-histoquímica incluíram pacientes com média de idade de 53 anos, sem predileção por gênero, e com lesões localizadas preferencialmente na mucosa jugal (85%), na gengiva/mucosa alveolar (47%) e na língua (42%). Quanto ao padrão clínico, 14 pacientes (35%) mostravam lesões exclusivamente reticulares e 26 (65%) mostravam lesões reticulares associadas a lesões atrófico-erosivas. Sintomas foram relatados por 53% dos pacientes e incluíram principalmente ardência e desconforto local. A análise histológica mostrou que o epitélio das lesões mostrava espessura normal, atrófica ou hiperplásica em, respectivamente, 17 (43%), 9 (22%) e 14 (35%) casos. A presença de hiperqueratose foi observada em 21 casos (53%) e exocitose de linfócitos T CD4+ e T CD8+ estava presente em, respectivamente, 17 (42%) e 30 (75%) casos. A análise imuno-histoquímica revelou que a IL-6 foi, de forma geral, a mais expressa, tanto no epitélio, quanto no conjuntivo. A expressão de IL-17 se mostrou intensa no tecido conjuntivo, em 40% dos casos. A IL-18 mostrou intensidade mais frequente leve/moderada tanto no epitélio (40%), quanto no tecido conjuntivo (45%). A presença de exocitose mostrou relação com a maior expressão das ILs e a expressão de IL-17 foi maior no epitélio mostrando hiperqueratose. Os resultados do presente estudo mostraram que as características clínicas das lesões de LPO e de LLO são distintas e podem ser utilizadas para diferenciação entre as duas entidades. Os achados histológicos e imunohistoquímicos sugerem que as ILs estudadas mostram-se mais presentes quando há exocitose linfócitos T CD4+ e T CD8+ e que sua expressão pode ter relação com as alterações epiteliais encontradas no LPO, participando da patogênese e da modulação da expressão da doença.

Oral lichen planus (OLP) is a chronic immunoinflammatory mucocutaneous condition of unknown etiology and pathogenesis. Studies focusing on the presence of cytokines in OLP, especially interleukin (IL)-6, IL-17 and IL-18, are scarce, as well as the correlation of clinical and histological characteristics with the presence of inflammatory mediators. All lesions diagnosed as OLP and oral lichenoid lesions (OLL) were reviewed from the files of the Oral Pathology laboratory, Dental School, Rio de Janeiro State University, and their clinicopathological characteristics were analyzed. Forty cases diagnosed as OLP were selected for additional immunohistochemical reactions directed against IL-6, IL-17 e IL-18. The total sample was composed by 221 cases and showed that OLP presented a predilection for adult females, mostly affected by lesions with the reticular pattern and located in the buccal mucosa. The 40 cases selected for the immunohistochemical reactions included patients with a mean age of 53 years, with no gender predilection, and with lesions located mostly in the buccal mucosa (85%), gingiva/alveolar mucosa (47%) and tongue (42%). The clinical pattern showed reticular lesions in 14 patients (35%) and reticular and atrophic/erosive lesions in 26 patients (65%). Symptoms were reported by 53% of the patients and included mostly burning sensation and local discomfort. Histological analysis showed that the epithelial thickness was normal, atrophic, or hyperplastic in, respectively, 17 (43%), 9 (22%) and 14 (35%) cases. The presence of hyperkeratosis was observed in 21 cases (53%), and exocytosis of T CD4+ and T CD8+ lymphocytes was present in, respectively, 17 (42%) and 30 (75%) cases. Immunohistochemical analysis showed that, in general, IL-6 was the most expressed IL both in epithelium and connective tissue. IL-17 expression was considered intense in the connective tissue from 40% of the cases. IL-18 expression was considered mostly mild/moderate both in epithelium (40% of the cases) and connective tissue (45% of the cases). The presence of exocytosis was associated with a higher expression of the ILs and expression of IL-17 was higher in epithelium showing hyperkeratosis. The results from the present study showed that the clinical characteristics of OLP and OLL are distinct and can be useful in differentiating these two diagnostic entities. The histological and immunohistochemical features suggest that the studied ILs are more expressed when there is exocytosis of both T CD4+ and T CD8+ lymphocytes. Expression of the ILs can be associated with the epithelial alterations encountered in OLP, participating in the pathogenesis and modulating the expression of the disease.

Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells Over Platelet Rich Fibrin Scaffold for Mandibular Cartilage Defects Regenerative Medicine

ABSTRACT Objective: To evaluate the regeneration of mandibular cartilage defect after implantation of human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUCMSC) over platelet rich fibrin (PRF) as scaffold. Material and Methods: 20 male Wistar rats were randomly divided into four experimental groups consisting of: a control group featuring untreated mandibular defects (C), experimental groups whose mandibular defects were implanted with hUCMSC (E1), mandibular defects implanted with PRF (E2), mandibular defects implanted with hUCMSC and PRF scaffold (E3). The subjects were sacrificed after six weeks of observation for immunohistochemical examination in order to evaluate the expression of Ki67, Sox9, FGF 18, type 2 collagen, and aggrecan, in addition to histology examination to evaluate chondrocyte number and cartilage thickness. Data was analyzed with univariate analysis (ANOVA). Results: The implantation of hUCMSC and PRF scaffold proved capable of regenerating mandibular cartilage defect through the expression of FGF 18, Sox9, Ki67, chondrosis counts, type 2 collagen, aggrecan, and cartilage thickness. The regeneration were significantly higher in group E3. Conclusion: Human umbilical cord mesenchymal stem cells in platelet rich fibrin scaffold proved capable of regenerating mandibular cartilage defect.

Immunohistochemical expression of OCT4 and CD44 in major and minor salivary gland neoplasms

Abstract The aim of this study was to identify tumor parenchyma cells exhibiting immunohistochemical profile of stem cells by evaluating the immunoreactivity of OCT4 and CD44 in a number of cases of salivary gland neoplasms. The sample consisted of 20 pleomorphic adenomas, 20 mucoepidermoid carcinomas, and 20 adenoid cystic carcinomas located in major and minor salivary glands. The expression of OCT4 and CD44 was evaluated by the percentage of positive cells and the intensity of expression. All studied cases showed positive expression of OCT4 and CD44 and higher values than the control groups. For OCT4, luminal and non-luminal cells were immunostained in the case of pleomorphic adenomas and adenoid cystic carcinomas. Moreover, the immunoreactivity of CD44 was particularly evident in the non-luminal cells of these lesions. In mucoepidermoid carcinomas, there was immunoreactivity for both markers in squamous and intermediate cells and absence of staining in mucous cells. For both markers, a significantly higher immunostaining was verified in neoplasms located in the major salivary glands compared with lesions in minor salivary glands (p<0.001). In the total sample and in minor salivary glands, malignant neoplasms exhibited higher immunoreactivity for OCT4 than pleomorphic adenoma. A significant moderate positive correlation (r = 0.444 and p ≤ 0.001) was found between OCT4 and CD44 immunoexpression in the total sample. The high expression of OCT4 and CD44 may indicate that these proteins play an important role in identifying tumor stem cells.