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1.
J. appl. oral sci ; 27: e20180211, 2019. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS, BBO - Odontologia | ID: biblio-984568

RESUMO

Abstract Objective The aim of this study was to evaluate the effects of gliclazide on oxidative stress, inflammation, and bone loss in an experimental periodontal disease model. Material and Methods Male albino Wistar rats were divided into no ligature, ligature, and ligature with 1, 5, and 10 mg/kg gliclazide groups. Maxillae were fixed and scanned using micro-computed tomography to quantify linear and bone volume/tissue volume (BV/TV) and volumetric bone loss. Histopathological, immunohistochemical and immunofluorescence analyses were conducted to examine matrix metalloproteinase-2 (MMP-2), cyclooxygenase 2 (COX-2), cathepsin K, members of the receptor activator of the nuclear factor kappa-Β ligand (RANKL), receptor activator of nuclear factor kappa-Β (RANK), osteoprotegerin (OPG) pathway, macrophage migration inhibitory factor (MIF), superoxide dismutase-1 (SOD-1), glutathione peroxidase-1 (GPx-1), NFKB p 50 (Cytoplasm), NFKB p50 NLS (nuclear localization signal), PI3 kinase and AKT staining. Myeloperoxidase activity, malondialdehyde and glutathione levels, while interleukin-1 beta (IL-1β) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) levels were evaluated by spectroscopic ultraviolet-visible analysis. A quantitative reverse transcription polymerase chain reaction was used to quantify the gene expression of the nuclear factor kappa B p50 subunit (NF-κB p50), phosphoinositide 3-kinase (PI3k), protein kinase B (AKT), and F4/80. Results Micro-computed tomography showed that the 1 mg/kg gliclazide treatment reduced linear bone loss compared to the ligature, 5 mg/kg gliclazide, and 10 mg/kg gliclazide treatments. All concentrations of gliclazide increased bone volume/tissue volume (BV/TV) compared to the ligature group. Treatment with 1 mg/kg gliclazide reduced myeloperoxidase activity, malondialdehyde, IL-1β, and TNF-α levels (p≤0.05), and resulted in weak staining for COX-2, cathepsin k, MMP-2, RANK, RANKL, SOD-1, GPx-1,MIF and PI3k. In addition, down-regulation of NF-κB p50, PI3k, AKT, and F4/80 were observed, and OPG staining was strong after the 1 mg/kg gliclazide treatment. Conclusions This treatment decreased neutrophil and macrophage migration, decreased the inflammatory response, and decreased bone loss in rats with ligature-induced periodontitis.


Assuntos
Animais , Masculino , Periodontite/tratamento farmacológico , Perda do Osso Alveolar/tratamento farmacológico , Estresse Oxidativo/efeitos dos fármacos , Gliclazida/farmacologia , Antioxidantes/farmacologia , Periodontite/patologia , Imuno-Histoquímica , Distribuição Aleatória , Reprodutibilidade dos Testes , Perda do Osso Alveolar/patologia , Imunofluorescência , Fatores Inibidores da Migração de Macrófagos/efeitos adversos , Fator de Necrose Tumoral alfa/análise , Ratos Wistar , Peroxidase/análise , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Metaloproteinase 2 da Matriz/análise , Interleucina-1beta/análise , Ligante RANK/análise , Receptor Ativador de Fator Nuclear kappa-B/análise , Microtomografia por Raio-X , Catepsina K/análise , Gengiva/patologia , Gengiva/química , Gliclazida/uso terapêutico , Glutationa/análise , Malondialdeído/análise , Neutrófilos/efeitos dos fármacos , Antioxidantes/uso terapêutico
2.
J. appl. oral sci ; 25(3): 299-309, May-June 2017. graf
Artigo em Inglês | LILACS, BBO - Odontologia | ID: biblio-893619

RESUMO

Abstract Objective To assess the effect of fibronectin (Fn) and porcine type I collagen (PCOL) on odontoblast-like cells in vitro. Material and Methods Rat odontoblast-like cells (MDPC-23 cells) were inoculated and cultured on Fn-coated or type I collagen-coated substrates. Proliferation assay, alkaline phosphatase activity (ALP activity), mRNA expression of hard tissue-forming markers, and Alizarin red staining were investigated over a period of 10 days. Results Cells maintained a high proliferation activity on Fn and PCOL even at a low seeding concentration (0.5×104/mL) as demonstrated by CCK-8 assay. The proliferation activity of cells on Fn increases in a concentration-dependent manner while it reached a plateau after 10 µg/mL. Cells adopted long, thin and spindle shape on Fn(10-50) and PCOL. Parallel actin filaments were observed in MDPC-23 cells cultured on Fn and PCOL. ALP activity was markedly up-regulated on Fn and PCOL-coated surfaces. Importantly, gene expression of BSP (Fn10: 2.44±0.32; Fn20: 3.05±0.01; Fn30: 2.90±0.21; Fn40: 2.74±0.30; Fn50: 2.64±0.12; PCOL: 2.20±0.03) and OCN (Fn10: 2.52±0.23; Fn20: 2.28±0.24; Fn30: 2.34±0.21; Fn40: 2.34±0.25; Fn50: 2.20±0.22; PCOL: 1.56±0.16) was significantly enhanced on Fn and PCOL substrates as compared with control; moreover, expression of integrin beta 1 (ITGB1), an ubiquitous cell surface receptor was augmented in Fn(10-50) and PCOL groups simultaneously. In accordance with the ALP activity and gene expression data, calcific deposition in cells grown on Fn(10-50) and PCOL was observed as well. Conclusion Despite the limitation of this study, the findings indicate that a surface coating of Fn enhances the proliferation, differentiation and mineralization of odontoblast-like cells by activation of integrin beta 1 (ITG B1). The promoting effects of Fn on MDPC-23 cells were achieved at a comparatively lower coating concentration than type I collagen (300 µg/mL). Specifically, it is suggested that the optimum coating concentration of Fn to be 10 µg/mL.


Assuntos
Humanos , Animais , Ratos , Diferenciação Celular/efeitos dos fármacos , Fibronectinas/farmacologia , Proliferação de Células/efeitos dos fármacos , Odontoblastos/efeitos dos fármacos , Fatores de Tempo , Expressão Gênica , Células Cultivadas , Reprodutibilidade dos Testes , Imunofluorescência , Antraquinonas , Integrina beta1/farmacologia , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Colágeno Tipo I/farmacologia , Fosfatase Alcalina/análise
3.
Bauru; s.n; 2017. 54 p. ilus, graf.
Tese em Inglês | BBO - Odontologia | ID: biblio-880409

RESUMO

A espécie vegetal Qualea grandiflora (QG), popularmente conhecida como "pauferro", "pau-terra-da-folha-grande", "pau-terra" ou "pau-de-tucano", muito comum no Cerrado brasileiro, é bem conhecida devido às suas variadas propriedades terapêuticas. Suas indicações incluem ações preventivas no aparecimento de lesões de mucosa gástrica, efeitos analgésicos, antibacterianos, anti-inflamatórios e antifúngicos. Assim, os componentes da QG poderiam ter alguma ação sobre moléculas amplamente envolvidas em processos angiogênicos e de desenvolvimento/reparo, como a Metaloproteinase de matriz 14 (MMP-14) e o Fator Induzido por hipóxia 1α (HIF-1alfa). Dessa maneira, o objetivo deste estudo foi investigar os efeitos do extrato hidroalcoólico das folhas de QG na viabilidade celular e expressão de MMP-14 e HIF-1alpha em culturas de fibroblastos da linhagem NIH/3T3 e pré-osteoblastos da linhagem MC3T3-E1. Para o teste de viabilidade celular e expressão das moléculas, concentrações de 0.1; 1.0 e 10 µg/mL do extrato hidroalcoólico das folhas de QG foram administrados por períodos de 24, 48, 72 e 96h. Após cada período, a viabilidade celular foi avaliada pelo método de redução de MTT e a análise da expressão das moléculas foi feita por meio da técnica de imunofluorescência. Os resultados mostram que o extrato de QG não promove redução da viabilidade celular de fibroblastos e pré-osteoblastos em concentrações até 10 µg/mL, nos períodos iniciais (24 e 48h). Porém, uma redução significativa da viabilidade pode ser verificada nos períodos de 72h e 96h para os fibroblastos e 96h para os pré-osteoblastos, expostos a mais alta concentração do extrato (10 µg/mL). O ensaio de imunofluorescência indica que o extrato, nas concentrações de 0.1; 1.0 e 10 µg/mL foi capaz de aumentar a expressão de MMP-14 e HIF-1alpha, em ambos os tipos celulares. Em conclusão, nossos resultados indicam que o extrato de QG exerce um efeito capaz de aumentar a expressão das duas moléculas em estudo (MMP-14 e HIF-1alpha), tanto para os fibroblastos da linhagem NIH/3T3 como para os pré- osteoblastos da linhagem MC3T3-E1. Assim, os compostos de QG podem apresentar potencial para serem utilizados como agentes terapêuticos moduladores da angiogênese, por meio do aumento da expressão de MMP-14 e HIF-1alpha.(AU)


The vegetable specie Qualea grandiflora (QG), popularly known as "pau-ferro", "pauterra-da-folha-grande", "pau-terra" or "pau-de-tucano", very common in the Brazilian Cerrado, is well known due to its varied therapeutic properties. Its indications include preventive actions in the appearance of lesions of gastric mucosa, analgesic, antibacterial, anti-inflammatory and antifungal effects. Thus, QG components could have some action on molecules widely involved in angiogenic and developmental / repair processes, such as Matrix metalloproteinase 14 (MMP-14) and HypoxiaInducible Factor-1α (HIF-1alpha). Thus, the objective of our study was to investigate the effects of QG hydroalcoholic extract on cell viability and expression of MMP-14 and HIF-1alpha in NIH/3T3 fibroblasts and MC3T3-E1 pre-osteoblasts cell lines. For the cell viability assay and expression of the molecules, concentrations of 0.1; 1.0 and 10 µg / mL of the hydroalcoholic extract of leaves of QG, were administered for periods of 24, 48, 72 and 96h. After each period, the cell viability was evaluated by MTT assay and the expression of the molecules was analyzed using the immunofluorescence technique. The results show that the QG extract does not promote reduction of the cellular viability of fibroblasts and pre-osteoblasts in concentrations up to 10 µg/mL in the initial periods (24 and 48h). However, a significant reduction in viability can be observed in 72h and 96h for fibroblasts and 96h for pre-osteoblasts exposed to the highest extract concentration (10 µg/mL). The immunofluorescence assay indicates that the extract, at concentrations of 0.1; 1.0 and 10 µg/mL was able to increase the expression of MMP-14 and HIF-1alpha in both cell types. In conclusion, our results indicate that the QG extract exerts an effect capable of increasing the expression of the two molecules under study (MMP-14 and HIF-1alpha) both for the NIH/3T3 fibroblasts as well as for the MC3T3-E1 pre-osteoblasts cells. Thus, the QG compounds could have potential to be used as angiogenesis modulating therapeutic agents, by increasing the expression of MMP-14 and HIF-1alpha.(AU)


Assuntos
Animais , Sobrevivência Celular/efeitos dos fármacos , Subunidade alfa do Fator 1 Induzível por Hipóxia/efeitos dos fármacos , Magnoliopsida/química , Metaloproteinase 14 da Matriz/efeitos dos fármacos , Células NIH 3T3/efeitos dos fármacos , Osteoblastos/efeitos dos fármacos , Extratos Vegetais/farmacologia , Células Cultivadas , Imunofluorescência/métodos , Subunidade alfa do Fator 1 Induzível por Hipóxia/análise , Metaloproteinase 14 da Matriz/análise , Muridae , Reprodutibilidade dos Testes , Espectrofotometria/métodos , Fatores de Tempo
4.
J. appl. oral sci ; 24(5): 481-486, Sept.-Oct. 2016. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS, BBO - Odontologia | ID: lil-797986

RESUMO

ABSTRACT Objective: The aim of the present study was to evaluate and compare the cytotoxic effects of Biodentine and MTA on dental pulp stem cells (DPSCs) and to assess cell viability and adherence after material exposure to an acidic environment. Material and Methods: DPSCs were cultured either alone or in contact with either: Biodentine; MTA set for 1 hour; or MTA set for 24 hours. After 4 and 7 days, cell viability was measured using the MTT assay. Biodentine and MTA were also prepared and packed into standardized bovine dentin disks and divided into three groups according to the storage media (n=6/group): freshly mixed materials without storage medium (Group A); materials stored in saline (Group B); materials stored in citric acid buffered at pH 5.4 (Group C). After 24 hours, DPSCs were introduced in the wells and cell adherence, viability, and cellular morphology were observed via confocal microscopy after three days of culture. Cell viability was analyzed using repeated-measures analysis of variance test with Tukey's post hoc tests (α=0.05). Results: Biodentine expressed significantly higher cell viability compared with all other groups after 4 days, with no differences after 7 days. Notably, cell viability was significantly greater in 24-hour set MTA compared with 1-hour set MTA and control groups after 7 days. Material exposure to an acidic environment showed an increase in cell adherence and viability in both groups. Conclusions: Biodentine induced a significantly accelerated cell proliferation compared with MTA. Setting of these materials in the presence of citric acid enhanced DPSC viability and adherence.


Assuntos
Humanos , Animais , Bovinos , Óxidos/toxicidade , Células-Tronco/efeitos dos fármacos , Silicatos/toxicidade , Compostos de Cálcio/toxicidade , Compostos de Alumínio/toxicidade , Polpa Dentária/citologia , Polpa Dentária/efeitos dos fármacos , Materiais Restauradores do Canal Radicular/toxicidade , Fatores de Tempo , Adesão Celular/efeitos dos fármacos , Sobrevivência Celular/efeitos dos fármacos , Células Cultivadas , Análise de Variância , Imunofluorescência , Microscopia Confocal , Ácido Cítrico/química , Meios de Cultura/química , Dentina/efeitos dos fármacos , Proliferação de Células/efeitos dos fármacos , Combinação de Medicamentos
5.
Bauru; s.n; 2016. 77 p. tab, ilus, graf.
Tese em Português | BBO - Odontologia | ID: biblio-880706

RESUMO

O carcinoma espinocelular (CEC) é a segunda forma de neoplasia cutânea mais prevalente. Os mecanismos exatos envolvidos na progressão desse tipo de tumor ainda não estão elucidados. Estudos recentes têm mostrado que a citocina IL33 é uma citocina reguladora da resposta imune adaptativa, principalmente como potente indutor do perfil Th2. Juntamente com seu receptor ST2, apresenta-se com os níveis elevados em alguns tipos de câncer, corroborando para a evidência de que essa citocina contribui para a carcinogênese. Baseado nessas informações, testamos a hipótese de que a presença de IL33 em carcinoma espinocelular, poderia estar relacionada a um melhor prognóstico. Neste estudo foram utilizadas amostras de carcinoma espinocelular, em diferentes gradações de malignidade tumoral (Grau I, Grau II e Grau III). Os resultados mostraram um infiltrado inflamatório mais intenso em tumores com Grau I e II. Imunorreatividade para IL33 foi observada em tumores de Grau I e II tanto por células epiteliais como por células do infiltrado inflamatório. A análise por microscopia confocal evidenciou que um grande número de células TCD4+ e TCD8+ que expressavam IL33 foi observado em tumores de Grau II. Esses resultados indicam a presença de um intenso infiltrado inflamatório e expressão de IL33 em amostras de carcinoma espinocelular com níveis menores de malignidade tumoral.(AU)


Squamous cell carcinoma (SCC) is the second most common form of cutaneous neoplasm. The exact mechanisms involved in the progression of this type of tumor have not yet been elucidated. Recent studies have shown that the cytokine IL33 is a cytokine regulating the adaptive immune response, mainly as a potent inducer of Th2 profile. Together with its ST2 receptor, its presents with elevated levels in some types of cancer, corroborating to evidence that this cytokine contributes to carcinogenesis. Based on this information, we tested the hypothesis that the presence of IL33 in squamous cell carcinoma could be related to a better prognosis. In this study, squamous cell carcinoma samples were used in three different gradations of tumor malignancy (Grade I, Grade II and Grade III). The results showed that a more intense inflammatory infiltrate in Grade I and II tumors. Immunoreactivity for IL33 was observed in Grade I and Grade II tumor, by epithelial cells and by inflammatory infiltrate cells. The analysis by confocal microscopy evidenced that a great number of TCD8+ and TCD4+ cells expressing IL33 was observed in grade II tumors. These results indicate the presence of an intense inflammatory infiltrate and expression of IL33 in samples of squamous cell carcinoma with lower levels of tumor malignancy.(AU)


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Pessoa de Meia-Idade , Idoso , Idoso de 80 Anos ou mais , Carcinoma de Células Escamosas/patologia , Interleucina-33/análise , Neoplasias Cutâneas/patologia , Linfócitos T CD4-Positivos/patologia , Linfócitos T CD8-Positivos/patologia , Imunofluorescência , Imuno-Histoquímica , Microscopia Confocal , Gradação de Tumores
6.
Natal; s.n; 2016. 104 p. ilus, tab, graf.
Tese em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: biblio-1427308

RESUMO

O carcinoma epidermóide (CE) de língua representa uma das lesões malignas mais comuns em cavidade oral e caracteriza-se por apresentar um comportamento localmente invasivo e agressivo. Os exossomos são responsáveis pela comunicação célula-célula e podem influenciar na progressão tumoral, metástase e eficácia terapêutica. Dentre as células capazes de secretar exossomos estão as células tumorais e as células imunes. Sabe-se que a presença das células imunes é importante para erradicar os tumores. No entanto, achados recentes demonstram que a inflamação pode promover o crescimento tumoral. Os macrófagos associados a tumores (TAMs) são conhecidos por apresentarem diferentes subtipos, M1 e M2, capazes de secretarem exossomos. O presente estudo se propôs a observar o comportamento dos exossomos derivados dos TAMs, dos subtipos 1 e 2, frente a cultura de células humanas SCC-25, HSC-3 e SAS derivadas de CE de língua, por meio da análise da capacidade de invasão, proliferação e viabilidade das células tumorais na presença dos exossomos. Observou-se que as microvesículas derivadas dos TAMs apresentam positividade para CD63, caracterizando-as como exossomos. Os exossomos dos TAMs do subtipo M2 foram os únicos a apresentarem marcação para TGF-ß, quando em comparação com os exossomos M1, THP1 e das linhagens celulares de CE, sugerindo que os exossomos M2 podem ser responsáveis pela expressão de TGF-ß nas células tumorais, uma vez que são internalizados. Nos ensaios de migração, observou-se que as células SCC-25 em presença de meio de cultura DMEM F/12, apresentaram maior capacidade de invasão frente aos exossomos M2 (p≤0,001), para concentração de 0,1 µg/ml. Para as células HSC-3 e SAS, não foi observada relação estatisticamente significante entre a presença de exossomos cultivados juntamente com as células tumorais e a capacidade de invasão celular (p>0,05). Quando os exossomos foram colocados no compartimento inferior do transwell, as células HSC-3 em presença dos exossomos M2 (1,0 µg/ml) apresentaram maior capacidade de invasão (p≤0,001). O teste de viabilidade demonstrou que as células HSC-3 tornam-se mais viáveis frente à presença dos exossomos M2 (p≤0,001) na concentração de 50 µg/ml. Para as células SCC-25, o resultado foi o mesmo (p≤0,05). A imunofluorescência demonstrou a internalização dos exossomos nas linhagens celulares estudadas. Os achados sugerem que a presença de exossomos M2, frente às culturas de células de CE de língua, pode ser um campo de pesquisa importante para futuros estudos com terapias-alvo (AU).


Squamous cell carcinoma (SCC) of the oral tongue is one of the most common malignant lesions in the oral cavity and is characterized by presenting a locally invasive and aggressive behavior. The exosomes are responsible for cell-cell communication and may influence tumor progression, metastasis and therapeutic efficacy. Among the cells that can secrete exosomes are tumor cells and immune cells. It is known that the presence of immune cells is important to eradicate tumors. However, recent findings suggest that inflammation may promote tumor growth. The tumor associated macrophages (TAMs) are known to have subtypes, M1 and M2, that secrete exosomes. This study's goal was to observe the behavior of derivatives TAMs exosomes, subtypes 1 and 2, against human cell culture SCC-25, HSC-3 and SAS derived from SCC of oral tongue, through the analysis of invasiveness, proliferation and viability of tumor cells in the presence of exosomes. It was observed that the microvesicles derived from TAMs are positive for CD63, characterizing them as exosomes. The exosomes of the M2 subtype TAMs were the only ones to present TGF-ß marking, as compared with M1 exosomes, THP1 and SCC cell lines, suggesting that M2 exosomes may be responsible for TGF-ß expression in tumor cells. In the migration tests, it was found that the SCC-25 cells in the presence of culture medium DMEM F / 12 showed higher invasion capacity in the presence of M2 exosomes (p≤0,001) to a concentration of 0.1 µg/ml. For HSC-3 and SAS cells, there was no significant statistical relationship between the presence of exosomes and invasiveness (p> 0.05) for the exosomes derived from TAMs. When the exosomes were placed in the lower compartment of the transwell, the HSC-3 cells in the presence of M2 exosomes (1.0 µg/ml) had higher invasiveness (p≤0,001). The viability test showed that HSC-3 cells became more viable in the presence of M2 exosomes (p≤0.001) at a concentration of 50 µg/ml. For SCC-25 cells, the result was the same (p≤0.05). Immunofluorescence showed the internalization of exosomes in the cell lines studied. These findings suggest that the presence of M2 exosomes in the SCC of the oral tongue cell cultures may be an important research field for future studies of targeted therapies (AU).


Assuntos
Carcinoma de Células Escamosas/patologia , Exossomos , Células THP-1 , Macrófagos , Técnicas In Vitro/métodos , Análise de Variância , Imunofluorescência/estatística & dados numéricos , Estatísticas não Paramétricas
7.
J. appl. oral sci ; 23(2): 179-186, Mar-Apr/2015. graf
Artigo em Inglês | LILACS, BBO - Odontologia | ID: lil-746537

RESUMO

Since the beginning of their lives, all living organisms are exposed to the influence of geomagnetic fields. Objectives : With respect to the positive effects that magnetic fields have on human tissues, especially the bactericidal effect, this investigation aimed to assess their influence on the reduction of oral microorganisms. Material and Methods : In order to obtain adequate specimens of dental plaque deposit, microbes such as Streptococcus parasanguinis, Staphylococcus epidermidis, Rhodococcus equi and Candida albicans were isolated from the human mouth. To establish the intensity of microbial growth on the basis of the modified optical density (OD) of agar turbidimetry assay, microbial count and spectrophotometry were applied. The study was carried out with two microbial concentrations (1 and 10 CFU/ml) after periods of incubation of 24 and 48 h and using micromagnets. Results : A positive effect of the magnetic field, resulting in the reduction of dental plaque microbes in vitro, was found. In the first 24 hours of exposure to the magnetic field, the number of all isolated microbes was significantly reduced. The most potent influence of magnets and the most intensified reduction after 24 hours were evident in Candida albicans colonies. The decrease in the influence of magnets on microbes in vitro was also detected. Conclusions : Magnets reduce the number of microbes and might be recommended as a supplement in therapy for reduced periodontal tissues. This is important because periodontal tissues that are in good conditions provide prolonged support to the oral tissues under partial and supradental denture. .


Assuntos
Humanos , Feminino , Sobrevivência Celular/fisiologia , Proteínas Cromossômicas não Histona/metabolismo , Linhagem Celular , Sobrevivência Celular/genética , Proteínas Cromossômicas não Histona/genética , Quebras de DNA de Cadeia Dupla , Dano ao DNA/genética , Imunofluorescência , RNA Interferente Pequeno/genética
8.
Bauru; s.n; 2015. 464 p. ilus, tab, graf.
Tese em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: biblio-867745

RESUMO

O trato gastrointestinal (TGI) é a principal rota de exposição ao fluoreto (F) e o seu mais importante sítio de absorção. Acredita-se que a toxicidade do F comprometa a fisiologia do intestino, devido à relevante sintomatologia gastrointestinal relatada em consequência da exposição excessiva ao F. A função intestinal é controlada por uma complexa rede neuronal interligada e incorporada à parede deste órgão, denominada Sistema Nervoso Entérico (SNE). Embora os efeitos tóxicos do F sobre o Sistema Nervoso Central sejam descritos na literatura, não há estudos relacionados à sua toxicidade sobre o SNE. Neste estudo realizado em ratos, foi avaliado o efeito da exposição aguda ou crônica ao F, sobre a população geral de neurônios entéricos e sobre as subpopulações que expressam os principais neurotransmissores entéricos: Acetilcolina (ACh), Óxido Nítrico (NO), Peptídeo Vasoativo Intestinal (VIP), Peptídeo Relacionado ao Gene da Calcitonina (CGRP) e Substância P (SP). Os animais foram divididos em 5 grupos: 3 destinados à exposição crônica (0 ppm, 10 ppm ou 50 ppm de F na água de beber) e 2 à exposição aguda (0 ou 25 mgF/Kg por gavagem gástrica). Foram coletados os 3 segmentos do intestino delgado (duodeno, jejuno e íleo) e processados para a detecção da HuC/D, ChAT, nNOS, VIP, CGRP e SP, através de técnicas de imunofluorescência, no plexo mioentérico. Foram obtidas imagens para a realização da análise quantitativa dos neurônios da população geral (HuC/D) e nitrérgicos (imunorreativos à nNOS); e morfométrica dos neurônios imunorreativos à HuC/D ou nNOS; e das varicosidades imunorreativas à ChAT, VIP, CGRP ou SP. Amostras dos 3 segmentos intestinais foram preparadas e coradas em Hematoxilina e Eosina para análise histológica da morfologia básica. O segmento intestinal considerado mais afetado na análise morfométrica da população geral de neurônios, o duodeno, foi selecionado para a realização da análise proteômica, com o objetivo de oferecer o seu perfil proteico...


The gastrointestinal tract (GIT) is the main route of fluoride (F) exposure, and the most important site of its absorption. It is believed that F toxicity compromises the intestine physiology, due to the relevant gastrointestinal symptomatology reported in consequence to excessive exposure. The intestinal function is controlled by a complex neuronal net, which is interconnected and embedded in the wall of this organ, named Enteric Nervous System (ENS). Although the toxic effects of F on the Central Nervous system are described in the literature, there are no studies related to its toxicity on the ENS. Therefore, in this study performed in rats, the effects of chronic and acute F exposure were evaluated, on the general population of enteric neurons and on the subpopulations that express the main enteric neurotransmitters: Acetylcholine (Ach), Nitric Oxide (NO), Vasoactive Intestinal Peptide (VIP), Calcitonin gene related peptide (CGRP), and Substance P (SP). The animals were divided into 5 groups: 3 designed to the chronic exposure (0 ppm, 10 ppm ou 50 ppm de F in the drinking water) and 2 to the acute exposure (0 ou 25 mgF/Kg - gastric gavage). Three intestinal segments were collected (duodenum, jejunum, and ileum) and processed for the immunofluorescence techniques to detect HuC/D, ChAT, nNOS, VIP, CGRP and SP, on the myenteric plexus. Images were obtained for the quantitative analysis of the general population of neurons (HuC/D immunoreactive) and the nitrergic neurons (nNOS immunoreactive), for the morphometric analysis of the general population and nitrergic neurons and also for the immunoreactive varicosities to ChAT, VIP, CGRP or SP. Samples of the 3 intestinal segments were prepared and stained with hematoxylin and eosin for histological analysis of the basic morphology. Duodenum, the intestinal segment considered the most affected in the morphological analysis of the general population of neurons, was selected for the proteomic analysis...


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Fluoreto de Sódio/administração & dosagem , Fluoreto de Sódio/toxicidade , Intestino Delgado , Proteínas/análise , Sistema Nervoso Entérico , Imunofluorescência , Intestino Delgado/química , Proteômica , Ratos Wistar , Valores de Referência
9.
Bauru; s.n; 2015. 464 p. ilus, tab, graf.
Tese em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: biblio-871404

RESUMO

O trato gastrointestinal (TGI) é a principal rota de exposição ao fluoreto (F) e o seu mais importante sítio de absorção. Acredita-se que a toxicidade do F comprometa a fisiologia do intestino, devido à relevante sintomatologia gastrointestinal relatada em consequência da exposição excessiva ao F. A função intestinal é controlada por uma complexa rede neuronal interligada e incorporada à parede deste órgão, denominada Sistema Nervoso Entérico (SNE). Embora os efeitos tóxicos do F sobre o Sistema Nervoso Central sejam descritos na literatura, não há estudos relacionados à sua toxicidade sobre o SNE. Neste estudo realizado em ratos, foi avaliado o efeito da exposição aguda ou crônica ao F, sobre a população geral de neurônios entéricos e sobre as subpopulações que expressam os principais neurotransmissores entéricos: Acetilcolina (ACh), Óxido Nítrico (NO), Peptídeo Vasoativo Intestinal (VIP), Peptídeo Relacionado ao Gene da Calcitonina (CGRP) e Substância P (SP). Os animais foram divididos em 5 grupos: 3 destinados à exposição crônica (0 ppm, 10 ppm ou 50 ppm de F na água de beber) e 2 à exposição aguda (0 ou 25 mgF/Kg por gavagem gástrica). Foram coletados os 3 segmentos do intestino delgado (duodeno, jejuno e íleo) e processados para a detecção da HuC/D, ChAT, nNOS, VIP, CGRP e SP, através de técnicas de imunofluorescência, no plexo mioentérico. Foram obtidas imagens para a realização da análise quantitativa dos neurônios da população geral (HuC/D) e nitrérgicos (imunorreativos à nNOS); e morfométrica dos neurônios imunorreativos à HuC/D ou nNOS; e das varicosidades imunorreativas à ChAT, VIP, CGRP ou SP. Amostras dos 3 segmentos intestinais foram preparadas e coradas em Hematoxilina e Eosina para análise histológica da morfologia básica. O segmento intestinal considerado mais afetado na análise morfométrica da população geral de neurônios, o duodeno, foi selecionado para a realização da análise proteômica, com o objetivo de oferecer o seu perfil proteico...


The gastrointestinal tract (GIT) is the main route of fluoride (F) exposure, and the most important site of its absorption. It is believed that F toxicity compromises the intestine physiology, due to the relevant gastrointestinal symptomatology reported in consequence to excessive exposure. The intestinal function is controlled by a complex neuronal net, which is interconnected and embedded in the wall of this organ, named Enteric Nervous System (ENS). Although the toxic effects of F on the Central Nervous system are described in the literature, there are no studies related to its toxicity on the ENS. Therefore, in this study performed in rats, the effects of chronic and acute F exposure were evaluated, on the general population of enteric neurons and on the subpopulations that express the main enteric neurotransmitters: Acetylcholine (Ach), Nitric Oxide (NO), Vasoactive Intestinal Peptide (VIP), Calcitonin gene related peptide (CGRP), and Substance P (SP). The animals were divided into 5 groups: 3 designed to the chronic exposure (0 ppm, 10 ppm ou 50 ppm de F in the drinking water) and 2 to the acute exposure (0 ou 25 mgF/Kg - gastric gavage). Three intestinal segments were collected (duodenum, jejunum, and ileum) and processed for the immunofluorescence techniques to detect HuC/D, ChAT, nNOS, VIP, CGRP and SP, on the myenteric plexus. Images were obtained for the quantitative analysis of the general population of neurons (HuC/D immunoreactive) and the nitrergic neurons (nNOS immunoreactive), for the morphometric analysis of the general population and nitrergic neurons and also for the immunoreactive varicosities to ChAT, VIP, CGRP or SP. Samples of the 3 intestinal segments were prepared and stained with hematoxylin and eosin for histological analysis of the basic morphology. Duodenum, the intestinal segment considered the most affected in the morphological analysis of the general population of neurons, was selected for the proteomic analysis...


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Fluoreto de Sódio/administração & dosagem , Fluoreto de Sódio/toxicidade , Intestino Delgado , Proteínas/análise , Sistema Nervoso Entérico , Imunofluorescência , Intestino Delgado/química , Proteômica , Ratos Wistar , Valores de Referência
10.
Bauru; s.n; 2014. 131 p. ilus, tab, graf.
Tese em Português | BBO - Odontologia | ID: biblio-867045

RESUMO

Atualmente, a população mundial está passando por um processo de transição demográfica, relacionado com o aumento considerável do número de idosos em relação aos jovens. O rápido crescimento da população idosa constitui uma das maiores preocupações da sociedade moderna, o que demanda um aumento no estudo da saúde e da melhoria da qualidade de vida dos idosos, incluindo um maior esclarecimento dos aspectos patofisiológicos relacionados com as doenças microbianas. Uma das infecções que afetam os idosos, principalmente os imunocomprometidos, é a candidose, a qual pode ser causada por diferentes espécies de Candida, em especial Candida albicans (C. albicans). Os monócitos e macrófagos exercem funções essenciais no combate a microrganismos através do processo fagocítico que abrange a produção de espécies reativas do nitrogênio e oxigênio que culminam no controle e/ou morte do patógeno. Uma vez esses fatores comprometidos, o combate aos agentes agressores é dificultado e ou ineficaz fazendo com que estas disfunções ocasionem problemas clínicos. Sendo assim, o objetivo do presente trabalho foi avaliar in vitro a capacidade fagocítica, a geração de óxido nítrico (NO) e peróxido de hidrogênio (H2O2) intracelular, e a habilidade de controlar o crescimento extracelular do fungo C. albicans por monócitos e macrófagos humanos de idosos e jovens. Para isso, foram obtidos monócitos do sangue periférico de indivíduos idosos e jovens os quais permaneceram em cultura por 7 dias e se diferenciaram em macrófagos. Ambos os fagócitos foram desafiadas com diferentes proporções de C. albicans viáveis (5 células:1 fungo, 1:1 e 1:5) por 30min, 2h e 5h. Após os desafios, os dados foram analisados por meio de ensaio fluorescente de fagocitose e crescimento fúngico extracelular, e pelos kits DAF-FM diacetato (NO) e Cell Rox Deep (H2O2). Os resultados foram expressos como média ± desvio padrão (SD) dos valores ou porcentagens obtidos e a análise estatística foi...


Currently, the world population is undergoing a process of demographic transition, associated with a considerable increase in the number of elderly compared with young subjects. The rapid growth of the elderly population is a major concern of the modern society, which requires an increase in the study of health and improved quality of life for the aged. This includes a greater clarification of the pathophysiological aspects of microbial diseases. One of the infections affecting the elderly, particularly those immunocompromised, is the candidosis that can be caused by various Candida species, especially Candida albicans (C. albicans). Monocytes and macrophages exert essential functions in combating microorganisms by phagocytic process. During this process occur the production of reactive nitrogen species and reactive oxygen species that culminate in the control and/or death of the pathogen. Once these factors are affected, the fight against aggressors is difficult and/or ineffective, and these disorders can cause clinical problems. Thus, the aim of this in vitro study was to investigate occurrence of phagocytosis, the intracellular generation of nitric oxide (NO) and hydrogen peroxide (H2O2), and the ability of human monocytes and macrophages from young and old in controlling the extracellular growth of the fungus C. albicans. Therefore, peripheral blood monocytes from elderly and young subjects were obtained and remained in culture for 7 days until they differentiate into macrophages. Both mononuclear cells were challenged with different proportions of viable C. albicans (5 cells:1 fungus, 1:1 and 1:5) for 30min, 2h and 5h. After the challenges, it was possible to evaluate the ability of fungal internalization and the controlling of extracellular fungal growth by a fluorescent assay, and measure the intracellular production of nitric oxide (NO) by DAF-FM Diacetate and hydrogen peroxide (H2O2) by Rox Deep Cell Kit. The results were expressed as mean ± standard...


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adolescente , Adulto Jovem , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Idoso , Candida albicans/fisiologia , Macrófagos/imunologia , Macrófagos/microbiologia , Monócitos/imunologia , Monócitos/microbiologia , Fatores Etários , Análise de Variância , Sobrevivência Celular , Imunofluorescência , Fagocitose/fisiologia , Óxido Nítrico/metabolismo , Peróxido de Hidrogênio/metabolismo , Fatores de Tempo
11.
Bauru; s.n; 2013. 98 p. ilus, graf, tab.
Tese em Português | BBO - Odontologia | ID: biblio-866496

RESUMO

Enxertos gengivais livres são importantes para garantir condições necessárias para o estabelecimento da homeostasia do periodonto de proteção. O processo de inflamação não ocorre por igual em todos os tecidos conjuntivos do organismo e os fibroblastos têm a capacidade de reagir a estímulos agressivos por meio de liberação de diversas citocinas, que desempenham importante função na formação do infiltrado inflamatório. Até o presente trabalho, não há relatos na literatura acerca da comparação do comportamento dos fibroblastos que compõem a mucosa palatina não marginal e dos fibroblastos provenientes de enxerto gengival livre (EGL) marginal em resistir aos estímulos agressores que ocorrem na doença periodontal. Dessa forma, a proposta do presente trabalho foi investigar se os fibroblastos da mucosa palatina não marginal mudariam seu perfil de secreção de citocinas quando enxertados na margem gengival. Foram coletadas biópsias da mucosa palatina no momento da cirurgia de EGL (período inicial) e após 4 meses (período final) no momento da cirurgia para recobrimento radicular. Os fibroblastos foram cultivados e estimulados com LPS de Porphyromonas gingivalis (Pg) e de Escherichia coli (Ec) por 24h e 48h para avaliação comparativa da expressão de citocinas e mediadores do reparo tecidual, como: IL-6, IL-8/CXCL8, MIP-1α/CCL3, TGF-β, VEGF e CXCL16. As citocinas foram quantificadas no sobrenadante das células por meio de ensaio imunoenzimático (ELISA). Para a citocina IL-6, os fibroblastos da mucosa palatina não marginal mantiveram o mesmo perfil de secreção quando enxertados na área gengival marginal; para MIP-1α a secreção se mostrou aumentada de forma estatisticamente significativa pelos fibroblastos obtidos do enxerto gengival marginal após 48h de estímulo por Pg em comparação com os fibroblastos da área palatina não marginal; a secreção de IL-8 pelos fibroblastos da mucosa palatina não marginal foi maior em resposta ao desafio por LPS de Pg e os fibroblastos...


Free gingival grafts are important to ensure conditions for the establishment of homeostasis of the periodontal soft tissues. The process of inflammation does not occur the same way in all connective tissues and fibroblasts have the ability to respond to aggressive stimuli through the release of various cytokines, which play an important role in the inflammatory infiltrate formation. In literature, there are no studies comparing the behavior of fibroblasts from palatal mucosa (not marginal) and fibroblasts from marginal free gingival graft (FGG) regarding their resistance towards periodontal disease aggressive stimuli. Thus, the purpose of this study was to investigate whether fibroblasts from the palatal mucosa behave differently when grafted to the gingival margin considering their mechanism of cytokine secretion. Biopsies from the palatal mucosa were collected at the time of FGG surgery (initial period) and after 4 months (final period) when surgery for root coverage was performed. The fibroblasts were cultured and stimulated with LPS of Porphyromonas gingivalis (Pg) and Escherichia coli (Ec) for 24 and 48 hours in order to make a comparative evaluation of cytokines and mediators of tissue repair expression, such as IL-6, IL-8/CXCL8, MIP-1α/CCL3, TGF-β, VEGF and CXCL16. Cytokines were measured in the cell supernatant by enzyme immunoassay (ELISA). For cytokine IL- 6, fibroblasts from palatal mucosa maintained the same secretion pattern when grafted to the gingival margin; for MIP-1α the secretion was significantly increased by fibroblasts from the marginal gingival graft after 48 hours of stimulation with Pg when compared to palatal mucosa fibroblasts; IL-8 secretion by palatal mucosa fibroblasts did not increase in response to Pg LPS challenge and fibroblasts from marginal gingival graft showed secretion even without the stimulus of LPS; only fibroblasts from marginal gingival graft showed secretion of TGF-β, even in the absence of LPS stimulation; VEGF...


Assuntos
Humanos , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Células Cultivadas/fisiologia , Fibroblastos/fisiologia , Gengiva/transplante , Mucosa Bucal/citologia , Análise de Variância , Citocinas/fisiologia , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Imunofluorescência , Palato/citologia , Fatores de Tempo
12.
Bauru; s.n; 2012. 117 p. graf, tab, ilus.
Tese em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: lil-681477

RESUMO

A hanseníase é uma doença crônica causada por Mycobacterium leprae e apresenta diversas formas clínicas. O entendimento da interação parasita-hospedeiro na hanseníase evidenciou que ocorre a persistência assintomática do patógeno, caracterizando um estado de latência. Os fatores mais importantes relacionados com a permanência do patógeno são: a patogenicidade do agente infeccioso e o perfil da resposta imune, no qual os eventos de migração celular, produção de citocinas, as células efetoras e reguladoras são extremamente relevantes. As células T reguladoras (Treg) desempenham papel central na regulação da resposta imune em infecções crônicas o que favorece a persistência do patógeno. A importância de células T reguladores na hanseníase ainda é pouco conhecida. Neste trabalho investigou-se a presença de células T reguladoras em lesões e sangue periférico de indivíduos com hanseníase. Inicialmente avaliou-se a proliferação e a produção de citocinas por células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de pacientes com hanseníase. Os resultados evidenciaram que não há diferenças quanto à proliferação de células T e produção de IFN-γ e TNF-α por células desses pacientes, mas a produção de IL-4 e IL-5 foi detectada apenas entre os pacientes com hanseníase virchoviana. Em relação à presença de células T reguladoras, os resultados evidenciaram aumento no número de linfócitos T CD4+CD25+FoxP3+ no sangue periférico de pacientes com hanseníase virchoviana. As células T reguladoras dos pacientes com hanseníase apresentaram elevada expressão de moléculas co-inibitórias PD-1, CTLA-4, GITR e ICOS. De modo relevante, as células T CD4+CD25+ isolados de pacientes com hanseníase virchoviana apresentaram maior atividade supressora quando comparado às células isoladas de pacientes com hanseníase tuberculóide. As células T CD4+CD25+ de pacientes com hanseníase virchoviana inibiram a proliferação de PBMC alogênico e a produção de IFN-γ e TNF-α...


Leprosy is caused by Mycobacterium leprae and its clinical features depend on the host immune background. The understanding of parasite-host interactions in leprosy have highlighted asymptomatic persistence of the pathogen, which indicates that this infection becomes latent. The most important factors related to the permanence of pathogens are: the pathogenicity of the infectious agents; the profile of the immune response developed by the host whose events of cellular migration, cytokines production, and the effector and regulatory cells are extremely relevant. The regulatory T cells (Treg) seem to play a central role in the regulation of the immune response in chronic infections, which favors the persistence of the pathogen. Herein, we analyzed the relation between tuberculoid and lepromatous leprosy with the presence and function of T regulatory cells from peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and skin lesions from these patients. First, the proliferation and cytokine production of PBMC isolated from leprosy patients were analyzed. We did not observe any difference in the proliferation ability or IFN-γ and TNF-α release; however, the production of IL-4 and IL-5 was detected only in patients with lepromatous leprosy. Furthermore, T CD4+CD25+FoxP3+ cells were detected in the PBMC of patients with leprosy and these cells from lepromatous patients showed high expression of co-inhibitory molecules such as PD-1, GITR, CTLA-4 and ICOS. T CD4+CD25+cells isolated from patients with lepromatous leprosy were significantly more suppressive than the cells obtained from tuberculoid patients. In addition, TCD4+CD25+ cells isolated from patients with lepromatous leprosy inhibited allogeneic PBMC proliferation and their production of IFN-γ and TNF-α. The results also demonstrated that IL- 10 and TGF-ß were co-expressed with CD25+ cells at the inflammatory infiltrate of skin lesions from lepromatous patients, but similar results were not detected among tuberculoid...


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Hanseníase/patologia , Linfócitos T Reguladores/citologia , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Citometria de Fluxo , Imunofluorescência , Linfócitos T Reguladores/imunologia
13.
RPG, Rev. Pós-Grad ; 16(3): 155-159, jul.- set. 2009. ilus
Artigo em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: biblio-855242

RESUMO

O carcinoma epidermoide corresponde a 95% das neoplasias malignas da cavidade oral, sendo seu mecanismo de invasão pouco conhecido. As células dessa neoplasia sofrem alterações genéticas e epigenéticas que as deixam com um caráter mais agressivo e, consequentemente, invasivo. Algumas vias de sinalizaçãoexercem papel importante sobre essas alterações. entre elas, a via do Wnt, em que se encontra um complexo formado por ß-catenina, um proto-oncogene e caderina-E, uma das principais moléculas de adesão do epitélio. Esse complexo torna-se responsável pela adesão entre as células e também por controlar a diferenciação morfológica e a proliferação celular. Assim, o propósito deste estudo foi analisar a expressão das proteínas ß-catenina e caderina-E em linhagens celulares derivadas de carcinoma epidermoide de cabeça e pescoço (CECP) e verificar a influência da matriz extracelular na expressão dessas proteínas. Os resultados mostraram que houve variação na expressão de ß-catenina e de caderina-E, dependendo da linhagem estudada, bem como do ambiente de cultivo celular empregado. Portanto, as proteínas ß-catenina e caderina-E foram expressas no CECP e a matriz extracelular foi capaz de alterar a expressão dessas proteínas


Assuntos
beta Catenina , Caderinas , Carcinoma de Células Escamosas , Imunofluorescência , Neoplasias de Cabeça e Pescoço , Hematoxilina , Imuno-Histoquímica
14.
Bauru; s.n; 2011. 135 p. ilus, tab, graf.
Tese em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: biblio-865844

RESUMO

Estomatite protética associada a Cândida (EPC), a lesão mais frequente em usuários de próteses removíveis, principalmente os idosos, caracteriza-se por uma inflamação da mucosa bucal que suporta a prótese. Está fortemente associada com Candida Albicans, bem como com fatores locais e sistêmicos, como a deficiência da resposta imune. Os monócitos são importantes na resposta protetora contra o fungo, produzindo citocinas que recrutam e ativam leucócitos. Existem alterações funcionais dessas células com o avanço da idade. Não foi possível encontrar na literatura dados referentes à função imunomodulatória dos monócitos de idosos com EPC. O presente trabalho pretendeu avaliar a produção de citocinas por essas células, estimuladas in vitro com C. albicans, obtidas do sangue periférico de idosos usuários de prótese total superior (PTS) com EPC, comparando-se com idosos usuários de PTS sem EPC, e com idosos e jovens não usuários de PTS. Os monócitos isolados foram cultivados em placas de cultura de 24 poços, na ausência ou presença de lipopolissacarídeo (LPS) ou C. albicans ATCC 90028 morta pelo calor. Após 18 horas, o sobrenadante foi coletado e submetido ao ensaio de imunoabsorção por ligação enzimática (ELISA) para dosagem das citocinas pró- inflamatórias fator de necrose tumoral- (TNF-), interleucina-6 (IL-6), IL-1, CXCL8 e proteína quimiotática de monócito (MCP-1), e anti-inflamatórias IL-10 e fator transformador de crescimento- (TGF-). Os resultados estão expressos como média ± desvio padrão dos valores obtidos para cada grupo, e foram analisados por meio de testes estatísticos não-paramétricos. Valores de p<0,05 foram considerados estatisticamente significativos. Os resultados demonstraram, de uma forma geral, alterações nos monócitos oriundos dos idosos com EPC, em comparação aos outros grupos: menor produção espontânea de CXCL8 e de MCP-1; menores níveis de TNF-, de IL-6, de IL-1, de CXCL8, de MCP-1 e de IL-10, após estímulo com LPS; e menor...


Candida-associated denture stomatitis (DS), the most frequent lesion among denture wearers, especially the elderly, is characterized by inflammation of the denture-bearing mucosa. It is strongly associated with Candida albicans, as well as with local and systemic factors, such as impaired immune response. Monocytes are important in the protective immune response against the fungus, by the production of cytokines that recruit and activate leukocytes. There are functional changes of these cells with advancing age. No data were found in the literature concerning the immunomodulatory function of these phagocytes in elderly patients with DS. This study aimed to evaluate the cytokine production by monocytes, challenged in vitro with C. albicans, obtained from peripheral blood of elderly denture wearers with DS, compared with elderly denture wearers without DS and elderly and young non-denture wearers. The isolated monocytes were cultivated in 24-well flat-bottomed culture plates, in the absence or presence of lipopolysaccharide (LPS) or heat-killed C.albicans ATCC 90028. After 18 hours, the supernatant was collected and submitted to the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for determination of the pro-inflammatory cytokines tumor necrosis factor-alpha (TNF-), interleukin-6 (IL-6), CXCL8, IL-1, monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1) and anti-inflammatory cytokines IL-10 and transforming growth factor- (TGF-). The results are expressed as mean ± standard deviation of the values obtained for each group, and were analyzed using nonparametric statistical tests; p values <0.05 were considered statistically significant. The results demonstrated, in general, changes in monocytes from the elderly with DS, as compared to other groups: lower spontaneous production of CXCL8 and MCP-1; lower levels of TNF-, IL-6, IL-1, CXCL8, MCP-1 and IL-10 after stimulation with LPS; and reduced production of TNF- and IL-6 after stimulation with C. albicans. Comparing...


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Idoso , Idoso de 80 Anos ou mais , Candida albicans/imunologia , Citocinas/biossíntese , Estomatite sob Prótese/imunologia , Monócitos/metabolismo , Fatores Etários , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Imunofluorescência , Prótese Total Superior/microbiologia
15.
Bauru; s.n; 2011. 98 p. ilus, tab, graf.
Tese em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: biblio-865848

RESUMO

Fibroblastos são as células mais numerosas encontradas nos tecidos orais como gengiva, ligamento periodontal e polpa dental. Além de exercerem função estrutural, estas células também desempenham papel importante na resposta imune destes tecidos através do reconhecimento de antígenos e produção de mediadores inflamatórios e citocinas. Evidências apontam ainda para o fato de que fibroblastos não constituem um grupo único de células. Sendo assim, os objetivos deste estudo foram: (I) avaliar a produção diferencial de fibroblastos de gengiva, ligamento periodontal e polpa dental de dentes permanentes e decíduos quanto à produção das quimiocinas CCL3 e CXCL12; (II) avaliar a produção de pró-colágeno I pelas células de polpa e (III) avaliar a expressão diferencial dos fibroblastos quanto a microRNAs. Dentes recentemente extraídos (terceiros molares hígidos) e fragmentos de gengivas saudáveis de três pacientes adultos foram obtidos no Laboratório de Farmacologia e Fisiologia Clínica da Faculdade de Odontologia de Bauru. Caninos decíduos de dois pacientes com indicação para extração por motivos ortodônticos foram obtidos na Clínica de Odontopediatria da mesma unidade. Culturas primárias de fibroblastos de gengiva (n=3), ligamento periodontal (n=3) e polpa de dente permanente (n=3) e polpa dental de dente decíduo (n=2) foram estabelecidas a partir de tecidos humanos por meio de técnica de explant. Após a quarta passagem, a produção de CCL3 e de CXCL12 foi avaliada após estímulo com concentrações crescentes (0 10 µg/mL) de ácido lipoteicóico de Enterococcus faecalis (EfLTA), lipopolissacarídeo de Porphyromonas gingivalis (PgLPS) ou LPS de Escherichia coli (EcLPS) por ELISA após 1, 6 e 24 h. O RNAm para as quimiocinas no grupo estimulado com EcLPS por 24 h foi avaliado por transcrição reversa seguida de reação em cadeia da polimerase quantitativa. A produção de pró-colágeno I por células de polpa estimuladas com EfLTA e PgLPS foi avaliada por imunofluorescência. O perfil...


Fibroblasts are the dominant cells within oral tissues such as gingiva, periodontal ligament and dental pulp. Besides the architectural maintenance of the connective tissues, fibroblasts are also involved in connective tissue immune response through antigen recognition and production of inflammatory mediators and cytokines. Recent studies also demonstrated that fibroblasts do not constitute a unique group of cells. Taken this togeter, the objectives of the present study were: (I) to evaluate the production of the chemokines CCL3 and CXCL12 by human gingival, periodontal ligament as well as permanent and deciduous dental pulp fibroblasts; (II) to evaluate the production of procollagen I by dental pulp fibroblasts and (III) to evaluate the differential pattern of expression of microRNAs by the oral fibroblasts. Recently extracted teeth (non-carious third molars) and fragments of healthy gingiva from three adults were obtained at the Laboratory for Clinical Pharmacology and Physiology at Dental School of Bauru. Deciduous canines from two patients with orthodontic indication for extraction were obtained at Pediatrics Clinics of Dental School of Bauru. Primary cultures of fibroblasts from gingiva (n=3), periodontal ligament (n=3) as well as permanent pulp (n=3) and deciduous pulp (n=2) were established through an explant technique. After the fourth passage, fibroblasts were challenged with increasing concentrations (0 10 µg/mL) of Enterococcus faecalis lipoteichoic acid (EfLTA), Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide (PgLPS) or Escherichia coli LPS (EcLPS) for 1, 6 and 24 h. The chemokines were assessed through ELISA while the mRNA for CCL3 and CXCL12 (EcLPS at 24 h) were assessed through reverse transcription followed by quantitative polymerase chain reaction. The expression of microRNAs was screened through a microarray assay. The production of CCL3 on cell supernatants was detected in all cellular groups, with higher amounts at gingival fibroblasts...


Assuntos
Humanos , Fibroblastos/metabolismo , Gengiva/citologia , Ligamento Periodontal/citologia , Polpa Dentária/citologia , Pró-Colágeno/biossíntese , Quimiocinas/biossíntese , Análise de Variância , Antígenos de Bactérias/metabolismo , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Imunofluorescência , Técnicas In Vitro , Reação em Cadeia da Polimerase
16.
Odontol. clín.-cient ; 9(1): 83-87, jan.-mar. 2010. ilus
Artigo em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: lil-541613

RESUMO

O penfigóide cicatricial é uma doença bolhosa inflamatória de caráter crônico e autoimune que afeta primariamente as superfícies mucosas. Auto anticorpos são produzidos contra o complexo de adesões dos hemidesmossomas da membrana basal da pele e mucosas. Afeta a cavidade bucal, laringe esôfago, membrana ocular e raramente a pele. A formação de cicatrizes é característica e pode resultar em cegueira, quando envolve a conjuntiva ocular. O envolvimento da mucosa bucal é observado na maioria dos pacientes e, quando acomete a gengiva, produz um quadro de gengivite descamativa. A etiologia é desconhecida, no entanto tem sido relatada a indução por drogas como possível desencadeador da doença. O diagnóstico é obtido com base na história clínica, biópsia e imunofluorescência direta. O tratamento é feito através de corticosteroide tópico ou sistêmico, na dependência da gravidade da doença. O presente trabalho tem por objetivo relatar um caso de penfigoide cicatricial onde a paciente apresentava apenas lesões bucais, tendo sido estabelecido o diagnóstico por meio da histopatologia através da microscopia óptica a qual apresentou aspecto bastante característico. O Tratamento intituído foi o uso de corticosteroide sistêmico. A paciente está em tratamento, com evolução satisfatória e compatível com o diagnóstico.


The cicatricial pemphigoid is a bullous disease of character chronic inflammatory and autoimmune diseases primarily affecting the mucosal surfaces. Auto-antibodies are produced against the hemidesmosomal complex of members of the basal membrane of the skin and mucous membranes. Affects the oral cavity, larynx, esophagus, eye membrane and rarely the skin. The formation of scar tissue is characteristic and can result in blindness if it involves the ocular conjunctiva. The involvement of the oral mucosa is observed in most patients and when affects the gingiva produces a table of gingivitis peel. The etiology is unknown, however, has been reported to be induced by drugs as a possible trigger of the disease. The diagnosis is made based on clinical history, biopsy and direct immunofluorescence. Treatment is realized by topical or systemic corticosteroids, depending on the severity of the disease, This study aims to report a case of cicatricial pemphigoid in which the patient had oral lesions only was the diagnosis established by histopathology by light microscopy which showed very characteristic appearance. The treatment was the use of systemic corticosteroids. The patient is in treatment, with satisfactory evolution and is compatible with the disgnosis.


Assuntos
Feminino , Boca/lesões , Imunofluorescência , Penfigoide Mucomembranoso Benigno
17.
São Paulo; s.n; 2009. 100 p. ilus, Cd Rom, tab, graf. (BR).
Tese em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: lil-558044

RESUMO

Líquen plano (LP) é doença inflamatória crônica de envolvimento mucocutâneo. lesões orais do líquen plano (LPO) são frequentes e classicamente reconhecidas pela sua distribuição sistêmica e bilateral na mucosa oral. As pesquisas atuais concentram-se sobre critério de diagnóstico do LPO em razão da sua caracterização como doença potencialmente cancerizável. O assunto é controverso, isto lporque alguns casos relatados com transformação malígna de LPO não apresentavam características explicitas de LPO, mas sim de outras doenças, particularmente displasia liquenóide. O objetivo deste presente estudo foi investigar correlações clínico-histopatológicas e imunofluorescência direta (IFD) em pacientes com lesões sujestivas de LPO.


Lichen planus (LP) is a chronic inflammatory disease involving skin and/or mucosa. Oral lesions of lichen planus (OLP) are frequent and recognized by their symmetical and bilateral distribution in the oral mucosa. Currently, most studies are concerned with the criteria...


Assuntos
Diagnóstico Bucal , Imunofluorescência/métodos , Líquen Plano Bucal/diagnóstico
18.
Bauru; s.n; 2009. 91 p. ilus, tab.
Tese em Português | BBO - Odontologia | ID: biblio-865280

RESUMO

Lesões nervosas periféricas com alterações morfofuncionais são de grande importância clínica, porque pode prejudicar a função, comprometendo a sensibilidade e/ou a motricidade do órgão alvo. Quando o nervo é lesado, o indivíduo torna-se impossibilitado de realizar suas atividades, seja profissional ou pessoal, e a partir do acidente esta situação se agrava ainda mais, pois tem início uma trajetória de sofrimento e humilhações decorrentes do tipo de assistência que passa a receber, tendo em vista, ainda, a fragilidade emocional e o abatimento moral de que passa a ser vítima. Na tentativa de reparo de lesões graves de nervos periféricos, várias técnicas têm sido utilizada, mas algumas com prejuízos funcionais para outras área do corpo, como por exemplo, quando se usa outro nervo no enxerto. Considerando que enxertos venosos tem tido bons resultados na capacidade regenerativa das fibras nervosas, e como elas são encontradas em abundância e em locais de fácil acesso cirúrgico, pensou-se em verificar se o tecido adiposo e o laser de baixa potência alterariam os resultados da reinervação, por tubulização, em músculos de contração rápida (EDL). Para isso foi utilizado 84 ratos (Rattus norvegicus) da linhagem wistar, machos, que foram divididos em 12 grupos (oito experimentais e quatro controles). Nos grupos experimentais (GE) foi utilizada tubulização de veia preenchida, ou não de tecido adiposo (GEVV e GEVG, respectivamente), com e sem tratamento de laser (GEVVL e GEVGL, respectivamente). Os grupos controles (GC) receberam os nomes de positivos (GCP) quando os animais não sofreram intervenção cirúrgica, e negativos (GCN) quando os animais foram submetidos à desnervação do nervo ciático. Todos os grupos tiveram os seus animais sacrificados em dois períodos, 45 e 150 dias, após o início do experimento. A certificação da recuperação foi feita por meio da análise dos músculos inervados por ele (EDL), comparando-os com os...


The peripheral nerves injuries with morphofunctional alterations, have great clinical importance because could prejudice the function, committing the sensibility and/or the motricity of target organ. When nerve is damage, the individual becomes disabled to realize yours activities, either professional or personal, in the post accident periods, this situation aggravates each more, therefore initiate a trajectory of suffering and distressing despite of the kind of assistance that this person receives, in view of your emotional fragility and your moral discouragement that pass to be victim. In attempt to repair severe peripheral nerves lesions, many techniques had been used, but some present functional prejudices to other area of bodies, for example when other autologous nerve graft it is used. Considering that, vein graft had demonstrated good results in regenerative nerve fibers capacity, and the vein are found in abundance in many locals of chirurgic access, it thought in verify if the adipose tissue and low power laser could alter the reinnervation results, by tubulization technique, in fast twitch muscle (EDL). For this, was used 84 rats (Rattus norvegicus) wistar, male, divided in 12 groups (eight experimental and four controls). In the experimental groups (EG) was used tubulization by vein combined / or not with adipose tissue (EGV and EGVA, receptively), with or without laser treatment (EGVL and EGVAL, respectively). The controls groups (CG) was called of positives (CGP) when the animals did not subject to transaction nerve, and negatives (CGN) when the sciatic nerve was transaction in this animals. All groups had the animals scarified in two periods, 45 and 150 days post experiments beginning. The recuperation was notified by means of muscle innervated analysis (EDL), comparing with the respective controls groups. Microscope techniques, Immunofluorescence for (MyoD and Miogenin), apoptosis by (Tunel assay)...


Assuntos
Humanos , Masculino , Dedos/inervação , Terapia com Luz de Baixa Intensidade , Nervos Periféricos/fisiologia , Regeneração Nervosa/fisiologia , Análise de Variância , Apoptose , Imunofluorescência , Modelos Lineares , Nervo Isquiático/fisiologia , Nervos Periféricos/cirurgia , Nervos Periféricos/efeitos da radiação , Proteínas Musculares/análise , Ratos Wistar , Procedimentos de Cirurgia Plástica , Regeneração Nervosa/efeitos da radiação , Tecido Adiposo/fisiologia
19.
Rev. bras. patol. oral ; 4(3): 143-146, jul.-set. 2005.
Artigo em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: biblio-872696

RESUMO

A doença por depósito linear de imunoglobulina A (IgA) é um processo mucocutâneo crônico, raro e de origem auto-imune, caracterizado por depósitos lineares do anticorpo ao longo da membrana basal da pele e mucosas. O estudo da enfermidade é de grande importância, visto que a mesma é de complexo diagnóstico e tratamento, além de sua etiopatogenia não estar ainda definida. O presente artigo teve por objetivo revisar a literatura referente à doença da IgA linear, abordando suas características clínicas, diagnóstico diferencial e alternativas de tratamento


Assuntos
Masculino , Feminino , Criança , Adulto , Deficiência de IgA/diagnóstico , Deficiência de IgA/patologia , Doenças Autoimunes/diagnóstico , Imunoglobulina A Secretora/imunologia , Imunoglobulina A Secretora , Imunofluorescência/métodos , Membrana Basal/imunologia , Membrana Basal/lesões
20.
Periodontia ; 5(4): 352-8, jul.-dez. 1996.
Artigo em Português | BBO - Odontologia | ID: biblio-853587

RESUMO

O problema para o periodontista clínico é a identificação e/ou a quantificação das bactérias periodontopatogênicas, dentre a variada e altamente complexa microbiota subgengival. As avaliações microbiológicas podem ser realizadas pelos métodos de cultura, de microscopia, de sondas de DNA e enzimáticos. O método de cultura ou seja, o isolamento e a identificação das espécies bacterianas é de pouca praticidade; o exame microscópio não é aceito comumente pelos clínicos por necessitar treinamento específico e custo elevado; os teste imunológicos, como o ELISA e a imunofluorescencia necessitam de uma bateria de anticorpos; as sondas de DNA exigem tecnologia sofisticada. Um dos meios para verificação da presença e/ou das bactérias periodontopatogênicas na placa subgengival, no fluido gengival ou na saliva é o teste enzimático. Inicialmente (1982), a utilização do método enzimático, ou seja BANA fase líquida, foi para identificar o perfil enzimático de três grupos de microrganismos: a espécie Porphyromonas, o gênero Capnocytophaga e as espiroquetas. Posteriormente, a apartir de 1989, foi introduzido a metodologia do teste BANA na forma sólida - PERIOSCAN - a princípio de maior praticidade e com a possibilidade de leitura dos resultados após 15 minutos, tornando-se desta forma o teste prático e acessível para a utilização no consultório do Periodontista. O objetivo deste trabalho é fazer uma análise da literatura, dos trabalhos que utilizaram o teste enzimático de BANA


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Meios de Cultura , Doenças Periodontais/microbiologia , Doenças Periodontais/terapia , Gengiva/microbiologia , Bactérias Anaeróbias Gram-Negativas , Técnicas Microbiológicas , Saliva/microbiologia , Ensaios Enzimáticos Clínicos , Imunofluorescência , Microscopia , Porphyromonas gingivalis , Sondas de DNA
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