Efeitos da terapia fotodinâmica mediada por curcumina livre e associada a nanopartículas de ferro sobre Candida spp. e biofilmes de estomatite protética / Effects of curcumin-mediated photodynamic therapy, alone and combined with Iron nanoparticles, on Candida spp. and prosthetic stomatitis biofilms

A estomatite protética é uma doença oral que resulta em processo inflamatório crônico da mucosa de suporte de uma prótese dentária, frequentemente associada à infecção por Candida. O tratamento da estomatite protética é dificultado pelo desenvolvimento de resistência das cepas de Candida aos fármacos antifúngicos. Neste cenário, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) mediada por curcumina livre (CUR) e nanopartículas de ferro revestidas de curcumina (NpFeCUR) sobre Candida spp. Para isso, o estudo foi dividido em 2 etapas. Na etapa 1, os efeitos da TFDa mediada por NpFeCUR foi estudado sobre células planctônicas e biofilmes monoespécie da cepa de C. albicans SC5314. Após o tratamento com TFDa, as células viáveis foram quantificadas por contagem de Unidades Formadoras de Colônias (UFC). Os resultados dessa etapa demonstraram que a TFDa mediada por NpFeCUR não foi capaz de reduzir a viabilidade fúngica em culturas planctônicas e em biofilmes. Na etapa 2, foi avaliado o efeito da TFDa mediada por CUR sobre biofilmes formados a partir de amostras clínicas de estomatite protética. Essas amostras foram coletadas de 5 pacientes com estomatite protética e analisadas quanto à presença de Candida spp. pelo método de Gram e semeadura em Chromagar Candida. As espécies de Candida foram identificadas por meio de espectrometria de massa (MALDI-TOF). A seguir, a TFDa foi testada sobre biofilmes monoespécies das espécies de Candida isoladas e sobre os biofilmes microcosmos. Após a TFDa, as células viáveis foram determinadas pela contagem de UFC em meios de cultura não seletivo e seletivos para leveduras, estreptococos, estafilococos e estreptococos do grupo mutans. Nos resultados da etapa 2, foi encontrada a presença de Candida nas amostras clínicas de 3 pacientes (P1, P2 e P3). Nas amostras P1 e P3, foi identificada a espécie C. dubliniensis, já na amostra P2 foi encontrada C. albicans. Os biofilmes monoespécies dessas cepas apresentaram redução em torno de 3,0 log10 UFC após o tratamento com TFDa. Para os biofilmes microcosmos, a redução do número de UFC causada pela TFDa variou entre as amostras dos pacientes e os meios de cultura, sendo capaz de inibir o crescimento de microrganismos totais, leveduras, estreptococos, estreptococos do grupo mutans e estafilococos. Conclui-se que a TFDa mediada por NpFeCUR não apresentou atividade antifúngica contra C. albicans. Já a TFDa mediada por CUR foi eficaz na redução das espécies de Candida e biofilmes provenientes de lesões de estomatite protética.(AU)

Prosthetic stomatitis is an oral disease that results in a chronic inflammatory process of the supporting mucosa of a dental prosthesis, often associated with Candida infection. The treatment of prosthetic stomatitis is complicated by the development of resistance in Candida strains to antifungal drugs. In this scenario, this study aimed to evaluate the effect of antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) mediated by free curcumin (CUR) and curcumin-coated iron nanoparticles (FeCUR NPs) on Candida spp. For this purpose, the study was divided into 2 stages. In stage 1, the effects of aPDT mediated by FeCUR NPs were studied on planktonic cells and monospecies biofilms of the C. albicans SC5314 strain. After aPDT treatment, viable cells were quantified by Colony-Forming Units (CFU) counting. The results of this stage demonstrated that aPDT mediated by FeCUR NPs was unable to reduce fungal viability in planktonic cultures and biofilms. In stage 2, the effect of aPDT mediated by CUR on biofilms formed from clinical samples of prosthetic stomatitis was evaluated. These samples were collected from 5 patients with prosthetic stomatitis and analyzed for the presence of Candida spp. by Gram staining and seeding on Chromagar Candida. Candida species were identified using mass spectrometry (MALDI-TOF). Subsequently, aPDT was tested on monospecies biofilms of the isolated Candida species and on microcosm biofilms. After aPDT, viable cells were determined by CFU counting on non-selective and selective culture media for yeasts, streptococci, staphylococci, and mutans group streptococci. In the results of stage 2, Candida was found in clinical samples from 3 patients (P1, P2, and P3). In P1 and P3 samples, C. dubliniensis was identified, while C. albicans was found in the P2 sample. Monospecies biofilms of these strains showed a reduction of around 3.0 log10 CFU after aPDT treatment. For microcosm biofilms, the reduction in CFU caused by aPDT varied between patient samples and culture media, being able to inhibit the growth of total microorganisms, yeasts, streptococci, mutans group streptococci, and staphylococci. It is concluded that aPDT mediated by FeCUR NPs did not exhibit antifungal activity against C. albicans. On the other hand, aPDT mediated by CUR was effective in reducing Candida species and biofilms from prosthetic stomatitis lesions.(AU)

Ação antifúngica e potencial antibiofilme de diferentes terapias alternativas frente a leveduras do gênero candida / Antifungal action and antibiofilm potential of different alternative therapies against yeasts of the genus candida

As candidoses usualmente são tratadas com antifúngicos. No entanto, o efeito desses fármacos é usualmente comprometido pela resistência microbiana e pelos efeitos adversos ocasionados. Nesse sentido, o aumento da prevalência e a complexidade de microrganismos multirresistentes a antimicrobianos têm incitado a busca por terapias complementares e alternativas capazes de atuar efetivamente frente à resistência emergente aos medicamentos. Diante disso, o objetivo desse trabalho foi avaliar comparativamente a ação antimicrobiana e o potencial antibiofilme, in vitro, entre a terapia fotodinâmica antimirobiana (TFDA) com azul de metileno, a fitoterapia, utilizando o extrato hidroetanólico de Spondias mombin L (EHSM), e o probiótico Lactobacillus rhamnosus (PLR) no controle de leveduras do gênero Candida, sendo elas: Candida albicans, Candida tropicalis e Candida parapsilosis. Trata-se de um estudo experimental, in vitro, analítico e quantitativo, em que foram investigadas, em triplicata, a atividade inibidora do crescimento microbiano e a atividade antibiofilme das seguintes terapias alternativas: TFDA, EHSM e PLR, utilizando como controle positivo a Nistatina 100.000UI/mL. Quanto à análise estatística, além da interpretação descritiva, foi aplicado o teste Two-Way ANOVA e o Teste de Tukey. Dessa forma, observou-se que todas as terapias testadas exibiram atividades antifúngica e antibiofilme. Todavia, quando comparadas tais atividades entre elas e ainda com a Nistatina, verificou-se que: a TFDA apresentou a maior atividade inibitória de crescimento microbiano (p<0,05), semelhante a Nistatina, seguida pelo EHSM, exibindo o PLR a menor atividade antifúngica e a TFDA juntamente com o EHSM representaram as terapias com maior atividade antibiofilme (p<0,0001), atuando ambas de forma semelhante a Nistatina. Nesse sentido, foi possível concluir que todas as terapias estudadas possuem atividades antifúngica e antibiofilme frente às cepas do gênero Candida testadas, com destaque para a atividade inibidora de crescimento microbiano da TFDA e a atividade antibiofilme da TFDA e do EHSM, sendo tais atividades semelhantes às atividades da Nistatina (AU).

Candidoses are usually treated with antifungals. However, the effect of these drugs is usually compromised by microbial resistance and adverse effects. In this sense, the increase in the prevalence and complexity of multidrug-resistant microorganisms to antimicrobials have incited the search for complementary and alternative therapies capable of acting effectively against the emerging resistance to medicines. Therefore, the objective of this study was to comparatively evaluate the antimicrobial action and antibiofilm potential, in vitro, between antimyrobial photodynamic therapy (PDT) with methylene blue, phytotherapy, using hydroethanolic extract of Spondias mombin L (EHSM)and the probiotic Lactobacillus rhamnosus (PLR) in the control of yeasts of the genus Candida: Candida albicans, Candida tropicalis and Candida parapsilosis. This is an experimental, in vitro, analytical and quantitative study in which the inhibitory activity of microbial growth and antibiofilm activity of the following alternative therapies were investigated in triplicate: TFDA, EHSM and PLR, using 100.000UI/mL as positive control. Regarding the statistical analysis, in addition to the descriptive interpretation, the Two-Way ANOVA test and the Tukey test were applied. Thus, it was observed that all therapies tested exhibited antifungal and antibiofilm activities. However, when comparing these activities between them and still with Nystatin, it was found that: TFDA showed the highest inhibitory activity of microbial growth (p <0.05), similar to Nystatin, followed by the EHSM, exhibiting the PLR the lowest antifungal activity and the TFDA together with the EHSM represented the therapies with higher antibiofilm activity (p <0.0001), acting both similarly to Nystatin. In this sense, it was possible to conclude that all the therapies studied have antifungal and antibiofilm activities against the strains of the genus Candida tested, especially the inhibitory activity of microbial growth of TFDA and the antibiofilm activity of TFDA and EHSM, similar to the activities of Nistatina (AU).

Novas estratégias terapêuticas para o controle de biofilmes orais: terapia fotodinâmica e sistema carreador de antimicrobianos / New therapeutic strategics for the control of oral biofilms: photodynamic therapy and drug delivery system

Os biofilmes orais possuem grande relevância clínica por estarem associados com o desenvolvimento de cárie dentária e candidose bucal, que são doenças infecciosas frequentemente encontradas na população. O presente trabalho foi dividido em dois estudos: Estudo 1 que teve como objetivo analisar os efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDa), mediada por Fotoenticine (FTC) e Azul de Metileno (AM), sobre biofilmes microcosmos de cárie dentária; e Estudo 2 cujo objetivo foi avaliar o gellan gum como biomaterial para carreador do antifúngico Ester fenetil do ácido caféico (CAPE) contra Candida albicans. No estudo 1, amostras de dentina cariada foram coletadas de diferentes pacientes para formar biofilmes microcosmos in vitro. Os biofilmes foram tratados com FTC ou AM associado à irradiação LED a 660 nm (28,5 J/cm²). Os dados foram analisados pela contagem de Unidades Formadoras de Colônias (UFC/mL). Além disso, a biomassa, estrutura do biofilme e produção de ácidos pelos microrganismos foram determinadas por análises microscópicas ou espectrofotométricas. Os biofilmes de diferentes pacientes apresentaram variações na composição microbiana, sendo formados por estreptococos, lactobacilos e leveduras. No geral, a TFDa diminuiu 3,7 Log10 do total de microrganismos, 2,8 Log10 de estreptococos, 3,2 Log10 de lactobacilos e 3,2 Log10 de leveduras, e atingiu a erradicação de estreptococos do grupo mutans. A TFDa também foi capaz de reduzir a biomassa, desagregar os biofilmes e diminuir a concentração de ácidos em 1,1 a 1,9 mmol de lactato/L. Em relação ao estudo 2, inicialmente, foram preparadas formulações do CAPE em diferentes concentrações de gellan gum (0,6 a 1%). As formulações foram avaliadas em relação ao sistema de liberação e ação antifúngica contra C. albicans. Verificou-se que concentrações mais altas de gellan (0,9 e 1%) levaram a uma liberação mais prolongada do CAPE em relação as concentrações mais baixas. Os valores de concentração inibitória mínima do CAPE sobre C. albicans foram aumentados quando esse composto foi incorporado no gellan. As formulações de CAPE em gellan apresentaram atividade antifúngica tanto em culturas planctônicas como em biofilmes de C. albicans, sendo esses efeitos dependentes do tempo de tratamento. O CAPE e suas formulações em gellan também levaram a uma diminuição da atividade proteolítica de C. albicans. Concluiu-se que a TFDa mediada por Fotoenticine e o sistema carreador de gellan gum podem ser estratégias terapêuticas promissoras para o controle dos biofilmes na cavidade bucal, podendo ser usadas respectivamente no tratamento da cárie e candidose. (AU)

Dental caries and oral candidiasis are infectious diseases frequently found in the population. The present work is divided into two studies, study 1 time as objective: To analyze the effects of antimicrobial photodynamic therapy (aPDT), mediated by Fotoenticine (FTC) and Methylene Blue (MB), on dental caries microcosm biofilms. In study 2, the objective was to evaluate gellan gum as a biomaterial to carry the antifungal caffeic acid phenethyl ester (CAPE) on Candida albicans. To conduct study 1, carious dentin samples were collected from different patients to form in vitro microcosm biofilms. The biofilms were treated with FTC or MB associated with 660 nm red LED irradiation, with energy dose of 28.5 J/cm² and power dose of 40 mW/cm². The data were analyzed by the count of Colony Forming Units (CFU/mL). In addition, the biomass, biofilm structure and acid production of the microorganisms were determined by microscopic or spectrophotometric analysis. The biofilms from different patients showed variations in microbial composition, being formed by streptococci, lactobacilli, and yeasts. Overall, aPDT decreased 3.7 Log10 of total microorganisms, 2.8 Log10 of streptococci, 3.2 Log10 of lactobacilli and 3.2 Log10 of yeasts, and achieved eradication of mutans group streptococci. PDTa was also able to reduce biomass, disaggregate biofilms, and decrease acid concentration by 1.1 to 1.9 mmol lactate/L. For study 2 of this, first the standards of CAPE were determined, such as minimum inhibitory concentration, and absorption peak, then CAPE was incorporated into gellan gum, and then the standard curve test and analysis of CAPE release was performed, finally the formulations were tested on planktonic culture and biofilm of different strains of C. albicans, it was also analyzed the action of this drug on the production of Sap. The MIC found varied from 32 to 64 µg/mL, the release tests showed a gradual release in the higher formulations, finally in the CFU/mL count both in planktonic culture and biofilm the formulations were able to inhibit the fungus. With this it is concluded that both aPDT for oral microcosm and gellan gum as caregiver of CAPE for Candida albicans inhibition are promising. (AU)

Uso da fototerapia como método complementar no retratamento endodôntico: revisões sistemáticas e meta-análise de ensaios clínicos / Use of phototherapy as a complementary method in endodontic reintervention: systematic reviews and meta-analysis of clinical trials

Este trabalho objetivou realizar duas revisões sistemáticas com as seguintes propostas: 1) Avaliar se a fototerapia com laser resultaria em menor dor pós-operatória (PP) em pacientes submetidos a reintervenção endodôntica; e 2) Avaliar se o uso da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) seria eficaz na desinfecção de canais radiculares em casos de reintervenção endodôntica. As Revisões Sistemáticas foram registradas no PROSPERO (CRD42021243500 e CRD42021260013, respectivamente) e seguiram as diretrizes dos Itens de Relatório Preferenciais para Revisões Sistemáticas e Meta-análise (PRISMA). As buscas foram realizadas nas bases de dados eletrônicas PubMeb, Scopus, Web of Science, Embase, Web of Science, Clinical Trials e Cochrane Library e nos bancos de dados da literatura cinza. A qualidade metodológica e o risco de viés foram avaliados pela ferramenta Cochrane Risk of Bias para ensaios clínicos randomizados (RCT) e pelo qualificador NewcastleOttawa (NOS) para estudos não RCT (prospectivos). A análise da qualidade de evidência foi realizada com base na abordagem GRADE. A meta-análise foi realizada com o R software Meta package, utilizando um intervalo de confiança (IC) de 95%. Quanto aos resultados do Artigo 1: Cinco artigos foram incluídos para análise. Os estudos foram classificados como "baixo" risco de viés. Dos cinco estudos clínicos, quatro estudos mostraram uma diminuição significativa da PP após a reintervenção endodôntica nos grupos de fototerapia a laser quando comparados ao grupo controle, principalmente nos primeiros dias após a intervenção. A certeza de evidência foi classificada como baixa. Devido à alta heterogeneidade clínica entre os estudos, não foi possível realizar qualquer meta-análise. Apesar das limitações desta revisão sistemática, a fototerapia se mostrou uma alternativa promissora na redução e controle da PP na reintervenção endodôntica não cirúrgica. Nos resultados do Artigo 2, dez estudos atenderam aos critérios de elegibilidade e foram incluídos, sendo 8 utilizados na síntese quantitativa. A meta-análise mostrou que todos os dados dos estudos apresentaram diferença significativa antes e depois da terapia fotodinâmica antimicrobiana na redução da carga microbiana em infecções endondônticas secundárias (OR 0,15 [0,07; 0,32], p < 0,0001). No geral, os estudos apresentaram baixo risco de viés e a análise das evidências foi classificada como moderada. Sugere-se que a terapia fotodinâmica seja uma ferramenta benéfica e promissora, mostrando eficácia na redução da carga microbiana nos casos de reintervenção endodôntica. Em suma, a abordagem da utilização da fototerapia se demonstrou eficaz na diminuição da dor pós-operatória e na desinfecção dos canais radiculares, podendo ser uma terapia indicada nos casos de reintervenção endodôntica(AU)

This study aimed to carry out two systematic reviews with the following proposals: 1) Evaluate whether laser phototherapy would result in less postoperative pain (PP) in patients undergoing endodontic reintervention; and 2) Evaluate whether the use of antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) would be effective in disinfection of root canals in cases of endodontic reintervention. Systematic Reviews were registered in PROSPERO (CRD42021243500 and CRD42021260013, respectively) and followed the guidelines of the Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Metaanalysis (PRISMA). Searches were performed in the electronic databases PubMeb, Scopus, Web of Science, Embase, Web of Science, Clinical Trials and Cochrane Library and in the gray literature databases. Methodological quality and risk of bias were assessed by the Cochrane Risk of Bias tool for randomized clinical trials (RCT) and by the Newcastle-Ottawa (NOS) qualifier for non-RCT (prospective) studies. The analysis of the quality of evidence was performed based on the GRADE approach. The meta-analysis was performed using the R Meta package software, using a 95% confidence interval (CI). As for the results of Article 1: Five articles were included for analysis. Studies were classified as "low" risk of bias. Of the five clinical studies, four studies showed a significant decrease in PP after endodontic reintervention in the laser phototherapy groups when compared to the control group, mainly in the first days after the intervention. The certainty of evidence was rated low. Due to the high clinical heterogeneity between studies, it was not possible to perform any meta-analysis. Despite the limitations of this systematic review, phototherapy proved to be a promising alternative for the reduction and control of PP in conventional endodontic reintervention. In the results of Article 2, ten studies met the eligibility criteria and were included, being 8 used in the quantitative synthesis. The meta-analysis showed that all data from the studies showed a significant difference before and after antimicrobial photodynamic therapy in reducing the microbial load in secondary endodontic infections (OR 0.15 [0.07; 0.32], p < 0.0001). Overall, the studies presented a low risk of bias and the analysis of evidence was rated as moderate. It is suggested that photodynamic therapy is a beneficial and promising tool, showing efficacy in reducing the microbial load in cases of endodontic reintervention. In summary, the approach to the use of phototherapy has been shown to be effective in reducing postoperative pain and disinfection of root canals, and may be an indicated therapy in cases of endodontic reintervention(AU)

Evaluation of Antimicrobial Photodynamic Therapy as an Adjuvant in Periodontal Treatment in Individual with Down Syndrome

Abstract Objective: To evaluate the effectiveness of Antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT), associated with scaling and root planing in the non-surgical periodontal treatment of individuals with Down Syndrome. Material and Methods: A controlled, randomized, split-mouth study was conducted. A total of 8 participants diagnosed with Down Syndrome aged 17-38 years of both sexes with clinical periodontitis were included in the study. Participants were treated at least three times: at the baseline, Plaque Index (PI), Bleeding on Probing (BOP), and Probing Pocket Depth (PPD) were obtained. After one week, conventional scaling and root planing were performed, and two quadrants were randomly selected for aPDT application. The reassessment was obtained one month after the aPDT application. The significance level was set at 5%. Analyses were performed considering a 95% confidence interval. Results: In the intergroup evaluation, no statistically significant differences were observed (p>0.05). In the intragroup evaluation, no statistically significant variations were observed in relation to the PI (p>0.05) and PPD (p>0.05); however, a statistically significant reduction in the BOP was observed between the test group (p=0.013) and control group (p=0.015). Conclusion: The use of aPDT as adjuvant therapy did not promote additional benefits in decreasing PI and PPD after 1 month of treatment. However, a significant reduction in the BOP was observed in the intragroup evaluation.

Comparative in vitro study of intracanal Enterococcus faecalis reduction using photosensitizers in aPDT

Aim: To compare Enterococcus faecalis reduction after antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) used with methylene blue, toluidine blue, tannin, and curcumin as photosensitizers, an adjunct to endodontic chemomechanical preparation (CMP) in root canals of human teeth. Methods: A total of 120 single-rooted teeth were divided into 6 groups (n = 20): G1- CMP and 2.5% sodium hypochlorite (NaOCl); G2- CMP and saline solution; G3- CMP, 2.5% NaOCl, and aPDT with 0.005% methylene blue; G4- CMP, 2.5% NaOCl, and aPDT with 0.005% toluidine blue; G5- CMP, 2.5% NaOCl, and aPDT with 0.005% tannin; and G6- CMP, 2.5% NaOCl, and aPDT with 0.005% curcumin. A portable semiconductor laser was used (660 nm, 100 mW, 1.8 J, 180s) in groups 1, 2, 3, 4, 5, and a blue LED light-curing (420-480 nm, 1200 mV/cm2 ) in G6. For all groups, a 5 min pre-irradiation time was applied. Samples were collected before (initial collection), immediately after (intermediate collection) and 7 days after CMP (final collection) for colony-forming unit (CFU) counting. The Kruskal-Wallis test and analysis of variance (ANOVA) were performed (p < 0.05; 95% confidence interval). Results: In between-group comparisons, there was no significant difference observed in the number of CFUs at the initial (p >< 0.001) and final collections (p >< 0.001) for G2 and G3. In within-group comparisons, the number of CFUs showed a decreasing trend in G4 (p = 0.007) and G5 (p = 0.001). Conclusion: Photosensitizers promoted E. faecalis reduction, with better results for tannin and curcumin. Alternative photosensitizers should be the focus of further studies.>< 0.05; 95% confidence interval). Results: In between-group comparisons, there was no significant difference observed in the number of CFUs at the initial (p < 0.001) and final collections (p >< 0.001) for G2 and G3. In within-group comparisons, the number of CFUs showed a decreasing trend in G4 (p = 0.007) and G5 (p = 0.001). Conclusion: Photosensitizers promoted E. faecalis reduction, with better results for tannin and curcumin. Alternative photosensitizers should be the focus of further studies.>< 0.001) and final collections (p < 0.001) for G2 and G3. In within-group comparisons, the number of CFUs showed a decreasing trend in G4 (p = 0.007) and G5 (p = 0.001). Conclusion: Photosensitizers promoted E. faecalis reduction, with better results for tannin and curcumin. Alternative photosensitizers should be the focus of further studies>< 0.001) for G2 and G3. In within-group comparisons, the number of CFUs showed a decreasing trend in G4 (p = 0.007) and G5 (p = 0.001). Conclusion: Photosensitizers promoted E. faecalis reduction, with better results for tannin and curcumin. Alternative photosensitizers should be the focus of further studies

Abordagens terapêuticas não-cirúrgicas para a queilite actínica / Non-surgical therapeutics approaches for actinic cheilitis

A queilite actínica (QA) é uma desordem potencialmente maligna que se desenvolve principalmente no lábio inferior, decorrente da exposição crônica a luz solar. O objetivo desse estudo é elucidar, a partir de uma revisão da literatura, as abordagens não cirúrgicas mais atuais para o tratamento da QA. Foi realizada uma busca nas bases de dados PubMed, Scielo e Cochrane, sendo obtidos 280 artigos e após aplicação dos critérios de elegibilidade, foram utilizados no presente traba lho 16 estudos. Várias abordagens, como, diclofenaco sódico, mebutato de ingenol, imiquimode, 5-fluorouracil, fludroxicortida e terapia fotodinâmica, são apontadas e estudadas como forma de tratamento para a QA. Entretanto, faltam trabalhos para que se estabeleça um consenso sobre a terapêutica não-cirúrgica mais adequada... (AU)

Actinic cheilitis (AC) is a potentially malignant disorder that develops mainly on the lower lip, result ing from a chronic exposure to sunlight. The objective of this study is to elucidate, from a literature review, the most current non-surgical approaches for the treatment of AC. A search was performed in the PubMed, Scielo and Cochrane databases, obtaining 280 papers and after applying the eligibility cri teria, 16 studies were used in the present study. Various approaches, such as diclofenac sodium, ingenol mebutate, imiquimod, 5-fluorouracil, fludroxycortide and photodynamic therapy are pointed out and studied as a form of treatment for AC. However, there is a lack of work to establish a consensus on the most appropriate non-surgical therapy... (AU)

Photosensitizers and exposure times to light showed tissue compatibility in isogenic mice / Fotossensibilizadores e tempo de exposição a luz em relação a compatibilidade de tecidos em ratos isogênicos

Objective: The aim of this study was to evaluate the subcutaneous tissue response after different protocols to photodynamic therapy (PDT). In Phase 1, were tested the diode laser (used for 1min) associated to the photosensitizer phenothiazine chloride solution (PCS) in different concentrations. In Phase 2 ­ the diode laser and LED were tested associated to two different photosensitizers, PCS and Curcumin, in different exposure times of light application. Material and Methods: After 7, 21 and 63-days the animals were euthanized and the subcutaneous tissue processed to histological analysis. Qualitative and semi-quantitative descriptions of the inflammatory process and immunohistochemical technique were performed. The obtained data were analyzed by Kruskal-Wallis and Dunn's post-test (α= 0.5). Results: On Phase 1, the tissue response was very similar among the groups. For the inflammatory infiltrate, PCS with concentration of 10mg/mL exhibited the most intense reaction (p > 0.05). On Phase 2, at 7-days period, the analyzed parameters presented small magnitude and after 21 and 63-days, all the parameters demonstrated tissue compatibility. Conclusion: Both photosensitizers presented proper tissue compatibility regardless the different concentrations used on Phase 1 and different durations of light exposure on Phase 2 (AU)

Objetivo: Este estudo avaliou a resposta do tecido subcutâneo após terapia fotodinâmica, utilizando na Fase 1 - laser diodo por 1min e solução fotossensibilizadora de cloreto de fenotiazina (CF) em diferentes concentrações e Fase 2 - laser diodo e LED e dois fotossensibilizadores, CF e Curcumina, em diferentes tempos de exposição da aplicação de luz. Material e Métodos: Após 7, 21 e 63 dias, foram realizadas descrições qualitativas e semiquantitativas do processo inflamatório e técnica de imunoistoquímica. Os dados foram analisados pelo pós-teste de Kruskal-Wallis e Dunn (α = 0,5). Resultados: Na Fase 1, a resposta do tecido foi muito semelhante. O infiltrado inflamatório, na concentração de 10 mg / mL, exibiu reação mais intensa (p > 0,05). Na Fase 2, aos 7 dias, os parâmetros analisados apresentaram pequena magnitude. Aos 21 e 63 dias, todos os parâmetros demonstraram compatibilidade com o tecido. Conclusão: Ambos os fotossensibilizadores apresentaram compatibilidade de tecido adequada, independentemente das diferentes concentrações utilizadas na Fase 1 e diferentes durações de exposição à luz na Fase 2 (AU)

Associação da quitosana à terapia fotodinâmica para controle de Candida albicans: estudo em culturas planctônicas, biofilmes e células persistentes / Association of chitosan and photodynamic therapy to control Candida albicans: study in planktonic cultures, biofilms and persister cells

A terapia fotodinâmica (TFD) vem se mostrando como um método eficaz no controle de micro-organismos patogênicos, sendo investigada para o tratamento de diversas doenças infecciosas, como a candidose bucal. Recentemente, alguns agentes potencializadores dessa terapia têm sido estudados, incluindo a Quitosana (QT), um polímero natural extraído do exoesqueleto de crustáceos. O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito potencializador da QT na TFD mediada pelo fotossensibilizador Azul de Metileno (AM) sobre cepas de Candida albicans, investigando sua ação em culturas planctônicas, biofilmes e células persistentes ao fluconazol. Além disso, foi avaliado a capacidade da QT em interferir na absorção do AM pelas células de Candida. Foram utilizadas duas cepas de C. albicans, sendo uma padrão (ATCC 18804) e uma clínica isolada de candidose orofaríngea (70). Para os ensaios em culturas planctônicas, as cepas de C. albicans foram cultivadas em caldo Yeast Nitrogen Base (YNB) por 24 horas. Os biofilmes foram formados por 48 horas no fundo das placas de 96 poços. Para indução de células persistentes, C. albicans foi cultivada com altas concentrações de fluconazol por 48 horas. A seguir, foram realizados os tratamentos com QT a 5 mg/mL (pH de 6,5), AM nas concentrações de 300 ou 600 µM, e irradiação com LED (660 nm) na densidade de energia de 30 J/cm2. Foram incluídos oito grupos experimentais: TFD com AM e QT na presença de Luz (AM+QT+L+), AM e QT sem Luz (AM+QT+L-), QT e Luz (QT+L+), QT sem Luz (QT+L-), TFD com AM e Luz (AM+L+), AM sem Luz (AM+L-), Solução Fisiológica com Luz (F-L+) e apenas Solução Fisiológica (F-L-). Após os tratamentos, foi realizada contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/mL). Para determinar a absorção do fotossensibilizador pelas células de C. albicans, as células foram lisadas e centrifugadas para leitura da densidade óptica. Os dados foram analisados por ANOVA e teste de Tukey (p<0,05%). Na TFD em culturas planctônicas, o AM (300 µm) reduziu as células de Candida em 1,6 log (UFC/mL), enquanto que a associação AM+QT levou à redução de 4,7 log. Na TFD em biofilmes, ocorreu redução microbiana de 2,9 log para o tratamento com AM (600 µm) e de 5,3 log para AM+QT. Em relação às células persistentes, a redução encontrada foi de 0,8 log para AM e 1,5 log para AM+QT. No teste de absorção, a penetração do AM nas células de Candida (DO 0,02) foi aumentada na presença da QT (DO 0,39). Concluiu-se que a QT potencializou o efeito antimicrobiano da TFD em culturas planctônicas, biofilmes e células persistentes de C. albicans, provavelmente por facilitar a penetração do AM nas células fúngicas.

Photodynamic therapy (PDT) has been shown to be an effective method to control pathogenic microorganisms, being investigated for the treatment of several infectious diseases, such as oral candidiasis. Recently, some agents that enhance this therapy have been studied, including Chitosan (CS), a natural polymer extracted from the exoskeleton of crustaceans. The aim of this study was to evaluate the potentiating effect of CS on Methylene Blue (MB) photosensitizer-mediated PDT on Candida albicans strains, investigating its action on planktonic cultures, biofilms and persister cells to fluconazole. In addition, the ability of CS to interfere with MB absorption by Candida cells was evaluated. Two strains of C. albicans were used, one standard (ATCC 18804) and one isolated clinical of oropharyngeal candidosis (70). For assays in planktonic cultures, C. albicans strains were cultivated in Yeast Nitrogen Base broth (YNB) for 24 hours. Biofilms were formed for 48 hours at the bottom of 96-well plates. For the induction of persister cells, C. albicans was cultivated with high concentrations of fluconazole for 48 hours. Next, treatments were performed with CS at 5 mg/mL (pH 6.5), MB at concentrations of 300 or 600 µM, and irradiation with LED (660 nm) at an energy density of 30 J/cm2. eight experimental groups were included: PDT with MB and CS in the presence of Light (MB+CS+L+), MB and CS without Light (MB+CS+L-), CS and Light (CS+L+), CS without Light (CS +L-), PDT with MB and Light (MB+L+), MB without Light (MB+L-), Physiological Solution with Light (F-L+) and Physiological Solution only (FL-). After the treatments, colony forming units (CFU/mL) were counted. To determine the absorption of the photosensitizer by C. albicans cells, the cells were lysed and centrifuged for optical density reading. Data were analyzed by ANOVA and Tukey test (p<0.05%). In PDT in planktonic cultures, MB (300 µm) reduced Candida cells by 1.6 log (CFU/mL), while the MB+CS association led to a 4.7 log reduction. In PDT in biofilms, there was a microbial reduction of 2.9 log for the treatment with MB (600 µm) and of 5.3 log for MB+CS. Regarding persister cells, the reduction found was 0.8 log for MB and 1.5 log for MB+CS. In the absorption test, the penetration of MB into Candida cells (OD 0.02) was increased in the presence of CS (OD 0.39). It was concluded that CS potentiated the antimicrobial effect of PDT in planktonic cultures, biofilms and persister cells of C. albicans, probably by facilitating the penetration of MB into fungal cells .

Métodos quimiomecânicos no tratamento de lesões cariosas profundas: um estudo in vitro / Chemomechanical methods in the treatment of deep carious lesions: an in vitro study

Este trabalho teve como objetivo investigar as propriedades antimicrobianas de substâncias utilizadas em métodos quimiomecânicos e seus efeitos na dentina e em células pulpares. Uma lesão de cárie artificial em dentina foi desenvolvida em cavidades padronizadas realizadas em dentes bovinos com amostras de Streptococcus mutans (ATCC 25175) e Lactobacillus casei (ATCC 7463). As cavidades foram tratadas de acordo com os grupos: G1 - Tampão FosfatoSalino (PBS); G2 - Clorexidina (CHX); G3 ­ Papacárie®; G4 - Água ozonizada (O3) e G5 - Terapia Fotodinâmica (PDT). O depósito microbiano coletado foi diluído e cultivado para obtenção de colônias isoladas na técnica pour-plate. A atividade de metaloproteinases dentinárias gelatinases (MMP-2 e MMP-9) foi avaliada pelo ensaio de zimografia qualitativamente. A viabilidade celular foi avaliada em células pulpares após 24, 72 e 120h e a osteodiferenciação após 10 dias. A CHX e PDT apresentaram redução bacteriana em comparação aos demais grupos (p<0,05). O tratamento feito com PBS, CHX e PDT apresentou atividade gelatinolítica após o tratamento para as MMP-2 e MMP-9. A viabilidade celular reduziu em 120 h para todos os grupos em relação ao controle. CHX, O3 e PDT induziram maior osteodiferenciação em relação ao PBS e ao Papacárie. Concluiu-se que CHX e PDT promoveram leve diminuição da carga bacteriana na lesão cariosa artificial. Todos os tratamentos causaram, em parte, atividade gelatinolítica, por meio da expressão de MMP-2 e MMP-9. Apesar de diminuírem a viabilidade celular, nenhum tratamento interferiu com a diferenciação das células pulpares. A utilização dos métodos quimiomecânicos testados resultou em baixa redução bacteriana nas lesões cariosas artificiais. Concomitantemente, alguns desses tratamentos podem ativar metaloproteinases e interferir com funções essenciais de células pulpares.

This work aimed to investigate the antimicrobial properties of substances used in chemo mechanical methods and their effects on dentin and pulp cells. An artificial caries lesion was developed in standardized cavities performed in bovine teeth with strains of Streptococcus mutans (ATCC 25175) and Lactobacillus casei (ATCC 7463). The cavities were treated according to the following groups: G1 - Phosphate Buffer Saline (PBS); G2 - Chlorhexidine (CHX); G3 ­ Papacárie®; G4 - Ozonized water (O3) and G5 - Photodynamic Therapy (PDT). A microbial sample was collected, diluted, and cultivated to obtain isolated colonies through pour-plate technique. The activity of dentin gelatinase metalloproteinases (MMP-2 and MMP9) was qualitatively evaluated by zymography assay. Cell viability was evaluated in pulp cells after 24, 72, and 120h and osteodifferentiation after 10 days. CHX and PDT caused bacterial reduction compared to the other groups (p<0.05). PBS, CHX, and PDT showed gelatinolytic activity through the expression of MMP-2 and MMP-9. Cell viability was reduced at 120 h for all groups in comparison to control. CHX, O3, and PDT induced greater osteodifferentiation compared to PBS and Papacárie®. It was concluded that CHX and PDT promoted a slight decrease in bacterial load in the artificial carious lesion. All treatments caused, in part, gelatinolytic activity, through the expression of MMP-2 and MMP-9. Despite decreasing cell viability, no treatment interfered with the differentiation of pulp cells. The use of chemo mechanical methods has a slight biological significance in reduction of bacterial load in artificial carious lesions. In addition, some of these treatments can activate metalloproteinases and interfere with essential pulp cell functions.

Efeito in vitro da laserterapia e da terapia fotodinâmica na redução de bactérias presentes em canais radiculares / In vitro effect of lasertherapy and photodynamic therapy in bacterial reduction presents in root canals

Este estudo tem por objetivo verificar in vitro o efeito bactericida da laserterapia e da terapia fotodinâmica com laser de baixa potência (660 nm e 808 nm) em bactérias presentes nos canais radiculares. Métodos: foram preparadas 60 placas de Petri com bactérias: 20 placas com Enterococcus faecalis, 20 placas com Staphylococcus aureus e 20 com Pseudomonas aeruginosa. Aleatoriamente, dividiu-se cada grupo em 10 subgrupos (duas placas cada): três subgrupos tratados com laserterapia 660 nm em doses de 150, 225 e 300J/ cm², três subgrupos tratados com terapia fotodinâmica (azul de metileno 0,2% e laser 660 nm) em doses de 150, 225 e 300J/cm²; um subgrupo tratado com laserterapia 808 nm na dose de 225J/cm², um subgrupo com terapia fotodinâmica e laser 808 nm, em dose 225J/cm²; um subgrupo tratado apenas com fotossensibilizante (FS), e um não tratado (controle). Os tratados com laserterapia e terapia fotodinâmica foram irradiados uma única vez e incubados por 24 horas. Os últimos dois não receberam irradiação. As culturas foram analisadas visualmente para verificação do halo de inibição. Nos grupos submetidos somente à laserterapia, para o grupo FS e para o grupo controle, não foram observados halos de inibição, já onde houve aplicação da TFD, tanto com L1 quanto com L2, observaram-se halos de inibição em todas as espécies bacterianas estudadas. Conclui-se que a laserterapia, não produziu efeitos bactericidas e/ou bacteriostáticos, enquanto a terapia fotodinâmica nos dois comprimentos de onda produziu halos significativos de inibição de crescimento nas três bactérias do estudo.(AU)

This study aims to verify in vitro the bactericidal effect of laser therapy and photodynamic therapy with low power laser (660 nm and 808 nm), in bacteria present in the root canals.Methods: 60 Petri dishes were prepared with bacteria: 20 plates with Enterococcus faecalis, 20 plates with Staphylococcus aureus and 20 with Pseudomonas aeruginosa. At random, each group was divided into 10 subgroups (two plates each): three subgroups treated with 660nm laser therapy at doses of 150, 225 and 300J / cm², three subgroups treated with photodynamic therapy, (0.2% methylene blue and laser 660nm) in doses of 150, 225 and 300J / cm²; a subgroup treated with 808nm laser therapy at a dose of 225J / cm², a subgroup with (photodynamic therapy and 808nm laser) at a dose of 225J / cm²; a subgroup treated only with photosensitizer(FS), and an untreated (control). Those treated with laser therapy and photodynamic therapy were irradiated only once and incubated for 24 hours. The last two received no radiation. The cultures were analyzed visually to check the inhibition zone. In the groups submitted to laser therapy only, for the FS group and for the Control group, no inhibition halos were observed, since PDT was applied, with both L1 and L2, inhibition halos were observed in all studied bacterial species. It was concluded that laser therapy did not produce bactericidal and / or bacteriostatic effects, while photodynamic therapy at both wavelengths produced significant growth inhibition halos in the three studied bacteria.(AU)

Influência da terapia fotodinâmica na resistência de união do cimento obturador à dentina intrarradicular e na morfologia da interface adesiva / Influence of photodynamic therapy on the bond strength of an MTA based root canal sealer to intraradicular dentin and morphology of the adhesive interface

Introdução: A terapia fotodinâmica (TFD) é utilizada como coadjuvante ao tratamento endodôntico para potencializar a redução microbiana no sistema de canais radiculares. No entanto, a literatura carece de estudos sobre as consequências da TFD na resistência de união do cimento obturador à dentina intrarradicular. O objetivo deste estudo foi avaliar a influência da TFD com azul de metileno na resistência de união do cimento obturador (MTA Fillapex) utilizando o teste de push-out, analisar o padrão de fratura das amostras representativas por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e a morfologia da interface adesiva intrarradicular pela microscopia confocal de fluorescência (MCF). Material e Métodos: Cinquenta e cinco dentes bovinos foram utilizados para simular o tratamento endodôntico. O preparo biomecânico foi realizado em todos os canais radiculares e os espécimes foram distribuídos em 5 grupos: controle (água deionizada); azul de metileno 50 mg/L (AM50SL); azul de metileno 100 mg/L (AM100SL); azul de metileno 50 mg/L + laser vermelho 660nm (AM50L) (TFD); e de azul de metileno 100 mg/L + laser vermelho 660nm (AM100L) (TFD). A resistência de união do cimento obturador à dentina foi mensurada usando uma máquina de teste universal (n=8) e as amostra representativas analisadas em MEV. A morfologia da interface adesiva intrarradicular foi analisada pela MCF. Os dados de resistência de união foram submetidos ao teste de KruskalWallis para comparação entre grupos e ao teste de Friedman para comparação entre terços (α=.05). Resultados: Houve diferença estatística significante para o grupo azul de metileno 100 mg/L + laser vermelho 660nm (TFD) quando comparando os terços radiculares, onde o terço apical apresentou maiores valores de resistência de união em relação ao terço médio (P=.0302). Nos demais grupos e terços não houve diferença estatística significante (P>.05). Quanto a morfologia da interface adesiva foi possível observar uma menor penetração do cimento obturador no grupo AM100L. Conclusão: Pode-se concluir que o uso de TFD com o fotossensibilizador azul de metileno na concentração de 50 mg/L não alterou negativamente a resistência de união do cimento obturador MTA Fillapex na dentina intrarradicular(AU)

Introduction: Photodynamic therapy (PDT) is used as an adjunct to endodontic treatment to enhance microbial reduction in the root canal system. However, studies are lacking on the consequences of the application of the application of PDT on the bond strength of the root canal sealer. Therefore, the objective of this study was to evaluate the influence of photodynamic therapy with methylene blue on the bond strength the root canal sealer using a push-out test, to analyze the fracture pattern of representative samples using scanning electron microscopy (SEM) and the morphology of the adhesive interface of the intraradicular dentin using Confocal Laser Scanning Microscopy (CLSM). Material and Methods: Fifty-five bovine teeth were used to simulate experimental endodontic treatments. Biomechanical instrumentation was performed for all root canals, and the teeth were distributed into 5 groups: control deionized water; methylene blue 50 mg/L (MB50WL); methylene blue 100 mg/L (MB100WL); methylene blue 50 mg/L + red laser 660nm (MB50L) (PDT); and methylene blue 100 mg/L + red laser 660nm (MB100L) (PDT). The push-out bond strength of the root sealer to dentin was measured using a universal testing machine (n=8), representative scanning electron microscopy images were obtained. Images of the morphology of the adhesive interface were obtained using CLSM (n=3). Bond strength data were submitted to the non-parametric Kruskal-Wallis test for comparison between groups and the Friedman test for comparison between thirds (α=.05). Results: Comparing the root thirds, for the methylene blue group with the higher concentration activated by Red Laser, there was significant difference, the apical third presented higher values of bond strength in relation to the middle third (P=.0302). In the other groups and thirds there was no statistically significant difference (P>.05). As for the morphology of the adhesive interface, it was possible to observe a lower penetration of the sealer in the MB100L group. Conclusion: The application of PDT with the photosensitizer methylene blue at a concentration of 50 mg/L, regardless of the activation by red laser, did not alter negatively the bond strength of the MTA Fillapex sealer to intraradicular dentin(AU)

Efeito de análogos de curcumina, irradiados ou não por LED, como agentes antimicrobianos e indutores de proliferação e migração celular / Effect of curcumin analogues, irradiated or not by LED, as antimicrobial agents and inducers of cell proliferation and migration

O tratamento endodôntico de dentes permanentes jovens com infecções pulpares/periapicais antes de completar a rizogênese ainda é um desafio para a Endodontia e a Odontopediatria. Relatos científicos têm mostrado que a curcumina (CUR), um fitoquímico polifenólico, apresenta diversas propriedades terapêuticas, entre as quais, amplo espectro de ação antimicrobiana e a capacidade de induzir a proliferação e migração celular. Além disso, devido à sua capacidade excitatória na presença de luz, a CUR também tem sido utilizada como fotossensibilizante em terapia fotodinâmica associada ao LED (light emitting diode), promovendo aumento dos seus efeitos biológicos. Uma forma de aumentar seu potencial terapêutico e reduzir algumas limitações do uso da CUR é a síntese de análogos a partir de pequenas modificações químicas na estrutura original, entretanto, mantendo sua capacidade fotossensibilizante. O objetivo desse estudo foi avaliar a ação antimicrobiana e antibiofilme de análogos de curcumina sob a influência ou não do LED sobre microrganismos de interesse endodôntico e sua influência sobre a viabilidade, proliferação e migração de fibroblastos da linhagem L-929. Uma série de compostos análogos de CUR (PCR-4 H, PCR-3 OH, PCR-4 OH, PCR-3 OCH3, PCR-4 OCH3, PCR-3 acetil, PCR-4 acetil) foram sintetizados pela metodologia de Pabon. A atividade antimicrobiana da CUR e seus análogos foi determinada pelo ensaio de Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) sobre Streptococcus mutans, Lactobacillus casei, Actinomyces israelii, Enterococcus faecalis e Fusobacterium nucleatum, sob a ação ou não do LED InGaN (nitreto de gálio e índio, com potência de saída de 100 mW/cm², ponta do LED com área de 0,78 cm², 60 s). A curcumina e seu análogo com melhor efeito antimicrobiano (PCR-3 OH) foi avaliado sobre o biofilme inicial (72h) e maduro (1 semana) dessas espécies em microplacas e sobre biofilmes multiespécies formados em túbulos dentinários por contagem das UFC/mL e por microscopia confocal, respectivamente, sob ação ou não do LED. Também foram avaliados quanto à citotoxicidade e a capacidade de induzir proliferação e migração em fibroblastos, por meio de ensaios de metiltetrazólio, azul de tripan e azul de Coomassie, respectivamente. Os dados foram avaliados estatisticamente (p<0,05). Dos 7 análogos de curcumina sintetizados, PCR-3 OH foi o único composto que apresentou atividade bactericida quando testado sobre as bactérias de interesse endodôntico selecionadas. Seu efeito foi potencializado na presença do LED, variando entre as espécies bacterianas. A curcumina teve efeito bactericida para as espécies S. mutans, A. israelii, L. casei e F. nucleatum, e em algumas delas, foi independente do LED. Ambos os compostos reduziram o crescimento dos biofilmes iniciais ou maduros, independente do LED. Entretanto, quando irradiados, o efeito dos compostos variou de acordo com a espécie bacteriana, sendo que A. israelii e S. mutans foram os mais afetados. Ambos os compostos reduziram significativamente os biofilmes multiespécies quando comparados ao controle sem tratamento, sendo que melhor efeito foi observado para PCR-3 OH. A curcumina foi considerada citocompatível a partir de 0,039µg/mL e PCR-3 OH a partir de 0,019 µg/mL. Houve redução significativa na viabilidade celular quando os compostos foram irradiados com LED nas concentrações 0,039 e 0,019 µg/mL. O LED, dentro dos parâmetros testados, reduziu significativamente a viabilidade, a proliferação e a migração celular, independente do composto ou tempo de exposição. Conclui-se que PCR-3 OH apresentou atividade bactericida e sobre biofilmes simples e multiespécies de bactérias de interesse endodôntico superior à CUR, principalmente sob ação do LED. Entretanto, sua citocompatiblidade foi inferior à da CUR. A presença do LED afetou a viabilidade, proliferação e migração dos fibroblastos, mostrando que os parâmetros utilizados para fins antimicrobianos não foram adequados para aplicação em células eucarióticas(AU)

Endodontic treatment of young permanent teeth with pulp / periapical infections before completing rhizogenesis is still a challenge for Endodontics and Pediatric Dentistry. Scientific reports have shown that curcumin (CUR), a polyphenolic phytochemical, has several therapeutic properties, including a broad spectrum of antimicrobial action and the ability to induce cell proliferation and migration. In addition, due to its excitatory capacity in the presence of light, CUR has also been used as a photosensitizer in photodynamic therapy associated with LED (light emitting diode), promoting an increase in its biological effects. One way to increase its therapeutic potential and reduce some limitations of the use of CUR is the synthesis of analogues from small chemical modifications in the original structure, however, maintaining its photosensitizing capacity. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial and antibiofilm action of curcumin analogues under the influence or not of LED on microorganisms of endodontic interest and their influence on the viability, proliferation and migration of L-929 fibroblasts. A series of CUR analog compounds (PCR-4 H, PCR-3 OH, PCR-4 OH, PCR-3 OCH3, PCR-4 OCH3, PCR-3 acetyl, PCR-4 acetyl) were synthesized by Pabon's methodology. The antimicrobial activity of CUR and its analogs was determined by the Minimum Concentration Inhibitory (CIM) and Minimum Bactericidal Concentration (CBM) assay on Streptococcus mutans, Lactobacillus casei, Actinomyces israelii, Enterococcus faecalis and Fusobacterium nucleatum, with or without the InGaN LED (gallium and indium nitride, with output power of 100 mW / cm², LED tip with an area of 0.78 cm², 60 sec). Curcumin and its analog with the best antimicrobial effect (PCR-3 OH) were evaluated on the initial (72h) and mature (1 week) biofilm of these species in microplates and on multispecies biofilms formed in dentinal tubules by counting CFU / mL and by confocal microscopy, respectively, under the action or not of the LED. They were also evaluated for cytotoxicity and the ability to induce proliferation and migration in fibroblasts, using methyltetrazolium, trypan blue and Coomassie blue assays, respectively. The data were evaluated statistically (p <0.05). Of the 7 curcumin analogues synthesized, PCR-3 OH was the only compound that showed bactericidal activity when tested on selected bacteria of endodontic interest. Its effect was enhanced in the presence of LED, varying between bacterial species. Curcumin had a bactericidal effect for the species S. mutans, A. israelii, L. casei and F. nucleatum, and in some of them, it was independent of the LED. Both compounds reduced the growth of the initial or mature biofilms, regardless of the LED. However, when irradiated, the effect of the compounds varied according to the bacterial species, with A. israelii and S. mutans being the most affected. Both compounds significantly reduced multispecies biofilms when compared to the untreated control, with the best effect being observed for PCR-3 OH. Curcumin was considered cytocompatible from 0.039 µg / mL and PCR-3 OH from 0.019 µg / mL. There was a significant reduction in cell viability when the compounds were irradiated with LED at concentrations of 0.039 and 0.019 µg / mL. The LED, within the parameters tested, significantly reduced cell viability, proliferation and migration, regardless of the compound or time of exposure. It is concluded that PCR-3 OH showed bactericidal activity and on simple and multispecies biofilms of bacteria of endodontic interest superior to CUR, mainly under the action of LED. However, its cytocompatibility was lower than that of the CUR. The presence of the LED affected the viability, proliferation and migration of fibroblasts, showing that the parameters used for antimicrobial purposes were not suitable for application in eukariotic cells(AU)

Antimicrobial Photodynamic Therapy in the Endodontic Treatment of Deciduous Teeth: In Vivo Pilot Study

Abstract Objective: To evaluate the Antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT) in infected deciduous teeth by quantifying the viable bacteria in root canal treatment. Material and Methods: Radicular canal cultures were collected (n= 10). Four intra-canal samples were collected at four different times in each of the sampled teeth, as follows: Time 1 (T1), baseline: After opening the pulp-chamber; Time 2 (T2): After application of aPDT; Time 3 (T3): After mechanical, chemical manipulation; Time 4 (T4): After a second application of aPDT. The aPDT was performed with a 4J/cm energy low-intensity diode, together with 0.005% methylene blue as a photosensitizer. The clinical specimens were taken to the laboratory for a bacteria count (colony forming units) and the results were statistically analyzed using the Friedman and Wilcoxon tests, with a significance level of α=0.05. Results: Statistical differences were seen between the numbers of bacteria at times T1-T2, T1-T3 and T1-T4 on the cultivated plates. However, no significant statistical differences were observed between the number of bacteria in samples T2-T3, T2-T4 and T3-T4. Conclusion: Antimicrobial photodynamic therapy can be a good co-adjuvant in root canal decontamination of necrotic primary teeth.

In Vitro Evaluation of the Antibacterial Effect of Photodynamic Therapy with Methylene Blue

Abstract Objective: To evaluate, in vitro, the effect of photodynamic therapy (PDT) compared to laser therapy and the use of a photosensitizer alone. Material and Methods: The following therapies were used: PDT, laser therapy and photosensitizer alone. For PDT, methylene blue (MB) at different concentrations and red laser InGaAlP 660nm were used. For the use of low-power laser (LPL) alone, red laser InGaAlP 660 nm and infrared laser AsGaAl, 830 nm, both in continuous emission were used. Standard ATCC strains of Staphylococcus aureus (S. aureus), Escherichia coli (E. coli) and Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) species were used. The antibacterial effect of PDT was quantified by the diameter of the inhibition halos. Results: PDT (LPL 660 nm, 320 J/cm2) with MB at concentration of 50 µg/mL showed antibacterial efficacy only when tested against S. aureus and E. coli strains, as well as with the isolated use of MB at the same concentration. Using LPL alone, whether red or infrared, with different dosimetry, no antibacterial effect was observed. In none of the therapeutic modalities used, P. aeruginosa inactivation was observed. Conclusion: Antibacterial effects of PDT (LPL 660 nm + MB 50 µg/mL) were observed for S. aureus and E. coli, as well as with the isolated use of MB (50 µg/mL). For P. aeruginosa, no antibacterial effect with any of the protocols recommended in the study was observed.

Associação da quitosana à terapia fotodinâmica para controle de Streptococcus mutans e biofilme microcosmos / Association of Photodynamic Therapy with chitosan for the control of Streptococcus mutans and microfilm biofilm

A terapia fotodinâmica (TFD) é uma técnica que combina um fotossensibilizador (FS) com luz visível e oxigênio molecular, podendo ser utilizada como agente antimicrobiano no controle de diversas doenças infecciosas, como a cárie dentária. A quitosana vem demonstrando atividade promissora quando associada à alguns fotossensibilizadores. Portanto, o objetivo desse trabalho foi investigar a associação da quitosana com o fotossensibilizador Photodithazine® (PDZ) na TFD sobre culturas planctônicas e biofilmes de S. mutans, bem como avaliar sua eficácia sobre biofilmes microcosmos orais. Inicialmente, foi preparada uma suspensão de S. mutans UA 159 padronizada em 106 células/mL. Para o estudo em culturas planctônicas, foi adicionada a suspensão de S. mutans em placas de 96 poços. Para o estudo em biofilmes, foram confeccionadas amostras de esmalte de dentes bovinos como substrato para a formação do biofilme em placas de 24 poços. As culturas planctônicas e os biofilmes foram tratados de acordo com os grupos experimentais, recebendo adição de PDZ, quitosana ou PBS, seguido pela irradiação ou pela manutenção em ambiente escuro (controle). Os efeitos dos tratamentos foram analisados por meio da contagem de UFC/mL de S. mutans em ágar Infusão Cérebro Coração (BHI) incubadas por 48h a 37°C (5% de CO2) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Além disso, para confirmar a penetração do FS e da quitosana nas células de S. mutans foi realizado teste de absorbância. A seguir, foram estudados os efeitos da terapia fotodinâmica com PDZ associado à quitosana sobre biofilmes microcosmos de saliva formados sobre corpos-de-prova de esmalte bovino. Os efeitos da TFD sobre os biofilmes foram analisados por meio da contagem de células viáveis de micro-organismos totais em ágar BHI e estreptococos do grupo mutans em ágar Mitis Salivarius Bacitracina Sacarose (MSBS). Os dados foram analisados por ANOVA e teste de Tukey. Os resultados demonstraram que a TFD mediada por PDZ foi capaz de reduzir a contagem de células viáveis de S. mutans tanto nos testes planctônicos como nos biofilmes, assim como reduzir a contagem de micro-organismos totais e estreptococos do grupo mutans em biofilmes microcosmos orais. Esses efeitos antimicrobianos foram ainda maiores quando à quitosana foi associada à TFD. A redução do número de células viáveis foi confirmada nas imagens de MEV, nas quais pode-se observar a desestruturação das células e matriz do biofilme. Nos testes de absorção, observou-se que a quitosana aumentou a capacidade de penetração do PDZ nas células de S. mutans. Concluiu-se que a quitosana apresentou capacidade de potencializar a atividade antimicrobiana da TFD mediada por PDZ sobre S. mutans e biofilmes microcosmos orais(AU)

Photodynamic therapy (PDT) is a technique that combines a photosensitizer (FS) with visible light and molecular oxygen and can be used as an antimicrobial agent to control various infectious diseases, such as dental caries. Chitosan has shown promising activity when associated with some photosensitizers. Therefore, the objective of this study was to investigate the association of chitosan with the Photodithazine® photosensitizer (PDZ) in PDT on S. mutans planktonic cultures and biofilms, as well as evaluating its effectiveness on oral microcosm biofilms. Initially, a standardized S. mutans UA159 suspension at 106 cells/mL was prepared. For the study in planktonic cultures, the suspension of S. mutans in 96 well plates was added. For biofilm study, bovine tooth enamel samples were made as substrate for biofilm formation in 24 well plates. Planktonic cultures and biofilms were treated according to the experimental groups, receiving the addition of PDZ, chitosan or PBS, followed by laser irradiation or maintenance in a dark environment (control). The effects of treatments were analyzed by counting CFU/mL of S. mutans on Brain Heart Infusion Agar (BHI) incubated for 48h at 37 °C (5% CO2 ) and Scanning Electron Microscopy (SEM). In addition, to confirm the penetration of PS and chitosan in S. mutans UA159 cells, an absorbance test was performed. Next, the effects of photodynamic therapy with PDZ associated with chitosan on saliva microcosm biofilms formed on bovine enamel specimens were studied. The effects of PDT on biofilms were analyzed by counting viable cells of total microorganisms on BHI agar and mutans streptococci on Mitis Salivarius Bacitracin Sucrose (MSBS) agar. The data were analyzed by ANOVA and Tukey's test. The results demonstrated that PDZ-mediated PDT was able to reduce the viable cell count of S. mutans in both planktonic and biofilm tests, as well as to reduce the count of total microorganisms and mutans streptococci in oral microcosm biofilms. These antimicrobial effects were even greater when chitosan was associated with PDT. The reduction in the number of viable cells was confirmed in the SEM images, in which it is possible to observe the breakdown of the cells and the biofilm matrix. In the absorption tests, it was observed that chitosan increased the penetration capacity of PDZ in S. mutans cells. It was concluded that chitosan was able to potentiate PDZ-mediated PDT antimicrobial activity on S. mutans and oral microcosm biofilms(AU)

Terapia fotodinâmica na endodontia: revisão de literatura / Photodynamic therapy in endodontics: literature review

A terapia endodôntica busca prevenir e quando necessário eliminar infecções endodônticas. A persistência de microrganismos ao preparo químico mecânico ou a medicação intracanal é considerada a principal causa dos insucessos do tratamento endodôntico. Sendo nestes casos o Enterococcus faecalis o microrganismo mais comumente encontrado. A terapia fotodinâmica (PDT) desponta desta maneira como uma promissora terapia coadjuvante ao tratamento endodôntico convencional para eliminar estes microrganismos persistentes. Esta terapia consiste na associação de uma fonte de luz específica a um fotossensibilizador na presença de oxigênio, produzindo assim espécies citotóxicas aos microrganismos. Assim, o presente artigo tem como objetivo realizar uma revisão de literatura sobre o uso da terapia fotodinâmica na endodontia, a qual demonstra-se efetiva como auxiliar durante o preparo do canal radicular(AU)

Endodontic therapy seeks to prevent and when necessary to eliminate endodontic infections. The persistence of microorganisms to the mechanical chemical preparation or the intracanal medication is considered the main cause of the failures of the endodontic treatment. In these cases Enterococcus faecalis is the most commonly found microorganism. Photodynamic therapy (PDT) emerges as a promising adjuvant therapy to conventional endodontic treatment to eliminate these persistent microorganisms. This therapy consists in the association of a specific light source with a photosensitizer in the presence of oxygen, producing cytotoxic species to the microorganisms. Thus, the present article aims at a review of the literature on the use of photodynamic therapy in endodontics, a test that is shown to assist in the preparation of the root canal(AU)

Terapia fotodinâmica como coadjuvante ao tratamento endodôntico: relato de caso / Photodynamic therapy as an endodontic treatment coadjuvant: case report

Introdução: a terapia fotodinâmica surgiu na Endodontia como um método de tratamento que utiliza a laserterapia de baixa potência, com ação analgésica, anti-inflamatória e antibacteriana. Objetivo: o presente trabalho visa apresentar e discutir, por meio do relato de um caso de tratamento endodôntico, o uso de terapia fotodinâmica como um aliado contra bactérias persistentes após o preparo químico-mecânico do canal. Relato de caso: paciente com 40 anos de idade, apresentou-se em consultório particular com dor pulsátil, sensível à percussão, com diagnóstico de periodontite apical aguda no dente #22. Após anamnese, exames radiográficos e odontometria, o tratamento endodôntico foi realizado com o sistema ProTaper® Universal (Dentsply), técnica híbrida, irrigação com hipoclorito de sódio 2,5% e agitação ultrassônica associada; e o elemento foi instrumentado e seco. Então, foi aplicada a terapia fotodinâmica: o corante azul de metileno 0,005% foi aplicado no canal seco durante 5 minutos, seguido de laser vermelho por 180 segundos, totalizando 18J (Laser DUO Portátil-MMO®), com movimentos de apical para incisal. Na sequência, nova irrigação de NaOCl e, então, EDTA 17%, com agitação ultrassônica por um minuto, seguido de NaOCl 2,5%, para se obter a neutralização do meio. Após secagem do canal, a obturação foi realizada com um cone único F3 (ProTaper® Universal) e cimentação com AH Plus®. Conclusão: a terapia fotodinâmica é um método de fácil e rápida aplicação, que surgiu como um coadjuvante ao tratamento endodôntico, sendo indicada para a eliminação de microrganismos persistentes após o preparo químico-mecânico dos canais radiculares (AU).

Introduction: Photodynamic therapy appears in endodontics as a treatment method that uses low level laser therapy with analgesic, anti-inflammatory and antibacterial. Goal: This paper aims to present and discuss through an endodontic treatment using photodynamic therapy as an ally against persistent bacteria after chemical-mechanical canal preparation. Case report: GR patient, 40, appeared in private practice, with throbbing pain, sensitive to shock, with acute apical periodontitis, the element 22. After anamnesis, X-ray examinations and tooth, endodontic treatment was performed with the system ProTaper Universal® (Dentsply), hybrid technique; irrigation with sodium hypochlorite 2.5%, ultrasonic agitation associated; instrumented and dry. Then it was applied to photodynamic therapy, 0.005% methylene blue dye was applied in the dry channel for 5 minutes followed by red laser for 180 seconds totaling 18J (Portable Laser DUO-MMO®) with the apex moves to the incisal, the new sequence NaOCl irrigation and after EDTA 17% with ultrasonic agitation for one minute followed by 2.5% NaOCl for neutralizing medium; Dry the canal obturation was performed with the single cone F3 ProTaper® Universal and cementation with AHPLUS®. Conclusion: We conclude that photodynamic therapy is a method of quick and easy application that comes as an adjunct to endodontic treatment, and is indicated for the elimination of persistent microorganisms after chemical-mechanical preparation of root canals (AU).

Influence of Photodynamic Therapy in the Control of Postoperative Pain in Endodontic Treatment: A Cross-Sectional Randomized Clinical Trial

Objective: To evaluate the postoperative pain at different times after endodontic treatment with and without the use of photodynamic therapy (PDT) of asymptomatic teeth with apical periodontitis. Material and Methods: In this cross-sectional randomized clinical trial, the treatment was performed in a single visit with and without the use of photodynamic therapy. The sample consisted of 10 patients with two teeth in the same jaw, but on different sides (splitmouth), subjected to the same endodontic treatment with reciprocating instrumentation in the apical foramen instrumentation limit. The teeth from each patient were randomly divided into two groups: G1 (Control): endodontic treatment without photodynamic therapy and G2 (PDT): received methylene blue 0.005% and irradiation with a low-level laser. The fillings were performed with a Touch'n Heat technical device and Ah Plus sealer. The treatments of G1 and G2 in the same patient were performed in an interval of 3 weeks between them and the blinding study was ensured during all long treatment. Postoperative pain was recorded using an adapted VAS scale in times of 6, 12, 24, 36, 48, and 72 hours. Results: In both groups, the highest value recorded at the VAS scale was 2 mm (no pain), and there were no statistically significant differences in postoperative pain between the groups at any observation times (p<0.05). Conclusion: The photodynamic therapy did not have advantages to control postoperative pain in endodontic treatments of asymptomatic teeth with apical periodontitis, since both groups showed low levels of pain in all patients evaluated.

Endodontic treatment of a large periapical cyst with the aid of antimicrobial photodynamic therapy: case report / Tratamento endodôntico de um grande cisto periapical com o auxílio de terapia fotodinâmica antimicrobiana: relato de caso

Introduction: Periapical cysts, especially those of great extension, represent a challenge for endodontics, due to the ineffectiveness of traditional root canal treatment (RCT) in such cases. The aim of this case report was to evaluate the effectivity of antimicrobial photodynamic therapy "aPDT" when associated with calcium hydroxide Ca(OH)2 in treating such cysts. Case report: A 40-years-old female patient complained of bulging in the upper anterior region of the mouth. The clinical examination showed an extensive swollen periodontal area, painful with digital palpation, with a negative response to thermal tests on teeth 11 and 21. After traditional RCT, the canals of teeth 11 and 21 were filled with photosensitizer methylene blue 0.005% for 5 min pre irradiation time (PIT) and irradiated by low power diode laser with visible red wavelength (660 nm) during 2 minutes without intervals, using an optical fiber delivering system with a helical movement from apical to cervical. Then the canals were filled with Ca(OH)2 paste for 45 days and had been changed each 15 days, and repeating the radiation. Results: After 45 days, the patient already had a bulging remission, with painless resistance to the apical pressure over the region and signs of bone repair confirmed with the radiographic examination, and total absence of signs or symptoms. Conclusion: the association of aPDT with Ca(OH)2 paste is effective in treating of periapical lesions of great extension and avoids surgical treatment. (AU)

Introdução: os cistos periapicais, especialmente os de grande extensão, representam um desafio para a endodontista, uma vez que não são reparados com o tratamento endodôntico tradicional. O objetivo deste relato de caso foi avaliar a efetividade da terapia fotodinâmica antimicrobiana "aPDT" quando associada ao hidróxido de cálcio Ca(OH)2 no tratamento desses cistos. Relato de caso: paciente do sexo feminino, 40 anos, com queixa de abaulamento na região ântero-superior da boca. O exame clínico evidenciou extensa área periodontal inchada, dolorosa com palpação digital, com resposta negativa aos testes térmicos dos dentes 11 e 21. Após o tratamento endodôntico tradicional, os canais dos dentes 11 e 21 foram preenchidos com fotossensibilizador de azul de metileno a 0,005% de tempo de pré-radiação de 5 min e irradiados por laser de diodo de baixa potência com comprimento de onda vermelho visível (660 nm) por 2 min sem intervalos, usando um sistema de fornecimento de fibra ótica com um movimento helicoidal do apical ao cervical. Em seguida, o canal foi preenchido com pasta de Ca(OH)2 por 45 dias sendo trocados a cada 15 dias e repetida a radiação. Resultados: Após 45 dias, o paciente já apresentava uma remissão volumosa, com resistência indolor à pressão apical na região e sinais de reparo ósseo ao exame radiográfico e ausência total de sinais ou sintomas. Conclusão: a associação de aPDT com Ca(OH)2 é eficaz no tratamento de lesões periapicais de grande extensão e evitar tratamento cirúrgico (AU)