Comparative Assessment of E-cadherin's Expression between the Metastatic and Non-metastatic Oral Squamous Cell Carcinoma: An Immunohistochemical Study

ABSTRACT Objective: To identify the clinicopathological correlation of E-cadherin expression in metastatic and non-metastatic oral squamous cell carcinoma (OSCC). Material and Methods: A total of 90 paraffin-embedded tissue sections of OSCC were retrieved from the registry. The total selected samples were 45 cases each from the primary lesions of metastatic and non-metastatic OSCC. One section was subjected to routine Hematoxylin and eosin stain and another to immunohistochemical analysis for E-cadherin expression. Results: A non-significant (p˃0.05) increased expression is seen in the non-metastatic group compared to the metastatic group, with predominantly membrane as the staining site in either group. However, the expression of E-cadherin did not reveal any statistically significant association with independent variables such as age, gender, and adverse habits of the patients (p>0.05). On the other hand, with respect to the histological differentiation of OSCC, a significant association (p<0.001) was observed with the well-differentiated type of metastatic OSCC. Conclusion: E-cadherin was useful to some extent in predicting regional metastasis. However, further studies using a panel of biomarkers with increased sample size may help us understand the process involved in metastasis.

Resinas acrílicas utilizadas em placas estabilizadoras: resistência a fraturas e ensaio microbiológico / Acrylic resins used in stabilizer plates: resistance to fractures and microbiological testing

O aprimoramento da tecnologia CAD/CAM permitiu a confecção de placas estabilizadoras digitais, no entanto, há lacunas acerca do comportamento desses dispositivos frente a variáveis mecânicas e biológicas ainda desconhecidas. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi verificar se as resinas utilizadas na tecnologia digital das placas fresadas e impressas são capazes de influenciar na resistência à fratura e na adesão de micro-organismos em detrimento das resinas empregadas na confecção das placas termopolimerizáveis convencionais e se as propriedades testadas se relacionam com a variação da espessura desses dispositivos. Para tanto, foi realizado um estudo in vitro que contou com as fases mecânica e microbiológica, sendo cada uma composta pelos grupos Convencional (GC) (n=30), Fresado (GF) (n=30) e Impresso (GI) (n=30), de acordo com o método de confecção, possuindo cada um três subgrupos (n=10) que variaram a espessura dos espécimes de 1 a 3 mm. Na fase mecânica, as amostras, com formato de barras de 65 mm, foram testadas quanto à resistência à fratura na máquina de ensaios universal, com célula de carga de 500 kgf e velocidade de 1 mm/min; na microbiológica, a forma foi de discos com 15 mm de diâmetro, submetidos à adesão de micro-organismos à superfície com a exposição a Streptococcus mutans e mantidos por 24h a 35 °C em estufa para sucessiva contagem de UFC, com controle positivo. Os testes foram feitos em triplicata e os dados foram armazenados no SPSS 22.0 e a análise estatística contou com a ANOVA e o pósteste de Tukey. Nos resultados da fase mecânica, o ANOVA identificou diferenças estatisticamente significativas entre os grupos (p≤0,005), mostrando que GC e GF apresentaram melhores resultados. O pós-teste de Tukey considerou diferença estatisticamente significativa entre GF e GI (p=0,031), elencando GF como superior. Para a fase microbiológica, não foram verificadas diferenças estatísticas entre os grupos (p>0,005) em nenhuma das análises. Observou-se que para a resistência a fraturas, as resinas do modo fresado descreveram resultados superiores e/ou próximos aos da técnica convencional; e que as resinas da técnica digital e convencional, quanto à adesão superficial de micro-organismos, não diferiram entre si (AU).

CAD/CAM technology allowed the stabilizing splints manufacture, however there are gaps about these devices' behavior in face of mechanical and biological variables that are still unknown. Thus, the objective of this project was to verify if the resins used in digital technology of milled and printed stabilizer splints can influence fracture resistance and microorganism adhesion, in detriment of the resin applied in manufacture of conventional thermopolymerizable splints and if the tested properties are related to thickness variation of these devices. The method included mechanical and microbiological steps, each one composed by Conventional (CG) (n=30), Milled (MG) (n=30) and Printed (PG) (n=30) groups, according to the method of preparation, each one having three subgroups (n=10) that varied the specimen thickness from 1 to 3 mm. In the mechanical step, the samples, in the form of 65 mm bars, were tested for fracture resistance in a universal testing machine, with load cell of 500 kgf and speed of 1 mm/min; in the microbiological step, the shape was in form of 15 mm diameter discs, subjected to microorganism adhesion to the surface with exposure to Streptococcus mutans and kept for 24 hours at 35 °C in oven for successive CFU counting, with positive control. The tests were performed in triplicate and data were stored in SPSS 22.0 and statistical analysis used ANOVA and Tukey's post hoc. In the results of mechanical step ANOVA had identified statistically significant differences between the groups (p≤0,005), showing CG and MG had presented better results. Tukey´s post hoc had considered statistically significant difference between MG and PG (p=0,031), listing MG as superior. For the microbiological step, they did not show statistical differences between the groups (p>0.005) in any analysis. It was observed milled resins described superior results and/or close to the conventional technique one, for fracture resistance; and resins of digital and conventional technique, regarding the microorganism adhesion to the surface, did not differ from each other (AU).

Influence of bisphosphonates on the behavior of osteoblasts seeded onto titanium discs

Abstract Among other factors, types of bisphosphonates and treatment regimens seem to be strongly associated with the success or failure of installation of osseointegrated implants. This study investigated the influence of two bisphosphonates, sodium alendronate (SA) and zoledronic acid (ZA), on the metabolism of osteoblasts. Human osteoblasts (Saos-2) were seeded onto machined or acid-treated titanium discs previously placed on 24-well plates in complete culture medium. After 24 h, cells were exposed to bisphosphonates at 0.5, 1 or 5 µM for 24 h, 48 h or 7 days. The effects of SA and ZA on osteoblasts were assessed based on the adhesion of these cells to the titanium surfaces by direct fluorescence, cell viability, total protein and collagen synthesis. Alkaline phosphatase activity and mineral nodule deposition by these cells were also evaluated. Data were evaluated by ANOVA and Tukey tests (α=0.05). Decreased adhesion of cells to the titanium discs was observed when exposed to both bisphosphonates; however, this lack of cell adhesion was more evident for ZA-treated cells. In addition, the exposure of osteoblasts to ZA decreased the viability, ALP activity and mineral nodule deposition, which may be related to poor osseointegration after implant installation.

Resumo Entre outros fatores, os tipos de bisfosfonatos bem como os regimes de tratamento parecem estar diretamente associados com o sucesso ou falhas na instalação de implantes osseointegrados. Este estudo avaliou a influência de dois bisfosfonatos, o alendronato de sódio (AS) e o ácido zoledrônico (AZ), no metabolismo de osteoblastos. Osteoblastos humanos (Saos-2) foram cultivados sobre discos de titânio polidos ou submetidos a tratamento ácido superficial, previamente alocados em placas de 24 compartimentos, utilizando meio de cultura completo. Após 24 horas, as células foram expostas aos bisfosfonatos, nas concentrações de 0,5, 1 ou 5 µM, por 24 h, 48 h, ou 7 dias. Os efeitos do AZ e AZ sobre os osteoblastos foram determinados considerando a adesão destas células às superfícies de titânio, por meio de fluorescência direta, a viabilidade celular, produção de proteína total e síntese de colágeno. A atividade de fosfatase alcalina e a deposição de nódulos mineralizados também foram avaliadas. Os dados foram analisados por meio do teste ANOVA complementado por Tukey (α = 0.05). Menor adesão dos osteoblastos foi observada quando estas células foram expostas a ambos os bisfosfonatos, porém, esta falha na adesão foi mais evidente para as células tratadas com AZ. Além disso, a exposição dos osteoblastos ao AZ também resultou em diminuição da viabilidade, atividade de ALP e deposição de nódulos mineralizados, o que pode estar relacionado a uma pobre osseointegração após a instalação do implante.

Phagocytosis and nitric oxide production by peritoneal adherent cells in response to Candida albicans in aging: a collaboration to elucidate the pathogenesis of denture stomatitis

Abstract Elderly denture wearers are commonly affected by Candida-associated denture stomatitis (DS), an inflammatory process of the oral mucosa strongly associated with Candida spp and other microorganisms, as well as local and systemic factors. The impaired immune response against pathogens is among the inherent host factors that have been also associated with the pathogenesis of DS. Mononuclear phagocytes respond to the pathogens through phagocytosis followed by the production of several substances inside the phagosomes, among them are the reactive nitrogen species (RNS). A failure in these mechanisms may contribute to the DS development. Objective The aim of this study was to investigate the influence of aging on the internalization and the production of nitric oxide (NO) by peritoneal adherent cells (PAC), in response to Candida albicans (C. albicans). Material and methods PAC obtained from young and aged mice were challenged with dead or viable C. albicans by using predetermined proportions (cells:yeast) for 30 and 120 minutes. Phagocytosis was analyzed by acridine orange dye, and NO production by the Griess reaction. Results C. albicans phagocytosis by PAC from aged mice was similar to that of young mice, although the cells from older mice cells present more internalized fungi compared with matched control. In addition, a tendency towards impaired NO production by peritoneal mononuclear phagocytes from aged mice was observed. Conclusions PAC from aged mice may capture and store many fungi, which in turn may mean that these cells are effectively unable to eliminate fungi, probably due to impaired NO production. Therefore, considering the important role of C. albicans overgrowth in the pathogenesis of DS and the aspects observed in this study, aging may favor the onset and severity of local candidosis such as DS and its systemic forms.

Repair of bone defects using adipose-derived stem cells combined with alpha-tricalcium phosphate and gelatin sponge scaffolds in a rat model

Abstract Objectives This study aimed to evaluate the potential of adipose-derived stem cells (ASCs) combined with a modified α-tricalcium phosphate (α-TCP) or gelatin sponge (GS) scaffolds for bone healing in a rat model. Material and Methods Bone defects were surgically created in the femur of adult SHR rats and filled with the scaffolds, empty or combined with ASCs. The results were analyzed by histology and histomorphometry on days seven, 14, 30, and 60. Results Significantly increased bone repair was observed on days seven and 60 in animals treated with α-TCP/ASCs, and on day 14 in the group treated with GS/ASCs, when compared with the groups treated with the biomaterials alone. Intense fibroplasia was observed in the group treated with GS alone, on days 14 and 30. Conclusions Our results showed that the use of ASCs combined with α-TCP or GS scaffolds resulted in increased bone repair. The higher efficacy of the α-TCP scaffold suggests osteoconductive property that results in a biological support to the cells, whereas the GS scaffold functions just as a carrier. These results confirm the potential of ASCs in accelerating bone repair in in vivo experimental rat models. These results suggest a new alternative for treating bone defects.

Efeitos do PDGF-BB na taxa de proliferação e na adesão de células derivadas da granulação óssea a fragmentos radiculares / Effects of PDGF-BB on the rate of proliferation and on the adhesion of human cells derived from bone granulation tissue to root fragments

O objetivo deste estudo foi investigar o papel do fator de crescimento derivado de plaquetas-BB (PDGF-BB) na concentração de 300ng/ml na taxa de proliferação e adesão de células derivadas da granulação óssea humana a fragmentos radiculares periodontalmente comprometidos. Na primeira etapa do estudo, foi estabelecida cultura primária de células da granulação óssea de dois pacientes adultos, sistemicamente saudáveis, não fumantes. Após a expansão celular, as células foram caracterizadas para determinação do fenótipo por meio de ensaios de viabilidade celular, MTT, ensaio de atividade de fosfatase alcalina, ensaio de mineralização e caracterização imunohistoquímica por meio de citometria de fluxo (segunda etapa). Na terceira etapa do estudo, os efeitos da adição de PDGF-BB recombinante humano na concentração de 300ng/ml na taxa de proliferação e adesão de células derivadas da granulação óssea a superfícies radiculares periodontalmente comprometidas foram investigados. A taxa de proliferação celular estimulada pelo PDGF-BB (grupo teste) ou pelo meio de cultura (grupo controle) foi investigada por meio de contagem de células viáveis nos frascos de cultura após 1, 3, 5 e 7 dias do cultivo celular. Foram obtidos 30 fragmentos dentários a partir de dentes extraídos por razões periodontais. Os fragmentos foram raspados com curetas Gracey e condicionados com solução em gel de EDTA a 24% durante 3 minutos, lavados com solução de soro fisiológico, secos e posicionados em placas de 24 poços. Foram incubadas sobre os fragmentos tratados 1x104 células GO por 24 horas, seguido por fixação e preparo para análise por microscopia eletrônica de varredura (MEV). O número de células aderidas sobre os fragmentos foi analisado nas fotomicrografias. O padrão de crescimento das células GO foi compatível com células ósseas, com modificação do padrão do crescimento com o aumento do número de passagens. Houve atividade de fosfatase alcalina em meio osteogênico e convencional, com pico máximo aos 7 dias e atividade de mineralização estimulada ou não por meio osteogênico, com pico máximo aos 21 dias. A análise por meio de citometria de fluxo demonstrou que as células GO não expressaram CD105 e CD166 na 14a passagem, indicando sua diferenciação celular avançada nesse período. A adição de rhPDGF-BB resultou em mudança na taxa de proliferação celular, observando-se pico máximo de crescimento aos 7 dias, com diferenças estatisticamente significantes (p < 0.005; ANOVA post hoc Tukey) em relação aos períodos de 1, 3 e 5 dias. O ensaio de MTT demonstrou maior viabilidade celular no período de 48 hs, comparativamente aos períodos de 24 e 72 horas, quando a densidade óptica celular diminuiu de forma significativa (p< 0.05; Friedmann pósteste Dunn). No ensaio de adesão celular, pode-se observar que a adição de rhPDGFBB aumentou significativamente o número de células aderidas aos fragmentos dentários (p< 0.05; teste t não pareado com correção Welch), com alteração da morfologia celular. Esses resultados sugerem que as células GO tem características compatíveis com linhagem de células osteoblásticas, de fenótipo mais diferenciado após a 12a passagem. A adição de rhPDGF-BB (300ng/ml) resulta em aumento da taxa de proliferação das células GO e do número de células aderidas a fragmentos radiculares, indicando que, nesta concentração, o fator de crescimento é citocompatível, favorecendo a proliferação e adesão celular.(AU)

The goal of this study was to investigate the effects of recombinant human platelet derived growth factor (rhPDGF-BB) at the concentration of 300ng/ml in the proliferation and adhesion of human bone granulation cells to periodontally diseased root fragments. At the first stage of the study, the granulation tissue existent in healing sockets (21 days after its creation) was collected from two systemically healthy nonsmoking adults to the establishment of primary culture. The in vitro properties of bone granulation (BG) cell lineage were characterized by cell viability, MTT, alkaline phosphatase activity and mineralization assays. The effects of culture medium (control) and rhPGDF-BB 300ng/ml (test) in the proliferation and adhesion of BG cells were investigated. The rate of BG cells proliferation was investigated by the number of viable cells present at 1, 3, 5 and 7 days after platting. Thirty root fragments were obtained from teeth extracted for periodontal reasons. Root fragments were scaled and root planed, conditioned with EDTA 24% for 3 minutes, rinsed in saline solution, air-dryed and positioned in 24-well plates. Each fragment was seeded with 104 BG cells, fixated after 24 hours and prepared for analysis in SEM. The number of cells adhered to the fragments was analysed in photomicrographies. BG cells growth pattern was compatible with osteogenic cell lineage, showing modification with the increasing number of cell passage. GO cells expressed alkaline phosphatase activity in conventional and osteogenic culture medium, with maximum peak at 7 days, as well as mineralization activity stimulated or not by osteogenic or non-osteogenic culture medium, with maximum peak at 21 days. The analysis by flow cytometer showed that BG cells have not expressed CD105 and CD106 at the 14th passage, indicating its advanced cell differentiation. The addition of rhPDGF-BB resulted in modification of proliferation rate, with maximum peak observed at 7 days, significantly different from 1-, 3- and 5-day periods (p< 0.005; ANOVA post hoc Tukey). MTT assay showed greater cell viability after 48 hours than after 24 and 72 hours, when optical density has significantly diminished (p< 0.05; Friedmann post hoc Dunn). At cell adhesion assay, it could be observed that the adhesion of rhPDGF-BB has significantly increased the number of cells adhered to root fragments (p< 0.05; unpaired t test with Welchs correction), and alterations in cell morphology. These results suggest that BG cells present in vitro characteristics compatible with osteoblastic cell lineages, with a more differentiated phenotype after the 12th passage. The addition of rhPDGF-BB (300 ng/ml) results in increase of the rate of BG cell proliferation and in the number of cells adhered to root fragments, indicating that, at this concentration, the growth factor is compatible with BG cells and favors cells proliferation and adhesion.(AU)

Interaction of dental pulp stem cells with Biodentine and MTA after exposure to different environments

ABSTRACT Objective: The aim of the present study was to evaluate and compare the cytotoxic effects of Biodentine and MTA on dental pulp stem cells (DPSCs) and to assess cell viability and adherence after material exposure to an acidic environment. Material and Methods: DPSCs were cultured either alone or in contact with either: Biodentine; MTA set for 1 hour; or MTA set for 24 hours. After 4 and 7 days, cell viability was measured using the MTT assay. Biodentine and MTA were also prepared and packed into standardized bovine dentin disks and divided into three groups according to the storage media (n=6/group): freshly mixed materials without storage medium (Group A); materials stored in saline (Group B); materials stored in citric acid buffered at pH 5.4 (Group C). After 24 hours, DPSCs were introduced in the wells and cell adherence, viability, and cellular morphology were observed via confocal microscopy after three days of culture. Cell viability was analyzed using repeated-measures analysis of variance test with Tukey's post hoc tests (α=0.05). Results: Biodentine expressed significantly higher cell viability compared with all other groups after 4 days, with no differences after 7 days. Notably, cell viability was significantly greater in 24-hour set MTA compared with 1-hour set MTA and control groups after 7 days. Material exposure to an acidic environment showed an increase in cell adherence and viability in both groups. Conclusions: Biodentine induced a significantly accelerated cell proliferation compared with MTA. Setting of these materials in the presence of citric acid enhanced DPSC viability and adherence.

Avaliação histológica comparativa da cicatrização em função de quatro biomateriais com aplicação clínica: resultados com modelo de calvária em ratos / Histological comparative evaluation of four biomaterials with clinical applications: rat calvaria model outcomes

Objetivo: avaliar histologicamente o processo cicatricial das feridas em calvárias de ratos, pelo uso de biomembranas. Material e métodos: em dez ratos Wistar, foram realizadas quatro lesões nas calvárias, dividindo-as em grupos conforme os seguintes tratamentos: membrana de látex com polilisina a 0,1% (G1), membrana de quitosana (G2), curativo de colágeno (G3) e coágulo (grupo-controle), G4. Os animais foram sacrificados com 12 e 24 horas, o processamento histológico foi realizado usando a coloração de HE. As lâminas foram analisadas através de uma análise cega, seguindo um escore pré-definido para edema, necrose, neovascularização, inflamação, tipo celular da resposta inflamatória e macrófagos. Resultados: o edema, a neovascularização, a inflamação e os macrófagos não apresentaram diferenças estatísticas significantes entre os materiais estudados, nos tempos de 12 e 24 horas; a necrose foi menos intensa para o grupo-controle no intervalo de tempo de 12 horas, e de 24 horas para a membrana de quitosana; o tipo celular da resposta inflamatória no grupo-controle apresentou um menor número de macrófagos no tempo de 24 horas; e a biomembrana de látex apresentou como melhor tratamento o utilizado no intervalo T1, enquanto que a membrana de colágeno e o controle no intervalo T2. Conclusão: os quatro biomateriais testados parecem adequados para começo dos testes clínicos.

Objective: to evaluate the histological reactions at the wound healing in the rat calvaria model using biomembranes. Material and methods: 10 Wistar rats were used to prepare four defects receiving the following materials: 0.1% poly-lysine latex membrane (G1), chitosan membrane (G2), collagen dressing (G3), and clot (control- G4). The animals were euthanized at 12 (T1) and 24 (T2) hours later, the histological sections processed, and stained with hematoxylin-eosin. The slides were blinded to the observer and examined according a pre-defined score for edema, necrosis, neovascularization, inflammation, cell type at the inflammatory response, and macrophages. Results: edema, neovascularization, inflammation, and macrophages were not different among the studied materials for both time periods; necrosis was less intense at the control group (12 hours) and at the chitosan group (24 hours); fewer macrophages were seen at the control group (24 hours)/ the latex membrane presented the best results at 12 hours, while similar results were seen for collagen dressing and control at 24 hours. Conclusion: the tested biomaterials seem to be adequate for clinical use.

Colonização bacteriana na região marginal de restaurações cerâmicas: efeito do método de remoção do cimento e do polimento / Bacterial colonization in the marginal region of ceramic restorations: effects of cement removal methods and polishing

O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes métodos de remoção do excesso de cimento e do polimento na formação de biofilme e micromorfologia na região de margem dente/restauração. A partir de dentes bovinos, foram obtidos 96 blocos de dentina (4 mm x 8 mm x 2 mm) que foram moldados e reproduzidos em gesso tipo IV, sobre os quais foram produzidos 96 blocos prensados de cerâmica (Vita PM9,Vita Zahnfabrik; 4 mm x 8 mm x 2 mm) pela técnica de cera perdida. Os blocos de dentina e seus respectivos blocos cerâmicos foram cimentados com um cimento resinoso auto-adesivo (RelyX U200, 3M ESPE) e o excesso de cimento foi removido utilizando diferentes técnicas: MBr:micro brush e fotoativação, MBr-Pol: micro brush, fotoativação e polimento,Pi: pincel e fotoativação, Pi-Pol: pincel, fotoativação e polimento, Foto-Expl: 5 s de fotoativação inicial, explorador e fotoativação final, Foto-Expl- Pol: 5 s de fotoativação inicial, explorador, fotoativação final e polimento, Foto-Bi: 5 s de fotoativação inicial, bisturi e fotoativação final, Foto-Bi-Pol: 5s de fotoativação inicial, bisturi, fotoativação final e polimento. Após 24 h, a rugosidade da região de margem das amostras foi analisada utilizando um rugosímetro (Mitutoyo SJ-400 Tóquio, Japão; três medições em cada amostra). Análise micromorfológica da região foi obtida por microscópio estereoscópico e MEV. Em seguida, as amostras foram contaminadas em caldo de sacarose com suspensão padronizada com Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus e Candida albicans e incubados por um período de 48 h. As amostras foram analisadas quantitativamente para aderência bacteriana na região da margem por microscopia de varredura confocal a laser e contagem das unidades formadoras de colônias(UFC/mL), e analisadas qualitativamente usando MEV. Os dados de rugosidade superficial (Ra) foram submetidos à análise de variância (2- way), teste de Tukey (5%) e teste t-student...

This study evaluated the effects of excess cement removal techniques,with or with out posterior polishing, on the biofilm formation and micromorphology in the marginal region of the tooth/restoration. From bovine teeth, 96 dentin blocks (4 x 8 x 2 mm) were produced, molded andre produced in type IV gyps um, on which 96 pressed ceramic blocks (VitaPM9 4 mm x 8 mm x 2 mm, Vita Zahnfabrik) were produces via lost wax technique. The dentin blocks and their respective ceramic blocks were cemented with a self-adhesive resin-cement (RelyX U200, 3M ESPE) and cement excess was removed using different techniques, followed by polishing with silicone tips or, in some cases, not polished at all: MBr:microbrush and photo activation, MBr-Pol: MBr + polishing, Pi: brush andphotoa ctivation, Pi-Pol: PI + polishing, Photo-Expl: 5 s initial photo activation, explorer and final curing, Photo-Expl-Pol: Photo-Expl +polishing, Photo-Bi: 5 s initial photo activation, scalpel and final curing,Photo-Bi-Pol: Photo-Bi + polishing. After 24 hours, the samples marginal region roughness was analyzed using a profilometer (Mitutoyo SJ-400 Tokyo, Japan; three measurements on each sample). Micromorphological analyses of the region were performed by stereoscopic microscope andSEM. Then the samples were contaminated with sucrose broth standardized suspension with Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus and Candida albicans and incubated for a period of 48 hours. The samples were quantitatively analyzed for bacterial adherence in the marginal region by confocal laser scanning microscopy and counting ofcolony forming units (CFU/ml), and qualitatively analyzed using SEM.Roughness data (Ra) were submitted to 2-way ANOVA, Tukey test (5%)and Student's-t tests. CFU, Biomass and bio thickness data were analyzedby Kruskal Wallis’, Mann-Whitney’s e Dunn’s tests. The removing technique statistically influenced the roughness (Ra; p ˂ 0.05), when comparing polished and un polished groups...

Colonização bacteriana na região marginal de restaurações cerâmicas: efeito do método de remoção do cimento e do polimento / Bacterial colonization in the marginal region of ceramic restorations: effects of cement removal methods and polishing

O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes métodos de remoção do excesso de cimento e do polimento na formação de biofilme e micromorfologia na região de margem dente/restauração. A partir de dentes bovinos, foram obtidos 96 blocos de dentina (4 mm x 8 mm x 2 mm) que foram moldados e reproduzidos em gesso tipo IV, sobre os quais foram produzidos 96 blocos prensados de cerâmica (Vita PM9,Vita Zahnfabrik; 4 mm x 8 mm x 2 mm) pela técnica de cera perdida. Os blocos de dentina e seus respectivos blocos cerâmicos foram cimentados com um cimento resinoso auto-adesivo (RelyX U200, 3M ESPE) e o excesso de cimento foi removido utilizando diferentes técnicas: MBr:micro brush e fotoativação, MBr-Pol: micro brush, fotoativação e polimento,Pi: pincel e fotoativação, Pi-Pol: pincel, fotoativação e polimento, Foto-Expl: 5 s de fotoativação inicial, explorador e fotoativação final, Foto-Expl- Pol: 5 s de fotoativação inicial, explorador, fotoativação final e polimento, Foto-Bi: 5 s de fotoativação inicial, bisturi e fotoativação final, Foto-Bi-Pol: 5s de fotoativação inicial, bisturi, fotoativação final e polimento. Após 24 h, a rugosidade da região de margem das amostras foi analisada utilizando um rugosímetro (Mitutoyo SJ-400 Tóquio, Japão; três medições em cada amostra). Análise micromorfológica da região foi obtida por microscópio estereoscópico e MEV. Em seguida, as amostras foram contaminadas em caldo de sacarose com suspensão padronizada com Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus e Candida albicans e incubados por um período de 48 h. As amostras foram analisadas quantitativamente para aderência bacteriana na região da margem por microscopia de varredura confocal a laser e contagem das unidades formadoras de colônias(UFC/mL), e analisadas qualitativamente usando MEV. Os dados de rugosidade superficial (Ra) foram submetidos à análise de variância (2- way), teste de Tukey (5%) e teste t-student. Os dados de UFC, biomassa e ...

This study evaluated the effects of excess cement removal techniques,with or with out posterior polishing, on the biofilm formation and micromorphology in the marginal region of the tooth/restoration. From bovine teeth, 96 dentin blocks (4 x 8 x 2 mm) were produced, molded andre produced in type IV gyps um, on which 96 pressed ceramic blocks (VitaPM9 4 mm x 8 mm x 2 mm, Vita Zahnfabrik) were produces via lost wax technique. The dentin blocks and their respective ceramic blocks were cemented with a self-adhesive resin-cement (RelyX U200, 3M ESPE) and cement excess was removed using different techniques, followed by polishing with silicone tips or, in some cases, not polished at all: MBr:microbrush and photo activation, MBr-Pol: MBr + polishing, Pi: brush andphotoa ctivation, Pi-Pol: PI + polishing, Photo-Expl: 5 s initial photo activation, explorer and final curing, Photo-Expl-Pol: Photo-Expl +polishing, Photo-Bi: 5 s initial photo activation, scalpel and final curing,Photo-Bi-Pol: Photo-Bi + polishing. After 24 hours, the samples marginal region roughness was analyzed using a profilometer (Mitutoyo SJ-400 Tokyo, Japan; three measurements on each sample). Micromorphological analyses of the region were performed by stereoscopic microscope andSEM. Then the samples were contaminated with sucrose broth standardized suspension with Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus and Candida albicans and incubated for a period of 48 hours. The samples were quantitatively analyzed for bacterial adherence in the marginal region by confocal laser scanning microscopy and counting ofcolony forming units (CFU/ml), and qualitatively analyzed using SEM.Roughness data (Ra) were submitted to 2-way ANOVA, Tukey test (5%)and Student's-t tests. CFU, Biomass and bio thickness data were analyzedby Kruskal Wallis’, Mann-Whitney’s e Dunn’s tests. The removing technique statistically influenced the roughness (Ra; p ˂ 0.05), when comparing polished and un polished groups. The MBr and ...

Adesão, proliferação e atividade de mineralização de celulas da granulação óssea e fibroblastos gengivais humanos em discos de titânio com diferentes superfícies de tratamento: análise in vitro / Adhesion, proliferation and mineralization activity of bone cells granulation and human gingival fibroblasts on titanium discs with different surface treatment: In vitro analysis

O objetivo deste estudo foi investigar adesão, proliferação, atividade de fosfatase alcalina e de síntese de matriz mineralizada por células derivadas da granulação óssea (células GO-1) e fibroblastos gengivais humanos (FGH-1) em discos de titânio com diferentes tratamentos de superfícies. Discos de titânio comercialmente puro grau IV foram divididos em 4 grupos de acordo com o tratamento de superfície: (1) discos usinados L (controle); (2) discos usinados seguido de jateamento abrasivo (JATO); (3) discos usinados, jateados e tratados por subtração ácida (superfície NeoPoros NP); (4) discos com tratamento superficial para melhora da hidrofilia (superfície Acqua - ACQ). A microtopografia de superfície dos diferentes tipos de disco de titânio foi avaliada por meio de MEV. A composição química dos discos de titânio de superfícies L, JATO, NP e ACQ foi analisada por espectrometria de energia dispersiva de raios-X (EDS). Para determinar a influência dos diferentes tratamentos de superfície sobre a adesão de células de linhagens fibroblásticas gengivais e osteoblásticas, foram cultivadas células GO-1 e FGH-1 sobre os discos de titânio dos diferentes grupos e as células aderidas foram avaliados por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV) após 24h (adesão) e 48 h (proliferação). No ensaio de mineralização os discos de titânio foram corados com vermelho de alizarina para evidenciação dos nódulos de mineralização. Para avaliação da atividade de fosfatase alcalina, as células FGH-1 e GO-1 foram plaqueadas sobre discos de titânio, a atividade da FA foi observada nas células lisadas usando 25 μl da amostra em placa de 96 poços adicionado com 200 μL de fosfato p-nitrofenol (pNPP) e determinada em espectofotômetro. Não houve diferenças entre os grupos para os parâmetros de rugosidade encontrados nas amostras, com exceção do parâmetro Rsk(asimetria), onde diferenças significantes foram observadas do grupo L em relação aos grupos JATO, NP e ACQ (p< 0.05...

The objective of this study was to investigate adhesion, proliferation, alkaline phosphatase activity and matrix synthesis mineralized by cells derived from the bone granulation (GO cells) and human gingival fibroblasts (HGF) in titanium disks with different surface treatment. Titanium discs commercially pure grade IV were used, divided into 4 groups according to the surface treatment: (1) machined discs - L (control); (2) machined discs followed by abrasive blasting (JATO); (3) machined discs, sandblasted and treated by acid subtraction (Neoporos surface - NP); (4) disks with surface treatment to improve the hydrophilic (Acqua surface - ACQ). The surface microtopography of different types of titanium disk was evaluated by SEM. The chemical composition of the surfaces of titanium disks, L, JET, NP and ACQ was analyzed by energy dispersive X-ray spectrometry (EDS). To determine the influence of different surface treatments on the cell adhesion of gingival fibroblast and osteoblast lines were cultured GO-1 and FGH-1 cells on titanium discs of different groups and the adhered cells were assessed by electron microscopy (SEM) after 24 (adherence) and 48 h (proliferation). To test the mineralization titanium disks were stained with alizarin red for disclosure of mineralization nodules. To evaluate the alkaline phosphatase activity, the FGH-1 and GO-1 cells were plated on titanium disks, AP activity was observed in cells lysed using 25 μl of sample in a 96 well plate with 200 μl added phosphate p nitrophenol (pNPP) and determined in spectrophotometer. There were no differences between groups for the roughness parameters found in the samples, except for the parameter Rsk(asimetry) where significant differences were observed in the group L compared to JATO groups, NP and ACQ (p <0.05). The L and NP surface implants had only Ti, JATO surface showed, in addition to titanium, oxygen and the substances aluminum, while the ACQ surface were observed titanium, sodium...

Influência de características físicas e química dos materiais de abutments de implantes em zircônia e titânio na adesão e viabilidade de células epiteliais gengivais OBA-9 / Influence of the physical and chemical characteristics of two surfaces implant abutments, zirconia and titanium, in adhesion and viability of gingival epithelial cells OBA-9

Dada à necessidade de uma efetiva barreira tecidual precoce ao redor dos implantes osseointegrados, o presente estudo avaliou, in vitro, a influência das características físicas e químicas de materiais simulando superfícies de abutments de implantes em titânio (T) e zircônia (ZrO2) na adesão de células epiteliais gengivais OBA-9. Para este estudo foram utilizados espécimes em forma de discos (n=13) de titânio e zircônia, e como controles positivo e negativo, discos de esmalte bovino (EB) e lamínulas de vidro (LV), respectivamente. Foram avaliadas previamente a adesão celular a rugosidade superficial (Ra), energia livre de superfície (ELS) e os elementos químicos presentes na superfície identificados por meio de Espectrômetro de raios-X por Dispersão de Energia em Microscópio Eletrônico de Varredura (MEV). Após a adesão celular em 1 e 24 horas, foram avaliadas a viabilidade celular por meio do MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide); e a morfologia das células aderidas sobre as superfícies por meio de MEV. Os dados de viabilidade celular foram avaliados estatisticamente pelo teste de ANOVA a dois critérios fixos ("material" e "período de análise"), enquanto os dados de ELS foram submetidos aos testes de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney, considerando um nível de significância de 5%. A superfície de T obteve o maior valor de ELS com 6,2N/m, seguida pela ZrO2 com 5,8N/m, LV com 4,9N/m, e com o menor valor o EB com 4,7N/m. Foi observado que os fatores material (p=0,336) e período de análise (p=0,400) não apresentaram efeito sobre os dados de viabilidade celular, assim como a interação entre eles (material*período de análise, p=0,559). A análise da morfologia celular mostrou que as células aderidas às superfícies de T e ZrO2 apresentaram espraiamento semelhante, sendo este maior quando comparado as superfícies de EB e LV. Concluiu-se que não houve diferença entre a adesão...

Given the need for effective early mucosal barrier around dental implants, the present study evaluated, in vitro, the influence of physical and chemical characteristics of materials simulating abutments implants surfaces in titanium (T) and zirconium (ZrO2) on gingival epithelial cells OBA-9 adhesion. For this study, disks-shaped samples (n=13) of titanium and zirconium were tested, and as positive and negative control groups, bovine enamel disks (BE), and glass coverslips (GCS), respectively. Previously the cellular adhesion surface roughness (Ra), surface free energy (SFE) and the chemical composition of specimens by X-ray Spectrometer Dispersive Energy in Scanning Electron Microscope (SEM) were evaluated. After the periods of cellular adhesion, 1 and 24 hours, the cellular viability was evaluated by MTT Assay (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) and the morphology of the epithelial cells adhered to the surfaces was analyzed using the SEM. The data of cell viability were statistically evaluated by two-way ANOVA ("Material" and "period of analysis"), while the SFE data were submitted to Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests, considering a significance level of 5%. The T specimens showed the highest values of SFE (6.2 N/m), followed by ZrO2 (5.8 N/m), GCS (4.9 N/m), and BE (4.7 N/m). It was observed that the factors material (p = 0.336) and periods of analysis (p = 0.400) showed no effect on cell viability data, as well as the interaction between them (material* period of analysis, p = 0.559). The analysis of cell morphology showed that cells adhered to the T and ZrO2 surfaces presented similar spreading, which was higher compared to the BE and GCS surfaces. It was concluded that there was no difference between the cellular adhesion to different materials for implant abutments, T and ZrO2, in evaluated periods. However, cell spreading was qualitatively higher in rougher surfaces and greater titanium and zirconia SFE

Influência do tempo de endurecimento no comportamento físico e biológico de sete cimentos endodônticos / Setting time of influence on the physical and biological behavior seven sealers

Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar a influência do tempo de endurecimento sobre as propriedades físicas (teste de push-out) e biológicas (XTT, MNT) de sete cimentos endodônticos: Apexit Plus, Real Seal, Endo Rez, Roeko Seal, AH Plus, Endomethasone N e o cimento biocerâmico iRoot SP. Material e Métodos: Para a análise da citotoxicidade (XTT), foram utilizados fibroblastos do ligamento periodontal humano (PDLF). Para o número de micronúcleos (MNT), este estudo avaliou culturas de células expostas a diluições dos cimentos testados sobre células V79 No teste de push-out foram usados cento e quarenta dentes humanos unirradiculares que tiveram suas coroas removidas. Os canais radiculares foram preparados biomecanicamente com o sistema rotatório Mtwo (VDW GmbH, München, Alemanha) até o número de série 702 a 25 mm (25-40). Durante todo o preparo biomecânico, os canais foram irrigados com 2 ml de hipoclorito de sódio. Os espécimes foram seccionados em fatias de 2 mm nos terços cervical, médio e apical. O teste de Push-out foi realizado a uma velocidade de 1 mm / min e célula de carga de 50 Kgf. Os testes biológicos foram avaliadas após 24 h, 72 h, 1 semana, 1 mês, 3 meses, 6 meses e um ano após a manipulação e o teste de push-out 15 dias e 1 ano.Os dados foram analisados pelo teste de Kruskal-Wallis e teste de Dunn (p = 0,05). Resultados: IRooot SP, Roeko seal, Apexit Plus, AH Plus e Real Seal não mostraram citotoxicidade nas células PDLF. AH Plus, Real Seal, IRooot SP e Endomethasone N não apresentaram genotoxicidade. Roeko Seal e Apexit Plus mostraram ser genotóxico e EndoRez apresentou alta genotoxicidade. Roeko Seal, IRooot SP e EndoRez tiveram menor resistência à tração nos terços apical, médio e cervical, tanto em 15 dias e 1 ano de análise. Além disso, Endomethasone N, Real Seal e AH Plus apresentaram uma força de adesão satisfatória após 1 ano em todos os terços. Conclusão: Conclui-se que AH Plus e Real Seal foram os cimentos com menor ...

Objective: The aim of this study was to evaluate the influence of curing time on physical (push-out test) and biological properties (XTT, MNT) of seven sealers: Apexit Plus, Royal Seal, Endo Rez, Roeko Seal, AH Plus, Endomethasone, and bioceramic cement iRoot SP. Material and Methods: To the citotoxity analysis (XTT), fibroblasts of the human periodontal ligament were used (PDLF). To the number of micronuclei (MNT), this study evaluated cell cultures exposed to dilutions of the tested sealers, among them from causing excessive cytotoxic effects on V79 cells. To push-out test was used one hundred and forty single-rooted teeth which had the crowns removed. The root canals were prepared biomechanically with the rotary system Mtwo (VDW GmbH, München, Alemanha) until to series number 702 to file 25 mm (25-40). Throughout the biomechanical preparation, the canals were irrigated with 2 ml of sodium hypochlorite. The specimens were sectioned in slices of 2 mm in cervical, middle and apical. The push-out test was performed at speed of 1 mm/min and 50 kgf load cell. The tests were evaluated after 24 h, 72 h, 1 week, 1 month, 3 months, 6 months and one year after manipulation. Data were analyzed by Kruskal-Wallis and Dunn test (p = 0.05). Results: IRooot SP, Roeko Seal, Apexit Plus, AH plus and Real Seal showed no cytotoxicity in PDLF cells. AH plus, Real Seal, IRooot SP and Endomethasone N showed no genotoxicity. Roeko Seal and Apexit Plus have shown to be genotoxic and EndoRez showed high genotoxicity. Roeko Seal, IRooot SP and EndoRez had lower bond strength in the apical, middle and cervical thirds in both the 15-day and 1 year analysis. Apexit Plus, Endomethasone N, Real Seal and AH plus had a satisfactory bond strength after 1 year in all thirds. Conclusion: It is conclude that AH plus and Real Seal were the sealer with lower cytotoxicity and genotoxicity, with good values of bond strength in all third, keeping as the material of choice for endodontic therapy

Avaliação da resistência de união em dentina submetida ao desafio erosivo: adesão ao substrato tratado com CPP-ACP e irradiado ou não com laser Nd:YAG / Evaluation of dentin bond strength under erosive challenge: adhesion to substrate treated with CPP-ACP and Nd:YAG irradiated

O estudo avaliou a influência do CCP-ACP (casein phosphopeptide – amorphous calcium phosphate) e CPP-ACP associado ao NaF, na resistência de união à dentina submetida ao desafio erosivo por bebida ácida, com ou sem irradiação por laser Nd:YAG. Foram utilizados 60 molares humanos, os quais tiveram a porção coronária seccionada mesio-distalmente, obtendo dois espécimes. Após a exposição da dentina, os espécimes foram embutidos em resina acrílica quimicamente ativada. Quatro grupos (n=30) foram obtidos: GC (grupo controle); DE (desafio erosivo); DE.M (desafio erosivo + MI Paste); DE.MP (desafio erosivo + MI Paste Plus). O desafio erosivo foi realizado pela imersão única das amostras em Sprite Zero, durante 30 min. Os grupos DE.M e DE.MP foram submetidos ao tratamento remineralizador com a aplicação de uma camada de aproximadamente 0,5mm por 3 min. Os grupos foram divididos em dois subgrupos: SL (sem laser Nd:YAG) e CL (sistema adesivo + laser Nd:YAG + fotopolimerização). A densidade de energia utilizada foi 174J/cm2, 140 mJ/pulsos, 10 Hz, 1,4W. Todos os espécimes foram restaurados com o sistema adesivo Clearfil SE Bond (Kuraray) e a resina composta Z350XT (3M-ESPE). Após 24h de armazenagem em água deionizada, os espécimes foram cortados em palitos, com secção transversal de 1mm2 de área e em seguida foi realizado o ensaio de microtração. Os dados foram submetidos à ANOVA 2 fatores e foram encontradas diferenças estatísticamente significantes para o fator tratamento (p=0,00). O grupo DE foi o que apresentou menor valor de resistência adesiva após o teste de Tukey. As médias de todos os grupos, em ordem crescente, foram: DE.CL (29,22) < DE.SL (33,50) < DE.M.SL (33,89) < DE.MP.SL (34,96) < GC.SL (36,40) < DE.MP.CL (36,92) < GC.CL (37,46) < DE.M.CL (37,68). Concluiu-se que: o desafio erosivo proposto resultou na diminuição da resistência de união quando comparado ao grupo controle; O CPP-ACP e o CPP-ACP associado ao NaF promoveram o aumento da resistência de ...

The purpose of this study was to evaluate the influence of CPP-ACP (MI Paste) and CPP-ACP associated to NaF (MI Paste Plus) on microtensile bond strength of dentin softened by a soft drink, irradiated or not with laser Nd:YAG. Sixty human molars had their crowns sectioned from mesial to distal face in order to obtain two specimens. The enamel was flattened until the exposure of 3 mm dentin area and then were embedded in acrylic resin. The samples were randomly divided into four groups (n=30): CG (control group); EC (erosive challenge); EC.M (erosive challenge + MI Paste); EC.MP (erosive challenge + MI Paste Plus). The erosive challenge consisted by a single immersion of the specimens in Sprite Zero, for 30 min. The EC.M and EC.MP were submitted to remineralizing treatment with the application of a 0,5 mm layer, for 3 min. The groups were subdivided into two subgroups: WITH (WL) or WITHOUT (W) Nd:YAG laser application. Laser application was made by the energy density of 174J/cm2, 140 mJ/pulse, 10 Hz, 1.4W, and the sequence was: adhesive system + Nd:YAG laser + photopolimerization. All the samples were restored by the adhesive system Clearfil SE Bond (Kuraray) and the composite Z350XT (3M-ESPE). After 24h storage in deionized water, the samples were cut in sticks, with 1mm2 cross-section area, then was accomplished the microtensile test. The microtensile data were analyzed with two-way ANOVA. Significant statistically differences were found to the treatment factor (p=0.00) and Tukey test showed that the EC group presented lower values to microtensile bond strength. The averages of each group, in ascending order, were: EC.WL (29.22) < EC.W (33.50) < EC.M.W (33.89) < EC.MP.W (34.96) < CG.W (36.40) < EC.MP.WL (36.92) < CG.WL (37.46) < EC.M.WL (37.68). It was concluded that: the erosive challenge decreased the bond strength compared to control group; the CPP-ACP and CPP-ACP associated to NaF increased the bond strength4 compared to the groups which had not ...

Tratamento superficial de implantes e sua influência na adesão e viabilidade de células e bactérias: uma revisão / Surface treatment for implants and their influence on the accession and viability of cells and bacteria: a review

O tratamento superficial aplicado aos implantes de titânio tem como principal finalidade acelerar o processo de osseointegração. Inicialmente a única preocupação dos pesquisadores, era como o tratamento aplicado alterava a topografia superficial do titânio. Porém com o tempo, descobriu-se que no que diz respeito aos fatores biológicos, as características químicas influenciam mais que a topografia. Este trabalho teve como objetivo avaliar através de uma revisão da literatura científica, como as alterações dos implantes do titânio podem interferir no processo de adesão e proliferação, tanto de células quanto de bactérias. Alguns estudos demonstram que o tratamento superficial influencia nos primeiros estágios da osseointegração, porém não há um aumento no número de osteoblastos, mas sim uma alteração no padrão de adesão celular. E no que diz respeito aos fatores biológicos, as características químicas influenciam mais que as características topográficas tanto para células quanto para bactérias

The surface treatment applied to titanium implants whose main purpose is to accelerate the process of osseointegration. Initially the only concern of the researchers was how this processaltered the surface topography of titanium. But with time, it was discovered that biological andchemical characteristics influence topography the most. This study aimed to evaluate through a review of scientific literature how the changes of titanium implants can interfere with the process of adhesion and proliferation of both cells and bacteria. Some studies show that the surface treatment influences the early stages of osseointegration however there is an increase in the number of osteoblasts but a change in the pattern of cell adhesion. And concerning to the biological area, chemical characteristics influence the topographic features for both cells and bacterian the most

Efeitos de diferentes tratamentos a plasma e de variações na coleta, preparo e pré-condicionamento com saliva na adesão de Candida a uma resina para a base de prótese / Effects of different plasma treatments and variations in the collection, preparation and preconditioning with saliva on Candida adhesion to a denture base acrylic resin

A adesão de Candida às superfícies protéticas é o passo inicial para ocorrência da estomatite protética. Entre os diversos fatores envolvidos na adesão de Candida spp. às superfícies poliméricas estão as interações hidrofóbicas e eletrostáticas, a rugosidade superficial e a película salivar. Assim, os objetivos deste estudo foram: investigar o potencial de diferentes tratamentos a plasma (Ar/50W; ArO2/70W; AAt/130W; ArSF6/70W) de modificar uma resina acrílica para base de prótese (VIPIWAVE) para reduzir a aderência de Candida albicans (ATCC 90028), avaliada pelo ensaio de XTT e cristal violeta. O efeito da rugosidade de superfície e do pré-condicionamento com saliva também foram avaliados; investigar se modificações de superfícies por meio de dois tratamentos a plasma (Ar/50W; AAt/130W) reduziriam a aderência de Candida glabrata (ATCC 2001), avaliada pela coloração cristal violeta, sobre superfícies lisas de resina acrílica. Além disso, o efeito do pré-condicionamento com saliva também foi avaliado; e ainda, avaliar se variações nos períodos de pré-condicionamento com saliva (0 min; 30 min; 60 min; 180 min; 720 min), nos parâmetros de centrifugação (velocidade e tempo) e número de doadores de saliva influenciariam os resultados de adesão de Candida albicans a uma resina acrílica para base de prótese, avaliada por meio do ensaio de XTT e coloração cristal violeta. Além disso, a correlação entre os dois métodos utilizados para avaliação da adesão de Candida albicans também foi avaliada. Os resultados obtidos demonstraram que os tratamentos a plasma são efetivos para modificação da hidrofobicidade de superfície ou incorporação de átomos de flúor na superfície da resina acrílica. Entretanto, após os tratamentos a plasma e imersão das amostras em água, houve alterações significantes nos valores médios de ângulo de contato obtidos. Os grupos ArO2/70W e ArSF6/70 W apresentaram menores valores de absorbância para a adesão de Candida albicans comparados aos outros grupos. Nenhuma diferença significante foi observada entre os grupos tratados a plasma e o grupo controle, quando a adesão de Candida albicans foi avaliada por meio da coloração cristal violeta, independente da rugosidade superficial e presença ou ausência de saliva. O número de Candida glabrata aderida, avaliado pela coloração cristal violeta, foi significantemente menor no grupo tratado com Ar/50W comparado ao grupo controle, na ausência de saliva. Entretanto, na presença de précondicionamento com saliva, nenhuma diferença significante foi observada entre os grupos experimentais e controle para adesão de Candida glabrata. Os diferentes períodos de pré-condicionamento com saliva não influenciaram significantemente a adesão de Candida albicans, entretanto, os parâmetros de centrifugação (velocidade e tempo) e o número de doadores de saliva influenciaram significantemente os resultados de adesão de Candida albicans à resina acrílica avaliada. Nenhuma correlação significante foi encontrada entre os métodos utilizados para avaliação da adesão de Candida albicans, coloração cristal violeta e ensaio de XTT. Portanto, os tratamentos a plasma com ArO2/70W e ArSF6/70W demonstraram-se promissores para redução da adesão de Candida albicans, enquanto o tratamento a plasma com Ar/50W apresentou resultado promissor para redução da adesão de Candida glabrata à resina acrílica avaliada. Além disso, a película de saliva, dependendo das condições experimentais, pode aumentar a adesão de Candida albicans, mas não altera significantemente a adesão de Candida glabrata. As variações metodológicas relacionadas ao pré condicionamento com saliva influenciaram os resultados de adesão de Candida albicans

The adhesion of Candida to denture surfaces is the initial step for occurrence of denture stomatitis. Among the various factors involved on Candida adhesion to polymeric surfaces are the hydrophobic and eletrostatic interactions, surface roughness and pellicle salivary. Hence, the aims of this study were: to investigate the potential of different plasma treatments (Ar/50W; ArO2/70W; AAt/130W; ArSF6/70W) to modify a denture base acrylic resin (VIPIWAVE) to reduce the Candida albicans adhesion (ATCC 90028), evaluated by XTT reduction assay and crystal violet staining. The effect of surface roughness and saliva coating was also evaluated; to investigate the potential of two plasma treatments (Ar/50W; AAt/130W) to modify a denture base acrylic resin to reduce the Candida glabrata adhesion (ATCC 2001), evaluated by crystal violet staining. Moreover, the effect of saliva coating was also evaluated; and to assess the effect of different periods of preconditioning with saliva (0 min; 30 min; 60 min; 180 min; 720 min), variations in the centrifugation parameters (speed and time) and number of donors of saliva on Candida albicans adhesion to a denture base resin using crystal violet staining and XTT reduction assay. Additionally, the correlation between the two methods used for assessing Candida albicans adhesion was also evaluated. The results obtained demonstrated that the plasma treatments were effective in modifying hydrophobicity or incorporation of fluorine into acrylic resin. However, there were significant alterations in the contact angle measured after immersion in water. Groups ArO2/70W and ArSF6/70W showed significantly lower absorbance readings to Candida albicans adhesion than the other groups. No statistically significant difference in the adherence of Candida albicans, evaluated by crystal violet staining, was observed between the plasma treated and control groups, irrespective of the presence or absence of saliva, and surface roughness. The number of adhered Candida glabrata, evaluated by counting after crystal violet staining, was significantly lower in Ar/50W group than the control group, in the absence of saliva. However, after preconditioning with saliva, Candida glabrata adherence in experimental and control groups did not differ significantly. The different periods of preconditioning with saliva had no significant influence in the Candida albicans adhesion, but the centrifugation parameters (speed and time) and number of donors of saliva influenced the results of Candida albicans adhesion to the denture base acrylic resin. No significant correlation was found between the two methods used for assessing Candida albicans adhesion, crystal violet staining and XTT reduction method. Thus, the results demonstrated that ArO2/70W and ArSF6/70W plasma treatments showed promising potential for reducing Candida albicans adhesion, while the Ar/50W plasma treatment showed promising potential for reducing Candida glabrata adhesion to denture base resins. Moreover, the saliva pellicle, depending of experimental conditions, may increase the Candida albicans adhesion, but it not significantly influences the Candida glabrata adhesion. The diverse methodological procedures regarding to preconditioning with saliva alter the results of Candida albicans adhesion

Efeito da desmineralização óssea superficial na migração, adesão e diferenciação de pré-osteoblastos / The effect of surface bone demineralization on the migration, adhesion and differentiation of pre-osteoblasts

Resultados de pesquisas prévias tem encontrado potencial aumentado para a consolidação de enxertos ósseos mediante desmineralização do material enxertado e/ou das superfícies de consolidação. Entretanto há carência de embasamento apoiado em evidências biológicas do benefício de tal procedimento. Para testar esta hipótese, o tecido ósseo da calvária de cobaias (Cavia porcellus) foi exposto ao condicionamento por ácido cítrico durante 15, 30, 90 e 180 segundos (grupos teste). Quarenta e cinco discos ósseos de três milímetros de diâmetro foram removidos dos animais, dos quais 36 foram condicionados com ácido cítrico pH 1 a 50% e nove não receberam condicionamento (grupo controle). Sobre nove discos de cada grupo foram cultivados pré-osteoblastos MC3T3-E1 durante 24, 48 e 72 horas (três discos de cada grupo em cada tempo). Análises da morfologia celular, do número de células aderidas sobre as superfícies e da área de cobertura destas superfícies por préosteoblastos foram realizadas à microscopia eletrônica de varredura. Observou-se aumento do número de células aderidas às superfícies com o tempo, independentemente de haver condicionamento ou de seu tempo de aplicação. Entretanto, essa diferença só foi estatisticamente significante intragrupos (p<0,05) e quando comparados os períodos de 24 e 72 horas de incubação. A área de cobertura das superfícies por células aumentou significantemente com o tempo somente nos grupos teste, também entre os períodos de incubação de 24 e 72 horas (p<0,01). O grupo controle apresentou-se com 50% ou menos de área de cobertura superficial em relação aos demais. A duração de aplicação do ácido não interferiu significantemente nesse parâmetro de avaliação, mas nos grupos 15 e 30, a área de recobrimento ósseo mais do que triplicou às 72 horas em relação às 24 horas (p<0,01), com cerca de 70% das superfícies cobertas por células, contra 30% no grupo controle. Conclui-se que a desmineralização óssea...

Results of previous research has found increased potential for the consolidation of bone grafts by demineralization of the graft material and / or areas of consolidation. However there is a lack of foundation supported by biological evidence of benefits from such procedures. To test this hypothesis, the bone tissue of the calvaria of guinea pigs (Cavia porcellus) were exposed to conditioning by citric acid for 15, 30, 90 and 180 seconds (test group). Forty-five bone disks measuring three millimeters in diameter were removed from the animals, of which 36 were conditioned with citric acid pH 1 to 50% and nine did not receive conditioning (control group). About nine disks in each group were pre-cultured with MC3T3- E1 osteoblasts for 24, 48 and 72 hours (three discs of each group at each time point). Analysis of cell morphology, number of cells attached on the surface and the coverage area of these surfaces by pre-osteoblasts were performed on scanning electron microscopy. There was na increase in the number of cells attached to surfaces over time, regardless of conditioning or application time. However, this difference was not statistically significant intra-group (p <0.05) when comparing the periods of 24 and 72 hours of incubation. The coverage area of the surfaces of cells increased significantly with time only in the test groups, also among the incubation periods of 24 and 72 hours (p <0.01). The control group presented with 50% or less of surface area coverage compared to the other. The duration of application of the acid did not affect significantly this parameter of evaluation, but in groups 15 and 30, the bonearea covered more than tripled from 24 to 72 hours (p <0.01), with about 70 % of the area covered by cells, versus 30% in the control group. It was concluded that bone demineralization in the studied conditioning times provides a substrate on which cells acquire pre-osteoblastic morphology compatible with...

Resistência de união e discrepância marginal absoluta de infraestruturas feitas em cerâmica Y-TZP: influência de novos métodos de tratamento de superfície / New approach for surface modification of a Y-TZP ceramic: resin bond strength quality, surface micro-morphological evaluations and marginal fit of Y-TZP frameworks

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de diferentes tratamentos de superfície da cerâmica Y-TZP na resistência de união, durabilidade e discrepância marginal. Para os testes de resistência adesiva, foram obtidos 144 corpos de prova (cp) da cerâmica VITA In-Ceram YZ for InLab (5,25 x 3,75 x 4,5 mm), que foram divididos em 6 grupos (G) (n=24), conforme o tratamento de superfície: G1: sem tratamento (controle); G2: jateamento com partículas de alumínio revestidas por sílica (CoJet®-Sand, 3M ESPE AG) (silicatização); G3: vitrificação 1 (Glaze Spray VITA AKZENT), condicionamento com ácido fluorídrico (HF) (1 min); G4: vitrificação 1 (Glaze Spray VITA AKZENT), silicatização; G5: vitrificação 2 (Glaze VITA AKZENT), condicionamento com HF (1 min); G6: vitrificação 2 (Glaze VITA AKZENT), silicatização. Após todos os tratamentos, as superfícies foram silanizadas por 5 min (ESPE-SIL) e a cimentação com Panavia F (Kuraray) foi realizada. Metade dos espécimes de cada tratamento foi ensaiada 24h após cimentação (SECO), a outra metade foi submetida à armazenagem (150 dias) e termociclagem (12.000x) (TC), e então realizado o ensaio de cisalhamento (1 mm/min). G7: G1+TC; G8: G2+TC; G9: G3+TC; G10: G4+TC; G11: G5+TC; G12: G6+TC. Superfícies tratadas foram analisadas por perfilometria óptica 3D para obtenção dos dados de rugosidade (Ra) e microscopia eletrônica de varredura (MEV) (1000x). Análise por energia dispersiva de raio-X (EDS) foi realizada para determinar os elementos químicos presentes na superfície de cada grupo. Para a análise de adaptação marginal foram confeccionadas 60 infraestruturas (adaptadas em um troquel metálico) nas quais foram realizados os mesmos tratamentos de superfície. Os dados obtidos foram analisados estatisticamente. Constata-se que tanto na condição Seco como na condição TC os grupos que receberam tratamento de superfície via vitrificação (vitrificação 1 e vitrificação 2) apresentaram mais alta resistência de união comparada ao grupo...

The aim of this study was to evaluate the effect of different surface treatments of Y-TZP ceramic on bond durability and marginal fit. 144 specimens of VITA In-Ceram YZ for InLab ceramic (5.25 x 3.75 x 4.5 mm) were obtained and divided into 6 groups (n=24) according to the surface treatment: G1: no treatment (control); G2: chairside tribochemical silica coating system (CoJet®-Sand, 3M ESPE AG) (Cojet); G3: vitrification 1 (Glaze Spray VITA AKZENT), conditioning with hydrofluoric acid (HF) (1 minute); G4: vitrification 1 (Glaze Spray VITA AKZENT), Cojet; G5: vitrification 2 (Glaze VITA AKZENT), conditioning with HF (1 minute); G6: vitification 2 (Glaze VITA AKZENT), Cojet. Then, the ceramic surfaces were silanized and the cement Panavia F (Kuraray) was applied. Half of the specimens from each treatment was tested 24 hours after cementation (DRY), the remaining specimens were stored in distilled water for150 days, thermocycled(12,000x) (AGING) and then the shear test was performed (1mm/minute). Conditioned surfaces were evaluated by 3D optical profilometry in order to obtain roughness data (Ra) and analysed by scan electronic microscopy (SEM) (1000x). Analysis by energy x-ray dispersive (EDS) was performed to determine the chemical elements present in each surface group. For analysis of marginal adaptation 60 crowns were produced (adapted into a metal die) and the same surface treatments were carried out on the internal surface of the crowns. The data were analysed using. The results suggest the vitrification 1 and vitrification 2 groups showed the highest bond strength compared to the control group. The highest marginal discrepancies were observed in the vitrification groups (117.36±29.61 to 105.78±12.23) comparing with the other groups (55.29±8.71 and 55.04±8.55). The proposed new surface treatment changed the Y-TZP ceramic morphology improving its adhesion to the resin cement...

Adesão de células do ligamento periodontal de ratos a diferentes superfícies de titânio: estudo comparativo in vitro / Adhesion of ligament periodontal cells to different titanium surfaces: an in vitro comparative study

Objetivo: o presente estudo teve como objetivo avaliar, através de experimentos in vitro utilizando cultura celular, a capacidade de adesão das células do ligamento periodontal de ratos sobre as superfícies de titânio polidas e tratadas por nitretação iônica (plasma). Método: foram utilizados discos de titânio grau II ASTM F86 nas dimensões de 15mm de diâmetro por 1,5mm de espessura, os quais receberam diferentes tratamentos de superfície em 2 grupos distintos: polido e nitretado a plasma por gaiola catódica. As células foram isoladas do ligamento periodontal de ratos e cultivadas em meio de cultura alfa-MEM contendo antibióticos e suplementado com 10% de FBS, por 72 horas, em atmosfera úmida com 5% de CO2 a 37ºC. No subcultivo as células foram cultivadas sobre os discos de titânio em uma placa de 24 poços, na densidade de 1 x 104 células por poço, incluindo-se controles positivos sem os discos de titânio. Após 24 horas de cultivo, as células foram submetidas à contagem em câmara de Neubauer. Resultados: os resultados mostraram que a média de adesão celular foi maior na superfície controle (0,62±0,22) do que nos grupos polido (0,46±0,14) e nitretado (0,33±0,10). Foi observada diferença estatisticamente significante entre os grupos controle e nitretado (p=0,04), porém não se observou diferença na adesão celular entre os grupos polido e nitretado. Conclusão: a capacidade de adesão das células do ligamento periodontal de rato a superfícies de titânio não sofreu influência do tratamento de superfície dado ao material.

Objective: the present study aims to evaluate, through experiments in vitro, the adhesion capacity of rats periodontal ligament cells on polishing and treated by ionic nitriding (plasma) titanium surfaces. Method: degree II titanium discs (ASTM F86), 15mm of diameter for 1,5mm of thickness, which had received different treatments from surface in 2 distinct groups (polished and cathodic cage plasma nitriding) were used. The cells were isolated from periodontal ligament of rats and cultivated in alpha-MEM contend antibiotic and supplemented with 10% of FBS, for 72 hours, in humid atmosphere with 5% of CO2 at 37ºC. In the subculture the cells were cultivated on titanium discs in 24-well cell culture plates, with a density of 1 x 104 cells per well, including wells with no discs (control). After 24 hours of cultivation, the cells were counted in a Neubauer chamber. Results: the results had shown that the mean adhesion was greater on the control surface (0.62±0.22) than on polished (0.46±0.14) and nitriding (0.33±0.10) surfaces. Statistical significant difference was observed between the groups control and cathodic cage plasma nitriding (p=0.04), nevertheless no diference was found between polished and nitriding groups. Conclusion: the adhesion capacity of rat periodontal ligament cells on the titanium surfaces was not influenced by the different surface treatments given to the material, since none of these contributed positively in the process of cellular adhesion.