Polihexametilenobiguanida versus solução salina na carga microbiana em feridas: protocolo de revisão sistemática / Polyhexamethylene biguanide versus saline on microbial load in wounds: a systematic review protocol

OBJETIVO: Analisar a efetividade de Polihexametileno Biguanida (PHMB), comparado à solução salina na carga microbiana de pacientes com feridas. MÉTODO: Protocolo de revisão sistemática, construído segundo o Preferred Reporting Items for Systematic reviews and Meta-Analyses (PRISMA), de acordo com metodologia do Joanna Briggs Institute (JBI). Os estudos serão avaliados por dois pesquisadores independentes, nas bases de dados: Literatura Latino-Americana e do Caribe em Ciências da Saúde (LILACS), Base de Dados de Enfermagem (BDENF), Sistema Online de Busca e Análise de Literatura Médica (MEDLINE)e Excerpta Medica Database (Embase). As pesquisas a serem incluídas serão aquelas publicadas em português, inglês ou espanhol e a busca não definirá recorte temporal. Serão desconsiderados estudos em animais ou in vitro, revisões, cartas ao editor ou estudos de casos. Após a seleção dos estudos, a extração de dados ocorrerá de maneira sistemática e os registros correspondentes serão feitos de forma narrativa e tabular.

OBJECTIVE: To analyze the effectiveness of polyhexamethylene biguanide (PHMB) compared to saline on the microbial load of wounds. METHOD: Systematic review protocol, built according to the Preferred Reporting Items for Systematic reviews and Meta-Analyses (PRISMA) and the Joanna Briggs Institute's (JBI) methodology. Studies will be evaluated by two independent researchers in the following databases: Latin America and the Caribbean Literature on Health Sciences (LILACS), Nursing Database (BDENF), Medical Literature Analysis and Retrieval System Online (MEDLINE), and Excerpta Medica Database (Embase). Studies published in Portuguese, English, or Spanish will be included, and the search will not be restricted by publication date. Animal or in vitro studies, reviews, letters to the editor, and case studies will be excluded. After selecting studies, data extraction will take place systematically, and the corresponding records will be presented in a narrative and tabular way.

Formação do biofilme em ferida cutânea e seu comportamento diante das intervenções: revisão integrativa / Biofilm formation in cutaneous wounds and its behavior in the face of interventions: an integrative review

RESUMO Objetivo identificar na literatura a formação do biofilme e o seu comportamento diante das intervenções em feridas cutâneas. Métodos revisão integrativa, realizada nas bases de dados Cumulative Index to Nursing and Allied Health Literature , Literatura Latino-Americana e do Caribe em Ciências da Saúde, EMBASE, Scopus, The Cochrane Library Collaboration , MEDLINE/PubMed e Science Direct, sem delimitação temporal. Foram selecionados 19 estudos. Avaliação das informações ocorreu de forma descritiva, confrontando com os achados pertinentes. Resultados os estudos da amostra foram publicados no idioma inglês e contemplaram três tipos de pesquisa de biofilme: dois clínicos, seis in vitro e 11 in vivo (animal). Incluíram-se três temas: criação de modelo biofilme (n=4), avaliação do biofilme (n=3), comportamento do biofilme diante de intervenções para o seu manejo (n=12). Conclusão efeitos prejudiciais do biofilme na cicatrização de feridas foram confirmados. Diversas intervenções foram capazes de reduzir e eliminar o biofilme nos modelos in vitro e in vivo . Contribuições para a prática constatou-se que avaliação clínica da lesão não permite identificar o biofilme, inclusive quando presente encontra-se abaixo da superfície da lesão. Este achado suscita reflexão por parte dos enfermeiros a respeito das intervenções adotadas para a remoção do biofilme.

ABSTRACT Objective to identify in the literature the biofilm formation and its behavior when faced with interventions in cutaneous wounds. Methods an integrative review, carried out in the Cumulative Index to Nursing and Allied Health Literature, Latin American and Caribbean Health Sciences Literature, EMBASE, Scopus, The Cochrane Library Collaboration, MEDLINE/PubMed and Science Direct databases, without temporal delimitation. Nineteen studies were selected. The information was evaluated descriptively, comparing it with the pertinent findings. Results the sample studies were published in English and included three types of biofilm research: two clinical, six in vitro and 11 in vivo (animal). Three themes were included: biofilm model creation (n=4), biofilm assessment (n=3), biofilm behavior before interventions for its management (n=12). Conclusion the detrimental effects of biofilm on wound healing have been confirmed. Several interventions were able to reduce and eliminate biofilm in in vitro and in vivo models. Contributions to practice it was found that clinical evaluation of the lesion does not allow the identification of biofilm, even when present; it is below the surface of the lesion. This finding raises reflection on the part of nurses regarding the interventions adopted for the removal of biofilm.

Desfechos clínicos e microbiológicos no uso de cateter venoso periférico: subsídios para assistência segura ao paciente / Clinical and microbiological outcomes in the use of peripheral venous catheters: subsidies for safe patient care

Os cateteres venosos periféricos (CVP) são produtos para saúde (PPS) comumente utilizados em pacientes hospitalizados para administração de fluidos, medicamentos, e monitoramento hemodinâmico. No entanto, podem representar fonte potencial de contaminação microbiana, formação de biofilme e infecção. O objetivo desta pesquisa foi avaliar indicadores clínicos e microbiológicos associados ao uso do CVP. Trata-se de um estudo observacional realizado em duas etapas: Etapa I - Seguimento longitudinal prospectivo dos pacientes hospitalizados em uso contínuo de CVP flexível com a caracterização dos pacientes submetidos à cateterização venosa periférica, bem como frequência dos sinais e sintomas de agravos associados ao uso de CVP. Além disso, a Etapa II - Avaliação das condições microbiológicas, incluindo a presença de biofilme em CVP flexíveis dos pacientes hospitalizados por microscopia eletrônica de varredura (MEV), e a associação entre os aspectos clínicos dos pacientes com os microbiológicos em diferentes locais dos CVP flexíveis (superfícies internas e externas). O seguimento longitudinal prospectivo de 67 pacientes hospitalizados em uso contínuo de CVP flexível, bem como a coleta das amostras de CVP flexíveis foram realizados em unidades de internação do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, SP, Brasil. Antes da avaliação microbiológica, todas as amostras de CVP flexíveis foram examinadas em termos de integridade e aparência (sujidade). A análise estatística foi realizada pelo teste de qui-quadrado (x2) de Pearson com α=5%. Os 67 pacientes hospitalizados eram de ambos os sexos, média de idade de 55,8 anos, com tempo médio de permanência do CVP flexível de 43,0h. Ainda, em relação aos locais de inserção dos CVP flexíveis, 98,5% estavam em membros superiores: braços (44,7%), mãos (35,8%) e antebraços (17,0%), e destes, 75,0% apresentavam cobertura (curativo adesivo) transparente. Aproximadamente, um em cada quadro pacientes apresentou sinais e sintomas de agravos associados ao uso do CVP flexível. Staphylococcus spp foram os micro-organismos mais prevalente nas amostras. Além disso, não houve associação entre a avaliação clínica e a presença nas superfícies internas e externas de micro-organismo no CVP flexível, respectivamente (x² =1,522; gl=1; p=0,217) e (x²=2,405; gl=1; p=0,121). A MEV evidenciou diferenças morfológicas (textura e espessura) entre as camadas das superfícies internas e externas dos CVP flexíveis, bem como a presença de célula epitelial, matéria orgânica, extensa rede de fibrina com células sanguíneas e bactéria na forma de bastonete. Em conclusão, esta pesquisa permitiu o avanço do conhecimento acerca do uso do CVP flexível e a assistência segura ao paciente, bem como inferir que estes PPS são fonte potencial de contaminação microbiana nas superfícies internas e externas com a formação de biofilme. Entretanto, não houve associação entre os desfechos clínicos e microbiológicos quanto ao uso de CVP flexível

Peripheral venous catheters (PVC) are health products (HP) commonly used in hospitalized patients to administer fluids, medications, and hemodynamic monitoring. However, they can represent a potential source of microbial contamination, biofilm formation and infection. The objective of this research was to evaluate clinical and microbiological indicators associated with the use of PVC. This is an observational study carried out in two stages: Step I - Prospective longitudinal follow-up of hospitalized patients on continuous use of flexible PVC with the characterization of patients undergoing peripheral venous catheterization, as well as the frequency of signs and symptoms of injuries associated with the use of PVC. In addition, Step II - Assessment of microbiological conditions, including the presence of biofilms in flexible PVC from patients hospitalized by scanning electron microscopy (SEM), and the association between the clinical aspects of patients and the microbiological aspects in different locations of flexible PVC (internal and external surfaces). The prospective longitudinal follow-up of 67 hospitalized patients in continuous use of flexible PVC, as well as the collection of flexible PVC samples were performed in inpatient units at Clinical Hospital, Ribeirão Preto Medical School, University of São Paulo, Ribeirão Preto, SP, Brazil. Before the microbiological evaluation, all flexible PVC samples were examined for integrity and appearance (dirt). Statistical analysis was performed using Pearson's chi-square test (x2) with α=5%. The 67 hospitalized patients were of both sexes, with a mean age of 55.8 years, with a mean length of stay of the flexible PVC of 43.0h. Moreover, in relation to the flexible PVC insertion sites, 98.5% were in the upper limbs: arms (44.7%), hands (35.8%) and forearms (17.0%), and of these, 75.0% had a transparent dressing (adhesive bandage). Approximately one in every patient presented signs and symptoms of injuries associated with the use of flexible PVC. Staphylococcus spp. were the most prevalent microorganisms in the samples. In addition, there was no association between clinical evaluation and the presence on the internal and external surfaces of microorganisms in the flexible PVC, respectively (x²=1.522; gl=1; p=0.217) and (x²=2.405; gl=1; p=0.121). SEM showed morphological differences (texture and thickness) between the layers of the internal and external surfaces of flexible PVC, as well as the presence of an epithelial cell, organic matter, extensive fibrin network with blood cells and bacteria in the form of a rod. In conclusion, this research allowed the advancement of knowledge about the use of flexible PVC and safe patient care, as well as inferring that these HP are a potential source of microbial contamination on the internal and external surfaces with the biofilm formation. However, there was no association between clinical and microbiological outcomes regarding the use of flexible PVC

Avaliação in vitro da formação de biofilme por cepas de Candida spp. provenientes de indivíduos diabéticos e não diabéticos em ambiente sem e com suplementação de glicose / In vitro evaluation of biofilm formation by Candida spp. strains from diabetic and non-diabetic individuals in environment without and with glucose supplementation

É notório o papel do diabetes mellitus como fator de risco para o desenvolvimento de doenças bucais, como a candidíase bucal, cárie e a periodontite. Assim, este estudo tem como objetivo avaliar a formação de biofilme por cepas de Candida spp. provenientes de diabéticos e não diabéticos em ambiente sem e com suplementação de glicose. Trata-se de um estudo experimental laboratorial in vitro, em três etapas. Etapas um e dois, de obtenção e identificação de 48 cepas de Candida spp., sendo que 32 de C. albicans e 16 de C. glabrata, com auxílio da técnica de PCR. Ainda, a etapa três, de processamento microbiológico, com a avaliação da capacidade de formação de biofilme por três ensaios distintos: I) determinação do número de unidades formadoras de colônia (UFC/mL); II) matéria seca dos biofilmes; III) taxa de crescimento de biofilme em fundo de placa de poliestireno. Inicialmente, objetivando simular as características observadas in vivo, o fundo das placas de cultivo recebeu 400 µL de saliva humana para formação da película adquirida. Decorrida a incubação a 37 °C por 24 h, a saliva foi descartada e cada poço de cultura recebeu suspensão padronizada das leveduras (106 UFC/mL) em Saubouraud Dextrose Broth sem suplementação e com suplementação de glicose a 2 e 10 mg/mL, e as placas foram incubadas a 37 °C por 48 h. Para avaliação do número de UFC/mL, o biofilme aderido foi coletado, diluído seriamente e cultivado em placas de Petri com Sabouraud Dextrose Agar. Após incubação os resultados foram expressos em log UFC/mL. Para a avaliação da matéria seca, a solução remanescente foi liofilizada e mensurada em balança de precisão. A taxa de crescimento de biofilme foi avaliada por microscopia Operetta CLS High Content e o FilmTracer(TM) LIVE/DEAD Biofilm Viability kit, conforme o protocolo do fabricante. Posteriormente, 10 imagens por poço foram obtidas e digitalizadas com ampliação de 40 ×. A área recoberta por biofilme (µm2) das imagens foi avaliada com auxílio do software Harmony High Content Imaging. Os dados apresentaram distribuição não normal, e a comparação entre as cepas de diabéticos e não diabéticos foi realizada pelo teste U Mann-Whitney. O teste de Kruskal-Wallis one way foi utilizado para verificar diferenças entre as condições de suplementação de glicose. O nível de significância estatística adotado foi de α = 5%. Os valores de UFC/mL mostraram um maior crescimento das cepas de C. albicans dos pacientes diabéticos em relação aos não diabéticos nas três suplementações (p < 0,001). Por outro lado, acerca da matéria seca em 10 mg/mL e da taxa de crescimento de biofilme sem suplementação de glicose e a 2 mg/mL, os resultados indicaram uma formação de biofilme maior para cepas de C. albicans dos não diabéticos (p < 0,001). Em conclusão, cepas de C. albicans e C. glabrata provenientes de diabéticos e não diabéticos em ambiente sem e com suplementação de glicose apresentaram resultados distintos quanto à formação de biofilme, por diferentes técnicas

The role of diabetes mellitus is notorious as a risk factor for development of oral diseases, such as oral candidiasis, dental caries, and periodontitis. Thus, this study aimed to evaluate biofilm formation by Candida spp. strains from diabetic and non-diabetic individuals in environment without and with glucose supplementation. This is an in vitro experimental laboratory study, in three stages. Stages one and two of obtainment and identification of 48 Candida spp. strains, with 32 of C. albicans and 16 of C. glabrata, with the help of PCR technique. Also, stage three, of microbiological processing, with evaluation of biofilm formation capacity by three different assays: I) determination of the number of colony forming units (CFU/mL); II) biofilm dry matter; III) biofilm growth rate on the bottom of polystyrene plates. Initially, aiming to simulate the characteristics observed in vivo, the bottom of the cultivation plates received 400 µL of human saliva for formation of acquired pellicle. After the incubation at 37 °C for 24 h, the saliva was discarded and each culture well received standardized suspension of yeast (106 CFU/mL) in Saubouraud Dextrose Broth without supplementation and with glucose supplementation at 2 and 10 mg/mL, and the plates were incubated at 37 °C for 48 h. To assess the number of CFU/mL, the adhered biofilm was collected, seriously diluted, and cultivated in Petri dishes with Sabouraud Dextrose Agar. After the incubation, the results were expressed in log CFU/mL. To assess the dry matter, the remaining solution was lyophilized and measured on a precision scale. The biofilm growth rate was evaluated by Operetta CLS High Content microscopy and FilmTracer(TM) LIVE/DEAD Biofilm Viability kit, according to manufacturer's protocol. Later, 10 images per well were obtained and digitalized with 40 × magnification. The area covered by biofilm (µm2) of the images was assessed with the help of Harmony High Content Imaging software. Data showed non-normal distribution, and the comparison among the diabetic and non-diabetic strains was performed by Mann-Whitney U test. Kruskal-Wallis one-way test was used to verify differences between conditions of glucose supplementation. The level of statistical significance adopted was α = 5%. The values of CFU/mL showed greater growth of the diabetic patient's strains in relation to the non-diabetic ones (p < 0.001). On the other hand, regarding dry matter at 10 mg/mL and the growth rate of biofilm without glucose supplementation and at 2 mg/mL, the results indicated a higher biofilm formation for strains of C. albicans from non-diabetic individuals (p <0.001). In conclusion, C. albicans and C. glabrata strains from diabetic and non-diabetic individuals in environment without and with glucose supplementation showed different results concerning the biofilm formation, using different techniques

Bacteriófagos com potencial aplicabilidade em tubos endotraqueaisavaliação das atividades antibacteriana e antibiofilme / Potential applicability of bacteriophages on endotracheal tubes: evaluation of antibacterial and antibiofilm activities

O objetivo deste estudo foi isolar bacteriófagos com potencial aplicabilidade no controle de biofilme de Pseudomonas aeruginosa em tubos endotraqueais. Os bacteriófagos isolados foram expandidos, titulados e caracterizados quanto ao perfil genômico, morfologia, tipo de material genético, especificidade de hospedeiros, eficiência de plaqueamento, atividade lítica, curva de crescimento e estabilidade às variações de pH e temperatura. A inibição do crescimento planctônico e a atividade antibiofilme, in vitro, foram avaliadas contra 15 cepas de P. aeruginosa. A atividade antibiofilme de tubos endotraqueais revestidos com os bacteriófagos foi avaliada em um modelo de biofilme em fluxo contínuo. A influência dos bacteriófagos sobre os fatores de virulência de P. aeruginosa foi avaliada pela inibição da formação de biofilme, produção de piocianina e proteases extracelulares e expressão dos genes pslA, lasl, lasB e phzH. Os dados referentes a área recoberta por biofilme após o tratamento com os bacteriófagos e a atividade antibiofilme de tubos endotraqueais revestidos apresentaram distribuição não normal e foram analisados em um Modelo Linear Generalizado (α=5%). A influência dos bacteriófagos sobre os fatores de virulência de P. aeruginosa também apresentou distribuição não normal e foi analisada pelo teste de Kruskal-Wallis (α=5%). Todas as demais variáveis apresentaram distribuição normal e variância homogênea e foram analisadas por ANOVA (α=5%). Vinte e cinco bacteriófagos foram isolados a partir de amostras do esgoto doméstico. Do total, 5 bacteriófagos foram selecionados para caracterização integral e avaliação das atividades antibacteriana e antibiofilme. Eles foram designados como vB_PaeM_USP_1, vB_PaeM_USP_2, vB_PaeM_USP_3, vB_PaeM_USP_18 e vB_PaeM_USP_25. Os bacteriófagos pertencem à ordem Caudovirales, família Myoviridae, com genoma constituído por DNA dupla fita (dsDNA), variando de ~62 a ~65 kb e codificam de 65 a 89 proteínas. Os bacteriófagos produziram de 27 a 46 partículas virais após 30 minutos de incubação e foram estáveis às variações de pH e temperatura. Os bacteriófagos exibiram um amplo espectro lítico e foram capazes de infectar P. aeruginosa, incluindo cepas multirresistentes. Eles também reduziram o crescimento de P. aeruginosa na forma planctônica, e a carga microbiana e atividade metabólica quando aplicados a biofilmes associados aos tubos endotraqueais. A área recoberta por biofilme foi significativamente reduzida após a exposição de biofilmes maduros aos bacteriófagos. A aplicação in situ dos bacteriófagos no revestimento de tubos endotraqueais mostrou que o coquetel composto por vB_PaeM_USP_2 e vB_PaeM_USP_18 alterou a colonização bacteriana e o desenvolvimento do biofilme de P. aeruginosa, sem afetar substancialmente a atividade metabólica. Avaliando os fatores de virulência de P. aeruginosa foi observado que os vírus promoveram mudanças no crescimento do biofilme apenas até 8 horas de cocultivo. Também, após 8 horas de cocultivo foi observado que vB_PaeM_USP_1, vB_PaeM_USP_2 e vB_PaeM_USP_3 promoveram filamentação da morfologia bacteriana. A presença de bacteriófagos não alterou a produção de piocianina e proteases extracelulares por P. aeruginosa. No entanto, alterações no nível de expressão de genes relacionados a fatores de virulência foram detectadas, principalmente, após 2 e 48 h de cocultivo. A atividade lítica no biofilme de P. aeruginosa formado por cepas multirresistentes indica que os bacteriófagos isolados neste estudo podem ser considerados bons candidatos para estudos terapêuticos.

The objective of this study was to isolate bacteriophages and potentially apply it against Pseudomonas aeruginosa biofilms on endotracheal tube surfaces. The isolated bacteriophages were propagated, titrated, and characterized in terms of their genomic profile, viral morphology, type of genetic material, host range investigation, efficiency of platting, lytic activity, growth curve, and pH and thermal stability. The inhibition of planktonic growth and antibiofilm activity, in vitro, were evaluated against 15 P. aeruginosa strains. The antibiofilm activity of endotracheal tubes coated with bacteriophages was evaluated in a continuous flow biofilm model. The bacteriophages influence on development of virulence mechanisms on P. aeruginosa was evaluated by the inhibition of biofilm growth, production of pyocyanin and extracellular proteases, and expression of pslA, lasl, lasB and phzH genes. Data referring to the residual aggregated biofilm after treatment with bacteriophages and the antibiofilm activity of endotracheal tubes coated with bacteriophages showed non-normal distribution and were analyzed in a Generalized Linear Model (α=5%). The bacteriophage's influence on development of virulence mechanisms on P. aeruginosa also showed non-normal distribution and was analyzed by Kruskal-Wallis test (α=5%). All other data had normal distribution and homogeneous variance and were analyzed using ANOVA (α=5%). Twenty-five bacteriophages were isolated from domestic sewage samples. Of these, 5 bacteriophages were selected for complete characterization and evaluation of antibacterial and antibiofilm activities. They were designated as vB_PaeM_USP_1, vB_PaeM_USP_2, vB_PaeM_USP_3, vB_PaeM_USP_18 and vB_PaeM_USP_25. All of them belong to the order Caudovirales, Myoviridae family, and they have a double-stranded DNA (dsDNA) genome ranging from ~62 kb to ~65 kb that codes from 65 to 89 proteins. The bacteriophages produced from 27 to 46 particles after 30 minutes of incubation and were pH and heat stable. Bacteriophages exhibited a broad lytic spectrum and were able to infect P. aeruginosa, including multidrug-resistant strains. They also reduced the growth of P. aeruginosa strains in planktonic form, and microbial load and metabolic activity when applied to biofilms associated with endotracheal tubes. Biofilm-coated area were significantly reduced after treatment of mature biofilms with bacteriophages. The in situ application of bacteriophages in endotracheal tubes revealed that the cocktail composed by vB_PaeM_USP_2 and vB_PaeM_USP_18 promoted changes in colonization and biofilm growth processes without, substantially, altering the metabolic activity. Assessing the virulence mechanisms of P. aeruginosa it was observed that the virus promoted changes in P. aeruginosa biofilm growth only up to 8 h of co-incubation. In addition, after 8 h of co-incubation, it was observed that vB_PaeM_USP_1, vB_PaeM_USP_2 and vB_PaeM_USP_3 promoted filamentation of bacterial morphology. Bacteriophage presence did not alter both pyocyanin and protease production by P. aeruginosa. However, changes in the expression level of genes related to virulence factors were detected mainly after 2 and 48 h of co-culture. The lytic activity on multidrug-resistant P. aeruginosa biofilm indicates that isolated bacteriophages in this study may be considered as good candidates for therapeutic studies

Protocolo com produtos químicos para o enfrentamento do biofilme em linhas d'água de equipos odontológicos: perspectiva física, química, mecânica e biológica / Protocol with chemical products to combat biofilm on dental unit waterlines: physical, chemical, mechanical, and microbiological perspective

A biossegurança na odontologia visa o enfrentamento da contaminação cruzada e o biofilme em linhas d'água de equipos odontológicos. O objetivo deste estudo foi investigar, na perspectiva física, química, mecânica e biológica, um protocolo de uso de produtos químicos com possível aplicabilidade nas linhas d'água de equipos odontológicos para melhoria e manutenção da qualidade da água. O protocolo com produtos químicos (Produto A - ácido cítrico + cloreto de sódio; Produto B - bicarbonato de sódio + cloreto de sódio; Produto AB - ácido cítrico + bicarbonato de sódio + cloreto de sódio) foi empregado em corpos de prova de aço inoxidável que, posteriormente, foram submetidos aos ensaios de microdureza e corrosão. Ainda, ensaios de cor, microdureza, rugosidade e de atividade antibiofilme [biomassa total (cristal violeta), atividade metabólica (XTT), viabilidade por meio de corante fluorescente e microscopia confocal de varredura à laser, bem como morfologia estrutural do biofilme por microscopia eletrônica de varredura (MEV)] foram realizados em corpos de prova de poliuretana. As cepas padrão empregadas para avaliar a atividade antibiofilme monoespécie foram Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), Staphylococcus aureus (ATCC 29923) e Escherichia coli (ATCC 25922). Com relação à alteração da microdureza no aço inoxidável, após a imersão simulada por 1 e 2 anos nos Produtos (A+B+AB), não houve diferença dos resultados com o grupo controle (água). Decorrida a exposição aos produtos e grupo controle, a maioria das amostras de aço inoxidável apresentou tendência à corrosão. Ainda, houve alterações de cor, microdureza e rugosidade nas superfícies de poliuretana após a imersão simulada por 1 e 2 anos dos produtos e do grupo controle. A avaliação da biomassa dos biofilmes indicou que o Produto A (p=0,003) e o Produto AB (p=0,019) reduziram significativamente o biofilme de P. aeruginosa em comparação com o controle. Por outro lado, a avaliação da biomassa do biofilme formado por S. aureus sugeriu que o Produto B (p=0,018) promoveu maior ação antibiofilme. Em relação aos biofilmes formados por E. coli, o Produto A (p=0,001) e o uso sequencial dos Produtos A+B+AB (p=0,021) mostraram os melhores resultados. Para o XTT em comparação com o controle, os tratamentos com o Produto A (p=0,001), o Produto AB (p<0,001) e o uso sequencial dos Produtos A+B+AB (p=0,002) reduziram significativamente a atividade metabólica do biofilme de P. aeruginosa. No biofilme formado por S. aureus, contrariando os resultados observados na avaliação da biomassa, o Produto B não promoveu alterações significantes na atividade metabólica (Produto A: p<0,001; Produto AB: p=0,007; uso sequencial dos Produtos A+B+AB: p<0,001). Considerando o biofilme formado por E. coli, observou-se que o Produto B (p=0,046), o Produto AB (p<0,001) e o uso sequencial dos Produtos A+B+AB (p<0,001) promoveram redução da atividade metabólica. Observou-se redução significativa do biofilme total após o emprego dos produtos (p<0,001), em relação ao controle. Apesar da redução significativa, ainda se observou agregados de biofilme residual, cobrindo extensa porção das superfícies, mesmo após o uso dos produtos. Considerando a quantidade de células vivas de P. aeruginosa e E. coli, o Produto A e o Produto B, isolados ou em conjunto demostraram resultados semelhantes. Além disso, o Produto AB e o uso sequencial dos Produtos A+B+AB não promoveu diferença na quantidade de células vivas de S. aureus, em comparação ao controle, indicando que a combinação dos produtos não potencializou a atividade antibiofilme. Em conclusão, os produtos analisados nesta pesquisa mostraram potencial inovador para o enfrentamento do biofilme linha d'água dos equipos odontológicos, preservando as propriedades físicas, químicas e mecânicas dos materiais.

Biosafety in dentistry aims to combat cross-contamination and biofilm on dental unit waterlines. The aim of this study was to investigate, from a physical, chemical, mechanical, and biological perspective, a protocol for the use of chemical products with possible applicability in dental unit waterlines to improve and maintain water quality. The protocol with chemicals (Product A - citric acid + sodium chloride; Product B - sodium bicarbonate + sodium chloride; Product AB - citric acid + sodium bicarbonate + sodium chloride) was used in stainless steel specimens which, later, were subjected to microhardness and corrosion tests. Moreover, color, microhardness, roughness and antibiofilm activity tests [total biomass (crystal violet), metabolic activity (XTT), viability by means of fluorescent dye and confocal laser scanning microscopy, as well as structural morphology of biofilm by scanning electron microscopy (SEM)] were performed on polyurethane specimens. The standard strains used to assess monospecies antibiofilm activity were Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), Staphylococcus aureus (ATCC 29923) and Escherichia coli (ATCC 25922). Regarding the microhardness change in stainless-steel, after simulated immersion for 1 and 2 years in Products (A+B+AB), there was no difference in the results with the control group (water). After exposure to the products and control group, most stainless-steel samples showed a tendency to corrosion. Furthermore, there were changes in color, microhardness, and roughness on the polyurethane surfaces after simulated immersion for 1 and 2 years of the products and the control group. Biofilm biomass evaluation indicated that Product A (p=0.003) and Product AB (p=0.019) significantly reduced P. aeruginosa biofilm compared to the control. On the other hand, the evaluation of the biomass of the biofilm formed by S. aureus suggested that Product B (p=0.018) promoted greater antibiofilm action. Regarding biofilms formed by E. coli, Product A (p=0.001) and the sequential use of Products A+B+AB (p=0.021) showed the best results. For XTT compared to the control, treatments with Product A (p=0.001), Product AB (p<0.001) and sequential use of Products A+B+AB (p=0.002) significantly reduced metabolic activity from the biofilm of P. aeruginosa. In the biofilm formed by S. aureus, contrary to the results observed in the biomass assessment, Product B did not promote significant changes in metabolic activity (Product A: p<0.001; Product AB: p=0.007; sequential use of Products A+B+ AB: p<0.001). Considering the biofilm formed by E. coli, it was observed that Product B (p=0.046), Product AB (p<0.001) and the sequential use of Products A+B+AB (p<0.001) promoted a metabolic activity reduction. There was a significant reduction in the total biofilm after using the products (p<0.001), compared to the control. Despite the significant reduction, residual biofilm aggregates were still observed, covering a large portion of the surfaces, even after using the products. Considering the amount of living cells of P. aeruginosa and E. coli, Product A and Product B, alone or together, showed similar results. In addition, Product AB and the sequential use of Products A+B+AB did not promote difference in the amount of living S. aureus cells, compared to the control, indicating that the combination of products did not enhance the antibiofilm activity. In conclusion, the products analyzed in this research showed innovative potential for facing the biofilm on dental unit waterline, preserving the physical, chemical, and mechanical properties of the materials.

AVALIAÇÃO DA CONTAMINAÇÃO MICROBIANA EM FITAS E RESINAS IDENTIFICADORAS DE INSTRUMENTAL CIRÚRGICO / Assessment of microbial contamination in surgical instrument identication tapes and resins / Evaluación de la contaminación microbiana en cintas y resinas identificadoras de instrumental quirúrgico

Objetivo: Avaliar a esterilidade de fitas coloridas e resinas utilizadas como identificadores em instrumentos cirúrgicos. Método: Foi realizado um estudo experimental, laboratorial, que utilizou uma amostra de 140 instrumentos cirúrgicos diversos, de aço inoxidável, identificados com fita ou resina, doados voluntariamente por Centros de Material e Esterilização para a presente investigação. As amostras foram inoculadas diretamente em trypticase soy broth (TSB) e em tioglicolato de sódio e incubadas por 14 dias. Resultados: Foi observado crescimento positivo em três amostras de fita e nenhum crescimento foi observado nas amostras de resina. Conclusão: Marcadores de instrumental do tipo fita albergaram microrganismos nos instrumentais avaliados, possivelmente protegidos por biofilme

Objective: To assess the sterility of colored tapes and resins used to identify surgical instruments. Method: We conducted an experimental laboratory study, which used a sample of 140 different stainless-steel surgical instruments, identified with tape or resin, voluntarily donated by Central Sterile Services Department to this research. The samples were inoculated directly into trypticase soy broth (TSB) and sodium thioglycolate and incubated for 14 days. Results: We found positive growth in three tape samples and none in resin samples. Conclusion: Identification tapes harbored microorganisms in the instruments assessed, possibly protected by biofilm

Objetivo: evaluar la esterilidad de las cintas de colores y las resinas utilizadas para identificar los instrumentos quirúrgicos. Método: Realizamos un estudio de laboratorio experimental, que utilizó una muestra de 140 instrumentos quirúrgicos de diferentes aceros inoxidable, identificados con cinta o resina, donados voluntariamente por el Departamento Central de Servicios Estériles para esta investigación. Las muestras se inocularon directamente en caldo de cultivo de soja tripticasa (TSB) y tioglicolato de sodio y se incubaron durante 14 días. Resultados: Encontramos un crecimiento positivo en tres muestras de cinta y ninguna en muestras de resina. Conclusión: las cintas de identificación albergaban microorganismos en los instrumentos evaluados, posiblemente protegidos por biofilm

Análise microbiológica de feridas tratadas com fator de crescimento epidérmico: estudo de coorte / Microbiological analysis of wounds treated with epidermal growth factor: cohort study

Introdução: O fator de crescimento epidérmico (EGF) é um biomaterial de origem peptídica que atua na pele estimulando a angiogênese e ativando os fibroblastos, favorecendo, assim, o processo de cicatrização. Porém, são necessários estudos que abordem a avaliação microbiológica de feridas tratadas com esse produto. Objetivo: Avaliar a colonização por S. aureus e P. aeruginosa em feridas de pacientes diabéticos tratadas com fator de crescimento epidérmico (EGF) em comparação àquelas tratadas com gel de carboximetilcelulose a 2%. Método: Estudo de coorte prospectivo, realizada a partir da coleta de material biológico de feridas por meio de swab estéril. A exposição do estudo foi o uso de EGF como tratamento. As análises laboratoriais incluiram técnicas de cultura para isolamento de P. aeruginosa e S. aureus a partir dos swabs, espectrometria de massas MALDI-TOF para confirmação ao nível de espécie, testes de suscetibilidade aos antimicrobianos, reações em cadeia da polimerase e ensaios para avaliação da capacidade de formação de biofilme pelas cepas isoladas. Resultados: Foram acompanhandos 25 pacientes, dos quais 11 foram tratados com hidrogel e 14 foram tratados com EGF. Os pacientes tinham características sociodemográficas e clínicas semelhantes em ambos os grupos. Foram isoladas 13 cepas de S. aureus (8 de feridas tratadas com hidrogel e 5 de feridas tratadas com EGF) e 15 cepas de P. aeruginosa (4 de feridas tratadas com hidrogel e 11 de feridas tratadas com EGF). Não há diferença estatística significativa entre a resistência aos antimicrobianos nas cepas de S. aureus e de P. aeruginosa isoladas de feridas tratadas com EGF ou com hidrogel. Apesar disso, foram isoladas três cepas de MRSA e uma cepa de P. aeruginosa multirresistente. Em relação à formação de biofilme, sem discriminar as espécies de microrganismos, tem-se que 91,7% das cepas isoladas de feridas tratadas com hidrogel foram formadoras de biofilme, enquanto no grupo tratamento, apenas 50,0% das cepas foram formadoras de biofilme. Tal diferença é significativa sob o ponto de vista estatístico, com p-valor=0,039 no teste Exato de Fisher, razão de chances (OR) = 11,0 (IC = 1,1-106,4) e risco relativo (RR) = 1,83 (IC = 1,2-3,8). Assim, pode-se dizer que há 11 vezes mais chances (ou uma probabilidade 83% maior) de que cepas de S. aureus ou P. aeruginosa isoladas de feridas tratadas com hidrogel sejam formadoras de biofilme quando comparadas a cepas dessas espécies isoladas de feridas tratadas com EGF. Não há diferença estatística entre a carga microbiana de P. aeruginosa e de S. aureus em feridas tratadas com EGF ou com hidrogel. Não foram identificadas cepas com genes responsáveis pela síntese da leucocidina de Panton-Valentine em nenhum dos grupos acompanhados. Não há diferença estatística significativa na incidência de genes de virulência (exoU ou exoS) nas cepas de P. aeruginosa isoladas de feridas tratadas com EGF ou com hidrogel. Em condições estáticas, o EGF estimula o crescimento de P. aeruginosa e inibe o crescimento de S. aureus, tanto quando se avaliam o crescimento de células planctônicas quanto em biofilme. Conclusão: O EGF pode ser considerado um fator de proteção contra a colonização de feridas crônicas por cepas de S. aureus ou de P. aeruginosa com capacidade de formação de biofilme. Sugere-se o desenvolvimento de novos estudos com a inclusão de maior número de participantes, para que se obtenha uma amostra que viabilize a validade externa dos resultados, bem como, para que sejam elucidados os mecanismos moleculares envolvidos nos resultados encontrados sobre a formação de biofilme.

Background: Chronic wounds are a health problem worldwide, especially diabetic wounds and venous ulcers. Epidermal growth factor (EGF) is a biomaterial of peptide origin that acts on the skin stimulating the angiogenesis and activating the fibroblasts, favoring, thus, the process of cicatrization. However, studies are required that address the microbiological evaluation of wounds treated with this product. Objective: To evaluate the colonization by S. aureus and P. aeruginosa in wounds of diabetic patients treated with epidermal growth factor (EGF) in comparison to those treated with 2% carboxymethylcellulose gel. Method: A prospective cohort study, carried out from the collection of biological wound material by sterile swab. The study's exposure was the use of EGF as a treatment. Laboratory analyzes included culture techniques for isolation of P. aeruginosa and S. aureus, MALDI-TOF mass spectrometry for species-level confirmation, antimicrobial susceptibility testing, polymerase chain reactions and assays for evaluation of the capacity of biofilm formation by the isolated strains. Results: Twenty-five patients were followed, of whom 11 were treated with hydrogel and 14 were treated with EGF. Patients had similar sociodemographic and clinical characteristics in both groups. 13 S. aureus strains (8 of hydrogel treated wounds and 5 of EGF treated wounds) and 15 P. aeruginosa strains (4 of hydrogel treated wounds and 11 of EGF treated wounds) were isolated. There is no statistically significant difference between antimicrobial resistance in S. aureus and P. aeruginosa strains isolated from EGF or hydrogel treated wounds. Despite this, three strains of MRSA and one strain of multidrug resistant P. aeruginosa were isolated. In relation to biofilm formation, without discriminating the species of microorganisms, 91.7% of the strains isolated from wounds treated with hydrogel were biofilm-forming, while in the treatment group only 50.0% of the strains were biofilm-forming. This difference is statistically significant, with p-value = 0.039 in Fisher's exact test, odds ratio (OR) = 11.0 (CI = 1.1-106.4) and relative risk (RR). = 1.83 (CI = 1.2-3.8). Thus, it can be said that there are 11 times more likely (or 83%) that strains of S. aureus or P. aeruginosa isolated from hydrogel-treated wounds form biofilm when compared to strains of these isolated wound species. treated with EGF. There is no statistical difference between the microbial load of P. aeruginosa and S. aureus on wounds treated with EGF or with hydrogel. Strains with genes responsible for the synthesis of Panton-Valentine leucocidin were not identified in any of the groups followed. There is no significant statistical difference in the incidence of virulence genes (exoU or exoS) in strains of P. aeruginosa isolated from wounds treated with EGF or with hydrogel. Under static conditions, EGF stimulates the growth of P. aeruginosa and inhibits the growth of S. aureus, both when evaluating planktonic cell growth and biofilm growth. Conclusion: EGF can be considered a protective factor against colonization of chronic wounds by S. aureus or P. aeruginosa strains with biofilm formation capacity. It is suggested the development of new studies with the inclusion of a larger number of participants, so as to obtain a sample that enables the external validity of the results, as well as to elucidate the molecular mechanisms involved in the results found about biofilm formation.

Água em elevada temperatura: é viável a sua aplicabilidade no controle do biofilme de equipo odontológico? / Water at high temperature: is its applicability for biofilm control of dental unit viable?

Na Odontologia, as linhas d'água de equipos odontológicos são substratos para a formação de biofilme e, consequentemente, dispersão dessa contaminação microbiana para água destinada ao tratamento odontológico. O objetivo desta pesquisa foi investigar a atividade antibiofilme da água em elevada temperatura contra Pseudomonas aeruginosa, visando à sua aplicabilidade em linhas d'água de equipos odontológicos para o controle dessa problemática. Trata-se de um estudo do tipo experimental/laboratorial in vitro. Alíquotas de 2mL de Tryptic Soy Broth com 1% do inóculo bacteriano padronizado (106UFC/mL) de P. aeruginosa (ATCC 27853) foram inoculadas em cada um dos poços de placas de poliestireno de 24 poços. Em seguida, fragmentos de linha d'água (FL) de 1cm (n=48) foram transferidos para os poços das placas. A incubação foi efetuada em estufa de agitação a 37°C por 24h em 80rpm. Decorrido o período de incubação, os FL foram enxaguados com 5mL de solução salina a 0,85% por três vezes para retirada das células planctônicas. Posteriormente, as amostras foram transferidas para duas placas de 24 poços contendo 2mL de água purificada do tipo II (osmose reversa) esterilizada em cada poço. Grupos experimentais com temperaturas e tempos de exposição diferentes foram avaliados: temperatura ambiente (controle) - (n=24) e a 60°C (n=24), e 30s (n=12) e 60s (n=12). As amostras dos FL foram transferidas para microtubos contendo 1mL de Tryptic Soy Broth e pérolas de vidro. Os tubos foram homogeneizados em agitador de tubos por 2min e, em seguida, alíquotas de 50µL in natura e diluídas (diluição decimal seriada até 10-5) foram semeadas em placas de Petri (60x15mm) com Cetrimide Agar. Após o período de incubação em estufa a 37°C por 24h, os números de unidades formadoras de colônia expressas por FL (UFC/FL) foram determinados. Além disso, as amostras dos FL foram fixadas, desidratadas, metalizadas e submetidas à análise por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV). Os dados coletados foram submetidos à análise estatística empregando-se os testes de Shapiro-Wilk e U de Mann-Whitney por meio do software BioEstat® (versão 5.3) e nível de significância a=5%. Houve diferença entre a comparação das medianas das cargas bacterianas expostas à água à temperatura ambiente (335.000UFC/FL) e a 60°C (2.030UFC/FL) por 30s (p=0,0005), com redução de 3logUFC/FL. Ainda, a comparação entre as medianas das cargas bacterianas expostas à água à temperatura ambiente (173.000UFC/FL) e a 60°C (1.780UFC/FL) por 60s mostrou diferença (p=0,0047), com redução de 2logUFC/FL. A MEV demonstrou a presença de biofilme em todas as amostras analisadas, entretanto nos FL expostos à água a 60°C, os bastonetes (P. aeruginosa) foram evidenciados em menor quantidade e com características morfológicas atípicas. Em conclusão, a exposição do biofilme de P. aeruginosa formado nos FL de equipo odontológico à água em elevada temperatura reduziu a carga e alterou a morfologia bacteriana, demonstrando possível aplicabilidade na biossegurança: controle de contaminação/infecção na Odontologia

In dentistry, dental unit waterlines were substrates for biofilm formation and, consequently, dispersion of this microbial contamination for distilled water to dental treatment. The objective of this study was to investigate water antibiofilm activity at high temperature against Pseudomonas aeruginosa, aiming at its applicability in dental unit waterlines for controlling this problem. It is an in vitro experimental/laboratory study. 2mL aliquots of Tryptic Soy Broth with 1% of standardized bacterial inoculum (106CFU/mL) of P. aeruginosa (ATCC 27853) were inoculated on each one of 24-well polystyrene plates. Next, fragments of waterline (FW) of 1cm (n=48) were transferred for plates wells. The incubation was carried out in an incubator shaker at 37°C for 24h at 80rpm. After the incubation period elapsed, the FW were flushed with 5mL of saline solution at 0.85% by three times for removing planktonic cells. Subsequently, the samples were transferred to two 24-well plates containing 2mL of type II purified water (reverse osmosis) sterilized in each well. Experimental groups with different temperatures and exposition times were evaluated: room temperature (control) - (n=24) and at 60°C (n=24), and 30s (n=12) and 60s (n=12). The FW samples were transferred to microtubes containing 1mL of Tryptic Soy Broth and glass beads. The tubes were homogenized in an orbital shaker for 2min and, following this, diluted in natura 50µL aliquots (serial decimal dilution up to 10-5) were seeded in Petri plates (60x15mm) with Cetrimide Agar. After the incubation period in chamber at 37°C for 24h, the numbers of colony-forming units expressed per FW (CFU/FW) were determined. Furthermore, the FW samples were fixed, dehydrated, metalized and submitted to analysis through scanning electron microscopy (SEM). The data collected were submitted to statistical analysis using Shapiro-Wilk and Mann-Whitney U tests through BioEstat® (version 5.3) software and a=5% significance level. There was a difference between the comparison of medians of bacterial loads exposed to water at room temperature (335,000CFU/FW) and at 60°C (2,030CFU/FW) for 30s (p=0.0005), with reduction of 3logCFU/FW. Moreover, the comparison between the medians of bacterial loads exposed to water at room temperature (173,000CFU/FW) and at 60°C (1,780CFU/FW) for 60s showed difference (p=0.0047), with a reduction of 2logCFU/FW. The SEM demonstrated biofilm presence on all analyzed samples, but on FW exposed to water at 60°C, the rods (P. aeruginosa) were evidenced in less quantity and with atypical morphological characteristics. In conclusion, the exposition of P. aeruginosa biofilm formed in dental unit FW to water at high temperature reduced the load and changed the bacterial morphology, demonstrating a possible applicability in biosafety: contamination/infection control in dentistry

Análise microbiológica de feridas tratadas com fator de crescimento epidérmico: estudo de coorte / Microbiological analysis of wounds treated with epidermal growth factor: cohort study

Introdução: O fator de crescimento epidérmico (EGF) é um biomaterial de origem peptídica que atua na pele estimulando a angiogênese e ativando os fibroblastos, favorecendo, assim, o processo de cicatrização. Porém, são necessários estudos que abordem a avaliação microbiológica de feridas tratadas com esse produto. Objetivo: Avaliar a colonização por S. aureus e P. aeruginosa em feridas de pacientes diabéticos tratadas com fator de crescimento epidérmico (EGF) em comparação àquelas tratadas com gel de carboximetilcelulose a 2%. Método: Estudo de coorte prospectivo, realizada a partir da coleta de material biológico de feridas por meio de swab estéril. A exposição do estudo foi o uso de EGF como tratamento. As análises laboratoriais incluiram técnicas de cultura para isolamento de P. aeruginosa e S. aureus a partir dos swabs, espectrometria de massas MALDI-TOF para confirmação ao nível de espécie, testes de suscetibilidade aos antimicrobianos, reações em cadeia da polimerase e ensaios para avaliação da capacidade de formação de biofilme pelas cepas isoladas. Resultados: Foram acompanhandos 25 pacientes, dos quais 11 foram tratados com hidrogel e 14 foram tratados com EGF. Os pacientes tinham características sociodemográficas e clínicas semelhantes em ambos os grupos. Foram isoladas 13 cepas de S. aureus (8 de feridas tratadas com hidrogel e 5 de feridas tratadas com EGF) e 15 cepas de P. aeruginosa (4 de feridas tratadas com hidrogel e 11 de feridas tratadas com EGF). Não há diferença estatística significativa entre a resistência aos antimicrobianos nas cepas de S. aureus e de P. aeruginosa isoladas de feridas tratadas com EGF ou com hidrogel. Apesar disso, foram isoladas três cepas de MRSA e uma cepa de P. aeruginosa multirresistente. Em relação à formação de biofilme, sem discriminar as espécies de microrganismos, tem-se que 91,7% das cepas isoladas de feridas tratadas com hidrogel foram formadoras de biofilme, enquanto no grupo tratamento, apenas 50,0% das cepas foram formadoras de biofilme. Tal diferença é significativa sob o ponto de vista estatístico, com p-valor=0,039 no teste Exato de Fisher, razão de chances (OR) = 11,0 (IC = 1,1-106,4) e risco relativo (RR) = 1,83 (IC = 1,2-3,8). Assim, pode-se dizer que há 11 vezes mais chances (ou uma probabilidade 83% maior) de que cepas de S. aureus ou P. aeruginosa isoladas de feridas tratadas com hidrogel sejam formadoras de biofilme quando comparadas a cepas dessas espécies isoladas de feridas tratadas com EGF. Não há diferença estatística entre a carga microbiana de P. aeruginosa e de S. aureus em feridas tratadas com EGF ou com hidrogel. Não foram identificadas cepas com genes responsáveis pela síntese da leucocidina de Panton-Valentine em nenhum dos grupos acompanhados. Não há diferença estatística significativa na incidência de genes de virulência (exoU ou exoS) nas cepas de P. aeruginosa isoladas de feridas tratadas com EGF ou com hidrogel. Em condições estáticas, o EGF estimula o crescimento de P. aeruginosa e inibe o crescimento de S. aureus, tanto quando se avaliam o crescimento de células planctônicas quanto em biofilme. Conclusão: O EGF pode ser considerado um fator de proteção contra a colonização de feridas crônicas por cepas de S. aureus ou de P. aeruginosa com capacidade de formação de biofilme. Sugere-se o desenvolvimento de novos estudos com a inclusão de maior número de participantes, para que se obtenha uma amostra que viabilize a validade externa dos resultados, bem como, para que sejam elucidados os mecanismos moleculares envolvidos nos resultados encontrados sobre a formação de biofilme.

Background: Chronic wounds are a health problem worldwide, especially diabetic wounds and venous ulcers. Epidermal growth factor (EGF) is a biomaterial of peptide origin that acts on the skin stimulating the angiogenesis and activating the fibroblasts, favoring, thus, the process of cicatrization. However, studies are required that address the microbiological evaluation of wounds treated with this product. Objective: To evaluate the colonization by S. aureus and P. aeruginosa in wounds of diabetic patients treated with epidermal growth factor (EGF) in comparison to those treated with 2% carboxymethylcellulose gel. Method: A prospective cohort study, carried out from the collection of biological wound material by sterile swab. The study's exposure was the use of EGF as a treatment. Laboratory analyzes included culture techniques for isolation of P. aeruginosa and S. aureus, MALDI-TOF mass spectrometry for species-level confirmation, antimicrobial susceptibility testing, polymerase chain reactions and assays for evaluation of the capacity of biofilm formation by the isolated strains. Results: Twenty-five patients were followed, of whom 11 were treated with hydrogel and 14 were treated with EGF. Patients had similar sociodemographic and clinical characteristics in both groups. 13 S. aureus strains (8 of hydrogel treated wounds and 5 of EGF treated wounds) and 15 P. aeruginosa strains (4 of hydrogel treated wounds and 11 of EGF treated wounds) were isolated. There is no statistically significant difference between antimicrobial resistance in S. aureus and P. aeruginosa strains isolated from EGF or hydrogel treated wounds. Despite this, three strains of MRSA and one strain of multidrug resistant P. aeruginosa were isolated. In relation to biofilm formation, without discriminating the species of microorganisms, 91.7% of the strains isolated from wounds treated with hydrogel were biofilm-forming, while in the treatment group only 50.0% of the strains were biofilmforming. This difference is statistically significant, with p-value = 0.039 in Fisher's exact test, odds ratio (OR) = 11.0 (CI = 1.1-106.4) and relative risk (RR). = 1.83 (CI = 1.2-3.8). Thus, it can be said that there are 11 times more likely (or 83%) that strains of S. aureus or P. aeruginosa isolated from hydrogel-treated wounds form biofilm when compared to strains of these isolated wound species. treated with EGF. There is no statistical difference between the microbial load of P. aeruginosa and S. aureus on wounds treated with EGF or with hydrogel. Strains with genes responsible for the synthesis of Panton-Valentine leucocidin were not identified in any of the groups followed. There is no significant statistical difference in the incidence of virulence genes (exoU or exoS) in strains of P. aeruginosa isolated from wounds treated with EGF or with hydrogel. Under static conditions, EGF stimulates the growth of P. aeruginosa and inhibits the growth of S. aureus, both when evaluating planktonic cell growth and biofilm growth. Conclusion: EGF can be considered a protective factor against colonization of chronic wounds by S. aureus or P. aeruginosa strains with biofilm formation capacity. It is suggested the development of new studies with the inclusion of a larger number of participants, so as to obtain a sample that enables the external validity of the results, as well as to elucidate the molecular mechanisms involved in the results found about biofilm formation.

Eficácia da limpeza manual versus automatizada para a remoção de Staphylococcus epidermidis aderido à superfície de instrumental cirúrgico em diferentes intervalos por contaminação experimental / Efficacy of manual versus automated cleaning for the removal of Staphylococcus epidermidis adhered to the surface of surgical instruments at different intervals due to experimental contamination

Ao longo de sua vida útil, instrumentais cirúrgicos são submetidos a sucessivos ciclos de contaminação e processamento. A presença em áreas de difícil acesso, como serrilha e cremalheira, assim como a adoção de práticas inadequadas, durante a prélimpeza e a limpeza, pode dificultar a remoção de resíduos a cada reúso, favorecendo a formação de biofilme. Amplamente isolados como contaminantes de instrumentais cirúrgicos, após o uso, Staphylococcus epidermidis são reconhecidos pela sua capacidade de formar biofilme em diferentes superfícies. Neste sentido, questiona-se: como os métodos de limpeza manual e automatizada atuam na remoção de S. epidermidis aderido à superfície de instrumental cirúrgico submetido à contaminação experimental por diferentes intervalos? Objetivou-se comparar dois protocolos de limpeza, manual e automatizada, quanto à capacidade de remoção de S. epidermidis da superfície de instrumental cirúrgico submetido a diferentes intervalos de contaminação. Tratou-se de uma pesquisa experimental, realizada no Laboratório de Microbiologia Oral e Anaeróbios do Instituto de Ciências Biológicas da Universidade Federal de Minas Gerais (ICB/UFMG) e no centro de microscopia da UFMG. Foram selecionadas pinças do tipo crile reta, para a análise de áreas com diferentes desafios ao processo de limpeza: superfície irregular (serrilha e cremalheira) e lisa (haste). Os corpos de prova foram contaminados por imersão em Triptical Soya Broth (TSB), contendo 106 UFC/mL de uma amostra clínica de S. epidermidis. A aderência bacteriana, logo após a contaminação e a capacidade de remoção desses microrganismos, submetidos à limpeza manual ou automatizada, foram verificadas depois de uma, duas, quatro, seis, oito e 12 horas. Os resultados foram avaliados por meio de cultura microbiológica e pela microscopia eletrônica de varredura (MEV). A análise dos resultados ocorreu pelo emprego de técnicas de estatística descritiva e análise de variância (ANOVA) em nível de confiança de 5%. No grupo submetido à contaminação, a carga bacteriana apresentou aumento, ao longo do tempo, variando entre 101­102 UFC/cm2 após uma hora e 104 UFC/cm2 em 12 horas. Verificou-se aderência bacteriana, depois de uma hora, com a formação de biofilme após duas horas e, em geral, um aumento na concentração de microrganismos nos tempos subsequentes. A carga microbiana foi reduzida em 1-2 log10 após limpeza manual e entre 1-3 log10 depois de limpeza automatizada, sendo significativa (p<0,05) em todos os fragmentos e tempos avaliados neste último grupo. A análise, por meio de MEV, demostrou a permanência de biofilme após ambos os métodos. Em geral, fragmentos de haste apresentaram menor carga microbiana, nos diferentes grupos avaliados, sendo essa diferença significativa (p<0,05) ao tempo de seis horas. Concluiu-se que S. epidermidis apresentou a capacidade de aderência rápida levando à formação de biofilme após duas horas de contato com o instrumental cirúrgico com carga bacteriana de 102 UFC/cm2. A limpeza automatizada foi mais efetiva que a limpeza manual, contudo nenhum dos métodos removeu o biofilme formado completamente. As condições de pré-limpeza, bem como a presença em áreas de difícil acesso, como cremalheira e serrilha, são fatores críticos à qualidade do processamento de instrumentais cirúrgicos.

Surgical instruments are subjected to successive contamination and processing cycles throughout their useful life. The presence of areas of difficult access, such as serration and rack, as well as the adoption of improper practices during pre-cleaning and cleaning, can make it difficult to remove residues after each use, favoring the formation of biofilm. Widely isolated as contaminants of surgical instruments after use, Staphylococcus epidermidis are recognized for their ability to form biofilm on different surfaces. In this sense, the question is: how the manual and automated cleaning methods perform on the removal of S. epidermidis adhered to the surface of surgical instruments submitted to experimental contamination for different intervals? We aimed at comparing two leaning protocols, manual and automated, regarding their capacity for removing S. epidermidis from the surface of surgical instruments submitted to different intervals of contamination. This was an experimental research conducted at the Oral and Anaerobic Microbiology Laboratory, ICB/UFMG and at the UFMG microscopy center. Straight crile tweezers were selected to analyze areas with different challenges to the cleaning process: uneven (serrated and rack) and smooth (rod) surface. The specimens were contaminated by immersion in Triptical Soya Broth (TSB), containing 106 CFU/mL of a clinical sample of S. epidermidis. The bacterial adherence and the removal capacity of these microorganisms, submitted to manual or automated cleaning, were verified after one, two, four, six, eight, and 12 hours. Results were evaluated by microbiological culture and scanning electron microscopy (SEM). The results were analyzed using descriptive statistics and analysis of variance (ANOVA) techniques at a level of 5% confidence. In the group subjected to contamination, the bacterial load increased over time, ranging from 101­102 CFU/cm2 after one hour to 104 CFU/cm2 within 12 hours. Bacterial adhesion was observed after one hour, with the formation of biofilm after two hours, and, in general, an increase in the concentration of microorganisms at subsequent times. The microbial load was reduced by 1-2 log10 after manual cleaning and between 1-3 log10 after automated cleaning and was considered significant (p<0.05) in all fragments and times evaluated in the last group. SEM analysis showed the permanence of biofilm after using both methods. In general, rod fragments presented lower microbial load during the evaluation period in the different groups evaluated, and this difference (p<0.05) was significant at six hours. In conclusion, the S. epidermidis presented fast adherence capacity and biofilm formation after two hours of contact with the surgical instruments with bacterial load of 102 CFU/cm2. The automated cleaning was more effective than manual cleaning. However, neither method completely removed the biofilm formed. Pre-cleaning conditions, as well as the presence of difficult access areas, such as serration and rack, are critical factors in the processing quality of surgical instruments.

Análise microbiológica e capacidade de formação de biofilme bacteriano em cepas de Pseudomonas Aeruginosa e Staphylococcus Aureus encontrados em úlceras venosas tratadas com plasma rico em plaquetas / Microbiological analysis and bacterial biofilm formation capacity in Pseudomonas Aeruginosa and Staphylococcus Aureus strains found in venous ulcers treated with platelet-rich plasma

Este estudo tem como objetivo analisar sinais de infecção nas úlceras venosas tratadas com Plasma Rico em Plaquetas (PRP), identificando a presença de Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa e sua capacidade de formação de biofilme. Método: Trata-se de coorte prospectiva tendo como campo de pesquisa o Ambulatório de Reparo de Feridas do Hospital Universitário Antônio Pedro (HUAP/UFF). Os pacientes foram alocados no grupo em uso do PRP associada a gaze com perolatum e no grupo controle em uso somente da gaze petrolatum pelo estudo de intervenção concomitante a este projeto. Estabeleceu-se a amostra de 36 participantes por grupo. A técnica de coleta de dados foi realizada por meio do exame clínico com dados de identificação do paciente, dados clínicos, descritivos da lesão e coleta do espécime clínico através do swab. A identificação microbiológica foi realizada por meio do MALDI-TOF e o perfil de suscetibilidade foi determinado pelo teste de disco-difusão seguindo os padrões do CLSI. Para a identificação de genes de virulência foi realizado a Reação em Cadeia da Polimerase. A capacidade de formação de biofilme foi analisada na superfície de placas de poliestireno. A Reação em Cadeia da Polimerase em tempo real (qPCR) foi realizada para avaliar a carga quantitativa microbiana das feridas. Resultados: Dos 36 pacientes do estudo, 18 foram alocados no grupo intervenção e 18 no grupo controle, deste total, no ínicio do tratamento, 19 pacientes apresentaram infecção na ferida. Foi identificada melhora da infecção na ferida ao final das 12 semanas tratamento no grupo intervenção (p=0,0078) e no grupo controle (p=0,01). Todavia, não foi identificada diferença significativa entre os grupos quando se compara a melhora de infecção intergrupos (PRP ou gaze petrolatum). De um total de 100 amostras oriundas dos swabs, foram encontradas 39 (39%) P. aeruginosa, sendo 22 (22%) do grupo intervenção e 17 (17%) do grupo controle e apenas 10 (10%) S. aureus foram detectados, sendo seis do grupo intervenção e quatro do grupo controle. Nos dois grupos da pesquisa, nas amostras que foram identificadas como P. aeruginosa, o gene exoU foi predominante. Quanto a capacidade de formação de biofilme em placa de microtitulação, todos os S. aureus identificados foram formadores, classificados como fracamente produtores. Com relação as cepas de P. aeruginosa todas foram formadoras, sendo 17 classificadas como fracamente produtoras de biofilme, 14 moderadamente produtoras e 8 fortemente produtoras de biofilme. Conclusão: Houve melhora de infecção na ferida nos grupos tratados com PRP e Gaze petrolatum; não houve diferença estatisticamente significante entre os microrganismos (P. aeruginosa e S. aureus) nos dois grupos do estudo acerca de maior resistência a antimicrobianos; os pacientes que possuíam os microrganismos que apresentaram capacidade forte para a formação de biofilme, em sua maioria, não possuíam infecção na ferida tanto no grupo tratado com PRP quanto com gaze petrolatum; não houve relação entre apresentar infecção e possuir maior carga microbiana na ferida em ambos os grupos.

This study aims to analyze the signs of infection in venous ulcers treated with Plaque Rich Plasma (PRP), identifying the presence of Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa and its biofilm formation capacity. Method: It is a prospective cohort having as research field the Wound Repair Ambulatory of Antônio Pedro University Hospital (HUAP / UFF). Patients were allocated to the group using PRP associated with gauze with perolatum and in the control group using only gaze petrolatum by the intervention study concomitant to this project. The sample of 36 participants was established by group. The data collection technique was performed through clinical examination with patient identification data, clinical data, descriptive of the lesion and collection of the clinical specimen through the swab. The microbiological identification was performed using MALDI-TOF and the susceptibility profile was determined by the disc-diffusion test following the CLSI standards. For the identification of virulence genes the Polymerase Chain Reaction was carried out. The capacity of biofilm formation was analyzed on the surface of polystyrene plates. The real-time Polymerase Chain Reaction (qPCR) was performed to evaluate the microbial quantitative load of the wounds. Results: Of the 36 patients in the study, 18 were allocated in the intervention group and 18 in the control group. Of this total, at the beginning of the treatment, 19 patients presented infection in the wound. Improvement in wound infection at the end of the 12 weeks treatment was identified in the intervention group (p = 0.0078) and in the control group (p = 0.01). However, no significant difference was identified between the groups when comparing improvement of intergroup infection (PRP or gauze petrolatum). From a total of 100 samples from the swabs, 39 (39%) P. aeruginosa were found, 22 (22%) from the intervention group and 17 (17%) from the control group and only 10 (10%) S. aureus were detected, six of the intervention group and four of the control group. In the two groups of the research, in the samples that were identified as P. aeruginosa, the exoU gene was predominant. As for the capacity of biofilm formation in microtiter plate, all identified S. aureus were formers, classified as poorly producing. Regarding the P. aeruginosa strains, all were formative, with 17 being classified as poorly biofilm producers, 14 moderately producing and 8 strongly biofilm producers. Conclusion: There was improvement of wound infection in the groups treated with PRP and Gaze petrolatum; there was no statistically significant difference between the microorganisms (P. aeruginosa and S. aureus) in the two groups of the study on greater antimicrobial resistance; patients who had microorganisms that had a strong capacity for biofilm formation did not have infection in the wound either in the PRP or gaze petrolatum group; there was no relation between presenting infection and having greater microbial load on the wound in both groups.

Cateter urinário: o tempo de exposição e calibre podem influenciar na formação de biofilme? / Catéter urinario: ¿el tiempo de exposición y calibre puede influir en la formación de biofilm? / Urinary catheter: can exposure time and gauge affect biofilm formation?

Resumo Objetivo: Avaliar a influência do tempo de exposição e calibre na formação de biofilme em cateteres urinários de Foley (CUFs). Método: Pesquisa in vitro com amostras de fragmentos de CUFs em látex siliconizado de diferentes calibres (n° 14 e n° 16 Frenchs). A urina artificial foi confeccionada, inoculada com bactérias-padrão Staphylococcus aureus (ATCC 25923) e Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) e incubada a 37 °C por 24 horas e 72 horas. As análises foram realizadas por meio de cultura (carga bacteriana) e microscopia eletrônica de varredura. Resultados: Não houve diferença na carga bacteriana dos biofilmes formados nas superfícies dos CUFs com relação aos diferentes calibres (p > 0,05). Por outro lado, o tempo de exposição (24 horas e 72 horas) foi o fator determinante para formação do biofilme de P. aeruginosa nos CUFs (p < 0,05). Conclusão: O tempo de exposição influenciou a formação do biofilme de P. aeruginosa nos CUFs, independentemente dos calibres.

Resumen Objetivo: Evaluar la influencia del tiempo de exposición y calibre en la formación de biofilm en catéteres urinarios de Foley (CUFs). Método: Investigación in vitro con muestras de fragmentos de CUFs en látex siliconizado de diferentes calibres (n ° 14 y n° 16 Frenchs). La orina artificial fue confeccionada, inoculada con bacterias estándar Staphylococcus aureus (ATCC 25923) y Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) e incubada a 37 °C durante 24 horas y 72 horas. Los análisis se realizaron por medio de cultivo (carga bacteriana) y microscopía electrónica de exploración. Resultados: No hubo diferencia en la carga bacteriana de los biofilmes formados en las superficies de los CUFs en relación con los diferentes calibres (p> 0,05). Por otro lado, el tiempo de exposición (24 horas y 72 horas) fue el factor determinante para la formación del biofilm de P. aeruginosa en los CUFs (p <0,05). Conclusión: El tiempo de exposición influenció la formación del biofilm de P. aeruginosa en los CUFs, independientemente de los calibres.

Abstract Objective: To assess the effects of exposure time and gauge of Foley catheters in biofilm formation. Method: In vitro study with samples of Foley catheter fragments made of siliconized latex of different gauges (#14 and #16 French gauge). Artificial urine was produced, which was inoculated with Staphylococcus aureus (ATCC 25923) and Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) standard bacteria, incubated at 37 °C for 24 hours and 72 hours. The material was analyzed by means of culture (bacterial load) and scanning electron microscopy. Results: There was no difference in bacterial load of biofilms formed in Foley catheter surfaces with regard to different gauges (p > 0.05). On the other hand, exposure time (24 hours and 72 hours) was a determining factor for P. aeruginosa biofilm formation in Foley catheters (p < 0.05). Conclusion: Exposure time had an effect on P. aeruginosa biofilm formation in Foley catheters, regardless of gauges.

Qualidade da água em clínica odontológica na perspectiva microbiológica: uma proposta de intervenção / Water quality in a dental clinic in the microbiological perspective: a proposal of intervention

Na odontologia, o biofilme formado nas linhas d'água de equipos odontológicos pode disseminar a contaminação microbiana na água. O objetivo desta pesquisa foi investigar a contaminação microbiana da água de abastecimento e de equipos odontológicos antes e após a implementação de um protocolo para melhoria e manutenção da qualidade microbiológica da água de equipos odontológicos, bem como desenvolver produtos antibiofilme com possível aplicabilidade nas linhas d'água. A carga microbiana da água de 27 torneiras e equipos (reservatórios, seringas tríplice e alta rotação) de uma clínica odontológica foi avaliada por meio do sistema Petrifilm(TM) (bactérias aeróbias totais e fungos) e meios de cultura convencionais (enterobactérias e Legionella spp.) em duas etapas distintas, sendo a segunda análise realizada após a implementação de um protocolo para melhoria e manutenção da qualidade microbiológica da água dos equipos. Ainda, as atividades antibacteriana (concentração inibitória mínima - hipoclorito de sódio, ácido cítrico, bicarbonato de sódio, cloreto de sódio, dodecil sulfato de sódio, peróxido de hidrogênio, polissorbato 20 e quitosana) e antibiofilme (biomassa total e viabilidade celular) foram determinadas in vitro a partir de substâncias e produtos com possível aplicabilidade na desinfecção de linhas d'água de equipos. As amostras de água das torneiras apresentaram carga bacteriana dentro do parâmetro estabelecido pela legislação brasileira, no entanto, as seringas tríplices e os alta rotação não. A implementação do protocolo para manutenção da qualidade microbiológica da água dos equipos demonstrou uma redução nas cargas bacteriana e fúngica apenas nos alta rotação. Enterobactérias e Legionella spp. não foram isoladas das amostras de água das torneiras e dos equipos. De acordo com a concentração inibitória mínima, o ácido cítrico, bicarbonato de sódio, cloreto de sódio, hipoclorito de sódio e peróxido de hidrogênio demonstraram as melhores atividades antibacterianas. As melhores atividades antibiofilme (biomassa total) foram do peróxido de hidrogênio a 5% (E. coli e P. aeruginosa), ácido cítrico a 30% (P. aeruginosa) e bicarbonato de sódio a 30% (S. aureus). Os produtos (Wanitox A e Wanitox B) desenvolvidos apresentaram atividade antibiofilme (viabilidade celular) contra a E. coli e S. aureus. Assim, os produtos desenvolvidos nesta pesquisa apresentaram possível aplicabilidade no enfrentamento do biofilme nas linhas d'água de equipos odontológicos, que permanece como um dos grandes desafios na odontologia. Ainda, pesquisas adicionais são necessárias para o aperfeiçoamento e aplicabilidade destes produtos

In dentistry, biofilm formed on dental unit waterlines can disseminate microbial contamination in water. The objective of this research was to determine the microbial contamination of water from supplies and dental units before and after the implementation of a protocol for improvement and maintenance of microbiological water quality of water from dental units as well as to develop antibiofilm products with possible applicability in waterlines. The microbial load of water from 27 taps and dental units (reservoirs, air-water syringes and high-speed turbines) in a dental clinic was evaluated through a Petrifilm(TM) system (total aerobic bacteria and fungi) and conventional culture mediums (enterobacteria and Legionella spp.) in two distinct stages, being the second analysis performed after the implementation of a protocol for improvement and maintenance of microbiological water quality of water from dental units. Moreover, the antibacterial (minimum inhibitory concentration - sodium hypochlorite, citric acid, sodium bicarbonate, sodium chloride, sodium dodecyl sulfate, hydrogen peroxide, polysorbate 20 and chitosan) and antibiofilm (total biomass and cell viability) activities were determined in vitro from substances and products with possible applicability in disinfection of dental unit waterlines. The water samples from taps presented bacterial load within the parameter established by Brazilian legislation; however, air-water syringes and high-speed turbines did not. The protocol implementation for maintenance of microbiological water quality of water from dental units showed a decrease on bacterial and fungal loads only on high-speed turbines. Enterobacteria and Legionella spp. were not isolated from water samples from taps and dental units. According to minimum inhibitory concentration, citric acid, sodium bicarbonate, sodium chloride, sodium hypochlorite and hydrogen peroxide showed the best antibacterial activities. The best antibiofilm activities (total biomass) were from 5% hydrogen peroxide (E. coli and P. aeruginosa), 30% citric acid (P. aeruginosa) and 30% sodium bicarbonate (S. aureus). The developed products (Wanitox A and Wanitox B) showed antibiofilm activity (cell viability) against E. coli and S. aureus. Thus, the products developed in this research presented a possible applicability in confrontation with biofilm on dental unit waterlines, and this remains as a major challenge in dentistry. Besides, additional researches are necessary for enhancement and applicability of these products

Biomateriais com aplicabilidade na ortopedia: avanços e desafios na área da infectologia / Biomaterials with applicability in orthopedics: advances and challenges in the infectology area

O controle na formação do biofilme em implantes e próteses ortopédicas continua sendo um dos grandes desafios acerca da infeção relacionada aos dispositivos na área da saúde. O objetivo desta pesquisa foi investigar biomateriais com aplicabilidade na ortopedia, visando os avanços e enfrentamentos dos desafios na área da infectologia. Uma revisão integrativa foi realizada a respeito da formação de biofilme em biomateriais de próteses de quadril com a finalidade de contribuir com as medidas de prevenção e controle aos agravos infecciosos. Além disso, a formação in vitro do biofilme em função dos biomateriais (titânio e titânio revestido com biovidro F18), microrganismos (Staphylococcus epidermidis e Candida albicans) e tempos de incubação (2, 4 e 8 horas) foi avaliada por microscopia de fluorescência. A revisão integrativa foi realizada no portal PubMed da National Library of Medicine, bem como nas bases Cochrane, Embase, Web of Science, CINAHL e LILACS com a inclusão de estudos primários sobre a temática, publicados online até novembro de 2017, em português, inglês e espanhol. Na fase experimental / laboratorial, biofilmes de S. epidermidis (ATCC 12228) e C. albicans (ATCC 90028) foram formados em corpos de prova de titânio e titânio revestido com biovidro F18 após 2, 4 e 8 horas de incubação a 37?C sob agitação orbital. As áreas das imagens dos corpos de prova, em porcentagem, recobertas com biofilme (células vivas) foram avaliadas por microscopia de fluorescência. Os dados coletados foram submetidos à análise estatística empregando-se os testes de normalidade Shapiro Wilk, U de Mann-Whitney e t de Student por meio do software IBM SPSS Statistics (versão 25) e nível de significância ?=5%. Na revisão integrativa, os resultados demonstraram que dos 16 estudos primários, 81,25% eram pesquisas experimentais in vitro e que novos biomateriais foram desenvolvidos para prevenir a formação de biofilme. Com relação à fase experimental / laboratorial, houve menor formação de biofilme por S. epidermidis e C. albicans (p<0,001) no titânio revestido com biovidro F18 do que no titânio, após 8 horas de incubação. Entretanto, houve maior formação de biofilme por S. epidermidis e C. albicans após 8 horas do que em 2 horas de incubação, tanto no titânio quanto no titânio revestido com biovidro F18 (p<0,05). Em suma, a revista da literatura mencionou o desenvolvimento de biomateriais novos para prevenir a formação de biofilme. Na fase laboratorial / experimental, o titânio revestido com biovidro F18 apresentou atividade antibiofilme em comparação com o titânio, e os tempos de incubação de 2 para 8 horas aumentaram a formação de biofilme em ambos os biomateriais. Ainda, pesquisas futuras acerca do biovidro F18 fundamentadas nos aspectos físicoquímicos, bioquímicos e microbiológicos são importantes para a elucidação dos mecanismos de ação relacionados ao controle dos biofilmes

The control of biofilm formation on implants and orthopedic prostheses still is one of the major challenges concerning infection related to devices in the health field. The objective of this research was to investigate biomaterials with applicability in orthopedics, aiming for advances and facing challenges in the infectology area. An integrative review was performed regarding biofilm formation on hip prosthesis biomaterials in order to contribute to the preventive and infection control measures. Moreover, the in vitro biofilm formation according to biomaterials (titanium and titanium coated with F18 bioglass), microorganisms (Staphylococcus epidermidis and Candida albicans) and incubation times (2, 4 and 8 hours) was evaluated by fluorescence microscopy. The integrative review was performed on PubMed portal from National Library of Medicine as well as on Cochrane, Embase, Web of Science, CINAHL and LILACS databases with the inclusion of primary studies about the topic, published online up until November 2017, in Portuguese, English and Spanish. In the experimental / laboratory step, S. epidermidis (ATCC 12228) and C. albicans (ATCC 90028) biofilms were formed on proof bodies of titanium and titanium coated with F18 bioglass after 2, 4 and 8 hours of incubation at 37?C under orbital shaking. The image areas of proof bodies, in percentage, coated with biofilm (living cells) were evaluated by fluorescence microscopy. The data collected were submitted to statistical analysis using normality tests Shapiro Wilk, U from Mann-Whitney and t from Student through IBM SPSS Statistics (version 25) software and significance level ?=5%. In the integrative review, the results showed that among 16 primary studies, 81.25% were in vitro experimental studies and that new biomaterials were developed to prevent biofilm formation. Regarding experimental / laboratory step, there was less biofilm formation by S. epidermidis and C. albicans (p<0.001) on titanium coated with F18 bioglass than on titanium, after 8 hours of incubation. However, there was more biofilm formation by S. epidermidis and C. albicans after 8 hours than in 2 hours of incubation, both on titanium and on titanium coated with F18 bioglass (p<0.05). In sum, the literature review mentioned the development of new biomaterials to prevent biofilm formation. In laboratory / experimental step, titanium coated with F18 bioglass presented antibiofilm activity in comparison with titanium, and the incubation times of 2 to 8 hours increased biofilm formation on both materials. Besides, future studies about F18 bioglass based on physicochemical, biochemical and microbiological aspects are important for the elucidation of action mechanisms related to biofilms control

Cuidados bucais em pacientes ventilados mecanicamente: conhecimento de enfermeiros de um hospital escola / Oral care in mechanically ventilated patients: knowledge of nurses from a school hospital

Objetivo: Avaliar o conhecimento acerca dos cuidados bucais realizados por enfermeiros a pacientes ventilados mecanicamente. Método: Estudo transversal, realizado em um hospital escola de Goiânia/Goiás. A coleta de dados deu-se por meio de questionário estruturado. Resultados: Os enfermeiros conhecem as medidas recomendadas sobre higiene bucal. Os fatores dificultadores encontrados foram a falta de pessoal (21,7%), falta de tempo (16,7%) e trabalhos burocráticos (15%). Contudo ainda existem lacunas no que se refere a produtos e materiais utilizados na higiene bucal. Conclusão: As Lacunas e os fatores dificultadores sinalizados nesse estudo merecem reflexão, como forma de avaliar a qualidade do cuidado oferecido.

Objective: To evaluate the knowledge about oral care performed by nurses in mechanically ventilated patients. Methods: a cross-sectional study, conducted in a teaching hospital of Goiania/Goias. The data collection was performed by means of a structured questionnaire. Results: The nurses know the measures recommended on oral hygiene. The complicating factors found were the lack of personnel (21.7%), lack of time (16.7%) and work on tape (15%). However there are still gaps in relation to products and materials used in oral hygiene. Conclusion: The gaps and the factors complicating factors indicated in this study deserve consideration, as a means of evaluating the quality of care offered.

Objetivo: Evaluar el conocimiento sobre el cuidado bucal realizadas por enfermeras en pacientes ventilados mecánicamente. Métodos: Estudio transversal, realizado en un hospital de Goiania y Goias. La recolección de datos se realizó por medio de un cuestionario estructurado. Resultados: Las enfermeras saben las medidas recomendadas en la higiene bucal. Los factores encontrados fueron la falta de personal (21,7%), la falta de tiempo (16,7%) y trabajar en la cinta (15%). Sin embargo todavía hay lagunas en relación con los productos y los materiales utilizados en la higiene bucal. Conclusión: Las brechas y los factores factores indicados en este estudio merecen consideración, como medio de evaluar la calidad de la atención ofrecida.

Prevenção da formação de biofilmes em marcapassos artificiais: é viável? / Prevention of biofilm formation on artificial pacemakers: is it feasible?

Resumo Objetivo: Identificar os agentes antimicrobianos utilizados na prevenção da formação de biofilme em marcapassos artificiais. Métodos: Revisão da literatura para responder a seguinte questão: "Quais agentes antimicrobianos são usados para prevenir a formação de biofilmes em marcapassos artificiais?" As bases de dados PubMed, Web of Science, Scopus, Science Direct, Cochrane, CINAHL, Embase e LILACS foram consultadas em todos os idiomas sem restrição de tempo. Resultados: A amostra final apresentou cinco estudos primários, sendo a maioria experimental. As investigações identificaram agentes com potencial para a redução ou inibição da formação de biofilmes em marcapassos. Destacou-se a associação de agentes físico-químicos e farmacológicos aos agentes antimicrobianos. Conclusão: A prevenção da formação de biofilmes em marcapassos é viável. Os agentes mais promissores para obter este efeito foram a rifampicina, AIGIS®, a formulação aquosa neobactrim e a cobertura com trimetilsilano e oxigênio em superfícies tratadas com plasma.

Abstract Objective: To identify the antimicrobial agents used in the prevention of biofilm formation on artificial pacemakers. Methods: Literature review, in order to answer the following question: "What antimicrobial agents are applied to prevent biofilm formation on artificial pacemakers?" The databases PubMed, Web of Science, Scopus, Science Direct, Cochrane, CINAHL, Embase, and LILACS were used in all languages and without time restriction. Results: The final sample consisted of five primary studies, mostly experimental laboratory ones. The investigations identified agents with promising potential for reduction or inhibition of biofilm formation on pacemakers. An association between physical-chemical agents and pharmacological antimicrobials was highlighted. Conclusion: Prevention of biofilm formation on pacemakers is feasible. Among the agents that stood out were rifampicin, AIGIS®, aqueous neobactrim formulation, and a plasma coating using a combination of trimethylsilane and oxygen for coating deposition.

Indicadores microbiológicos e físico-químico no reprocessamento de endoscópios e as interfaces de monitoramento - Brasil/Austrália / Microbial and physical-chemical indicators on endoscope reprocessing and monitoring interface - Brazil/Australia

As dificuldades do reprocessamento dos endoscópicos gastrointestinais, o risco de contaminação e os casos de infecções representam desafios amplamente conhecidos na comunidade cientifica. Neste sentido, investigou-se o reprocessamento de endoscópios gastrointestinais subsidiado nos níveis de sujidade, contaminação microbiana e presença de biofilme. Trata-se de um experimento laboratorial realizado em três fases por meio da bioluminescência com adenosina trifosfato (ATP) para avaliação do nível de sujidade; polimerase chain reaction (PCR) para carga bacteriana e cultura microbiana para determinação do nível de contaminação. Ainda, avaliou-se as superfícies internas de canais de endoscópios por microscopia eletrônica de varredura (MEV) quanto à presença de biofilme. A análise estatística dos dados foi subsidiada em medidas de tendência central, testes de Man-Whitney, Wilcoxon e Spearman, p<0,05, por meio do software IBM SPSS Statistics versão 23.0. A avaliação de 99 endoscópios antes e após limpeza manual demonstrou a eficácia do processo na redução de sujidade (p<0,001) e contaminação microbiana (p=0,03), inclusive com baixo percentual da amostra com micro-organismos viáveis. Dos 75 endoscópios avaliados após o reprocessamento evidenciou-se uma redução do nível de sujidade (todos com <50URL, interna e externamente); entretanto a presença de carga bacteriana foi de 3log de bactéria/mL e 10,6% de positividade das culturas. Os micro-organismos isolados dos lavados de endoscópios após o reprocessamento foram Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus hominis, Staphylococcus capitis, Roseomonas gilardii e Micrococcus luteus. Na avaliação dos canais de biópsia de endoscópios provenientes do Brasil observou-se maior contaminação do que os da Austrália (p<0,001). Todos os canais apresentaram biofilme e danos em suas superfícies, entretanto as amostras brasileiras apresentaram particularidades, como, presença de hemácias, neutrófilos e fungos. Assim, observou-se que apesar da baixa carga microbiana nos endoscópios há o risco potencial de infecção cruzada associado ao biofilme, ameaçando a qualidade e segurança do reprocessamento. Adiciona-se a necessidade de avanços tecnológicos e científicos contra o biofilme na prática do reprocessamento de endoscópios

The difficulties on gastrointestinal endoscope reprocessing, contamination risk and outbreaks are a recognized challenge in science. It was investigated gastrointestinal endoscope reprocessing for dirtiness, contamination level and presence of biofilm. Laboratorial experiment performed in three phases using adenosine triphosphate (ATP) bioluminescence for dirtiness evaluation; polymerase chain reaction (PCR) for bacterial load and microbial culture for contamination level evaluation. In addition, it was evaluated biofilm on endoscope channels internal surfaces by scanning electron microscopy (SEM). Statistics analysis was performed by descriptive analysis, ManWhitney, Wilcoxon and Spearman tests, p<0,05, using IBM SPSS Statistics versão 23.0. Before and after cleaning analysis of 99 endoscopes showed it efficacy on reducing dirtiness (p<0,001) and microbial contamination level (p=0,03), including a small percentage of culturable microorganism. From 75 endoscopes tested after reprocessing demonstrated dirtiness level reduction (all samples <50RUL, from internal and external area); but, also, presence of bacterial load of 3 log of bacteria/mL and 10,6% of culture positive. The microorganisms isolated from endoscope flush after reprocessing were Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus hominis, Staphylococcus capitis, Roseomonas gilardii and Micrococcus luteus. Endoscope biopsy channel analysis showed that samples from Brazil had higher contamination level than the ones from Australia (p<0,001). All channels analyzed presented biofilm and damage on their surfaces, however Brazilian samples showed particularities, like, blood cells, neutrophils and fungus. So, ever with low microbial load on endoscopes there is a potential risk of crossinfection associated with biofilm, compromising reprocessing quality and safety. Additionally, there´s the need of scientific and technologic improvement on endoscope reprocessing against biofilm

Biofilme e feridas crônicas: reflexões para o cuidado de enfermagem / Biofilm and chronic wound: reflections for nursing care

Objetiva-se refletir sobre o tema biofilme e ferida crônica para o cuidado de enfermagem. Estudo teórico-reflexivo, no qual os dados foram baseados em pesquisa na base de dados Scientific Electronic Library Online (SciELO) e PubMed, no período de 2010 à 2015, utilizando-se os descritores infecção, biofilmes e cicatrização de feridas. Os resultados apresentaram o crescimento microbiano em feridas crônicas é uma preocupação na prática clínica e a presença do biofilme prejudica o processo de cicatrização. O biofilme obtém nutrientes do plasma e do exsudato presentes no leito da ferida, e regula o metabolismo, a virulência e motilidade pela liberação e detecção de moléculas denominadas de quorum sensing. Abordagens no tratamento de feridas crônicas com foco no biofilme consistem na avaliação das características da ferida e na utilização de métodos de desbridamento para remoção da necrose e do esfacelo. Concluí-se que a limpeza do leito da ferida e o uso de antimicrobianos contribuem para o controle da carga microbiana, mas a administração destes produtos requer uma avaliação criteriosa. Novos métodos de diagnóstico para o controle do biofilme são necessários com vistas à prevenção, ao tratamento e cura das lesões em menor tempo

The aim is to reflect on biofilms in chronic wound for nursing care. A theoretical and reflective study based on Scientific Electronic Library Online (SciELO) and PubMed database, on the period 2010 to 2015. The used descriptors were infection, biofilms and wound healing. The results showed the microbial growth in chronic wounds is a concern in a clinical practice, and the presence of biofilm harms the healing process. The biofilm obtains plasma and exudate nutrients found in the wound bed, and regulates metabolism, virulence and motility by releasing and detecting molecules named quorum sensing. Approaches on treatment of chronic wounds focused on biofilm consist on the evaluation of the wound characteristics and on the usage of debridement methods to remove necrotic tissue and slough. It concludes that cleaning the wound bed help on controlling microbial load, but the usage of antimicrobial agents is also an expedient currently employed to control biofilm. The search for new diagnostic methods and biofilm control is necessary in order to prevent, to treat and to heal the wound in lesser time