Uso de ribavirina en virus distintos de la hepatitis C. Una revisión de la evidencia / Use of ribavirin in viruses other than hepatitis C. A review of the evidence

La ribavirina es una molécula con actividad antiviral sobre diferentes virus. Ha encontrado su hueco en la práctica clínica de forma casi exclusiva para el tratamiento del virus de la hepatitis C, pero existen otras enfermedades que podrían beneficiarse de su empleo. Su disponibilidad para administración por vía oral, por vía intravenosa e inhalada es una característica beneficiosa. En este trabajo se realiza una revisión de las indicaciones en las principales agencias del medicamento (española, europea y americana), así como de otras posibles indicaciones, principalmente sobre fiebres hemorrágicas y coronavirus

Ribavirin is a molecule with antiviral activity against different viruses. In clinical practice, it has made its niche almost exclusively for the treatment of the hepatitis C virus. However, there are other diseases in which it could be of benefit and it has the advantage of being suitable for oral, intravenous and inhaled administration. We conducted a review of the indications of the main drug agencies (Spanish, European and American) and other possible indications, mainly haemorrhagic fevers and coronavirus

Evidence for respiratory viruses interactions in asymptomatic preschool-aged children

Aim: To prospectively evaluate interferences between viruses of the upper respiratory tract in asymptomatic preschool children. Methods: Nasal-pharyngeal swabs from 233 preschool aged children were prospectively collected over four consecutive time periods, during one school year. The samples were tested using a RT-PCR DNA/RNA microarray system for nine respiratory viruses. Results: Respiratory syncytial virus (RSV) was a predictor of the presence of influenza virus (INFL) (OR: 9.12, CI: 1.52-54.75, p = 0.016), and similarly, INFL predicted the presence of RSV (OR: 4.01, CI: 1.14-14.16, p = 0.030). Also, rhinovirus (RV) was a predictor of adenovirus (ADV) presence (OR: 3.66, CI: 1.10-12.14, p = 0.034), and similarly, ADV predicted the presence of RV (OR: 4.05, CI: 1.02-16.05, p = 0.046). No other significant associations between viruses were observed. Conclusion: Our results indicate that respiratory viruses found in carrier stage in asymptomatic children may interact with other viruses and even facilitate their settling in the upper respiratory tract. The pathophysiological role of these interactions is not yet clear

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ADenoVirus Initiative Study in Epidemiology (ADVISE): resultados de un estudio epidemiológico multicéntrico en España / ADenoVirus Initiative Study in Epidemiology (ADVISE): Results of a multicentric epidemiology study in Spain

Objetivo: Estudio epidemiológico, observacional, no intervencionista, cuya finalidad es determinar las características clínicas y la frecuencia de la conjuntivitis adenovírica diagnosticada con AdenoPlus® en pacientes que presentaban signos y síntomas de conjuntivitis aguda, así como establecer la seguridad de dicho test. Método: Este trabajo presenta los datos recogidos de los 386 pacientes incluidos en España. Los pacientes debían presentar signos o síntomas de conjuntivitis aguda de ≤ 7 días de evolución. La edad mínima para participar era de 1 año. Se excluyeron los pacientes ya tratados con diversos fármacos (antivíricos tópicos, esteroides tópicos o inmunomoduladores). Se utilizó un cuestionario estandarizado para recoger los datos del paciente y los resultados del test. Resultados: Veintidós centros reclutaron 386 pacientes, de los cuales 329 fueron analizados. El porcentaje de «AdenoPlus ® positivo» fue del 36,2% (119/329). En el 84,1% de casos los investigadores consideraron que la conjuntivitis era de origen vírico, pero solo el 50,3% de ellos vio su criterio clínico confirmado por el test. Los pacientes con resultado positivo a adenovirus tendían a presentar más signos y síntomas comparados con el resto de pacientes. Conclusiones: Ningún signo ni síntoma puede considerarse patognomónico de la enfermedad, dificultando el diagnóstico por parte del clínico. El test AdenoPlus® es una prueba de inmunoanálisis rápida para la detección de adenovirus directamente de secreción lagrimal, y puede ser una herramienta útil para ayudar en el diagnóstico diferencial precoz en pacientes con signos y síntomas de conjuntivitis con una evolución de 7 días o menos (AU)

Objective: Non-interventional, observational, epidemiology study to assess clinical characteristics and frequency of adenovirus conjunctivitis diagnosed by AdenoPlus® in patients who presented with signs and symptoms of acute conjunctivitis. Safety aspects during use of the test were analyzed as well. Method: This analysis presents the data obtained from the 386 patients enrolled in Spain. Patients had to present with acute signs and symptoms of conjunctivitis ≤ 7days. The minimum age was 1 year old. Patients who had already used local antiviral therapies, topical steroids or immuno-modulators were not allowed to enter the study. A standardized questionnaire was used to collect patient's ocular history and test results. Results: A total of 386 patients were recruited in 22 sites, being analyzed 329 patients. Among them, the percentage of "AdenoPlus® positive" was 36,2% (119/329). Before the test was performed, in 84,1% of the cases, investigators believed that the conjunctivitis was of viral origin but only 50,3% of the investigators had their clinical assessment confirmed by the test. Patients who tested positive for adenoviral conjunctivitis presented higher percentages of signs and symptoms than the rest of the patients. Conclusions: None of the signs or symptoms could be qualified as pathognomonic of the disease, being difficult for the clinicians to perform an accurate diagnosis. AdenoPlus® test is an antigen based immunoassay test that detects the presence of adenovirus directly from tears, and it can be an useful tool to help early differential diagnosis in patients with conjunctivitis signs and symptoms lasting for less than or equal to 7 days (AU)

Rotavirus y otros virus productores de gastroenteritis aguda en la infancia / Rotavirus and other viruses causing acute childhood gastroenteritis

La gastroenteritis aguda es una de las enfermedades máscomunes y que afecta a los niños de todo el mundo. Losvirus se reconocen hoy día como una de las principalescausas de esta infección, particularmente en la infancia.Desde que se describiera el virus Norwalk por primera vezcomo causa de gastroenteritis, se ha ido incrementandoprogresivamente el número de virus asociados a estaenfermedad. Los rotavirus son la primera causa de diarreagrave en niños menores de 5 años y los astrovirus,calicivirus y adenovirus entéricos son también agentesetiológicos importantes de la enfermedad. Otros virus,como los torovirus, coronavirus, picobirnaviruses, virusAichi o los bocavirus humanos, también se han implicadoen la etiología de la diarrea aguda. La vacunación frente alos rotavirus constituye, hoy día, la mejor estrategia paraprevenir los casos graves de diarrea y reducir la mortalidadproducida por estos virus(AU)

Acute gastroenteritis is one of the most common diseases,affecting children worldwide. Viruses are recognized as amajor cause of this disease, particularly in children. Sincethe Norwalk virus was identified as a cause ofgastroenteritis, the number of viral agents associated withdiarrheal disease in humans has progressively increased.Rotavirus is the most common cause of severe diarrhea inchildren under 5 years of age. Human astroviruses,caliciviruses and enteric adenovirus are also importantetiologic agents of acute gastroenteritis. Other virusessuch as toroviruses, coronaviruses, picobirnaviruses, Aichivirus and human bocavirus are increasingly beingidentified as causative agents of diarrhea. Vaccinationagainst rotavirus could prevent cases of severe diarrheaand reduce the mortality attributable to this disease(AU)

Aplicación de los métodos moleculares al diagnóstico y el estudio epidemiológico de las infecciones respiratorias causadas por virus / Application of molecular methods in the diagnosis and epidemiological study of viral respiratory infections

Hasta la fecha se han identificado más de 200 virus pertenecientes a 6 familias taxonómicas diferentes asociados con la infección del tracto respiratorio humano. La utilización generalizada de métodos moleculares en los laboratorios de microbiología clínica no sólo ha aportado grandes ventajas al diagnóstico de estas infecciones, sino también está permitiendo profundizar en el conocimiento de la enfermedad y el comportamiento epidemiológico de los virus causantes. Esta tecnología incrementa de manera notable el rendimiento de detección de virus en las muestras respiratorias, debido a su elevada sensibilidad en comparación con las técnicas clásicas y a la posibilidad de identificar virus no cultivables o de crecimiento fastidioso en las líneas celulares habituales, lo que permite realizar el diagnóstico etiológico con mayor rapidez. Sin embargo, también comporta algunos inconvenientes, como son detectar virus que se encuentran colonizando la mucosa respiratoria de personas asintomáticas, o en secreciones de pacientes que ya se han recuperado de una infección pasada, a consecuencia de excreción prolongada de éstos. La secuenciación de los productos obtenidos en la reacción de amplificación genómica permite caracterizar de forma adicional los virus detectados mediante su genotipado, realizar estudios de epidemiología molecular e identificar resistencias a determinados antivirales, por citar sólo algunos ejemplos(AU)

To date, more than two hundred viruses, belonging to six different taxonomic families, have been associated with human respiratory tract infection. The widespread incorporation of molecular methods into clinical microbiology laboratories has not only led to notable advances in the etiological diagnosis of viral respiratory infections but has also increased insight into the pathology and epidemiological profiles of the causative viruses. Because of their high sensitivity, molecular techniques markedly increase the efficiency of viral detection in respiratory specimens, particularly those that fail to propagate successfully in common cell cultures, thus allowing more rapid etiologic diagnosis. However, there are also some disadvantages in the use of these new technologies such as detection of viruses that merely colonize the respiratory tract of healthy people, or those found in the nasopharyngeal secretions of patients who have recovered from respiratory infections, due to longterm viral shedding, when the viruses are unlikely to act as pathogens. Additionally, sequencing of the amplification products allows further characterization of detected viruses, including molecular epidemiology, genotyping, or detection of antiviral resistance, to cite only a few examples(AU)

Protective immunization against murine cytomegalovirus infection using adenoviruses and poxviruses expressing hepatitis B virus chimeras

Recombinant adenoviruses, poxviruses, and plasmid DNA vaccines encoding different hepatitis B virus (HBV)/murine cytomegalovirus (MCMV) protein chimeras were used to immunize mice. Processing of the chimeras resulted in presentation of a protective Ld/CD8+ T-cell epitope of the immediate early 1 protein pp89 (IE1 pp89) of MCMV to the immune system. Different levels of immunogenicity were observed depending on: (i) the type of viral vector used, (ii) whether the antigens were included in the cellular secretion pathway, and (iii) the location of the protective epitope within the chimeric protein. An adenovirus expressing a secretory HBV core protein with the MCMV epitope in its C-terminus induced the highest immune response. When the most immunogenic adenovirus and vaccinia virus were used in a heterologous prime-boost immunization protocol, even higher levels of epitope-specific T cells were obtained. Furthermore, responses were protective against a challenge with MCMV, inducing up to a 96% reduction of viral load in immunized animals, as determined by a sensitive real-time PCR assay. Together, these results confirmed previous observations of the efficient use of adenoviral and poxviral vectors in prime-boost protocols for immunization against diseases whose resolution depends on cellular immunity, as well as the aptness of correctly designed chimeric carrier proteins to facilitate this goal (AU)

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Brote nosocomial de queratoconjuntivitis epidémica en una unidad de cuidados intensivos neonatal / Nosocomial outbreak of epidemic keratoconjunctivitis in a neonatal intensive care unit

Objetivos: Descripción de un brote nosocomial epidémico de queratoconjuntivitis ocurrido en Madrid (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatal) entre los meses de mayo y octubre de 2002 y que afectó al menos a 43 trabajadores del centro; investigación del posible origen y valoración de secuelas. Medidas preventivas para evitar nuevos brotes. Material y métodos: Estudio descriptivo del brote, definición de caso clínico, investigación microbiológica y epidemiológica mediante encuesta. Análisis de la relación entre la tasa de infiltrados subepiteliales 1 año después de la infección y la tasa de uso de corticoide tópico. Resultados: El brote epidémico empezó en el Servicio de Neonatología, encontrándose como focos iniciales unos gemelos prematuros ingresados en dicha unidad. La diseminación se produjo en 24 trabajadores de la unidad, y otros 19 trabajadores de otros Servicios. El diagnóstico microbiológico contrafirma infección por adenovirus en 10 exudados conjuntivales y una serología, el resto cumple criterios clínicos y epidemiológicos. Aunque es una muestra pequeña y no concluyente, en este estudio los pacientes que usaron corticoide tópico tienen mayor tasa de infiltrados que los que no usaron (p = 0,003 en test exacto de Fisher). Conclusiones: La queratoconjuntivitis epidémica es una enfermedad frecuente y en la mayoría banal, pero su alta tasa de contagiosidad y sus posibles secuelas requieren que se preste mayor atención a las medidas preventivas para evitar nuevos brotes

Objective: To describe an epidemic nosocomial outbreak of keratoconjunctivitis affecting at least 43 people in a Neonatal Intensive Care Unit in Madrid, between May and October 2002, perform epidemiologic research and determine preventive measures to prevent new outbreaks. Methods: Description of the outbreak, clinical case definition, microbiologic and epidemiologic research through the use of questionnaires. Analysis of the incidence of subepithelial infiltrates 1 year after infection and the use of topical corticosteroid therapy. Results: The epidemic began in the Neonatal Service, with a pair of twins being found as the initial focus. Dissemination occurred to about 24 workers of the unit, and 19 workers from other services. The microbiologic diagnosis confirmed adenovirus in 10 conjunctival smears and one serologically, with the remainder obeying clinical and epidemiological criteria of such infection. Infected patients using topical corticosteroids had a higher incidence of infiltrates 12 months later than those not using such agents (p=0.003 in Fisher test). Conclusions: Epidemic keratoconjunctivitis occurs frequently, is highly contagious and has possible long-term sequelae, necessitating the use of preventive measures to avoid spread and new outbreaks

Aplicación de tratamiento génico a un modelo subcutáneo de cáncer de pulmón murino / Use of gene therapy in a subcutaneous murine model of lung cancer

Objetivo: Demostrar la utilidad del tratamiento génico (TG) in vivo en los tumores subcutáneos de cáncer de pulmón murino. Material y métodos: Se inyectaron a ratones C57BL/6 por vía subcutánea 5 x 105 células de la línea de cáncer de pulmón murino de Lewis. A los 10 días se formaron tumores subcutáneos de unos 5 mm de diámetro. En ese momento se trataron mediante inyección intratumoral con un adenovirus recombinante defectivo portador del gen de la timidincinasa (AdCMV-Tk), o del gen de la interleucina 12 (AdCMV-IL12), o con células dendríticas (CD) singénicas transducidas con el gen de la interleucina 12 (CD-IL12). Como grupos control se incluyeron tumores tratados con suero salino o con un adenovirus con el gen de la β-galactosidasa (AdCMV-LacZ), que es un gen indicador sin efecto terapéutico. El número de animales por grupo osciló entre 14 y 25 con adenovirus y entre 10 y 12 con CD. A continuación se realizó un seguimiento del tamaño tumoral desde el primer día de tratamiento hasta la tercera (adenovirus) o cuarta (CD) semanas para comparar su evolución. Resultados: Se objetivó una disminución significativa del crecimiento de los tumores subcutáneos en los grupos tratados con AdCMV-Tk, AdCMV-IL12 y CD-IL12 comparados con los grupos control tratados con suelo salino y AdCMV-LacZ. En el grupo AdCMV-Tk esta diferencia fue estadísticamente significativa desde el día 7, en AdCMV-IL12 desde el día 9 y en CD-IL12 desde el día 10 y se mantuvo hasta el final del seguimiento. Conclusiones: El TG con AdCMV-Tk, AdCMV-IL12 o CD-IL12 es efectivo en nuestro modelo de tumores subcutáneos de células de carcinoma pulmonar de Lewis, ya que es capaz de disminuir su tasa de crecimiento de forma significativa respecto a los grupos de control

Objective: To assess the effectiveness of in vivo gene therapy to treat subcutaneous tumors generated from murine lung cancer cells. Material and methods: C57BL/6 mice received subcutaneus injections of 5 x 105 cells from the murine Lewis lung cancer cell line. By 10 days, subcutaneous tumors of approximately 5 mm diameter were formed. At that point, treatment was provided by intratumor injection of a replication-defective recombinant adenovirus carrying the gene for thymidine kinase (AdCMV-Tk) or interleukin (IL) 12 (AdCMV-IL12), or by injection of syngeneic dendritic cells previously transduced with adenovirus containing the IL-12 gene (DC-IL12). Control groups were treated with saline or adenovirus containing the gene for β-galactosidase (AdCMV-LacZ), which functions as a reporter gene and does not have a therapeutic effect. The number of animals in each group ranged from 14 to 25 in experiments using adenovirus and from 10 to 12 in experiments using dendritic cells. Tumor size was followed for 3 weeks in the case of treatment with adenovirus and 4 weeks for treatment with dendritic cells. Results: A significant reduction in subcutaneous tumor growth was observed in the groups treated with AdCMV-Tk, AdCMV-IL12, and DC-IL12 compared with control groups treated with saline or AdCMV-LacZ. The difference was statistically significant from day 7 of treatment in the AdCMV-Tk group, from day 9 in the AdCMV-IL12 group, and from day 10 in the DC-IL12 group, and in all cases it was maintained until the end of the follow-up period. Conclusions: Gene therapy with AdCMV-Tk, AdCMV-IL12, or DC-IL12 is effective in our model of subcutaneous tumors arising from cells of the Lewis lung cancer cell line. The treatment leads to a significant reduction in tumor growth compared with control groups

Identificación por métodos moleculares de adenovirus asociados a conjuntivitis / Identification of adenovirus associated with conjunctivitis by molecular methodology

Objetivo: Por medio de métodos moleculares comola Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) y lasecuenciación del material genético, identificar adenovirusen pacientes con conjuntivitis.Métodos: Se procesaron muestras de raspado delsaco conjuntival inferior de 51 pacientes (39 diagnosticadoscon conjuntivitis folicular y 12 diagnosticadoscon conjuntivitis vernal) para identificaradenovirus por medio de la PCR genérica. Todas lasmuestras positivas en la PCR genérica, fueron cultivadasen células VERO para el aislamiento delvirus, éste se demostró por inmunofluorescencia. Seutilizó la PCR múltiple para la caracterización delos serotipos aislados y las variantes genéticas seidentificaron mediante la secuenciación automatizada.Resultados: Veintiocho de los pacientes diagnosticadoscon conjuntivitis folicular y seis de los diagnosticadoscon conjuntivitis vernal resultaron positivosa adenovirus (67%). El cultivo en célulasVERO permitió el aislamiento del virus de 8 muestras.Sólo tres de los aislados fueron identificados(un serotipo Ad1 y dos Ad2) por la PCR múltipleque identifica adenovirus del subgénero C. Por estreptomicisecuenciaciónautomatizada se identificó unavariante genética correspondiente al Ad1, mientrasque los aislados de Ad2 fueron idénticos a losreportados en el Banco de Genes.Conclusiones: La Reacción en Cadena de la Polimerasay la Secuenciación son herramientas útilespara la identificación y caracterización de agentescausantes de enfermedades tales como la Conjuntivitispor Adenovirus

Objective: To identify adenovirus in patients with conjunctivitis by molecular methods such as the Polymerase Chain Reaction (PCR) and DNA sequencing. Methods: Samples of scrapings from the inferior fornix of 51 patients (39 diagnosed with Follicular Conjunctivitis and 12 diagnosed with Vernal Conjunctivitis) were processed by generic PCR to identify adenovirus. All the samples that were PCR positive were cultured on VERO cells for virus isolation, with this being demonstrated by immunofluorescence. For the identification of the isolated serotype, the multiplex PCR was utilized and DNA automated sequencing was employed to identify the genetic variants. Results: Twenty-eight of the individuals diagnosed with Follicular Conjunctivitis and six of those diagnosed with Vernal Conjunctivitis, had positive results to adenovirus (67%). The cultures in VERO cells allowed the isolation of eight samples. Only three of the isolated viruses (one Ad1 and two Ad2) were identified by the multiplex PCR used to identify the subgenus C adenovirus. An Ad1 genetic variant was identified by automated sequencing while the Ad2 serotypes were identical to the ones reported by Genbank. Conclusions: The Polymerase Chain Reaction and DNA sequencing are useful tools to identify and characterize microorganisms responsible for diseases such as conjunctivitis caused by adenoviruses

La infección de hepatocitos de rata en cultivo con adenovirus recombinantes causa un drástico descenso en la secreción de lipoproteínas de muy baja densidad / Recombinant adenoviral infection of rat hepatocyte cultures dramatically decreases very low-density lipoprotein secretion

Introducción. Tras su administración sistémica, los adenovirus recombinantes se concentran en el hígado, lo que les validaría para la transferencia génica a este órgano, pero existen efectos colaterales. En este trabajo se ha analizado el impacto de la infección sobre la cantidad y composición de las lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL) secretadas en hepatocitos de rata en cultivo. Métodos. Se generaron 2 vectores adenovirales, con ADNc en dirección sentido o antisentido, ambos con capacidad infectiva pero no de propagación. Se infectaron cultivos de hepatocitos de rata con una dosis no citotóxica y se analizaron las VLDL secretadas durante los 3 períodos de 24 h posteriores a la infección y el contenido en lípidos del citosol. Resultados. La infección causó un moderado descenso en la secreción de apo B48 y de éster de colesterol durante las primeras 24 h, pero posteriormente se redujo drásticamente la secreción de partículas con apo B48 y apo B100 y su contenido en lípidos. Además, modificó sus proporciones, aumentando el porcentaje de colesterol libre a costa del esterificado, que llegó a ser indetectable. La menor secreción de VLDL no conllevó una acumulación de lípido intracelular e, incluso, descendió la masa citosólica de éster de colesterol. Conclusión. La infección con adenovirus reduce la secreción hepatocitaria de VLDL y su porcentaje de colesterol esterificado y, a diferencia de otros virus, estas acciones no parecen ir acompañadas de esteatosis hepatocelular (AU)

Introduction. After systemic administration, recombinant adenoviruses are rapidly concentrated in the liver, making them good candidates for gene transfer to this organ. However, there are collateral effects. In this study, we analyzed the effect of adenoviral infection on the number and composition of very low-density lipoproteins (VLDL) secreted by cultured rat hepatocytes. Methods. Two recombinant adenoviruses were developed, each containing cDNA in sense or antisense orientation, and with infective but not propagating ability. Cultured rat hepatocytes were infected with a subcytotoxic adenoviral dose. Secretion of VLDL particles during 3 consecutive 24 h-periods after infection and cytosolic lipid content were characterized. Results. During the first 24 h period, apo B48 and cholesteryl ester secretion moderately decreased. However, in longer incubations, infection dramatically reduced both apo B48 and apo B100 secretion, as well as VLDL lipid content. Lipid proportion was also modified: free cholesterol increased while cholesteryl ester decreased to undetectable levels. Decreased VLDL secretion was not associated with intracellular lipid accumulation; indeed, cholesteryl ester mass was even lower than in noninfected cells. Conclusion. Adenovirus infection causes hepatocytes to secrete less VLDL and to reduce their cholesteryl ester percentage. In contrast with the effects of other viruses, these effects are not accompanied by hepatocellular steatosis (AU)

Estudio de las características clínicas y epidemiológicas de las infecciones respiratorias por adenovirus en una población infantil (1997-2003) / Study of the clinical and epidemiological characteristics of respiratory infections caused by adenovirus in a pediatric population (1997-2003)

Introducción Las infecciones por adenovirus son muy prevalentes en la edad infantil. Las infecciones respiratorias presentan unas manifestaciones clínicas inespecíficas que obligan al empleo de métodos virológicos para el establecimiento de su etiología. Se presenta un estudio retrospectivo sobre las características clínicas y virológicas de los pacientes con aislamiento de adenovirus en muestras respiratorias. Material y métodos: Durante el período 1997-2003 se estudiaron 5.746 muestras respiratorias pediátricas (< 15 años) de las cuales 2.122 (36,9 por ciento) fueron consideradas positivas. Los adenovirus se aislaron en cultivo celular utilizando la línea Hep-2 y cultivo tipo shell vial. Resultados: En 100 muestras se pudo aislar adenovirus (4,7 por ciento de las muestras positivas y 1,7 por ciento de todas las muestras) presentando los pacientes una edad media de 14 meses. El diagnóstico clínico de los pacientes fue de bronquiolitis (61 por ciento), neumonía (10 por ciento), tos pertussoide (16 por ciento) y crisis asmática (11 por ciento). Las infecciones por adenovirus se han presentado preferentemente entre los meses de diciembre y marzo. El 72 por ciento de los pacientes presentaban antecedentes previos de otras infecciones virales respiratorias o manifestaciones clínicas de asma bronquial. Ningún paciente presentó conjuntivitis y sólo en cinco se detectó diarrea causada por adenovirus. El 70 por ciento de los pacientes habían recibido lactancia artificial y el 30 por ciento, lactancia materna. El 90 por ciento de los pacientes precisaron ingreso hospitalario, y fueron tratados preferentemente con broncodilatadores y antibióticos. Conclusiones: Las infecciones respiratorias por adenovirus se presentan preferentemente en pacientes menores de 14 meses, durante el primer cuatrimestre del año, y presentan manifestaciones de bronquiolitis o neumonía sin conjuntivitis, difícilmente diferenciables de las ocasionadas por otros virus respiratorios. (AU)

Efecto antitumoral del gen suicida HSV-tk y ganciclovir en un modelo experimental de carcinoma epidermoide de cabeza y cuello / Antitumoral effect of HSV-tk suicide gene associated with ganciclovir in an experimental model of head and neck squamous cell carcinoma

Introducción: Se estudió la transfección por adenovectores y el efecto antitumoral del gen HVS-tk asociado a ganciclovir (AdCMVtk/GCV) en células KB de carcinoma epidermoide oral humano, in vitro e in vivo. Material y métodos: La trasfección por adenovectores se comprobó al teñir con X-gal cultivos y cortes tumorales KB tras exponerlos al adenovector AdCMVlacZ. El efecto antitumoral de AdCMVtk/GCV in vitro se estudió al comparar la supervivencia entre cultivos expuestos a AdCMVtk/GCV y a AdCMVlacZ/GCV. Para valorar el efecto antitumoral in vivo, se comparó el volumen de necrosis tumoral con respecto al total, entre animales tratados con AdCMVtk/GCV y con AdCMVlacZ/GCV. Se estudió la toxicidad hepática y renal. Resultados: In vitro, la supervivencia con AdCMVtk/GCV es menor que con AdCMVlacZ/GCV. In vivo, el volumen de necrosis es mayor con AdCMVtk/GCV que con AdCMVlacZ/GCV. No se constató toxicidad hepática ni renal. Conclusiones: Las células KB se transfectan por adenovectores y son destruidas por AdCMVtk/GCV, in vitro e in vivo (sin toxicidad en este modelo experimental animal) (AU)

INTRODUCTION: We studied the transfection by adenoviral vectors and the antitumoral effect of HSV-tk gene associated with ganciclovir (AdCMVtk/GCV) in KB human oral cavity squamous cell carcinoma, in vitro and in vivo. MATERIALS AND METHODS: Transfection was assessed by the X-gal stain. It was used in cell cultures and tumoral sections previously exposed to adenoviral vector AdCMVlacZ. In vitro, in order to study the antitumoral effect of AdCMVtk/GCV, survival of cell cultures exposed to AdCMVtk/GCV and to AdCMVlacZ/GCV was compared. In vivo, necrotic volume as a percentage of total tumoral volume, was compared between AdCMVtk/GCV treated group and AdCMVlacZ/GCV exposed group. Hepatic and renal toxicities were assessed. RESULTS: In vitro, survival of cell cultures treated with AdCMVtk/GCV was less than AdCMVlacZ/GCV exposed cells. In vivo, necrotic volume was larger in AdCMVtk/GCV treated group than in AdCMVlacZ/GCV exposed group. No toxicity was found (hepatic, renal). CONCLUSIONS: KB cells are transfected by adenoviral vectors and are killed by AdCMVtk/GCV, both in vitro and in vivo (no toxicity was found in the animal model) (AU)

Inducción de activación de NF-kB y maduración parcial en células dendríticas infectadas con adenovirus recombinantes / Dendritic cells infected with recombinant defective adenoviruses undergo NF-kB activation and partial maturation

Las células dendríticas se vienen usando como adyuvantes naturales para inducir respuestas inmunitarias con utilidad terapéutica. Para conseguir esto, los genes que codifican para antígenos relevantes son transfectados en células dendríticas mediante vectores virales y no virales. Los adenovirus recombinantes defectivos que codifican para antígenos o citoquinas se utilizan con gran eficiencia para transfectar ex vivo células dendríticas. Aquí hemos estudiado los efectos de infectar células dendríticas humanas y murinas con adenovirus que codifican para el gen reportero -galactosidasa (AdCMVLacZ). La infección con AdCMVLacZ induce la translocación nuclear de diferentes factores de transcripción de la familia de NF -B, a través la inducción de fosforilación de I -B según se demuestra mediante geles de retardo de movilidad e inmunoblots. La activación de NF- B se indujo también con capsides virales semipurificadas o adenovirus sin transgén, pero no mediante un adenovirus que codifica para un inhibidor dominante negativo de I -B (AdCMVI -B). A diferencia de AdCMVI B , AdCMVLacZ induce aumentos en la expresión de CD40, CD80 y CD86 con aumentos menos significativos de MHC clase II. También induce la expresión de IL-6 pero no de TNF ni IL-12. Estos cambios hacen que las células dendríticas sean más eficientes en inducir proliferación en MLR alogénicos. Nuestros resultados muestran que los adenovirus recombinantes inducen de forma independiente de transgén, cambios en el status madurativo de células dendríticas humanas y murinas que son relevantes para sus funciones. (AU)

Adenovirus oncolíticos para el tratamiento de tumores cerebrales: pasado, presente y futuro / Oncolytic adenovirus for the treatment of cerebral tumors: past, present and future

La transferencia de material genético con fines terapéuticos (terapia génica) es uno de los tratamientos experimentales a considerar en pacientes con tumores cerebrales incurables mediante tratamientos convencionales. Aunque diferentes estudios clínicos han demostrado que la administración intratumoral de genes no produce una toxicidad intolerable para el paciente, todavía no se ha conseguido una eficacia antitumoral significativa. Uno de los principales problemas de la terapia génica del cáncer es la imposibilidad de los vectores actuales para introducir el gen terapéutico en un número suficiente de células del tumor, incluso utilizando vectores derivados de virus de alta infectividad, como el adenovirus.Para solventar esta dificultad se están utilizando virus, y sus vectores derivados, con capacidad de replicarse y extenderse a través del tumor. Las características infiltrantes pero raramente metastásicas y multifocales de los tumores cerebrales ofrecen una oportunidad única para utilizar este tipo de terapia con inyección local intratumoral. Para conseguir adenovirus capaces de replicarse en células cancerosas pero no en células normales se han utilizado principalmente dos estrategias: la regulación de la expresión de genes virales con promotores específicos de tumor y la deleción de funciones virales necesarias para activar el ciclo celular. El estado quiescente de las células normales que rodean a los gliomas hacen que esta última estrategia sea especialmente atractiva para este tipo de tumores. (AU)

ldentificación del virus respiratorio sincitial y adenovirus en niños con otitis serosa crónica / ldentificación of the respiratory syncytial and adenovirus infection in children with chronic serous otitis

Objetivo del estudio: Estudiar la presencia de virus respiratorio sincitial (VRS) y adenovirus en el exudado del oído medio y en las adenoides de pacientes con otitis serosa crónica mediante la técnica de PCR. Método: El grupo a estudio consistió en 32 niños a quienes se les objetivó otitis serosa crónica sin mejoría con el tratamiento médico habitual (antibióticos y mucolíticos). La cirugía consistió en adenoidectomía, miringotomía y colocación de drenajes transtimpánicos. Se tomaron muestras del exudado del oído medio y de las adenoides de todos los pacientes. Las muestras obtenidas se dividieron para s er analizadas mediante cultivo viral e inmunoanálisis, así como para extracción de ADN o ARN y análisis mediante PCR. Resultados: Sólo una muestra de las obtenidas a partir de los exudados óticos fue positiva para adenovirus (3 por ciento) mediante la técnica de PCR. Ninguna muestra fue positiva mediante esta técnica para el VRS. Los cultivos virales e inmunoanálisis de los exudados óticos y de las adenoides fueron negativos en todos los casos para ambos virus. Discusión: No se ha detectado genoma viral (adenovirus y VRS) en las muestras de exudados y adenoides analizados. Estos resultados no nos permiten afirmar que los virus respiratorios sean una causa de otitis serosa crónica infantil (AU)

OBJECTIVE: To study the presence of respiratory syncytial virus (RSV) and adenovirus in the effusions of the middle ear and adenoid tissue from patients with chronic otitis media with effusion by use of the polymerase chain reaction. METHOD: The effusions and adenoid samples were collected from 32 children undergoing myringotomy and ventilation tube placement for chronic otitis media with effusion. The samples were separated for viral culture, immunofluorescence and PCR analysis. RESULTS: One (3%) effusion sample was positive for adenovirus by the PCR. None of samples (effusion and adenoid) were positives for RSV. The results of viral culture and immunofluorescence were all negative. CONCLUSIONS: Our results can not support that respiratory viruses play a role in the pathogenesis of chronic otitis media with effusion (AU)

Análisis de las características clínicas y irológicas de los pacientes con aislamiento de adenovirus en muestras respiratorias / Analysis of clinical and virological characteristics of patients with isolation of the adenovirus in respiratory samples

Se presenta un estudio retrospectivo sobre las características clínicas y virológicas de pacientes con aislamiento de adenovirus en muestras respiratorias. Durante el período 1995-1998 se analizaron 2.489 muestras de las cuales1.061 (42,6 por ciento) fueron consideradas positivas. Se ha observado un incremento de la incidencia de adenovirus desde el 16,2 por ciento en 1995 hasta el 40,5 por ciento en 1998. Los 37 aislamientos pertenecían a 33 pacientes, el 80 por ciento de los pacientes tenían menos de 18 meses. El diagnóstico clínico de los pacientes fue de bronquiolitis (40 por ciento), bronconeumonía (26,7 por ciento), tos pertusoide (16,6 por ciento) e infecciones de vías respiratorias altas (16,6 por ciento). El 70 por ciento de los pacientes presentaban antecedentes previos de otras infecciones víricas respiratorias o manifestaciones clínicas de asma bronquial. El 72 por ciento de los pacientes habían recibido lactancia artificial y 28 por ciento lactancia materna. En 27 pacientes (90 por ciento) se precisó el ingreso hospitalario, siendo tratados preferentemente con broncodilatadores y antibióticos. En resumen las infecciones respiratorias por adenovirus se presentan preferentemente en pacientes menores de 12 meses, durante el primer cuatrimestre del año, y presentan manifestaciones de bronquiolitis o neumonía sin conjuntivitis, dificilmente diferenciables de las ocasionadas por otros virus respiratorios (AU)