Histochemical Evaluation of the Vessel Wall Destruction and Selectivity After Treatment with Intense Pulsed Light in Capillary Malformations / Evaluación histoquímica de la destrucción de la pared del vaso y la selectividad después del tratamiento con luz pulsada intensa en las malformaciones capilares

BACKGROUND: Among the different approaches for improving the effectiveness in the treatment of Capillary Malformations type Port Wine Stain (CM type PWS) are the intense pulsed light sources. There are few clinical studies prove useful in the treatment of CM. Furthermore, no studies have been published yet demonstrating the histological effects of IPL in CM. OBJECTIVES: To assess the histological effects of pulsed light in capillary malformations type port wine stain. We wanted to compare epidermal, dermal and vessel wall damage after treatment with different combinations of IPL parameters. MATERIAL AND METHODS: Fifty-five post-treatment biopsies were performed in 15 consenting patients with CM and stained with nitroblue-tetrazolium chloride (NBTC). Patients had not been treated previously. RESULTS: Fifteen patients with CM, with a median age of 39 years-old were enrolled in this study. In this series, the patients with the most severe epidermal damage were those with a darker phototype. Pink CM were especially resistant to treatment, even using high fluences, short pulse durations and stacking pulses. Longer intra- and interpulse delays were effective in purple CM, achieving adequate vessel destruction. CONCLUSIONS: IPL devices provide a vast amount of treatment possibilities and further studies are necessary to optimize therapeutic approaches to CM. In this study we have observed the histological effects of different pulses on the MC type PWS

ANTECEDENTES: Entre las distintas estrategias para intentar mejorar la eficacia en el tratamiento de las malformaciones capilares tipo mancha en vino de Oporto (MC tipo MVO) están las fuentes de luz pulsada intensa. Existen hasta la fecha pocos estudios clínicos que avalen su utilidad en el tratamiento de las MC. Además, no disponemos de estudios histológicos que objetiven los efectos de la luz pulsada en la coagulación de estos vasos anómalos. OBJETIVOS: Evaluar los efectos histológicos de la luz pulsada en las MC tipo MVO. Intentamos comparar el daño epidérmico, dérmico y de la pared de los vasos después del tratamiento con distintos parámetros de IPL. MATERIAL Y MÉTODOS: Fueron realizadas 55 biopsias postratamiento en las MC de 15 pacientes. Las muestras fueron teñidas con cloruro de nitroblue tetrazolium. RESULTADOS: Quince pacientes (edad media: 39 años) fueron inscritos en este estudio. En esta serie los pacientes con mayor daño epidérmico fueron aquellos con un fototipo más alto (>IV). Las malformaciones de color rosa pálido eran especialmente resistentes al tratamiento, incluso con altas fluencias, duraciones de pulso corto y pulsos repetidos. Los pulsos de una mayor duración fueron especialmente eficaces en malformaciones capilares violáceas. CONCLUSIONES: Los equipos de IPL ofrecen una gran cantidad de opciones de tratamiento en las MC, sin embargo necesitamos conocer mejor sus efectos para realizar abordajes más eficaces y seguros. En este estudio hemos podido observar los efectos histológicos de los distintos pulsos sobre las MC tipo MVO

Células mesenquimales y fibrocitos en sangre periférica. Condiciones de cultivo / Mesenchymal cells and fibrocytes in peripheral blood. Culture conditions

Objetivos: El término fibroblast-like, célula madre de sangre periférica, engloba a las unidades formadoras de colonias fibroblásticas, los fibrocitos y las células mesenquimales. El diseño de este trabajo intenta establecer las condiciones de cultivo. Material y método: En 25 muestras de sangre venosa se aislaron células mononucleares y se sembraron en medio de cultivo McCoy’s 5A con suero bovino fetal al 20%. A los 7, 14 y 21 días se evaluó la proliferación, la confluencia y la relación células redondas/células alargadas. El día 21 se valoró la morfología, los marcadores de superficie y la actividad fagocítica. Resultados: En todos los cultivos se detectó crecimiento celular positivo para la vimentina, CD34 y NBT. La media ± desviación estándar del 36 ± 3,71% eran células alargadas (fibrocitos) y sólo en 2 casos se registraron áreas de confluencia. Conclusiones: Los métodos de cultivo descritos son adecuados para los seudofibroblastos de sangre periférica. La positividad de CD34, prueba NBT y vimentina demuestra que los seudofibroblastos tienen características comunes con la célula madre, los monocitos-macrófagos y los fibroblastos (AU)

Objectives: The fibrocytes, the mesenchymal cells and the colony forming units are included in the concept fibroblast-like, peripheral-blood circulating stem cells The aim of this work was to establish the culture conditions. Material and method: Peripheral blood mononuclear cells were isolated from 25 samples collected from the cephalic vein. These were cultured in McCoy’s 5A enriched with 20% of foetal bovine serum. The culture was read at 7, 14 and 21 days, evaluating the proliferation, confluence and the round cell/spindle cell ratio. Moreover the 21st day surface markers and phagocytic activity testing was carried out. Results: Growth was achieved in all the cases but only in two dishes were confluence areas retrieved. Spindle cells were 36 ± 3.71% (mean ± SD). All the cells showed intense signal against vimentin, CD34 marker and the NBT test were positives. Conclusions: Clear CD34 expression, positivity against a connective tissue marker such as vimentin and positivity in a phagocytic assay like the NBT-test, support that stem cells, monocytes and fibroblasts share common characteristics (AU)