Células madre y sus exosomas como terapia avanzada para tratar la hernia incisional: prueba de concepto en modelo murino / Stem cells and their exosomes as an advanced therapy to treat incisional hernia: proof of concept in a murine model

Una hernia incisional consiste en una protrusión de tejido a través de una cicatriz traumática o quirúrgica en la pared abdominal. El tratamiento de este y de otros tipos de hernias pasa frecuentemente por la implantación de una malla quirúrgica para reforzar el tejido debilitado. Sin embargo, a menudo se produce una respuesta inflamatoria exacerbada que desemboca en diferentes complicaciones, teniendo consecuencias graves para el paciente. Considerando el potencial inmunomodulador de las células madre mesenquimales (MSCs) y de sus exosomas (exo-MSCs), en este estudio planteamos que la administración de ambos productos terapéuticos, conjuntamente con los selladores de fibrina que se utilizan frecuentemente para la fijación de las mallas quirúrgicas, podría ejercer un efecto biológico y terapéutico que ayudara a controlar esa respuesta inflamatoria y mejorara, por tanto, el éxito del tratamiento con mallas quirúrgicas. Los resultados obtenidos en este estudio mostraron, en un modelo murino de hernia incisional, que los exo-MSCs reducen la infiltración de macrófagos inflamatorios M1 y que existe una predominancia de citoquinas relacionadas con la respuesta Th2, y con ello, con la polarización de macrófagos hacia un fenotipo M2 antiinflamatorio, en el tejido circundante a las mallas en las que se vehicularon MSCs o sus exosomas. Este estudio concluye que la fijación de mallas quirúrgicas con selladores de fibrina combinados con MSCs o exo-MSCs tendría un efecto beneficioso en el tratamiento de la hernia incisional, en términos de reducción de la respuesta inflamatoria y modulación de una reacción exacerbada frente a un cuerpo extraño

An incisional hernia constitutes a tissue protrusion through a traumatic or surgical scar in the abdominal wall. Frequently, the treatment of the incisional hernia, as well as other types of hernia, involves the implantation of a surgical mesh to reinforce the weakened tissue. However, an exacerbated inflammatory response is commonly developed after this implantation, having serious consequences for the patient. Considering the immunomodulatory potential of mesenchymal stem cells (MSCs) and their exosomes (exo-MSCs), in this study we proposed that the administration of these two therapeutic products, together with fibrin sealants that are frequently used to fix surgical meshes, could have a beneficial biological and therapeutic effect that could help to modulate the inflammatory response and improve the success of the surgical mesh implantation. The results obtained in this work showed, in a murine model of incisional hernia, that exo-MSCs reduce M1 inflammatory macrophages infiltration and that there is a predominance of Th2- related cytokines in the surrounding tissue of MSCs or exo-MSCs treated meshes, favoring the macrophage polarization towards a M2 anti-inflammatory phenotype. This study concludes that mesh fixation with fibrin sealants co-administered with MSCs or exo-MSCs would have a beneficiary effect on the treatment of incisional hernia in terms of reduction of the inflammatory response and modulation of the foreign body reaction

Disminución de los niveles plasmáticos de clusterina en pacientes con psoriasis / Decreased Plasma Levels of Clusterin in Patients With Psoriasis

Introducción y objetivos: La psoriasis es una enfermedad inflamatoria crónica que se ha asociado a un incremento del riesgo cardiovascular. La clusterina (apolipoproteína J) es un componente de las lipoproteínas de alta densidad (HDL) y tiene un papel protector de la ateroesclerosis. El objetivo del estudio ha sido evaluar la clusterina y el factor inhibitorio de la migración del macrófago (MIF) plasmáticos en pacientes con psoriasis grave comparando grupos de pacientes con distintos riesgos cardiovasculares asociados. Material y métodos: Se estudiaron 21 pacientes con psoriasis grave (Psoriasis Area Severity Index [PASI] y Body Surface Area [BSA] > 10) y 11 controles sin enfermedad dermatológica. Se evaluaron los factores de riesgo cardiovascular según criterios del síndrome metabólico del Adult Treatment Panel III (ATP- III ) y la ateromatosis carotídea subclínica mediante ecografía doppler de carótidas. La clusterina y MIF plasmáticos se midieron mediante Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay (ELISA). Resultados: El 47% de los pacientes con psoriasis presentaba criterios de síndrome metabólico y el 33% presentó placa de ateroma carotídea. Se observó una disminución significativa de la clusterina plasmática (μg/ml) en pacientes con psoriasis respecto a controles (81,39 ± 27,30; n = 21, versus 117 ± 21,6, n = 11; p = 0,0017). El MIF plasmático (ng/ml) estaba aumentado significativamente en los pacientes con psoriasis y placa de ateroma carotídea respecto a los controles (53,22 ± 29,02; n = 6, versus 34,21 ± 9,65; n = 11; p = 0,0394). Conclusiones: La disminución de clusterina en pacientes con psoriasis sugiere una relación con la enfermedad y con la situación inflamatoria sistémica. El aumento de MIF en pacientes parece relacionarse con la presencia de factores de riesgo cardiovascular asociados y placa de ateroma carotídea (AU)

Introduction and objectives: Psoriasis is a chronic inflammatory disease that has been linked to increased cardiovascular risk. The glycoprotein clusterin (apolipoprotein J) is a component of high-density lipoproteins and has a protective role in atherosclerosis. The aim of the present study was to evaluate the plasma levels of clusterin and the proinflammatory cytokine macrophage migration inhibitory factor (MIF) in patients with severe psoriasis, comparing groups of patients with different risks of cardiovascular disease. Material and methods: Twenty-one patients with severe psoriasis (psoriasis area severity index and body surface area > 10) and 11 healthy controls with no dermatologic disease were studied. Cardiovascular risk factors were assessed according to the Adult Treatment Panel (ATP) IIIcriteria. Subclinical carotid atheromatosis was assessed by Doppler ultrasonography of the carotid arteries. Plasma clusterin and MIF levels were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. Results: ATP-III criteria for metabolic syndrome were met by 47% of the patients, and 33% had carotid atheromatous plaque. Mean (SD) clusterin plasma levels were significantly lower in patients with psoriasis compared with controls (81.39 [27.30] micreg/mL for the 21 patients vs 117[21.6] g/mL for the 11 controls; P = .0017). MIF plasma levels (ng/ml) were significantly higherin patients with atheromatous plaque compared with controls (53.22 [29.02] for the 6 patientswith plaque vs 34.21 [9.65] for the 11 controls; P = 0.0394).Conclusions: The decreased plasma levels of clusterin in psoriatic patients suggested an association with the disease and might be an indicator of systemic inflammatory activity. Increased levels of MIF appear to be associated with cardiovascular risk factors and carotid atheromatous plaque (AU)

Entamoeba histolytica, un parásito antiinflamatorio / Entamoeba histolytica, a remarkable anti-inflammatory parasite

El Factor Inhibidor de la Locomoción de Monocitos (FILM) es un pentapéptido (Met-Gln-Cys-Asn-Ser) termoestable producido por E. histolytica cultivada en medio axénico. Este factor posee diversas propiedades antiinflamatorias in vitro e in vivo (i.e. inhibición de la locomoción de monocitos y del estallido respiratorio de monocitos y neutrófilos, inhibición de la hipersensibilidad retardada cutánea al dinitrocluorobenceno (DNCB) en cobayos y gerbos, retraso de leucocitos mononucleares en ventanas de Rebuck en humanos, con abatimiento de las moléculas de adhesión VLA-4, VCAM en el endotelio poscapilar y monocitos, etc). Desconocemos el mecanismo de acción molecular del FILM. La multiplicidad de sus efectos en diversas células nos llevó a considerar una acción sobre la red de citocinas inflamatorias del huésped (humano), en particular de las quimiocinas y sus receptores. El FILM inhibe la expresión inducida de las CC-quimiocinas MIP-1alfa, MIP1beta, I-309 y del receptor CCR1. Estudios preliminares sugieren que el FILM incide en la cascada de señalización NF-kappaB en monocitos humanos, aumentando la translocación del homodímero p50/p50 y alterando la dinámica del heterodímero p65/p50. Igualmente, corriente arriba el pentapéptido inhibe la síntesis de la proteína acopladora MyD88 y altera su translocación membranal. Las citocinas inflamatorias IL-1beta e IL-6 (involucradas en esta vía de señalización) aparentemente se abaten en tanto que se incrementa la síntesis de IL-10, la citocina antiinflamatoria por excelencia. Estos resultados contribuyen a la elucidación del mecanismo de acción molecular del FILM, que parece alterar la regulación de la inmunidad innata en su matriz NF-kappaB (AU)

Determinación semicuantitativa de la expresión de ARNm de las isoformas de MIP-1Alfa y MIP-1Beta mediante un competidor recombinante y RT-AFLP / semiquantitative assessment of mip-1alfa and mip1Beta mRNA isoform expression by using a recombinant competitor fragment and rt- aflp

Dentro de la amplia familia de las citocinas quimiotácticas, MIP-1alfa y MIP-1Beta son -quimiocinas de especial interés por sus efectos sobre linfocitos y monocitos, las principales células de la inmunidad adquirida. En estudios previos hallamos una correlación clara entre los niveles tisulares de MIP - 1alfa y MIP-1Beta y el diagnóstico clínico en los diversos cuadros de enfermedad autoinmune del tiroides. La existencia de isotipos para estas quimiocinas impone cierta dificultad en su análisis y evaluación funcional. En este trabajo presentamos un protocolo que, aprovechando pequeñas diferencias a nivel de secuencia nucleotídica, combina RTPCR y restricción con MspI para estimar semicuantitativamente los niveles de ARNm de los loci codificantes para cada una de estas dos quimiocinas. El aspecto más relevante de esta técnica es el uso de un fragmento de ADN recombinante que actúa de estándar interno tanto para MIP-1alfa como para MIP-1Beta , a la vez que contiene un lugar de restricción para MspI. De esta forma actúa como control no sólo de amplificación (en una RT-PCR competitiva) sino también de eficiencia de la digestión. La validez técnica de la aproximación, se corroboró por la similar cinética de amplificación del estándar interno y de las dos citocinas mediante PCR en tiempo real. Un estudio de la inducción de la expresión de MIP-1Beta (mediante experimentos de tiempo-respuesta) en células U-937 demostró diferencias claras entre los ARNms de los dos loci indicando que este protocolo puede contribuir al estudio de la expresión diferencial de productos génicos similares mediante técnicas disponibles en la mayoría de los laboratorios (AU)